为研究芽孢杆菌制剂对蛋鸡生产性能、血清相关指标及盲肠微生物的影响。试验选择健康、产蛋均匀的259日龄的"京粉一号"蛋鸡3600只,随机分为2组,每组6个重复,每个重复300只鸡。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加3%的芽孢杆菌制剂,进行为期40 d的试验。试验第41天晨饲前,从每个重复随机选取中等大小的蛋鸡3只,翅静脉采血备测血清指标;同时将其麻醉后剖腹,用细绳分别结扎两只盲肠的开口端,剪下盲肠,用于测定盲肠内容物中的大肠杆菌和乳酸菌数。结果表明:①日粮中添加芽孢杆菌制剂,对其生产性能各指标无显著影响(P＞0.05);②芽孢杆菌制剂对蛋鸡血清尿素氮、血糖、胆固醇等指标影响差异不显著(P＞0.05),可以显著提高蛋鸡血清中总超氧化物歧化酶(SOD)的含量(P＜0.05);③与对照组相比,试验组蛋鸡盲肠内乳酸菌增加5.19%(P＞0.05),大肠杆菌数显著降低6.25%(P＜0.05)。因此,在蛋鸡日粮中添加芽孢杆菌制剂能提高动物的抗氧化能力,改善肠道微生态结构。

在饮水中添加不同剂量的复方中药制剂,研究其对仔猪生长性能及免疫机能的影响。选取48头(15 d±2 d)"杜×长×大"三元杂交仔猪,按体重和性别随机分为4组,每组12 头。在15 d,对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组仔猪分别饮用自来水、自来水+0.5 g/100 mL复方中药制剂、自来水+1.0 g/100 mL复方中药制剂和自来水+1.5 g/100 mL复方中药制剂。试验期为30 d。所有仔猪于15、29和43 d时进行称重,计算平均日采食量、平均日增重和料重比,并观察断奶后腹泻情况。另外,每组选取6头仔猪,于15、28、33、38和43 d,经前腔静脉采血,测定部分免疫指标及猪瘟抗体水平。结果显示,饮水中添加不同剂量的复方中药制剂,能显著提高仔猪平均日增重(P<0.01),降低料重比及腹泻率(P<0.01或P<0.05),显著提高T淋巴细胞转化率(P<0.05),同时能够促进猪瘟抗体的产生,提高免疫球蛋白的水平。因此,在饮水中添加适量的复方中药制剂,能够明显改善仔猪的生长性能,增强机体免疫力,促进仔猪的生长。

选用1日龄鸡2000只,随机分成2组。试验组放养并通过不同途径补硒,对照组相同条件下放养不作补硒处理,对比研究两组鸡的胸肌肉样、胸骨、肝脏及血清中的硒含量差异,同时对比研究补硒对胸肌营养成分、胴体性状及脏器系数的影响。结果表明,试验组鸡的胸肌、肝脏、胸骨及血清硒含量极显著高于对照组鸡的胸肌、肝脏、胸骨及血清硒的含量(P＜0.01);而两者之间的胸肌营养成分、胴体性状及脏器系数差异不显著(P＞0.05)。

作者通过物理、化学、生物学和复合处理方法介绍了国内外秸秆加工处理技术的研究进展,着重介绍了在生产中应用最广泛的化学方法中的氨化法,生物学方法中的青贮法,并对复合处理法在生产中的优势作了简要介绍。

选择平均体重为(7.5±0.15) kg断奶仔猪90头,随机分为3个处理,每个处理6个重复,每个重复5头。试验1、2组日粮分别在对照组日粮基础上添加0.2％、0.4%酸化剂。结果表明,添加酸化剂能够显著降低胃和十二指肠pH(P<0.05),随着食糜向后移动,效果下降;可以提高乳酸菌及总厌氧菌数量(P<0.05),降低大肠杆菌及总需氧菌数量;显著提高结肠食糜挥发性脂肪酸中丁酸、戊酸含量(P<0.05),降低乙酸含量(P<0.05);可以促进空肠肠绒毛生长(P<0.05),增加肠道吸收面积;由此可知,酸化剂通过降低肠道pH,促进厌氧菌生长繁殖,改善消化道环境,提高丁酸合成,促进肠绒毛生长。

马铃薯淀粉渣是马铃薯加工淀粉后的副产品,其含水量高,含杂菌多,容易变质且不易烘干,但由于其含有大量的淀粉、纤维素、半纤维素、果胶等有效成分,具有很高的开发利用价值。作者介绍了马铃薯淀粉渣的成分与特性和国内外开发利用研究进展。

共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)是一组具有共轭双键的亚油酸的各种构象和位置异构体的总称;作为生长促进因子,CLA具有营养重分配、降低脂肪含量、抗癌、抗动脉粥样硬化等生物特性。作者介绍了CLA的来源与制备及其在猪营养中的应用。

由于具有合成和分泌乳汁的特殊生理功能,哺乳动物乳腺上皮细胞是进行乳腺生物反应器研究的重要细胞模型。用乳腺上皮细胞建立的模型,能真实反映哺乳动物乳腺生长发育及泌乳的各项生物学机制,验证乳腺特异性表达载体的构建是否合理有效,涉及到细胞生物学、发育生物学、内分泌学、生物化学与分子生物学等多个领域,对于乳腺生物反应器、乳蛋白基因表达的研究有重要意义。作者主要从培养方法方面介绍了近年来哺乳动物乳腺上皮细胞体外培养方法。

