本研究旨在探明胰岛素样生长因子结合蛋白(insulin-like growth factor-binding protein,IGFBP)在内蒙古白绒山羊绒毛发育的不同生长阶段皮肤组织中的表达变化情况。试验采用实时荧光定量PCR技术,对内蒙古白绒山羊绒毛生长发育的各个时期皮肤中IGFBP-1~IGFBP-6基因的表达进行了测定,并通过埋植褪黑素组改变绒毛生长周期的研究,来鉴定IGFBP-1~IGFBP-6基因中高表达的结合蛋白的作用。结果表明,IGFBP-3和IGFBP-5在绒山羊绒毛生长发育的各个时期的皮肤组织中均有表达,但是IGFBP-5的表达相对于IGFBP-3的表达具有很强的规律性。结果提示,在内蒙古白绒山羊的绒毛发育过程中,IGFBP-5可能是一个主要的调控因子。

试验旨在探究在猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染过程中环腺苷酸(cAMP)特异性磷酸二酯酶(PDE)的活性及其mRNA表达量的变化,以期为PDE抑制剂的应用提供相关依据。试验采集PRRSV感染猪肺脏组织,运用高效液相色谱(HPLC)法检测cAMP在PDE反应前后的变化,计算cAMP-PDE活性;通过Real-time PCR检测cAMP-PDE mRNA表达量的变化。结果显示,PRRSV感染猪肺脏组织中cAMP-PDE活性显著高于对照组(P<0.05),在检测的8个PDE亚型中,除PDE4A外,PDE4B、PDE4C、PDE4D、PDE7A、PDE7B、PDE8A、PDE8B mRNA的表达量均高于对照组。结果表明,cAMP-PDE在PRRSV感染引起的猪肺脏部的炎症反应过程中存在异常变化,提示cAMP-PDE特异性抑制剂有望减轻PRRSV感染引起的猪肺脏部炎症损伤。

为了测定H1N1亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)对小鼠的致病性,本试验对A/swine/Guangdong/2/2012(H1N1)株SIV HA基因进行克隆及遗传分析,并将SIV尿囊液经鼻腔感染6周龄BALB/c小鼠,观察感染后小鼠的一般状况、器官系数和组织病理学变化,在病毒感染后第1、3和7天使用荧光定量PCR测定小鼠肺脏、脾脏、脑组织中7种细胞因子mRNA的表达量,研究其对小鼠的致病特性。结果显示,该病毒属于经典SIV,病毒经鼻腔感染后可引起小鼠活动减少、采食量降低,但无咳嗽和死亡;病理组织学变化为肺间隔较正常组织明显增厚,毛细血管明显扩张充血,周围肺泡腔呈代偿性肺气肿;小鼠肺脏、脾脏组织样本中IFN-α、IFN-β、IP-10、IL-1β、TNF-α、IRF-3和IL-10 mRNA含量在感染后第3天均显著升高(P<0.05),而脑组织样本中IL-1β和IL-10在小鼠攻毒后第3和7天均显著上调(P<0.05)。

通过PCR方法扩增得到Ⅱ群禽腺病毒火鸡出血性肠炎病毒(HEV)的五邻体(penton)基因,并构建了原核表达载体pET-32a-penton,将其转化至E.coil BL21中,通过诱导表达,以切胶回收的方式纯化蛋白,获得约70 ku的重组融合蛋白,Western blotting检测纯化后的重组蛋白具有较好的抗原性。将纯化后的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备了五邻体蛋白单因子血清,间接ELISA检测结果显示所制备的抗血清效价大于1:40000。本试验获得的高效单因子血清,为Ⅱ群禽腺病毒特异性检测方法的研究奠定了基础。

为探讨不同日粮对乌金猪不同生长阶段脂类合成代谢相关基因表达的影响,试验选取体重约23 kg乌金猪36头,公、母各半,随机分为2个处理组,每个处理组3个重复,每个重复6头。处理1组饲喂乌金猪日粮,处理2组饲喂NRC日粮。分别于30、60和100 kg体重时屠宰,通过Real-time PCR比较研究3个脂肪合成代谢相关基因在脂肪组织中表达的差异。结果显示,体重30 kg时,处理1组脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)的相对表达量显著低于处理2组(P<0.05),60和100 kg时,处理1组FAS基因的相对表达量高于处理2组,60 kg时达到显著水平(P<0.05);在各个体重时,处理1组固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulator element binding protein-1c,SREBP-1c)的相对表达量均高于处理2组,30和60 kg时达到显著水平(P<0.05);在各个体重时,处理1组二酰基甘油酰基转移酶1(diacylglycerol acyltransferase-1,DGAT-1)的相对表达量低于处理2组,100 kg时达到显著水平(P<0.05)。提示,不同日粮调控不同体重乌金猪脂类合成代谢相关基因表达存在着差异。

为研究鲁豫冀地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的遗传变异情况,对2006—2012年来自3省区发病猪场的42份样品进行PRRSV分离鉴定,并进行了生物学特性研究和PCR鉴定,结果显示先后分离到15株PRRSV。分别采用RT-PCR扩增其ORF5基因和部分Nsp2基因并测序,与GenBank中68个ORF5序列和40个Nsp2序列的推导氨基酸序列进行比对,遗传变异分析结果表明,15株分离株均属于美洲型毒株,其中13个毒株Nsp2基因推导的氨基酸序列均存在氨基酸的不连续缺失,其ORF5基因推导的氨基酸序列与JXA1株有较高的同源性(95.5%~97.5%);SDDY2007株与疫苗株RespPRRS MLV和VR2332株亲缘关系相近,处于同一个亚群中;而HN25-2009分离株Nsp2基因推导的氨基酸序列有30个氨基酸的特征性缺失,其ORF5基因推导的氨基酸序列的遗传进化分析结果显示该分离株处于VR2332所在亚群(氨基酸同源性97.5%),具有一定特殊性。本试验结果表明,2006—2012年高致病性PRRSV是鲁豫冀地区的优势流行毒株,且存在疫苗毒株,3省区流行毒株间有一定遗传差异,但无明显地域特征。

