【目的】自前期选育获得的无猪内源性反转录病毒(Porcine endogenous retrovirus，PERV)传染性“中畜”五指山小型猪近交系(Zhong Xu Wuzhishan Mini-pig Inbred line，ZXWIPIG)新品系中，选取1头雌性猪(ZXWIPIG505)进行全基因组重测序分析，以进一步从分子水平上阐释无PERV传染性猪新品系的序列特征。【方法】分离ZXWIPIG505外周血单个核细胞并提取其基因组DNA，利用Illumina HiSeq-4000测序平台进行全基因组重测序。分别使用BLAST和SAMtools 0.1.19软件，提取ZXWIPIG505基因组中整合的PERV长片段和PERV-pol基因序列片段，并使用DNAStar软件对整合的PERV结构基因序列进行分析。将ZXWIPIG505中整合的PERV-pol基因序列特征与前期鉴定的PERV-pol缺陷型ZXWIPIG452中PERV-pol基因序列进行比较研究。【结果】ZXWIPIG505全基因组重测序平均测序深度为14.32×，测序数据有效率为97.21%，Q20为94.37%，Q30为87.03%，GC含量为43.38%，表明本次测序数据质量较高。ZXWIPIG505基因组中共整合5条PERV长片段，其中仅scaffold5028含有PERV全部结构基因，但均为缺陷型。ZXWIPIG505基因组中共整合85条PERV-pol基因片段序列，比对发现所有PERV-pol基因片段均不完整，为缺陷型。ZXWIPIG505和ZXWIPIG452基因组中整合的PERV-pol基因序列存在高度相似性，60条序列长度相同，75条序列在猪基因组中的整合位点相同，42条序列的PERV-pol基因提前终止位点相同。【结论】前期选育的ZXWIPIG505为PERV-pol基因缺陷型猪，并且ZXWIPIG505和ZXWIPIG452中整合的PERV-pol基因序列具有高度相似性。

环状RNA(circular RNA，circRNA)是一种新型的RNA分子，是由前体mRNA通过反向剪接形成共价闭合的环状结构，由于缺少帽子结构和PolyA尾巴使其稳定且不易被核酸外切酶降解。随着高通量测序和生物信息技术的快速发展，解释了许多circRNA在动植物生命活动和疾病发生中的重要调控功能，如竞争性结合微小RNA(microRNA，miRNA)、调控基因转录、编码多肽以及与RNA结合蛋白(RNA binding protein，RBP)相互作用等。近年来，circRNA因其自身特殊的结构以及在基因表达中发挥的重要调控作用，成为了畜禽遗传育种工作中的关注热点。羊作为中国饲养历史悠久的重要畜种，品种繁多且分布于全国各地，是人们日常生活中最常见的家畜之一。circRNA在羊的绒(毛)、肉质、泌乳、繁殖等性状中发挥着调控作用，且circRNA大多通过作为miRNA的分子海绵调节相关基因的表达，从而影响羊的各个性状。作者综述了circRNA的来源、发展、合成机制、生物功能及其在羊重要经济性状方面的最新应用，旨在为深入探究circRNA在羊重要性状中的分子调控机制提供科学参考。

【目的】对合作猪基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor 1，SDF-1(CXCL12))基因进行克隆及生物信息学分析，并检测其在不同组织中的表达水平，为研究CXCL12基因的功能奠定基础。【方法】以合作猪心脏组织cDNA为模板，采用PCR扩增、克隆CXCL12基因CDS区序列并测序，对所获序列进行相似性比对及系统进化树构建。利用生物信息学软件对合作猪CXCL12蛋白进行理化性质及结构功能分析。运用实时荧光定量PCR检测CXCL12基因在合作猪各组织内的表达水平。【结果】合作猪CXCL12基因CDS区全长351 bp，编码116个氨基酸；与马的亲缘关系最近，与羚羊的亲缘关系最远。CXCL12蛋白不存在跨膜区和信号肽，但存在1个低复杂度的SCY结构域，亲水性指数为―0.347，属于亲水性蛋白，包含12个磷酸化位点；二级结构主要为无规则卷曲(54.31%)和α-螺旋(32.76%)，三级结构与二级结构相一致；该蛋白主要分布于细胞核和线粒体，并与CCL21、CXCL9等蛋白存在相互作用。实时荧光定量PCR结果显示，CXCL12基因在合作猪肝脏中的表达量极显著高于其他组织(P＜0.01)，在肾脏和心脏中的表达量极显著低于其他组织(P＜0.01)。【结论】本研究成功克隆合作猪CXCL12基因CDS区，编码116个氨基酸，主要分布在细胞核和线粒体中，是一种稳定、亲水且无跨膜结构的分泌蛋白。CXCL12基因在合作猪肝脏中的表达量最高。本研究结果可为进一步揭示CXCL12基因调控合作猪免疫机制提供参考。

【目的】筛选快、慢生长速度撒坝猪背最长肌组织中的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)，并探讨其在猪生长发育过程中的重要作用。【方法】选择322日龄体重最大和最小的撒坝猪各6头(公、母各3头)，分为快长组(fast-growth group,FG)和慢长组(slow-growth group,SG)，分别取其背最长肌样品进行转录组测序。测序数据经质控、比对和拼接后，使用DESeq2软件包筛选出快长组和慢长组的差异表达lncRNA，预测其靶基因，并对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。随机挑选6个差异表达lncRNAs进行实时荧光定量PCR验证。【结果】共筛选出165个差异表达lncRNAs，其中71个上调，94个下调，并预测到了65个靶基因。GO功能和KEGG通路富集分析结果显示，靶基因显著富集在脂质代谢过程、经典Wnt信号通路等功能条目，以及Wnt信号通路、精氨酸和脯氨酸代谢、组氨酸代谢等通路。实时荧光定量PCR结果显示，所挑选的6个差异表达lncRNAs(ENSSSCT00000085548、MSTRG.8918.1、MSTRG.20943.30、MSTRG.7048.7、MSTRG.11735.9、MSTRG.20943.40)的表达趋势与转录组测序结果一致，且在快、慢长组撒坝猪背最长肌中均存在显著差异(P＜0.05)。【结论】本研究发现的部分lncRNAs与肌肉生长发育过程有关，其可能通过调控WNT10B、SFRP4、LEP、MAOB、ARG1、PRICKLE1和DUSP1等基因的表达影响平均日增重等生长性状，进而导致撒坝猪群体内的生长速度存在差异。研究结果为深入揭示猪生长发育的分子调控机制及平均日增重等生长性状的遗传改良提供了理论依据。

【目的】克隆牛转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGFB1)基因CDS区，并探究其在固原黄牛不同组织和脂肪细胞分化过程中的表达水平，为后续研究TGFB1基因功能奠定基础。【方法】以牛皮下脂肪组织cDNA为模板，用PCR扩增克隆牛TGFB1基因CDS区。通过生物信息学在线软件预测TGFB1蛋白理化性质、亚细胞定位、蛋白质结构与功能结构域等；利用实时荧光定量PCR检测TGFB1基因在牛脂肪细胞分化中及不同组织中的表达量。【结论】试验成功克隆牛TGFB1基因CDS区，全长1 173 bp。TGFB1基因编码蛋白主要由390个氨基酸组成，蛋白化学分子式为C₁₉₈₁H₃₁₃₄N₅₅₄O₅₆₄S₂₁，总平均亲水性(GRAVY)值为―0.328。TGFB1蛋白共存在37个磷酸化位点、49个O-糖基化位点和3个N-糖基化位点，二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成，与SMAD2、SMAD3、ITGAV等蛋白存在互作。实时荧光定量PCR结果显示，与诱导分化0 d相比，在脂肪细胞分化2 d时TGFB1基因表达量显著降低(P＜0.05)，4～10 d时TGFB1基因表达量显著升高(P＜0.05)。组织表达谱显示，TGFB1基因分别在犊牛的脾脏中和成年牛的皮下脂肪中表达量最高，且显著高于其他组织(P＜0.05)。【结论】牛TGFB1基因在牛前体脂肪细胞诱导分化4 d时表达量较高，且在犊牛脾脏和成年牛皮下脂肪中高表达，其在调控脂肪细胞增殖和分化过程及犊牛免疫系统的生理过程中发挥重要作用。研究结果为进一步探究TGFB1基因参与固原黄牛脂肪沉积的分子机制提供了理论基础。

【目的】分离培养西门塔尔牛胰腺间充质干细胞，建立西门塔尔牛胰腺间充质干细胞系，研究其生物学特性，为西门塔尔牛种质资源的保存提供参考。【方法】采集西门塔尔牛胰腺组织，利用酶消法和组织块贴壁法分离培养胰腺间充质干细胞，并对胰腺间充质干细胞的生物学特性进行鉴定；利用免疫荧光试验和半定量PCR测定细胞表面标记物(CD34、CD73、CD90、CD166)的表达情况；通过绘制P4、P10、P16代细胞生长曲线及计算群体倍增时间测定细胞增殖能力；通过细胞克隆试验测定细胞克隆形成率，通过划痕试验计算细胞迁移率；对纯化后的细胞分别进行成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞诱导分化，检测胰腺间充质干细胞多向分化能力，并通过染色体核型分析试验检测细胞的遗传稳定性。【结果】采用组织块贴壁法培养可得到胰腺间充质干细胞，且传代到第3代基本纯化。半定量PCR结果显示，表面标记物(CD73、CD90、CD166)呈阳性表达，而与造血细胞相关的表面抗原CD34呈阴性表达。西门塔尔牛胰腺间充质干细胞呈现典型的S型生长曲线，P4、P10、P16代细胞群体倍增时间分别为40.22、43.09和44.50 h，细胞克隆形成率分别为26.25%、19.00%和13.50%。划痕试验测定第3代细胞迁移率为44.44%。在体外诱导分化胰腺间充质干细胞后，结果呈现出清晰的脂滴、软骨团和钙结节。核型分析结果判定，西门塔尔牛胰腺间充质干细胞为正常二倍体核型(2n=60，XY)，染色体组未发生变异。【结论】从西门塔尔牛胰腺组织分离培养的胰腺间充质干细胞能够稳定遗传，增殖能力强，且具有向成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞分化的潜能。研究结果可为西门塔尔牛组织修复提供新方法，为西门塔尔牛种质资源的保护和保存提供种子细胞。

【目的】探究菟丝子和牛蒡子复合提取物对成年猫尿液理化指标、血清抗氧化能力及免疫指标的影响，以期为菟丝子和牛蒡子复合提取物在宠物饲料上的应用提供理论依据。【方法】将20只体况和年龄相近的成年英国短毛猫随机分为2组，对照组提供基础饲粮，试验组饲粮在基础饲粮中添加3 g/kg复合植物提取物(由菟丝子提取物和牛蒡子提取物按质量比1∶2混合，主要成分为没食子酸酯、槲皮素和牛蒡甙)。每组设10个重复，公母各半，每个重复1只猫。预饲期为7 d，正式试验期为42 d。试验结束后，采血并收集新鲜尿液，以测定血常规指标、血清生化指标、免疫指标、抗氧化指标及尿液理化指标。【结果】与对照组相比，试验组成年猫血清总蛋白和白蛋白水平显著升高(P＜0.05)；血清白细胞介素-1β含量显著降低，而白细胞介素-10含量显著升高(P＜0.05)；血清丙二醛含量显著低于对照组，而总抗氧化能力显著高于对照组(P＜0.05)。与对照组相比，试验组饲粮对成年猫尿液pH无显著影响(P＞0.05)，但显著提高了成年猫尿液总量(P＜0.05)，并显著降低了尿液中钙离子、钠离子、钾离子、氯离子、磷酸根离子和柠檬酸根离子浓度(P＜0.05)。【结论】在饲粮中添加菟丝子和牛蒡子提取物组合物能够增强成年猫机体抗氧化能力和免疫能力，改善尿液理化指标，有助于维持成年猫的健康状态。