本研究旨在探索影响小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)分离培养的因素,建立有效的胚胎成纤维细胞培养体系,为构建饲养层细胞与体细胞核移植技术的细胞核供体建立平台。本研究用组织细胞培养液DMEM作为基础培养液,观察了不同胎龄、不同血清浓度及不同胰蛋白酶作用时间等因素对MEF分离培养的影响。结果显示,在所进行的4个胎龄8.5、10.5、12.5、14.5 d的比较试验中,原代成纤维细胞分离培养的最适胎龄为12.5 d,细胞贴壁迅速,12 h已完全贴壁,增殖速度快;在所进行的不同时间5、10、15、30 min的胰蛋白酶消化中,最佳时间为5~10 min;在所进行的5个血清浓度7%、9%、10%、11%、13%的比较试验中,添加11%胎牛血清浓度培养效果最佳,从3~5代增殖倍数稳定在1.35左右,传代时间也相对较长。以上结果表明,采用12.5 d胎鼠,胰蛋白酶消化5~10 min,在含有11%血清的DMEM培养液中培养MEF细胞时,原代和传代效果最好,传代至第3~5代时细胞生长增殖最旺盛,处于对数分裂期,适宜作为饲养层细胞与体细胞核移植细胞核供体。

试验旨在研究甘氨酰谷氨酰胺和牛磺酸对早期断奶仔猪外周血液免疫功能的影响。选择28日龄断奶杜×长×大仔猪为研究对象,通过饲养试验,研究甘氨酰谷氨酰胺和牛磺酸对早期断奶仔猪外周血液活化T、B淋巴细胞的影响。研究结果表明,日粮中分别或同时添加甘氨酰谷氨酰胺和牛磺酸提高了血液中的T、B淋巴细胞阳性率(P＜0.05)。在早期断奶仔猪日粮中分别或同时添加0.25％甘氨酰谷氨酰胺和0.1％牛磺酸对仔猪T、B淋巴细胞免疫功能有一定作用。

用Ⅰ型鸭肝炎病毒人工感染3日龄健康金定鸭,对接种后48 h后血清中血糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶等9项血液生化指标进行测定。结果显示,谷丙转氨酶含量较对照组极显著升高(P＜0.01);尿素氮含量显著升高(P＜0.05);葡萄糖、IgG含量与对照组相比有一定量的下降,但差异不显著(P＞0.05);谷草转氨酶、甘油三酯、尿酸、IgA和IgM含量在发病时略微升高(P＞0.05)。上述结果提示,雏鸭感染鸭病毒性肝炎后,肝脏和肾脏受到不同程度的损伤。

生长轴是动物体内下丘脑－垂体－靶器官一系列激素及其受体所组成的神经内分泌系统。通过提高生长轴中生长激素(GH)和胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)水平,促进增重、提高饲料转化率和改善肉品质,是畜禽生长调控的一种新途径。GH通过IGF-Ⅰ介导调节动物生长和细胞分化等,文章综述了GH/IGF-Ⅰ轴的组成、功能,以及GH调控IGF-Ⅰ表达的分子机理。

在对南非Ⅱ型口蹄疫病毒抗原分析基础上,将已经筛选出的6条抗原性良好的多肽采用柔性linker拼接,人工合成相应核苷酸后连入T载体中。将酶切回收的串联基因(VP1-VP3)克隆于表达载体pGEX-6P-1中,获得重组质粒pGEX-VP1-VP3。该质粒转化于感受态细胞BL21(DE3) plysS中,经IPTG诱导后进行了可溶性分析和Western blotting分析,且对融合蛋白柱上酶切纯化后进行了抗原性分析。重组质粒pGEX-VP1-VP3的PCR和测序结果表明,VP1-VP3串联基因已成功插入pGEX-6p-1载体中;pGEX-VP1-VP3融合蛋白分子质量约为38.3 ku,并以包涵体形式存在;Western blotting结果显示,该融合蛋白与南非Ⅱ型FMDV阳性血清能发生特异性反应;酶切纯化后蛋白间接ELISA鉴定结果表明,表达的VP1-VP3蛋白具有良好的免疫原性与反应原性。串联多肽的成功表达,将为南非型口蹄疫血清学检测方法建立奠定基础。

采用巢式PCR鉴定广东两株犬源贾第虫(GD1和GD2)的基因型。运用碘液染色对犬粪便中贾第虫进行鉴定,提取DNA后经巢式PCR扩增tpi基因,扩增产物测序后用BLAST和DNAStar软件进行同源性和系统发育分析。结果表明,通过tpi基因分析,GD1与L02120的同源性为100%,种系发育树上位于同一分支;GD2与DQ220289的同源性为99.1％,种系发育树上两者在同一分支。广东犬源贾第虫GD1为人畜共患的A1型,GD2为犬的D型。

