试验旨在获得具有毛囊表达特性的转蜘蛛牵丝蛋白基因细胞株。根据GenBank上发表的棒络新妇属蜘蛛的cDNA片段合成拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体S，加倍后连入pEGFP-N1框架载体以构建真核表达载体pK-2S，转染新疆美利奴细毛羊皮肤成纤维细胞后筛选单克隆，并通过PCR在DNA、RNA水平检测阳性克隆。基因合成后测序结果显示序列正确，酶切得到正确目的条带，筛选出阳性克隆并且可以在基因组及cDNA上扩增出目的片段。本研究成功将蜘蛛牵丝蛋白基因转入新疆美利奴细毛羊细胞，并在RNA水平表达，为培育毛囊特异表达蜘蛛牵丝蛋白基因并具有更高机械性能羊毛的新型细毛羊品种奠定基础。

为确定microRNA-152(miR-152)对奶牛乳腺上皮细胞中乳蛋白合成的影响，本试验应用脂质体转染技术，改变miR-152在奶牛乳腺上皮细胞的表达量。采用实时荧光定量PCR、Western blotting、细胞活力分析等技术探索miR-152对奶牛乳腺上皮细胞增殖及泌乳功能的影响。结果显示，miR-152沉默，细胞因子信号传导抑制蛋白3（suppressor of cytokine signaling 3，SOCS3）表达增强，信号转导通路分子磷酸化信号转导与转录激活因子5（phospho-signal transducer and activator of transcription 5，p-STAT5）、磷酸化哺乳动物雷帕霉素蛋白（phospho-mammalian target of rapamycin，p-mTOR）、核糖体S6激酶1（ribosomal protein S6 kinase 1，S6K1）、细胞周期蛋白D1（cyclinD1）表达减弱，细胞增殖能力减弱，β-酪蛋白分泌减少。研究结果表明，miR-152在奶牛乳腺上皮细胞调控的靶基因是SOCS3，通过抑制其表达而发挥作用。miR-152可通过调控p-STAT5、p-mTOR、S6K1、cyclinD1信号转导而促进乳蛋白的合成和乳腺上皮细胞增殖。

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根据GenBank中猪瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）5′NTR的保守序列，设计1对特异性引物和TaqMan探针，以CSFV全长基因重组质粒pGEM-CSFV为标准品，建立TaqMan实时荧光定量PCR标准曲线，进行特异性、敏感性和重复性试验，并检测人工感染CSFV后不同时期猪血浆中CSFV的载量。结果表明，标准曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系，R²=0.999；敏感性高，最低检测限为1×10¹拷贝/μL；特异性强，与猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒无交叉反应性；重复性好，组内和组间变异系数均小于2%。人工感染CSFV后第7天猪血浆中CSFV载量达到峰值，之后逐渐降低。结果表明，建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、重复性好等优点，为CSFV的定量分析及临床诊断奠定基础。

为研究脂联素（AdipoQ）基因在藏山羊中的表达模式及相关功能，本试验利用生物信息学和比较基因组学方法克隆得到藏山羊AdipoQ基因序列；半定量RT-PCR和qPCR方法检测AdipoQ基因在成年藏山羊11个不同组织中的表达模式及不同脂肪组织中AdipoQ基因的相对表达量。结果显示，藏山羊AdipoQ基因编码区与牛、猪、人等哺乳动物AdipoQ基因同源性较高；AdipoQ基因在脂肪组织中表达量最高，在肌肉组织和胃中表达量较低，而在其他各组织中未检测到表达；AdipoQ基因在肾周脂肪组织中的表达量高于肠系膜脂肪组织和皮下脂肪组织中的表达量，但差异不显著（P>0.05）。本研究得到藏山羊AdipoQ基因序列、组织表达模式及不同脂肪组织中的相对表达量，为进一步研究藏山羊AdipoQ基因的功能奠定基础。

为探索猪α干扰素（poIFN-α）与白介素-18（poIL-18）融合基因的抗病毒效果，本研究通过融合PCR，以质粒pMD18-T/poIFN-α和pMD18-T/poIL-18为模板扩增猪IFNα-IL18（poIFNα-IL18）融合基因。将poIFNα-IL18融合基因插入原核表达载体pET-28b（+）构建重组表达质粒pET-28b/poIFNα-IL18，转化大肠杆菌BL21感受态细胞进行诱导表达，SDS-PAGE分析重组表达蛋白；经镍琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化后，用微量细胞病变抑制法在PK-15/VSV系统上进行抗病毒活性测定。结果表明成功构建重组表达质粒pET-28b/poIFNα-IL18；SDS-PAGE可检测到分子质量为37 ku左右的蛋白条带，与目的蛋白大小相近；经镍琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化，获得高纯度重组蛋白；用微量细胞病变抑制法在PK-15/VSV系统上检测到重组蛋白poIFNα-IL18比单一蛋白poIFN-α和poIL-18的抗病毒活性显著，其抗水疱性口炎病毒（vesicular stomatitis virus，VSV)活性分别为1.03×10⁵、1.28×10⁴及0.11×10⁴ U/mg。

本试验旨在构建用于牛肌肉生长抑制素(MSTN)基因敲除的置换型打靶载体。基于已发布的MSTN基因序列，选取第3外显子约600 bp作为靶位点，在其上、下游设计2条同源臂，分别为4.4和1.4 kb。以pPNTⅢ为骨架载体，在其2个多克隆位点处插入同源臂，构建出置换型打靶载体MSTN-KO-pPNTⅢ。结果显示，经DNA测序及酶切鉴定证实1.4 kb同源短臂和4.4 kb同源长臂均正确插入基础载体中。结果表明，成功构建出牛MSTN-KO-pPNTⅢ打靶载体。

