本试验根据GenBank中公布的原鸡肌细胞生成素（myogenin，MyoG）基因序列设计1对引物，采用RT-PCR方法，从京海黄鸡肌肉组织中克隆MyoG基因的编码区序列，并使用多种生物软件和在线工具对目的序列进行生物信息学分析,分析MyoG 基因与其他物种的同源性、蛋白质的理化性质、蛋白质序列的跨膜区、亚细胞定位、亲水性、潜在的磷酸化位点、保守结构域及该基因编码蛋白的二级结构和三级结构。最终获得了包括编码区在内的长754 bp的MyoG基因序列，生物信息学分析显示，京海黄鸡MyoG基因的保守性较低，与GenBank中原鸡、火鸡、鹌鹑、马、人、野猪、牛、山羊、大鼠、绵羊的同源性分别为99.7％、94.4％、92.0％、70.0％、70.0％、73.3％、69.0％、67.9％、67.8％、73.5％；氨基酸分析发现，MyoG蛋白为水溶性蛋白，分子质量为25854 u，理论等电点为5.46，不属于跨膜蛋白；亚细胞定位显示，大部分蛋白位于细胞质内，不属于分泌蛋白；预测含有6个潜在的磷酸化位点，1段碱性序列，1段HLH序列，1段低复杂度序列；二级结构以无规则卷曲为主，三级结构显示MyoG蛋白的结构域呈螺旋状。

本研究运用生物信息学方法对水牛信号转导子和转录激活子1(signal transduction and activators of transcription 1，STAT1)基因进行电子克隆及其序列分析。以牛STAT1基因序列作为探针电子克隆了水牛STAT1基因完整的编码序列并进行了RT-PCR验证。序列分析结果表明，水牛的STAT1基因序列长3437 bp，包含1个2244 bp的开发阅读框，共编码747个氨基酸。该基因cDNA编码区序列与普通牛、绵羊、人、猪、大鼠、小鼠和山羊同源性比对结果表明，其相似性分别为99%、98%、89%、93%、86%、85%和87%。经聚类分析结果表明，水牛与普通牛的分子进化关系最近。

为了解不同物种干细胞因子（stem cell factor, SCF）基因编码区（CDS）的遗传变异，本研究采用生物信息学方法比较分析了山羊、绵羊、牛、白犀、野猪、虎鲸、马、雪貂、人、鼩鼱、裸鼢鼠、褐家鼠、长尾毛丝鼠、小家鼠和智利八齿鼠SCF基因编码区的遗传多样性，并对该基因的氨基酸序列、跨膜结构域、导肽、信号肽和二级结构特征进行了预测和分析。结果发现，在15个物种55条基因序列中共检测到294个多态位点，生成36种单倍型，SCF基因序列编码区在物种间存在丰富的遗传多样性；理论等电点分布广泛，多数肽链呈酸性，亲水；N端具信号肽、无导肽，可溶型蛋白无跨膜结构域，跨膜型蛋白有1个长23个氨基酸的跨膜结构域；这些蛋白二级结构主要为α-螺旋、无序卷曲、伸展链及β-转角。

本研究旨在制备山羊支原体山羊肺炎亚种(M.capricolum subsp.capripneumoniae, Mccp)的单克隆抗体并筛选与抗体结合的抗原表位。试验用甲醛灭活的Mccp免疫BALB/c小鼠，运用传统的细胞融合技术进行融合获得杂交瘤细胞，亚克隆，制备单克隆抗体腹水，采用酶联免疫技术（ELISA）和免疫印迹（Western blotting）技术鉴定单克隆抗体的特异性及胶内酶切鉴定与抗体结合的抗原表位。最终成功筛选获得5株单克隆抗体，鉴定到3个与抗体结合的抗原表位，为下一步科学研究提供了初步且可靠的试验基础。

为获得具有天然构象及良好抗原性的犬瘟热病毒（CDV）血凝蛋白（H），本研究以HLJ2-07毒株为模板，利用RT-PCR方法扩增出H基因，将其克隆到pFastBac^TMHTA载体中，利用大肠杆菌DH10Bac^TM同源重组构建穿梭质粒reBACmid-rH，将重组穿梭质粒转染Sf9昆虫细胞，进行杆状病毒表达。利用Western blotting对获得的重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。同时，利用在线网站与软件对CDV H蛋白进行B细胞表位分析预测。结果显示，在杆状病毒系统中表达的H蛋白能与His-tag单克隆抗体及CDV阳性血清发生特异性反应，表明该蛋白成功表达，且具有良好的反应原性；用Swiss-model同源建模软件及B细胞表位预测软件，预测H蛋白可能具有的B细胞表位有5处，分别是175—195、240—250、365—380、480—508及526—555。本研究获得了具有天然构象及良好抗原性的CDV重组H蛋白，可为诊断试剂开发、单克隆抗体制备及表位筛选等工作奠定基础。

应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus,PPRV）西藏分离株Tibet 07的融合蛋白，并对其抗原性进行鉴定。扩增PPRV Tibet 07株融合蛋白基因，克隆至pFastBac/CT-TOPO载体中，构建重组穿梭质粒pFastBacCT-PPRV-F，构建重组杆状病毒Bacmid-PPRV-F，转染sf9细胞，获得重组杆状病毒。通过SDS-PAGE鉴定F蛋白的表达，利用Western blotting和间接免疫荧光鉴定F蛋白的抗原性。表达的F蛋白在分子质量约59 ku处可见特异蛋白条带。重组杆状病毒Bacmid-PPRV-F感染的sf9细胞可与抗PPRV阳性血清发生特异性反应。使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达了PPRV西藏分离株Tibet 07的融合蛋白，为进一步研究其生物学功能及研制小反刍兽疫的亚单位疫苗奠定了基础。

