体细胞数和菌落总数是衡量奶牛乳房健康状况和乳品质量的一项重要指标。作者对主要国家牛乳中体细胞数和菌落总数的限量进行了比较,分析了中国与主要国家限量的异同及原因,介绍了体细胞数和菌落总数的检测方法,对体细胞数的变化规律、风险评估进行综合分析阐述。

本试验从江苏某猪场采集猪血清,进行猪圆环病毒2型(PCV2)的检测和分离,根据GenBank中登录的PCV2全基因组序列,设计1对特异性引物,扩增PCV2全基因组,并且进行序列测定和分析。发现一株PCV2 10JS-2的基因组全长为1779 nt,在病毒复制起始区域含有11个碱基的插入。在GenBank中对含有11个碱基插入的毒株序列进行BLAST发现,有两株PCV2(AY321993和EF565360)也有11个碱基的插入,但是与10JS-2比较,插入的碱基和插入的位置不同。遗传进化分析显示10JS-2属于PCV2a基因型,AY321993和EF565360属于PCV2b基因型,因此推断10JS-2可能是由PCV2a基因型的毒株在复制起始区域发生碱基插入形成的。这是首次发现此类PCV2毒株。

试验旨在建立内蒙古绒山羊皮肤蛋白质双向电泳图谱。采用液氮研磨法提取蛋白质,通过双向电泳技术对蛋白质进行分离,分别对不同的蛋白质沉淀方法、上样量和SDS-PAGE凝胶浓度进行比较。结果显示,使用2-D Clean-up试剂盒处理、上样量为20 μg、采用10%的SDS-PAGE凝胶浓度时可获得重复性好和分辨率高的双向电泳图谱,便于后续的内蒙古绒山羊皮肤差异蛋白质组学分析。

采用RT-PCR技术,从香猪的肝脏总RNA中克隆了3个对氧磷酯酶(paraoxonase,PON)基因:PON1、PON2、PON3,其cDNA分别长1164、1212和1080 bp,各包含1个完整的开放阅读框,分别编码355、354、354个氨基酸组成的前体,其N-端的15、23、23个氨基酸为信号肽。香猪PON1基因中有1个碱基变异,不改变编码的氨基酸,为无义突变;香猪PON2基因中有2个碱基改变,导致成熟肽发生Q234R、V269I替换;香猪PON3基因中有1个碱基变化,使成熟肽出现R127H替换。经三维结构预测分析,这3个氨基酸位点的变化将影响蛋白质内部区域的微环境,影响对氧磷酯酶的功能,可能与香猪的抗逆性有一定的联系。

试验构建牛朊蛋白(prion protein,PRNP)基因的真核表达载体,为进一步研究牛朊蛋白的生理功能和从细胞水平研究抗疯牛病转基因克隆牛奠定基础。采用重叠延伸PCR(splicing overlap extension PCR,SOE-PCR)法扩增获得牛PRNP基因序列,并克隆到带有DsRED2报告基因的真核表达载体pDsRED2-N1中,将双酶切、PCR、测序鉴定的阳性质粒经脂质体转染牛骨髓间充质干细胞(BMSC);通过荧光显微镜观察转染细胞,并用800 μg/mL G418对转染的细胞进行药物筛选。琼脂糖凝胶电泳显示基因合成的片段大小和构建的载体大小与预期相符;重组表达载体转染BMSC后有红色荧光出现;通过药物筛选出了稳定转染的细胞单克隆。通过SOE-PCR成功扩增了牛PRNP基因序列,并构建成真核表达载体,得到稳定表达目的蛋白的BMSC细胞。

鹿茸是唯一可以重复再生的哺乳动物器官。利用不同的提取方法制备梅花鹿鹿茸总蛋白样品,分别进行双向电泳,从得到的蛋白点的数量和点的圆滑程度、分辨率等确定适合的提取方法。分别用全蛋白提取试剂盒、自制裂解液、丙酮沉淀制备蛋白样品,并对得到的3种2-DE图谱进行比较分析。结果显示,试剂盒提取法和自制裂解液法得到的蛋白点比较多、圆滑,图谱清晰;丙酮沉淀法得到的蛋白点不如前者多,图谱有横竖纹。

试验旨在构建水牛脂多糖结合蛋白(LBP)基因融合蛋白表达载体,探讨其在293细胞中的表达情况;筛选获得可抑制水牛LBP基因表达的shRNA干扰片段。采用RT-PCR方法,以水牛肝脏cDNA为模板,扩增水牛LBP开放阅读框(ORF),将其连接到pMD18-T载体中。序列测定并分析正确后,采用SalⅠ和BamHⅠ进行双酶切,将水牛LBP基因编码区定向克隆至pDsRed-N1载体中,构建其融合蛋白表达载体pDsRed-N1-LBP。设计2个针对LBP靶基因序列的shRNA(774-792、1212-1231),同时设计无关序列1864作为阴性对照。合成好的shRNA序列先退火连接到pUC 57载体上,再亚克隆到慢病毒表达载体pSicoR-GFP中,将重组质粒命名为pSicoR-GFP-shLBP774/1212/1864(N.C),采用PCR和测序方法鉴定阳性克隆。将LBP融合蛋白表达载体和其shRNA慢病毒表达载体经脂质体共转染293细胞,48 h后观测荧光蛋白表达情况。收集共转染细胞样品,采用实时定量PCR(QRT-PCR)检测LBP基因的表达,筛选有效抑制LBP基因表达的shRNA干扰序列。结果表明,成功构建水牛LBP融合蛋白表达载体pDsRed-N1-LBP,并在293细胞中瞬时表达。PCR和测序结果均证实所构建的shRNA慢病毒表达载体pSicoR-GFP-shLBP774/1212/1864(N.C)为阳性克隆。共转染48 h后观测,红色和绿色荧光蛋白均有表达。QRT-PCR检测结果显示,shRNA-774和shRNA-1212对293细胞中LBP基因mRNA的表达均有抑制效果,抑制效率分别为49.53%、29.27%。因此,设计合成的2条shRNA序列能有效抑制水牛LBP基因的表达,这为进一步探讨LBP基因在LPS诱导的革兰氏阴性菌跨膜机制和信号转导中的作用机理研究奠定了基础。

