【目的】 克隆灵丘青背山羊长链脂酰辅酶A合成酶1(long-chain acyl-CoA synthetase 1，ACSL1)基因CDS区序列并进行生物信息学分析，探究ACSL1基因在灵丘青背山羊不同组织及皮下脂肪细胞分化过程中的表达规律。【方法】 根据GenBank中山羊ACSL1基因序列(登录号：XM_018041882.1)设计特异性引物，以灵丘青背山羊肝脏组织cDNA为模板，通过PCR扩增ACSL1基因CDS区序列并克隆、测序，与其他物种进行相似性比对及系统进化树构建，并采用在线软件对ACSL1蛋白进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR方法检测ACSL1基因在灵丘青背山羊不同组织以及ACSL1、ACACA、PPARγ、FASN基因在皮下脂肪细胞不同分化时期的表达情况。【结果】 灵丘青背山羊ACSL1基因CDS区序列全长2 100 bp，编码699个氨基酸。相似性比对发现，灵丘青背山羊ACSL1蛋白氨基酸序列与绵羊的相似性最高，达99.0%。系统进化树显示，灵丘青背山羊与绵羊的亲缘关系最近，与虎鲸的亲缘关系最远，且在不同物种进化过程中具有高度保守性。生物信息学分析发现，灵丘青背山羊ACSL1蛋白分子式为C₃₅₂₉H₅₅₆₇N₉₂₉O₁₀₀₀S₃₆，分子质量为78.2 ku，理论等电点为7.46，半衰期为30 h，不稳定系数为32.61。ACSL1蛋白为碱性疏水性蛋白，存在1个跨膜结构，无信号肽。ACSL1蛋白有49个磷酸化位点，主要在线粒体中发挥生物学功能。灵丘青背山羊ACSL1蛋白二级结构由α-螺旋(39.63%)、无规则卷曲(31.33%)、延伸链(20.74%)及β-转角(8.30%)组成。ACSL1蛋白与FASN、ACACA、LPL等10个蛋白可能存在互作。组织表达分析发现，ACSL1基因在灵丘青背山羊各组织中均有表达，其中在肝脏中表达量最高，且显著高于其他组织(P＜0.05)，在皮下脂肪、肾脏和心脏中表达量次之。检测山羊脂肪细胞不同分化时期基因的时序表达，结果显示，与分化第0天相比，山羊ACSL1基因表达量在分化第8天达到峰值(P＜0.05)；ACACA和FASN基因表达量均在分化第10天达到峰值(P＜0.05)；PPARγ基因表达量在分化第6天达到峰值(P＜0.05)。【结论】 本研究成功克隆了灵丘青背山羊ACSL1基因CDS区序列，并明确了其在山羊不同组织和脂肪细胞分化过程中的表达规律。ACSL1基因在肝脏和皮下脂肪组织中有较高的表达，ACSL1、ACACA、PPARγ、FASN基因表达量在脂肪细胞诱导分化过程中均呈现先升后降的趋势，研究结果为进一步探究ACSL1基因在山羊脂肪沉积过程中的分子机制提供了理论依据。

【目的】 了解腹泻猪群病毒混合感染情况及病毒感染下肠道微生物群落结构变化。【方法】 收集73份临床猪腹泻样品，使用单端100 bp读长(SE100)进行宏基因组测序。下机数据经FastQC工具质控获得clean data，利用BWA工具去除宿主序列获得unmapped data。使用Kraken 2工具将unmapped data比对到动物病原数据库进行物种分类注释并生成物种分类表。使用主成分分析(PCA)对数据降维处理，并使用每百万读数(RPM)进行数据归一化，利用Z-score统计方法生成热图进行差异分析可视化。使用MEGAHIT工具从头拼接病毒序列，使用BWA将unmapped data比对到contigs评估拼接效果，选择高质量contigs在NCBI上比对找到最相似序列，将ummapped data比对到该序列后提取一致序列，作为该病毒序列，使用IQ-TREE工具进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)S基因和猪星状病毒(PAstV)ORF1a基因遗传进化分析。【结果】 73份猪腹泻样品中检出多种病毒，阳性率分别为：PAstV 26.03%、猪嵴病毒(PKV)20.55%、猪轮状病毒(PoRV)19.18%、PEDV 19.18%、猪札幌病毒(PSaV)6.85%、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)4.11%。混合感染情况复杂，主要为PEDV+PAstV组合，在全部样品中占比为17.81%(13/73)，在混合感染样品中占比为30.95%(13/42)。不同病毒感染下肠道微生物结构发生变化，PEDV阳性组样品乳杆菌属(Lactobacillus)相对丰度高于阴性组，PAstV阳性组样品梭菌属(Clostridium)和密螺旋体属(Treponema)相对丰度高于阴性组。拼接得到2条PEDV全基因组序列SE18和SE22，均属于GⅡa谱系，以及4条PAstV ORF1a基因组序列SE18、PE31、PE36和PE70，SE18为PAstV2型，其余3条序列与HAstV-HMO-B株亲缘关系较近。【结论】 本研究通过宏基因组学技术揭示了临床腹泻猪群中PAstV和PEDV的高阳性率及混合感染情况，发现PEDV和PAstV感染显著改变了肠道微生物结构，为猪腹泻混合感染的防控提供了重要数据支持。

【目的】 探究徐州牛不同嫩度背最长肌间的基因表达差异，挖掘相关调控基因和信号通路，为进一步研究徐州牛肌肉生长调控的作用机制提供理论依据。【方法】 本研究以江苏地方特色牛种——徐州牛为研究对象，屠宰后对背最长肌进行剪切力测定，依据剪切力值大小分为高嫩度组6头(剪切力＜5.5 kg)和低嫩度组4头(剪切力＞7 kg)，并对两组肌肉组织进行转录组测序，对数据进行过滤、质控、比对、定量后使用R语言DEseq2包筛选差异表达基因并进行功能富集分析。对差异极显著基因胱抑素B(cystatin B，CSTB)进行物种相似性比对及蛋白理化性质等分析。【结果】 ①转录组结果显示，相对于低嫩度组，高嫩度组中有94个基因上调、37个基因下调，位于前二十的差异表达基因包括CSTB、VWF、DIRAS3、CDKN1A、CFB等。②GO和KEGG富集分析发现，差异表达基因主要涉及凝血、免疫效应、伤口愈合等生物学过程，以及参与脂质代谢的Wnt信号通路等。基因通路网络分析发现，生物过程和分子功能中共同存在CSTB、PRKG1、PLAUR等差异表达基因。③牛CSTB基因与羊的相似性最高，为97.96%，其次是猪；蛋白理化性质发现，CSTB含有98个氨基酸残基，不稳定系数为33.17(＜40)，为稳定蛋白；蛋白二级结构预测显示，CSTB主要是由延伸链和无规则卷曲构成；STRING在线数据库分析结果显示，CSTB可能与CTSH、WC1-10、CTSB等存在相互作用。【结论】 本研究筛选出影响徐州牛肌肉不同嫩度的差异表达基因CSTB、VWF、DIRAS3、CDKN1A、CFB等。研究结果可为牛肉品质研究提供理论依据和数据支撑。

【目的】 克隆马山黑山羊丝裂原活化蛋白激酶8(mitogen-activated protein kinase 8,MAPK8)基因序列，并对该基因进行生物信息学分析，构建其真核表达载体，为山羊乳腺发育及MAPK8基因在转分化过程中的研究提供试验材料。【方法】 参考山羊MAPK8基因序列(GenBank登录号：XM_018042429.1)设计引物，利用PCR扩增马山黑山羊MAPK8基因CDS序列并克隆；分别使用DNAStar和Mega 11.0软件进行序列比对及系统进化树构建，并利用ProtParam、ProtScale等软件进行生物信息学分析；构建真核表达载体并进行慢病毒包装后收集病毒液上清，感染马山黑山羊成纤维细胞，并通过实时荧光定量PCR检测感染病毒组和对照组MAPK8基因表达水平。【结果】 马山黑山羊MAPK8基因CDS区全长1 155 bp，编码384个氨基酸，蛋白分子质量为43.98 ku，分子式为C₁₉₆₈H₃₁₁₄N₅₂₈O₅₆₉S₂₂，等电点(pI)为7.13。相似性比对结果显示，马山黑山羊与不同物种间MAPK8基因氨基酸序列相似性均高于85%，表明MAPK8氨基酸序列较为保守。系统进化树显示，马山黑山羊MAPK8基因氨基酸序列与牛的亲缘关系最近，与斑马鱼的亲缘关系最远。马山黑山羊MAPK8蛋白为亲水性，不属于跨膜蛋白，主要分布在细胞质(52.2%)、线粒体(26.1%)、细胞核(17.4%)和细胞膜(4.3%)中，含有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化结构域(第26―321位氨基酸处)。MAPK8蛋白二级结构包括无规则卷曲、α-螺旋、β-转角和延伸链。互作蛋白预测显示，MAPK8蛋白可能与MAPK9、JUN、TP53、FOS、JUNB、MAP2K4、MAP2K7、MAPK8IP1和NFATC3蛋白存在互作。试验成功构建MAPK8基因慢病毒真核表达载体pCDH-CMV-MAPK8-mchery-Puro，转染马山黑山羊成纤维细胞后产生红色荧光信号，试验组细胞内MAPK8基因表达量极显著高于对照组(P＜0.01)。【结论】 本研究成功克隆了马山黑山羊MAPK8基因CDS序列，并构建了pCDH-CMV-MAPK8-mchery-Puro真核表达载体，为山羊MAPK8基因功能及应用研究提供了基础数据。