本研究根据GenBank上登录的猪β-干扰素基因成熟肽核苷酸序列(mPoIFNβ),在保持原猪β-干扰素蛋白序列不变的基础上,对猪β-干扰素基因进行了毕赤酵母偏嗜性改造,并构建了毕赤酵母重组表达质粒pPICZαC-PoIFNβ。pPICZαC-PoIFNβ经SacⅠ酶切线性化后,电击转化导入感受态的毕赤酵母菌株X-33中,转化子经YPDS+Zeocin抗性平板筛选和PCR鉴定后获得多株阳性菌株。阳性酵母菌株经甲醇诱导分泌表达了重组PoIFNβ,其表达量约为127.9 mg/L。表达产物经SDS-PAGE和Western blotting检测,结果表明,表达产物为分子质量约25和28 ku的混合物,并且二者都可与PoIFNβ阳性血清结合。以细胞病变抑制法测定重组β-干扰素在BHK-21细胞上的抗水泡性口炎病毒活性为2.8×10³ IU/mL;对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在Marc-145细胞上抗病毒活性达到1.6×10³ IU/mL。

雄性特异性组织相容性抗原(male specific minor histompatibility antigens,H-Y抗原)是由Y染色体上的基因编码,在雄性动物细胞中普遍表达(包括胚胎和滋养层细胞)。H-Y抗原不仅能引起基因型相同的雌性动物排斥雄性组织,也能导致人白细胞抗原匹配干细胞移植术后出现移植抗宿主性疾病(GVH)。细胞毒性T淋巴细胞检测到几个不同的H-Y抗原表位,这些肽是从胞内蛋白分离出来,由主要组织相容性复合分子结合呈递在细胞表面。H-Y抗原肽与人白细胞抗原Ⅰ类和Ⅱ类分子特异结合参与免疫反应,从而影响移植结果。近年来越来越多的文献报道了H-Y抗原的相关研究,作者主要综述编码H-Y抗原的相关候选基因,并对它在疾病等方面的前景作出了一些展望。

对蓝狐多巴胺受体D2(dopamine receptor,DRD2)基因进行克隆测序,为进一步探讨蓝狐DRD2基因与自咬行为的相关分析及染色体定位提供理论基础。本试验参考狗的DRD2基因序列(GenBank登录号:AF293962.1)设计特异引物,对蓝狐的基因组进行PCR扩增、克隆和测序,并进行序列的同源性分析。试验获得蓝狐DRD2基因序列819 bp,其序列与家犬的同源性最高,达97%,而在水貂和人及小鼠这些哺乳动物的同源性为85%~91%。本研究成功克隆了蓝狐DRD2基因的部分序列,表明其在物种间具有较高的保守性。

J亚群禽白血病病毒(ALV-J)在中国普遍存在,严重危害养禽业,暂时尚无有效预防、治疗禽白血病的措施,只能通过净化控制。因此,研究一种低成本、易推广的检测方法对防控此病非常重要。用DF-1细胞接种病毒,以细胞基因组为模板,通过巢式PCR方法扩增出941 bp的含酶切位点的ALV-J特异性基因gp85基因序列,连接于pET32a(+)载体上,实现gp85蛋白在宿主菌BL21的表达,以切胶回收方式纯化蛋白,成功获得约52 ku的重组融合蛋白,免疫新西兰兔,制备gp85单因子抗血清,Dot-ELISA检测抗体效价。结果显示,纯化所得蛋白质具有良好抗原性,制备的抗血清效价高于1.024×10⁵。本试验通过较简便、低耗的方法获得高效单因子血清,为抗血清的制备提供参考,为ALV-J gp85蛋白的研究、ALV-J特异性检测方法的研制打下基础,对ALV-J的净化有重要意义。

设计合成特异引物,扩增O型口蹄疫病毒(O/FMDV)P1-2A基因,将其克隆至T载体上,通过Hind Ⅲ和Not Ⅰ双酶切P1-2A基因和真核转座载体pFastBac^TM Dual,构建重组转座质粒pFastBac-P12A,再将pFastBac-P12A转化入含穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac,经重组筛选获得杆状病毒重组质粒Bacmid-P12A。将Bacmid-P12A质粒转染Sf9昆虫细胞,出现典型CPE。病变细胞经Dot blotting和SDS-PAGE检测和分析,结果表明,O/FMDV P1-2A蛋白在Sf9细胞中获得表达,为O型FMDV特异性蛋白。

分离纯化来自河南不同地区的鸡大肠杆菌菌株,按照NCCLS标准和双纸片协同试验法进行ESBLs基因表型鉴定。然后根据GenBank已发表的序列设计两对引物,选择阳性表型菌株并提取总DNA,进行PCR、克隆、阳性质粒测序,将测定的序列拼接后和参考菌株ESBLs基因序列比较分析。结果显示,15株大肠杆菌菌株有3株菌株含有β-内酰胺酶,为阳性菌株,这3株与2个参考株核苷酸序列同源性为98.9%~99.7%,氨基酸序列同源性为98.1%~99.2%。3株大肠杆菌阳性菌株序列ESBLs基因型均为TEM型,核苷酸有15个位点发生突变,其中6个位点突变引起氨基酸变异。