【目的】试验旨在探讨苦豆子和苦豆子生物碱对滩羊生长性能和瘤胃微生物区系的影响。【方法】选取60只育肥期健康、体况良好的滩羊(体重28.38 kg±1.49 kg)，随机分为5组，每组12个重复。对照组饲喂基础饲粮，试验1、2、3组分别在基础饲粮中添加2%、3%和4%苦豆子，试验4组在基础饲粮中添加0.2%苦豆子生物碱。预饲期7 d，试验期60 d。试验期间称重，记录滩羊采食量，统计生长性能指标；试验结束时采集瘤胃液，基于16S rRNA高通量测序技术分析滩羊瘤胃微生物群落的变化。【结果】①与对照组相比，试验3组滩羊的平均日采食量极显著降低(P＜0.01)，4个试验组滩羊的料重比均极显著下降(P＜0.01)。②各组间滩羊瘤胃微生物Ace指数、Chao1指数、Shannon指数、Simpson指数及Sobs指数均无显著差异(P＞0.05)。③在滩羊瘤胃微生物门水平上，各组的优势菌群均为厚壁菌门和拟杆菌门，与对照组相比，试验2和4组厚壁菌门相对丰度极显著降低(P＜0.01)，试验3组厚壁菌门相对丰度极显著升高(P＜0.01)，试验2组拟杆菌门和丝状杆菌门相对丰度均显著升高(P＜0.05)。④在滩羊瘤胃微生物属水平上，各组的主要优势菌群为普雷沃菌属、瘤胃球菌属、克里斯滕森菌科R-7群、理岩菌科RC9_肠道群和norank_f_F082。与对照组相比，试验1和2组滩羊瘤胃普雷沃菌属相对丰度极显著升高(P＜0.01)，试验4组norank_f_F082相对丰度极显著升高(P＜0.01)，试验3组瘤胃Ruminococcus_gauvreauii_group相对丰度极显著升高(P＜0.01)，4个试验组瘤胃奥尔森菌属相对丰度均显著降低(P＜0.05)，试验3组瘤胃未分类瘤胃球菌科相对丰度显著升高(P＜0.05)。【结论】本试验条件下，饲粮中添加2%、3%苦豆子和0.2%苦豆子生物碱均能够有效改善滩羊的生长性能，并对滩羊瘤胃微生物群落的组成有调节作用，提高滩羊的营养利用率，该结果为探讨苦豆子及苦豆子生物碱作为饲料添加剂的潜在机制提供了依据。

【目的】试验旨在探究饮用不同水平绿茶浸提液对青脚麻鸡消化酶活性、营养物质表观消化率和血清生化指标的影响，为废弃茶叶作为家禽生产中新型饲料添加剂的潜在应用开辟新的可行途径。【方法】试验随机选取1日龄青脚麻鸡400 只，分为4组，组内设置5个重复，每个重复20只鸡。各组鸡均饲喂基础饲粮，对照组鸡自由饮用清水，试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组鸡分别饮用0.3%、0.6%和1.2%的绿茶浸提液，试验期21 d。试验结束后，从每个重复中随机选取2只鸡采血、屠宰，收集胰腺和十二指肠食糜，检测血清生化指标和肠道消化酶活性；在试验的第19、20和21天，以重复为单位采集鸡的排泄物，测定养分表观代谢率。【结果】各试验组鸡胰腺脂肪酶活性均显著低于对照组(P＜0.05)，试验Ⅱ和Ⅲ组鸡十二指肠食糜胰蛋白酶活性显著高于对照组(P＜0.05)，试验Ⅲ组鸡十二指肠食糜脂肪酶活性显著低于对照组(P＜0.05)。试验Ⅱ和Ⅲ组鸡的粗蛋白质表观代谢率显著高于对照组(P＜0.05)。与对照组相比，各试验组鸡血清中甘油三酯(TG)含量显著降低(P＜0.05)；试验Ⅱ和Ⅲ组鸡血清尿素氮(BUN)、低密度脂蛋白(LDLC)含量和谷丙转氨酶(ALT)活性显著降低(P＜0.05),且BUN含量显著低于试验Ⅰ组(P＜0.05)，试验Ⅲ组鸡LDLC含量和ALT活性显著低于试验Ⅰ组(P＜0.05)。【结论】饮用绿茶浸提液可以提高青脚麻鸡粗蛋白质的表观代谢率和肠道蛋白酶的活性，并对血清蛋白质和脂类代谢指标产生有利影响，推荐饮用0.6%绿茶浸提液为宜。

钙和磷是动物机体中含量最丰富的两种矿物质元素，在动物机体的生长发育、新陈代谢、免疫功能等多种生命活动中发挥重要作用。钙磷代谢紊乱对动物影响显著，常引起动物营养不良和生产性能低下的症状。Klotho蛋白由抗衰老基因Klotho编码，在肾脏、脑以及骨骼中存在表达，在生物学上具有多种重要功能。研究发现，Klotho蛋白可作为辅助因子与成纤维生长因子受体(fibroblast growth factor receptor，FGFR)结合影响离子通道表达，并通过调节钙磷代谢相关激素的分泌来共同参与动物机体钙磷稳态的维持。作者综述了Klotho蛋白的表达与定位、生物学功能，以及钙磷代谢的基础过程和Klotho蛋白在钙磷代谢调控中可能机制的相关研究进展，以期为Klotho蛋白在维持机体钙磷稳态的进一步深入研究及以Klotho为潜在靶点治疗钙磷代谢疾病的开发利用提供理论参考。

【目的】探究不同假单胞菌添加量对人工瘤胃内环境的影响，筛选出适宜的假单胞菌添加量。【方法】选用4头高产奶牛作为瘤胃液的供体，以供体牛的全混合饲粮(TMR)为发酵底物。采用单因素四水平试验设计，对照组(CON)发酵底物中添加0.5 g TMR，试验组(A～D)在此基础上分别添加1×10⁹、2×10⁹、4×10⁹、8×10⁹ CFU/mL假单胞菌，每个水平设置3个重复，发酵2、4、6、8、10、12、24 h时记录pH及产气量，发酵结束后测定氨态氮(NH₃-N)、微生物蛋白(microbial protein，MCP)和挥发性脂肪酸(volatile fatty acid，VFA)含量；基于16S rRNA、内转录间隔区(internal transcribed spacer，ITS)进行宏基因组测序，分析瘤胃发酵液中微生物区系的变化。【结果】①发酵10 h时，C、D组瘤胃发酵液中pH显著低于CON组(P＜0.05)；各时间点所有处理组间的产气量、NH₃-N、MCP含量均无显著变化(P＞0.05)。②发酵10 h时，B组瘤胃发酵液中乙酸、丁酸、总VFA含量显著或极显著高于CON组(P＜0.05；P＜0.01)；发酵12 h时，A、B组瘤胃发酵液中异丁酸含量显著高于D组(P＜0.05)；发酵24 h时，各试验组瘤胃发酵液中丙酸、丁酸、异戊酸、乙丙比和总VFA含量显著或极显著高于CON组(P＜0.05；P＜0.01)。③C、D组瘤胃发酵液中16S rRNA和ITS的Chao1、Ace指数显著或极显著低于CON组(P＜0.05；P＜0.01)。④在16S rRNA门和属水平上，与CON组相比，D组瘤胃发酵液中变形杆菌门和克雷伯菌属相对丰度均显著升高(P＜0.05)，C和D组琥珀菌属_UCG-001、理研菌属_RC9相对丰度显著或极显著降低(P＜0.05；P＜0.01)；B组瘤胃发酵液中解琥珀酸菌属相对丰度显著高于C、D组(P＜0.05)，norank_F082菌属相对丰度显著高于D组(P＜0.05)。⑤在ITS门和属水平上，与CON组相比，B、C、D组瘤胃发酵液中柯达酵母属相对丰度显著升高(P＜0.05)；B组放线菌属相对丰度显著升高(P＜0.05)。【结论】本试验条件下，2×10⁹ CFU/mL假单胞菌对奶牛瘤胃发酵参数无副作用，增加了VFA的产生，同时促进了纤维降解菌的增殖，因此，假单胞菌适宜添加量为2×10⁹ CFU/mL。

【目的】为探究北京鸭最佳的填饲时间，试验研究了不同填饲时间对北京鸭生长性能、屠宰性能、营养品质和肠道形态的影响。【方法】选用体重相近的1日龄北京鸭150只，采用单因素随机试验设计，随机分为5组，每组6个重复，每个重复5只，分别在育肥期(36～42日龄)的第7、5、3、1天每天填饲4次，分别填饲1(OF1组)、3(OF3组)、5(OF5组)和7 d(OF7组)，OF0组为免填对照组，试验期为42 d。试验结束后称重，计算北京鸭生产性能，每个重复组选取2只北京鸭屠宰并测定屠宰性能；采集皮脂和胸肌组织，分别检测脂肪酸和氨基酸含量；采集十二指肠、空肠和回肠组织做组织病理切片。【结果】①与OF0组相比，OF3、OF5、OF7组北京鸭终末体重和平均日增重均显著升高(P＜0.05)，OF7组料重比显著升高(P<0.05)。②与OF0组相比，4个填饲组北京鸭屠宰率、全净膛率、腿肌重(率)及胸肌重(率)均无显著差异(P＞0.05)，但OF3、OF5、OF7组北京鸭的活体重、屠体重及皮脂重(率)均显著升高(P＜0.05)。③与OF0组相比，OF1组北京鸭皮脂中总脂肪酸(TFA)、饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)、n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFA)、n-6多不饱和脂肪酸(n-6 PUFA)含量均显著降低(P＜0.05)；OF3、OF5组北京鸭皮脂中TFA、MUFA含量显著升高(P＜0.05)，OF5、OF7组北京鸭皮脂中SFA含量显著升高(P＜0.05)，OF3组北京鸭皮脂中PUFA、n-3 PUFA及n-6 PUFA含量显著升高(P＜0.05)，n-6/n-3差异不显著(P＞0.05)；北京鸭胸肌中总氨基酸(TAA)含量差异不显著(P＞0.05)，但OF7组北京鸭胸肌中必需氨基酸(EAA)含量明显降低(P＜0.05)。④与OF0组相比，填饲均可导致北京鸭小肠绒毛结构出现不同程度的脱落、炎性细胞浸润甚至坏死。【结论】填饲能显著提高北京鸭的生长性能、屠宰性能以及皮脂营养成分，但会损伤肠道形态结构。综合考虑推荐最佳填饲时间为3 d。