动物传染病是对养殖业危害最严重的一类疾病，不仅造成动物大量死亡及其产品的损失，而且对人类健康构成重大威胁。因此，快速、准确和廉价的病原体检测方法对动物传染病防控具有重要意义。规律成簇间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)及相关蛋白(CRISPR associated protein,Cas)系统是一种灵敏、特异的生物系统，可快速识别病原体特异性核酸，在原核生物免疫系统中发挥重要作用。基于CRISPR-Cas系统的病原体检测方法具有特异性强、灵敏度高和操作便捷等优点，在动物病原微生物快速检测中具有良好的应用前景。笔者系统介绍了Ⅱ型(cas9)、Ⅴ型(cas12a、cas12b、cas14a)和Ⅵ型(cas13a)CRISPR-Cas系统，简述其工作原理和基于CRISPR-Cas系统建立的NASBA-CRISPR、CAS-EXPAR、CASLFA、DETECTR、CORDS、HOLMESv2、SHERLOCK、SHERLOCKv2、DETECTR-Cas14等快速检测方法在动物病原微生物检测中的研究及应用现状，同时对CRISPR-Cas系统在动物病原检测应用中面临的问题进行了分析，包括crRNA的特异性、与扩增技术联用、样本采集和运输方式等因素对定量检测产生的影响，并提出了一些解决方案，旨在为更深入地了解CRISPR-Cas技术在动物病原微生物检测上的应用提供参考。

病毒是引起疾病的重要微生物之一，严重危害了人类和动物的健康及生命安全。随着病毒的不断变异与重组，如流感病毒、新型冠状病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等，使得疫苗提供的保护有限。同时，有效抗病毒药物的缺乏使得病毒感染后治疗困难，因此，迫切需要寻找新的、安全、有效的防控方法来预防病毒感染。中药因具有成分安全、不易产生耐药性且能多途径、多靶点作用于病毒等优点而被广泛应用于抗病毒研究中。传统中药为抗病毒药物提供了丰富的基础，但传统试验手段进行抗病毒药物研发耗时久且工作量大，组学技术的发展为抗病毒药物研发提供了新的视角，利用组学数据分析药物和疾病之间的关系已成为筛选、评价药物疗效和发现新的药物靶点的有力手段。因此，笔者总结分析了转录组学、蛋白质组学、代谢组学及多组学联合分析在中药抗病毒中的研究进展，通过不同组学视角分析中药在抗病毒研究中的应用，不仅有助于深入理解中药的抗病毒机制，还可为抗病毒药物的研发和优化提供科学依据。

【目的】 克隆获得和田羊皮肤角蛋白79(keratin 79，KRT79)基因，探究雄激素对和田羊皮肤结构的影响，了解KRT79在雄激素影响和田羊皮肤结构过程中发挥的作用，为深入研究KRT79在绵羊皮肤中的功能及雄激素对KRT79基因表达调控的机制奠定基础。【方法】 选取15只2岁和田母羊，随机分为5组，采用肌内注射的方法对对照组和田羊注射玉米油，对4个试验组和田羊分别注射1、2、3、4 mg/kg BW睾酮，每3天注射一次，共处理42 d，在第42天采集和田羊背部皮肤组织。从对照组和田羊皮肤中提取总RNA，PCR扩增、克隆KRT79基因CDS区序列并测序。利用DNAStar软件对和田羊KRT79基因序列与绵羊等物种相应的基因序列进行比对，采用Mega 5.0软件绘制各物种KRT79基因系统进化树。使用生物信息学在线网站分析KRT79蛋白的理化性质及结构特征。通过HE染色观察睾酮处理的和田羊皮肤结构变化，使用实时荧光定量PCR和Western blotting检测分析不同浓度睾酮处理的和田羊皮肤中KRT79基因和蛋白表达量的差异，并通过免疫荧光染色探究睾酮对KRT79蛋白在和田羊皮肤中表达分布的影响。【结果】 和田羊KRT79基因CDS区序列长1 614 bp，与绵羊的相似性为99.9%。系统进化树分析表明，和田羊KRT79基因与绵羊的进化关系最近，与小鼠的进化关系最远。和田羊KRT79基因编码537个氨基酸，是一种不稳定的亲水性蛋白，KRT79蛋白的二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成。形态学分析结果表明，睾酮处理后和田羊皮肤中皮脂腺面积增大，数量变多。实时荧光定量PCR、Western blotting和免疫荧光结果表明，睾酮处理后和田羊皮肤中KRT79基因和蛋白的表达水平显著高于对照组(P＜0.05)，KRT79蛋白主要分布于和田羊皮肤的皮脂腺、表皮和毛囊区域。【结论】 和田羊KRT79基因CDS区长1 614 bp，是一种不稳定的亲水性蛋白。雄激素刺激能显著促进和田羊皮肤的皮脂腺面积增大和数量变多，并促进皮肤中KRT79基因和蛋白的表达。研究结果为深入探讨雄激素对和田羊皮肤的影响及其作用机制提供了理论依据，同时为解决由雄激素引起的皮肤脂质代谢异常和角蛋白失调疾病治疗方法的研究提供了参考。

【目的】 探索不同浓度硬脂酸对奶山羊乳腺上皮细胞(GMECs)活力和乳脂合成的影响。【方法】 以体外培养的GMECs为试验材料，采用不同浓度的硬脂酸(0、12.5、25、50、100、200 μmol/L)处理GMECs 36 h后，通过CCK-8法检测其对细胞活力的影响，采用细胞甘油三酯检测试剂盒检测其对细胞甘油三酯含量的影响；选择对细胞活力无抑制作用的最大浓度硬脂酸处理GMECs，油红O染色法检测硬脂酸对细胞中脂滴聚积的影响；采用实时荧光定量PCR检测乳脂合成相关基因mRNA水平的变化。【结果】 硬脂酸浓度在0～100 μmol/L范围时对细胞活力无显著影响(P>0.05)，而当硬脂酸浓度为200 μmol/L时GMECs的活力显著低于对照组(P＜0.05)。与对照组相比，100 μmol/L硬脂酸组GMECs内甘油三酯含量和脂滴聚积量显著或极显著增加(P＜0.05；P＜0.01)。实时荧光定量PCR结果表明，与对照组相比，100 μmol/L硬脂酸处理后，GMECs内白细胞分化抗原36(CD36)和二酰甘油-O-酰基转移酶同源物1(DGAT1)基因mRNA表达量极显著或显著升高(P＜0.01；P＜0.05)；心脏型脂肪酸结合蛋白3(FABP3)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)和叉头框转录因子O1(FoxO1)基因的mRNA表达量极显著或显著降低(P＜0.01；P＜0.05)，而脂肪酸合成酶(FASN)和固醇调节元件结合蛋白1(SREBF1)基因的mRNA表达无显著影响(P＞0.05)。【结论】 100 μmol/L硬脂酸能通过调控乳脂代谢相关基因的表达，促进GMECs内甘油三酯合成及脂滴分泌。本研究为外源添加长链脂肪酸调控乳脂合成代谢提供参考，对进一步提高奶山羊泌乳性能和乳品质具有重要意义。

山羊肉具有肉质细嫩、脂肪和胆固醇含量低等特点，深受消费者喜爱。骨骼肌是动物机体的重要组成部分，很大程度上影响山羊的产肉量和肉品质。许多基因、信号通路和分子参与调控骨骼肌的生长发育，如生肌调节因子家族(MRFs)、配对盒基因家族(PAX)、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路等。非编码RNA(ncRNA)包括微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)、环状RNA(circRNA)等，通过对这些基因和信号通路进行调控，进而在骨骼肌的生长发育过程中发挥重要作用。如miR-495-3p、miR-101a、miR-27b、lncR-125b等能够促进骨骼肌卫星细胞的分化；miR-99b-3p能够促进骨骼肌卫星细胞增殖。部分lncRNA通过充当miRNA海绵，调节靶基因的表达，进而调控骨骼肌的生长发育。对参与调控山羊骨骼肌发育的ncRNA进行研究，有利于了解山羊骨骼肌的生长发育过程，对于肉品质的改善也有重要作用。作者简要介绍了山羊骨骼肌发育相关miRNA、lncRNA、circRNA的功能及相关的调控机制，为进一步研究ncRNA调控山羊骨骼肌发育提供参考。

【目的】 反刍动物机体氮的利用是影响养殖效益的重要因素，同时其代谢产物会对环境造成一定的污染。试验旨在探究添加烟酰胺(nicotinamide，NAM)对泌乳期奶牛瘤胃发酵参数、微生物蛋白产量和微生物群落的影响，以期通过烟酰胺调控奶牛瘤胃发酵及微生物区系，提高机体氮的利用效率。【方法】 选择泌乳日龄(170 d±50 d)、胎次(2.23±0.62)、产奶量(36.17 kg±7.40 kg)相近且健康的泌乳中期荷斯坦奶牛40头，随机分为4组，每组10头。对照组奶牛饲喂全混合饲粮(TMR)并灌服50 mL自来水，NAM组(NAM7、NAM11、NAM15)奶牛分别在TMR基础上灌服7、11、15 g/d烟酰胺。试验期75 d，其中预试期15 d，正试期60 d。于试验第30、60天晨饲前采集瘤胃液样品，于试验0―2、28―30、58―60 d收集尿液样品，分别用于测定pH、乙酸和丙酸等挥发性脂肪酸、瘤胃微生物蛋白产量及瘤胃微生物区系等指标。【结果】 ①与对照组相比，NAM7组奶牛瘤胃pH显著升高(P＜0.05)，NAM组乙酸/丙酸值均极显著降低(P＜0.01)。NAM7组乙酸/丙酸值显著或极显著低于NAM11和NAM15组(P＜0.05；P＜0.01)。试验处理和试验期之间的互作效应不显著(P＞0.05)。②NAM7组奶牛尿液中尿囊素、PD衍生物浓度和瘤胃微生物蛋白含量均显著高于对照组(P＜0.05)；尿酸浓度显著高于对照组及NAM11、NAM15组(P＜0.05)。试验处理和试验期之间的互作效应不显著(P＞0.05)。③NAM组奶牛瘤胃液Chao1指数和观察到的物种数均显著高于对照组(P＜0.05)；NAM7和NAM11组螺旋体门相对丰度显著低于对照组(P＜0.05)；NAM7和NAM15组琥珀酸弧菌属相对丰度显著高于对照组(P＜0.05)，沙特尔沃思氏菌属相对丰度显著低于对照组(P＜0.05)。【结论】 在本试验条件下，烟酰胺可以提高泌乳期奶牛瘤胃pH、微生物蛋白产量及拟杆菌门、变形菌门、瘤胃球菌属的相对丰度，降低乙酸浓度、乙酸/丙酸值及厚壁菌门、普雷沃氏菌属的相对丰度。推荐烟酰胺添加量为7 g/d。