本研究旨在探索脂质体介导抗猪瘟病毒基因重组质粒PGPUG/GFP/Neo转染小鼠胚胎成纤维细胞的条件,为构建疾病模型动物及抗猪瘟病毒转基因猪提供技术平台。本研究比较了不同的小鼠胚胎成纤维细胞分离培养方法,将培养至3~5代的胚胎儿成纤维细胞,通过脂质体(LiPofectamine^TM 2000)介导转染抗猪瘟病毒基因重组质粒PGPUG/GFP/Neo。结果显示,在所选用的不同浓度脂质体和重组质粒,以及不同转染时间的组合中,2 μL脂质体介导1.5 μg重组质粒,转染6 h时可获得19%的转染效率,极显著高于其他剂量和时间组合(P＜0.01)。这些结果表明,脂质体、重组质粒及转染时间的优化组合,能有效介导抗猪瘟病毒基因重组质粒PGPUG/GFP/Neo转染小鼠胚胎成纤维细胞。

本试验旨在建立一种PCR技术,既能快速检测牛传染性鼻气管炎病毒,又能区分同属病毒牛疱疹病毒5型和伪狂犬病病毒。根据基因库中牛传染性鼻气管炎病毒gG基因的特异性引物,建立PCR方法,对牛传染性鼻气管炎病毒参考毒株和阳性样本进行扩增,结果均能扩增出一条463 bp的特异性条带;对同属的牛疱疹病毒5型进行扩增,获得651 bp和431 bp两条带;对同属伪狂犬病病毒进行扩增,获得493 bp的条带;而非相关病毒(如猪呼吸与繁殖综合征病毒等),不能扩增出条带。对牛传染性鼻气管炎病毒的检测灵敏度为2×10^-3 PFU/mL。鉴于该方法具有良好的灵敏度和特异性,将在牛疱疹病毒感染诊断和标记疫苗免疫后的鉴别诊断方面具有良好的应用前景。

本试验把不同温度下的样品分成3个处理组,通过检测精子与繁殖力有关的重要指标研究3个处理组的冷冻效果,结果显示, 在3个不同的环境下收集附睾,室温下(19 ℃)收集附睾精子(处理1组)的冷冻效果最好,解冻后活率为(55.0±3.4)%;4 ℃下收集的精子(处理2组)冷冻解冻后的活率为(35.0±2.5)%;37 ℃下收集的精子(处理3组)的冷冻效果较差,解冻后活率为(23.0±2.5)%。通过对处理组中冷冻和解冻后两个阶段的精子指标的测定,研究了精子活率与其他指标的关系,得出白绒山羊附睾精子能够成功的保存。

采用FAO-ISGA联合推荐的10对微卫星引物,结合荧光标记PCR技术,分析了中国9个地方绵品种的遗传多样性。结果表明,10个微卫星座位上共检测到153个等位基因,有效等位基因数在2.3064~13.7632之间,位点多态信息含量和观察杂合度为0.5395~0.8559和0.3972~0.8475,位点的遗传分化系数在0.042~0.149之间。Structure遗传结构关系、D_A/UPGMA聚类图、MVSP聚类分析图三者的结论基本相吻合,与绵羊的起源进化、亲缘关系、地理分布相一致。

为了解猪组蛋白变异体H3.3基因在组织中表达的发育性变化规律,本研究通过实时荧光定量PCR的方法,检测H3.3基因在不同日龄和正反交组合下在猪肌肉组织中的表达水平。试验结果表明,猪H3.3基因在猪出生后各个时期的背最长肌中均有表达,且随日龄的增加表达量也随之增加;正反交间表达量也有所差异,1日龄反交(二花脸猪♂×大约克猪♀)组表达量大于正交(大约克猪♂×二花脸猪♀)组,20日龄以后,均为正交组表达量高于反交组,但同时期各组正反交表达量间均差异不显著。本试验首次证实了组蛋白变异体H3.3在猪肌肉组织中确有掺入,得到了H3.3在猪肌细胞中表达量的发育性规律,并且认为H3.3的替换作用可能受到母体效应的影响。本研究为更深入的研究组蛋白变体的替换对真核生物细胞生长和发育相关基因的调控与修饰分子机制的研究奠定基础。

本研究采用PCR直接测序和PCR-RFLP法研究了云南高峰牛MHC-DQB基因外显子2(DQB.2)的遗传多态性,并利用DNAMAN软件分析了云南高峰牛与部分物种DQB.2相应核苷酸序列的同源性。结果发现,共检测到了17个等位基因,其中Hae Ⅲ酶切位点存在10种基因型,由A、B、C、D和E 5个复等位基因控制;RsaⅠ酶切位点存在22种基因型,由A、B、C、D、E、F、G、H、I、J和K共11个复等位基因控制;TaqⅠ酶切位点只出现了1种基因型。分析发现,云南高峰牛DQB.2基因的12、25、63、96、106、126、152、156、165、204位的碱基表现出了多态性。所分析的物种该基因片段大小相同均为270 bp,云南高峰牛第224位碱基缺失及236位碱基插入现象。云南高峰牛与人、猪、马、绵羊、黄牛×瘤牛的核苷酸序列的同源性分别为81.4%、83.3%、78.1%、87.7%、86.6%。经χ²检验结果表明,Hae Ⅲ和TaqⅠ酶切位点处于Hardy-Weinberg平衡状态(P＞0.05),而RsaⅠ酶切位点则未达到Hardy-Weinberg平衡状态(P＜0.05)。

