3种猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒的比较与应用

中国畜牧兽医

3种猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒的比较与应用

何海健¹，邢刚²^，3，马涛³，邱小伙³，蒋春燕¹，周彩琴⁴

（1.金华职业技术学院农业与生物工程学院，浙江金华 321000；2.浙江大学动物科学学院，农业部动物病毒学重点实验室，浙江杭州 310058；3.浙江同点生物科技有限公司, 浙江杭州 310030；4.浙江省动物疫病预防控制中心，浙江杭州 310020）

修回日期:2014-04-04 出版日期:2014-06-20 发布日期:2014-07-24
通讯作者: 邢刚（1981—），男，湖北人，硕士，研究实习员，研究方向：病毒分子生物学。E-mail：gxing@zju.edu.cn
作者简介:何海健（1966—），男，浙江人，硕士，副教授，研究方向：临床兽医学。
基金资助:
浙江省科技厅公益技术研究农业项目（2012C22051）；金华市科技计划重点项目（2012-2-012）。

Comparison of Three ELISA Kits for the Detection of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Antibody and its Application

HE Hai-jian¹, XING Gang²^，3, MA Tao³, QIU Xiao-huo³, JIANG Chun-yan¹, ZHOU Cai-qin⁴

(1. College of Agriculture and Biotechnology, Jinhua Poletechnic, Jinhua 321000,China；2. Key Laboratory of Animal Virology of Ministry of Agriculture, College of Animal Science, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China；3. Zhejiang Tongdian Biotechnology Co., Ltd., Hangzhou 310030, China；4. Zhejiang Centre of Animal Disease Control, Hangzhou 310020, China)

Revised:2014-04-04 Online:2014-06-20 Published:2014-07-24

摘要/Abstract

摘要： 本研究采用3种不同的猪繁殖与呼吸综合征病毒（procine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）抗体检测试剂盒对仔猪母源抗体和免疫猪抗体消长规律进行了比较分析，以期为猪群PRRSV抗体监测提供试剂盒选择依据。将10头PRRSV、PCV2病原双阴性仔猪随机分为2组，每组5头，2组仔猪分别于14日龄及PRRSV母源抗体转阴后免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗，于14、21、28、35、42、49、56、70、84、98日龄采血并分离血清，分别用3种商品化PRRSV抗体检测试剂盒检测抗体水平，同时检测母猪分娩后14 d抗体水平；结果显示，试剂盒A与试剂盒C的Kappa值=0.784＞0.6，试剂盒A与试剂盒C高度一致；试剂盒B与试剂盒A、试剂盒B与试剂盒C的Kappa值分别为0.422、0.374，试剂盒B与试剂盒A一致性中度,试剂盒B与试剂盒C一致性较弱。母源抗体监测表明，3种试剂盒检测的PRRSV母源抗体均在42日龄左右转阴。试剂盒A与试剂盒C所检测的PRRSV相关抗体在免疫后1周即产生，3周即可达到峰值，而试剂盒B所检测的PRRSV相关抗体在免疫后3周产生，5周达到峰值。本研究为3种试剂盒对临床PRRSV的抗体监测和免疫评估提供了试验依据。

关键词:

猪繁殖与呼吸综合征; 间接ELISA; 比较; 免疫抗体

Abstract: To comparatively analyzed piglets maternal antibodies and the antibody dynamics in immunized pigs using three different of antibody detection Kits of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)，in order to provide selection refereace for Kits of monitoring PRRSV antibodies of pigs. The results showed that the Kappa value =0.784＞0.6 between Kit A and Kit C，the compared results were highly-consistent；the Kappa value was 0.422 between Kit B and Kit A，the Kappa value was 0.374 between Kit B and Kit C.Maternal antibody monitoring showed that PRRSV maternal antibodies of three Kits had become negative at 42 days old. PRRSV associated antibodies of using Kit A and Kit C were detected after immuned one week, three weeks to reach the peak, while the PRRSV antibodies of using Kit B were detected three weeks after immunization, and reached the peak in five weeks. This study provided the experimental basis for the three Kits were used to antibody surveillance and immune assessment in the clinical PRRSV.

Key words:

porcine reproductive and respiratory syndrome （PRRS）; indirect ELISA; comparison; immune antibody

何海健，邢刚，马涛，邱小伙，蒋春燕，周彩琴. 3种猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测试剂盒的比较与应用[J]. 中国畜牧兽医.

HE Hai-jian, XING Gang, MA Tao, QIU Xiao-huo, JIANG Chun-yan, ZHOU Cai-qin. Comparison of Three ELISA Kits for the Detection of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Antibody and its Application[J]. .