为构建一种快速、高效、特异性强的检测与鉴定福氏志贺菌的多重PCR方法，本试验以不同血清型志贺菌中的特有基因ipaH、gtrⅡ、gtrⅩ和R002为扩增目标来设计相对应的引物，在同一PCR体系中对福氏志贺菌进行检测。通过一系列探索及对反应条件的优化调整，最终建立了可在多种细菌中快速检测出福氏志贺菌2型（2a和2b）的方法。结果表明，应用多重PCR可快速、高效、准确的对福氏志贺菌进行验证和鉴别，对于预防实验室菌种污染和志贺氏菌病的临床诊断与治疗有着重要意义。

为了研究鹅FoxO1（forkhead box O1）基因的功能，根据GenBank已收录的鸡（Gallus gallus）、人（Homo sapiens）和小鼠（Mus musculus）等物种FoxO1基因序列的同源保守区域，设计特异性引物，利用RT-PCR技术克隆鹅FoxO1基因cDNA序列，并对基因序列进行了生物信息学分析。结果表明，成功克隆得到了鹅FoxO1基因cDNA序列，通过BLAST比对,鹅FoxO1基因与原鸡、人、小鼠的核苷酸序列同源性分别为97%、83%、82%，FoxO1基因在四川白鹅中表达水平总体表现为：皮脂＞腹脂＞腿肌＞胸肌＞肝脏。因此，FoxO1基因在多个组织中都有表达，且表达差异较大。

为了能高效表达理想的微小牛蜱抗原，本研究对新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室已获得的Bm86基因（Bm86 Tarim）进行遗传进化分析，并对其编码蛋白进行生物学信息分析。结果显示本研究获得的新疆南疆微小牛蜱Bm86 Tarim序列与已登录的所有国外Bm86基因完整阅读框序列的核苷酸和氨基酸同源性分别为95.9%～98.6%和93.8%～97.8%，差异极小；遗传进化树分析结果显示本研究毒株与已登录多数毒株在同一分支内；生物学信息预测结果显示该蛋白不稳定，不溶性的概率为93.26%，有4个潜在糖基化位点。本试验结果为后续Bm86基因表达、免疫抗原制备和抗微小牛蜱疫苗的研制奠定基础。

为进一步掌握黔西南州猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）流行变异趋势，对2株高致病性PRRSV（HR-PRRSV）贵州分离株GZLPS、GZSB进行Nsp2与GP5基因克隆和测序，并分析毒株分子变异特征。结果显示，2株分离株Nsp2基因有90个核苷酸不连续缺失，不同位置的36个核苷酸发生突变；GP5基因存在不同位点置换。同源性比对与系统进化树分析显示，2株分离株Nsp2与GP5基因与HP-PRRSV JXA1株及贵州省2011年以前流行毒株的核苷酸同源性在96%以上，氨基酸同源性在95%以上，但在分子变异上存在差异。结果表明黔西南州PRRSV变异方式已呈多样性。

为研究弓形虫DOC2基因作为弓形虫疫苗候选抗原分子的可行性，本试验用RT-PCR技术扩增DOC2基因编码区的C-端并测序。将该基因片段用生物信息学软件翻译为氨基酸序列后，预测弓形虫DOC2蛋白C-端的生物学特性、高级结构和B细胞抗原表位。结果表明，DOC2基因C-端片段长度为1887 bp。将其翻译成氨基酸序列后预测含有11个亲水区域和7个跨膜区。二级结构中含有19个α-螺旋、1个β-转角和17个无规则卷曲。结合柔性区域等分析，DOC2蛋白C-端共含有12个线性B细胞抗原表位。结果表明DOC2蛋白C-端可作为弓形虫疫苗候选分子，为研制新型弓形虫DNA疫苗或表位肽疫苗提供理论基础。

为探索TB27.4蛋白在牛结核病鉴别诊断中的作用，本试验以牛分枝杆菌Vallee Ⅲ株基因组DNA为模板，PCR扩增tb27.4全长基因片段，将其定向克隆到原核表达载体pET-32a(+)中，构建重组质粒pET-TB27.4，优化原核表达条件，并用AKTA Purifier对蛋白的纯化条件进行优化。SDS-PAGE结果显示重组蛋白为可溶性表达，且大小与理论值相符，用牛分枝杆菌阳性血清进行Western blotting检测有特异性条带，且可特异性地刺激牛分枝杆菌感染牛外周血淋巴细胞释放大量IFN-γ。结果表明，重组蛋白TB27.4具有良好的B细胞活性和T细胞刺激活性，为进一步研究其在牛结核病诊断中的作用奠定了基础。

本试验旨在构建甲型H7N9流感病毒非结构蛋白（NS1）真核表达载体，并在293T细胞中表达其编码的NS1蛋白。首先提取安徽分离株甲型H7N9流感病毒（A/Anhui/3/2013(H7N9)）的总RNA，通过RT-PCR技术获得了甲型H7N9流感病毒H7N9 NS1全长基因，然后将其克隆至载体pcDNA4-Flag-HA中构建pcDNA4-Flag-HA-NS1真核重组表达载体，经酶切及测序鉴定正确后将质粒pcDNA4-Flag-HA-NS1转染到293T细胞中，通过Western blotting鉴定NS1蛋白的表达。结果表明成功克隆了NS1全长基因，构建了甲型H7N9流感病毒NS1蛋白真核表达载pcDNA4-Flag-HA-NS1，并在293T细胞中转染表达，Western blotting确定了NS1蛋白的成功表达。该表达载体的成功构建及在293T细胞中成功表达NS1蛋白，为后期开展流感病毒NS1蛋白功能及与真核细胞中的蛋白相互作用奠定了基础。