近年来先进的测序和基因分型技术促进了肉牛育种方法的革新。从过去低通量、耗时的限制性片段多态标记(RFLP)到如今高通量、高密度的单核苷酸多态性(SNP)标记,基因检测效率大幅提高。随着肉牛基因组序列图谱及SNP图谱的完成,基于高密度SNP标记的牛全基因组选择成了牛育种的新热点。作者立足高密度SNP芯片对肉牛育种的影响,综述高密度SNP芯片及和下一代测定技术及肉牛全基因组选择的研究进展,阐明高密度SNP芯片对多品种全基因组选择的模型的建立及准确的预测基因组育种值极其重要。

瘦素(Leptin)主要是由脂肪组织分泌的一种蛋白质产物,对动物初次发情有重要的调节作用。作者就Leptin对动物初情期启动的调控,特别是对下丘脑－垂体－卵巢轴及其相关激素的调控作用进行了综述。

采用国产促性腺激素对新西兰白兔进行超数排卵试验,研究激素、季节及兔龄对超排效果的影响。结果发现:①FSH组(30.05±8.97个/只)平均排卵数显著高于PMSG组(22.46±5.18个/只)(P＜0.05)。②母兔在春季、夏季、秋季、冬季的平均排卵数为32.34±5.58、15.96±4.11、24.18±4.95和22.61±3.75个/只,春季的处理效果显著优于其他3个季节(P＜0.05),而秋季和冬季处理组之间没有显著差异(P＞0.05),但都显著高于夏季(P＜0.05)。③经产母兔超排处理后的平均排卵数(30.56 ± 6.79个/只)显著高于青年母兔平均排卵数(21.60 ± 3.66个/只)(P＜0.05)。以上结果表明,SH超排效果优于PMSG,且在春季对母兔进行超排处理比较合适,经产母兔比青年母兔超排效果更好。

细胞凋亡是多细胞生物调控生物体的发育、细胞更新和维持内环境稳定的一种重要机制。目前发现细胞凋亡存在死亡受体通路、线粒体通路和内质网通路3条通路,且各通路之间相互联系,共同促进细胞凋亡。作者综述了近年来细胞凋亡信号传导通路及其调控的研究进展。

小反刍兽疫(peste des petits ruminants,PPR)是由小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)引起的一种急性、烈性、接触性传染病。山羊高度易感;牛、猪等动物也可以感染带毒,野生动物偶有发生。作者主要介绍了小反刍兽疫病毒各基因结构特点,6种结构蛋白的功能,以及小反刍兽疫的诊断技术等方面的最新研究进展。

试验旨在研究咖啡因、维生素E、超氧化物歧化酶(SOD)及剂型对猪冷冻精液品质的影响。采用添加了不同浓度咖啡因、维生素E、超氧化物歧化酶(SOD)的冷冻稀释液和3种剂型的冻精管进行精液冷冻。3种添加剂对冻精解冻后的精液品质都有一定的促进作用,试验中其添加最适浓度分别为:咖啡因为0.2 mg/mL,维生素E为0.4 mg/mL,SOD为300 IU/mL;0.25mL剂型的冻精解冻后精子品质最好。咖啡因、抗氧化剂及冻精管剂型对冷冻精液的效果有一定的影响。

选取鸭肝炎病毒(duck hepatitis virus,DHV)分离株BZ-Ⅰ株作为疫苗株制备灭活苗,多次免疫蛋鸡制备卵黄抗体。经鸡胚中和试验法测定卵黄抗体的中和效价为2^9.6;经动物试验证实卵黄抗体可有效预防和治疗雏鸭对鸭病毒性肝炎(duck viral hepatitis,DVH)强毒的攻击,为雏鸭DVH的防治提供了新的技术手段。

文章介绍了新城疫疫苗的应用现状,概述了灭活疫苗、活疫苗及基因工程苗等主要的新城疫疫苗研究现状及发展动态。旨在为研制广谱、多价、浓缩、高效、价廉的新城疫疫苗提供科学的参考依据,从而进一步控制当前新城疫疫病的蔓延。

呼吸系统疾病是圈养和野生爬行动物群体中非常常见的疾病,有高患病率和死亡率。多种传染性和非传染性因素与爬行动物的呼吸系统疾病有关系。常用的诊断技术包括放射摄影、血清学检验、下呼吸道灌洗物培养和鉴定、内窥镜检查等。关于爬行动物的药代动力学理论很少,大多数抗菌药物的有效治疗水平尚未确定。推荐用广谱抗生素和多种药物组合来治疗呼吸系统疾病,推荐的药品有阿米卡星、头孢他定、哌拉西林,应当根据培养观察结果和药物敏感性试验结果适当调整。喷雾疗法是一种抗生素治疗的有效辅助疗法。目前,爬行动物呼吸系统疾病相关研究有非常大的发展空间,要根据爬行动物的进化和生理特点研究适用的技术和手段,以指导疾病的预防、诊断和治疗。