采用RT-PCR方法从Ⅰ型鸭肝炎病毒ZJ-Ⅴ株中扩增VP3基因,运用DNAStar软件对VP3序列与参考序列的同源性进行比对,并进行了遗传进化分析,然后将VP3基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),获得重组表达质粒pET-VP3,转化宿主菌E.coli Rosetta(DE3),经1 mmol/L IPTG诱导表达后用SDS-PAGE和Western blotting方法对表达产物进行检测。结果显示,成功克隆了DHV-Ⅰ VP3基因,片段大小为711 bp。序列分析结果表明,ZJ-Ⅴ株VP3与其他A型DHV分离株的同源性较高,为95.1%~97.7%;而与C型DHV分离株的同源性较低,为71.3%~72.6%;与B型DHV分离株的VP3基因同源性最差,为70.3%~70.5%。SDS-PAGE和Western blotting检测结果显示,重组VP3基因在大肠杆菌细胞(DE3)中获得了良好表达,其分子质量约为47 ku;与抗Ⅰ型鸭肝炎病毒ZJ-Ⅴ株阳性血清发生特异性免疫反应,表明重组VP3蛋白具有良好免疫原性。

新城疫病毒Ⅰ系苗Mukteswar株为中等毒力,野外分离株JS/7/05/Ch的基因组核苷酸与其具有高于99%的相似性,但其毒力却明显强于前者。为了给基因Ⅲ型NDV的遗传进化机制研究提供基础,本研究成功构建了JS/7/05/Ch株的反向遗传平台。首先根据GenBank上公布的基因Ⅲ型新城疫病毒JS/7/05/Ch株基因组全序列设计并合成8对引物,RT-PCR扩增目的片段后,分别依次亚克隆至pCR2.1载体中构建含有JS/7/05/Ch全长基因组cDNA的克隆质粒pJS/7/05/Ch,然后再通过特异性酶切位点将JS/7/05株全长基因组cDNA转移到TVT7R(0.0)转录载体中,成功构建出含JS/7/05/Ch株基因组全长cDNA的转录质粒pTVT/JS705。然后将该质粒与3个辅助质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,转染60 h后将该细胞及其上清接种鸡胚;血凝(HA)试验和RT-PCR结果表明JS/7/05/Ch株新城疫病毒被成功拯救。

本试验以鲤鱼外周血白细胞肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)EST序列为基础,经地高辛标记后作为探针,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,从重组噬菌体中经过两轮筛选获得阳性克隆。序列分析结果显示,该序列包含有5'-非编码区(5'-UTR) 25 bp;3'-非编码区(3'-UTR) 535 bp,存在2个mRNA不稳定基序ATTTA;开放阅读框ORF长1632 bp,编码543个氨基酸。预测蛋白质等电点为5.88,分子质量大小为61.773 ku。序列同源性比对结果表明,所获得的序列与GenBank上登录的鲤鱼TRAF6a基因同源性达99%。蛋白质序列分析结果发现,其具有TRAF家族的典型序列特征。

为调查产CMY-2大肠杆菌在广东各养殖场的流行情况,对2010—2011年间分离自猪、鸡、鸭、鹅等动物的1293株大肠杆菌,采用PCR方法筛选出bla_CMY-2阳性菌株,琼脂稀释法测定阳性菌株对17种抗微生物药物的敏感性;接合转移试验和XbaⅠ酶切PFGE图谱分析bla_CMY-2基因转移扩散的方式。结果显示,1293株大肠杆菌中27 株含有bla_CMY-2 基因,检出率为2.09%,均为多重耐药菌株,主要耐药谱型为AMP/CHL/TET/FLF/CTF/CTX/CAZ/CTR/GEN/CIP/ENR/NAL/OQX;27 株携带bla_CMY-2 基因菌株中有14 株的bla_CMY-2 基因可随质粒转移到受体菌E.coli C600中,且往往与bla_TEM-1和(或)qnrS1共同转移;PFGE分析结果显示,27 株携带bla_CMY-2 基因菌株共产生17条谱带,其中有4株菌株,两两分别来自同一地区,存在克隆传播关系。提示,在广东地区食品动物养殖场内存在产CMY-2大肠杆菌的克隆传播,且bla_CMY-2 基因伴随可转移质粒或其他可转移移动元件可能是造成产CMY-2大肠杆菌流行分布的主要原因。

脂质运载蛋白(lipocalin,Lcn)家族的功能十分重要,其中附睾分泌的Lcn家族能结合一些小分子配体,呈高度区域性分布,参与很多生物调控过程,在精子成熟过程中扮演重要角色,可为研究附睾功能提供理论基础。作者介绍了Lcn家族的结构特征、Lcn在附睾中的表达、作用及研究现状。

本研究以海南黑山羊睾丸组织为材料,利用RT-PCR和RACE技术获得海南黑山羊小分子热休克蛋白9(small heat shock protein 9,Hspb9)基因完整的CDS序列,并对其进行生物信息学分析。结果表明,克隆得到山羊Hspb9 cDNA 长549 bp,CDS区471 bp,共编码157个氨基酸,提交至GenBank数据库中,登录号为:JX088726。生物信息学分析结果表明,Hspb9编码的蛋白无跨膜区和信号肽,存在多个磷酸化位点;预测Hspb9蛋白二级结构α-螺旋占15.28%,β-折叠占30.57%,无规则卷曲占54.15%;存在1个UBQ结构域;Clustel W方法比对山羊Hspb9与绵羊、牛的同源性最高。