为了快速、准确检测禽源生物制品中的禽网状内皮组织增生症病毒,根据GenBank中登录的REV参考毒株LTR基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计合成了1对特异性引物,其扩增产物长度为314 bp,建立了PCR法,其特异性和敏感性较好。经与间接免疫荧光法进行同步比较试验,发现结果吻合性较高,且PCR法的结果更为直观,易于判断,样品保存方便,重检也方便,当日即可完成,显示出了较好的可行性。

cDNA文库的构建是一种重要的基因克隆的手段,主要用于新基因的发现及基因功能的研究。作者主要介绍cDNA文库的构建方法及cDNA文库的一些实际应用,为研究cDNA文库的构建提供一些有价值参考意见。

本研究应用PCR技术扩增来自广东的3株柔嫩艾美耳球虫的28S rRNA基因部分序列,并与GenBank^TM登录的柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、鼠肉孢子虫和刚地弓形虫虫株的相应序列进行比对分析。试验结果显示,柔嫩艾美耳球虫3个样品均获得1172 bp的28S rRNA基因部分有效序列,不同虫株序列没有差异,与GenBank^TM登录的柔嫩艾美耳球虫相应序列只有一个碱基差异,显示种内序列高度保守,而与堆型艾美耳球虫、鼠肉孢子虫、刚地弓形虫相应的序列存在不同程度的差异。结果表明,28S rRNA基因部分序列可作为研究艾美耳球虫种间及其他顶复门原虫遗传变异的标记。

本研究采集山西省不同地区的发病猪脏器组织与血液样品,采用特异性 RT-PCR方法检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)样品16份,应用设计的特异性引物扩增出Nsp2基因序列,利用DNAStar生物信息学分析软件,对获得的序列与国外代表毒株VR-2332、国内代表毒株CH-1a、BJ-4、HB-1及PRRSV变异毒株HuN4和JXA1的序列进行了比较,绘制系统发生树。氨基酸序列比较分析发现山西省流行毒株同源性分别在69.8%~71.7%、85.3%~87.9%、68.7%~70.6%、91.7%~94.3%、94.3%~98.5%、95.1%~98.9%。所获得的16株病毒之间的同源性在90.9%~100%之间。研究结果发现所获得的序列同源性与国内近几年流行的PRRSV的变异毒株HuN4和JXA1毒株的序列同源性最高,分别在94.3%~98.5%与95.1%~98.9%之间,Nsp2 基因缺失位置一致,其Nsp2均有2个部位出现了缺失,即Nsp2基因分别为编码1个氨基酸的3个核苷酸的缺失和编码29个氨基酸的连续87个核苷酸的缺失,结果表明,山西省目前流行PRRSV的变异毒株与国内流行株属于同一分支。

试验使用GenBank中已知的鸟类细胞色素b(Cyt b)基因部分序列(1044 bp)(共13条序列,其中鸡形目4条、鸭科鸟类9条)作为本研究的数据集,并以鸡形目与雁形目(鸡/绿头鸭)的分歧时间(89.8 MYA)为锚定点,用核苷酸不同替代模型对鸭科的分子钟进行标定。雉科与鸭科间的分歧时间的估计值为116.3785 MYA("1+2TiTv"),雁属与5个鸭属间的分歧时间为63.8823 MYA("1+2TiTv"), 鸡与鹌鹑的分歧时间为37.6708 MYA("1+2TiTv"),灰雁、白额雁与鸿雁间的分歧时间的估计值为1.879331 MYA("1+2TiTv")。以上结果说明:用"1+2TiTv"模型分析得到的鸭科鸟类的分歧时间比较可靠;雉科与鸭科、雁属与鸭属两个接近基部类群的分歧时间发生在白垩纪(137-65 MYA),支持鸟类早期历史发生在白垩纪的观点。

以牛支原体(Mycoplasma bovis)湖北分离株HB0801作为抗原免疫8周龄BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术筛选出了6株能稳定分泌抗牛支原体的单克隆抗体细胞株,分别生产腹水并对单抗进行了纯化和特性鉴定。经亚型测定,这些单抗都属IgG类。腹水ELISA效价在1×10⁵~1.6×10⁶。ELISA特异性分析结果表明,6株单抗与临床分离的牛支原体菌株以及ATCC标准株PG45都显阳性反应,但与牛的其他常见病原菌如多杀性巴氏杆菌、化脓隐秘杆菌等都显阴性反应。所有制备的单抗都与无乳支原体有交叉反应,其中两株单抗1A5和1C11只与无乳支原体有交叉反应,与其他支原体无交叉反应。经Western blotting验证,6株单抗分别识别牛支原体全菌蛋白中的不同条带,说明分别针对不同的蛋白抗原。这些牛支原体单克隆抗体为后期建立牛支原体检测方法及致病机理研究奠定了良好基础。

变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术是一种新型的用于检测核酸变异和点突变的电泳方法,主要根据突变型和野生型核酸序列的不同而导致其变性浓度的差异,从而利用变性梯度胶进行分离,可用于肠道菌群结构多样性和种群动态变化的研究。文章对DGGE技术的原理、在肠道菌群多样性和动态性的应用、局限性及发展前景及上综述。