oqxAB是近年新发现的一种可同时介导细菌对喹口恶啉类药物、氯霉素和喹诺酮类等抗菌药物耐药的多重耐药外排泵。本研究拟比较oqxAB基因在不同来源动物大肠杆菌中的流行情况,并分析oqxAB对耐药性的影响。采用PCR法对2007—2009年主要分离自广东地区的655株大肠杆菌,包括猪源219株、牛源40株、鸭源205株及鸡源191株,进行oqxAB基因的检测,并采用琼脂稀释法测定大肠杆菌对10种抗菌药物的敏感性。oqxAB在猪、牛、鸭、鸡源大肠杆菌的阳性率分别为49.3%(108/219)、47.5%(19/40)、60.5%(124/205)和12.6%(24/191),总阳性率为42.0%(275/655)。大肠杆菌对庆大霉素、氨苄西林、复方新诺明、恩诺沙星和四环素耐药率较高,分别达到68.2%、68.7%、70.4%、77.9%和80.8%。oqxAB阳性菌和阴性菌对头孢曲松、四环素和复方新诺明的耐药率差别不显著(P＞0.05),对庆大霉素的耐药率差别显著(P＜0.05),对氨苄西林、环丙沙星、阿米卡星、氯霉素、氟苯尼考和恩诺沙星的耐药率oqxAB阳性菌极显著高于阴性菌(P＜0.01)。中国兽医临床oqxAB流行很普遍,这可能与国内大量使用喹口恶啉类药物有关。

为了对鹅大肠杆菌的临床治疗提供指导并为制备大肠杆菌自家灭活疫苗奠定基础,采集疑似病例的病料,用麦康凯培养基分离细菌,对分离的细菌进行形态学鉴定、生化鉴定、血清型鉴定、致病性试验及药敏试验。结果显示,所分离到的菌落呈粉红色、光滑湿润、边缘整齐;革兰氏染色为阴性小杆菌,两端钝圆,多单个存在;共鉴定出15株大肠杆菌,其中4株O₃₅型,3株O₇₈型,3株O₂₆型,2株O₇型,1株O₁₀₉型,1株O₁₄₁型,1株O₂型;动物试验表明所鉴定的菌株对小鼠和雏鹅均有较高的致死率;体外抑菌试验结果发现强力霉素、阿莫西林对该场的鹅致病性大肠杆菌具有较强的抑制作用。本研究为有效防制鹅大肠杆菌病提供了理论依据,对于控制规模化鹅场大肠杆菌等细菌性疾病具有重要的应用价值。

为增强现有猪支原体肺炎活疫苗的免疫刺激能力以实现肌肉注射免疫,向现有活疫苗中添加几种不同佐剂,考察其经肌肉免疫后机体的免疫应答情况。结果表明,免疫刺激复合物基质佐剂和左旋咪唑+壳聚糖混合佐剂能有效激发细胞免疫应答和体液免疫应答;左旋咪唑+黄芪多糖混合佐剂能增强疫苗的细胞免疫刺激能力,而对体液免疫无作用;皂角素佐剂未显示明显的免疫增强效果。本试验结果为肌肉注射猪支原体肺炎活疫苗的开发奠定了数据基础。

为筛选抗传染性支气管炎病毒中药,对麻杏石甘散组方进行加减,研制形成3个中药组方,并以其为试验药物,观察其在9~15日龄鸡胚上对鸡传染性支气管炎病毒IBV-M41株的作用效果。结果表明,在安全浓度范围内,3个组方对该病毒均具有一定的阻断和抑制作用,其中,组方1的阻断和抑制作用较为突出。

为了掌握导致青海地区奶牛乳房炎的最主要病原菌——葡萄球菌流行情况及其对常用药物的敏感性,从而为奶牛乳房炎的治疗提供参考依据,本试验在青海地区18个奶牛场共采集243份乳房炎乳样。应用传统方法进行葡萄球菌的分离培养;通过试管法血浆凝固酶试验与生化鉴定方法,本次共分离出金黄色葡萄球菌43株,木糖葡萄球菌与产色葡萄球菌各6株,腐生葡萄球菌5株,松鼠葡萄球菌、表皮葡萄球菌和人葡萄球菌各4 株,头葡萄球菌和模仿葡萄球菌各2株;经K-B纸片扩散法对葡萄球菌耐药性检测结果显示,该地区葡萄球菌主要对头孢类、林可霉素、阿米卡星比较敏感,部分菌株对恩诺沙星与庆大霉素敏感,从而为该地区奶牛乳房炎的有效预防和治疗提供科学依据。

猪日本乙型脑炎是由黄病毒科乙型脑炎病毒引起的一种人畜共患的病毒性传染病。人与多种动物均能感染,其中猪是主要的储存宿主和扩散宿主,猪感染该病毒后引发猪的繁殖障碍,使养猪业遭受重大经济损失,因此学者们一直在致力于寻找可以快速检测和诊断日本乙型脑炎的方法,为预防和治疗该病提供基础条件。文章对猪日本乙型脑炎检测技术,包括病毒分离鉴定方法、血清学方法、分子生物学方法等方面的研究进展进行了较为全面的综述。

本试验使用牛传染性鼻气管炎弱毒活疫苗进行安全性和免疫保护效果研究,将该疫苗分别接种1月龄犊牛、6~8月龄牛及后备母牛,接种剂量为2 mL(10头份),检验疫苗安全性。将疫苗接种6~8月龄牛,接种剂量为1 mL(1头份),疫苗接种后28 d使用检验用强毒进行攻毒,检验疫苗对攻击用强毒的保护效力。结果表明,不同月龄牛接种疫苗后体温正常,无任何临床可见异常,后备母牛接种疫苗后精神状态及食欲均良好,无流产、死胎及木乃伊胎出现。疫苗接种牛对强毒攻击可产生较好的抵抗力,攻毒保护率达5/5。 研究结果表明,该疫苗对牛安全,且免疫保护效果良好。