【目的】 研究饲粮中添加非淀粉多糖酶对三层立体笼养肉鸭生长性能、屠宰性能、养分代谢率及氮排放的影响。【方法】 试验采用2×3双因子试验设计，设置2个饲粮复合非淀粉多糖酶添加水平(0和500 mg/kg)，3个饲养笼层位(上层、中层和下层，距离地面高度分别为1.8、1.2和0.6 m)。将体重大小一致、健康的21日龄北京鸭840只随机分为6个处理组，每个处理组10个重复，每个重复14只(公母各半)，饲养阶段为21～42日龄。饲养试验结束后，记录42日龄北京鸭(空腹6 h)的体重和采食量，计算22～42日龄试验鸭平均体重、平均日增重、平均日采食量和料重比；采集42日龄北京鸭胸肌、腿肌、腹脂并称重，计算胸肌率、腿肌率、腹脂率；于试验鸭第41、42日龄收集试验肉鸭排泄物，计算营养物质表观代谢率。【结果】 ①随着饲养笼的层位下移，肉鸭42日龄体重、22～42日龄平均日增重和平均日采食量均显著降低(P＜0.05)；饲粮中添加复合非淀粉多糖酶可显著降低22～42日龄肉鸭平均日采食量和料重比(P＜0.05)。②饲粮中添加复合非淀粉多糖酶和饲养笼层位对肉鸭胸肌、腿肌、腹脂重量和比率均无显著影响(P＞0.05)。③随着饲养笼的层位下移，肉鸭粗蛋白质代谢率极显著降低(P＜0.01)；饲粮中添加复合非淀粉多糖酶极显著提高肉鸭能量、粗蛋白质和干物质代谢率(P＜0.01)，且饲粮中添加非淀粉多糖酶和饲养笼层位对肉鸭粗蛋白质代谢率存在显著的互作效应(P＜0.05)。④随着饲养笼的层位下移，肉鸭粗蛋白质和氮摄入量极显著降低(P＜0.01)，氮排出量极显著升高(P＜0.01)；饲粮中添加复合非淀粉多糖酶极显著降低肉鸭粗蛋白质摄入量和氮排放量(P＜0.01)。【结论】 在肉鸭立体笼养中，饲粮中添加复合非淀粉多糖酶可降低育肥期肉鸭采食量和料重比以及提高干物质、能量和粗蛋白质代谢率，降低粗蛋白质摄入量和氮排放量；饲养笼层位显著影响42日龄肉鸭体重、平均日增重、平均日采食量和粗蛋白质代谢率、粗蛋白质摄入量、氮摄入量和氮排出量。

【目的】 试验旨在研究添加不同水平木薯粉对文昌鸡生产性能、血清生化及免疫指标的影响。【方法】 选取遗传背景一致、体重相近(1 215.56 g±3.73 g)的81日龄健康文昌鸡母鸡600只，随机分入5个处理组，每组设6个重复，每重复20只鸡，分别饲喂添加0(CM0组)、5％(CM5组)、10％(CM10组)、20％(CM20组)和25％(CM25组)木薯粉的饲粮。试验期40 d。试验结束后称重，计算生长性能；从每个重复选取2只鸡翅静脉采血，测定血清生化指标和免疫指标；屠宰后测定屠宰性能及脏器系数。【结果】 ①与CM0组相比，CM10、CM20和CM25组文昌鸡日增重均显著增加(P＜0.05)，料重比均显著降低(P＜0.05)。②添加不同水平木薯粉对文昌鸡屠宰性能及脏器系数均未产生显著影响(P＞0.05)。③与CM0组相比，CM20和CM25组文昌鸡血清葡萄糖水平显著提高(P<0.05)；CM20组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著提高(P＜0.05)；CM5组文昌鸡血清免疫球蛋白A(IgA)含量显著升高(P＜0.05)；CM25组文昌鸡血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著降低(P＜0.05)。【结论】 添加适量木薯粉可提高文昌鸡生产性能，还能改善其糖代谢及抗氧化性能。推荐81～120日龄文昌鸡饲粮中木薯粉的适宜添加水平为20％。

【目的】 试验旨在研究黑曲霉(Aspergillus niger)对奶牛瘤胃体外发酵、甲烷(CH₄)排放及微生物区系的影响，为黑曲霉作为饲料添加剂在奶牛生产中的合理应用提供理论依据。【方法】 采用体外瘤胃发酵装置，共分为4组：A(对照组)、B、C和D组，分别向每组发酵瓶(含人工饲料及培养液)中添加0、15、20、25 mg黑曲霉(孢子浓度≥1.0×10⁹/g)；每种处理设3次重复，另设3个空白组以校正气体和CH₄产量(空白组不含饲料，只有培养液)；在培养开始后的第3、6、9、12、24 h，测量产气量和CH₄产量；培养24 h后，分析发酵液的pH、氨态氮(NH₃-N)、微生物蛋白(MCP)、挥发性脂肪酸(VFA)以及瘤胃微生物群落多样性。【结果】 与A组相比，B、C和D组的体外瘤胃发酵液pH显著升高(P＜0.05)，NH₃-N含量显著降低(P＜0.05)，且C和D组的MCP含量显著高于A组(P＜0.05)，而B组则显著低于其他3组(P＜0.05)。各组之间各种VFA含量、乙酸/丙酸比值以及总挥发性脂肪酸(TVFA)含量均无显著差异(P＞0.05)。A组CH₄产量占总产气量比值显著高于B、C和D组(P＜0.05)。16S rRNA测序表明，与A组相比，B组瘤胃微生物Alpha及Beta多样性指数无显著差异(P>0.05)。在瘤胃门水平前10种细菌中，其中变形菌门和拟杆菌门为奶牛瘤胃中的优势菌门，且A、B两组差异不显著(P＞0.05)；螺旋体菌门与丙酸和NH₃-N含量呈显著负相关(P＜0.05)；纤维杆菌门与pH呈显著正相关(P＜0.05)，与戊酸、丁酸、乙酸、CH₄和NH₃-N含量呈显著负相关(P＜0.05)。在瘤胃属水平前10种细菌中，其中普氏菌属和理研菌科RC9为奶牛瘤胃中的优势菌属；与A组相比，B组琥珀酸弧菌属的相对丰度显著降低(P＜0.05)。理研菌科RC9与NH₃-N含量呈显著正相关(P＜0.05)；拟杆菌目RF16细菌属与戊酸、丁酸、乙酸、CH₄和NH₃-N含量呈显著正相关(P＜0.05)。与A组相比，B组细菌和产甲烷菌的绝对含量显著增加(P＜0.05)；B组原虫的绝对含量显著减少(P＜0.05)。【结论】 黑曲霉的添加在改善奶牛瘤胃发酵环境的同时，通过调节瘤胃内微生物群落结构，影响VFA、NH₃-N、MCP的产生和CH₄的排放，研究结果揭示了微生物干预措施对提升奶牛健康和生产效率潜在的复杂作用机制。

色氨酸(tryptophan，Trp)是功能性必需氨基酸之一。色氨酸及其细菌代谢产物对维持宿主肠道稳态，促进机体生长性能和代谢极为重要。色氨酸通过吲哚途径、犬尿氨酸途径和5-羟色胺途径等代谢过程，产生多种具有益生功能的细菌代谢产物。色氨酸及其代谢产物能够促进肠道上皮细胞的紧密连接蛋白表达，增加肠道黏膜屏障中黏蛋白的合成与分泌，此外，色氨酸及其代谢产物通过促进肠道微生物中一些有益菌的定植，抑制致病菌的增殖，维持菌群稳定性和多样性。色氨酸及其细菌代谢产物对畜禽生长性能的积极影响，包括提高采食量、日增重，缓解生长阻碍及提高畜禽产品品质等。然而，目前对色氨酸细菌代谢产物在畜禽肠道健康、营养代谢和生长性能中的作用机制尚缺乏系统性研究。未来的研究可探讨色氨酸细菌代谢产物如何影响畜禽肠道微生物定植，如何介导不同信号通路调控肠道屏障功能。作者综述了近些年色氨酸及其细菌代谢产物对畜禽肠道黏膜屏障及其在调节畜禽生长性能和免疫反应中的作用，旨在为色氨酸细菌代谢产物应用于畜禽生产提供新思路、新方法。

【目的】 研究添加不同复合菌对黑水虻幼虫粉发酵产物组成的影响，以期提高其营养价值，减少不利影响。【方法】 试验分为4个处理，以接种枯草芽孢杆菌+植物乳杆菌(TB)、黑曲霉+酿酒酵母(TF)以及4株菌混合菌剂(TM)的作为发酵处理，以不接菌处理作为对照组(CK)，每个发酵处理按10%(V/W)的比例接种菌悬液至黑水虻幼虫粉中(CK加等量无菌水)，置于30 ℃条件下进行为期5 d的有氧固态发酵，发酵完成后取样烘干测定粗脂肪、粗蛋白质、几丁质、粗灰分、脂肪酸谱及氨基酸谱。【结果】 ①在黑水虻幼虫粉发酵产物组成方面，相较于CK，TM处理会显著增加粗脂肪含量(P＜0.05)，其他发酵处理对粗脂肪含量无显著影响(P＞0.05)；各发酵处理会一定程度降低粗蛋白质含量，其中TF处理达显著水平(P＜0.05)；各发酵处理会显著降低几丁质含量(P＜0.05)，其中TM处理减少最多，其次为TB处理；各发酵处理对粗灰分含量无显著影响(P＞0.05)。②在黑水虻幼虫粉发酵产物脂肪酸组成方面，相较于CK，TB处理会提高短、中链脂肪酸的比例，显著降低不饱和脂肪酸含量(P＜0.05)，对多不饱和脂肪酸(PUFA)中n-6/n-3值的影响不大；TF和TM处理会显著提高n-6 PUFA的比例(P＜0.05)，显著降低n-3 PUFA和饱和脂肪酸的比例(P＜0.05)。③在黑水虻幼虫粉发酵产物氨基酸组成方面，相较于CK，各发酵处理会显著降低非必需氨基酸、必需氨基酸及总氨基酸含量(P＜0.05)，其中仅有TF处理会显著提高第一限制性氨基酸蛋氨酸的含量(P＜0.05)。在各发酵处理的蛋白质评分中，TF处理评分最高，其次为TB处理。【结论】 添加复合菌可优化黑水虻幼虫粉发酵产物组成，提高其营养价值，不同复合菌组合的发酵产物组成具有明显差异。