抗原表位是抗原分子中能与相应淋巴细胞表面的受体结合的特殊化学基团,一般由几个氨基酸残基序列或其空间结构组成。它是引起免疫应答的物质基础,其性质决定了抗原的特异性。抗原表位的鉴定方法主要有肽扫描技术、氨基酸定点突变技术、X-ray衍射或核磁共振技术、质谱技术、噬菌体展示肽技术及生物信息技术预测等,文章将从这几方面入手对近几年来鉴定抗原表位的方法作一综述。

以京海黄鸡为材料,采用PCR-SSCP和DNA测序技术对ACVR1基因外显子多态性进行研究。结果表明,ACVR1基因20190 bp处发生G→A突变,检测到AA、AB和BB 3种基因型。A等位基因频率为0.9075,B等位基因频率为0.0925。基因型与生长和繁殖性状的关联性分析发现,BB基因型鸡的开产体重极显著高于AA基因型鸡(P<0.01),AA基因型鸡300日龄体重显著高于BB基因型鸡(P<0.05)。由此初步推断,ACVR1基因可能对京海黄鸡的产蛋和发育有一定的影响,A为体重的优势基因,B为产蛋的优势基因。

从送检的一份疑似链球菌病病死猪病料中分离出1株细菌,通过对分离菌株进行细菌的培养特性、生化试验、玻片凝集试验及PCR分型鉴定,确定为2型猪链球菌,动物致病性试验表明,1×10⁸ CFU/mL的剂量可致死小白鼠,对该分离菌株的毒力因子进行PCR检测发现,溶菌酶释放蛋白(mrp)、胞外因子(ef)和溶血素(sly)均为阳性。此菌的分离鉴定为自家灭活菌苗的制备提供了候选菌株。

miRNA参与生命过程中的一系列重要进程,包括发育进程,造血过程,器官形成,凋亡,细胞增殖,甚至是肿瘤发生。近期的研究发现,miRNA在毛囊的形成及毛发的生长中起着重要的作用,这类小RNA作为一类新型的转录后调控小分子,所调控的靶向基因众多,为研究动物毛发形成提供了新的方向。

自从内含子被发现以来,一直受到人们的关注。目前越来越多的研究发现,内含子参与mRNA的转录和翻译调控及组织特异性表达。内含子的应用刚刚起步,但在许多方面都展现出广阔的应用前景。文章就内含子的功能及其在基因组学、分子进化、分子系统学和转基因系统中的应用进行了阐述。

以3个贵州地方猪种(可乐猪、贵州白香猪、黔北黑猪)为试验素材构建品种DNA池,采用直接测序技术对猪脂肪特异蛋白27(fat-specific protein 27,Fsp27)基因的第4~5外显子区域进行SNPs快速筛查,共检测出4个SNPs位点:intron3-T2169C,exon4-G5A,intron4-G21C和exon5-C5G,其中exon4-G5A和exon5-C5G使编码氨基酸发生Arg→Gln,Thr→Ser的改变。进一步的生物信息学分析显示,exon4-G5A位点的变异导致mRNA的二级结构改变,exon5-C5G多态位点使蛋白质的二级结构发生变化,且当exon4-G5A和exon5-C5G位点的碱基分别为A和G时蛋白质三级结构与其它3种碱基组合(G与G,G与C,A与C)的三级结构明显不同。

病原菌体内诱导基因与其在体内的生存和致病过程密切相关,体内诱导抗原技术(IVIAT)已广泛应用于筛选体内诱导基因的研究。IVIAT不使用动物模型,采用经病原菌体外培养抗原吸附处理的感染动物血清来检测病原菌的原核表达文库,对体内诱导基因进行筛选。利用该方法可以快速、简单的筛选到体内诱导基因,有助于病原菌致病机制的研究,同时也能够为目标病原菌抗菌药物、诊断试剂及疫苗设计的开发研究提供理论依据。文章就IVIAT的原理、兽医致病病原菌中的应用及应用前景作一简略的概述。

p63基因是肿瘤抑制基因p53家族的成员之一,与p53基因有高度的同源性。基因结构复杂,有两个不同的启动子和多种内含子剪接方式,能编码多种亚型的蛋白质,而这些p63蛋白在不同的组织不同的发育阶段发挥着不同的生物学作用。文章就p63基因的结构、功能及其与肿瘤的关系作一综述。

氯霉素类药物是一类广泛应用于畜禽、水产养殖中的抗生素,它在水产品中的残留将会影响水产品出口和人体健康。作者综述了氯霉素类药物在水产品中的前处理技术和残留检测方法,包括微生物法、免疫分析法、色谱分析法和其他方法,并分别对其检测方法的优缺点进行了综述,最后对氯霉素类药物多残留检测方法的发展趋势进行了展望。

探讨东方田鼠和小鼠感染日本血吸虫前后不同时点组织与血清中蛋白质电泳谱的变化。分别提取东方田鼠感染日本血吸虫(0、7、12、25 d) 和小鼠感染日本血吸虫(0、7、12、45 d)后的肝脏、脾脏、肺脏蛋白及血清进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,对结果比较分析并进行组织病理形态学观察。结果显示,小鼠感染日本血吸虫第7和12天后肝脏150 ku附近蛋白质条带较东方田鼠表达量明显增高;东方田鼠在感染日本血吸虫后40~50 ku附近蛋白质条带较正常东方田鼠表达明显上调;感染第7天后肺脏40 ku附近蛋白质条带较其他时间点变化明显;小鼠感染日本血吸虫第7、12和45天后血清中IgG类蛋白质表达量较东方田鼠显著增高。东方田鼠和小鼠在日本血吸虫感染后不同时点间的组织及血清蛋白组分存在差异,东方田鼠肝脏和血清中150 ku附近蛋白条带较其他动物特异,蛋白质表达丰度高,该蛋白可能与东方田鼠抗日本血吸虫相关。

microRNA 是一类长18~24核苷酸的短序列非编码RNA,通过抑制目的mRNA的翻译或降解,负性调控转录后基因表达。microRNA参与调控细胞增殖、死亡、神经分化、免疫调控和疾病发生等生物学过程,影响着动物的生长、发育及抗病能力。针对microRNA的特点、调控机制、分析方法及在动物肌肉和脂肪组织中的最新研究进行了综述,为利用microRNA技术对动物肌肉与脂肪相关疾病的诊断、治疗提供新的思路。