为探讨ASCL2基因在体细胞克隆牛中的重编程状态，本研究通过亚硫酸氢盐测序法（BSP）对体细胞克隆牛和自然繁殖牛肺脏中ASCL2基因启动子区CpG岛上的CpG位点进行了甲基化状态分析。结果显示，体细胞克隆牛的甲基化水平（28.41%）显著高于正常对照组（7.62%）（P＜0.05）。推测ASCL2基因的异常甲基化可能是造成体细胞克隆牛新生死亡及肺脏发育异常的原因之一。

为明确福建省猪细环病毒（porcine torque teno sus virus，PTTSuV）1b型（PTTSuV-1b）ORF3基因的遗传进化特征，本研究根据GenBank中登录的PTTSuV-1b基因组特征设计特异性引物，对福建省某猪场患有仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)的猪血清进行PTTSuV-1b分段扩增，并分别对PCR扩增产物进行胶回收后克隆测序，将测序结果经BLAST分析后进行序列拼接。试验结果表明，所扩增的目的片段编码有完整的PTTSuV-1b ORF3蛋白，全长为600 bp，编码有199个氨基酸。将获得的PTTSuV-1b型福建株与GenBank中PTTSuV-1b型的ORF3基因进行比对分析，其与FJ/China/2010/TTV2/2株核苷酸同源性最高，为99.7%，与西班牙PTTSuV-1b分离株TTV2_G43核苷酸同源性为97.3%，与SC株核苷酸同源性稍低，但也达94.0%；而与猪细环病毒K2型德国家猪分离株472142株核苷酸同源性仅为60.7%，与猪细环病毒1a型西班牙分离株PTTV1_1914株核苷酸同源性仅为46.8%。从遗传进化关系上看，PTTSuV-1b ORF3基因在遗传进化上呈2个大的遗传进化分支（分支Ⅰ和分支Ⅱ），本研究分离株处于分支Ⅰ。

Fosl2(Fos-like antigen 2)属于活化因子蛋白1(activator protein-1,AP1)转录因子家族中的一种，在多种组织中均有显著表达，对哺乳动物的生长发育、生殖性状、免疫应答等起到重要的作用。近年来，随着研究的深入，人们发现Fosl2基因与脂肪代谢、骨骼发育及疾病和癌症的发生有着重要联系。作者综述了Fosl2基因的结构与组织表达分布，同时概述了其在脂肪代谢、骨骼发育、癌症发生及眼部发育等重要生理过程中的作用，并对其生物功能进行了展望，以期为更深层次的研究和提高动物的生长发育性状提供参考。

为探讨抗犊牛肺炎支原体免疫初乳乳清的制备方法，本试验采用牛支原体灭活佐剂疫苗于经产前2～4周给怀孕母牛免疫接种2次，制备高免初乳，收集产后12 h之内的初乳，分别采用离心沉淀与过滤法制备脱脂初乳，采用不同的酸化法、酶化法、酸和酶结合法制备乳清，通过紫外分光光度计及ELISA方法检测乳清中的总蛋白含量及抗牛支原体抗体滴度。结果显示，4 ℃、3500 r/min离心30 min对初乳的脱脂效果最好，初乳总蛋白含量及抗牛支原体抗体滴度损失最少；酶和酸结合法的乳清析出率最高，维生素C（0.2 g/mL）处理法对脱脂初乳中蛋白损失最小，盐酸处理法对脱脂初乳中抗牛支原体抗体滴度损失最小。结果表明用0.6 mol/L盐酸调pH至4.6，室温下放置30 min，10000 r/min离心20 min是高免初乳乳清制备的适宜方法。

本试验通过碳二亚胺法，将半抗原氧氟沙星与载体牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）偶联，制备得到氧氟沙星免疫原和包被原，并制备抗氧氟沙星的单克隆抗体，初步研制测定氧氟沙星的ELISA试剂盒，经过测试，对鱼肉样本中氧氟沙星的检测限为1 μg/kg，添加回收率在62.8%～97.7%之间，批内、批间试验的相对标准偏差均小于10%。

本试验旨在研究添加不同浓度的纤维素酶或甲酸青贮菠萝茎叶后对其饲用品质的影响。以菠萝茎叶作为研究材料，青贮处理方式分别为直接青贮（对照组）及添加0.1 g/kg纤维素酶、0.2 g/kg纤维素酶和3.0 g/kg甲酸、6.0 g/kg甲酸青贮，青贮45 d后进行营养成分、养分的瘤胃降解分析。结果表明，与对照组相比，2个纤维素酶处理组显著提高了单宁含量（P＜0.05），其他成分含量均没有显著变化（P＞0.05）；3.0 g/kg甲酸处理组显著降低了氨态氮（NH₃-N）、钙和磷含量（P＜0.05），显著提高了可溶性碳水化合物（WSC）含量（P＜0.05）；6.0 g/kg甲酸处理组显著提高了干物质（DM）、可溶性碳水化合物含量（P＜0.05），显著降低了粗蛋白质（CP）、酸性洗涤纤维（ADF）、中性洗涤纤维（NDF）、氨态氮、钙和磷含量（P＜0.05）；6.0 g/kg甲酸处理组显著提高了72 h内干物质的瘤胃降解率（P＜0.05），而对72 h粗蛋白质降解率和中性洗涤纤维降解率无显著影响（P＞0.05）。综上所述，在本试验条件下，添加6.0 g/kg甲酸青贮菠萝茎叶效果最好，其次为直接青贮组。