为了合成恩诺沙星（enrofloxacin，EFLX）完全抗原，制备兔源多克隆抗体血清,试验通过活化酯法将小分子的EFLX偶联到牛血清白蛋白（BSA）和鸡卵清白蛋白(OVA)上，形成偶联物EFLX-BSA和EFLX-OVA，以EFLX-BSA为免疫原免疫兔，以EFLX-OVA为检测原通过ELISA方法检测兔血清效价。结果表明，免疫兔血清效价都在1∶51200以上，其中2号兔效价最高，达到1∶204800，敏感性好，半数抑制浓度IC₅₀为169.91 ng/mL，检测范围为37.52～302.31 ng/mL。本试验成功制备了EFLX完全抗原，获得了敏感的兔源多克隆抗体血清，为以后ELISA试剂盒和胶体金试纸条的研发奠定了基础。

本试验首次研究了小鼠隐藏管状线虫及四翼无刺线虫在线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）脱氢酶亚单位5基因（nad5）部分序列（pnad5）的种间及种内变异。通过对甘肃兰州地区实验小鼠体内分离的蛲虫样品（LY1-20、LS1-22） nad5基因pnad5进行PCR扩增、克隆及测序分析，研究其遗传变异情况。结果表明，获得隐藏管状线虫pnad5有效序列753 bp，通过序列比对发现来自LY和LS 2家实验动物中心的22个隐藏管状线虫样品之间只存在3个碱基的差异，序列相似性99.60%。获得四翼无刺线虫pnad5有效序列865 bp，2大动物中心20个四翼无刺线虫样品之间没有碱基的差异，序列相似性100%。用软件ClustalX 1.83截取2种鼠蛲虫nad5基因长度共同的序列，通过比对发现2种鼠蛲虫种间差异为53.64%，种间差异显著。研究结果表明，线粒体nad5基因在鼠蛲虫种内相对保守，但种间有着较高的突变率，可作为鼠蛲虫种间鉴定、诊断的遗传标记。

以鸡β-防御素-1 (Gallinacin-1, Gal-1)为研究对象，据GenBank中已发表的鸡β-actin和Gal-1序列设计引物，构建重组质粒作为标准品，成功建立了检测鸡免疫器官组织中Gal-1 mRNA表达的实时荧光定量PCR方法，并进行灵敏度、重复性、特异性试验。结果显示，此方法具有快速、高通量、线性范围广、特异性强、灵敏度高等特点，为进一步定量研究Gal-1 mRNA表达及其与机体免疫机能的关系奠定了技术基础。

本研究对DF-1细胞的培养条件及新城疫病毒（NDV）DF-1细胞的蚀斑纯化方法进行了优化摸索，结果显示相较于DMEM培养基，DF-1细胞更适宜在含15%胎牛血清的DMEM/F12培养基中生长，DF-1细胞以3×10⁵/孔的剂量覆盖6孔板能获得最佳的铺板效果，吸附病毒后1.5 h覆盖第1层琼脂，48 h后覆盖第2层琼脂能获得最佳的蚀斑形成效果。通过对蚀斑纯化株F和HN基因测序分析，结果表明蚀斑纯化后无任何变异。通过此方法可在1个星期之内获得稳定的纯化毒株，方法简单、可重复性强、纯化效率高。

本研究以鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus，IBV)S1基因为研究对象，设计特异性引物扩增S1抗原集中区目的基因，长度为198 bp，亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1，构建重组原核表达质粒pGEX-6P-1-S1，转化至宿主菌Rosetta(DE3)后进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示，表达获得1条特异性蛋白条带，其分子质量大小为33.0 ku，与预期蛋白大小一致。可溶性分析结果表明目的蛋白以包涵体形式存在。Western blotting结果显示，重组蛋白能与IBV鸡阳性高免血清反应，被GST标签单抗识别，结果表明该融合蛋白正确表达并具有良好的抗原性。本研究为制备IBV单克隆抗体奠定了抗原基础。

试验参考了SD大鼠转化生长因子α（transforming growth factor alpha, TGFα）基因序列，用PCR方法对SD大鼠TGFα基因cDNA序列进行了克隆，获得了SD大鼠TGFα基因的970 bp的cDNA序列，提交GenBank，登录号：KF366251，其中CDS长度为483 bp，共编码了160个氨基酸。SD大鼠与BN大鼠、小家鼠、黄牛、野猪、猕猴、黑猩猩、人、原鸡、鹌鹑和斑马鱼的TGFα基因编码序列的同源性分别为98.6%、95.0%、85.5%、85.3%、85.5%、86.3%、86.3%、73.2%、73.2%和56.8%，其编码蛋白的氨基酸序列同源性分别为98.8%、96.9%、90.6%、90.6%、91.2%、91.9%、91.9%、72.6%、72.6%和38.8%。这一结果表明了TGFα基因在进化过程中具有一定的保守性，但不同物种之间也具有功能上的特异性。通过比较SD大鼠与BN大鼠的TGFα基因编码序列，发现了7个SNPs位点，这一结果为TGFα基因的SNPs数据库提供了新的信息。

为了研制一种能够高效表达猪流行性腹泻病毒S1主要抗原表位基因的新型疫苗，将S1主要抗原表位基因整合到酵母表达载体pPICZαC中，构建了重组质粒pPICZαC-S1，对重组质粒经Sac Ⅰ酶切线性化后通过电转化法转化到毕赤酵母X-33中，经Zeocin^TM抗性筛选后得到阳性转化子(pPICZαC-S1)，转化子接种培养基后用甲醇进行诱导，并对诱导结果进行SDS-PAGE分析和Western blotting鉴定。结果表明，纤突蛋白主要抗原表位在毕赤酵母中成功分泌表达，表达的蛋白分子质量为42 ku，且能够与PEDV阳性血清特异性结合。