【目的】探究牛粪好氧堆肥过程中理化性质和微生物群落的演变及其相互关系，以期为粪肥资源化利用提供理论基础。【方法】对牛粪经螺旋挤压进行固液分离，分离后的固形物通过28 d好氧堆肥的方式处理，分别于0 d(C0d)、7 d(C7d)、14 d(C14d)、28 d(C28d)采样，检测含水率(MC)、有机质(OM)、碳氮比(C/N)、硝态氮(NO₃-N)、总氮(TN)含量等理化指标，以16S rRNA高通量测序分析样品中微生物群落结构的变化。【结果】经堆肥处理后，C28d样品与C0d、C7d、C14d样品相比，含水率、有机质含量和碳氮比极显著降低(P＜0.01)，pH变化幅度不大，硝态氮和总氮含量极显著增加(P＜0.01)。微生物群落Alpha多样性分析显示，随着堆肥过程的进行，微生物群落的丰度和多样性逐渐下降，C14d样品中Chao1、Faith_pd、Observed species指数与C0d样品间存在显著差异(P＜0.05)。门水平分析显示，厚壁菌门(Firmicutes)、放线菌门(Actinobacteriota)和变形菌门(Proteobacteria)是整个堆肥阶段的优势菌门；属水平分析显示，嗜冷杆菌(Psychrobacter)和棒状杆菌(Corynebacterium)等条件性致病菌随着堆肥过程的进行被有效杀灭。关联分析结果表明，SBR1031的相对丰度与硝态氮含量呈正相关，与有机质含量呈负相关；Limnochordaceae、双孢菌属(Thermobispora)和芽孢杆菌属(Bacillus)的相对丰度与总氮含量呈正相关，与pH呈负相关；棒状杆菌属和嗜冷杆菌属相对丰度与pH呈正相关，与总氮含量呈负相关。【结论】堆肥结束后，堆肥含水率、有机质含量较初始样品分别降低53.14%和19.20%；碳氮比从57.21降为21.69，总氮含量从8.65 g/kg升高为17.29 g/kg，微生物群落多样性和丰度变化与堆肥不同阶段存在紧密联系，Limnochordaceae、双孢菌属、芽孢杆菌属、直丝菌属、热多孢菌属的相对丰度与硝态氮和总氮含量呈正相关，与pH、含水率和有机质含量呈负相关。

脂肪组织按照其功能可分为储存能量的白色脂肪组织和调节体温、平衡能量的褐色脂肪组织。在体内，脂肪组织主要以皮下脂肪、内脏脂肪、肌间脂肪和肌内脂肪4种形式分布。肌内脂肪又称大理石花纹，是在肌肉内部及肌纤维间沉积的脂肪，直接影响肉质的多汁性、嫩度和风味，是衡量肉品等级的重要指标。肌内脂肪含量取决于脂肪细胞的大小和数量，其发育和沉积受多种机制的调控。在这个复杂的生物过程中，多种转录因子和酶的协同作用同样至关重要。提高肌内脂肪含量能显著改善畜禽肉的口感和风味，提升肉的整体品质，是畜禽育种的重要目标之一。因此，对肌内脂肪发育和沉积相关机制和信号通路的深入了解显得尤为重要。作者通过整合相关文献，介绍了肌内脂肪沉积过程，重点讨论了与肌内脂肪沉积相关的6个关键基因的结构特点及相关机制，并对目前肌内脂肪沉积相关研究存在的不足提供建议，旨在为育种工作者提供科学参考。

【目的】研究性别及不同屠宰体重阶段对广益黑猪胴体性能和肉品质的影响，以期了解其种质特性，为广益黑猪的科学饲喂、肉品质调控及合理利用等提供理论依据。【方法】本研究对30头广益黑猪(公母各半)胴体性能、肉品质和营养成分进行测定，将数据按照不同性别和屠宰体重阶段(80～90、91～100、101～110 kg)分别进行统计分析。【结果】80～90 kg广益黑猪的胃、心脏和肝脏重量均显著低于101～110 kg猪(P＜0.05)。广益黑猪屠宰率和瘦肉率分别为74.02%和56.93%；与91～100和101～110 kg猪相比，80～90 kg猪胴体长最小(P＜0.01)。广益黑猪肌肉肉色评分(45 min)和肌内脂肪含量分别为3.77和4.52%；与91～100和101～110 kg猪相比，80～90 kg猪肌肉pH_{24 h}(P＜0.01)和肌苷酸含量(P＜0.05)最低。广益黑猪肌肉中氨基酸总量、呈味氨基酸含量和必需氨基酸含量分别为20.26%、15.48%和9.04%，其中80～90和91～100 kg阶段存在显著差异(P＜0.05)。广益黑猪肌肉中钙、铜、镁、钠和锌含量分别为35.25、0.36、275.47、433.43和14.82 mg/kg，钾含量为0.41%，其中80～90 kg猪肌肉中钠含量显著高于91～100 kg猪(P＜0.05)，镁含量显著低于101～110 kg猪(P＜0.05)。广益黑猪肌肉中单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸、总不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸含量分别为45.25%、9.25%、54.50%和45.25%。性别对广益黑猪胴体性能和肉品质均无显著影响(P＞0.05)。广益黑猪平均背膘厚与眼肌面积、腿臀比例和脂率均存在极显著正相关(P＜0.01)，与瘦肉率存在极显著负相关(P＜0.01)；大理石纹评分与肌内脂肪含量存在极显著正相关(P＜0.01)。【结论】广益黑猪肉品佳，肌肉氨基酸、脂肪酸和矿物质含量均很丰富，必需氨基酸和风味氨基酸、饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸构成比例理想；其胴体性能和肉质性状与性别无关，与屠宰体重有关，91～100 kg为其最适宜上市屠宰体重。

植物多糖是从多种草本植物中萃取得到的一类天然生物活性成分，广泛存在于植物细胞壁、黏液层内，因其独特的理化性质和多样的生物学功能备受关注，具有安全、高效、低残留、无耐药性等优点，在反刍动物生产中展现出巨大的应用潜力。文章分析了植物多糖的抗病毒、免疫调节、抗氧化、肠道菌群调节和抗肿瘤抗癌功能，回顾了植物多糖在反刍动物生产中的应用进展，探讨其在促生长、改善机体免疫、改善胃肠道健康和保障动物产品质量安全等方面的实践效果与作用机制。在生长性能方面，饲料中添加植物多糖能够提高反刍动物的日增重、采食量和饲料转化率，提高经济效益。在提高免疫性能方面，植物多糖的使用，促进免疫器官发育，刺激免疫球蛋白和抗炎细胞因子分泌，提升反刍动物免疫力。在改善胃肠道健康方面，植物多糖能够通过增加胃肠道屏障完整性、调节胃肠道菌群组成和提高胃肠道细胞免疫活性，降低胃肠道疾病的发生。在生产性能方面，添加植物多糖能够改善肉产品的理化特性，增强营养成分含量，提升反刍动物肉品质。未来需要进一步研究植物多糖的生物学功能和作用机制，为新型饲料添加剂的开发和利用提供有益借鉴，并为植物多糖在反刍动物生产中的进一步研究和应用奠定基础。

【目的】本试验旨在研究饲粮中添加不同水平黑果枸杞提取物对八眉三元猪(长白×约克夏×八眉)生长性能、屠宰性能、抗氧化功能及肉品质的影响。【方法】试验选取(50±2)日龄、体重为(7.82±0.59)kg的健康公猪48头，随机分为4组，分别为对照组(CON组)和3个试验组(LE、ME、HE)，每组3个重复，每个重复4头猪。CON组饲喂基础饲粮，试验组LE、ME、HE分别在基础饲粮中添加5、10和15 g/kg黑果枸杞提取物。试验期共42 d，其中预饲期7 d，正试期35 d。试验结束后，测定猪生长性能；每个重复随机选取2头、每组共选取6头猪测定屠宰性能和背最长肌抗氧化指标及其肉品质指标、常规营养成分、氨基酸及脂肪酸含量。【结果】①与CON组相比，3个试验组猪终末体重、平均日增重均显著升高，料重比显著降低；LE和HE组猪平均日采食量显著升高，ME和HE组猪胴体重显著提高(P＜0.05)。3个试验组间比较，ME组猪终末体重显著高于LE组，LE组料重比显著低于HE组(P＜0.05)。②与CON组相比，LE、ME、HE组猪背最长肌丙二醛含量显著降低(P＜0.05)，过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活性及总抗氧化能力均显著升高(P＜0.05)，谷胱甘肽过氧化酶活性仅在ME、HE组显著升高(P＜0.05)。在3个试验组中，ME组猪背最长肌丙二醛含量最低，过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶活性及总抗氧化能力最高，且显著高于其他两个试验组(P＜0.05)。③与CON组相比，LE、ME组猪背最长肌pH_{45 min}显著升高(P＜0.05)，且3个试验组间无显著差异(P＞0.05)；ME组背最长肌剪切力显著低于CON和LE组(P＜0.05)。④CON及3个试验组猪背最长肌中干物质、粗蛋白质、粗脂肪以及灰分的含量均无显著差异(P＞0.05)；与CON组相比，3个试验组猪背最长肌中多种氨基酸含量均显著提高，尤其是必需氨基酸和呈味氨基酸(P＜0.05)，同时月桂酸甲酯、反油酸甲酯等饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸含量显著提高(P＜0.05)，其中ME组猪背最长肌中精氨酸、苏氨酸，谷氨酰胺、羟脯氨酸、酪氨酸、非必需氨基酸、总氨基酸以及多不饱和脂肪酸含量显著高于LE和HE组，甘氨酸、呈味氨基酸以及花生酸甲酯、二十碳三烯酸甲酯、单不饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸含量显著高于LE组，苯丙氨酸、丝氨酸以及单不饱和脂肪酸含量显著高于HE组(P＜0.05)。【结论】在八眉三元猪饲粮中添加不同浓度的黑果枸杞提取物能改善其生长性能、屠宰性能和肉品质，同时增强了猪肉的抗氧化能力，且当黑果枸杞提取物添加量为10 g/kg时，其肌肉氨基酸与脂肪酸比例最佳，肉品质最好。

近年来，随着集约化畜牧业的发展，畜禽养殖过程中造成的臭气污染已成为制约畜牧业绿色可持续发展的瓶颈问题。粪臭素是体内色氨酸经后肠厌氧微生物作用产生的吲哚类物质，其嗅觉阈值浓度低，具有强烈的粪臭味，是畜禽粪便排放的主要恶臭化合物之一。研究表明，粪臭素的产生具有时间-空间效应，与肠道微生物组成密切相关。粪臭素不仅对畜禽健康产生负面影响，还影响肉品品质，且对人类健康存在潜在威胁。在粪臭素的体外降解方面，非生物降解法如光催化降解、臭氧氧化和Fenton反应展现了一定的降解效率，但存在局限性。相比之下，微生物降解法因其环境友好性和高效性而显示出更大的应用前景。目前已筛选出多种具有粪臭素降解能力的菌株，包括假单胞菌、红球菌和不动杆菌等，它们通过不同的生化途径将粪臭素转化为较低毒性或无毒性的物质。然而，粪臭素的微生物降解机制目前仍不完全清楚，且在实际应用中仍面临挑战。未来的研究需聚焦于筛选更高效的粪臭素降解菌株、解析降解微生物的作用机制，以及深入研究肠道中产生粪臭素的微生物种类及其影响因素，以推动畜禽养殖业的绿色可持续发展。

