抗柱状黄杆菌多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定

›› 2013, Vol. 40 ›› Issue (10): 64-67.

抗柱状黄杆菌多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定

吕娜^1,2, 赵国坤², 孙强², 张虹茜², 殷晓平², 张懋岚², 张捷¹

1. 浙江万里学院生物与环境学院, 浙江宁波 315100;
2. 吉林农业大学食品科学与工程学院, 吉林长春 130118

收稿日期:2013-04-01 出版日期:2013-10-20 发布日期:2013-12-19
通讯作者: 张捷 E-mail:zhangjie@zwu.edu.cn
作者简介:吕娜(1980-),女,吉林人,博士,副教授,研究方向:鱼类疾病快速检测。
基金资助:
2010年浙江省科技厅公益项目(2010C32066)。

Preparation of the Polyclonal Antibody against Flavobacterium columnaris and Identification of its Immunological Properties

LV Na^1,2, ZHAO Guo-kun², SUN Qiang², ZHANG Hong-xi², YIN Xiao-ping², ZHANG Mao-lan², ZHANG Jie¹

1. College of Biological and Environmental Sciences, Zhejiang Wanli University, Ningbo 315100, China;
2. College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China

Received:2013-04-01 Online:2013-10-20 Published:2013-12-19

摘要/Abstract

摘要： 为制备抗柱状黄杆菌多克隆抗体,本研究利用颗粒性抗原免疫新西兰白兔,收集的抗血清通过辛酸-硫酸铵法纯化,采用间接ELISA法检测纯化后多克隆抗体的效价和交叉反应性。结果显示,制备的多克隆抗体蛋白质浓度为29.28 mg/mL,效价在1:6.4×10⁴以上,与迟钝爱德华氏菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌及哈维氏弧菌等水生动物致病菌均无交叉反应。本研究成功建立了抗柱状黄杆菌多克隆抗体的制备方法,可用于柱状黄杆菌的快速检测。

关键词: 柱状黄杆菌; 多克隆抗体; 免疫学特性

Abstract: To prepare the polyclonal antibody against Flavobacterium columnaris, New Zealand rabbits were immunized with particulate antigen. Antisera from the immunized rabbits were purified with caprylic/ammonium sulfate precipitation. Titers and cross reaction of the polyclonal antibody were determined by indirect ELISA. The results showed that the protein concentration of the polyclonal antibody was 29.28 mg/mL. The titer was over 1:6.4×10⁴. No cross-reaction was observed with other aquatic pathogenic bacteria such as Edwardsiella tarda, E.coli, Aeromonas hydrophila, Vibrio anguillarum, Vibrio alginolyticus, Vibrio parahaemolyticus and Vibrio harveyi. High specific polyclonal antibody against Flavobacterium columnaris was prepared, which might be used for rapid detection of Flavobacterium columnaris.

Key words: Flavobacterium columnaris; polyclonal antibody; immunological properties

中图分类号:

S852.65

吕娜, 赵国坤, 孙强, 张虹茜, 殷晓平, 张懋岚, 张捷. 抗柱状黄杆菌多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定[J]. , 2013, 40(10): 64-67.

LV Na, ZHAO Guo-kun, SUN Qiang, ZHANG Hong-xi, YIN Xiao-ping, ZHANG Mao-lan, ZHANG Jie. Preparation of the Polyclonal Antibody against Flavobacterium columnaris and Identification of its Immunological Properties[J]. , 2013, 40(10): 64-67.

[1]	焦琳琳, 成玉婷, 吴庆国, 吴双, 吴植, 朱善元, 钱莺娟. 鸭坦布苏病毒Capsid蛋白原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2395-2402.
[2]	欧云文, 潘琴, 汪洋, 代军飞, 任绍科, 张洋, 张杰. 猪细小病毒6型ORF2基因的截短表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2487-2495.
[3]	王雪平, 张孝俊, 李晓月, 王国栋, 张福良, 宋玉伟, 张明亮, 马磊. 高致病性禽腺病毒血清4型Hexon蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2053-2060.
[4]	胡乐玉, 胡欣瑶, 李颖, 赵盛淼, 沈凤臻, 王长法, 李亮亮, 王彤彤, 任慧英. 德州驴HO-1基因生物信息学分析及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1499-1510.
[5]	王文婕, 茹鹏辉, 郁川, 杜付熙, 陈松彪, 尚珂, 张春杰, 程相朝. 猫细小病毒洛阳分离株VP2蛋白原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1511-1521.
[6]	牛小杰, 徐明国, 肖莉, 刘文豪, 陈创夫, 王勇. 鸡白痢沙门氏菌IPAJ蛋白的表达纯化、多克隆抗体制备及ELISA方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1218-1228.
[7]	张梦杨, 何健, 刘阳坤, 姚伦广. 非洲猪瘟病毒p37蛋白生物信息学分析及其多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(1): 300-309.
[8]	朱丽霖, 王后坤, 陈雪阳, 刘晶, 梁雄燕, 方春, 杨玉莹. 鸡IFIT5对J亚群禽白血病病毒在DF-1细胞内复制的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(1): 310-316.
[9]	肖洋洋, 马忠臣, 李芮芮, 陈创夫, 郑炜, 王勇, 王鹏雁. 布鲁氏菌分泌蛋白BspI生物信息学分析及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(8): 3112-3121.
[10]	王炜, 韩慧慧, 丁乃峥, 何成强. 牛病毒性腹泻病毒E0蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(8): 3131-3139.
[11]	刘铭, 张永宁. 猪丁型冠状病毒N蛋白原核表达及其多克隆抗体的制备[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(7): 2698-2707.
[12]	许春梅, 邵明珠, 王心悦, 林佳迪, 郭建雄, 张祥胤, 童德文, 梁瑞英, 赵晓民. 非洲猪瘟病毒D250R蛋白生物信息学分析及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(12): 4745-4755.
[13]	刘超, 王后坤, 朱丽霖, 刘晶, 梁雄燕, 方春, 杨玉莹. 鸡RNF165蛋白多克隆抗体制备及其生物信息学分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(11): 4159-4167.
[14]	张天爱, 李婷婷, 陶晓莉, 李藤菲, 林家锋, 胡思漫, 刘文秀, 佟伟, 李永刚. 猪流行性腹泻病毒S蛋白原核表达及多克隆抗体的制备与鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(11): 4383-4391.
[15]	杨景, 张新宇, 梁志鹏, 程晴, 王聪颖, 池仕红, 袁生, 郭锦玥, 黄淑坚, 温峰. H9N2亚型禽流感病毒NP蛋白原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(10): 3963-3971.