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为研制一种用于检测牛奶中呕吐毒素（deoxynivalenol，DON）残留的快速检测试纸条，试验以人工合成抗原DON-OVA和羊抗鼠二抗为原料，包被硝酸纤维素膜；以抗DON单克隆抗体为原料，制备金标抗体，并冻干保存于反应板微孔中，最终制备出可用于检测牛奶中DON残留的胶体金快速检测试纸条。结果显示，该检测试纸条检测限为100 μg/L，重复性、特异性均较好，可用于检测牛奶中DON残留。

将16只体重约53 kg的成年小尾寒羊母羊随机分为4组,每组4只，从妊娠50 d起，分别喂给粗料型（秸秆67%）粉碎日粮（试验1组）或颗粒日粮（试验2组）和精料型（秸秆50%）粉碎日粮（试验3组）或颗粒日粮（试验4组），在妊娠前期（60～76 d）和妊娠后期（120～136 d）进行2次消化代谢试验，以研究饲喂颗粒日粮对妊娠母羊采食、消化和营养代谢的影响。结果表明，在粗料型和精料型日粮条件下，饲喂颗粒日粮时母羊的干物质自由采食量在妊娠前期和妊娠后期分别增加44.8%、58.7%、46.0%和58.5%，差异均极显著（P＜0.01）；干物质表观消化率在妊娠前期和妊娠后期分别降低6.2%、8.0%、6.0%和1.6%，差异均不显著（P＞0.05）；粗蛋白质表观消化率在妊娠前期和妊娠后期分别降低13.9%、4.8%、2.3%和3.9%,差异均不显著（P＞0.05）；能量表观消化率在妊娠前期和妊娠后期分别降低2.9%（P＞0.05）、0.5%（P＞0.05）、5.7%（P<0.05）和8.2%（P＜0.01）。然而，在粗料型和精料型日粮条件下，饲喂颗粒日粮时母羊的干物质消化量在妊娠前期和妊娠后期分别增加19.7%（P＜0.05）、65.8%（P＜0.01）、37.0%（P＜0.01）和46.3%（P＜0.01）；粗蛋白质消化量在妊娠前期和妊娠后期分别增加31.2%（P＜0.01）、60.1%（P＜0.05）、30.4%（P＜0.01）和56.4%（P＜0.01）；总能消化量在妊娠前期和妊娠后期分别增加54.6%、105.2%、36.8%和63.8%，差异均极显著（P＜0.01）。在粗料型和精料型日粮条件下，饲喂颗粒日粮时母羊的氮保留量在妊娠前期和妊娠后期分别增加74.5%（P＜0.01）、101.1%（P＜0.01）、44.7%（P＜0.05）和73.4%（P＜0.01）；羔羊初生重分别提高26.3%（P＜0.05）和34.8%（P＜0.01）。综上所述，饲喂颗粒日粮可提高妊娠母羊的自由采食量、消化量、氮保留量及羔羊初生重，降低妊娠母羊日粮的表观消化率。因此，饲喂颗粒日粮是增加妊娠母羊营养供应的有效手段。

本试验旨在研究转苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis，Bt）基因糙米作为日粮原料对生长猪免疫功能的影响。选用80日龄大白仔猪30头，随机分为2组，每组15个重复，每个重复1头猪。对照组饲喂含70%亲本非转基因糙米的日粮，试验组饲喂含70%转Bt基因糙米的日粮，试验期90 d。结果显示，与对照组相比，饲喂转Bt基因糙米的生长猪血清中IgA、IgG、IgM含量及补体C3和C4水平差异均不显著（P＞0.05）；试验组生长猪的肝脏、脾脏组织切片观察发现，其亚显微结构均无病理变化，与对照组相比无明显差异（P＞0.05），且两组间的免疫器官指数也均无显著差异（P＞0.05）。综上所述，在本试验条件下，转Bt基因糙米作为生长猪的日粮，未见对生长猪的免疫器官及其功能造成影响。

选择4头装有永久性瘤胃瘘管的荷斯坦奶牛作为试验动物，利用尼龙袋法研究了马铃薯渣和红薯渣青贮前后干物质和淀粉瘤胃降解规律。结果表明，青贮后马铃薯渣和红薯渣的干物质和淀粉的瘤胃72 h消失率及有效降解率均极显著降低（P＜0.01），马铃薯渣干物质和淀粉消失率由青贮前的95.72%和99.60%下降为53.43%和86.51%，红薯渣则由97.65%和99.81%下降为66.72%和84.69%，马铃薯渣干物质和淀粉的有效降解率降低了47.34%和35.98%，红薯渣则下降了51.48%和57.39%；马铃薯渣青贮和红薯渣青贮干物质的有效降解率差异不显著（P＞0.05），淀粉差异显著（P＜0.05）；马铃薯渣和红薯渣青贮后过瘤胃淀粉分别增加了57.43%（42.94 g/kg）和151.37%（122.52 g/kg），且红薯渣极显著高于马铃薯渣（P＜0.01）。因此，青贮处理有效降低了2种薯渣干物质和淀粉的瘤胃降解率，并提高了其过瘤胃淀粉量，红薯渣的过瘤胃淀粉量明显高于马铃薯渣。

锌是迄今为止发现的畜禽机体内最重要的微量元素之一，对于促进动物生长、增强免疫功能、维持皮肤健康等方面具有重要功能。作者主要综述了微量元素锌的生物学功能、影响畜禽机体对锌吸收的因素及近年来不同锌源（无机锌和有机锌）在动物营养上的研究进展，为锌在畜禽饲料中的高效合理利用提供参考。

