猪β-防御素-2转化酿酒酵母方法的比较分析

›› 2012, Vol. 39 ›› Issue (7): 138-141.

猪β-防御素-2转化酿酒酵母方法的比较分析

吴雅琨, 彭子欣, 冯秋月, 谢飞, 刘鹏, 王安如

北京大北农科技集团股份有限公司饲用微生物工程国家重点实验室,北京 100193

收稿日期:2011-12-19 出版日期:2012-07-20 发布日期:2012-07-16
通讯作者: 王安如(1963－),男,高级兽医师,博士,从事动物营养的研发工作。E-mail:anruwang@sohu.com E-mail:anruwang@sohu.com
作者简介:吴雅琨(1985－),女,河北人,硕士,研究方向:动物微生态。
基金资助:
国家重点基础研究发展计划(973计划)"农业生物技术及农产品加工科学问题"项目(2010CB35703)。

Comparison Analysis of Two Methods of Porcine-β-defensin-2 Gene Transforming into Saccharomyces cerevisiae

WU Ya-kun, PENG Zi-xin, FENG Qiu-yue, XIE Fei, LIU Peng, WANG An-ru

Dabeinong Technology Group, Institute of Agro-Food Science and Technology, Beijing 100193,China

Received:2011-12-19 Online:2012-07-20 Published:2012-07-16

摘要/Abstract

摘要： 为了建立操作简单、高效率的猪β-防御素-2转化酿酒酵母的方法,试验比较了酿酒酵母的两种转化方法,即电转化和醋酸锂法。结果显示,两种转化方法对细胞生长状态均有严格的要求。在醋酸锂转化中,以培养10 h,D_{600 nm}为1.051的细胞制备感受态,热激时间为60 min时,转化率为136个/μg DNA;在电转化中,以培养12 h,D₆₀₀_nm为1.359的细胞制备感受态,电击电压2.5 kV时转化效率为154个/μg DNA。但综合操作效率,最终选择醋酸锂法进行酿酒酵母的转化。

关键词: β-防御素-2; 酿酒酵母; 转化

Abstract: In order to develop a high efficiency genetic transformation system for Saccharomyces cerevisiae, two different transformation methods were compared in this study, which were electroporation transformation and lithium acetate transformation. The results showed that two methods all had strict request to cell growth state. For lithium acetate transformation, under the conditions of D_{600 nm} was 1.051, were treated for 60 min by LiAc, transformation efficiency was 136/μg DNA. While for electroporation transformation, 154/μg DNA were detected under the conditions of D_{600 nm} was 1.359, voltage of 2.5 kV. All results demonstrated that LiAc transformation method would be beneficial to develop the genetic transformation system for Saccharomyces cerevisiae.

Key words: β-defensin-2; Saccharomyces cerevisiae; transformation

中图分类号:

S859.79⁺7

吴雅琨, 彭子欣, 冯秋月, 谢飞, 刘鹏, 王安如. 猪β-防御素-2转化酿酒酵母方法的比较分析[J]. , 2012, 39(7): 138-141.

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