为了使干扰素-γ(interferon γ,IFN-γ)在牛结核等疾病的诊断和防制方面取得更有效的应用,试验采用RT-PCR法从云南本地黄牛外周血淋巴细胞总RNA中扩增牛IFN-γ(BoIFN-γ)基因,测序并进行序列分析;然后亚克隆至pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。序列分析结果表明,克隆的IFN-γ基因与GenBank中荷斯坦牛IFN-γ序列同源性达99.60%。表达产物经SDS-PAGE分析,在大小约23 ku处可见目的蛋白表达条带,与预期结果一致;用ELISA检测,表达的蛋白具有明显的生物学活性,在菌体中的含量为244 ng/mL。本试验结果为牛IFN-γ蛋白的进一步研究和应用奠定了基础。

本试验旨在研究microRNA-143(miR-143)对小鼠肌细胞增殖和分化的影响。利用Real-time PCR方法对细胞不同分化时期进行检测,并且在小鼠肌细胞C2C12中通过转染miR-143 mimics和Inhibitor对标志基因myogenin(MyoG)进行检测,然后利用免疫荧光和Western blotting方法对组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)基因表达水平进行检测。结果表明,miR-143与肌细胞的增殖和分化密切相关,过表达miR-143后,肌细胞标志基因MyoG出现下调,敲低后结果相反,且在分化细胞中过表达miR-143,免疫荧光和Western blotting结果显示,标志基因MHC的表达水平下降。因此,miR-143是一个潜在的影响肌肉生长发育的microRNA,为以后肌肉发育和功能的研究提供了一个新的资料。

为了解广东部分地区猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)流行毒株的基因型和遗传变异情况,本研究根据GenBank中PCV2的核苷酸序列设计针对ORF2基因的1对特异性引物,从分离于广东省的8株PCV2分离株BL、HD、Li、GD01、GD02、HD01、HD02和HD03株的细胞培养物中扩增ORF2基因,扩增片段克隆到pMD18-T上,获得重组质粒,并对其进行测序。序列分析结果表明,8株PCV2分离株ORF2基因与其他PCV2 ORF2基因核苷酸序列同源性为89.7%~100%,氨基酸序列同源性为87.2%~99.6%,进化分析结果表明,其中7株分离株处于同一分支,属于PCV2b-1A/1B,HD01株属于PCV2b-1C。

为分析猪葡萄球菌脱落毒素EXHC和SHETA基因结构并预测其所编码蛋白的结构和功能,本试验根据GenBank已报道的猪葡萄球菌脱落毒素EXHC和SHETA基因序列分别设计了1对特异性引物,从猪葡萄球菌GDZC株中扩增获得EXHC和SHETA基因片段,大小分别为1007和971 bp。序列分析结果表明,EXHC基因与猪葡萄球菌丹麦分离株(GenBank登录号:AF515455)及猪源松鼠葡萄球菌河北分离株(GenBank登录号:JF755400)的核苷酸序列、氨基酸序列同源性均为100.0%,而与其他葡萄球菌脱落毒素基因的核苷酸、氨基酸序列同源性分别为3.3%~53.9%和7.9%~44.2%。SHETA基因与日本分离株(GenBank登录号:AB036768)的核苷酸序列同源性为96.2%,氨基酸序列同源性为98.4%,在保守区共有31个碱基发生突变。利用DNAStar软件对EXHC和SHETA蛋白结构进行分析,结果显示EXHC基因编码的蛋白为亲水性蛋白,SHETA基因编码蛋白为疏水性蛋白,抗原性较差。本研究从猪葡萄球菌GDZC株中成功扩增获得EXHC和SHETA基因片段并对其编码的蛋白结构进行了预测,证实了中国分离的猪葡萄球菌同时携带有EXHC和SHETA 2种毒素基因,为进一步研究猪葡萄球菌的致病机理及毒素之间的相互作用提供了理论依据。