本试验旨在探讨日粮中添加不同水平黄芪多糖对免疫抑制肉鸡生长性能、肠道微生物菌群及免疫功能的影响。选用180只体重相近的健康快大型黄羽肉杂鸡，随机分成4组，每组3个重复，每个重复15只鸡，Ⅰ组饲喂基础日粮，自由饮水；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组在饮水中添加水溶性氟苯尼考200 mg/L，用药6 d后，Ⅱ组饲喂基础日粮，Ⅲ、Ⅳ组分别饲喂在基础日粮中添加500和1000 mg/kg黄芪多糖的日粮。预试期7 d，正试期35 d。结果表明，与Ⅱ组相比，Ⅲ、Ⅳ组能显著改善免疫抑制肉鸡生长性能（P＜0.05），增加免疫抑制肉鸡肠道中有益菌（乳酸杆菌、双歧杆菌）的数量（P＜0.05），降低有害菌（大肠杆菌、沙门氏菌）的数量（P＜0.05），提高免疫抑制肉鸡免疫器官指数及新城疫抗体效价（P＜0.05），降低免疫抑制肉鸡血清中IL-10和IFN-γ含量（P＜0.05）。综上所述，日粮中添加500和1000 mg/kg黄芪多糖均能消除氟苯尼考诱导的免疫抑制作用，改善肉鸡生长性能，调节肉鸡肠道的微生态平衡，提高机体免疫功能。

黄曲霉毒素是畜禽饲料中危害最严重的生物类毒素，作者综述了黄曲霉毒素在畜禽体内的代谢及其对畜禽生长性能、抗氧化系统、免疫系统和肝脏的毒性作用，并介绍了物理吸附类、化学反应类、生物降解类和联合应用类黄曲霉毒素解毒剂及其作用效果，为饲料行业研究如何避免黄曲霉毒素污染提供参考。

本试验旨在研究添加不同乳酸菌剂对苜蓿青贮营养价值的影响。以紫花苜蓿为原料，分别添加干酪乳杆菌（A-LAB组）、植物乳杆菌（B-LAB组）和戊糖片球菌（C-LAB组）各1×10⁶ CFU/g进行青贮，同时设置空白对照。发酵45 d后，应用康奈尔净碳水化合物—蛋白质体系（CNCPS）对苜蓿青贮营养价值进行评定。结果表明，在蛋白质组分中，与对照组相比，添加乳酸菌剂能降低非蛋白氮（PA）含量，其中B-LAB组达到显著水平（P＜0.05）；乳酸菌剂组中速降解真蛋白质（PB₂）和慢速降解真蛋白质（PB₃）含量均高于对照组，但差异不显著（P＞0.05）。在碳水化合物组分中，添加乳酸菌剂提高了糖类（CA）、非结构性碳水化合物（CNSC）的含量，降低了可利用纤维（CB₂）的含量，其中A-LAB组达到显著水平（P＜0.05）。综上所述，添加乳酸菌剂能在一定程度上通过保护真蛋白和提高快速降解碳水化合物组分及非结构性碳水化合物含量，提高苜蓿青贮营养价值，且分别以添加植物乳杆菌和干酪乳杆菌效果较好。

本试验旨在通过对内蒙古绒山羊骨骼肌中氨基酸含量进行测定，并与之前文献报道的绵羊、牛、猪、鸡骨骼肌中氨基酸含量进行检测比较并分析。结果显示，试验检测的7种必需氨基酸含量物种间差异较大，但总含量都在35%以上，含量从大到小依次为：猪、鸡、绵羊、绒山羊、牛。绒山羊和绵羊的谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸和丙氨酸含量较高，提示鲜味氨基酸含量较高可能是羊肉味鲜美的主要原因。聚类分析结果显示19个绒山羊肌肉样品中的17个与所有绵羊、牛及鸡聚在一起，牛、绵羊与猪完全分开，提示反刍动物和单胃动物体内与鲜味相关的氨基酸模式存在差异。本研究为揭示反刍家畜骨骼肌蛋白特性提供了重要试验依据，并对将来深入揭示绒山羊肉质特性形成的机理提供一定的理论依据。

△³-△^{2-烯酰—辅酶A异构酶（△3-△2-enoyl-CoA isomerase,ECI）是生物体内核编码的酶，是参与β氧化过程中奇数和偶数位双键新陈代谢所必需的辅酶，它通过将不同位置和长度的反式或顺式-3烯酯酰辅酶A转化为反式-2烯酯酰辅酶A来催化β氧化反应，是该途径的关键辅酶。研究结果表明，该基因编码的酶对鼠和人等多种生物中不饱和脂肪酸β氧化有调控作用。综述ECI基因在细胞中的定位及分类、ECI基因表达对不饱和脂肪酸代谢的影响及其作用途径，并展望ECI基因今后的研究重点和方向。}

为研究紫玉米花色苷(purple corn anthocynins，PCA)的抗病毒效果，本试验先通过观察细胞病变效应测定了PCA对牛肾细胞传代系MDBK细胞的毒性作用，以此确定PCA的安全浓度范围；然后以3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测了安全浓度范围内的PCA对牛传染性鼻气管炎病毒在MDBK细胞中复制的影响。PCA毒性试验结果显示，PCA对MDBK细胞的最大安全浓度为262.14 μg/mL；而最小浓度为7.8125 μg/mL的PCA就能对牛传染性鼻气管炎病毒在MDBK细胞中的复制有明显抑制作用。MTT试验结果显示，PCA对MDBK细胞的半数抑制浓度（TC₅₀）为262.14 μg/mL，对病毒的半数抑制浓度（IC₅₀）为11.38 μg/mL，以此计算出治疗指数（TI）为23.04。由此证明PCA具有良好的抗牛传染性鼻气管炎病毒的作用，提示紫玉米可作为防制奶牛传染性鼻气管炎的饲料原料。

