鸡大肠杆菌ESBLs基因的克隆及序列分析

›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (10): 86-88.

鸡大肠杆菌ESBLs基因的克隆及序列分析

张晓凤¹, 张春辉¹, 于顺周²

1. 郑州牧业工程高等专科学校,河南郑州 450011;2. 上海海利生物药品有限公司,上海 201403

收稿日期:2011-03-11 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-10-20 发布日期:2011-10-20

Cloning and Sequence Analysis of ESBLs Gene from Escherichia coli in Chicken

ZHANG Xiao-feng¹, ZHANG Chun-hui¹, YU Shun-zhou²

1. Zhengzhou College of Animal Husbandry Engineering,Zhengzhou 450011, China;2. Shanghai Hile Bio-pharmaceutical Co.Ltd., Shanghai 201403, China

Received:2011-03-11 Revised:1900-01-01 Online:2011-10-20 Published:2011-10-20

摘要/Abstract

摘要： 分离纯化来自河南不同地区的鸡大肠杆菌菌株,按照NCCLS标准和双纸片协同试验法进行ESBLs基因表型鉴定。然后根据GenBank已发表的序列设计两对引物,选择阳性表型菌株并提取总DNA,进行PCR、克隆、阳性质粒测序,将测定的序列拼接后和参考菌株ESBLs基因序列比较分析。结果显示,15株大肠杆菌菌株有3株菌株含有β-内酰胺酶,为阳性菌株,这3株与2个参考株核苷酸序列同源性为98.9%~99.7%,氨基酸序列同源性为98.1%~99.2%。3株大肠杆菌阳性菌株序列ESBLs基因型均为TEM型,核苷酸有15个位点发生突变,其中6个位点突变引起氨基酸变异。

关键词: ESBLs基因; 克隆; 序列分析

Abstract: To purified the isolated E.coli in chickens from different area in Henan, screen phenotype for ESBLs according to NCCLS standards and the double-disc synergy method. Then according to sequences published in GenBank, designed two pairs of primers. The bacteria producing ESBLs were chose, extracted the total DNA, amplified with PCR,cloned, sequenced and analyzed. The results showed the three determinated sequences had 98.9% to 99.7% nucleotide sequence homology with the two reference sequence, amino homology was 98.1% to 99.2%. And there were 15 nucleotide mutations and 6 mutations of amino in the 3 determinated sequences.

Key words: ESBLs gene; clone; sequence analysis

中图分类号:

S852.61

张晓凤;张春辉;于顺周. 鸡大肠杆菌ESBLs基因的克隆及序列分析[J]. , 2011, 38(10): 86-88.

ZHANG Xiao-feng;ZHANG Chun-hui;YU Shun-zhou. Cloning and Sequence Analysis of ESBLs Gene from Escherichia coli in Chicken[J]. , 2011, 38(10): 86-88.

[1]	任建乐, 林铱婷, 姬康, 谭姗姗, 陈新新, 晋怡, 王颖, 牛胜, 梁立滨, 李俊平, 赵宇军, 田文霞. A型塞内卡病毒VP2蛋白多克隆抗体的制备及间接ELISA检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(2): 678-688.
[2]	王永飞, 邓博文, 刘晓艳, 哈尔勒哈·阿曼太, 郭嘉栋, 周正国, 蔡江, 李有文. 绵羊肺炎支原体EF-Tu蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(2): 689-699.
[3]	窦俊峰, 汪最, 李丽, 卢琴, 金鑫鑫, 凌小淳, 罗青平, 翟新国. A、B、J亚群禽白血病病毒混合感染的鉴定及gp85基因序列分析[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(1): 302-311.
[4]	于鑫, 胡玉苗, 李芳兵, 杨亚东, 赵金, 冯亚莉, 张莹. 疣鼻天鹅TLR4基因克隆及生物信息学分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(9): 3469-3479.
[5]	袁冬冬, 宋国华, 陈孟娟, 王智通, 柏中峰, 蔡含芳, 李明, 许会芬. 新西兰白兔CTSB、CTSS基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(9): 3499-3509.
[6]	刘海翔, 张佩佩, 邓思, 秦英惠, 姚伦广. 大口黑鲈弹状病毒G蛋白胞外区原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(9): 3762-3770.
[7]	王晨光, 隋志远, 张永杰, 张志帅, 李孝君, 邢凤. 多浪羊BMP7基因克隆、生物信息学分析及其在不同初情期阶段组织表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2629-2638.
[8]	邢珊珊, 李鑫, 余磊, 许会芬, 蔡含芳, 李明. 夏南牛SOX6基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2651-2660.
[9]	马天天, 张亚楠, 冯亚文, 岳怀宁, 王亚文, 苏恺, 袁晨, 逯纪成, 孙泰然, 薛文阁, 宋勤叶. 非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2832-2842.
[10]	任胜杰, 申宏利, 项勋, 代飞燕, 朱茂银, 邬佳莉, 胡志辉, 段纲, 常华. 红嘴鸥TLR7蛋白多克隆抗体制备及在DF-1细胞中的表达特征分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2865-2875.
[11]	索南吉, 李沛轩, 刘转霞, 王亭玮, 刘柯江, 谢东旭, 曾巍巍, 王雯慧. 双峰驼Cyp-A的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2896-2905.
[12]	罗世美, 赵瑶, 马鲜平, 张金阳, 易华山. 蓝舌病病毒NS4蛋白原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2923-2930.
[13]	焦琳琳, 成玉婷, 吴庆国, 吴双, 吴植, 朱善元, 钱莺娟. 鸭坦布苏病毒Capsid蛋白原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2395-2402.
[14]	欧云文, 潘琴, 汪洋, 代军飞, 任绍科, 张洋, 张杰. 猪细小病毒6型ORF2基因的截短表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2487-2495.
[15]	刘佳隆, 张译文, 张悦然, 孙奇娟, 陈建, 何雷, 贾艳艳, 丁轲, 余祖华. 鸡ELAVL1基因克隆、原核表达及生物信息学分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 1807-1817.