构树(茎叶)中含有丰富的蛋白质，可以作为植物性蛋白原料替代畜禽饲粮中的部分豆粕，目前已经用于多种动物饲料，具有较高的营养价值。2018年，构树(茎叶)被纳入《饲料原料目录》，其饲用价值得到广泛关注；同时，构树也是一种传统的中草药，其果实(楮实子)、叶、根皮等多个部位均可入药。构树具有提高畜禽免疫、改善脂肪代谢、防治鸡球虫感染等药用功效，构树的药用价值正逐步得到研究人员的关注。以往对构树活性成分的研究多集中在黄酮类、生物碱、木脂素等，而对多糖活性的研究较少。构树多糖具有抗氧化、抗微生物、保肝、提高免疫等生物活性，在当前饲料禁抗和养殖减抗的政策背景下，构树多糖或许能够开发为一种新型的功能性饲料，在畜牧领域展现出广阔的应用前景。作者系统综述了构树多糖的提取工艺、结构表征和生物活性，并分析和总结了当前构树多糖的研究热点和不足，以期为构树多糖的进一步开发和在畜禽生产中的应用提供理论参考。

【目的】本试验旨在研究405 nm光谱协同二氧化钛(TiO₂)的发光二极管(LED)灯源应用于鸡舍对蛋鸡生产性能、健康及舍内环境微生物的影响。【方法】将480只产蛋率相近的39周龄京红1号蛋鸡随机分为2组，每组6个重复，每个重复40只蛋鸡，对照组使用常规LED灯，试验组使用405 nm光谱协同TiO₂的LED灯源，预试期1周，正式试验期12周。每日记录蛋鸡生产性能数据，试验期第72天时，分别检测蛋品质，并测定蛋鸡强直静止时间(tonic immobility，TI)、血液抗氧化指标、免疫指标以及H9、H7、H5亚型禽流感病毒、鸡新城疫病毒(NDV)、鸡产蛋下降综合征病毒(EDSV)的抗体滴度，同时检测舍内环境微生物含量。【结果】①试验组入舍母鸡产蛋数、饲养日产蛋数及产蛋率显著高于对照组(P＜0.05)，蛋品质在两组间无显著差异(P＞0.05)。②试验组蛋鸡的强直静止时间、血清抗氧化及免疫指标较对照组无显著差异(P＞0.05)，试验组蛋鸡H5亚型禽流感病毒抗体滴度显著高于对照组(P＜0.05)，H7、H9亚型禽流感病毒、NDV与EDSV抗体滴度则无显著差异(P＞0.05)。③试验组舍内空气微生物及物体表面微生物较对照组分别降低41.43%与34.49%，差异均显著(P＜0.05)。舍内化学制剂喷雾消毒前后，各时间点试验组舍内空气中微生物总数均显著低于对照组(P＜0.05)；且消毒12 h后试验组喷雾消毒的杀灭率较对照组增加8.41百分点，消毒后48 h舍内空气中微生物的恢复率较对照组降低5.34百分点。【结论】405 nm光谱协同TiO₂的LED灯源应用于蛋鸡舍，在不影响蛋鸡群健康的情况下，同时能够提高蛋鸡的生产性能，应用405 nm光谱协同TiO₂的LED灯源较常规LED灯能降低舍内41.43%的空气微生物与34.49%的物体表面微生物，增加常规喷雾消毒的效果并抑制微生物增长。

【目的】探究饲粮中添加N-氨基甲酰谷氨酸(N-carbamylglutamate,NCG)对母羊胎盘形态、羔羊初生窝重及体尺、血浆抗氧化指标以及血液和胎盘中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的影响，以了解NCG在绒山羊胎盘发育中的作用。【方法】试验选择60只8月龄、体重(45.0±2.3) kg、体况良好的辽宁绒山羊母羊，经同期发情后人工授精，利用B超检查技术记录同期受孕的母羊，随机分为对照组(CON，全混合饲粮)和 NCG组(含0.09% NCG的全混合饲粮)。试验预试期1周，正试期22周。试验第18周结束时对怀孕母羊进行颈静脉采血，通过试剂盒测定血浆抗氧化指标；妊娠期结束后采集胎盘，统计胎盘重量、胎盘绒毛叶的重量和数量，计算绒毛叶的均度与密度，记录羔羊的初生窝重和初生体重，测量羔羊的体高、体长和胸围。【结果】与CON组相比，NCG组绒山羊母羊胎盘的重量和羔羊初生窝重、初生体重和胸围均显著升高(P＜0.05)；NCG组母羊血浆中一氧化氮(NO)、VEGF和血管内皮生长因子A(VEGFA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均显著升高(P＜0.05)。NCG组母羊胎盘中的VEGF和VEGFA含量均显著低于CON组母羊(P＜0.05)。【结论】NCG可通过NO路径影响妊娠期绒山羊机体抗氧化能力、提高机体VEGF水平，进而促进胎盘和胎儿发育。研究结果为NCG在绒山羊母羊饲粮中的应用提供理论依据。

【目的】探索超数排卵后获取不同胚胎数量的牛子宫冲胚液外泌体miRNA的表达差异，以明确子宫冲胚液外泌体miRNA在牛胚胎发育和着床中的调控机制。【方法】选取15头3～6岁、480～600 kg夏南牛进行超数排卵、同期发情和人工授精。在人工授精后第7天，冲洗牛子宫以获取囊胚，根据国际胚胎生产的平均水平5.5枚作为标准，选取获取的囊胚数量多的3头夏南牛(试验组)和获取的囊胚数量少的2头夏南牛(对照组)，收集子宫冲胚液进行外泌体分离与鉴定，并提取外泌体miRNA进行测序分析；对差异表达miRNA进行靶基因预测，并对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。随机选取4个miRNAs(bta-miR-2888、bta-miR-11987、bta-miR-2484、bta-miR-27a-3p)进行实时荧光定量PCR验证。【结果】5个样本的囊泡粒径为30～150 nm，符合外泌体的特征。共筛选到14个差异表达miRNAs，其中9个miRNAs表达上调，5个miRNAs表达下调。差异表达miRNAs共预测到8 703个靶基因。GO功能富集分析表明，靶基因主要富集在与发育过程调节、多细胞生物发育调控、调节运输、发育过程的正向调节、细胞连接等功能有关的条目。KEGG通路富集分析表明，显著富集的MAPK和Hedgehog信号通路等与胚胎发育和着床相关，提示子宫冲胚液外泌体可能参与调控胚胎发育和着床。4个miRNAs的实时荧光定量PCR结果与转录组测序结果相一致。【结论】本研究从夏南牛子宫冲胚液中分离得到了外泌体，丰富了外泌体研究的物种，为夏南牛后续外泌体研究提供了材料。共筛选出14个差异表达miRNAs，有8个miRNAs与胚胎发育和着床相关。子宫内外泌体中miRNA的变化可能影响牛胚胎发育和着床。

【目的】探究光周期调控对不同颜色绒山羊产绒相关激素的影响，旨在优化不同颜色类型绒山羊的养殖模式，提升羊绒的生产效率和质量。【方法】选取2岁不同颜色类型(红山羊(n=24)、白山羊(n=30)、黑山羊(n=10))绒山羊成年母羊共64只，随机分为2组：试验组(短光照，09:00-17:00)和对照组(自然光照)。在次级毛囊的不同生长期(休止期、兴盛前期、兴盛期、退行期)采集血液样本，通过ELISA试剂盒测定绒山羊血清中三碘甲状腺原氨酸(T₃)、甲状腺素(T₄)、催乳素(PRL)、雌二醇(E₂)、生长激素(GH)、睾酮(T)和褪黑激素(MELT)浓度，利用SAS 9.0软件对试验组和对照组绒山羊不同生长期的激素浓度进行显著性检验，并采用CORR方法探讨短光照条件下两组绒山羊不同激素间的相关性。【结果】①在自然光照条件下，不同颜色绒山羊血清中激素浓度存在差异，如休止期红山羊血清中E₂浓度极显著高于白山羊(P＜0.01)，退行期红山羊血清中T浓度极显著高于白山羊和黑山羊(P＜0.01)等。②在短光照条件下，与对照组相比，兴盛前期和兴盛期红山羊血清中E₂浓度极显著或显著降低(P＜0.01；P＜0.05)；兴盛期T浓度显著升高(P＜0.05)；兴盛前期T₃浓度显著升高(P＜0.05)。白山羊兴盛前期、兴盛期和退行期血清中E₂浓度均显著降低(P＜0.05)；兴盛前期和兴盛期T浓度显著升高(P＜0.05)；兴盛前期和退行期T₄浓度显著或极显著升高(P＜0.05；P＜0.01)；T₃和GH浓度在兴盛期显著或极显著降低(P＜0.05；P＜0.01)，在退行期极显著升高(P＜0.01)。黑山羊兴盛前期和退行期血清中E₂浓度均极显著降低(P＜0.01)；兴盛前期、兴盛期和退行期T浓度显著升高(P＜0.05)。兴盛前期和兴盛期3种山羊血清中MELT浓度显著或极显著升高(P＜0.05；P＜0.01)，PRL浓度显著或极显著降低(P＜0.05；P＜0.01)。③相关性分析显示，在短光照条件下，红山羊血清中E₂与PRL、T与GH浓度均呈显著负相关(P＜0.05)；白山羊血清中T与E₂、MELT浓度呈显著正相关(P＜0.05)，PRL与T、T₄、GH、MELT浓度呈显著负相关(P＜0.05)；黑山羊血清中T与E₂、T₄浓度呈显著正相关(P＜0.05)，T₄与GH浓度呈显著负相关(P＜0.05)。【结论】不同颜色绒山羊对光周期变化的响应存在差异。在短光照条件下，红山羊以调节T₃和GH浓度为主；白山羊表现为T₄、GH和MELT浓度升高及T₃浓度降低；黑山羊集中于E₂、T和MELT浓度的变化。激素间的负相关关系提示存在颉颃作用。本研究结果为利用光周期调节优化绒山羊养殖提供科学依据。