本试验旨在探讨黄芪多糖（Astragalus polysaccharides，APS）对泌乳期奶牛血清生化指标的影响。选用年龄、胎次和体重相近的健康荷斯坦奶牛40头，采用单因子完全随机试验设计，随机分为4组，每组10头奶牛，Ⅰ组为空白对照组，饲喂不含APS的基础日粮；Ⅱ～Ⅳ组分别饲喂添加10、50和100 g/（头·d）APS的基础日粮，试验期20 d。结果表明，随着APS添加剂量增加，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、γ-谷氨酰转移酶（γ-GGT）、碱性磷酸酶（ALP）、肌酸磷酸激酶（CK）活性及总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、总胆固醇(CHO）、总蛋白(TP)、白蛋白（ALB）、血糖（GLU）含量均无明显变化，与对照组相比差异均不显著（P＞0.05）；随着APS添加剂量增加，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组血清中甘油三酯（TG）含量呈下降趋势，且给药第10天时显著低于对照组（P＜0.05）。综上所述，生产中以黄芪多糖推荐剂量饲喂奶牛安全可靠，达到10倍推荐剂量时也无安全性问题，黄芪多糖可作为一种安全的抗氧化剂和免疫增强剂应用于奶牛养殖。

本试验通过分离葡萄原花青素（grape procyandins，GPC）混合物的不同组分，研究其对肉仔鸡外周血淋巴细胞（PBLs）增殖的影响，为筛选GPC功能组分提供依据和方法借鉴。首先选取0、0.24、1.2、6.0、30、150 μg/mL 6个终浓度的GPC混合物，确定混合物对肉仔鸡PBLs增殖效果最佳的浓度；然后通过反相高效液相色谱（RT-HPLC）实时分馏，得到GPC最佳浓度时的不同组分；选取GPC最佳浓度的不同组分，研究其对肉仔鸡PBLs增殖效果的最佳组分。结果显示，对肉仔鸡PBLs增殖效果最佳的GPC浓度为30 μg/mL，最佳组分为16～25 min馏出组分。

近年来随着硒与糖尿病关系研究的不断深入，人们发现硒在促进细胞对葡萄糖的摄入、糖代谢以及信号传导等方面都具有类胰岛素作用，但其有效剂量接近于毒性剂量，故出于安全性的考虑并不适用于人体。作者在对硒的类胰岛素作用研究进行综述的基础上，深入探讨了硒在糖代谢中的调控机制，为利用硒调控畜禽应激状态下的糖代谢紊乱提供参考。

为分离筛选用于牛活菌制剂的乳酸菌菌株，试验采用API 50CHL对从牛瘤胃中分离的60株乳酸菌进行生化鉴定，对鉴定出的菌株进行耐酸耐碱、生长温度、耐氧、耐药和抑菌性测定。结果显示，经生化鉴定出的3株菌分别为嗜酸乳杆菌（L.acidophilus）、发酵乳杆菌（L.fermentum）和乳明串珠菌（L.holzapfelii），分别命名为L1、L2和L3。其中，L1耐酸性最强，L2耐碱性最强，L1在37～40 ℃之间均生长良好且兼性厌氧；L1、L2、L3耐药率为60%～100%；3株乳酸菌对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑制作用，其中L1抑菌效果最好，抑菌圈直径分别为18.30和16.40 mm。提示，L1、L2可作为抗性乳酸菌活菌制剂的候选菌株。

为探讨Ca²⁺、K^+对犬心功能的影响及其在治疗犬电解质紊乱疾病中的作用，选取24～48月龄中华田园犬20只，公母各半，按年龄、性别及体重均分成2组。Ⅰ组按照1.5 mL/min对试验犬静脉注射5% KCl建立高钾血症模型，然后按照1 mL/min对其静脉注射适量CaCl₂以缓解其临床症状；Ⅱ组按照1 mL/min对试验犬静脉注射5% CaCl₂建立高钙血症模型，然后按照1.5 mL/min对其静脉注射适量KCl缓解其临床症状。采集试验犬在模型建立前、后及对模型犬注射CaCl₂（KCl）后血液2 mL，分离血清检测血清中K⁺、Ca²⁺、Na⁺、Cl^-离子浓度，同时监测各采样点试验犬血压、心率和心电图变化。结果显示，试验犬按照1.5 mL/min静脉注射5% KCl可成功建立高钾血症模型，此时血清K⁺浓度显著升高（P＜0.05），心率极显著下降（P＜0.01），收缩压显著下降（P＜0.05），心电图表现为心脏节律不齐，P波低平甚至消失，T波高尖呈斗篷状；对高钾血症模型犬静脉注射CaCl₂后，血清K⁺浓度显著下降（P＜0.05），心率显著升高（P＜0.05），心电图中P波重新出现，斗篷状的T波消失。按照1 mL/min静脉注射5% CaCl₂可成功建立高钙血症模型，此时血清Ca²⁺浓度极显著升高（P＜0.01），Na⁺浓度显著下降（P＜0.05），心率显著升高（P＜0.05），脉压极显著下降（P＜0.01），心电图表现为S-T段缩短甚至消失、T波增宽、Q-T间期缩短、出现特征性U波等变化；对高钙血症模型犬注射KCl后血清Ca²⁺浓度下降但差异不显著（P＞0.05），心率显著下降（P＜0.05），基本恢复正常，脉压持续下降但差异不显著（P＞0.05），此时心电图中T波明显升高、S-T段时限有所增加、U波消失等变化。结果表明静脉注射5% KCl（5% CaCl₂）可成功建立犬高钾血症（高钙血症）模型。对高钾血症犬静脉注射CaCl₂可使其心功能显著恢复；而对高钙血症犬静脉注射KCl其心功能恢复欠佳。

本研究旨在探讨马兜铃酸肾病（AAN）中标志性因子的表达变化。30只小鼠灌胃8 mg/(kg·d) 马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)，于不同时间处死，用常规病理切片染色法观察肾脏不同时间段的病理变化程度，以实时荧光定量PCR和Western blotting检查各组小鼠肾组织细胞标志性蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、角蛋白18（CK-18）、波形蛋白（vimentin）的表达变化。结果显示随着AAⅠ用药时间的延长，肾脏损伤逐渐加重，并证实AAⅠ可诱导小鼠肾脏发生上皮—间质转分化(EMT)，促进α-SMA、vimentin的mRNA及蛋白表达增加，抑制CK-18的表达，为AAN更深一步的机制研究提供有力的理论基础。