细胞因子是指一些由机体免疫或非免疫细胞产生的具有生物活性,与造血、炎症和免疫应答反应密切相关的小分子多肽类糖蛋白。因此,在动物免疫抑制病中对细胞因子的检测有着非常重要的临床价值。文章介绍了细胞因子的检测方法、与免疫抑制相关的细胞因子及细胞因子检测在研究动物免疫抑制病中的价值。

为了解四川某野生动物园动物肠道寄生虫感染情况,本试验采用离心沉淀法、卢戈氏碘液染色法、饱和蔗糖溶液漂浮法对40种野生动物及混居水禽共计180份粪便样本进行调查。寄生虫总感染率为74.4%,共发现8种寄生虫,其中球虫、阿米巴原虫、蛔虫、鞭虫、毛细线虫、圆线虫、绦虫和吸虫感染率分别为31.1%、19.4%、15.6%、10.6%、17.2%、20.6%、4.4%和1.7%。结果表明,某野生动物肠寄生虫感染较为普遍,应采取有效的综合防治措施,以保证野生动物的健康。

本试验通过注射利血平复制犬脾虚证动物模型,观察犬临床体征、体重及部分消化功能指标的变化,并研究针灸对各项指标的调整作用。试验结果显示,在实验犬出现脾虚证后,其体重显著低于空白对照组(P<0.05);在经针灸治疗7 d后,实验犬的胃蛋白酶、胰蛋白酶活性与胃动素水平均显著高于未经治疗的实验犬(P<0.05),而胃泌素与生长抑素均显著低于未经治疗的实验犬(P<0.05)。结果表明,通过针刺脾虚犬足三里、脾俞两穴位,对改善脾虚犬临床症状、增加体重及恢复正常消化功能等方面具有明显的功效。

本试验对J亚群禽白血病病毒引发商品蛋鸡发生多种肿瘤进行了详细的病理学观察。尸检10只病死鸡,其中髓细胞性白血病占8/10,表现肝脾明显肿大,被膜下可见弥散的灰白色结节,组织学观察发现几乎所有组织均见典型髓细胞样瘤细胞增生。其中5/10病例表现有其他类型肿瘤,包括血管瘤、纤维瘤、脂肪肉瘤。用ALV-J特异性引物H5/H7进行PCR确诊该鸡群感染了ALV-J。

随着全基因组扫描技术的突破及学科交叉互动,近年来家禽起源、驯化研究取得了一些重要进展。家禽为人类提供肉、蛋及羽绒,也用于宗教礼仪及文化生活。在人类文明进程中驯养家禽占据不可或缺的地位。分子生物学技术及考古学研究表明,家禽驯化是一个复杂而漫长过程,家禽适应人类改变了形态、行为及生理,人类因家禽出现改变了饮食结构及行为方式。家禽来源于野生物种,不同的家禽在不同地点由不同族群独立驯化而成,驯化过程伴随其他物种基因渗入。揭示家禽起源不仅是一个科学问题,对保护家禽遗传多样性及遗传育种都有重要意义,未来全基因组扫描及花粉考古有望成为家禽驯化研究热点。

本研究选择18~24月龄广丰黄牛、吉安黄牛、锦江黄牛3个江西地方品种黄牛各3头,进行肉用性能和牛肉主要营养养分的测定分析。结果表明,广丰黄牛的骨率显著高于吉安黄牛(P<0.05);锦江黄牛与广丰黄牛、吉安黄牛相比屠宰率、净肉率较高,眼肌面积较大,但无显著差异(P>0.05);同时,锦江黄牛氨基酸总量低于其它品种,鲜味氨基酸、甜鲜味氨基酸高于其它品种,苦味氨基酸低于其它两品种,差异均不显著(P>0.05);各种氨基酸中,锦江黄牛赖氨酸和酪氨酸含量低于其它品种,但甘氨酸含量高于广丰黄牛,差异显著(P<0.05)。牛肉各种脂肪酸含量、硬脂肪酸总含量和不饱和脂肪总含量在品种间均无显著差异(P>0.05)。结果显示从常规养分含量、氨基酸、脂肪酸的营养价值评定方面,3个地方品种黄牛中,广丰黄牛、吉安黄牛优于锦江黄牛。

乌金猪是中国优良的地方猪种,具有适应性强,耐粗饲,抗病力强、繁殖性能好,脂肪沉积能力强,肉质细嫩等优点,作者就乌金猪的种质特性和日粮适宜营养水平研究进行综述,并从营养学角度对乌金猪的研究进行了展望。

本试验分别用蛋白G亲和层析法、饱和硫酸铵法和辛酸-硫酸铵法纯化兔抗H9N2亚型禽流感病毒血清,发现蛋白G亲和层析法纯化得到的抗体纯度最高,回收率较低,抗体活性未变,操作简便,但成本较高,适合实验室研究及小量样品的纯化;饱和硫酸铵法纯化得到的抗体纯度较蛋白G亲和层析法低一些,抗体活性不变,可通过多次盐析来提高抗体纯度,多作为蛋白G亲和层析法纯化前的初步纯化;辛酸-硫酸铵法纯化得到的抗体纯度不及前两种方法,回收率较高,抗体活性亦无改变,纯化时对pH的精确性和辛酸的浓度要求较高,多用于样品的粗提和单抗的纯化。