试验旨在提高狂犬病病毒(rabies virus,RV)糖蛋白(G)在大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)中的表达量。通过优化蛋白质诱导表达的温度、时间、诱导剂浓度等条件,以提高该蛋白质的表达量。SDS-PAGE电泳分析结果显示,重组质粒在1 mmol/mL IPTG、30 ℃诱导6 h条件下蛋白表达量最高,经GST-resin亲和层析柱法纯化获得的纯化蛋白约为36 ku,与预期大小相符。Western blotting结果显示,表达蛋白具有很好的免疫原性和特异性。结果表明,RV G融合蛋白的优化表达和纯化为RV亚单位疫苗及中和抗体的研制奠定了基础。

为制备抗柱状黄杆菌多克隆抗体,本研究利用颗粒性抗原免疫新西兰白兔,收集的抗血清通过辛酸-硫酸铵法纯化,采用间接ELISA法检测纯化后多克隆抗体的效价和交叉反应性。结果显示,制备的多克隆抗体蛋白质浓度为29.28 mg/mL,效价在1:6.4×10⁴以上,与迟钝爱德华氏菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌及哈维氏弧菌等水生动物致病菌均无交叉反应。本研究成功建立了抗柱状黄杆菌多克隆抗体的制备方法,可用于柱状黄杆菌的快速检测。

本研究旨在筛选脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)染毒小鼠的理想内参基因。试验以健康小鼠肝脏和LPS染毒后3、6、12、18 h的小鼠肝脏为研究对象,荧光定量RT-PCR评价YWHAZ、HPRT1、PPIA、ACTB和18S rRNA 5个内参基因的表达情况,并用geNorm软件分析其表达的稳定性。结果表明,除18S rRNA在LPS染毒时不能稳定表达外,其余4个内参基因在健康小鼠肝脏和LPS染毒小鼠肝脏中均能稳定表达,其中PPIA和YWHAZ的表达最稳定。本试验结果为荧光定量RT-PCR研究LPS与小鼠相互作用时mRNA表达水平提供了依据。

利用PCR技术从弓形虫RH株基因组中扩增出Rop18基因片段,克隆入pET-30a载体,将重组质粒转化入大肠杆菌Top10中,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与参考序列(登录号:JX045329.1)比对发现,核苷酸同源性为99.6%。将阳性重组质粒转化入大肠杆菌BL21中,表达产物经SDS-PAGE检测结果显示,Rop18基因在大肠杆菌中成功表达;融合蛋白的分子质量在66.2 ku左右,Western blotting显示其能被兔抗弓形虫免疫血清识别。结果表明,弓形虫RH株Rop18基因可以在原核表达系统中高效表达,该重组蛋白具有免疫原性,有望作为弓形虫疫苗候选抗原。

为研制抗三肽囊素(bursin,KHG-NH₂)的单克隆抗体,本试验采用EDC法将三肽囊素分子赖氨酰(K)上的氨基与载体蛋白(BSA或OVA)定向偶联,分别制备三肽囊素免疫抗原(BSA-KHG-NH₂)和检测抗原(OVA-KHG-NH₂)。以BSA-KHG-NH₂免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术,筛选到18株能稳定分泌抗三肽囊素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。这18株单克隆抗体与三肽囊素人工抗原的结合均能被三肽囊素、GKHG-NH₂四肽阻断,但不能被KHGK四肽阻断,表明18株单抗与三肽囊素分子的结合具有高度特异性。以本研究制备的单抗2D2建立间接竞争ELISA方法,检测三肽囊素含量,检测下限为4 ng/mL,线性范围为4~500 ng/mL,加标检测回收率为85.0%~92.4%。

为确定西藏新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)分离株HN基因结构特征及其与已知毒株的遗传相关性,本试验应用RT-PCR技术对西藏NDV分离株HN基因进行扩增,然后克隆至pMD18-T载体测序,并与国内外代表性毒株和当前疫苗株进行比对及系统发育分析。结果表明,NDV分离株HN基因片段长度为1734 bp, 编码577个氨基酸;推导的氨基酸序列均有5个糖基化位点, XZ10和XZ17有12个半胱氨酸残基,XZ20只有11个半胱氨酸残基。NDV西藏分离株HN基因与国内代表性毒株核苷酸同源性在81.1%~93.0%之间,氨基酸同源性在81.1%~93.6%之间;与疫苗株核苷酸同源性在87.8%~98.7%之间,氨基酸同源性在88.0%~98.9%之间。系统进化分析结果表明,NDV西藏分离株HN基因均属于Ⅱ型。

信号转导与转录激活子5(signal transducer and activator of transcription,STAT5)作为一种重要的信号转导与转录激活子,能被多种细胞因子和多肽类激素激活,引起靶基因的转录。参与调控细胞的增殖、分化及凋亡,并对生物体的生长、造血和免疫应答具有重要意义,其活性的高低与肿瘤的发生和发展关系密切。作者重点阐述了STAT5的结构和生物学功能。