Toll样受体（toll like receptors，TLRs）能识别病原微生物相关分子模式，募集含有Toll/白介素-1受体（TIR）结构域的接头蛋白分子，通过髓样分化蛋白88（MyD88）依赖性信号传导通路或由β-干扰素TIR结构域衔接蛋白（TRIF）依赖性信号传导通路启动信号传导，继而引发特异性的免疫应答。作者就TLRs的结构特征、分布、配体识别、参与信号传导的接头蛋白分子及介导的信号传导通路的最新研究进展进行综述。

本试验研究了口服紫锥菊对清醒比格犬心率、心电、血压和呼吸的影响。结果显示，口服0.125～1.25 g/kg紫锥菊对清醒比格犬心率有明显降低作用，对心电图P波、T波、R波、Q-T间期、QRS间期、P-R间期及血压、呼吸均无显著影响（P>0.05）。表明紫锥菊对犬的呼吸系统和心血管系统均无明显影响，在药效剂量应用时安全可靠。

本试验旨在建立金根芩连散的质量标准，采用薄层色谱（TLC）法对组方中药材进行定性鉴别，确定了该制剂中金银花、黄芩、连翘及柴胡的薄层鉴别方法，在选定的色谱条件下，色谱斑点分离较好。该方法能有效的鉴别复方中的金银花、黄芩、连翘及柴胡。本试验所建立的方法简便、专属性强、重复性好，可为该复方的质量控制提供依据。

试验对绵羊精液分别采用液氮熏蒸冷冻法和冷冻仪冷冻法进行冷冻，通过测定精液解冻后精子活率、顶体完整率、质膜完整率和谷草转氨酶活性及乳酸脱氢酶活性来比较不同的冷冻方法对解冻后精液品质的影响；通过测定精液稀释后、平衡后、冷冻仪法冷冻后的酶活性来比较谷草转氨酶与乳酸脱氢酶在不同阶段的释放量。结果表明，采用冷冻仪法冷冻后的精子活率和质膜完整率极显著高于液氮熏蒸冷冻法（P<0.01）；冷冻仪法冷冻后的谷草转氨酶和乳酸脱氢酶活性极显著低于液氮熏蒸冷冻法（P<0.01）；精液稀释后的谷草转氨酶和乳酸脱氢酶活性极显著低于精液冷冻后的活性（P<0.01）。表明采用冷冻仪冷冻法的绵羊精液品质好于液氮熏蒸冷冻法。精子中谷草转氨酶主要在平衡阶段释放，而乳酸脱氢酶主要在冷冻阶段释放。

试验选择高繁殖力小尾寒羊为试验动物，采用公认的CIDR结合外源激素处理使其同期发情，与自然发情及乏情的小尾寒羊作对比，利用反转录荧光定量RT-PCR和Western blotting技术研究雌激素受体(estrogen receptor, ESR)基因在卵巢细胞中的表达差异，同时对其启动子区的甲基化岛进行了分析。结果发现，自然发情绵羊和外源激素处理发情的羊在发情表现和时间上无明显差别；在转录水平的检测结果上也无显著性差异(P＞0.05)；但是它们显著高于在乏情期绵羊卵巢细胞内的表达(P＜0.05)。尽管激素处理的同期发情羊卵巢细胞内的ESR蛋白表达量显著高于乏情期绵羊，但是仍然显著低于自然发情期绵羊卵巢细胞的表达(P＜0.05)。此外，自然发情和激素处理的绵羊ESR基因启动子区CpG岛甲基化水平分别为0和10.77%，而发情期绵羊ESR基因启动子处于超甲基化状态（92.30%）。以上结果说明，外源激素处理的同期发情小尾寒羊尽管发情表现、时间等与自然发情的绵羊类似，但是ESR基因在蛋白水平上差异显著，且其启动子区CpG岛甲基化水平也存在显著性差异，这也许是目前胚胎移植后着床率低下的原因之一。

本研究通过对转脂肪酸结合蛋白（fatty acid binding protein，FABP）基因2个子代小鼠的心脏、肝脏、骨骼肌、子宫、卵巢进行组织切片、傅里叶红外光谱及表观生长发育指标的检测与分析，结果表明，转FABP基因小鼠与非转基因小鼠无显著差异，可稳定遗传。

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为了研究抗热应激品种麒麟鸡（卷羽鸡）的肉用开发价值，试验对12周龄麒麟鸡体尺性状和屠宰性能进行测定及相关性分析，并构建简单回归方程。结果表明，12周龄麒麟公鸡龙骨长和胫长显著高于母鸡（P<0.05）；12周龄麒麟公鸡活重、屠体重、半净膛重、全净膛重和腿肌重显著高于母鸡（P<0.05），腹脂重和皮脂厚显著低于母鸡（P<0.05），其余指标公、母差异不显著（P＞0.05）；麒麟鸡屠宰性能与体尺性状绝大多数存在显著或极显著相关性，并建立了主要屠宰性状的回归模型，为通过麒麟鸡活体的体尺测量结果预测屠宰性能指标提供一定理论依据，同时加速了麒麟鸡的遗传育种进程。