为获得高包封率的伊维菌素小单室脂质体,本研究对其制备工艺进行了优化,并选取超声波频率、超声时间、卵磷脂与胆固醇质量比、伊维菌素与卵磷脂质量比各因素进行正交交互作用考察,同时利用反相高效液相色谱法对各工艺配方组合下伊维菌素小单室脂质体的包封率进行了测定。结果显示,伊维菌素小单室脂质体的制备最佳配方和工艺组合为超声波频率200 kHz,超声时间6 min,伊维菌素与大豆卵磷脂质量比为1:10。经过优化组合,得到了较高品质的伊维菌素小单室脂质体,平均载药量达到(92.35±0.61)%,药物品质优良,且制备工艺简单可行。

试验旨在研究日粮添加不同水平微生态制剂对樱桃谷鸭生产性能的影响,确定最佳添加水平。选用1日龄樱桃谷鸭750只,随机分成5个组(试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组,Ⅴ组为对照组),每组设3个重复,每个重复50只。分别在基础日粮中添加500、1000、1500、2000和0 mg/kg微生态制剂,饲养至42日龄。结果表明,添加1000和1500 mg/kg的微生态制剂促生长效果显著高于对照组(P<0.05);添加1000 mg/kg微生态制剂的肉鸭全程料重比最佳;添加500 mg/kg的微生态制剂组对肉鸭增重不明显;添加2000 mg/kg的微生态制剂组优于对照组和500 mg/kg添加组,但差异不显著(P>0.05)。因此,日粮微生态制剂能促进樱桃谷肉鸭的增重、降低料重比,从而提高其生长性能、产肉性能及养殖效益,1000 mg/kg微生态制剂能取得最佳料重比和经济效益,1500 mg/kg微生态制剂能取得最佳产肉性能,由此可知,添加1000 mg/kg微生态制剂为最佳添加水平。

本研究旨在观察cGhrelin对岭南黄蛋鸡生产性能的调节作用。选择45周龄的岭南黄蛋鸡24羽,随机分为试验组和对照组。试验组定时每3 d翅下静脉注射0.5 nmol/100 g cGhrelin,对照组注射相应体积的生理盐水,并记录各组生产性能;第15天屠宰取样检测生理生化指标。结果表明,cGhrelin可以显著降低蛋鸡的产蛋率及日均采食量(P<0.05),对料蛋比与平均蛋重无显著影响(P>0.05);试验组蛋鸡血清中雌二醇含量显著低于对照组 (P<0.05),且三碘甲腺原氨酸与甲状腺激素含量也明显降低(P>0.05)。因此,cGhrelin对岭南黄蛋鸡部分生产性能有负调控作用。

为探明不同组方中草药饲料添加剂对京海黄鸡生产性能和肉品质的影响。随机选择1日龄京海黄鸡160羽,分成4组,每组40羽,在基础日粮中分别添加0.5%、1.0%和1.5%的中草药组成试验组A、B和C组,对照组D组不添加。结果表明,中草药饲料添加剂能提高京海黄鸡的成活率、日增重、活重、屠宰率、全净膛率、胸肌率、腿肌率、肌肉pH、色度、系水力和嫩度,降低日采食量、料重比和腹脂率,可以起到改善生产性能和提高肉品质的效果,并且以添加1.0%中草药组效果最好。

反刍动物的瘤胃微生物能以非蛋白氮(NPN)为氮源合成自身蛋白质,其中,尿素因其具有来源广、成本低、含氮量高等优点,目前已成为世界范围内畜牧业生产中广泛使用的NPN饲料,但直接饲喂尿素适口性差,又会在瘤胃脲酶的催化下爆发式释放出水溶性的NH₃,极易导致动物NH₃中毒和粪便中大量NH₃的排放,污染环境;脲酶抑制剂可以调控尿素NPN饲料的降解速度,显著提高反刍动物利用尿素的效率,提高动物生产性能。作者对近10年来国内外NPN饲料的种类、提高反刍动物NPN利用的缓/控释技术、对尿素NPN饲料氮代谢的调控机理等进行了综述。

试验选用1~3胎次泌乳荷斯坦牛32头,按照产奶水平、泌乳阶段、胎次相近的原则,随机分为对照组、试验1、2、3组。对照组饲喂基础日粮,试验1、2、3组分别在基础日粮中添加0、12.5、125、250 mg/kg的葛根提取物。结果表明,与对照组相比,试验1、2、3组平均日产奶量分别提高了17.47%、9.68%、11.36%;且乳脂率和乳密度有所上升,乳中蛋白质、非脂固体等指标变化不大;试验组能提高奶牛血液中E₂、COR、PRL含量,但无显著性差异(P>0.05)。因此,补饲葛根提取物可以缓解奶牛产奶量的下降。