【目的】 本研究旨在探讨姜黄素(curcumin,CUR)对热应激条件下育成牛生长性能、营养物质表观消化率和血清生化指标的影响，探究热应激条件下肉牛饲粮中适宜的姜黄素添加水平。【方法】 选取健康、体重接近(286.36 kg±3.95 kg)的32头延边黄牛育成牛，随机分成4组，每组8个重复，每个重复1头牛。各组姜黄素添加水平分别为0、100、200、300 mg/kg DM饲粮，分别为对照组、100 CUR组、200 CUR组、300 CUR组。预饲期7 d，正式试验期30 d。试验期间测定每日各时间点牛舍温度及相对湿度，计算温湿指数(temperature humidity index,THI)(试验期间牛舍THI≥72，试验牛均处于热应激状态)；试验第31天早上，试验牛称重、测量体尺指标；颈静脉采血，检测血清生化指标；采用全收粪法收集新鲜粪便，测定饲料养分表观消化率。【结果】 与对照组相比，200 CUR组牛平均日增重、体斜长和胸围均显著提高(P＜0.05)，料重比显著降低(P＜0.05)；饲料粗脂肪、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观消化率均显著提高(P＜0.05)；血清白蛋白、甲状腺素含量显著提高(P＜0.05)，谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性、甘油三酯含量显著降低(P＜0.05)；丙二醛水平显著降低(P＜0.05)。与对照组相比，各试验组牛体高、粗蛋白质消化率、血清总蛋白、球蛋白含量均显著提高(P＜0.05)；血清热休克蛋白70、皮质醇水平均显著降低(P＜0.05)；100 CUR组牛血清免疫球蛋白A显著提高(P＜0.05)；200 CUR和300 CUR组牛血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽-过氧化物酶活性及总抗氧能力均显著提高(P＜0.05)。【结论】 在热应激条件下，饲粮中添加200 mg/kg DM 姜黄素可以提高育成期延边黄牛的生长性能和饲料养分表观消化率，提高机体抗氧化能力。

植物精油(PEO)是天然植物提取物的主要种类之一，具有较好的抗菌、抗氧化、抗炎和加强机体免疫能力等作用。PEO本身降解速度快、半衰期短并且不会在机体内蓄积，因此被公认为是一种无毒性、纯天然的绿色新型植物添加剂。PEO通过使菌体的细胞膜发生超极化，破坏细胞稳态，从而发挥抗菌作用；通过清除机体的自由基、抑制细胞膜脂质过氧化、增强抗氧化物酶活性提高机体抗氧化能力；还通过抑制促炎细胞因子的表达、减少机体NO、前列腺素E₂含量以及活性氧的合成降低机体患炎症的风险，缓解机体炎症。在鸡生产性能方面，PEO可以提高鸡的采食量、体增重、饲料利用率，降低料重比。在鸡蛋品质方面，PEO可以提高蛋壳厚度和强度、蛋重和蛋质量、蛋黄颜色评分以及哈氏单位。在鸡肉品质方面，PEO可以降低鸡血清和大腿肌肉总饱和脂肪酸含量，增加血清和大腿肌肉总多不饱和脂肪酸，以及降低鸡肉的滴水损失。在鸡肠道菌群和肠道形态结构方面，PEO可以增加鸡肠道益生菌的数量，减少致病菌的数量，并且提高鸡十二指肠、回肠、盲肠的绒毛高度、隐窝深度以及绒隐比。在鸡血清生化和免疫性能方面，PEO可以改善机体代谢水平，增加机体细胞免疫反应和体液免疫反应。作者综述了PEO的生物学功能及其作用机理，阐述了其在鸡生产中的应用及其作用机制，以期为PEO在鸡生产中的实际应用提供更多的理论参考。

【目的】 通过研究不同剂量枯草芽孢杆菌对保育猪生长性能、肠道黏膜形态、血清生化及免疫指标的影响，探讨其在保育猪养殖中添加的最佳剂量，为枯草芽孢杆菌的高效应用提供参考。【方法】 选取240头体况相近的保育猪，平均分为4组，每组6个重复，每个重复10头猪。对照组猪采食基础饲粮，3个试验组猪分别采食在基础饲粮中添加200、400、800 mg/kg枯草芽孢杆菌(活菌数分别为2.0×10⁹、4.0×10⁹、8.0×10⁹ CFU/kg)的饲粮。试验期60 d。试验结束时从各重复中随机选取1头猪，采集血液、空肠和回肠样品，测定保育猪生长性能、肠道黏膜形态及血清生化和免疫指标。【结果】 与对照组相比，饲粮中添加400和800 mg/kg枯草芽孢杆菌能够显著提高保育猪终末体重和平均日增重(P＜0.05)，显著降低料重比(P＜0.05)；显著提高保育猪回肠、空肠的绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度比值(P＜0.05)，显著降低回肠和空肠的隐窝深度(P＜0.05)；显著提高保育猪血清中白蛋白、总蛋白、免疫球蛋白A、免疫球蛋白G和白介素-2含量(P＜0.05)，显著降低肿瘤坏死因子-α含量(P＜0.05)；添加200 mg/kg枯草芽孢杆菌对保育猪生长性能、肠道黏膜形态、血清生化及免疫指标均无显著影响(P＞0.05)。【结论】 在保育猪饲粮中添加枯草芽孢杆菌可以提高其生长性能，优化肠道黏膜结构，改善机体蛋白质周转代谢水平和免疫功能。综合考虑，添加剂量以400 mg/kg(活菌数4.0×10⁹ CFU/kg)为宜。

肌苷酸(inosine monophosphate，IMP)作为嘌呤代谢的中间产物，参与细胞内的能量代谢与信号传导。同时，肌苷酸是畜禽肉中的关键风味前体物质，与氨基酸、糖类等物质发生复杂相互作用产生香气化合物，显著提升畜禽肉鲜味和香味。肌苷酸含量是肉质风味的重要评价指标，也是影响畜禽肉产品经济价值的重要因素。因此，肌苷酸对肉品质的影响、肌苷酸沉积的遗传调控机制备受关注。肌苷酸的合成与代谢受到众多基因的网络式调控。随着现代分子生物学技术的发展，研究人员深入解析肌苷酸的合成与代谢途径，揭示了若干关键酶和调控基因。目前，多组学技术已广泛应用于畜禽重要经济性状的遗传机制解析，畜禽肌肉肌苷酸沉积的调控机制有望进一步突破。文章主要对畜禽肌肉肌苷酸的研究进展进行综述，介绍了肌苷酸的结构和检测方法，简述了肌苷酸对肉品质的影响，回顾了肌苷酸合成与代谢作用机制，分析了影响肌苷酸合成代谢的主要因素等，为深入研究肌苷酸的合成与代谢机制、畜禽肉质风味调控机制和畜禽遗传育种改良提供理论参考。

【目的】 探究辣椒油树脂(oleoresin capsicum，OC)对育肥牛血清生化、免疫及抗氧化指标的影响，为辣椒油树脂在育肥牛饲养生产中的应用提供理论依据。【方法】 选取体况良好、月龄相近(15.5±0.5)、体重相近(484.73 kg±48.42 kg)的西门塔尔牛杂交牛48头，采用随机区组设计分为4组，每组12个重复，每个重复1头牛。对照组牛饲喂牛场原有饲粮；试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组牛在牛场原有饲粮基础上分别添加4、8和12 g/d 辣椒油树脂。预试期7 d，正试期90 d。试验结束后采集血样，测定血清生化、免疫和抗氧化指标。【结果】 与对照组相比，①试验Ⅱ组牛血清中总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量显著增加(P＜0.05)，而尿素氮(BUN)含量显著降低(P＜0.05)。②试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组牛血清中免疫球蛋白A(IgA)含量均显著增加(P＜0.05)，白细胞介素-1(IL-1)、IL-2和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均显著降低(P＜0.05)；试验Ⅰ、Ⅱ组牛血清中IgM、IL-4含量均显著增加(P＜0.05)，γ-干扰素(IFN-γ)含量显著降低(P＜0.05)；试验Ⅱ组牛血清中IgG含量显著增加(P＜0.05)，而试验Ⅲ组牛血清中IgG、IgM、IL-4、IFN-γ含量均无显著变化(P＞0.05)。③试验Ⅰ、Ⅱ组牛血清中总抗氧化能力(T-AOC)及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性均显著增加(P＜0.05)，丙二醛(MDA)含量显著降低(P＜0.05)；试验Ⅱ组牛血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著增加(P＜0.05)；试验Ⅲ组牛血清中各项抗氧化指标均无显著变化(P＞0.05)。【结论】 饲粮中添加适量辣椒油树脂可在一定程度上提高育肥牛机体的抗氧化力和免疫力。本试验条件下，在育肥牛饲粮中添加8 g/d辣椒油树脂时提高机体抗氧化力和免疫力的效果最佳。

沼泽红假单胞菌作为一种益生菌，不仅代谢功能强大，而且营养丰富，富含多种氨基酸、维生素、类胡萝卜素和辅酶Q等生物活性物质，具有多种生物功能。一方面，沼泽红假单胞菌可以通过产生相应的代谢酶来降解和同化水体中的氮、磷等化合物，从而净化水质；另一方面，沼泽红假单胞菌通过提供营养物质、提高消化酶活性和增加肠道有益菌丰度，从而促进水产动物生长。此外，沼泽红假单胞菌可以通过提高免疫相关酶活性来增强非特异性免疫、调节信号转导通路来激活特异性免疫和产生抗菌物质或竞争生态位来抑制病原菌生长，从而增强水产动物的抗病性。在水产集约化养殖模式和饲料“禁抗”背景下，沼泽红假单胞菌因具有改善水质、提高动物生长性能和增强免疫力等重要功能，作为水质净化剂和饲料添加剂被广泛应用于水产养殖中。笔者系统总结了沼泽红假单胞菌在水产养殖中的研究进展，并对未来的研究方向进行了展望，以期为沼泽红假单胞菌在水产养殖中的深入研究和应用提供参考。