为了研究胎次对杜洛克、长白和大白母猪繁殖性能的影响，根据江苏省某国家级生猪核心育种场2009—2011年出生的繁殖母猪资料，分别选取128头杜洛克、681头长白和610头大白母猪共7280窝生产数据，统计分析不同胎次母猪的总产仔数、产活仔数、断奶仔猪数、初生窝重及校正21日龄窝重。此外，依据胎次将母猪分为3个繁殖阶段（1～2胎、3～6胎及7～8胎）来探究品种差异对母猪繁殖性能的影响。结果表明：胎次对母猪繁殖性能有显著影响（P<0.05），母猪1～4胎的总产仔数、产活仔数、断奶仔猪数及初生窝重随胎次呈增加趋势，第4胎达到高峰，且显著高于其他胎次（P<0.05）；3～6胎繁殖性能较好，7胎之后出现迅速下降趋势；除在第4胎略有下降外，其他胎次的校正21日龄窝重随胎次递增。品种对母猪繁殖性能的影响显著（P<0.05），长白和大白母猪的繁殖性能均极显著高于杜洛克母猪（P<0.01）；长白母猪的产活仔数和校正21日龄窝重显著高于大白母猪（P<0.05），2个品种其他繁殖性能无显著差异（P＞0.05）。综上所述，杜洛克、长白和大白母猪的最佳繁殖胎次为3～6胎，长白猪的繁殖性能总体上优于大白猪，就本试验所在的育种场而言，长白猪可能更适合作为二元母猪生产中的母本。

为了解水貂皮肤毛囊发育的变化规律，本试验采集0～6周龄初生的美国短毛黑公水貂的背中部皮肤样品,用HE染色法制备组织切片，在显微镜下观察其皮肤毛囊结构及变化规律。结果发现，水貂的皮肤在出生前就已经基本发育完成，初级毛囊、次级毛囊的毛干具有髓质；水貂出生时可见初级毛囊而无次级毛囊，初级毛囊的密度随周龄的增加而增加，于4周龄后降低，初级毛囊在水貂4周龄后不再发育或很少发育， 4周龄时可见次级毛囊，次级毛囊随水貂体表的增长毛密度增加，且在水貂出生后大量发育。水貂6周龄时S/P值为2.95±0.23，次级毛囊仍将大量发育。水貂背中部表皮呈先增厚后变薄的变化，真皮随着周龄的增加而增厚；初级毛囊、次级毛囊随周龄的增加而加深。

为研究脂多糖对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)诱导的抗病毒免疫反应的影响,本研究采用100 TCID₅₀的PRRSV感染猪肺巨噬细胞（porcine alveolar macrophage，PAM），感染12 h后用100 ng/mL脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)处理感染细胞，分别培养12、24、36、48 h后收集细胞及上清，同时设PRRSV组、LPS组和PAM细胞组，用河南农业大学兽医微生物研究室已建立的Real-time qPCR方法对LPS+PRRSV组和PRRSV组中PRRSV复制水平及各组PAM细胞中IFN-α、TNF-α mRNA转录水平变化进行定量分析。结果显示，LPS+PRRSV组与PRRSV组相比，PRRSV拷贝数12～48 h均较低，IFN-α mRNA转录水平显著升高（P＜0.05），TNF-α mRNA转录水平升高，在48 h时转录水平降低。而与LPS组相比，LPS+PRRSV组IFN-α mRNA转录水平在12 h时升高，24、36、48 h均降低。结果表明，PRRSV感染PAM细胞经LPS刺激后，IFN-α、TNF-α mRNA转录水平显著升高（P＜0.05），从而抑制了PRRSV在PAM细胞内的复制。

随着分子生物学和基因工程的发展，减少疾病损失、提高畜禽产品质量、实施无公害生产的抗病育种研究已成为趋势。文章就目前鸡球虫病的防制现状，鸡球虫病预防的药物和疫苗的研究开发，特别是对鸡球虫病抗病育种研究进展进行了综述。尽管鸡球虫病的预防目前仍以药物和疫苗为主，但从长远来看，通过鸡球虫病的抗病育种，从而培育抗病鸡新品种或新品系将成为疾病防控的新途径。

该研究从四川成都某羊场腹泻简阳大耳山羊粪便中分离鉴定出奇异变形杆菌（14/20），随机选取5个菌株腹腔注射小鼠，5×10^8 CFU/只，小鼠于接种后12 h内全部死亡。PCR扩增分离株的16S rRNA序列，测序结果显示其与GenBank中奇异变形杆菌的序列同源性为99%～100%，分离菌株间的同源性为99.8%～100%；系统发育分析结果显示，分离菌株与不同宿主源奇异变形杆菌共聚为2个分支，存在一定的多样性，但其进化不存在显著的地域及宿主相关性。本研究结果表明，奇异变形杆菌与山羊腹泻密切相关，对养羊业的危害及公共卫生学意义值得关注。

为了研究药用植物内生真菌的次生代谢产物是否具有抑菌活性，以96株罗汉松内生真菌为研究材料，将菌丝及其培养液经氯仿—甲醇抽提后，采用杯碟法测定了全部菌株的抑菌活性。罗汉松内生真菌中49%的菌株具有抑菌作用，其中菌株LHS18、LHS42、LHS67、LHS92和LHS93抽提物经100倍稀释后对金黄色葡萄球菌仍有强的抑菌作用，菌株LHS30抽提物的100倍稀释溶液对大肠杆菌的生长有强烈的抑制作用。对抑菌活性较强的6株菌根据其ITS序列相似性进行了分子鉴定。菌株LHS18和LHS42鉴定为烟曲霉（Aspergillus fumigatus），LHS92为四孢脉孢菌（Neurospora tetrasperma），LHS30为丝枝霉（Aphanocladium sp.），LHS67为拟茎点霉（Phomopsis liquidambari），LHS93未能鉴定出种属。研究结果提示，罗汉松内生真菌中49%菌株具有抑菌活性，其中6株菌对动物和人类的病原菌有强列的抑制作用，是挖掘高效抑菌物质的重要资源。

为了对引起绵羊肺炎的病原进行分离、鉴定和耐药性分析，本研究通过无菌采集绵羊肺脏并对细菌进行分离纯化、生化试验和PCR鉴定，然后对所得到的溶血性曼氏杆菌分离株进行药物敏感性研究。结果显示，分离纯化得到的细菌为革兰氏阴性短杆菌，具有弱溶血性，经生化试验和PCR鉴定为溶血性曼氏杆菌；耐药性分析显示该菌株对恩诺沙星、庆大霉素、四环素等大部分药物敏感。本研究为绵羊溶血性曼氏杆菌感染的有效防制提供有用的信息和数据。