L-肉碱作为肉碱基转移酶的辅酶在长链脂肪酸的氧化中发挥着重要的作用,并具有改善动物生产性能、提高饲料利用率、改善胴体品质等作用,近年来在饲料工业和动物生产中得到了越来越广泛的应用。综合近年来国内外关于肉碱的文献报道,作者就L-肉碱的性质、生理功能及其在动物营养中的应用等作一综述。

将重组有北京鸭抑制素α-亚基基因的T载体和pET-28a表达载体分别用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后连接并转化E. coli BL21(DE3),经PCR和双酶切鉴定,筛选得到阳性重组表达载体,在IPTG诱导下融合表达了北京鸭抑制素α-亚基蛋白。试验结果表明,抑制素α-亚基基因在E. coli BL21中得到了有效表达,表达产物具有免疫活性,为后期探讨该免疫原提高北京鸭产蛋性能的研究奠定基础。

为了建立操作简单、高效率的猪β-防御素-2转化酿酒酵母的方法,试验比较了酿酒酵母的两种转化方法,即电转化和醋酸锂法。结果显示,两种转化方法对细胞生长状态均有严格的要求。在醋酸锂转化中,以培养10 h,D_{600 nm}为1.051的细胞制备感受态,热激时间为60 min时,转化率为136个/μg DNA;在电转化中,以培养12 h,D_{600 nm}为1.359的细胞制备感受态,电击电压2.5 kV时转化效率为154个/μg DNA。但综合操作效率,最终选择醋酸锂法进行酿酒酵母的转化。

牛奶易氧化腐败变质,牛奶中的抗氧化物质在维持牛奶营养品质稳定方面具有重要作用。作者综述了牛奶中重要的抗氧化物质及抗氧化机理,可为生产高品质牛奶和优化生产工艺提供资料。

黑素皮质素受体-4(melanocortin receptor-4,MC4R)、黑素皮质素受体-3(melanocortin receptor-3,MC3R)、瘦素(Leptin)和缩胆囊素受体(cholecystokinin A receptor,CCKAR)基因均是与采食量相关的功能基因,为了研究这4个基因之间可能存在的互作关系,本研究采用RNAi方法,将体外培养的成纤维细胞中的MC4R基因沉默,然后采用Real-time PCR方法对Leptin、MC3R和CCKAR基因的表达变化情况进行了研究。结果表明,MC4R被沉默后,Leptin、MC3R和CCKAR的表达水平均没有发生显著变化。

正常机体存在一套比较完整的氧化－抗氧化平衡系统。病理情况下,该系统失衡向氧化方向进行时,便会给机体造成一系列的损伤,产生大量自由基。转录反式作用催化蛋白(TAT)可介导超氧化物歧化酶(SOD)透过血脑屏障进入细胞,甚至线粒体内对其进行清除,从而对机体发挥抗氧化能力及保护作用,尤其对神经细胞凋亡的保护作用尤为明显。TAT介导外源性大分子物质进入细胞的机制众说纷纭,迄今为止,还没有一个明确的、具有说服力的观点。因此,对TAT介导SOD对神经细胞凋亡的保护作用近几年的研究进展作一简要综述具有十分重要的意义。

猪肉品质是一个综合性状,涉及许多方面,影响的因素很多。猪肉品质常用猪肉的pH、颜色、嫩度、风味物质、肌肉持水力、肌内脂肪含量等指标进行评定,影响的主要因素有年龄、品种、性别、营养、饲养管理、宰前状况、屠宰工艺等方面。作者对国内外的相关研究进行了综述。

本试验通过对抗菌肽结构改造优化,得到了一条新设计的抗菌肽AMP-D,并利用固相合成技术人工合成后对其活性和溶血性进行测定。试验结果表明,AMP-D对革兰氏阴性菌及真菌没有生物活性,对革兰氏阳性菌有明显的抑制作用,且其没有溶血活性;AMP-D对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为10.5 μg/mL,较原设计肽活性有较大提高。

氟是维持动物生命活动所必需的微量元素之一,在行使正常的生理功能过程中发挥重要作用,然而,其作用也具有两面性。过量的氟可引起机体多器官受损的全身性疾病。氟化物对机体免疫功能的影响是近些年来研究的热点之一。作者主要对氟化物对白细胞介素、肿瘤坏死因子和干扰素表达及功能的影响进行综述,并对其影响机制进行初步探讨。

试验旨在探讨盐地碱蓬甜菜红素改善疲劳状态下肌力减退的作用。采用脉冲式电流直接刺激腓肠肌作为疲劳模型,对比盐地碱蓬甜菜红素和任氏液分别对蟾蜍腓肠肌疲劳的影响。结果表明,盐地碱蓬甜菜红素在浓度为0.005、0.01、0.02 mg/mL时,离体腓肠肌达到最大收缩幅度90%、50%和10%的时间显著长于在任氏液作用下的离体腓肠肌(P<0.05);0.02 mg/mL的盐地碱蓬甜菜红素也极显著的延长了在体腓肠肌达到最大收缩幅度90%、50%和10%的时间(P<0.01)。因此,盐地碱蓬甜菜红素具有延缓肌肉疲劳的作用。

为指导二郎山山地鸡品种选育,本试验选用SD02、SD03品系第2世代54个家系、2个批次的种蛋进行孵化试验,比较批次间、品系间和品系内家系间的种蛋孵化效果差异。结果显示,SD03的各家系入孵蛋数(47枚)显著高于SD02(40枚)(P<0.05),SD02各家系的健雏率(99.5%)显著高于SD03(98.4%)(P<0.05)。SD03的死精率和死胎率低于SD02,受精率、受精蛋孵化率高于SD02,但差异不显著(P>0.05)。第1批次的受精蛋孵化率和健雏率高于第2批次,死精率和死胎率低于第2批次(P<0.05)。试验表明孵化效果SD03优于SD02,第1批次好于第2批次;SD02品系内家系3、30和48与SD03品系内家系13和49的各孵化指标远低于相应的品系均值,家系选种时应避免选用上述家系种鸡。