【目的】成骨分化特异转录因子2b(Runx2b)基因在调节鱼类骨骼发育方面具有重要作用。本研究旨在探究淇河鲫(Qihe crucian carp,Carassius auratus)Runx2b基因的特征和表达情况。【方法】参考银鲫Runx2b基因序列(GeneBank登录号：NC_068415.1)结合本地基因组数据进行BLAST比对设计引物，通过PCR分段克隆Runx2b基因，并分别通过DNAStar和Mega 11.0软件进行序列相似性比对及系统发育树构建。通过ORF finder和ProtParam等在线网站进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR技术检测Runx2b基因在淇河鲫不同发育时期和不同组织中的表达水平。【结果】测序拼接比对后得到Runx2b-A和Runx2b-B基因，其CDS区均为1 392 bp，编码463个氨基酸。两基因的CDS序列相似性为95.33%，Runx2b-A和Runx2b-B氨基酸序列均与银鲫对应的氨基酸序列相似性最高，分别为98.0%和99.1%。系统进化树分析显示，淇河鲫与银鲫亲缘关系最近。生物信息学分析表明，两个Runx2b蛋白分子式分别为C₂₂₀₆H₃₄₀₉N₆₃₇O₆₈₅S₁₈和C₂₁₉₆H₃₃₉₅N₆₃₃O₆₉₅S₁₆，均属于亲水性不稳定蛋白，且蛋白质结构主要以无规则卷曲为主，两个蛋白质序列中都存在Runx家族蛋白特征性的Runt-dom和RunxⅠ保守结构域。实时荧光定量PCR检测结果表明，Runx2b-A和Runx2b-B基因在淇河鲫整个肌间刺发育阶段整体表达趋势较为一致，肌间刺发育前期(1～5 dph)表达量较高，在肌间刺开始发育后(5～13 dph)表达量逐渐降低，在后期表达量出现上升趋势，尤其在肌间刺发育晚期(25～45 dph)仍有较高的表达量；Runx2b-A和Runx2b-B基因在淇河鲫脑、肝脏、背部肌肉、尾部肌肉等9个组织中均有表达，二者均在脑和肝脏中表达量较高，且显著高于其他组织(P＜0.05)，二者在尾部肌肉中的相对表达量均显著高于背部(P＜0.05)，但在不同组织中呈现差异表达，具有不同的表达水平。【结论】本研究成功克隆获得两条淇河鲫同源基因Runx2b-A和Runx2b-B的CDS序列，二者氨基酸序列与鲤科鱼类的相似较高，蛋白质序列中存在Runx家族蛋白特征性的Runt-dom和RunxⅠ保守结构域。淇河鲫两个Runx2b基因表达具有广泛的组织分布，但在不同组织中呈现差异表达，具有不同的表达模式；在不同发育时期整体表达趋势较为一致，在肌间刺发育晚期仍有较高的表达量，可为后续深入研究肌间刺发育机制和创制无肌间刺淇河鲫奠定基础。

作为一种在超低温环境下长期保存卵母细胞的技术，卵母细胞玻璃化冷冻保存在优良种质资源保存方面具有重要意义。然而，玻璃化冷冻保存技术面临的核心挑战在于细胞凋亡信号的激活致使凋亡细胞比例升高，影响细胞功能、活力和发育潜能。细胞凋亡是指一种程序化的细胞死亡过程，通常被称为“细胞自杀”，这一机制在生物体内发挥着关键作用，有助于维持细胞的平衡和组织的稳态。然而，异常的细胞凋亡会导致细胞死亡等不利影响。因此，有效抑制或减缓细胞凋亡过程，成为提高冷冻卵母细胞存活率和发育潜能的关键所在。应用凋亡抑制剂和抗氧化剂可以减少玻璃化卵母细胞凋亡，提高其存活率和发育能力，从而改善解冻后的细胞质量。作者简述了玻璃化冷冻保存技术对卵母细胞的影响，以及冷冻引起的细胞内源性和外源性凋亡机制，并分析了相关凋亡抑制剂与抗氧化剂的应用，未来可深入探究新型抑制剂与抗氧化剂在玻璃化冷冻技术中的作用机理，以及探究细胞凋亡与坏死性凋亡等细胞死亡途径之间的交互影响，为卵母细胞玻璃化冷冻保存技术提供新的思路和方法。

【目的】评价牡荆提取物(Vitex negundo L.var. cannabifolia (Sieb.et Zucc.) Hand.-Mazz.extract,VNE)对产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP)诱导坏死性肠炎(necrotic enteritis,NE)肉鸡生长性能、血清免疫球蛋白含量、免疫器官指数、肠道组织结构及炎性因子的影响。【方法】选取150只7日龄雄性岭南黄羽肉鸡，随机分为5组：空白对照组(CON)、感染组(INF)及低(L-VNE)、中(M-VNE)、高(H-VNE)剂量牡荆提取物组，每组3个重复，每个重复10只鸡。CON组肉鸡饲喂基础饲粮，INF、L-VNE、M-VNE、H-VNE组肉鸡饲喂高鱼粉饲粮。7―13日龄，L-VNE、M-VNE、H-VNE组肉鸡连续7 d分别灌胃4、8、12 g/(kg·d)牡荆提取物；10―13日龄，INF、L-VNE、M-VNE、H-VNE组肉鸡连续4 d灌胃5×10⁹ CFU/d产气荚膜梭菌。分别于14、21日龄对试验肉鸡称重，计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)；称重后，每个重复随机取3只肉鸡采血，检测血清中免疫球蛋白(IgA、IgG)含量；采血后处死，取脾脏、胸腺和法氏囊称重，并计算免疫器官指数；利用肠道切片检查十二指肠、空肠和回肠的病理及形态变化，取小肠黏膜，分析肉鸡肠道中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、IL-17A、IL-1β的表达量。【结果】①14日龄时，与INF组相比，L-VNE、H-VNE组肉鸡的ADFI和ADG极显著或显著升高(P＜0.01；P＜0.05)；H-VNE组肉鸡血清中IgG含量极显著升高(P＜0.01)。②21日龄时，M-VNE、H-VNE组肉鸡脾脏指数极显著高于INF组(P＜0.01)。③14日龄时，与INF组相比，M-VNE、H-VNE组肉鸡十二指肠绒毛高度(VH)极显著升高(P＜0.01)；L-VNE、M-VNE、H-VNE组肉鸡空肠和回肠VH、十二指肠绒毛高度与隐窝深度比(VH/CD)极显著或显著升高(P＜0.01；P＜0.05)，十二指肠隐窝深度极显著降低(P＜0.01)；M-VNE、H-VNE组肉鸡空肠VH/CD显著或极显著升高(P＜0.05；P＜0.01)；L-VNE、H-VNE组肉鸡回肠VH/CD极显著升高(P＜0.01)。21日龄时，与INF组相比，L-VNE、M-VNE、H-VNE组肉鸡十二指肠、空肠和回肠VH极显著或显著升高(P＜0.01；P＜0.05)。④14日龄时，与CON组相比，L-VNE、M-VNE、H-VNE组肉鸡肠道中IL-8基因表达水平极显著降低(P＜0.01)，M-VNE组肉鸡肠道中IL-1β基因表达水平显著降低(P＜0.05)。【结论】岭南黄羽肉鸡感染产气荚膜梭菌后，在饲粮中添加牡荆提取物，可以提高其生长性能，提高血清中免疫球蛋白浓度，促进脾脏发育，减轻肠道病变和炎症反应，说明牡荆提取物对产气荚膜梭菌诱导的肉鸡坏死性肠炎具有预防作用。本试验条件下，连续7 d灌胃肉鸡8 g/(kg·d)牡荆提取物可以得到较好的预防效果。

【目的】制备抗猪轮状病毒(Porcine rotavirus，PoRV)VP6蛋白单克隆抗体，为PoRV检测方法的开发提供参考。【方法】以痘苗病毒启动子P28为VP6的启动子，以G3型PoRV核酸为模板扩增VP6基因，通过无缝克隆方法将VP6基因片段克隆至pSWE178质粒，构建重组质粒pSWE178-P28-VP6；利用同源重组和蚀斑纯化技术获得表达VP6蛋白的重组猪痘病毒rSWE178-P28-VP6，用SDS-PAGE鉴定VP6蛋白表达形式。以G9型PoRV为免疫原免疫BALB/c小鼠，取免疫小鼠脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合，以重组病毒表达的VP6蛋白为检测抗原，通过间接ELISA筛选分泌抗VP6单克隆抗体的杂交瘤细胞。通过间接免疫荧光试验(IFA)检测单克隆抗体与G3、G4、G5、G9型PoRV的反应原性，选择其中1株单克隆抗体对人工感染PoRV的猪肠道组织进行免疫组化(IHC)检测。【结果】在构建了表达PoRV VP6蛋白的重组质粒pSWE178-P28-VP6基础上，成功构建了表达PoRV VP6蛋白的重组猪痘病毒，表达的蛋白分子质量大小45 ku，为可溶性表达。采用杂交瘤技术制备单克隆抗体，筛选获得29株分泌抗VP6单克隆抗体的杂交瘤细胞株。IFA结果显示，26株单克隆抗体均能与G3、G4、G5、G9型PoRV反应，但荧光亮度存在差异。IHC检测结果显示，单克隆抗体能与感染PoRV的临床样品发生特异性免疫反应。【结论】本研究利用真核表达系统成功表达了PoRV VP6蛋白，采用杂交瘤技术筛选获得29株抗VP6单抗隆抗体，其中26株均能与G3、G4、G5、G9型PoRV反应。试验结果为PoRV免疫学检测方法的建立奠定了基础。

【目的】目前国内外西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)的核酸检测中缺乏安全、稳定的RNA标准参考样品，对检测结果的精确度和可信度造成一定的影响。本研究旨在研制一种安全稳定的WNV核酸检测质控品，为西尼罗热监测提供技术支持。【方法】将WNV核酸检测靶基因、MS2噬菌体外壳蛋白CP及成熟酶蛋白A基因序列插入到表达载体得到重组质粒pET-CPA-WN，经转化、表达、纯化后，制备WNV装甲RNA质控品，并对其进行实时荧光定量PCR和数字PCR定量、均匀性及稳定性分析，评估其作为标准物质的可能性。【结果】PCR检测、双酶切和基因测序结果均显示已成功构建重组质粒pET-CPA-WN，表达纯化后得到了大小均一、直径为23～28 nm的病毒样颗粒。核酸酶消化后实时荧光定量PCR检测结果显示，颗粒溶液中几乎无核酸残余且形成了包封靶基因的装甲RNA；其定植结果为8.80×10⁹拷贝/mL。稳定性试验结果表明，该装甲RNA可在37 ℃稳定保持20 d，随机抽取10个样本进行均匀性检验证明其均匀性良好。【结论】本研究基于MS2噬菌体制备的装甲RNA拷贝数高，均匀性和稳定性良好，可为WNV分子检测提供安全、稳定的参考样品。

【目的】补体受体Ⅱ(complement receptor 2，CR2)与其生理学配体C3d相互作用能桥连先天性免疫反应和适应性免疫反应，放大下游信号的转导现象，显著降低抗原刺激B细胞活化的阈值，可将B细胞对抗原的敏感性提高1 000～10 000倍，对于激活B细胞及启动免疫反应至关重要。本研究旨在制备兔源鸡CR2(chCR2)多克隆抗体，为检测chCR2蛋白的表达情况提供工具，也为深入探究chCR2蛋白的功能和作用奠定基础。【方法】将pTT5-His-chCR2-ΔTM重组质粒转染至HEK293F细胞中，在真核表达系统HEK293F细胞中表达重组chCR2蛋白(His-chCR2-ΔTM)，经Western blotting对蛋白表达进行分析，利用镍柱亲和层析纯化系统纯化chCR2蛋白并进行SDS-PAGE鉴定。用纯化出的chCR2蛋白免疫新西兰大白兔制备抗chCR2血清多克隆抗体；利用ELISA方法检测chCR2兔血清的效价；利用Western blotting和间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay，IFA)检测chCR2血清多克隆抗体的特异性和灵敏度。【结果】重组His-chCR2-ΔTM蛋白可在HEK293F细胞系表达，利用镍柱亲和层析法纯化得到的重组His-chCR2-ΔTM 蛋白浓度为4.439 mg/mL，分子质量为45 ku。ELISA检测结果显示，chCR2血清多克隆抗体效价最高为1∶32 768 000；Western blotting和IFA结果表明，chCR2蛋白可被chCR2血清多抗体特异性识别；Western blotting检测时，chCR2血清多克隆抗体的稀释度为1∶5 000时特异性最好；IFA检测时，chCR2血清多克隆抗体最大稀释度为1∶1 600。【结论】本研究成功制备了chCR2蛋白兔多克隆抗体，该抗体效价较高且特异性较好，为后续检测chCR2蛋白及研究chCR2蛋白的功能提供了试验基础。