本试验旨在研究8~14日龄能量限饲对肉仔鸡生长性能、屠宰性能、内脏器官和胫骨生长的影响。选择同一批出雏、健康、体重相近的1日龄AA公雏300只,随机分为4组,每组5个重复,每个重复15只。基础日粮在8~14日龄分别限饲能量0、5%、10%和15%,其余营养水平均满足肉仔鸡生长需求,14、42日龄从各重复中选取1只接近该重复平均体重的鸡屠宰进行测定。结果表明:①从生长性能上看,肉仔鸡8~14日龄限饲能量10%组采食量显著大于其他组(P<0.05),14日龄体重显著大于对照组(P<0.05),限饲能量15%组料重比显著大于其他组(P<0.05),限饲能量10%组15~42日龄采食量显著大于其他组(P<0.05),42日龄体重显著大于其他组(P<0.05);②从屠宰性能上看,8~14日龄能量限饲对肉仔鸡42日龄屠宰性能无显著影响(P>0.05);③从内脏器官上看,早期能量限饲有利于增加肉仔鸡限饲期心脏重量,限饲能量10%组心脏重量显著大于对照组(P<0.05),限饲组腺胃重均显著大于对照组(P<0.05),限饲能量10%组42日龄肌胃重显著大于其他组(P<0.05);④从胫骨生长上看,限饲能量5%组胫骨密度显著大于对照组(P<0.05),其他指标与对照组相比均无显著差异(P>0.05)。提示,肉仔鸡8~14日龄日粮能量适宜限饲水平为10%。

试验旨在研究复合微生态制剂和开口抗生素对肉雏鸡免疫性能、肠道菌群和血清生化指标的影响。选取180只1日龄健康雌性白羽肉雏鸡,随机分为3组,每组3个重复,每个重复20只。Ⅰ组为对照组,饲喂不含抗生素的基础日粮;Ⅱ组为复合微生态制剂组,在基础日粮中添加2.0‰复合微生态制剂产品;Ⅲ组为开口抗生素组,在基础日粮中添加莫能霉素(90 g/t)、抗敌素(30 g/t)和阿散酸(100 g/t)。试验期14 d。结果表明:①14日龄时,试验Ⅱ组法氏囊指数和脾脏指数分别显著高于对照组和试验Ⅲ组(P<0.05);②7日龄时,试验Ⅱ组盲肠大肠杆菌数显著低于对照组(P<0.05),14日龄时,试验Ⅱ组小肠乳酸菌数显著高于试验Ⅲ组(P<0.05);③14日龄时,试验Ⅲ组肉雏鸡血清白介素2含量显著低于试验Ⅱ组和对照组(P<0.05),谷丙转氨酶含量显著高于试验Ⅱ组(P<0.05),但与对照组相比差异不显著(P>0.05),且14日龄时,试验Ⅱ组尿素氮含量显著低于试验Ⅲ组(P<0.05)。提示,在基础日粮中添加2.0‰复合微生态制剂能部分或全部替代开口抗生素应用在肉雏鸡生产中。

本研究旨在探讨苜蓿草粉对肉兔脂质代谢和抗氧化性能的影响。采用随机区组试验设计将120只生长兔分为6组,即分别在日粮中添加0(对照组)、20%(试验Ⅰ组)、30%(试验Ⅱ组)、40%(试验Ⅲ组)、50%(试验Ⅳ组)和60%(试验Ⅴ组)的苜蓿草粉,试验期45 d。结果表明:①除试验Ⅴ组外,血液中的甘油三酯和总胆固醇含量随苜蓿草粉的增加而降低;②肝脏和肌肉中总胆固醇、甘油三酯含量随苜蓿草粉添加量的增加而降低,但只有肌肉中的总胆固醇含量在试验组间存在差异性,即试验Ⅳ组显著低于对照组(P<0.05),其余均不显著(P>0.05);③血清、肝脏及肌肉中超氧化物歧化物酶和谷胱甘肽过氧化酶含量随苜蓿草粉的增加而显著升高(P<0.05),丙二醛含量显著降低(P<0.05)。提示,在肉兔日粮中添加40%~50%苜蓿草粉能起到降低肉兔血液和肌肉中总胆固醇含量,提高兔体抗氧化性能的作用。

本试验旨在研究生产性能测定站对猪生产性能和行为的影响。选用平均体重为28.2 kg的大白猪122头,公、母各半,按圈随机分成3组,分别为试验1组(普通料槽15头组)、试验2组(测定站15头组)及试验3组(测定站8头组),试验1、2组各3个重复,试验3组4个重复,试验期44 d。试验前对测定站精准性进行评价;试验期间测定猪生产性能和皮肤损伤,并对猪行为进行录像。结果表明,测定站料槽和体重称量秤精准性符合其技术参数;3组之间猪生产性能均无显著差异(P>0.05),试验3组猪的末重变异系数呈下降趋势(44.48%),试验1组猪的末重、平均日增重和平均日采食量略高于试验2组;测定站极显著增加了猪的皮肤损伤评分(P<0.01),极显著增加了试验2组第1天时的攻击行为(P<0.01),极显著降低了第7天的攻击行为(P<0.01),但采食猪所占比例相对较低,试验2组显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)提高了猪的圈友操纵行为。

本试验选择30头1月龄短途运输后奶公犊,随机分为A、B和C 3组,A和B组在日粮中分别添加5和10 g/(头·d)黄芪多糖,C组为对照组,不添加黄芪多糖,以探讨日粮中添加不同水平黄芪多糖对育肥奶公犊生产性能的影响。结果表明,日粮中添加5和10 g/(头·d)黄芪多糖均可显著提高奶公犊的采食量和日增重(P<0.05),降低腹泻频率,促进体尺指标发育。考虑成本等因素,建议生产上采用5 g/(头·d)黄芪多糖的添加量。