为了解中国农业科学院特产研究所分子生物学重点实验室前期分离的牛病毒性腹泻病毒BVDV-JL毒株完整的基因序列信息,本试验对BVDV-JL F6代毒株进行了完整基因序列测定。利用反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分段扩增了BVDV-JL分离毒株的7段cDNA片段,分别克隆于pMD18-T载体并进行测序。BVDV-JL株基因组序列全长为12276 bp,编码3901个氨基酸。基因组两端为非编码区5'UTR和3'UTR。基因比对及进化树分析结果表明BVDV-JL与BVDV CP7同源性最高,核苷酸同源性为93.2%,归类于BVDV-1b2基因亚型。BVDV-JL是第1个在中国报道的BVDV-1b2亚型毒株。了解BVDV-JL完整基因序列有利于中国BVDV流行病学调查。

为深入了解鸡主要组织相容性复合体Ⅰ(major histocompatibility complex class Ⅰ,MHCⅠ)β微球蛋白(β2m)分子的特征,研究β2m的免疫作用机理,试验通过RT-PCR技术获得了15条3个地方品种鸡完整的典型的MHCⅠβ2m基因,将该序列与GenBank数据库中登录的鸭、人、鼠、鱼、猴、马和猪7个不同物种的MHCⅠβ2m 分子序列进行了比对分析。结果显示,15条鸡β2m氨基酸序列同源性在98.0%~100%之间,大部分序列完全一致。鸡β2m氨基酸序列与鸭同源性最高,为60.6%;最低的则是来源于草鱼的β2m氨基酸序列,仅为33.3%。遗传进化分析进一步证实鸡与鸭的MHCⅠβ2m亲缘关系较近,与其他物种则遗传距离较远。此外,序列分析发现鸡β2m基因高度保守,仅个别碱基发生突变。其成熟肽序列的第24和79位为半胱氨酸,在所比对的动物中均未发生突变;同时在成熟肽的第77~83位之间存在免疫球蛋白超基因家族的特征基序“YXCXVXH”。研究结果表明,鸡与其他物种的MHCⅠβ2m分子具有相同的免疫功能基本单位,同时又具备独特的结构特点。

为了更系统的研究病毒在猪肠道内侵入及致病的分子机制,本试验以猪小肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IEC)为模型,应用RNeasy Min Kit从猪IEC中提取细胞总RNA,反转录后,利用SMART技术合成双链cDNA(ds-cDNA),通过同源重组的方法构建猪IEC酵母双杂交cDNA文库。结果显示,文库的滴度为8.4×10⁸ CFU/mL,插入的ds-cDNA片段大小为0.5~2.0 kb,平均长度约为1.1 kb,文库重组率为100%。此文库为筛选与猪腹泻病毒相互作用的宿主蛋白及进一步阐明病毒的致病机制奠定了基础,为研制有效的药物或疫苗提供了依据。

为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)贵州PT分离株Nsp2基因序列特征,选择PRRSV JXA1株Nsp2基因保守区域设计并合成特异性引物,用RT-PCR方法扩增出PRRSV贵州PT分离株Nsp2基因片段,克隆至pMD18-T载体并测序,应用DNAStar、PSORTⅡ、TMHMM、MLRC等软件对Nsp2序列的理化参数、同源性、亲水性、表面可及性、抗原性和亚细胞定位等进行分析和预测。结果显示,该基因cDNA长588 bp,蛋白理论分子质量为21.5674 ku,理论pI值为5.02,为不稳定蛋白,具有良好的形成抗原表位的条件。亚细胞定位结果表明该蛋白极有可能位于细胞核,其Nsp2基因与所选18个毒株相应片段的同源性为80.0%~99.8%。预测Nsp2蛋白具有良好的抗原性,在PRRSV的流行过程中,Nsp2基因不断发生遗传变异,产生新的变异序列。