DNA甲基化作为表观遗传学修饰方法之一,对基因的表达发挥重要的调控作用。随着众多DNA甲基化检测技术(如高通量检测技术)的迅速发展对DNA甲基化的生物信息学研究已经变成了一个非常活跃的热点。在动物遗传育种方面,由于DNA甲基化程度的改变,可能影响众多性状相关基因的表达量,因此改变动物的各种性状。所以目前已有相关研究开始探索DNA甲基化在动物遗传育种上的具体作用。

采用PCR-SSCP技术检测了大白猪、长白猪、杜洛克猪、马身猪、山西黑猪和山西白猪等6个品种364头个体催乳素受体基因(prolactin,PRLR)第8内含子的多态性,并分析了多态位点对猪头胎产仔性能的影响。结果表明,猪PRLR基因第8内含子存在多态性,共检测到A、B、C 3个等位基因和AA、AB、AC、BB、BC和CC 6种基因型。在杜洛克猪、长白猪、山西黑猪和山西白猪群体中,A等位基因的频率最高,分别为0.8276、0.5439、0.5345和0.7669;而在大白猪和马身猪群体中,B等位基因的频率最高,分别为0.6894和0.7000;仅在大白猪、山西黑猪和山西白猪中检测到C等位基因,且频率较低,在0.0379~0.1385之间。PRLR基因型对母猪头胎产仔数有显著影响(P<0.05),对产活仔数的影响未达显著水平。AC基因型母猪的头胎产仔数和产活仔数显著高于BC基因型个体,而与AA、AB和BB基因型个体差异不显著。含有A等位基因的母猪的产仔性能优于不带有A等位基因的个体,表明A等位基因是有利于母猪产仔性能提高的等位基因,可应用于标记辅助选择来提高母猪的繁殖性能。

本试验采用不同超排处理方案对不同月龄犊牛(1~6月龄)进行超排处理,以得出犊牛超数排卵的最佳方案、最佳月龄和重复超排的最佳时间间隔。结果表明,超排方案4的超排效果最好,平均采卵数(80.0枚)、平均回收卵数(43.3枚)和平均可用卵数(37.8枚)均显著高于其他4个方案(P<0.05),表明超排方案4比较适合3月龄犊牛的超数排卵;2、3、4、5月龄犊牛应用超排方案4的超排效果较好,差异不显著,平均可用卵数分别为33.5、41.0、34.5、32.8枚,1、6月龄犊牛的超排效果显著差于其他4个月龄组(P<0.05),平均可用卵数分别为10.8、18.3枚,表明超排方案4处理犊牛的最佳月龄为2~5月龄;超排间隔2周组(6.3枚)平均可用卵数效果显著差于间隔3、4和5周组(16.7、23.7、23.0枚)(P<0.05),超排间隔3、4、5周组之间超排效果差异不显著,表明犊牛重复超排处理的最佳时间间隔为3~4周。

通过分子育种方法可以改善猪肉质性状。作者介绍了评价猪肉质性状的指标,分子育种方法的内容和特点,综述了应用分子育种方法改善猪肉质性状的研究进展、存在问题,并对其进行了展望。

为了调查山东省鸭疫里默氏杆菌病与其他疾病的混合感染情况,对从山东省6个肉鸭养殖较多县(市)收集到的118份样品进行了大肠杆菌、沙门氏菌和鸭病毒性肝炎的分离鉴定。结果显示,鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌单独感染分别占到样品总数的21.18%和11.86%,鸭疫里默氏杆菌与大肠杆菌和鸭病毒性肝炎的双重感染最为普遍,分别占到样品总数的38.14%和18.64%,鸭疫里默氏杆菌、鸭大肠杆菌、鸭病毒性肝炎的三重感染占到样品总数的6.78%。其中,鸭大肠杆菌的优势血清型为O₇₈和O₉₂,分别占总分离株数的16.90%和15.49%,其次是血清型O₉₃和O₁₄₂,分别占到总分离株的11.27%和8.45%。

2011年山西省多个奶牛场发生了较严重的乳房炎,对76份采集的奶样进行细菌分离鉴定并采用药敏纸片法检测主要分离菌的抗生素耐药情况。所分离细菌以革兰氏阳性菌为主,革兰氏阳性球菌和其他革兰氏阳性菌分别占60.67%和23.59%。分离出多种病原菌和机会致病菌,主要的病原菌有链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等,检出率为2.24%~11.24%,其中无乳链球菌的检出率最高;机会致病菌有粪链球菌、微球菌、克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌等,检出率为1.12%~11.24%,其中粪链球菌和微球菌的检出率较大,分别为11.24%和6.74%。药敏试验检测结果显示,在所选的15种药物中,主要分离菌均对丁胺卡那霉素、氟哌酸和恩诺沙星3种药物敏感;大肠杆菌、克雷伯菌、凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素类和β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂类药物产生了极强的耐药性,耐药率均为100%;乳房链球菌对该类药物也产生不同程度的耐药,耐药率为20%~100%;对链霉素产生100%耐药的细菌有大肠杆菌、克雷伯菌、无乳链球菌、乳房链球菌、停乳链球菌等细菌;部分分离菌对卡那霉素、庆大霉素、链霉素、四环素、红霉素、先锋霉素Ⅴ、复方新诺明等药物产生不同程度耐药。被检奶牛场混合感染较为严重,应进一步加强环境卫生管理,临床治疗应合理有效用药。