文章简述了体况评分(body condition score,BCS)细则与方法,综述了体况评分体系,体况评分与奶牛健康状况、生产性能、繁殖性能和奶牛福利之间的关系,以及体况评分报告在牧场管理中的撰写与应用。以使体况评分在奶牛的饲养管理上更好的行使其"指示器"的功能。

试验选择体质良好41周龄的罗曼褐壳蛋鸡945只,分成5组,每组3个重复,每个重复63只。Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组为试验组,分别在基础日粮中添加0.1%中草药A(党参、当归、虎板、菟丝子、益母草、大蒜素、多维等)、0.1%中草药B(当归、甘草(浆)、干姜、知母、多维等)、0.1%中草药C(水牛角、石膏、黄连、牡开皮、秸秆、甘草、连翅、知母)和0.1%中草药D(穿心莲、苦参、板蓝根、甘草、恩诺少量),预试期7 d,正试期56 d,研究不同复方中草药添加剂对蛋鸡生产性能的影响。结果显示,44周龄末,试验Ⅱ、Ⅲ组产蛋率比对照组分别提高0.92%(P<0.05)和0.78%(P<0.05);49周龄末,对照组产蛋率显著低于各试验组(P<0.05),且试验Ⅱ组蛋重显著高于其他各组(P<0.05)。提示,复方中草药添加剂显著改善了蛋鸡的平均产蛋率、平均蛋重和死淘率,其中以试验Ⅱ组配方效果较好。

本试验旨在研究布拖黑绵羊及凉山半细毛羊改良羊的脂肪酸及挥发性成分的种类及含量,并比较二者的异同。利用顶空固相微萃取—气相色谱—质谱(SPME-GC/MS)联用分析技术,对1周岁布拖黑绵羊及凉山半细毛羊改良羊各部位肌肉混合肉样脂肪酸的组成和挥发性成分进行研究。结果表明,脂肪酸主要由豆蔻酸、棕榈酸、棕榈烯酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、花生酸和亚麻酸等构成,其中布拖黑绵羊与凉山半细毛羊改良羊肌肉中亚油酸含量差异显著(P<0.05),其他脂肪酸含量差异不显著(P>0.05);布拖黑绵羊中检测到48种挥发性化合物,而凉山半细毛羊改良羊中检测到56种挥发性化合物,二者共同挥发性成分主要有己醛、庚醛、1-辛烯-3-醇、2-戊基呋喃、2,3-辛二酮、辛醛、苯甲醛、壬醛等,不同羊存在个体差异,且2种绵羊挥发性成分中占主要地位的可能是醛类。

试验旨在研究D-半乳糖饲喂及D-半乳糖、葡萄糖和链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射4种方法能否成功建立大鼠糖性白内障模型,并在此基础上探讨各种方法的优缺点,以期找出一种快速、有效、安全性高、实用性及可重复性强的大鼠糖性白内障模型建立方法,并为犬糖性白内障模型建立提供理论依据。本试验采用D-半乳糖饲喂(日粮30%)及50% D-半乳糖(15 g/kg)、50%葡萄糖(15 g/kg)和STZ(70 mg/kg)腹腔注射4种方法对同日龄大鼠进行模型建立,试验周期为30 d,给药48 h后尾静脉穿刺测定血糖,72 h后用裂隙灯检查晶状体变化情况,每隔3 d测定体重变化,同时每天测定饮水量及摄食量。试验结果显示,D-半乳糖饲喂组晶状体无异常变化;D-半乳糖腹腔注射组和葡萄糖腹腔注射组血糖始终未达到糖尿病血糖标准,但均在第3天可见白内障发生;STZ腹腔注射组在72 h动物出现糖尿病症状,4~5周诱发白内障。结果表明,D-半乳糖饲喂不能使大鼠产生白内障;D-半乳糖腹腔注射及葡萄糖腹腔注射仅需3 d即可诱发白内障,快速且成模率高,适合进行白内障药物延缓效应的研究;STZ腹腔注射需4~5周建立糖性白内障模型,因而更适用于研究糖性白内障的发病机制。

胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES)是从早期囊胚内细胞团分离培养出来的能够不断维持自我更新和具有发育多能性的细胞。Wnt信号通路在维持胚胎干细胞的自我更新方面起着重要作用,糖原合成激酶 (glycogen synthase kinase-3,GSK-3)抑制剂可以激活Wnt信号通路,促进胚胎干细胞自我更新和增强细胞间连接。作者就GSK-3抑制剂在胚胎干细胞自我更新、细胞连接方面的作用及其作用机制进行简单综述。

为探讨白花蛇舌草多糖对小鼠免疫功能和生长发育的影响,本研究将60只雌性昆明小鼠随机等分为4组,1~3组分别以50、100和150 mg/kg 体重的白花蛇舌草多糖粗提物灌胃小鼠,连续给药7 d,第4组以等量的生理盐水灌胃,作为空白对照组。最后一次给药12 h后,各组小鼠用鸡新城疫弱毒疫苗接种,2头份/只,分别于给药结束后的7、14和21 d采小鼠外周血并分离淋巴细胞和血清。用淋巴细胞转化试验(CCK-8法)测定外周血淋巴细胞增殖能力;微量血凝抑制试验评价血清中新城疫抗体水平;测定各组小鼠体重;21 d测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力,并测定脾脏指数。统计学分析结果显示,白花蛇舌草多糖组小鼠的外周血淋巴细胞增殖能力、免疫抗体水平、腹腔巨噬细胞吞噬能力、脾脏指数和体重均显著高于对照组(P<0.05),且具有量效关系。结果表明,白花蛇舌草多糖能显著提高机体的特异性免疫和非特异性免疫功能,促进机体的生长发育。本试验结果为利用白花蛇舌草多糖开发保健产品提供了参考。