本试验旨在建立一种能同时快速检测H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)和鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)的二重PCR检测方法。根据GenBank中H9亚型 AIV的HA基因和DTMUV的NS2基因序列,分别设计了1对针对H9亚型AIV和DTMUV保守基因序列的引物。利用这2对引物对混有H9亚型AIV和DTMUV的cDNA模板进行二重PCR扩增,得到了2个大小与试验设计相符的特异性扩增条带。利用本试验建立的二重PCR对其他鸭病病原体进行PCR扩增,结果均为阴性。利用这2对引物对H9亚型AIV和DTMUV进行敏感性检测,结果显示最低检测极限分别为6.3和 6.6 pg。对临床235份样品检测的结果表明该二重PCR检测方法具有快速、敏感、特异等优点,适用于临床检测的应用。

为研究奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)主要毒力因子的分布情况,本试验利用PCR对70株临床型乳房炎、55株隐性乳房炎金黄色葡萄球菌的8种主要毒力基因进行检测。结果显示,nuc、ClfA、TSST-1、PVL、Hla、Hlb、FnBPA和FnBPB 8种毒力基因在临床型乳房炎SA菌株中的检出率分别为:100.0%(70株)、100.0%(70株)、0(0株)、5.7%(4株)、100.0%(70株)、11.4%(8株)、97.1%(68株)和100.0%(70株);在隐性乳房炎SA菌株中的检出率分别为:100.0%(55株)、100.0%(55株)、0(0株)、70.9%(39株)、98.2%(54株)、9.1%(5株)、100.0%(55株)和100.0%(55株)。结果表明,nuc、ClfA、Hla、Hlb和FnBPA 5种毒力基因是引起奶牛乳房炎的SA的最主要毒力基因;PVL基因可能是引起隐性乳房炎的重要致病基因。

为建立一种通过胶体金免疫层析技术快速检测柱状黄杆菌的方法,试验采用柠檬酸三钠还原法制备粒径为20 nm的胶体金颗粒,将其标记纯化的抗柱状黄杆菌单克隆抗体(McAb)制备出金标抗体结合垫。纯化的兔抗柱状黄杆菌多克隆抗体(PcAb)和羊抗鼠IgG分别包被在硝酸纤维素膜的检测线(T)与质控线(C)上,制备出胶体金免疫层析试纸条,并对试纸条的灵敏度、特异性及稳定性进行测定。结果显示,该试纸条检测灵敏度为1×10³ CFU,检测时间为3.5 min,制备的试纸条与迟钝爱德华氏菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌均无交叉反应,且稳定性好。本研究首次成功建立了柱状黄杆菌胶体金快速检测方法,所制备的试纸条具有灵敏、特异、稳定、快速等优点,可用于柱状黄杆菌的检测。

外膜蛋白是原核生物细胞膜的重要组成成分之一,在维持细菌正常形态结构及细菌在机体内的生存和繁殖中发挥着不可替代的作用。作者将对其结构、功能及临床应用等方面的研究成果进行综述,以期为今后基础研究、疾病诊断和临床治疗方面提供有力的理论及研究基础。

随机引物PCR技术(AP-PCR)是一种建立在PCR基础上的新的DNA多态性检测技术,其特点是利用随机寡核苷酸引物扩增基因组DNA片段,在无需预知研究对象的情况下对其进行基因特征的分析,具有简便、高效、实用等优点,现已广泛应用于分子生物学的多个领域。文章主要对AP-PCR技术的原理、优缺点、研究近况及其在动物医学中的应用等作一综述。

本试验利用猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)SC株免疫产蛋鸡,收集高免卵黄,采用水稀释法和水稀释-盐析法获得鸡源抗PEDV卵黄抗体,采用已建立的ELISA方法对卵黄抗体效价进行测定。以3日龄无母源抗体的易感仔猪为试验动物,对抗PEDV卵黄抗体的治疗效果及安全性进行测定,并进一步利用自然发病猪场的治疗效果进行验证。结果表明,经PEDV SC株细胞毒免疫的鸡可在2次加强免疫后15 d产生高水平的特异性抗体。在实验室治疗试验中,攻毒治疗组仔猪的存活率达60%,攻毒对照组存活率为20%;用于自然发病猪场时,饲喂抗PEDV卵黄抗体饲料的仔猪存活率亦为60%,而自然发病对照组的存活率为10%。以上结果表明抗PEDV卵黄抗体对感染PEDV的仔猪有一定治疗作用。