【目的】 研究复合菌培养物对蒙寒杂交肉羊生长性能、免疫功能及疫苗抗体效价的影响。【方法】 选取健康状况良好，体重相近的1.5月龄蒙寒杂交公羔羊40只，随机分为2组：试验组和对照组；每组4个重复，每个重复5只羔羊。对照组肉羊饲喂基础饲粮，试验组肉羊在饲喂基础饲粮的基础上每只羊额外饲喂复合菌培养物30 g/d，试验第16天给各组羊注射A型口蹄疫和羊痘疫苗，预试期7 d，正试期90 d。试验第0、30、60和90天晨饲前称重并采血分离血清，测定羔羊生长性能、免疫及抗氧化指标；试验第15、30和45天采血分离血清，测定A型口蹄疫和羊痘疫苗抗体效价。【结果】 试验第90天,试验组肉羊平均体重显著高于对照组(P＜0.05)；试验0～90 d，试验组肉羊平均日采食量(ADFI)与料重比(F/G)与对照组无显著差异(P＞0.05)，平均日增重(ADG)较对照组显著提高(P＜0.05)。试验第90天，与对照组相比，试验组肉羊血清中溶菌酶(LZM)活性、白细胞介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及总抗氧化能力(T-AOC)均显著提高(P＜0.05)，丙二醛(MDA)含量显著降低(P＜0.05)；试验第45天，与对照组相比，试验组肉羊痘疫苗抗体效价显著提高(P＜0.05)，A型口蹄疫疫苗抗体效果差异不显著(P＞0.05)。【结论】 添加复合菌培养物能显著提高蒙寒杂交肉羊生长性能，改善免疫功能与抗氧化功能，并能提高疫苗抗体效价。

【目的】 在体外成熟液(IVM)中添加不同来源的卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)对日本黑牛(和牛)活体采卵(OPU)卵母细胞进行成熟培养，研究其体外受精(IVF)的胚胎在体外培养(IVC)与体内发育的潜能。【方法】 按照3×2试验设计，OPU卵母细胞在3种FSH(NIH-FSH、NB-FSH和CA-FSH，0.13 IU/mL)和2种LH(NIH-LH和NB-LH，23 IU/mL)匹配的6组IVM液中培养22～24 h，IVF和IVC后检查囊胚发育率。将胚胎移植(ET)至同步化受体后40 d，采用超声波检查妊娠率。【结果】 最佳匹配组是在IVM培养液中添加0.13 IU/mL NIH-FSH与23 IU/mL NIH-LH，囊胚发育率最高达47.3%。OPU卵母细胞经IVM和IVF后，在体外培养6 d的胚胎(IVC 6D)妊娠率(62.6%～64.0%)与体内胚胎相比无显著差异(P＞0.05)，但显著高于体外培养7 d的胚胎(IVC 7D)(44.2%～47.1%)(P＜0.05)。囊胚移植到青年牛受体的妊娠率高达67.1%，移植后未孕的受体可继续ET，但ET重复4次时妊娠率显著低于0、1次(P＜0.05)。【结论】 不同来源的FSH与LH的IVM匹配对OPU-IVF的胚胎发育潜能有明显的影响。移植IVC 6D的囊胚比IVC 7D的妊娠率显著升高。本研究优化的OPU-IVF-ET体系可有效培育优良的和牛品系，并快速扩繁其生产群体。

【目的】 探究梅花鹿富含半胱氨酸和甘氨酸蛋白3(cysteine and glycine-rich protein 3，CSRP3)基因的生物学作用及其在不同肌肉组织中的表达情况。【方法】 以梅花鹿背最长肌为试验材料，克隆获得CSRP3基因，测序后进行相似性比对，构建系统进化树，并对CSRP3蛋白进行生物信息学分析。运用实时荧光定量PCR技术来研究梅花鹿背最长肌、臀大肌、股四头肌、肋间肌中CSRP3基因的表达差异。【结果】 成功克隆出梅花鹿CSRP3基因，其编码区片段大小为585 bp,共编码194个氨基酸。BLAST比对结果显示，梅花鹿CSRP3基因与马鹿的相似性最高，为99.83%，与白尾鹿、牛、羊的相似性均超过95%，说明梅花鹿CSRP3基因在进化中具有高度保守性；根据梅花鹿CSRP3基因构建系统进化树，结果表明，梅花鹿与马鹿的亲缘关系最近，与虎和虎鲸的亲缘关系最远。CSRP3基因编码蛋白分子式为C₉₀₃H₁₄₀₃N₂₆₃O₂₇₅S₁₉，相对分子质量为20 952.81，理论等电点(pI)为8.89，脂肪系数为43.81，其二级结构以不规则卷曲为主；亚细胞定位于细胞核内。实时荧光定量PCR结果表明，CSRP3基因在梅花鹿不同部位肌肉组织中均有表达，在梅花鹿肋间肌中的表达量最高，与背最长肌、臀大肌、股四头肌存在显著性差异(P＜0.05)，而背最长肌、臀大肌和股四头肌之间CSRP3基因表达量差异并不显著(P＞0.05)。【结论】 本研究成功克隆了梅花鹿CSRP3基因，其编码蛋白位于细胞核内； CSRP3基因在梅花鹿不同肌肉组织中存在差异表达。本研究结果为CSRP3基因在梅花鹿肉品质方面的调控机制研究提供了数据基础。

家畜的体尺参数和体重数据是衡量生产繁育特性的主要参数之一，可为优良品种的选择提供主要参照数据。传统的家畜体尺、体重测量方法费时费力，且受个人等主观因素干扰较大，严重损害动物福利。随着现代科学技术水平的提高，家畜体尺及体重自动测量技术的发展取得了显著进展。作者对当下主流的体尺测量和体重预估方法进行总结，全面阐述了数据采集和处理方法、家畜体尺测量和体重预测的研究现状、方法特点及优缺点，通过了解高效的现代技术手段，准确地对家畜进行体尺测量和体重预估，进而帮助养殖者更好地管理畜群，预测生长趋势，评估畜体健康状况，提高生产效率。作者还对基础自动测量领域的研究现状和发展趋势进行了展望，旨在为家畜体尺测量技术研究提供参考。

【目的】 分析赤水乌骨鸡内皮素受体B亚型2(endothelin receptor B subtype 2，EDNRB2)基因多态性对乌骨鸡肤色性状的影响，并筛选EDNRB2基因调控赤水乌骨鸡肤色的关键多态位点，为深入探究乌骨鸡黑色素沉积调控的内在机制与赤水乌骨鸡肤色性状的优化改良提供新的遗传标记。【方法】 以赤水乌骨鸡作为研究对象，对EDNRB2基因第1～9外显子进行PCR扩增后测序，对所获序列进行比对鉴定其单核苷酸多态性(SNP)位点，并分析EDNRB2基因的遗传多样性。利用RNAfold web server分析EDNRB2基因SNP位点突变前后的mRNA二级结构；利用SHEsis在线网站进行EDNRB2基因SNP位点的连锁不平衡及单倍型、双倍型分析；利用SPSS 27.0软件分析EDNRB2基因多态性与赤水乌骨鸡肤色性状的关联性。【结果】 在赤水乌骨鸡EDNRB2基因第3与9外显子上共发现5个SNPs位点，其中第3外显子中存在2个SNPs位点(g.11120193 T＞C和g.11120382 C＞T)，第9外显子中在3个SNPs位点(g.11125882 G＞A、g.11125917 T＞A、g.11125931 C＞A)。g.11120193 T＞C位点存在TT、TC、CC 3种基因型，g.11120382 C＞T位点存在CC、CT 2种基因型，突变类型均属于同义突变；g.11125882 G＞A位点存在GG、AG、AA 3种基因型，属于错义突变(Gly→Glu)；g.11125917 T＞A位点存在TT、AT、AA 3种基因型，属于错义突变(Phe→Ile)；g.11125931 C＞A位点存在CC、AC、AA 3种基因型，属于无义突变。EDNRB2基因5个SNPs位点共发现10种单倍型与24种双倍型，其中优势单倍型与双倍型分别为H4与H4H4。关联分析结果显示，EDNRB2基因g.11120193 T＞C位点CC基因型个体的鸡冠△a值显著高于TC基因型(P＜0.05)，背部△a值显著低于TT基因型(P＜0.05)；g.11125931 C＞A位点CC基因型个体鸡冠△L值显著高于AC基因型(P＜0.05)；其余SNP位点不同基因型个体间的肤色参数差异均不显著(P＞0.05)。双倍型H5H5与H7H7对赤水乌骨鸡的肤色性状影响最为明显。【结论】 在EDNRB2基因第3、9外显子上共发现5个SNPs位点，其中g.11120193 T＞C和g.11125931 C＞A位点与赤水乌骨鸡的鸡冠、背部的肤色有显著关联性。双倍型H5H5对鸡冠△L值与△a值、背部△b值、翅下△b值有明显影响。EDNRB2基因能够作为赤水乌骨鸡的肤色性状育种选择的候选基因。

卵泡发育是决定排卵率和产羔数的重要因素，直接影响母畜生殖机能和繁殖力高低。随着近年来组学技术的发展，微小RNA(microRNA，miRNA)和长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)在反刍动物的卵泡动态发育过程中发挥了重要的调控作用。miRNA可以通过沉默或诱导靶基因表达参与颗粒细胞功能、卵母细胞成熟和卵泡发育的调控；lncRNA作为miRNA的分子海绵，通过竞争性结合miRNA间接调控基因表达，影响卵泡内的生殖细胞发育和卵巢功能。作者综述了miRNA和lncRNA在反刍动物卵泡发育中的分子功能和作用机制，并对miRNA、lncRNA和基因三者之间的竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)互作网络进行归纳，为挖掘母畜繁殖力性状关键基因和分子育种工作提供可靠的基因资源和理论参考。