本研究采用改良的两步胶原酶灌流法分离培养大鼠肝脏细胞,并对其进行了形态学观察、功能检测及表面受体的鉴定,以探索其短期培养的最佳功能状态。结果表明,平均每只大鼠可获取2.12×10⁸个肝脏细胞,平均活率达94.23%;光镜下观察发现肝脏细胞呈多角形并成片生长;对肝脏细胞的LDH、Alb和尿素进行连续检测,结果发现细胞离体培养第3天功能较好;Mab263-PE单抗鉴定结果显示,肝脏细胞生长激素受体功能健全尚未受损,为细胞信号转导等相关试验奠定了基础。

生长激素(growth hormone,GH)是一种含有191个氨基酸的多肽类激素,分子质量为22 ku,由垂体前叶分泌进入血液循环,与靶细胞膜表面以二聚体形式存在的生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)相结合。对于受体的激活来说,仅是二聚化还不够,还需在GH的诱导下发生构象变化,进而才能诱发Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)的酪氨酸磷酸化,并通过4条不同的路径将信号传入细胞内,从而发挥代谢、增殖及分化等一系列生理效应。作者就生长激素与受体的结构、作用机理、信号转导通路的进展进行综述。

试验以喹喔啉-2-羧酸(quinoxaline-2-carboxylic acid,QCA)及其与γ-氨基丁酸(ABA)的衍生物(QCA-ABA)为半抗原,将其与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)偶联,合成人工抗原。以QCA-BSA和QCA-ABA-BSA为免疫原,免疫大白兔制备多克隆抗体,利用紫外分光光度计分析结合物的结合情况,间接ELISA和间接竞争ELISA分析抗体特性。结果表明,以QCA-BSA、QCA-ABA-BSA为免疫原制备的抗体平均效价分别为12.8×10⁴、6.4×10⁴。2种抗体对QCA灵敏度低,IC₅₀均大于10000 ng/mL,而对QCA-ABA的灵敏度高,IC₅₀分别为14.2和7.75 ng/mL,特异性好,仅与3-甲基-喹喔啉-2-羧酸(12%)、卡巴氧(0.038%)和喹赛多(0.028%)有较低程度的交叉反应,与衍生试剂和结构类似物均无交叉反应(<0.01%)。该抗体为建立动物可食性组织中QCA残留物的快速检测方法奠定了基础。

采用原生质体融合技术,以红发夫酵母突变株和黏红酵母突变株为亲本菌株,以原生质体形成率和再生率的乘积为检测指标,对菌株菌龄、酶解温度、酶解时间和渗透压稳定剂等原生质体形成和再生的条件进行研究。结果表明,处于对数生长前期的红发夫酵母和处于对数生长中期的黏红酵母原生质体形成率和再生率的乘积显著高于其他组(P<0.05);红发夫酵母原生质体形成率和再生率的乘积在酶解温度22 ℃时为17.34%,在25和28 ℃时为0,黏红酵母形成率和再生率的乘积在22和25 ℃时显著高于28 ℃(P<0.05),但2个温度之间差异不显著(P>0.05);2菌株原生质体形成率和再生率的乘积在酶解时间为2 h时显著高于其他组(P<0.05);对照组渗透压稳定剂的组合对原生质体形成率和再生率的乘积显著高于其他组(P<0.05)。红发夫酵母和黏红酵母原生质体形成和再生的最适条件为:红发夫酵母菌龄为14 h、黏红酵母菌龄为18 h、酶解温度均为22 ℃、酶解时间均为2 h,原生质体形成的最适渗透压稳定剂均为1.0 mol/L的KCl缓冲液,再生的最适渗透压稳定剂均为17%蔗糖稀释液;最后筛选出1株能在28 ℃生长良好且虾青素含量586.38 μg/g的融合子,比融合前红发夫酵母和黏红酵母分别提高了79.58%和64.08%,且传代多次生产性能稳定。

嫩度是影响猪肉品质的重要性状之一,肉品的嫩度取决于肌肉结构及其相关蛋白质的变化程度。影响肌肉嫩度的因素有很多,其中钙蛋白酶系统在肌肉嫩化过程中发挥着重要作用。钙蛋白酶抑制蛋白是钙蛋白酶系统的成员之一,同时也为钙蛋白酶抑制蛋白基因的表达产物,钙蛋白酶抑制蛋白基因为调控猪肉品质的候选基因之一。作者对影响肌肉嫩度的因素、钙蛋白酶系统的结构和生理功能,以及钙蛋白酶系统和钙蛋白酶抑制蛋白基因型对猪肉嫩度的影响进行综述。

本试验旨在研究不同周龄蛋鸡卵巢机能及氧化还原状态的变化规律。选择17周龄京红蛋鸡48只、78周龄京红蛋鸡24只,2只1笼为1个重复,分别饲养至36、48、97周龄采样。结果发现,随着周龄增大,蛋鸡卵巢机能衰退,表现为卵巢内等级卵泡、小黄卵泡、初级卵泡和次级卵泡数量显著减少(P<0.05),小黄卵泡、大白卵泡和次级卵泡闭锁率显著增加(P<0.05);血清中黄体生成素和孕酮的含量均呈现降低趋势,但差异不显著(P>0.05);随着周龄增大,蛋鸡机体氧化损伤加剧,表现为肝脏、卵巢中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均显著降低(P<0.05),丙二醛(MDA)水平显著升高(P<0.05)。结果表明,蛋鸡卵巢机能衰退可能与体内(肝脏、卵巢和血清)氧化损伤加重有关。