为探讨腐殖酸钠对大肠杆菌的抑制作用机理，试验采用稀释平板计数法测定不同水平腐殖酸钠对大肠杆菌的抑制效果，并通过透射电镜对大肠杆菌菌体进行观察。结果表明，添加5%、10%、15%腐殖酸钠可使大肠杆菌活菌数量明显降低（P＜0.05）；同一菌株随腐殖酸钠添加量增加，抑制效果明显加强（P＜0.05）；不同菌株在相同处理条件下，随时间的延长，抑制作用越明显。透射电镜下观察发现，添加5%腐殖酸钠组与添加5%腐殖酸钠调节pH组均可使大肠杆菌细胞膜通透性改变，细胞内出现空泡。综上所述，腐殖酸钠可有效抑制大肠杆菌生长。

为了调查新疆伊犁某牛场饮水、饲料和粪样中分离的大肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药情况。本试验采用微量肉汤稀释法，对饮水源、饲料源、牛粪源样品中分离出的大肠杆菌进行最小抑菌浓度测定。结果显示，25份牛场饮水源样品，大肠杆菌分离率为100.0%（25/25），对阿莫西林/克拉维酸（12.0%）、氨苄西林（4.0%）、诺氟沙星（4.0%）、恩诺沙星（8.0%）和安普霉素（8.0%）5种抗菌药物耐药；72份牛场饲料源样品，大肠杆菌分离率为65.3%（47/72），对阿莫西林/克拉维酸（36.2%）、氨苄西林（19.1%）、诺氟沙星（4.3%）和安普霉素（4.3%）4种抗菌药物耐药；80份牛粪源样品，大肠杆菌分离率为100.0%（80/80），对阿米卡星（12.5%）、氨苄西林（7.5%）、恩诺沙星（7.5%）、庆大霉素（5.0%）、诺氟沙星（2.5%）、环丙沙星（2.5%）、阿莫西林/克拉维酸（1.3%）和头孢噻呋（1.3%）8种抗菌药物耐药，仅对安普霉素敏感。该牛场分离的大肠杆菌对常用抗菌药物耐药情况一般，但中介率较高，须在临床治疗细菌性疾病中避免使用不敏感和中介率高的抗菌药物，养殖场饮水和饲料有被耐药大肠杆菌污染的风险。

中国于2013年底首次发现H10N8亚型禽流感病毒（AIV）能感染人并致死的病例，而在此之前从未有过关于H10N8亚型病毒能感染人的报道，目前也未在其他国家监测到H10N8亚型AIV感染人的病例。与H7N9亚型AIV相似，H10N8亚型AIV在家禽中致病性很弱，可一旦感染人能表现出很强的致病性。感染了H10N8亚型AIV的患者病情恶化快、死亡率高、对人的健康危害很大，但至今尚无有效的防制手段。目前还不太清楚H10N8亚型AIV是通过何种途径传播给人的，今后H10N8亚型AIV是否会在人群中引发新的疫情暴发是人们普遍关心的问题。文章简要介绍了H10N8亚型AIV的特点及研究现状。

为研究食淀粉乳杆菌（Lactobacillus amylovorus）代谢产物抑菌和抗病毒的作用机制并确定其成分，试验采用过酸、过氧化氢酶及蛋白酶等处理食淀粉乳杆菌培养上清液，并利用琼脂扩散法（牛津杯法）和MTT法分别检测了食淀粉乳杆菌培养上清液对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌活力及对猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）感染猪小肠上皮细胞的抗病毒活性。结果显示，经过氧化氢酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶处理后的食淀粉乳杆菌培养上清液的抑菌效果显著降低（P<0.05），但抗病毒活性变化不显著（P>0.05）；经酸、蛋白酶K处理后的食淀粉乳杆菌培养上清液的抑菌效果和抗病毒活性都显著减弱（P<0.05），表明食淀粉乳杆菌培养上清液中抑菌与抗病毒成分有一致性，且为酸性物质和对蛋白酶K敏感的蛋白类物质。

本试验旨在从泰山土壤中筛选出具有降解黄曲霉毒素B₁（AFB₁）作用的枯草芽孢杆菌，经16S rRNA基因测序鉴定为枯草芽孢杆菌，最终确定1株具有较高降解作用的枯草芽孢杆菌，命名为泰山枯草芽孢杆菌，并利用该菌株对AFB₁进行了降解率、活性组分、性质的确定及降解饲料中AFB₁效果的研究。结果表明，泰山枯草芽孢杆菌对AFB₁的降解率达90.28%，其中，泰山枯草芽孢杆菌发酵后的上清液对AFB₁的降解活性最高，确定发酵后的上清液中存在解毒活性组分；对解毒活性物质进行加热和蛋白酶K变性处理后，解毒活性显著降低，表明起解毒作用的活性物质是其分泌的一种胞外酶；应用性试验进一步证明泰山枯草芽孢杆菌能降解霉变饲料中的AFB₁，可在饲料或食品行业应用。

为了分析牛源大肠杆菌生长周期中不同阶段蛋白的表达变化，本研究采用二维凝胶电泳结合质谱技术分离并鉴定了大肠杆菌生长周期中延迟期、对数期和平稳期菌体全蛋白的表达变化。结果显示，大肠杆菌菌体全蛋白组成在延迟期、对数期和平稳期存在差异，大肠杆菌生长延迟期的外膜蛋白W和磷酸丙酮酸羧化酶表达量高于对数期和平稳期，而周质蛋白、外膜蛋白Ⅱ和磷酸转乙酰酶表达量低于对数期和平稳期。本研究结果初步揭示了菌体蛋白表达变化与细菌生长的关系，为进一步用于大肠杆菌奶牛乳房炎的防控提供参考。