【目的】 采用原核表达系统表达并获得非洲猪瘟病毒(ASFV)p22重组蛋白，并进一步制备、鉴定p22重组蛋白的单克隆抗体。【方法】 采用PCR方法扩增ASFV p22蛋白编码基因，构建重组表达质粒pET-28a(+)-p22，并通过IPTG诱导表达p22蛋白。将纯化后重组蛋白免疫小鼠，取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合制备单克隆抗体。通过Western blotting鉴定单克隆抗体特异性，通过ELISA方法测定腹水效价；利用在线软件预测p22蛋白抗原表位分布情况并合成重叠多肽，通过Dot blotting鉴定抗体识别的抗原表位。【结果】 本研究成功构建了p22重组蛋白的原核表达质粒，获得原核系统表达的p22重组蛋白，分子质量约为22 ku。用纯化后p22蛋白作为免疫原免疫小鼠，成功筛选到4株阳性单克隆杂交瘤细胞株，分别为1G3D7G11、2G5H6H8、6D10G7D6和8F6F8B9，其腹水效价均达到1∶500 000。Western blotting结果显示，4株单克隆抗体均能与p22蛋白发生特异性反应。单克隆亚型鉴定结果显示，1G3D7G11、2G5H6H8和6D10G7D6株单克隆抗体的重链均为IgG1类，8F6F8B9株单克隆抗体的重链为IgG2a类，4株单克隆抗体轻链均为Kappa型。Dot blotting检测结果显示，1G3D7G11、2G5H6H8株单克隆抗体识别抗原表位位于第58—89位氨基酸处；8F6F8B9株单克隆抗体识别抗原表位位于第126—150位氨基酸处。【结论】 本研究成功制备了4株ASFV p22蛋白的单克隆抗体，并初步鉴定了单克隆抗体所识别的B细胞表位区间。研究结果为p22蛋白的生物学功能研究和ASFV血清学检测提供了参考依据。

【目的】 探究长链非编码RNA(lncRNA)在猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)感染猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)过程中的作用。【方法】 利用感染复数(MOI)为1的PEDV感染IPEC-J2细胞构建细胞病变模型，通过RNA-Seq进行lncRNA测序，筛选出影响PEDV复制的关键lncRNA；利用实时荧光定量PCR和核质分离检测lncRNA表达和细胞定位；构建RNA干扰载体并转染IPEC-J2细胞，通过病毒拷贝数测定、Western blotting、半数组织培养感染剂量(TCID₅₀)以及间接免疫荧光试验(IFA)检测lncRNA表达对PEDV复制水平的影响。【结果】 PEDV感染IPEC-J2细胞24 h时，细胞病变最为明显，成功构建细胞病变模型。与对照组相比，PEDV感染组中存在61个差异表达lncRNA，其中19个上调，42个下调，筛选出1个显著上调且差异倍数较大的lncRNA——lncMSTRG.10733.2。实时荧光定量PCR结果显示，与对照组相比，PEDV感染IPEC-J2细胞后，lncMSTRG.10733.2表达水平显著上调(P＜0.05)。核质分离测定结果显示，lncMSTRG.10733.2主要分布在IPEC-J2细胞质中。成功构建了lncMSTRG.10733.2瞬时干扰IPEC-J2细胞，干扰效率为45.9%。实时荧光定量PCR和Western blotting结果显示，lncRNA干扰后，PEDV-M基因mRNA相对表达量和PEDV N蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05)。TCID₅₀测定结果显示，lncRNA干扰后PEDV滴度极显著上升(P＜0.01)；IFA结果显示，lncRNA干扰后IPEC-J2细胞中的PEDV N蛋白荧光分布水平明显增加。【结论】 本研究基于高通量测序从细胞水平上筛选鉴定出1个与PEDV感染密切相关的lncRNA，其表达水平上调有利于提高猪对PEDV感染的抵抗能力。研究结果揭示了lncRNA在PEDV感染宿主过程中的重要作用，为今后制定PEDV的抗病育种工作策略和筛选分子标记物奠定基础。

【目的】 探究细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)胆盐活化脂肪酶(EgBAL)的生物信息学特征并进行原核表达，检测EgBAL重组蛋白的免疫原性，为囊性棘球蚴病疫苗抗原筛选提供理论依据。【方法】 从NCBI数据库获取细粒棘球绦虫EgBAL基因序列(GenBank登录号：HM748917)，设计特异性引物，以细粒棘球绦虫原头蚴cDNA为模板，通过PCR扩增并克隆EgBAL基因。使用Mega 7.0软件，通过邻接法(NJ)构建系统进化树，运用生物信息学软件对EgBAL蛋白理化性质和结构特征进行预测分析。构建含EgBAL基因重组pET-22b质粒，并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞诱导表达EgBAL重组蛋白，通过SDS-PAGE检测蛋白表达情况，并进行纯化。利用Western blotting分析重组蛋白的免疫原性。【结果】 细粒棘球绦虫EgBAL基因片段大小为1 020 bp。系统进化树显示，EgBAL蛋白与中华树鼩EgBAL蛋白处于同一分支，进化距离较近，相似性高达99.60%。生物信息学分析显示，EgBAL基因全长1 014 bp，编码337个氨基酸，EgBAL蛋白分子质量为37 089.59 u，理论等电点为4.77，不稳定指数为44.72，为不稳定蛋白，脂肪系数为66.11，亲水性为－0.429，为亲水性蛋白，无跨膜区域及信号肽。EgBAL蛋白具有14个潜在B细胞抗原表位，二级结构包括α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲,分别占27.90%、12.76%、12.76%和56.08%。此外，EgBAL蛋白含有35个磷酸化位点，其中包括12个丝氨酸磷酸化位点、16个苏氨酸磷酸化位点和7个酪氨酸磷酸化位点。本研究成功构建重组pET-22b-EgBAL质粒，诱导表达得到EgBAL重组蛋白大小约38 ku。Western blotting结果显示，该重组蛋白可被细粒棘球绦虫感染的昆明小鼠和犬的阳性血清识别，具有良好的免疫原性。【结论】 本研究成功克隆了细粒棘球绦虫EgBAL基因、表达了EgBAL重组蛋白，并初步证实重组EgBAL蛋白具有较好的免疫原性，提示其有作为囊型棘球蚴病疫苗或诊断候选抗原的潜力，为进一步研究EgBAL蛋白的功能提供了科学依据。

【目的】 明确2021年9月河南省南阳市某乌鳢养殖场乌鳢大量死亡的病原。【方法】 本研究通过体表检测、显微观察、细菌分离、PCR检测、序列相似性和系统进化树分析、细胞培养、透射电镜观察、人工感染及病理切片观察等方法进行病原体鉴定。【结果】 患病鱼体表无明显机械损伤和出血点，未在患病鱼体表和鳃表面观察到寄生虫的存在，未从患病鱼的组织中分离出致病菌。PCR检测结果显示，患病鱼呈乌鳢水泡病毒(SHVV)阳性。SHVV G基因序列相似性分析显示，分离株与佛山分离株HSHRV-MS2021相似性最高，达99.85%。系统进化树显示，分离毒株与SHVV-2019、SHVV-YL01和HSHRV-MS2021株等聚为同一分支，属于Siniperhavirus属，与HSHRV-MS2021株亲缘关系最近。患病鱼组织匀浆液接种鲤鱼上皮瘤细胞(epithelioma papillosum cyprini cells，EPC)和石斑鱼脾脏细胞(grouper spleen cells，GS)均可引起明显的细胞病变。透射电镜观察发现，病变的EPC细胞内存在大量的子弹状病毒粒子。人工感染试验表明，感染鱼出现与自然患病鱼相似症状，死亡率高达100%。组织切片观察显示，回感患病鱼肠道微绒毛消失，肝脏和脾脏血淋巴增多。【结论】 本研究从广东以外地区养殖的乌鳢中分离出1株SHVV，命名为SHVV-NY01，该养殖场乌鳢的大量死亡是由SHVV引起的，本研究结果为该病毒的流行病学调查和防控提供了参考。

【目的】 了解保定地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus，FPV)的流行情况以及其VP2基因遗传变异情况。【方法】 从保定市多家宠物医院随机采集20例疑似患猫泛白细胞减少症(feline panleukopenia，FP)的猫粪便和鼻腔分泌物样本，利用PCR扩增、测序获得FPV VP2全基因序列并对其进行分析，利用Mega 7.0软件构建系统进化树，采用MegAlign软件对其核苷酸序列相似性及关键氨基变异位点进行分析。【结果】 20例患猫粪便样品中扩增出16条长度为1 755 bp的FPV VP2特异性条带，序列分析表明，FPV VP2基因全长为1 755 bp，分离获得的FPV均属于G1分型，与日本分离株V211(登录号：AB054227)亲缘关系较近，与FPV标准株CU-4(登录号：M38246)亲缘关系较远，16条FPV VP2基因之间核苷酸序列相似性为99.1%～100%。16条VP2蛋白序列的13个关键氨基酸位点均相同，与FPV标准株CU-4相比，在第101位氨基酸处出现I-T突变；与5个参考毒株CPV VP2的关键氨基酸位点进行比对，仅第101位氨基酸位点相同，其他位点均存在不同程度变异。【结论】 保定区主要流行G1型FPV，且其VP2基因遗传稳定性较强。研究结果丰富了FPV的流行病学资料，为保定地区FPV预防提供了理论依据。

猪圆环病毒(Porcine circoviruses，PCV)是目前已知进化速率最快的单链DNA病毒之一，可分为4个基因型(PCV1～PCV4)，其中PCV2进化速率达1.2×10^-3替代/位点/年，已接近RNA病毒。PCV4是新发现的基因型，与其他PCVs基因组的相似性为43.2%～51.5%。PCV1不具有致病性，其余基因型可感染各年龄段猪，引起具有多种临床表现的免疫抑制相关疾病，已成为制约当代养猪业发展的最重要因素之一。现有研究表明，PCVs不仅在猪群中广泛存在且有高度传染性，在反刍动物、啮齿动物、犬科动物、节肢动物和其他物种中被频繁检测出，具有跨物种传播的风险，需引起高度重视。为更深入地了解PCVs的进化及跨物种传播潜力，笔者总结了PCVs在不同物种中的检出情况及潜在传播途径，为揭示其进化、宿主适应性研究和防控策略提供参考。

