朱艳平1,2,郭东光1,岳锋1,2,杨媛3,李冲3,王爱国3,李博文3,阮涛3,孔令芸3,王选年1
(1.新乡学院生物技术研究中心,河南新乡 453003;2.新乡学院生命科学与技术系,河南新乡 453003;3.河南科技学院动物科学学院,河南新乡 453003)
ZHU Yan-ping1,2, GUO Dong-guang1, YUE Feng1,2, YANG Yuan3, LI Chong3, WANG Ai-guo3, LI Bo-wen3, RUAN Tao3, KONG Ling-yun3, WANG Xuan-nian1
(1. Bio-technology Centre, Xinxiang University, Xinxiang 453003, China;2. Life Science and Technology Department, Xinxiang University, Xinxiang 453003, China;3. College of Animal Science, Henan Institute of Science and Technology, Xinxiang 453003, China)
摘要: 本研究以鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)S1基因为研究对象,设计特异性引物扩增S1抗原集中区目的基因,长度为198 bp,亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,构建重组原核表达质粒pGEX-6P-1-S1,转化至宿主菌Rosetta(DE3)后进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示,表达获得1条特异性蛋白条带,其分子质量大小为33.0 ku,与预期蛋白大小一致。可溶性分析结果表明目的蛋白以包涵体形式存在。Western blotting结果显示,重组蛋白能与IBV鸡阳性高免血清反应,被GST标签单抗识别,结果表明该融合蛋白正确表达并具有良好的抗原性。本研究为制备IBV单克隆抗体奠定了抗原基础。