本试验旨在研究荷斯坦奶牛亚临床酮病对血清中微量元素的影响，选择40头产后1～15 d的荷斯坦亚临床酮病奶牛，通过应用原子吸收光谱法测定血清中Cu、Fe、Mn、Zn、Se、Co含量，应用分光光度计和比色法测定血清中GSH-Px、T-AOC、T-SOD活力及MDA含量。结果显示，阳性组血清中Cu、Zn、Se、Co的含量在整个检测过程中均极显著低于对照组(P＜0.01)；阳性组血清中Mn的含量在第1、5天的检测中显著低于对照组(P＜0.05)，第10、15天极显著低于对照组(P＜0.01)；阳性组血清中Fe的含量与对照组相比差异不显著（P＞0.05）；阳性组血清中GSH-Px、T-SOD、T-AOC的活性均极显著低于对照组(P＜0.01)；阳性组血清中MDA的含量极显著高于对照组(P＜0.01)。结果表明，亚临床酮病直接影响奶牛抗氧化系统GSH-Px、T-AOC、T-SOD的活性，间接地影响血清中微量元素Cu、Mn、Se、Zn的含量。Co是维生素B₁₂的重要组成部分，维生素B₁₂在肝脏内的浓度下降，从而导致亚临床酮病血清中Co的含量降低。亚临床酮病奶牛肝脏和氧化酶受损，破坏Fe的结合，机体内贮存的Fe则可以释放出来，维持机体的需要，血清中Fe的含量没有显著的变化。

霉菌毒素对蛋鸡饲料的污染，不仅影响到蛋鸡健康，其在组织和鸡蛋中的残留也给食品安全带来很大隐患。作者就霉菌毒素的污染情况、对蛋鸡的影响、在肌肉、肝脏和肾脏等组织和鸡蛋中的残留情况及其检测方法的研究现状进行综述，从而为深入研究霉菌毒素提供一定的依据。

为探讨添加不同剂量中草药和抗生素对仔猪生产性能与经济效益的影响，本试验选择60头健康的三元杂交断奶仔猪（杜×长×大），体重为（10±1）kg，随机分成4个试验组，分别为试验1、2、3、4组(3个试验组和1个对照组)，每个试验组设3个重复，每个重复选5头仔猪，在各试验组基础日粮中分别添加0.2%、0.4%中草药和抗生素（400 mg/kg硫酸黏杆菌素）。试验结果表明，添加0.2%、0.4%中草药组和添加抗生素组比对照组平均日增重分别提高了8.24%、9.17%和8.65%，均差异显著(P＜0.05)；料重比分别下降了5.12%、6.56%和5.01%，均差异显著(P＜0.05)；仔猪腹泻率明显下降；头均毛利分别提高了3.78%、5.87%和4.07%。结果表明该中草药组方在一定程度上可完全替代抗生素，且添加不同剂量中草药的饲喂效果存在一定差异。

为阐明牦牛乳中矿物质元素含量在全泌乳期的变化规律，试验采集了四川省龙日种畜场麦洼牦牛产犊当天到180 d（即0～180 d）内共12个时间点的乳样。采用微波消解法处理乳样，用电感耦合等离子体发射光谱仪（ICP-OES）测定牦牛乳中14种矿物质元素，分别为4种大量元素（钾（K）、钙（Ca）、镁（Mg）、磷（P））和10种微量元素（硼（B）、钡（Ba）、镉（Cd）、钴（Co）、铜（Cu）、钼（Mo）、镍（Ni）、钛（Ti）、锌（Zn）、锰（Mn）），并以牦牛产犊后30 d采集的乳样数据为基准进行统计分析。结果显示，麦洼牦牛初乳中K、Ca、Mg、P 4种大量元素含量较高。与30 d的常乳含量相比，K的含量在0 d时差异极显著（P＜0.01），在120 d时差异显著（P＜0.05）；Ca的含量在5 d时差异显著（P＜0.05）；Mg的含量在180 d时差异显著（P＜0.05）；P的含量变化差异不显著（P＞0.05）。在0～180 d泌乳期内微量元素随泌乳期的变化也较明显，与30 d的常乳含量相比，Ba的含量在0和1 d时差异极显著（P＜0.01），在2、3、4、5和180 d时差异显著（P＜0.05）；Mo、Ni、Zn的含量在180 d时差异显著（P＜0.05）；B、Cd、Cu、Ti、Mn的含量随泌乳期变化差异均不显著（P＞0.05）。综上所述，牦牛乳中K、Ca、Mg、Ba、Mo、Ni、Zn的含量随泌乳期的变化差异显著（P<0.05），P、B、Cd、Cu、Ti、Mn的含量变化不显著（P>0.05）；整体上看，K、Mg、P、Ba、Zn的含量变化呈先降低后增加的趋势，而Ca的含量呈现出先增加后降低的趋势。

本试验以2株乳酸菌（LJ2和LZ1）按不同剂量分别对小鼠连续灌服30 d，在10、20、30 d检测各组小鼠血清中IgG和IgA的含量。结果表明，灌服不同剂量的LJ2和LZ1菌液均能提高小鼠血清中IgG、IgA含量，且随灌服时间的不断增加，低、中剂量组有超过高剂量组的趋势。整体上看，灌服LZ1菌液对提高血清中IgG、IgA含量的效果优于LJ2菌液，其中LZ1的低剂量组对于提高机体免疫力效果最好，中、高剂量组次之，最后是低剂量LJ2。