本试验在连续3年时间里测定了上海地区热应激周期变化对泌乳中期奶牛生产性能和牛奶品质的影响。通过实地测定并计算分析,绘制了上海地区热应激周期变化图谱,揭示了整个热应激周期中不同热应激程度的分布状况。研究对比了自然生产环境下无热应激与中度热应激对奶牛生产性能和牛奶品质的影响,发现中度热应激极显著降低了奶牛采食量、产奶量、乳脂校正乳产量、能量校正乳产量、乳脂率、乳蛋白含量、总固体含量(P<0.01),而且显著增加了乳中尿素氮含量(P<0.05)。在热应激周期变化研究中发现,中度热应激显著升高泌乳奶牛的直肠温度和呼吸频率(P<0.05),而且呼吸频率比直肠温度对热应激变化的反应更快、更敏感。热应激周期变化对奶牛干物质采食量、产奶量的影响取决于热应激程度,2012年整个热应激周期的热应激程度比较低,热应激周期变化对奶牛干物质采食量、产奶量无显著影响(P>0.05),但是2013年热应激程度更加严重,热应激周期变化对奶牛干物质采食量、产奶量产生了极显著影响(P<0.01)。在牛奶品质中,受热应激影响最大的是乳蛋白合成量(P<0.01)。2012年和2013年2个热应激周期变化对其他乳成分含量没有显著影响(P>0.05),但是两年的热应激周期变化都导致乳蛋白含量显著下降(P<0.05)和乳中尿素氮含量显著升高(P<0.05)。尤其值得注意的是,2012年热应激周期变化并没有导致奶牛采食量下降(P>0.05),而且产奶量也没有显著性差异(P>0.05),但是仍然出现了乳蛋白含量下降和乳中尿素氮含量升高(P<0.05)。这表明热应激周期变化改变了泌乳中期奶牛氮代谢的途径,发生了氮营养重分配(repartitioning)现象,而且这种现象不依赖于采食量和产奶量,可以称之为“热应激乳蛋白降低征”(heat-stressed milk protein decrease syndrome,HS-MPD)。

本试验旨在研究绿汁发酵液和纤维素酶对香蕉茎+小麦麸混合青贮发酵品质的影响。调制1个香蕉茎单贮(BSS)组和8个香蕉茎小麦麸混合青贮组,分别为1个对照(CON)组,添加2 mL/kg绿汁发酵液(FGJ)组,添加0.05、0.15和0.25 g/kg纤维素酶(CEL1、CEL2和CEL3)3个水平组,添加FGJ+CEL1(MIX1)、FGJ+CEL2(MIX2)和FGJ+CEL3(MIX3)3个混合组,每组均设3个重复。常温发酵60 d,测定青贮的发酵品质和化学成分。结果表明,与BSS组相比,CON组的气体损失率(GLR)和pH显著降低(P<0.05)。与CON组相比,各添加剂组的干物质(DM)、干物质回收率(DMR)和可溶性碳水化合物(WSC)含量有不同程度的增高,中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)及氨态氮(AN)含量有不同程度的降低;与FGJ组相比,CEL和MIX组的DMR极显著升高(P<0.01)。在CEL组中,随CEL水平的增加,青贮效果愈好;与MIX1组相比,MIX3组的NDF含量显著减少(P<0.05),DMR显著升高(P<0.05);与CEL组相比,对应的MIX组有不同程度的改善。综上所述,在香蕉茎青贮中添加小麦麸有利于改善青贮品质,添加纤维素的效果优于添加绿汁发酵液的效果,二者混合效果更好,且混合后的青贮效果随着纤维素酶的增加而更好。