猪星状病毒(porcine astrovirus,PAstV)感染猪后可引起腹泻、呕吐、脱水和生长迟缓等临床症状,对断奶前仔猪侵害尤为严重,对养猪业造成一定的经济损失。本研究对猪星状病毒广西流行株用PK-15细胞进行分离,用RT-nPCR、间接免疫荧光、电镜和免疫印迹分析进行鉴定并进行致病性试验,结果分离到2株具有细胞病变和致病性的猪星状病毒,为进一步研究猪星状病分子生物学、致病机制及构建发病动物模型等奠定了基础。

抗菌肽具有广谱杀菌,对病毒、真菌、某些肿瘤具有一定的抑制作用,抗菌肽还具有不产生耐药性,对正常细胞无毒害作用,是一种理想的生物制剂。作者综述了近些年来抗菌肽在抗细菌、病毒、真菌和癌症等方面的相关研究,并就抗菌肽在当前存在的问题和未来巨大的应用前景进行了探讨。

非洲马瘟(African horse sickness,AHS)由非洲马瘟病毒(African horse sickness virus,AHSV)感染马科动物而引起的一种非接触性传播的虫媒病毒病,为世界动物卫生组织法定报告的动物疫病,目前主要流行于亚撒哈拉非洲等地区。库蠓(Culicoides midges)是非洲马瘟的主要媒介昆虫,其在疫区的生长繁殖直接影响着该病的流行状况。非洲马瘟弱毒苗和灭活苗已经商品化并得到广泛地应用,新型基因工程疫苗,如亚单位疫苗、活病毒载体疫苗等,正在研发当中并有望将来进入疫苗市场,作者着重对ASH疫苗的研究现状进行了评述。

血根碱(sanguinarine)作为一种苯菲啶异喹啉类生物碱,具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、改善肝功能及诱导细胞凋亡等作用,同时对肝脏、心脏等具有一定的毒性。作者就血根碱对细菌、真菌和癌细胞的药理作用及毒性作一综述,为该药在临床中的有效合理应用奠定基础。

猪繁殖与呼吸综合征是一种引起母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸道症状及高死亡率的传染病,在全世界蔓延流行,2006年在中国又变异为高致病性猪繁殖与呼吸综合征并造成严重经济损失。自20世纪80年代末首次在美国发现该病至今已有20余年,该病尚未有特效的治疗药物,疫苗免疫是防控该病的重要措施之一,国内外学者高度重视其疫苗的研究,并取得了较大的进展。笔者着重阐述近些年来猪繁殖与呼吸综合征活疫苗、灭活疫苗及基因工程疫苗的研究进展。

对锦州及周边地区3个水库30尾病鱼进行细菌分离培养、染色镜检、生化试验和PCR扩增气溶素基因aer鉴定,确定6株为嗜水气单胞菌。进一步采用纸片扩散法测定嗜水气单胞菌分离株对多种抗生素的敏感性,各分离菌株均对环丙沙星、氯霉素、强力霉素、妥布霉素敏感;对氨苄青霉素、青霉素不敏感;部分菌株存在不同程度的耐药性。接种试验动物出现典型的嗜水气单胞菌的病理变化和死亡。

某鸡场鸡群中出现以神经症状、产蛋下降、畸形蛋增多和呼吸困难、腹泻等为主要特征的疾病,对发病鸡场进行实地走访并采集发病鸡病料。根据临床症状,病理剖检及实验室细菌学、血清学、病毒学检测,鉴定该鸡场发生新城疫疫情,并继发鸡群大肠杆菌感染;通过实时荧光RT-PCR检测,对该病毒进行强弱毒株的鉴别,显示该鸡场发生的新城疫是由新城疫中强毒株引起的。

本研究采用单个乳腺切除、区域乳腺切除、单侧乳腺切除对临床31例犬乳腺肿瘤病例进行手术治疗,调查不同手术方法及肿瘤质量对良性、恶性乳腺肿瘤术后预后的影响。结果显示,犬乳腺肿瘤的大小与其预后相关,随着犬瘤体质重的增加,其术后预后不良愈加明显,复发率、死亡率呈上升趋势;区域乳腺摘除术或乳腺完全根除术对乳腺肿瘤患犬的预后有一定影响。

从健康仔猪粪便中分离到一株乳酸菌ZW002,并从形态、生理生化指标,16S rRNA基因序列分析,鉴定该菌株为屎肠球菌(Enterococcus faecium),将其16S rRNA基因提交GenBank,登录号为JN542513。从耐酸、耐胆盐及抑菌性能等方面对菌株进行益生功能初步研究,结果表明,菌株ZW002表现出良好的耐受性及益菌性能,为猪用微生态制剂的研究开发奠定了基础。

试验旨在研究不同程度热应激水平对奶牛甲烷排放量的影响。试验选用4头处于干奶期的经产中国荷斯坦奶牛,采用4×4拉丁方设计,利用环境控制舱检测温湿度指数(THI)在66、72、78和84条件下甲烷的产生量。结果表明,当奶牛处于应激状态时,CO₂和CH₄排放量均显著下降;单位饲料干物质所产生的甲烷量显著升高。因此,干奶期奶牛在热应激条件下,甲烷排放量显著下降。

本试验旨在提高鸡传染性法氏囊卵黄抗体防制鸡传染性法氏囊的效果,比较不同提纯方法对鸡传染性法氏囊高免卵黄抗体效价的影响。制备高免蛋并测定其效价,在实验室通过直接离心法、酸化水提取法、氯仿提取法、聚乙二醇法4种方法分别对高免卵黄抗体提取及抗体效价检测。试验结果表明,自制卵黄抗体效价为1:64;直接离心法的抗体效价为1:128,酸化水提取法的抗体效价为1:16,氯仿提取法抗体效价为1:256,聚乙二醇法的抗体效价是1:32。试验结果显示,使用氯仿提取法后检测的抗体效价最高,是临床提取抗体的常用方法。