通过测定150头育成牛从出生到配种前各月龄牛的体重、体高、体斜长、胸围和管围，掌握其生长发育规律，绘制生长发育曲线。结果表明，育成牛在13月龄时体重、体高、胸围、体斜长和管围分别为366.26 kg、125.69 cm、168.01 cm、139.38 cm和17.83 cm，均达到了配种要求；在8月龄之前各项体尺增长最快，8月龄之后速度减慢。犊牛和育成牛体重的评估模型为：Y＝－284.087＋4.747X₁＋5.664X₂－3.209X₃－25.352X₄或Y＝96.475X²₂X₃。

山羊胚胎生殖细胞是一种来源于胎儿原始性腺的多能干细胞，建立该细胞体外稳定分离培养体系对研究山羊繁殖育种具有重要价值。本试验通过酶消化法和组织培养法分离培养关中奶山羊胚胎生殖细胞，检测无血清培养基对细胞体外增殖的影响。结果发现，该培养基可以分离得到山羊胚胎生殖细胞，细胞集落形态典型，表达AKP、Oct4、TERT及SSEA-1。经体外分化试验表明，细胞可以分化为类胚体、成纤维样细胞、成脂细胞和卵母细胞样形态。无血清培养基可以用于山羊胚胎生殖细胞的分离与培养，本试验对进一步建立山羊胚胎生殖细胞长期培养体系提供了新的参考。

本研究应用流式细胞仪对添加了不同浓度阿非迪霉素的Jurkat细胞进行测定，通过Cellquest Pro软件分析细胞的凋亡率。结果表明，阿非迪霉素引起Jurkat细胞的凋亡呈剂量依赖效应和时间依赖效应。随着阿非迪霉素浓度的增加，早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率均不断增加，并在浓度≥1 μg/mL时，凋亡率呈明显增加的趋势；随着培养时间的延长，早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率同样不断增加，并在培养时间≥16 h，凋亡率呈明显增加的趋势。

益生菌FGM株发酵黄芪后，产物粗多糖得率显著提高。为进一步提高FGM株发酵黄芪转化多糖的稳定性，本试验将连续传代的FGM株种子液接种黄芪进行液体发酵，采用细菌平板计数法和苯酚—硫酸法分别测定发酵前、后的细菌总数和发酵后黄芪多糖的含量，并对结果进行了统计学分析。结果表明菌种在多次连续传代后会产生菌种退化现象，发酵产物中多糖含量与种子液细菌总数呈极显著相关（P=0.007），其中第4代种子液发酵黄芪转化多糖的性能最高。

本试验旨在建立测定枫蓼水煎液中总黄酮含量的紫外—可见分光光度法。以芦丁为对照品，用亚硝酸钠—硝酸铝—氢氧化钠为显色体系，采用紫外—可见分光光度法于510 nm波长处测定其吸光度。结果表明总黄酮浓度在0.008～0.048 mg/mL范围内，芦丁浓度与吸光度的线性关系良好。总黄酮加样平均回收率为100.97%，RSD=1.66%。本试验结果表明所用的方法简便、准确，可用于牛耳枫、辣蓼药材的半成品及成品中总黄酮含量的检测。

活性氧自由基是需氧生物不可避免的，过多自由基的积累会导致水产动物细胞损伤，甚至引起疾病。作者从水产动物活性氧自由基产生和消除的机制及水环境温度、溶氧、盐度、过渡金属离子浓度和农药导致水产动物氧化应激的机理2方面进行综述，为中国集约化水产养殖准确控制水环境变化及有效抵抗氧化应激方面工作提供参考。

试验旨在研究流加培养基中不同营养成分、初始接种密度、流加起始时间对BHK-21悬浮细胞流加培养的影响。结果表明，流加浓缩包中的氨基酸对促进细胞生长有明显影响，而无血清培养基添加成分不仅促进细胞生长，且对细胞活力的维持起着较为重要的作用。初始接种密度为3×10⁵～6×10⁵ m/L，培养至48 h开始流加一定量的浓缩液，流加培养效果较好。另外，在已优化的条件下进行流加培养，未出现细胞大量凋亡现象。

本试验利用不同浓度过氧化氢（H₂O₂）作用于BRL-3A大鼠肝细胞，用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测BRL-3A细胞存活数量以确定H₂O₂最适损伤浓度。试验随机分为正常对照组、H₂O₂处理组和硫氧还蛋白(2.5和5 μmol/L) 预处理组，用脂质过氧化物丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）试剂盒测定细胞的氧化应激变化。结果显示1000 μmol/L H₂O₂对BRL-3A细胞增殖具有显著的抑制作用（P<0.05）；2.5 μmol/L 硫氧还蛋白对H₂O₂损伤的BRL-3A细胞具有保护作用，能显著抑制H₂O₂诱导的BRL-3A细胞损伤产生MDA（P＜0.05），并显著增加细胞SOD及CAT的活性（P＜0.05），从而保护肝细胞。本试验结果表明，硫氧还蛋白对H₂O₂诱导BRL-3A细胞的氧化应激损伤具有保护作用。

通过分离子宫蓄脓犬与健康犬子宫内膜基质细胞，观察其生长特性并对其进行细胞免疫荧光鉴定，分析比较该细胞在病犬中是否异常。结果显示，轻度子宫蓄脓犬和健康犬的子宫内膜基质细胞形态和特性基本一致，前者的细胞活性更强，增殖速度较快，可在接种后4 d融合成片，细胞多数呈梭形，少数呈多角状。经细胞免疫荧光鉴定，该细胞表达波形蛋白，阳性率98%以上。结果表明本试验所分离的细胞为犬子宫内膜基质细胞，该细胞在轻度子宫蓄脓犬和健康犬中无明显变化。