本试验旨在研究不同贮藏温度对王草青贮品质的影响,选用热带牧草王草为青贮原料,用塑料瓶青贮并在25、30和35℃条件下贮藏30 d,测定王草青贮品质。结果表明,不同贮藏温度对王草青贮饲料的干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、酸性洗涤纤维(ADF)、中性洗涤纤维(NDF)及水溶性碳水化合物(WSC)含量均无显著影响(P>0.05);30℃处理能显著降低王草青贮饲料的pH及氨态氮/总氮(P<0.05),V-Score评分等级为优,具有较好的青贮发酵品质;25和35℃处理下pH及氨态氮/总氮、丁酸含量较高(P<0.05),V-Score评分等级为差,青贮发酵品质较差。综上所述,不同贮藏温度可影响王草青贮品质,其中30℃较25和35℃更有利于王草青贮。

本试验旨在研究日粮中添加不同水平百里香精油对麻花鸡生长性能、血清蛋白和细胞因子的影响。选取1日龄麻花鸡768只,采用单因子试验设计,随机分为8组,每组4个重复,每个重复24只鸡。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ~Ⅶ组在基础日粮中分别添加0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30和0.35 mg/kg百里香精油。试验期42 d,分1~21日龄(前期)、22~42日龄(后期)2个阶段。结果表明,与对照组相比,日粮中添加百里香精油对1~21日龄麻花鸡生长性能无显著影响(P>0.05),但试验Ⅱ~Ⅵ组可极显著提高22~42日龄麻花鸡平均日增重(P<0.01),试验Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ组可显著降低22~42日龄麻花鸡料重比(P<0.05)。与对照组相比,试验Ⅱ组可显著降低42日龄麻花鸡血清中白蛋白含量(P<0.05),试验Ⅱ~Ⅴ、Ⅶ组可显著提高21日龄麻花鸡血清中球蛋白含量(P<0.05),试验Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组可显著降低21和42日龄麻花鸡血清中白蛋白/球蛋白比值(P<0.05)。与对照组相比,日粮中添加百里香精油对21和42日龄麻花鸡血清中白介素-4、肿瘤坏死因子-α和γ-干扰素含量均无显著影响(P>0.05),但试验Ⅶ组可显著提高42日龄麻花鸡血清中白介素-1含量(P<0.05)。综上所述,日粮中添加百里香精油可显著促进麻花鸡体内蛋白沉积,提高生长性能和增强γ-球蛋白和白介素-1细胞因子参与介导的免疫调节作用,建议生产中麻花鸡日粮中百里香精油的适宜添加量为0.10~0.25 mg/kg。

本试验旨在探讨轻音乐对奶牛产奶量及血液激素水平的影响。选取产奶量、年龄、胎次、泌乳期相近的荷斯坦泌乳牛32头,随机分成2组,每组16头。试验组于早、中、晚3次给料时间各播放轻音乐2 h,轻音乐选用理查德·克莱德曼的经典钢琴曲20首,对照组常规饲喂。预试期7 d,正试期60 d。正试期当天起(0 d),每隔10 d测定单产1次并采集血样1次。结果表明,试验组产奶量在第10、40天时显著高于对照组(P<0.05);试验组产奶量在第20、30、50、60天时高于对照组,差异均不显著(P>0.05);整个试验期,试验组平均产奶量较对照组高1.72 kg,差异极显著(P<0.01)。整个试验期,轻音乐能提高奶牛血液中γ-氨基丁酸(GABA)、生长激素(GH)含量,降低血液中皮质醇(COR)、五羟色胺(5-HT)含量,差异均不显著(P>0.05)。综上所述,轻音乐可通过提高奶牛血液中γ-氨基丁酸含量,促进生长激素的分泌,降低皮质醇、五羟色胺的含量,稳定奶牛情绪,从而降低奶牛应激反应,提高产奶量。