动物被毛生长是一个复杂的过程,受遗传、内分泌、营养及外界条件等各种因素的影响。而胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)是一种具有促进细胞增殖、分化,调节物质代谢等多种生物活性的多肽分子。研究结果发现,IGF-1对被毛/毛发生长的影响不仅局限于自身,同时介导一些细胞因子对被毛生长的调节作用。为阐明IGF-1在被毛/毛发生长方面的重要作用,文章就国内外IGF-1对动物被毛生长影响的研究进展进行综述。

本试验利用Illumina OvineSNP50 BeadChip芯片对71只苏尼特羊进行了分型,共检测到134个拷贝数变异区域(copy number variation regions,CNVR),大小范围为29.48 kb~1.30 Mb之间,总长度达到25.95 Mb。基因注释及功能分析结果显示,这些基因与嗅觉感官知觉、化学刺激的感官知觉、感官知觉、识别等环境应答有关。选取5个CNVR进行qPCR验证,其中3个CNVR得到验证。通过对苏尼特羊基因组拷贝数变异的分析可以进一步了解绵羊基因组结构的特点,为今后开展绵羊基因组结构变异与重要经济性状的关联研究提供参考。

本试验以42 d繁殖模式为基础,在人工授精前48 h分别给母兔注射不同剂量(0、10、20、30和40 μg)的氯前列烯醇(cloprostenol,CLO)以进行同期发情,并进行产仔率、产仔总数、产活仔数、活窝重、仔兔个体重及雌激素、孕激素等指标检测。结果显示,与对照组相比,注射不同剂量CLO的母兔产仔率都有极显著的提高(P<0.01),且产仔率随注射剂量的增加呈递增趋势;但各组中母兔产仔总数无显著变化(P>0.05)。激素测定结果显示,注射CLO后雌激素水平逐渐上升,且上升的幅度随剂量的增加而加大;注射10、20和40 μg CLO 24和48 h后,孕激素浓度显著降低(P<0.05)。因此,采用氯前列烯醇对母兔进行同期发情,可有效促进母兔的发情,进而提高母兔产仔率和生产效率。

为研究肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因对中国地方黄牛品种产肉性能的影响,本试验以吉林省2个地方黄牛品种(草原红牛、延边黄牛)为研究对象,以4个二元杂交黄牛群体(德国黄牛×西门塔尔、利木赞×西门塔尔、夏洛莱×西门塔尔、红安格斯×西门塔尔)为参照,采用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(PCR-RFLP)技术对MSTN基因的多态性进行分型,并将其与草原红牛屠宰性状进行关联分析。测序结果发现,在MSTN基因外显子3上没有发现突变位点,而3'-UTR区发现了C5357A突变,导致了自然酶切位点AclⅠ基因的消失;6个群体皆表现多态性,形成A和C 2个等位基因和AA、CA、CC 3种基因型;4个二元杂交群体的AA基因型频率明显高于2个地方群体,且等位基因A为优势等位基因;CA、CC和AA基因型频率在二元杂交群体间和地方群体间的频率分布变异不大,等位基因C在地方群体间的基因频率明显高于等位基因A,为地方群体的优势等位基因。将草原红牛不同基因型与部分屠宰性能进行关联分析,结果表明AA基因型个体的净肉率和眼肌面积显著高于CA和CC基因型个体(P<0.05),但其他的屠宰性能在3种基因型上无显著差异(P>0.05)。上述结果可为今后草原红牛在产肉性能上的分子育种研究提供参考。

作者介绍了国际畜禽遗传资源保存的研究现状与趋势,分析了细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)文库的发展和应用状况,阐述了BAC文库应用于畜禽遗传资源保存的特有优势,提出了建立BAC文库将成为畜禽遗传资源保存的一种重要补充形式,有利于提升畜禽遗传资源保存的安全性和长久性,也为今后进一步研究畜禽品种的特定性状提供了无可替代的材料,对实现全方位保存畜禽遗传资源具有重要的实用价值和推动作用。

为研究杜洛克猪(D)、长白猪(L)、大白猪(Y)和梅山猪(M)组合的配套杂交商品猪(DLYM)的胴体品质和肉质特性,本试验对其屠宰性能和肉质性状进行了系统测定。结果表明,DLYM瘦肉率为53.97%±6.82%;平均背膘厚为3.32 cm±0.52 cm;眼肌面积为46.01 cm²±3.14 cm²;屠宰后45 min的pH₁为6.69±0.52;熟化24 h后pH₂为5.68±0.74;屠宰后45 min光反射值为41.59±4.24;屠宰后24 h光反射值为49.42±5.61;大理石纹为2.33±0.07;滴水损失为3.58%±0.25%;剪切力为4.82 kg±1.36 kg。综合测定结果表明,DLYM杂交商品猪瘦肉率适中,在肉质性状和胴体品质方面表现突出,非常适应西南地区对优质猪肉的需求,达到了胴体与肉质平衡发展的需求,是一种简洁高效的优质杂交组合模式。

为了解细环病毒(Torque teno virus,TTV)在广西猪群中的感染情况,本研究运用Nest-PCR方法,对2009—2011年采自广西140个规模猪场的156份血液、流产胎儿及肺脏、脾脏、肾脏、肝脏、淋巴结等组织样品进行检测,并对阳性样品的非编码区(UTR)进行克隆测序及遗传进化分析;同时对部分样品进行猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、典型猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)检测及细菌的分离鉴定。结果发现,广西猪群中TTV总感染率达到93.6%,TTV2的感染率(76.9%)不仅明显高于TTV1(16.7%),且毒株间遗传变异较大。TTV多与PCV2和PRRSV混合感染,且以与PRRSV混合感染率更高(64.29%)。猪群中存在2重、3重,甚至4重TTV与其他病毒的混合感染。临床上TTV与细菌的混合感染(或细菌继发感染)以链球菌和副猪嗜血杆菌多见。本研究证实在广西猪群中存在TTV感染,且存在普遍的TTV与PRRSV、PCV2和CSFV混合感染。