通过对马的线粒体细胞色素b（Cytb）基因序列的遗传变异分析，来探讨蒙古家马、蒙古野马和驴之间的亲缘关系和遗传多样性。对各类马和驴样本 mtDNA Cytb 基因进行PCR扩增和测序，运用现代分子生物学软件进行数据处理。结果共检测到15个单倍型，90个突变位点，单倍型多样性（Hd）为0.9356,核苷酸多样性（Pi）为0.01022,平均核苷酸差异数（K）为8.966，各群体间的遗传多样性相差不大。系统发育树和NETwork图中每一分支都至少包含2个群体的信息。4个类型蒙古家马总体上具有较高的遗传多态性，蒙古家马与蒙古野马之间的亲缘关系较近, 且出现数个分支，蒙古家马分布在各独立的进化支中，说明蒙古家马母系来源非常广泛或经过多次驯化。

本研究利用SAS 8.1软件的最小二乘方差分析和MTDFREML软件对南山种羊场的2125只中国美利奴羊（新疆型）的初生重进行了遗传力估计，并分析了非遗传因素对羔羊初生重的影响。结果表明，初生重的遗传力为0.30，属于中等遗传力(0.1＜h²＜0.3)。在非遗传因素中，母亲年龄、出生年份、产羔类型和群别对羔羊的初生重有极显著影响(P＜0.01)，而性别对初生重无显著影响(P＞0.05)。试验结果为中国美利奴羊（新疆型）进一步选育提供一定的依据。

试验旨在研究会理黑山羊线粒体DNA (mtDNA) D-loop区的起源进化及遗传多样性，为保护该品种山羊遗传资源提供理论依据。采用PCR扩增、测序、生物信息学分析等技术分析41只会理黑山羊mtDNA D-loop区核苷酸序列，并对其进行系统发育树构建。会理黑山羊mtDNA D-loop区的长度在1211～1213 bp之间，其中2个个体为1211 bp，29个个体为1212 bp，10个个体为1213 bp；A+T(60.1%)含量远高于G+C(39.9%)含量，有9种单倍型，单倍型多样度为0.842±0.00368，核苷酸多样度为0.01542±0.00034。遗传进化分析表明，会理黑山羊与建昌黑山羊、成都麻羊、金堂黑山羊、贵州白山羊、贵州黑山羊亲缘关系最近，与旋角野山羊亲缘关系最远。会理黑山羊具有较丰富的遗传多样性，在进化过程中受到其他品种山羊影响。

为研究钙蛋白酶抑制蛋白（calpastatin，CAST）基因多态性与新疆阿勒泰羊肉嫩度的关系，本试验以89只新疆阿勒泰羊为研究对象，运用PCR-SSCP方法对新疆阿勒泰羊CAST基因第1、2、21外显子进行多态性检测，采用DNA测序技术对结果进行测序，并与新疆阿勒泰羊肉嫩度进行关联性分析。结果显示，在第1和2外显子均未发现多态性，在第21外显子检测出AA、AB、BB 3种基因型，测序结果显示该处发生了A→G的突变。关联分析结果表明，该突变对阿勒泰羊肉嫩度有显著影响（P＜0.05），初步推断AA基因型可能对阿勒泰羊肉嫩度有一定的改善作用。

坝上长尾鸡是坝上人民经长期选育，逐步形成的体型外貌和生产性能相对稳定的优质蛋肉兼用型地方品种，因分布于河北北部的承德、张家口坝上地区而得名，外形偏于蛋用型鸡，体型小，体躯较长，尾羽高翘，背线呈V形，主要特征是尾羽较长，公鸡有2～3根大翘羽，所测得的数据中最长达52 cm。母鸡尾羽上翘，主尾羽长15～20 cm，分两侧呈八字形。蛋白透明、口感弹性细腻,蛋黄大，呈金黄色，该鸡具有野外觅食力强、耐粗饲、抗病力强、肉嫩味美等特点。通过本次调研将坝上长尾鸡数量最多的沽源县长梁乡、平定堡镇和康保县丹清河乡作为重点保种基地，设立保种场，进一步建立保种核心群。同时，对坝上长尾鸡进行系统选育，巩固和提高其原有优良性状与特性。

为研究母猪分娩与断奶时背膘厚度对繁殖性能的影响，使用A超测定母猪分娩及断奶时的背膘厚度，根据分娩时背膘厚度将试验动物分为1组（X＜10 mm）、2 组（10 mm≤X≤14 mm）、3 组（X＞14 mm）,根据断奶时背膘厚度将试验动物分为A组（X＜7 mm）、B组（7 mm≤X＜10 mm）、C组（10 mm≤X＜13 mm）、D组（13 mm≤X＜16 mm）、E组（X≥16 mm），又根据母猪哺乳期间损失的背膘厚度分为Ⅰ组（X＜3 mm）、Ⅱ组（3 mm≤X≤6 mm）、Ⅲ组（X＞6 mm），用方差分析比较各组繁殖表现，并建立了发情间隔对背膘厚度的回归方程。结果表明，分娩时产死胎母猪的比例2组是10.5%，在3组中最小；断奶后平均发情间隔C组显著低于其他各组(P＜0.05)；哺乳期间背膘损失最大的Ⅲ组母猪平均发情间隔为8 d,显著高于Ⅰ组、Ⅱ组(P＜0.05)。表明分娩与断奶背膘厚对母猪繁殖性能有显著影响，膘情适中的母猪有最好的繁殖表现，并建立了回归方程Y=31.787－6.169X +0.440X²－0.009X³，用于预测母猪发情配种日期。