【目的】确定广东某规模化猪场发病猪是否为猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2，PCV2)感染，并评估病毒的遗传特性及其在猪群中的流行情况，为疫病的防控提供科学数据支持。【方法】采用实时荧光定量PCR和ELISA方法对猪场病猪的肾脏、淋巴结、脾脏等内脏组织及血清样本进行检测分析，并通过PCR扩增PCV2阳性样本的ORF2基因。利用DNAStar软件包中的MegAlign模块对所得ORF2基因序列与GenBank数据库中23株PCV2参考毒株进行相似性比对。运用Mega 7.0软件构建基于ORF2基因序列的遗传进化树，以明确鉴定毒株与参考毒株之间的遗传关系。【结果】流行病学调查、临床症状及病理解剖结果显示，该猪场病猪符合PCV2感染的特征。实时荧光定量PCR检测发现3份样本的Ct值分别为14.42、15.13和16.08，表明病毒载量较高，且PCV2检测结果为阳性。ELISA检测结果显示，不同日龄段猪群中Cap蛋白抗体阳性率介于60%～100%之间，而Rep蛋白抗体阳性率则在0～100%之间，特别是150日龄猪群的2种蛋白抗体阳性率均达到100%，表明PCV2感染强度较高。ORF2基因测序获得了3条序列，分别命名为LZC-2305-1、LZC-2305-2和LZC-2305-3。相似性分析结果显示，这3条序列间具有99.9%～100%的相似性，且与GenBank中的23株PCV2参考毒株序列的相似性为82.3%～99.7%，其中与CZ246序列相似性最高，为99.6%～99.7%。遗传进化树分析进一步证实，本研究获得的3条序列与CZ246序列具有最近的亲缘关系，归属于PCV2的2d分支。【结论】本研究确诊该猪场猪群发生了PCV2d分支的感染。本研究结果不仅为该猪场的PCV2防控提供了科学依据，也为其他规模化猪场的疫病监测与防控提供了参考。

【目的】了解山东地区牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus，LSDV)流行株的病原学特性。【方法】采集山东某牛场疑似结节性皮肤病(lumpy skin disease，LSD)牛的皮肤结节组织，用原代羔羊睾丸细胞(primary lamb testicular cells，PLT)进行病毒分离；通过PCR扩增LSDV G蛋白偶联受体(G-protein-coupled chemokine receptor,GPCR)基因并测序，利用抗LSDV特异性血清进行间接免疫荧光试验(IFA)鉴定病毒特异性；对分离毒株进行基因组测序并分析其遗传变异情况；在不同细胞中对分离毒株连续传代并测定病毒滴度，绘制生长曲线，进一步测定其在不同细胞中的增殖能力；通过抗体中和试验测定分离毒株对山羊痘疫苗抗体的中和指数。【结果】病牛皮肤结节组织样品经PLT细胞培养，盲传3代后出现细胞变圆、聚集、脱落为特征的细胞病变效应(cytopathic effect，CPE)。PCR扩增获得大小约1 010 bp的分离毒株GPCR基因特异性条带，且该基因序列与国内外LSDV毒株相似性为99.3%～100%。分离毒株可与抗LSDV特异性血清结合，免疫荧光染色后出现特异性绿色荧光斑。基因组测序比对结果显示，分离毒株与2019—2022年流行的7株国内以及2022年泰国毒株遗传距离较近。分离毒株传代20～30代时，病毒滴度可稳定在10^-6.08至10^-6.17 TCID₅₀/mL。生长曲线显示，该分离毒株滴度在96 h达到峰值(10^-6.16 TCID₅₀/mL)，144 h下降至10^-5.60 TCID₅₀/mL。分离毒株在MBDK和BHK-21细胞系上均能连续增殖3代，其病毒滴度可分别达10^-4.85和10^-4.63 TCID₅₀/mL。山羊痘疫苗抗体对该毒株的中和指数(276)显著低于山羊痘疫苗毒株(1 833)(P＜0.05)。【结论】从病牛皮肤结节组织中成功分离到1株LSDV，该毒株与国内除西藏地区外的其他地区的毒株遗传距离较近，在MBDK和BHK-21细胞中可稳定传代培养，且山羊痘疫苗抗体对该毒株的中和能力较差。

【目的】探究金黄色葡萄球菌性奶牛乳房炎的噬菌体生物防治方法。【方法】利用双层琼脂平板培养法从奶牛粪便和废水中分离鉴定奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌Sau2703特异性噬菌体，对其效价、超微形态结构和最佳感染复数进行研究，绘制噬菌体一步生长曲线，并对其热稳定性、pH稳定性、紫外线敏感性及裂菌谱进行研究。【结果】成功分离1株奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌Sau2703特异性噬菌体，命名为PhageSau2703。噬菌体PhageSau2703效价高达4.62×10¹⁵ PFU/mL。透射电子显微镜下噬菌体PhageSau2703具有正多面体头部(直径71 nm)和不可收缩尾巴(长106 nm，直径11 nm)，最佳感染复数为0.001。噬菌体PhageSau2703热稳定性较好，90 ℃处理90 min仍具有较低的活性；在pH 3.0～8.0范围内活性稳定，对酸性环境的耐受能力高于碱性环境；紫外线对噬菌体PhageSau2703活性影响较小。噬菌体PhageSau2703潜伏期为20 min，爆发期为50 min，爆发量为112 PFU/cell。噬菌体PhageSau2703对奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌的裂解率为48.5%，裂菌谱较广。【结论】噬菌体PhageSau2703效价高、裂菌谱广，对温度、pH和紫外线耐受能力强，具有研发为金黄色葡萄球菌噬菌体生物制剂用于奶牛乳房炎防治的潜力。

多年来动物寄生虫病主要依靠传统镜检与PCR技术结合的方式进行诊断,在临床中确实起到了明显的防治效果，也控制了一些寄生虫病的流行。但寄生虫病多是慢性消耗性疾病，早期诊断尤为重要，而传统方法的灵敏度、简便性不能满足彻底控制寄生虫病的需求。因此，亟需灵敏度更高、便捷性更强的检测方法。近年来，CRISPR/Cas系统不断发展，已发现了多种Cas蛋白的功能，并广泛应用于寄生虫病原的核酸检测。研究人员针对第2类CRISPR/Cas系统中的Cas13与Cas12蛋白与重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification，RPA)或PCR联用，筛选特异性靶标序列并设计crRNA，之后与Cas12、Cas13蛋白和荧光报告基团组成CRISPR/Cas核酸检测系统，可用于多种寄生虫病的诊断，具有快速、精准、便捷和廉价等特点，适用于现场检测，具有巨大的市场应用潜力。笔者就CRISPR/Cas系统的作用机制和分类，以及近年来其在寄生虫病核酸检测领域的研究进展进行综述，以期为寄生虫病的早期诊断提供参考依据。

【目的】优化雪白睡莲花粗多糖的提取工艺，并探究其在金黄色葡萄球菌感染小鼠乳腺炎治疗中的应用效果。【方法】以雪白睡莲花为试验材料，以雪白睡莲花粗多糖的提取率为评价指标，采用单因素结合响应面法优化其提取工艺。将60只SPF级健康昆明小鼠随机分为4组：空白对照组(BC)、模型对照组(MC)、阳性对照组(PC)、雪白睡莲花粗多糖组(CPNA)，每组15只，除空白对照组外其余各组小鼠注射50 μL 1×10⁴ CFU/mL金黄色葡萄球菌构建小鼠乳腺炎模型,造模成功后各组小鼠分别灌胃生理盐水、0.13 g/kg环丙沙星、0.5 g/kg雪白睡莲花粗多糖,每天2次,连续给药7 d,空白对照组小鼠不做处理。分别在给药后3、5、7 d测定各试验组小鼠乳腺组织中金黄色葡萄球菌菌落数量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量，同时观察小鼠乳腺病理组织学变化，从而评估其治疗效果。【结果】在料液比为1∶14，超声功率为70%，提取温度为57 ℃，提取时间为30 min，提取次数为2次的条件下，雪白睡莲花粗多糖得率为51.78%。给药后第5、7天，雪白睡莲花粗多糖组小鼠乳腺组织菌落数量、TNF-α、IL-6含量均显著或极显著低于模型对照组(P＜0.05；P＜0.01)，乳腺组织中炎症细胞和红细胞明显减少。【结论】使用单因素结合响应面法优化提取方法后，雪白睡莲花粗多糖得率达51.78%，其对金黄色葡萄球菌性小鼠乳腺炎动物模型具有良好的治疗效果。本研究结果可为临床乳腺炎的防治及雪白睡莲花的开发利用提供科学依据。

【目的】Ⅲ型鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus genotype 3,DHAV-3)是引发雏鸭急性致死性肝炎的主要病原体之一，其致病性呈现显著的日龄依赖性特征。本研究旨在阐明不同日龄雏鸭感染DHAV-3后胆汁分泌通路的调控机制，揭示宿主日龄因素对病毒致病过程的影响规律。【方法】本研究以Z2系北京鸭为研究对象，设置7、14、21日龄3个试验组(50只/组)及相应对照组(15只/组)。攻毒组雏鸭腿肌注射0.2 mL DHAV-3(10^-8.83 ELD₅₀/0.2 mL)，对照组注射等体积PBS，隔离饲养至感染后18 h，采集血液、肝脏、回肠样本，检测指标包括血浆生化指标、病毒载量、总胆汁酸(TBA)含量以及胆汁分泌通路相关基因表达量。【结果】各日龄组雏鸭肝脏病毒载量均显著高于回肠(P＜0.05)，且7日龄雏鸭肝脏病毒载量显著高于14和21日龄(P＜0.05)。雏鸭血浆中天冬氨酸转氨酶(AST)活性和总胆固醇(CHOL)水平在对照组随日龄增加而显著下降(P＜0.05)；DHAV-3感染后，7日龄攻毒组雏鸭血浆中CHOL水平相较于对照组显著降低(P＜0.05)，而14、21日龄则显著升高(P＜0.05)，同时伴随免疫球蛋白Y(IgY)水平显著升高(P＜0.05)。胆汁酸代谢呈现组织特异性调控，对照组雏鸭TBA含量在肝脏中随日龄增加而减少，而在回肠中则随日龄增加而增加；DHAV-3感染后，7日龄攻毒组雏鸭肝脏和回肠中TBA含量均显著下降(P＜0.05)，14日龄呈现肝升/肠降的逆向调控(P＜0.05)，21日龄则呈现双组织同步升高(P＜0.05)。胆汁分泌通路相关基因胆固醇-7α-羟化酶(cholesterol-7 α-hydroxyase,CYP7A1)、三磷酸腺苷结合盒转运体G5(ATP binding cassette transporter G5，ABCG5)和ABCG8在对照组雏鸭肝脏中随日龄增长显著上调(P＜0.05)；DHAV-3感染后，CYP7A1基因转录水平在14、21日龄鸭显著下调(P＜0.05)，ABCG5和ABCG8基因在7、14日龄鸭回肠显著上调(P＜0.05)，而在14日龄肝脏中下调(P＜0.05)；法尼醇X受体(farnesoid X recptor，FXR)基因表达量在对照组雏鸭肝脏中随日龄增长显著上调(P＜0.05)，在回肠中则显著下调(P＜0.05)，攻毒后21日龄雏鸭肝脏FXR基因和14日龄雏鸭回肠FXR基因较对照组显著下调(P＜0.05)。【结论】本研究描述了北京鸭感染DHAV-3后宿主代谢与免疫应答的日龄依赖性特征，首次阐明DHAV-3感染通过干扰胆汁分泌代谢通路诱发日龄依赖性病理损伤，为解析鸭病毒性肝炎的日龄易感性提供了代谢-免疫交叉调控新视角，同时提示核受体介导的胆汁酸负反馈途径可能是探究DHAV-3感染的日龄依赖性机制的关键线索。