2010年从贵州省猪肉和牛奶样品中分离鉴定出73株葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌50株,凝固酶阴性葡萄球菌23株。采用琼脂稀释法检测其对18种抗菌药物的敏感性,运用统计学方法比较分析金黄色葡萄球菌与凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性差异。结果显示,动物性食品源葡萄球菌耐药较严重,对临床上常用药物耐药率较高,且为多重耐药,其中乳源葡萄球菌的多重耐药现象较猪肉源葡萄球菌严重;猪肉源金黄色葡萄球菌主要对青霉素类、四环素和大环内酯类耐药,乳源金黄色葡萄球菌主要对青霉素类、头孢菌素类、大环内酯类、四环素、克林霉素、泰妙菌素及利福平耐药;猪肉源凝固酶阴性葡萄球菌主要对氨苄西林、苯唑西林和泰妙菌素耐药,乳源凝固酶阴性葡萄球菌的耐药谱与乳源金黄色葡萄球菌类似。

试验从吉林省通化某地发病死亡鸭子病料中分离到1株具有血凝性的病毒,通过血凝试验、血凝抑制试验、血清中和试验及融合蛋白(F)基因的扩增测序,初步鉴定为新城疫病毒,命名为TH-1株。该病毒鸡胚平均死亡时间(MDT)、1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)及6周龄鸡静脉接种致病指数(IVPI)分别为53.4 h、1.85和2.575,表明该新城疫病毒为强毒。F蛋白多肽裂解位点为112-RRQKRF-117,符合新城疫强毒株裂解位点氨基酸序列,进一步证明该毒株为新城疫强毒株。F基因核苷酸及氨基酸同源性比对发现,TH-1株与中国野鸭源新城疫病毒分离株mallard China HLJ株的同源性最高,核苷酸同源性达到了99.3%,同为新城疫基因Ⅶ型毒株,与目前新城疫流行的主要基因型Ⅶ型相一致,为鸭源新城疫的有效防制提供了理论基础。

为了解畜禽源大肠杆菌的耐药状况,2011—2012年从患病和健康食品动物中分离鉴定大肠杆菌935株,包括健康猪源606株、患病猪源114株、患病鸡源51株、患病水禽源(鸭和鹅)164株。试验采用琼脂稀释法测定了不同动物来源的大肠杆菌对15种抗菌药物的敏感性。结果发现,大肠杆菌耐药严重,对大部分药物的耐药率超过70.0%,其中氨苄西林、复方新诺明和四环素的耐药率均达到了80.0%以上;仅对头孢西丁、黏菌素和阿米卡星较敏感,但患病水禽源大肠杆菌对阿米卡星的耐药率达到了52.4%,明显高于其他动物。健康畜禽源大肠杆菌对多数抗菌药的耐药率低于患病畜禽源大肠杆菌,表明抗菌药物的使用增加了病原菌对第3代头孢类药物和氟喹诺酮类药物的耐药率,势必增加临床治疗难度。

试验旨在分析16S rRNA甲基化酶耐药基因在鸡肠道大肠杆菌中的传播方式。采用质粒接合试验研究rmtB和armA基因的水平传播方式,计算接合频率,并用微量稀释法分析原菌株及接合子对抗菌药物的敏感性。结果显示,5株rmtB阳性菌均可通过接合试验将耐药基因传递给受体菌E.coli C600,每个受体细胞的接合频率从4.3×10^-10至5.5×10^-6不等;而armA阳性菌无法通过接合试验将耐药基因传递给受体菌。研究结果表明,rmtB基因在鸡肠道大肠杆菌中以水平传播方式为主,而armA基因在鸡肠道大肠杆菌中的传播方式有待于进一步研究。

无乳链球菌是人和动物的主要致病菌之一,该菌可引起人和动物的脑膜炎、肺炎、败血症等疾病。目前已发现的无乳链球菌主要致病因子包括荚膜多糖、溶血素、透明质酸酶、环磷酸腺苷(CAMP)因子、超氧化物歧化酶和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶等。作者就上述几类致病因子进行综述,介绍了近年来国内外无乳链球菌的致病性及致病机理等方面的一些研究进展。

本试验研究了不同菌体预处理、不同浓度菌体、不同作用时间、不同pH环境对布拉酵母菌脱除黄曲霉毒素B₁(AFB₁)效果的影响。结果发现,布拉酵母菌脱除AFB₁的主要机理是吸附作用;与2 mol/L HCl 121 ℃处理30 min相比,100 ℃处理30 min更有利于布拉酵母菌对AFB₁的脱毒;强酸性和偏碱性的环境也利于布拉酵母菌对AFB₁的脱毒。

2012年早春季节广西柳州市某罗非鱼养殖场出现暴发性疾病,从患病罗非鱼的肝脏、肾脏和脾脏组织中分离到1株革兰氏阴性杆菌。通过生理生化试验和16S rDNA序列分析,鉴定该菌为嗜水气单胞菌。人工感染试验结果显示,分离菌株对罗非鱼有很强的毒力,该菌注射浓度为1×10⁹ CFU时,可使健康罗非鱼在24 h内全部死亡;药物敏感试验结果显示,分离菌株仅对氨苄西林耐药,对氨曲南、氧氟沙星等15种抗生素敏感。本研究为早春季节罗非鱼疾病防控提供试验依据。