本试验旨在研究Dab2蛋白在马兜铃酸肾病（aristolochic acid nephropathy，AAN）小鼠模型中的表达变化。在AAN小鼠模型的基础上，利用免疫组化、荧光定量PCR和Western blotting技术对肾脏中Dab2基因转录水平和蛋白表达水平进行检测。结果显示，随着用药时间的延长，肾脏组织损伤程度加重；Dab2蛋白表达量在第6天先降低（P＞0.05），在第12天突然升高随后又极显著降低（P＜0.01），Dab2蛋白表达总体呈上升趋势，Dab2基因转录水平变化趋势与此一致；同时Dab2蛋白的定位也发生了变化，完成了从刷状缘到细胞质，再到细胞核的转移。结果表明Dab2蛋白参与AAN小鼠的发病过程，为进一步研究Dab2蛋白在AAN中的作用奠定理论基础。

为了评估某些批次的禽白血病病毒（ALV）抗体商品化 ELISA检测试剂盒在检测鸡群中A/B亚群禽白血病病毒（ALV-A/B）抗体阳性率的可靠性，使用同一批次试剂盒，对往年ALV-A/B抗体检测阳性率达标（＜1%）的A类鸡场及往年ALV-A/B抗体检测阳性率不达标（＞1%）的B类鸡场所送检样品进行初检，在A类鸡场初检阳性样品中挑选S/P值最高的8份阳性样品，在B类鸡场初检阳性样品中挑选S/P值最高的40份样品，再使用相同批次的试剂盒将每个初检阳性样品做3个孔的重复检测，并以上述48份样品为一抗同时做间接免疫荧光试验（IFA），系统比较了IFA和ELISA 2种方法检测结果的一致性。结果发现，A类鸡场初检为阳性的8份样品经复检和IFA检测均变为阴性；B类鸡场4份样品（4/40）ELISA复检和IFA结果均变为阴性，36份样品（36/40）ELISA复检仍为阳性，但其中20份呈IFA阳性，16份呈IFA阴性，结果表明某些批次的试剂盒在特异性和稳定性方面存在一定问题。提示，相关企业在进行大批量样本检测时，ELISA阳性样品需结合IFA进行结果判定，以提高检测的准确性。

试验从养殖环境中分离到22株细菌，以副溶血弧菌为病原指示菌，点种法筛选到1株弧菌颉颃菌A4；通过生理生化试验和16S rRNA序列分析，鉴定该菌为枯草芽孢杆菌。抑菌性能试验结果显示，分离菌株对副溶血弧菌、溶藻弧菌及灿烂弧菌均具有较好的颉颃作用。在对虾养殖试验中发现，使用枯草芽孢杆菌制剂2 d后可显著减少水体中的弧菌数量（P＜0.05），改善对虾生长状态。该菌株可作为益生菌开发成微生态制剂，用于对虾养殖中弧菌病的预防。

本研究对江苏部分奶牛场致隐性乳房炎病原进行流行病学调查，采样并进行细菌分离培养、革兰氏染色镜检、生化鉴定，共分离到35株凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）。用常规药敏纸片法对CNS分离菌株的抗生素耐药情况进行分析，结果显示分离培养到的35株CNS对临床常用抗生素万古霉素、左氟沙星、克拉霉素、苯唑西林、诺氟沙星、氯霉素、环丙沙星、头孢噻肟、磷霉素和呋喃妥因等高度敏感，高敏率在60%～80%之间；而对青霉素G、复方新诺明和多黏菌素B有一定的耐药性，耐药率为70%～100%。分离菌株表现了较强的多重耐药性，耐20种药物的细菌有3株，耐15种药物的细菌有1株，耐14种药物的细菌有1株，62.9%的CNS分离菌株能耐5种以上抗生素，表明导致奶牛隐性乳房炎CNS菌株耐药情况不容小视。

本研究采用3种不同的猪繁殖与呼吸综合征病毒（procine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）抗体检测试剂盒对仔猪母源抗体和免疫猪抗体消长规律进行了比较分析，以期为猪群PRRSV抗体监测提供试剂盒选择依据。将10头PRRSV、PCV2病原双阴性仔猪随机分为2组，每组5头，2组仔猪分别于14日龄及PRRSV母源抗体转阴后免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗，于14、21、28、35、42、49、56、70、84、98日龄采血并分离血清，分别用3种商品化PRRSV抗体检测试剂盒检测抗体水平，同时检测母猪分娩后14 d抗体水平；结果显示，试剂盒A与试剂盒C的Kappa值=0.784＞0.6，试剂盒A与试剂盒C高度一致；试剂盒B与试剂盒A、试剂盒B与试剂盒C的Kappa值分别为0.422、0.374，试剂盒B与试剂盒A一致性中度,试剂盒B与试剂盒C一致性较弱。母源抗体监测表明，3种试剂盒检测的PRRSV母源抗体均在42日龄左右转阴。试剂盒A与试剂盒C所检测的PRRSV相关抗体在免疫后1周即产生，3周即可达到峰值，而试剂盒B所检测的PRRSV相关抗体在免疫后3周产生，5周达到峰值。本研究为3种试剂盒对临床PRRSV的抗体监测和免疫评估提供了试验依据。

为阐明淡水鱼的主要致病菌嗜水气单胞菌对氟苯尼考的耐药现状，本试验采用纸片扩散法和浓度稀释法分别定性、定量检测了2010年9月至2013年5月期间收集的26株鱼源嗜水气单胞菌对氟苯尼考的耐药性，利用PCR法检测菌株携带氟苯尼考耐药基因的情况。结果显示，北京地区的鱼源嗜水气单胞菌对氟苯尼考的耐药率为15.38%，氟苯尼考对其最小抑菌浓度（MIC）主要集中在2～4 μg/mL，5株菌对氟苯尼考的MIC超过8 μg/mL，1株分离菌具有氟苯尼考耐药基因floR。结合以往数据及其他省市的相关数据，结果表明鱼源嗜水气单胞菌对氟苯尼考已呈较高的耐药率和耐药浓度，且位于质粒上的floR基因阳性菌株有传递该基因给其他种属鱼类致病菌的风险。因此，有必要科学规范氟苯尼考在水产养殖中的应用。