【目的】从动物尸体化制副产物肉骨渣发酵反应堆中分离耐高温产蛋白酶菌株，研究其蛋白酶活性，以期为肉骨渣中蛋白降解开发利用提供理论基础和研究策略。【方法】设置高温培养条件，使用酪蛋白平板水解和蛋白酶福林酚法进行耐高温产蛋白酶菌株筛选，通过16S rRNA测序鉴定菌株；通过高温驯化、紫外诱变提升菌株的耐热性和蛋白酶活性，通过单因素试验和响应面试验探究菌株最佳产酶条件。【结果】从肉骨渣发酵反应堆中筛选出1株耐高温产蛋白酶的热嗜淀粉芽孢杆菌R4.1(Bacillus thermoamylovorans R4.1)，通过紫外诱变，蛋白酶活性提升了40.92%，高温驯化使菌株的最适生长和产酶温度由50 ℃提升至65 ℃；单因素试验结果显示，菌株蛋白酶活性受发酵时间、pH、NaCl浓度和Ca²⁺浓度的影响；响应面优化试验确定菌株的最适产酶条件为：65 ℃发酵96.36 h，初始pH 8.02，NaCl浓度0.59%，Ca²⁺浓度1.11%，接种量1%，在此条件下，蛋白酶活性为55.08 U/mL。相较于原始菌株，酶活性提升了1.96倍。此外，菌株在肉骨渣中发酵120 h后肉骨渣减重率为12.30%，粗蛋白质含量减少11.06%。【结论】热嗜淀粉芽孢杆菌R4.1具有较高的高温蛋白酶活力，能对肉骨渣中的蛋白质进行有效降解，具有良好的应用前景。

【目的】利用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术分析威灵仙水提物的主要化学成分，并结合网络药理学和细胞试验验证其抗炎作用机制。【方法】通过UPLC-Q-TOF-MS技术分析鉴定威灵仙水提物化学成分，结合网络药理学方法预测主要成分及相应靶点，并构建“成分-靶点-通路”网络，进一步利用AutoDock软件对主要活性成分与核心靶点进行分子对接，验证核心成分与关键靶点之间的结合能力。采用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞构建炎症模型，进行核心靶点和通路的验证。【结果】从威灵仙水提物中共鉴定出19个成分，其中酚酸类8个、皂苷类11个。网络药理学分析筛选出5个主要活性成分，主要通过调控磷脂酰肌醇3-激酶催化亚单位α(PIK3CA)、信号转导与转录激活子3(STAT3)、磷脂酰肌醇3-激酶催化亚单位β(PIK3CB)、肿瘤坏死因子(TNF)等核心靶点，并通过介导PI3K/Akt/STAT3等关键信号通路发挥抗炎作用。ELISA试验结果显示，与对照组相比，模型组细胞炎症因子TNF-α、白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β含量显著升高(P＜0.05)；与模型组相比，威灵仙水提物各剂量组细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著降低(P＜0.05)。Western blotting结果显示，与对照组相比，模型组细胞中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达量显著上调(P＜0.05)；与模型组相比，威灵仙水提物各剂量组p-PI3K、p-Akt蛋白表达量均显著下调(P＜0.05)。【结论】威灵仙可通过多成分、多靶点、多途径发挥抗炎作用，且作用靶点与PI3K/Akt信号通路有关。本研究结果为深入研究威灵仙的药效物质基础及药理活性提供了参考。

【目的】探究异丹叶大黄素(isorhapontigenin，ISO)对猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化损伤的缓解作用，为ISO作为一种抗氧化剂在动物生产中应用提供理论参考。【方法】使用过氧化氢(H₂O₂)处理IPEC-J2细胞构建氧化应激模型，通过细胞存活率筛选出ISO缓解IPEC-J2细胞氧化损伤的最佳浓度；采用相应试剂盒测定细胞中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)含量及过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)；通过实时荧光定量PCR检测IPEC-J2细胞中抗氧化酶基因(SOD-1、CAT、GSH-Px、HO-1和NQO-1)、炎症相关基因(IL-1β、IL-12和TNF-α)及宿主防御肽基因(pBD1、pBD2和pBD3)的相对表达量。【结果】与H₂O₂组相比，用5、20、40 μmol/L ISO预处理细胞24 h后细胞存活率显著或极显著提高(P＜0.05；P＜0.01)，其中20 μmol/L ISO缓解效果最好。与H₂O₂组相比，ISO预处理可显著或极显著降低IPEC-J2细胞MDA、ROS和8-OHDG水平(P＜0.05；P＜0.01)；极显著提高GSH-Px、SOD1、CAT和NQO-1基因相对表达量及CAT活性(P＜0.01)。与H₂O₂组相比，ISO预处理可降低IL-1β和IL-12基因相对表达量(P＜0.05；P＜0.01)，提高pBD1、pBD2和pBD3基因相对表达量(P＜0.05；P＜0.01)。【结论】ISO可减少细胞中应激产物的生成，提高抗氧化酶基因的表达和抗氧化酶活性，并调节炎症相关基因的表达，从而缓解H₂O₂引起的IPEC-J2细胞氧化损伤。本试验条件下，推荐ISO浓度为20 μmol/L。

【目的】从奶牛场环境和牛体样本中分离明串珠菌(Leuconostoc)并深入探究其生物学特性，为防治奶牛乳房炎提供益生菌菌株。【方法】通过菌体形态学观察及分子生物学手段对分离菌进行菌种鉴定，通过双层平板法分析菌株对奶牛乳房炎常见病原菌的抗菌活性，并分析其主要抑菌物质成分，建立生长曲线及产酸曲线，探究其消化道环境耐受特性，并通过药敏试验和溶血试验评估菌株的安全性。【结果】分离得到3株益生菌，在MRS琼脂培养基上均呈乳白色单菌落，镜检为革兰阳性球菌,分别命名为11、14和18号菌株。16S rDNA测序结果显示，11和14号菌株与NCBI登录的肠膜明串珠菌相似性均在99%以上，18号菌株与乳明串珠菌相似性在99%以上，确定3株分离株均为明串珠菌。3株明串珠菌对大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的抑菌圈直径均＞19 mm，具有良好的抑菌活性。3株明串珠菌对大肠杆菌的抑菌物质主要包括有机酸、细菌素和过氧化氢；而11、14号菌株对肺炎克雷伯菌的主要抗菌物质包括有机酸和过氧化氢，18号菌株主要包括有机酸。生长曲线显示，3株明串珠菌生长规律基本一致，其中0～2 h为迟缓期，2～12 h为对数期，12 h后为稳定期，菌液产酸pH均稳定为4.0左右,具有较好的产酸性能。3株明串珠菌在人工胃液、人工肠液中培养4 h后的存活率均在56%以上，胆盐浓度为0.3%时，3株明串珠菌存活率均在26%以上，说明菌株具有良好的耐受性。药敏试验结果显示，3株明串珠菌对红霉素、米诺霉素、妥布霉素等高度敏感；对青霉素、氨苄西林和万古霉素耐受；对头孢呋辛、头孢曲松、左氧氟沙星等中度敏感。3株明串珠菌均不具有溶血性。【结论】本研究分离得到的3株明串珠菌均具有较好的抑菌特性和安全性，为后续开展益生菌防治细菌性奶牛乳房炎提供了研究基础。

【目的】阐明猪源大肠杆菌中bla_CTX-M-123基因的位置，同时探究其携带的移动遗传元件的传播能力与适应性代价。【方法】通过化学转化试验评估bla_CTX-M-123基因的种内转移能力，并利用全基因组测序确定bla_CTX-M-123基因的位置，分析大肠杆菌中bla_CTX-M-123基因的遗传环境；使用微量肉汤稀释法测定大肠杆菌911菌株、大肠杆菌DH5α感受态细胞及转化子的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration，MIC)。此外，通过竞争试验评估携带bla_CTX-M-123基因质粒的适应性代价，并使用大蜡螟感染模型进行致病性评价。【结果】通过转化试验得到了1株转化子DH5α-pL1，其对头孢噻呋的MIC值为256 μg/mL，生长速率高于受体菌大肠杆菌DH5α感受态细胞，但低于野生型菌株911。DH5α-pL1在培养7 d后，质粒留存率逐渐下降，培养24 h后表现出一定的适应性代价，相对竞争指数＜1。致病性试验结果显示，对照组及大肠杆菌DH5α感受态细胞组大蜡螟幼虫存活率为100%；注射菌株911和DH5α-pL1 120 h后，幼虫存活率分别为50%和70%。【结论】携带bla_CTX-M-123基因的质粒可在种内转移并介导转化子耐药，且该质粒的稳定性弱，具有一定的适应性代价。此外，携带bla_CTX-M-123基因的质粒具有增强受体菌致病力的作用，增加了感染的几率和治疗难度。研究结果为细菌的耐药机制研究和防控提供理论依据。

【目的】掌握广西地区无乳链球菌流行规律和耐药特征，为罗非鱼健康养殖提供科学依据。【方法】采集广西贵港市、北海市、玉林市罗非鱼养殖场病鱼肝脏、脾脏、脑等组织作为样本进行细菌分离培养，通过对分离菌株形态观察及16S rRNA测序分析进行病原鉴定；利用PCR方法检测各分离菌株血清型、主要毒力基因，并采用K-B法检测其耐药性。【结果】共分离38株链球菌，分离菌株在血平板上形成乳白色圆形、具备溶血环的小菌落；革兰染色为阳性，呈典型短链状，经鉴定均为Ⅰa型无乳链球菌；分离菌株均能扩增出毒力基因sodA、cylE、gapC、bac和bca，但未能扩增出毒力基因scpB；38株分离株对氨基糖苷类药物敏感性较低，对阿米卡星耐药率达到85%以上；分离菌株对β-内酰胺类药物敏感性较高，对青霉素G、头孢哌酮敏感性达100%。38株分离菌中有23株分离菌株呈多重耐药性，耐药数量为3～10重，其中4重及以上为13株，占总分离菌株的34.21%。【结论】广西地区罗非鱼源无乳链球菌临床菌株主要血清型为Ⅰa型，其主要毒力基因为sodA、cylE、gapC、bac和bca；分离菌株对氨基糖苷类药物耐药，提示避免使用该类药物进行防治。