【目的】 了解信阳地区散养土鸡群中禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)与马立克病病毒(Marek’s disease virus，MDV)混合感染及其遗传进化情况。【方法】 对送检的疑似ALV与MDV混合感染的病鸡进行病理解剖,使用特异性引物进行PCR扩增，并对J亚群ALV(ALV-J) gp85基因与MDV meq基因进行扩增测序，使用MegAlign软件进行核苷酸、氨基酸序列相似性比对以及氨基酸变异位点分析。利用Mega 11.0软件构建gp85、meq氨基酸序列系统进化树。【结果】 送检发病鸡腺胃、脾脏肿大，肝脏出现弥漫性肿大并伴有灰白色结节。ALV-J gp85与MDV 132-bpr基因PCR扩增结果均为阳性，分别获得545、317 bp目的条带。测序比对结果显示，扩增序列分别与ALV-J分离株GX12NN04 gp85基因(登录号：KT598488)和MDV-1型分离株YLO40920 meq基因(登录号：DQ174459)高度相似，相似性分别为94.6%和99.9%，初步确定分离株为ALV-J和MDV，并分别命名为HN23XY01-ALV、HN23XY01-MDV。核苷酸序列分析结果显示,HN23XY01-ALV gp85基因与13株ALV-J参考毒株核苷酸序列相似性为92.1%～94.6%；HN23XY01-MDV meq基因与14株MDV参考毒株的核苷酸序列相似性为99.3%～99.9%。氨基酸序列分析结果显示，HN23XY01-ALV gp85与13株ALV-J参考毒株氨基酸序列相似性为87.4%～91.4%，HN23XY01-MDV与14株MDV参考毒株的氨基酸序列相似性为97.9%～99.7%。系统进化树结果显示，HN23XY01-ALV与ALV-J亲缘关系较近，处于同一进化分支；HN23XY01-MDV与广西分离株GXY2、YLO40920、GX20NN2和河南分离株HNSC105处于同一个分支，与疫苗株CVI988、814和CU-2亲缘关系较远。氨基酸变异位点分析结果显示，HN23XY01-ALV存在D(E)65Y、Q(K/R)75L、A(T)76S、R(T)119K、T(M/A)219K氨基酸位点突变；HN23XY01-MDV存在K77E、D80Y、T139A、P176R和P217A氨基酸位点突变，且含有疫苗株所缺失的第193位脯氨酸，与MDV-1型强毒株的特征相符合。【结论】 本研究从信阳地区散养土鸡群中检测到ALV-J与MDV混合感染，结果为当地土鸡ALV-J与MDV协同致病机制研究以及混合感染的疫情防控提供重要参考。

鸡球虫病主要由艾美耳属多种球虫寄生于肠道上皮细胞，从而引发的一种严重威胁鸡肠道健康的寄生虫疾病，其病症的严重程度与宿主鸡的品种和日龄、饲养管理、饲料营养及球虫的种类、感染剂量等因素密切相关。抗球虫药物是预防和控制球虫病的主要手段，但易出现耐药性与药物残留等食品安全问题。近年来，植物提取物凭借其天然安全与营养保健等多重优势在球虫病防治方面备受关注。植物提取物可对球虫生命周期的不同阶段进行干预来防治球虫病，如抑制球虫发育、破坏球虫生理结构、破坏卵囊形态等，从而改善鸡肠道抗氧化性能，提高其生产性能和饲料转化效率。在不产生耐药性的基础上，植物提取物可有效控制球虫的传播，减轻球虫危害、提升机体免疫力、调节肠道微生物群。笔者系统梳理了鸡球虫病的病因、影响球虫病危害程度的因素以及常见植物提取物在鸡球虫病预防、治疗和免疫调节方面的应用效果及其作用机理，旨在为植物提取物在鸡球虫病防控中的开发与应用提供参考。

中华蜜蜂囊状幼虫病(Chinese sacbrood disease，CSBD)是由中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(Chinese sacbrood virus，CSBV)引起的一种病毒性疾病。该病对蜂群危害严重，传染性强，死亡率高达100%，给中国养蜂业造成了巨大的经济损失。尽管实际生产中采用了多种方法和措施对该病进行预防和治疗，但实际效果欠佳。针对CSBV的检测技术发展迅速，尤其是分子生物学检测手段的更新，使得检测结果的准确性和特异性大大提高。鉴于卵黄抗体(egg yolk antibodies，EYA)在多种病毒性疾病中的应用效果显著，对于CSBD的防治有着潜在的应用开发价值。笔者综述了CSBD诊断和防治的最新研究进展，总结了EYA抗体药物的治疗应用现状。此外，在剖析EYA药物优缺点的基础上，提出了多种EYA协同增效的策略，并从多个方面如新型抗体药物的开发、新型中药单体/配方的鉴定、核苷酸药物的开发等对抗CSBV的研究前景进行望，以期为蜂业病毒性疾病的防控提供参考。

【目的】 探讨当归饮子(Angelica decoction,DGYZ)治疗2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导的小鼠特应性皮炎(atopic dermatitis，AD)皮肤病变效果，为临床宠物AD的诊断和治疗提供参考。【方法】 选用90只BALB/c小鼠，分为6组：空白组(Control)、DNCB组、DGYZ低(9.8 mg/kg DGYZ)、中(19.6 mg/kg DGYZ)、高(39.3 mg/kg DGYZ)剂量组和西替利嗪组(4 mg/kg西替利嗪)，每组15只小鼠。空白组小鼠涂抹丙酮溶液作为对照，其余各组小鼠通过背部反复涂抹DNCB建立小鼠AD样皮肤病模型，并按分组进行药物治疗。治疗结束后采集小鼠背部皮肤、血液及脾脏用于后续分析。通过HE和甲苯胺蓝染色观察小鼠皮肤组织厚度和肥大细胞数；ELISA方法检测小鼠血清中免疫球蛋白E(IgE)水平；全自动血细胞分析仪测定血液中白细胞(WBC)、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的含量变化；流式细胞术检测小鼠脾脏CD4⁺/CD8⁺和Th1/2细胞分化；实时荧光定量PCR测定小鼠背部皮肤中细胞因子相关mRNA的表达水平；超高压液相色谱-飞行时间质谱仪(UPLC-TOF-MS)分析DGYZ的主要活性成分，联合网络药理学探讨DGYZ治疗AD的主要靶点和作用机制。最后采用实时荧光定量PCR检测JAK1-STAT3信号通路的mRNA表达水平。【结果】 与空白组相比，DNCB组小鼠背部皮肤出现严重的皮肤病变和表皮增厚现象，血液中白细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞数目显著上升(P＜0.05)；与DNCB组相比，DGYZ各剂量组和西替利嗪组小鼠表皮增厚现象均得到有效缓解，血液中白细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞数目均下降，且DGYZ高剂量组及西替利嗪组差异显著(P＜0.05)；DGYZ高剂量组和西替利嗪组小鼠血清中IgE表达水平显著降低(P＜0.05)。流式细胞术结果显示，DNCB组小鼠CD4⁺/CD8⁺和Th1/2细胞的平衡受到干扰，不同剂量DGYZ均可显著改善这一情况(P＜0.05)。实时荧光定量PCR检测结果显示，与空白组相比，DNCB组小鼠皮肤组织中γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-12(IL-12)基因mRNA表达水平显著下调(P＜0.05)；IL-4、IL-13、IL-6基因mRNA表达水平显著上调(P＜0.05)。与DNCB组相比，饲喂DGYZ治疗后皮肤组织中IFN-γ和IL-12基因mRNA表达水平逐渐上调，IL-4、IL-13、IL-6基因mRNA表达水平显著下调(P＜0.05)。UPLC-TOF-MS鉴定出89种DGYZ成分，其中活性成分64种。网络药理学分析结果表明，以上64种活性成分通过作用于信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)、蛋白激酶B(AKT1)等基因及JAK/STAT、NF-κB和Th17细胞分化信号通路，对AD样皮肤病变发挥治疗作用。实时荧光定量PCR检测结果表明，DNCB可诱导小鼠JAK1-STAT3信号通路的激活，DGYZ可抑制该途径的激活。【结论】 DGYZ可减少小鼠皮肤中肥大细胞数目和血清中IgE的表达，调节免疫平衡，降低促炎因子的mRNA表达并抑制JAK1-STAT3信号通路激活，缓解AD样皮肤病变。本研究结果可为中药治疗动物AD样皮肤病变提供依据。

【目的】 江西省高安市某养殖场的大口黑鲈(Micropterus salmoides)体表出现溃疡，肝脏、脾脏及肾脏等器官出现结节，病鱼陆续死亡。本研究旨在分离和鉴定导致大口黑鲈体表出现溃疡及内脏出现结节的病原菌，并评估不同抗菌药对该病原菌的敏感性，从而为大口黑鲈溃疡病的有效防治提供科学依据。【方法】 对该养殖场患病大口黑鲈进行解剖，对其肝脏、脾脏、肾脏和肠道等部位进行病原菌分离并进行革兰染色。对分离菌进行生理生化特性反应、16S rDNA序列鉴定、系统发育树构建、人工感染试验、病理组织学观察、毒力基因检测及药敏试验。【结果】 从患病大口黑鲈的肾脏结节部位中分离出1株优势菌，命名为GALS1。该分离菌单菌落呈圆形且表面光滑，边缘整齐，为革兰阴性菌。菌株GALS1氧化酶反应、葡萄糖发酵、硝酸盐还原及产氨等表现为阳性，甲基红及反硝化等呈阴性，与维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)生化指标一致。分离菌株GALS1的16S rDNA序列与维氏气单胞菌聚为一支，相似性达99%，被鉴定为维氏气单胞菌。人工感染试验结果表明，菌株GALS1对大口黑鲈有较强的致病性，发病鱼表现为活力减弱、体表出血，肝脾肿大。毒力基因检测结果显示，该菌株携带毒力基因act、exu、fla和aerA。药敏试验结果表明，菌株GALS1对头孢曲松、四环素、庆大霉素、环丙沙星等敏感，对青霉素、红霉素、麦迪霉素等耐药。【结论】 该养殖场大口黑鲈体表溃疡及内脏结节病病原为维氏气单胞菌，本研究结果可为维氏气单胞菌引起的大口黑鲈病害防治提供参考。