参考文献

1 王振华, 曹晓涵, 宋禾，等. 猪繁殖与呼吸综合征病毒的危害及免疫策略［J］. 中国畜牧兽医, 2014, 41(2): 239～244.
2 农业部.2012年国家动物疫病强制免疫计划.2012.
3 吴雪军,周彩琴,赵灵燕,等.检测猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒抗体的两种ELISA方法的比较及其应用［J］.中国兽医杂志, 2012, 48(4):27～29.
4 陈庆新, 周继勇, 叶菊秀, 等. 猪Ⅱ型圆环病毒浙江株的分离及全基因组结构分析［J］. 微生物学报, 2004, 4:526～529.
5 杨明娴, 邢刚, 孙文博, 等. 乳猪“高热症”猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与致病性分析［J］. 中国预防兽医学报,2008,11:846～851.
6 郭宝清，陈章水，刘文兴，等. 从疑似PRRS流产胎儿分离PRRSV的研究［J］. 中国畜禽传染病，1996，2：1～5.
7 钱欢, 唐利. 3种检测猪繁殖与呼吸综合征抗体的ELISA试剂盒的比较［J］.猪业科学,2012,29(10):42～44.
8 夏世邦，吴金华. Kappa 一致性检验在检验医学研究中的应用［J］. 中华检验医学杂志，2006，29：83～84.
9 童光志,周艳君,郝晓芳，等. 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及其分子流行病学分析［J］.中国预防兽医学报, 2007, 29(5):323～327.
10 Loemba H D, Mounir S, Ma-rdassi H，et al. Kinetics of humoral immune response to the major structural proteins of porcine reproductive and respiratory syndrome virus［J］. Archive of Virology, 1996, 141(3～4):751～761.
11 Plagemann P G. Neutralizing antibody formation in swine infected with seven strains of porcine reproductive and respiratory syndrome virus as measured by indirect ELISA with peptides containing the GP5 neutralization epitope［J］. Viral Immunol，2006，19(2):285～293.
12 Tian K, Yu X, Zhao T, et al. Emergence of fatal PRRSV variants: unparalleled outbreaks of atypical PRRS in China and molecular dissection of the unique hallmark［J］. PLoS One, 2007,2(6):e526.
13 Witte S B， Chard-Bergstrom C， Loughin T A, et al. Development of a recombinant nucleoprotein-based enzyme-linked immunosorbent assay for quantification of antibodies against porcine reproductive and respiratory syndrome virus［J］. Clin and Diagn Lab Immuno, 2000, 7(4): 700～702.
14 Yoon K J, Zimmerman J J, Swenson S L,et al. Characterization of the humeral immune response to porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus infection［J］. J Vet Diagn Invest, 1995, 7(3):305～312.

[1]	王乐平, 潘艳, 谭奕舟, 李磊, 韩凯欧, 曹雅洁, 李军, 周雨晴, 廖玉英, 马东鑫, 龚俞, 彭昊, 王晓晔. 1株大肠杆菌噬菌体vB_EcoP_GN07的分离鉴定及全基因组分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1522-1531.
[2]	刘欣睿, 王嘉博, 柴志欣, 武志娟, 益西康珠, 钟金城. 牦牛与普通牛、水牛的X染色体基因编码区比较及密码子偏性分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(6): 2043-2055.
[3]	朱育星, 刘俊, 艾翳, 陈通, 邓志和, 何世明, 吴锦波, 兰道亮. 牦牛泌乳期垂体组织比较转录组学分析[J]. 《中国畜牧兽医》, 2019, 46(3): 824-831.
[4]	冯倩, 吴锦艳, 陈妍, 刘永杰, 张克山, 尚佑军, 刘湘涛. 羊口疮病毒疫苗株与野毒株VIL-10基因的比较分析[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(9): 2368-2376.
[5]	杨坤明, 任航, 苏雅婷, 郭小华. 几种商用益生芽孢杆菌特性的比较研究[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(5): 1241-1250.
[6]	付绍印, 何小龙, 王标, 李虎山, 储明星, 刘永斌, 张文广. 不同产羔数绵羊性腺轴比较转录组研究[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(2): 488-496.
[7]	侯成林, 王伟, 周欢敏, 张焱如, 曹俊伟. 中国北方绵羊基因组拷贝数变异研究[J]. , 2016, 43(3): 784-790.
[8]	曲英龙, 钱爱东, 钱军, 计越, 郑关雨, 郭振东, 赵思言, 付莹莹, 张毅, 赵红艳, 陈龙, 刘林娜. 重组蓖麻毒素A链表达及其与天然蓖麻毒素毒性比较研究[J]. , 2015, 42(4): 950-957.
[9]	伊如格勒图, 杨丽华, 赵一萍, 任秀娟, 白东义, 赵启南, 芒来. 蒙古马肠道细菌总DNA提取方法的比较[J]. , 2015, 42(2): 498-502.
[10]	李浩天, 王伟, 凌宇, 崔岩, 周欢敏, 张焱如. 蒙古马基因组拷贝数变异的研究[J]. , 2015, 42(1): 153-160.
[11]	唐德富, Iji P, Choct M, 汝应俊, 宋淑玉, Clarke K L. 木薯产品营养成分的分析与比较研究[J]. 中国畜牧兽医, 2014, 41(9): 74-80.
[12]	谭伟，邓显文，谢芝勋. 猪繁殖与呼吸综合征病毒及疫苗的研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2014, 41(6): 240-247.
[13]	马志亮，孙亭亭，杨洁，范斌，刘旭川，张以芳. 猪繁殖与呼吸综合征活疫苗中病毒含量荧光定量PCR测定方法的建立及初步应用[J]. 中国畜牧兽医, 2014, 41(5): 71-76.
[14]	陶田谷晟, 李思远, 秦建辉, 濮兴杰, 李晓鹏, 肖啸. 犬第三眼睑增生切除法与包埋法治疗效果的比较[J]. , 2014, 41(11): 287-290.
[15]	刘辉;季海峰;王四新;王晶;张董燕;单达聪;王雅民;侯成立. 乳酸菌基因组学研究进展[J]. , 2012, 39(4): 158-161.