利用Protean软件对猪戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)swCH189株的ORF2进行潜在抗原位点分析,选取381aa－623aa段作为表达片段,运用PCR方法从ORF2全长质粒中扩增出目的片段cp239,经纯化、连接等,成功构建了表达载体pET32a(+)-cp239,为下一步进行基因原核表达及其生物学活性分析奠定了基础。

由于淀粉样物质与许多疾病,如阿兹海默病、帕金森综合症和朊蛋白病相关,对其形成的基础—结构方面的研究引起了越来越多人的关注。但是其结构目前还没有被完全研究清楚,文章介绍了多种研究淀粉样物质结构的先进方法,如氢氘交换、冷冻显微技术、固态核磁共振等。人们利用这些技术能够更精确地观察和研究淀粉样物质的结构,以便进行深入研究。

从四川某猪场疑似胸膜肺炎放线杆菌感染的病料中分离到一株革兰氏阴性小球杆菌。经染色镜检、生化试验、PCR检测、血清型检测,致病性试验和药敏试验,鉴定该菌为猪胸膜肺炎放线杆菌1型,且具有较强致病性。药敏试验结果表明,该菌对四环素、甲氧苄啶,以及链霉素、庆大霉素、卡那霉素、丁胺卡那、新霉素等氨基糖苷类药物高度耐药,对氯霉素、氟苯尼考、氨苄西林、阿莫西林、羧苄西林和恩诺沙星、诺氟沙星等喹诺酮类受试药物敏感。

本研究建立了猪肝中乙酰异戊酰泰乐菌素残留的超高效液相色谱―串联质谱检测方法(UPLC-MS/MS)。样品经EDTA-McIlvaine's缓冲液提取,HLB固相萃取柱净化后,采用C₁₈色谱柱分离,以乙腈―0.1％甲酸(7∶3,V/V)为流动相洗脱,电喷雾正离子模式电离,选择离子监测模式检测。结果表明,药物浓度与峰面积在5~2000 ng/mL范围内呈现良好的线性关系,相关系数大于0.99,对空白猪肝组织进行5~500 μg/kg的药物添加回收试验,经统计分析获得平均回收率约为84.9%~88.1%,批内变异系数为8.2％~15.1%,批间变异系数为14.7％~16.5%。本方法对乙酰异戊酰泰乐菌素的检测限为0.76 μg/kg,定量限为2.51 μg/kg,方法灵敏、准确,适用于猪肝脏中乙酰异戊酰泰乐菌素残留的检测。

本试验旨在制备黄体酮聚乳酸微球,并考察其体外释药性能。以包封率、载药量为主要评价指标,考察制备黄体酮微球的主要影响因素,筛选出最佳工艺条件。扫描电子显微镜观察微球形态,紫外—可见分光光度法测定微球的包封率、载药量和体外释药特性。最佳工艺所制备的微球光滑、圆整、均匀、分散性好,包封率为(80.60±1.00)%,载药量为(10.63±0.05)%,在7 d内累积释药率达53.41%。制备微球包封率和载药量高,具有明显的缓释效果,能有效地延长药物作用时间。

猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)是引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原之一,该病毒在世界范围内广泛存在并呈地方性流行, 给生猪的繁殖、发展带来了巨大的经济损失,故防制猪细小病毒病非常重要。PPV VP2蛋白是病毒粒子的主要衣壳蛋白,在体外能自我装配成病毒样颗粒,并能刺激机体产生抗PPV中和抗体,且可作为抗原转运载体,所以研究VP2对PPV新型疫苗研制至关重要。文章综述了猪细小病毒结构蛋白VP2及其疫苗的研究进展。

为了探明苯扎溴铵－大蒜素复方消毒剂的杀菌效果,根据兽用消毒剂鉴定技术规范的相关规定,用不同稀释倍数(500、1000、2000、4000倍)的该消毒剂在不同时间段(1、5、10、20 min)对5种细菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、溶血性链球菌C型及蜡样芽孢杆菌)进行杀菌效果试验,同时以苯扎溴铵和大蒜油为对照试验组,观察和评价苯扎溴铵－大蒜素复方消毒剂的杀菌效果。结果表明在2000倍稀释的状态下该复方消毒剂对以上5种细菌表现出了完全的杀菌效果。因此,苯扎溴铵－大蒜素复方消毒剂在2000倍的稀释状态下能达到良好的杀菌效果,便于临床应用。

本研究通过在不同日龄对海兰褐蛋鸡进行新城疫灭活疫苗的免疫,探讨新城疫灭活疫苗的免疫间隔期。结果表明,开产后不管免疫2次、3次、4次新城疫灭活疫苗,抗体水平均在6 log2以上,且鸡日龄越大、免疫次数越多,高抗体滴度维持期越长。因此,建议从育成到鸡群淘汰的饲养全程中,合理搭配3~4次新城疫灭活疫苗的免疫足以维持6 log2以上的抗体水平,且此抗体水平可控制新城疫的流行。