【目的】 明确浙江地区某猪场副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)感染情况，明确分离株的血清型、生物学特性及致病性，为临床控制副猪嗜血杆菌提供理论参考。【方法】 从发病猪的肺脏、心脏血液、关节液等病料中分离、纯化菌株，并对其进行革兰染色镜检、16S rRNA基因PCR扩增及测序，明确分离株的血清型，检测分离株携带毒力基因情况、对常见抗菌药物的敏感性及对小鼠的致病性，使用饱和硫酸铵法提取菌株分泌蛋白，并通过电泳分析蛋白主要富集区域。【结果】 分离株在TSA培养基上生长出圆形、光滑湿润、颜色灰白、边缘整齐的针尖大小的菌落；接种至TSB培养基后，1～3 h生长缓慢，3～4 h进入对数生长期，4～12 h进入生长稳定期；革兰染色镜检呈红色短杆状、长杆状，长度不等，疑似副猪嗜血杆菌。16S rRNA基因PCR扩增结果显示，出现680 bp的特异性条带，与预期相符。血清型鉴定结果显示，检测到2型血清型副猪嗜血杆菌特异性条带。BLAST比对显示该分离株为血清2型副猪嗜血杆菌。毒力基因检测结果显示，分离株携带cdtA、cdtB、cdtC、vtaA1、rfaD、rfaE、gnd、cpaD、espP2、vacJ、rfaF、vtaA2、htrA和ompP2基因。该菌株以1.0×10⁹ CFU/mL剂量感染BALB/c小鼠，在5～10 h出现死亡，并引起小鼠肝脏细胞核浓缩、坏死,肺泡腔内有大量浆液性渗出物，混有红细胞和菌体，脾脏组织炎性细胞浸润。药敏试验结果显示，分离株对头孢哌酮、头孢呋辛钠、哌拉西林、青霉素等药物耐药，对氯霉素表现中介，对环丙沙星、左氧氟沙星、阿奇霉素等药物敏感。该菌株分泌蛋白大小主要集中在25～180 ku。【结论】 本研究分离鉴定获得1株血清2型副猪嗜血杆菌，该分离株编码多种毒力基因，具有致病性，对多种常用抗菌药物有明显的耐药性，并分泌多种蛋白。试验结果提示该猪场可使用喹诺酮类、大环内酯类及氨基糖苷类药物进行防控。

【目的】 建立禽源多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌的可视化检测方法。【方法】 将重组酶聚合酶扩增(RPA)与成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR-Cas)系统相结合，针对两种病原菌设计特异性CRISPR相关RNA(crRNA)序列，筛选RPA引物，并对CRISPR检测体系进行优化，探究单管双靶标扩增体系，评估检测方法的特异性及灵敏度，验证临床样品检测的可行性。【结果】 本研究建立的检测方法最优组合为：Buffer中Mg²⁺浓度20 mmol/L、Cas12a蛋白80 nmol/L、crRNA 400 nmol/L、ROX荧光探针14 μmol/L。特异性及灵敏度检测结果显示，本研究建立的检测方法特异性良好，在蓝光下观察，灵敏度与实时荧光定量PCR一致，比普通PCR高100倍。临床样品检测结果显示，巴氏杆菌、大肠杆菌均被有效检出，本研究所建立方法的临床符合率为100%。【结论】 本研究成功建立了禽源多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌的可视化检测方法，其特异性及灵敏度较高，可以准确检测临床样品中的目标病原菌。试验结果为监测与防控禽源细菌性疾病提供了新方法。

食源性致病菌(foodborne pathogens)是引起动物和人类食源性疾病最重要的致病因素。常见的食源性致病菌有沙门菌、致泻性大肠杆菌、弯曲杆菌、副溶血性弧菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌等。食源性致病菌具有强大的侵袭和定植能力，可污染多种蔬果及动物源性食品，并可沿“农场-餐桌链”传播。由于抗生素的滥用，食源性致病菌耐药性现象日益严重。传统的抗菌药物逐渐难以应对日益严重的细菌耐药性问题，导致食源细菌性疾病面临治疗药物选择受限、生物利用度差、毒性难以控制等诸多挑战。随着纳米技术的发展，多种微纳材料(micro/nano materials)逐步应用于生物医学领域，展示出优异的治疗性能。微纳材料主要指平均粒径在微米或纳米级的一系列复合材料。抗食源性致病菌感染研究中的微纳材料主要是指将微米材料与纳米材料结合而成的药物递送系统，兼具微米和纳米尺度材料的优势，具有生物相容性良好、靶向性药物递送、可控与长效释放及多重抗菌作用等多种优势。笔者综述了微纳材料的基本概念、常见种类、独特优势及微纳材料在各种抗食源性致病菌感染中的研究进展，探讨了微纳材料在应对多种食源性细菌感染、缓解抗生素耐药性问题中的应用潜力以及目前存在的应用瓶颈，以期为微纳材料在食源细菌性疾病治疗中的研究和应用提供参考。

抗菌肽(antimicrobibal peptides,AMPs)是一类由宿主基因编码且具有广谱杀菌作用的小分子多肽，是几乎所有生物体非特异性免疫的重要组成成分。抗菌肽种类多样，按照生物活性可分为抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤等不同类型。抗菌肽一般具有正电荷和两亲性，可与疏水表面和膜结构发生相互作用,破环膜的完整性及抑制细胞内核酸、蛋白质等物质的活性，在细胞壁、细胞膜、细胞内及病毒的相关靶点发挥抑菌作用。在以细胞膜为靶点的抗菌肽中，相关研究提出了桶板、环孔、地毯、凝聚等不同细胞膜损伤模型，即抗菌肽通过不同的杀菌机制表现出了抗细菌、抗真菌和抗病毒等广谱的生物活性。抗菌肽因其独特的杀菌机制有着广阔的应用前景，在畜禽养殖过程中，作为绿色饲料添加剂能增加畜禽体重、提高肠道有益菌数量、提高免疫球蛋白含量、降低炎症因子浓度，在畜禽的生产性能、肠道菌群、免疫力及疾病防治等方面发挥重要作用，是畜禽行业未来发展中替抗产品的良好选择。然而抗菌肽还存在用法用量尚未明确、使用成本较高、联合使用效果不明确等限制因素，笔者对抗菌肽的抑菌作用机制及在畜禽中的应用进行总结，并对其未来发展进行展望，以期为抗菌肽的研究及应用提供参考。

近年来，脂多糖(LPS)引发的免疫应激已经成为畜牧业生产中潜在的威胁。LPS作为一种常见的细菌内毒素，具有多种免疫活性，在免疫调节和细胞信号转导中扮演重要角色。LPS能够快速激活动物的免疫系统，引发多种炎症因子如肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素-1β(IL-1β)等的分泌。适度的LPS刺激可以提高动物的抗病能力，帮助其有效对抗感染和外界压力。然而，过量或长期的LPS暴露则可能导致动物的免疫系统过度激活，引起炎症性疾病的发生，甚至影响动物生产性能和健康状态。目前，LPS已被广泛应用于建立与免疫应激相关的动物模型,深入理解LPS对于不同动物免疫应激的影响对畜牧业的生产至关重要，也是兽医领域开发兽药的关键。笔者对LPS的结构和功能、不同动物经历LPS免疫应激的共性和差异、缓解LPS免疫应激的措施进行了综述，并对LPS免疫应激模型的建立方法及其在疾病中的应用进行了总结，对今后研究动物LPS免疫应激提出了建议和展望，以期为LPS的研究和畜牧业生产实践提供参考依据。

猫哮喘是一种由过敏原引起的下呼吸道嗜酸性粒细胞炎性疾病，临床表现为反复发作的咳嗽、呼吸急促甚至呼吸困难。猫哮喘的病理机制与人类高Th2型哮喘类似，患猫出现气道高反应性变化、黏蛋白基因高度表达和嗜酸性粒细胞浸润。目前猫哮喘尚无公认的诊断指南，慢性支气管炎与其有极为相似的临床症状和影像学表现，是临床诊断中应重点排查的方向。哮喘患猫胸部X线片最常见的异常表现为支气管型或支气管间质型，支气管灌洗液可见嗜酸性粒细胞炎症。新型诊断方法中，呼出气冷凝液分析和气压全身体积描记术属于无创性诊断，并且可用于清醒状态下的患猫，在标准化呼出气冷凝液生物标志物和气压全身体积描记术的参数参考范围后，两种新型诊断方案有望应用于宠物猫临床。临床常用的治疗药物为皮质类固醇，在患猫支气管痉挛时使用支气管扩张剂。新型治疗方案中，冲击免疫疗法针对过敏原建立免疫耐受机制，从过敏性炎症级联初始阶段进行治疗，是有望彻底治愈哮喘的新型治疗技术。新型的诊断与治疗技术目前在宠物猫中的研究较少，多用于实验室建立的猫哮喘模型，在应用于宠物猫临床之前，仍需更多的临床数据。

随着全球畜牧业的快速发展，畜禽粪污产生量逐年增加，如何对粪污进行高效资源化利用显得尤为重要。在饲料化、能源化、沼气发酵等众多粪污处理方法中，堆肥过程被认为是将畜禽粪便中的有机物分解成优质、无害的有机肥产品的最佳处理方式，对于推动农业可持续发展和生态环境保护具有重要意义。然而，传统的自然堆肥方式往往存在着发酵周期长且发酵不彻底的缺陷，限制了发酵效率和效果。因此，文章分析了现代堆肥技术引入外源微生物为辅助手段的创新举措，这不仅显著提高了畜禽粪便发酵效率，也提高了最终产品质量，为畜禽粪污资源化利用开辟了新的路径。文章围绕微生物菌剂在羊粪堆肥发酵过程中的影响进行综述，回顾了国内外学者在堆肥中添加外源微生物菌剂对堆体菌群丰度、多样性的影响，以及对堆体理化性质的改善。进一步分析了施用微生物发酵羊粪对土壤理化因素和农作物品质的影响，展示了微生物菌剂在农业可持续发展中的重要作用。此外，也对微生物菌剂在未来粪污资源化利用中的发展方向进行了展望，旨在为农业的可持续发展提供科学依据。