【目的】研究四黄散对鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis，IB)的治疗效果和肠道菌群的影响。【方法】选取100只10日龄SPF雏鸡随机分为5组：对照组、病毒组及四黄散低、中、高剂量，每组20只。除对照组外，其余各组雏鸡均采用滴鼻、点眼方式接种鸡胚半数感染量(EID₅₀)为10^-4.67/100 μL的IBV-QX株病毒液，0.25 mL/只。攻毒后24 h给药，四黄散低、中、高剂量组雏鸡通过饮水给药的方式分别给予浓度为1 g/mL的四黄散药液2、4、6 mL，早晚给药，2 次/d，连续给药24 d，对照组和病毒组饮用超纯水，每日观察临床症状。给药24 d后雏鸡全部进行剖检，采集气管、肺脏和肾脏样品，分析组织病理变化，同时无菌采集鸡盲肠内容物测定肠道菌群结构和多样性。【结果】病毒组雏鸡给药第3天时出现食欲下降、呼吸困难和腹泻等症状。给药第7天时，四黄散各剂量组雏鸡临床症状逐渐减轻，给药第8天时，四黄散中、高剂量组雏鸡呼吸困难症状消失，食欲恢复。病理组织学观察结果显示，与病毒组相比，四黄散各剂量组雏鸡未见气管黏膜层呼吸上皮大面积脱落、肺泡塌陷和肺泡壁炎性细胞浸润，未见肾小球内皮细胞增生、炎症渗出及坏死等病理变化；四黄散中剂量组雏鸡气管黏膜层完整，可见纤毛细胞和杯状细胞，肺泡结构完整，肾小球结构完整，偶见炎性细胞聚集。盲肠菌群变化结果显示，与对照组相比，病毒组Shannon指数显著降低，Simpson指数显著升高(P＜0.05)；与病毒组相比，四黄散各剂量组Shannon指数显著升高，Simpson指数显著降低(P＜0.05)。盲肠菌群Beta多样性分析结果显示，四黄散各剂量组和对照组菌群构成相似度高，不存在明显差异；病毒组与四黄散各剂量组及对照组菌群聚落显著分开，差异明显。门水平上，病毒组变形菌门相对丰度高于对照组及四黄散各剂量组，厚壁菌门相对丰度低于对照组及四黄散各剂量组；属水平上，与对照组相比，病毒组乳杆菌属相对丰度明显降低；四黄散中剂量组乳球菌属(Lactococcus)和Inconstantimicrobium菌属明显高于病毒组。【结论】四黄散可有效改传染性支气管炎鸡的临床症状、病理变化和盲肠菌群结构和多样性，中剂量(0.4 g/只)组效果最好。

【目的】全面评估辣蓼散的安全性，为其在临床中的安全应用提供科学依据。【方法】设计急性毒性试验与亚慢性毒性试验。在急性毒性试验中，先选取20只昆明系小鼠进行预试验，随机分为5组，每组4只，雌雄各半，设置5个不同剂量组(1.875、3.75、7.5、15和30 g/kg BW)，经口灌胃一次性给药后连续观察7 d并记录小鼠的行为变化、体重增减及脏器异常情况；若预试验无小鼠死亡，正式试验时每组增至10只，分组、给药方式及观察指标与预试验相同；若正式试验仍无小鼠死亡则进行最大耐受试验，另选20只小鼠以最大耐受剂量30 g/kg BW给药后观察7 d。在亚慢性毒性试验中，将80只SD大鼠随机分为4组，辣蓼散高(20 g/kg BW)、中(10 g/kg BW)、低(5 g/kg BW)剂量组及空白对照组(给予等体积纯化水)，每组20只，连续给药30 d，观察大鼠行为表现、中毒及死亡状况，记录体重、摄食量与饮水量，检测血液生理生化指标，采集脏器称重并计算脏器系数，制作病理切片。【结果】在小鼠急性毒性试验中，预试验、正式试验和最大耐受试验中均未出现中毒症状或死亡现象，剖检脏器无异常变化，半数致死量(LD₅₀)＞30 g/kg BW。在大鼠亚慢性毒性试验中，各剂量组大鼠无中毒症状和死亡现象，体重增长趋势与对照组相似，雄性大鼠体重增长高于雌性；高剂量组雌性大鼠胸腺指数显著低于对照组(P＜0.05)，其余脏器系数与对照组均无显著差异(P＞0.05)；血液生理生化指标除中性粒细胞百分比(Neu)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)有一定变化外，其余指标均无显著差异(P＞0.05)，且均在正常范围内，各脏器组织病理切片也未见明显病理变化。【结论】辣蓼散在本研究设定的剂量范围内对昆明系小鼠和SD大鼠均无毒副作用，安全性良好。在小鼠急性毒性试验中，辣蓼散的LD₅₀＞30 g/kg BW；在大鼠亚慢性毒性试验中，高剂量辣蓼散(20 g/kg BW)连续给药30 d，未观察到明显毒性反应。

炎症小体是先天免疫的重要组成部分，参与多种病理生理学过程。NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD like recepter heat protein domain associated protein 3，NLRP3)作为近年来研究最广泛的炎症小体之一，其在机体对病原微生物感染、维持组织稳态等方面发挥着重要作用。NLRP3炎症小体由NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬酶1(Caspase-1)等蛋白组成，其活化过程涉及多步骤信号转导，包括启动信号和激活信号。NLRP3炎症小体的活化能够促进Caspase-1的切割与活化，进而介导促炎细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-18的成熟与释放，以及细胞焦亡过程，从而在机体炎症反应中发挥关键作用。在兽医领域，NLRP3炎症小体的研究主要集中在与动物疾病发生发展的关系及其作为治疗靶点的潜力。研究表明，NLRP3炎症小体的过度激活与多种动物疾病相关，其中包括细菌、病毒、寄生虫以及支原体感染等。因此，针对NLRP3炎症小体的调控已成为相关疾病治疗的重要策略，并展现出作为疾病诊断标记物的潜力。目前在兽医临床上，针对NLRP3炎症小体的相关调控机制正在被系统研究。近年来，研究人员开发了一系列针对NLRP3炎症小体的抑制剂，如UK5099、MCC950等，虽然这些抑制剂在动物模型中显示出显著的抗炎作用，但NLRP3炎症小体抑制剂的开发领域仍属于起步阶段且尚未有针对此靶点的药物成功上市，因此开发更接近临床应用的新型NLRP3炎症小体抑制剂仍面临挑战。笔者对NLRP3炎症小体及其在兽医领域的研究进展进行了综述，以期为NLRP3炎症小体应用于治疗动物炎症性疾病的重要靶点提供参考。

【目的】2023年11月，河南省某蛋鸭场发生卵黄性腹膜炎疫情，本研究对送检的病死蛋鸭进行实验室诊断和病原分析，确定发病原因，以期对该鸭场卵黄性腹膜炎疫情防控提供科学依据。【方法】对试验鸭病理解剖观察之后，无菌采集肝脏、脾脏、肾脏及血液样品，并进行细菌分离培养和革兰染色镜检，利用特异性引物进行PCR扩增测序，并检测分离株对常见抗菌药物敏感性。通过PCR/RT-PCR方法检测蛋鸭常见病毒性传染病病原，并对阳性病原主要结构蛋白基因进行测序分析，确定蛋鸭感染的病毒性病原及分子流行病学情况。【结果】细菌学检测结果显示，分离获得2种不同菌落形态的优势菌，其中1种菌落呈现半透明圆形突起、边缘整齐、表面光滑，革兰染色阴性短杆菌，多以单个或成对存在，符合鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer，RA)生长特性和菌体特点；另1种菌落在血平板上呈现灰白色圆形突起、边缘整齐、表面光滑，无溶血环，革兰染色阴性短杆菌，多以单个存在，呈两短钝圆，符合大肠杆菌(Escherichia coli，E.coli)生长特性和菌体特点。分别对疑似菌进行ompA和16S rRNA基因扩增测序，经BLAST比对显示，该2种优势菌分别为鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌。药敏试验结果显示，鸭疫里默氏杆菌分离株对环丙沙星、阿莫西林-克拉维酸钾、氟苯尼考表现敏感，大肠杆菌分离株对头孢噻肟、环丙沙星、头孢曲松、磷霉素钠表现敏感。PCR/RT-PCR检测结果显示，鸭圆环病毒(Duck circovirus，DuCV)特异性引物在915 bp处扩增出特异性条带，为核酸阳性，其他病原核酸检测结果均呈阴性，将该分离毒株命名为DuCV/HN-2023。测序比对结果显示，DuCV/HN-2023株Cap基因与鸭源圆环病毒ZQ-XYF1010-1和GZ-GXG0905-X4株核苷酸序列相似性最高，分别为99.7%和99.4%；与番鸭圆环病毒FJFQ315和FJFQ312株核苷酸序列相似性分别为98.6%和98.5%。系统进化树分析显示，DuCV/HN-2023株与ZQ-XYF1010-1、GZ-GXG0905-X4株亲缘关系较近。【结论】通过综合诊断确定了该鸭场蛋鸭发病是由鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌和鸭圆环病毒混合感染所致，并对分离株进行了耐药性分析，在分子水平上对分离毒株进行遗传演化分析，进一步对病原的生物学特性进行了分析，为临床上该类疾病的科学防控提供了参考依据。

鸡滑液囊支原体病是由滑液囊支原体引起的一种感染性疾病，主要表现为感染性滑膜炎、蛋壳顶端异常、气囊炎及轻度上呼吸道疾病。滑液囊支原体感染广泛存在于家禽养殖业，主要有慢性感染和隐性感染，且常与其他呼吸道病原体共同诱发混合感染，给国内养禽业造成巨大经济损失。滑液囊支原体具有多种复杂的致病机制，如黏附宿主细胞、竞争营养物质以及分泌代谢产物等。目前已有病原分离培养、分子生物学与血清学等多种检测方法可用于滑液囊支原体的实验室诊断，但国内当前可用于预防滑液囊支原体感染的疫苗种类较少，当鸡群发生感染时主要通过抗菌药物进行治疗。笔者对近年来鸡滑液囊支原体病的流行病学、临床症状、致病机制、诊断方法以及防治措施的研究进展进行综述，以期为该病的预防和控制提供新的思路。

肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae，KP)是一种重要的人兽共患致病菌，可引发多种感染，严重影响人类和动物健康。多重耐药KP的广泛传播及高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)的蔓延引起人们对KP感染的重点关注。抗生素是抗KP感染的重要手段，但随着抗生素耐药性(AMR)的出现及多重耐药性加剧，抗生素治疗已无法满足临床需求。噬菌体疗法因其独特抗菌机制而备受关注，有研究表明，噬菌体能够有效抗KP感染，但目前相关报道主要集中在临床前体内、体外试验及少量临床案例中，缺乏系统性的安全性评价及应用指导。笔者总结了国内外现有研究数据，系统性回顾了噬菌体抗KP感染的临床前研究和临床病例报告，旨在为开发抗KP感染的噬菌体治疗方案提供参考。