采用16S rRNA序列分析及生化分析的方法，从某规模育肥羊场的患呼吸系统疾患的病羊分离到1株金黄色葡萄球菌，命名为JLY-1。药敏试验结果显示，JLY-1是1株多重耐药葡萄球菌，对红霉素、氨苄西林、复方新诺明高度耐药（MIC≥512 μg/mL）；对多西环素、丁胺卡那（MIC≥64 μg/mL）和环丙沙星、恩诺沙星（MIC≥4 μg/mL）耐药;对氟苯尼考和头孢曲松敏感（MIC≤0.25 μg/mL）。

本研究旨在通过对内蒙古地区奶牛源沙门氏菌的分离、血清学鉴定及其对小鼠的致病性研究，探明本地区奶牛源沙门氏菌的血清型分布及其对小鼠的致病力强度，为兽医临床防制由沙门氏菌引起的奶牛感染性疾病提供依据。采用SC增菌液和SS琼脂从兽医临床采集的奶牛乳房炎和奶牛子宫内膜炎病料中分离沙门氏菌；对分离到的疑似菌落进行涂片染色镜检和生化鉴定；采用A～F群O抗原多价诊断血清及单价诊断血清对疑似沙门氏菌进行血清型鉴定；采用腹腔注射感染小鼠，观察部分菌株对小鼠的致病和致死情况，并进行病理学检查。结果显示，从460份病料中共分离、鉴定出沙门氏菌38株，分离率为8.3%；38株分离菌均分布于A～F群内，分属8个群、14种血清型，其中鼠伤寒沙门氏菌分离率最高（39.5%）；选择的5株沙门氏菌攻毒后均可引起小鼠发生死亡，死亡率在50%～80%之间；在感染小鼠的心脏、肝脏均回收到了攻毒菌，且发病小鼠的心脏、肝脏和肾脏出现坏死灶，肺脏有细菌性栓子。结果表明，内蒙古地区奶牛源沙门氏菌血清型分布较复杂，对小鼠有较强的致病性，且不同血清型菌株间的毒力存在差异。

J亚型禽白血病（AL-J）是由外源性J亚型禽白血病病毒（ALV-J）引起的致瘤性和免疫抑制性传染病。该病既可水平传播又可垂直传播，在中国鸡群中污染极为普遍且日趋复杂化，严重危害养鸡业的健康发展。由于该病迄今尚无疫苗和有效治疗药物，目前所采取的主要防控措施是对种鸡群净化。作者就其病原学、流行病学、诊断与防控等方面的研究近况进行了综述。

为探讨板蓝根颗粒对鸡传染性法氏囊病（IBD）的防制效果，以传染性法氏囊病病毒（IBDV）强毒株BC-6/85人工感染26日龄SPF鸡，于攻毒前后在饮水中加入不同剂量的板蓝根颗粒，观察试验鸡的临床症状、病理变化，统计病变得分、免疫器官指数等。结果显示，中、高剂量组的板蓝根颗粒经饮水给药，能改善患IBD鸡的精神状态，减轻该病对鸡免疫器官的破坏，增加血液白细胞吞噬率，增加饮食量和体增重。结果表明，3 g/L的板蓝根颗粒经饮水给药，连续服用5 d，能有效治疗IBD。

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）严重危害养猪业的健康发展，每年给养猪业带来巨大的经济损失。猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是PRRS的致病因子，其可引起孕猪在妊娠后期出现早产、流产或死产等繁殖障碍，并可在新生仔猪引起呼吸系统症状。目前虽然已有商业化的灭活疫苗及减毒活疫苗，但它们的保护效果仍不理想。因此深入研究PRRSV的基因结构、蛋白功能、病毒的生物学性状及致病机制将有助于研发安全、有效的PRRS疫苗。作者对PRRSV及其疫苗的研究进展作一综述。

本研究旨在探讨饮水中添加不同剂量氟苯尼考对肉鸡新城疫活疫苗免疫效果的影响，确定氟苯尼考的最适使用剂量，为临床应用氟苯尼考提供合理的科学依据。试验将150只14日龄肉鸡分成5组（对照组及试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组）。对照组正常饮水，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在饮水中添加水溶性氟苯尼考50、100、200、400 mg/L，通过测定血清中鸡新城疫病毒抗体效价及IL-10、INF-γ含量，比较分析添加不同剂量的氟苯尼考对新城疫活疫苗免疫效果的影响。结果显示，试验Ⅰ和Ⅱ组血清中鸡新城疫病毒抗体效价及IL-10、INF-γ含量与对照组相比差异均不显著（P＞0.05），但试验Ⅲ和Ⅳ组与对照组相比均差异显著（P＜0.05）。结果表明，饮水中添加低剂量氟苯尼考（50、100 mg/L）对鸡新城疫活疫苗免疫效果不产生影响，但添加高剂量氟苯尼考（200、400 mg/L）对鸡新城疫活疫苗免疫效果产生免疫抑制作用。

本试验旨在探索银黄止咳颗粒是否具有体外抑菌和抗炎功效。采用肉汤二倍稀释法进行体外抑菌试验；通过注射0.6%冰醋酸建立炎症早期实验动物模型，并收集腹腔液体用于检测光密度D_{590 nm}值。结果表明，银黄止咳颗粒对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和肺炎双球菌的最小抑菌浓度（MIC）分别为7.8、7.8、3.9、125 mg/mL；最小杀菌浓度（MBC）分别为15.6、15.6、7.8、250 mg/mL；30、16、8 g/kg银黄止咳颗粒溶液均对冰醋酸所致小鼠毛细血管通透性增高有明显的抑制作用。