发酵床连续养殖是环保,节能的养殖技术,但它是否对疫病控制有不良影响,则是需关注的另一方向。采集同一地区不同养殖方式的白羽肉鸡样品,采用斑点杂交技术和抗体检测技术检测,试验结果表明,两种养殖方式在马立克氏病病毒(MDV)、网状内皮细胞增生病病毒(REV)检测结果上没有差别;在禽贫血病病毒(CAV)检测上抗体差异明显:发酵床养殖阳性率为28%,普通网上养殖阳性率为86%;NDV HI抗体滴度差异极显著(P<0.01)。综合评价发酵床连续养殖可有效控制疫病的感染。

本试验采用微量肉汤稀释法对120株宠物医院分离的大肠杆菌进行头孢噻呋、恩诺沙星等13种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)值测定,并利用WHONET 5.4软件对数据进行处理,以了解广州市宠物源性大肠杆菌的耐药情况。通过对其耐药谱型的调查,为指导宠物临床用药和耐药性及耐药性监测提供理论依据。

本研究报道了普鲁卡因青霉素－硫酸双氢链霉素混悬剂对试验性感染猪链球菌病的临床药效学。以试管2倍稀释法测得兰氏C群类马链球菌对青霉素、恩诺沙星的最小抑菌浓度(MIC)分别是0.0313、0.5 mg/L。肌注给药对猪链球菌病的试验性治疗结果表明,低、中、高剂量普鲁卡因青霉素－硫酸双氢链霉素混悬剂组(0.05、0.1、0.2 mL/kg体重,每毫升混悬剂含普鲁卡因青霉素、硫酸双氢链霉素200000 IU和250000 IU)及恩诺沙星组(2.5 mg/kg体重)用药3 d,对猪链球菌病的治愈率分别是60%、80%、90%及60%,而链球菌感染对照的死亡率为70%。

本试验为建立一种高效的羊附红细胞体解离方法,采集红细胞感染率大于90%的阳性抗凝血,分别应用水浴法和药物体外驱虫法对羊附红细胞体进行解离,观察分离前后附红细胞体感染率、红细胞感染强度、附红细胞体数、杂质含量和附红细胞体的运动性5项指标;提取附红细胞体抗原,制备全蛋白悬液,测定蛋白质含量,比较解离效果。将两种方法制备的羊附红细胞体抗原全蛋白进行SDS-PAGE试验,观察条带是否一致。结果显示,200 mL血液中加入1 mL双向红莲灭,4℃作用36 h,即可达到较好分离效果。与水浴法相比,解离后,红细胞感染率和感染强度明显下降,蛋白含量增加,收率高,纯度好。SDS-PAGE结果显示,体外驱虫法所制的羊附红细胞体抗原全蛋白悬液,其抗原蛋白带与水浴法相同,因此可用于粗制羊附红细胞体抗原。

本试验旨在研究日粮中添加抗菌肽和抗生素对断奶仔猪生长性能的影响。选用144头平均体重为(7.32±0.45)kg的杜×长×大三元杂交断奶仔猪,采用4×2析因设计,研究了日粮中添加4个抗菌肽水平(0、1、3、5 g/kg)和2个抗生素(恩拉霉素+抗敌素)水平(0、20 mg/kg + 20 mg/kg)对断奶仔猪生长性能的影响。试验设8个处理组,每组3个重复,每个重复6头猪。试验期为28 d,分为前期(1~14 d)和后期(15~28 d)2个阶段。试验结果表明,抗菌肽和抗生素显著影响断奶仔猪的前期、后期和全期的平均日增重和腹泻率(P<0.05);其中联合添加3 g/kg抗菌肽和20 mg/kg恩拉霉素、20 mg/kg抗敌素,显著提高了断奶仔猪的平均日增重,降低了料重比和腹泻率(P<0.05)。由此可知,抗菌肽和抗生素可一定程度上改善断奶仔猪生长性能,且两者有互作效应。

本研究建立了注射液中泰拉霉素的高效液相色谱－蒸发光散射检测法。试样为自制5%泰拉霉素注射液,以ODS C₁₈(250 μm×4.6 μm,5 μm)为色谱柱,2 mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸)－乙腈(80:20)为流动相,流速为1 mL/min,柱温25℃,蒸发光散射检测器条件:漂移管温度60℃,喷嘴加热器级别为60%,气体压力为172.4 kpa,增益为150。研究结果表明,泰拉霉素在0.01~0.2 mg/mL范围内,呈良好的线性关系(R＝0.9989),在高、中、低3个加标水平下的平均回收率为96.3%~97.8%,日间变异系数为0.6%~0.9%。该方法简便、快捷、准确,可用于泰拉霉素注射液的含量检测。

在揭示生猪健康产业链利益增长机制内涵的基础上,以产品质量价值与价格协同为目标,运用消费者决策理论和系统分析方法,分析生猪健康产业链利益增长机制的构成及运行机理,并从质量控制、政府监管、制度建设和政策扶持方面提出生猪健康产业链利益增长机制有效运行的保障策略,推动中国生猪健康产业链快速、持续发展。

猪在解剖学和生理学等方面与人极其相似。小型猪作为实验动物模型应用于医学研究领域,其优点是:体型小,饲料消耗低,管理操作方便,特别是经过人工培育的各品系小型猪能够配合试验,应激小,基因纯合度较高,成为理想的动物模型。作者综述了小型猪的国内外品种、品系,及其作为动物模型在心血管系统领域、消化系统领域、皮肤整形领域、外科领域、器官移植领域、口腔系统领域的研究与应用。