本试验旨在探讨日粮中添加CC-Dp对马驹麦草采食量和血清中摄食调控激素的影响。选取20匹17月龄健康无病、体况和采食量相近的伊犁马驹,采用单因素试验设计,随机分为4组,每组5匹,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础日粮中添加500、1000、1500 mg/kg CC-Dp。预试期7 d,正试期30 d。结果表明,与对照组相比,试验Ⅱ组马驹麦草采食量在试验第1~15天显著提高(P<0.05),血清中胆囊收缩素(CCK)和γ-氨基丁酸(GABA)含量在试验进行1~15 d分别显著降低和升高(P<0.05);与对照组相比,试验Ⅲ组马驹麦草采食量在试验全期内显著提高(P<0.05),血清中CCK含量在试验进行1~15 d极显著降低(P<0.01)、16~30 d显著降低(P<0.05),血清中GABA含量在试验全期均显著提高(P<0.05);各组间血清中神经肽Y(NPY)、5-羟色胺(5-HT)、瘦素(LEP)含量差异均不显著(P>0.05)。综上所述,日粮中添加1500 mg/kg CC-Dp能显著提高伊犁马驹麦草采食量,显著降低血清中胆囊收缩素含量,显著升高血清中γ-氨基丁酸含量,推测其作用机制可能是通过降低动物体内胆囊收缩素水平以调控动物的采食,且与γ-氨基丁酸的调控途径有关。

本试验旨在研究日粮中添加酵母浓缩物对罗斯肉鸡屠宰性能和胴体品质的影响。选取1日龄罗斯308肉鸡160只,采用单因子试验设计,随机分为5组,每组4个重复,每个重复8只鸡。Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮;Ⅱ~Ⅴ组在基础日粮中分别添加2000、4000、6000、8000 mg/kg酵母浓缩物,其中Ⅱ组(2000 mg/kg)添加方式为1~42日龄连续添加;Ⅲ~Ⅴ组添加方式为1~21日龄添加酵母浓缩物,22~42日龄不添加酵母浓缩物。试验期42 d。结果表明,21日龄时,与对照组相比,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组有提高屠宰率、全净膛率、胸肌率、腿肌率及降低腹脂率的趋势,但差异均不显著(P>0.05);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组可显著提高肌肉的a值、降低肌肉剪切力(P<0.05),Ⅲ组可显著降低肌肉的b值(P<0.05)。42日龄时,与对照组相比,Ⅳ组可显著降低腹脂率、提高胸肌率(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组可显著提高肌肉的a值(P<0.05),Ⅱ组可显著降低肌肉剪切力(P<0.05)。综上所述,日粮中添加酵母浓缩物可显著提高罗斯肉鸡的屠宰性能、改善胴体品质,并具有滞后效应,最佳添加剂量为6000 mg/kg,添加方式为1~21日龄添加,22~42日龄不添加。

本试验旨在通过优化提取中药复方宫炎净中的有效成分生物碱,得到最佳提取工艺。试验通过探究乙醇体积分数、超声提取时间、超声提取次数及料液比这4个单因素对提取效果的影响,以盐酸水苏碱为标准品,采用L₉(3⁴)正交设计法优选中药复方宫炎净中总生物碱的提取工艺。结果显示中药复方宫炎净中总生物碱的最佳提取工艺为乙醇体积分数为70%、超声提取时间为25 min、超声提取3次、料液比为1:10,且在影响中药复方宫炎净中生物碱提取的因素中,影响大小依次为料液比、乙醇体积分数、超声提取次数、超声提取时间。

试验旨在探索使较高比例的淋巴细胞富集在有丝分裂G2/M期的最佳条件。运用植物血凝素(PHA)和刀豆蛋白A(ConA)对淋巴细胞进行刺激使其增殖,培养一定时间后加秋水仙素对淋巴细胞进行同步化处理,用流式细胞仪检测G2/M期的细胞数量进行比对,观察试剂的最佳作用浓度和加秋水仙素的最佳时间。结果表明,采用PHA和ConA刺激淋巴细胞增殖的最佳作用浓度是60和5 μg/mL,且淋巴细胞经ConA刺激培养45 h再加秋水仙素处理5 h G2期的比例最高为58.38%。结果提示,就绒山羊的淋巴细胞来说,ConA刺激绒山羊淋巴细胞增殖的效果比PHA好,且摸索出细胞G2/M期的时间点至关重要。

本试验旨在研究miR-193a在致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(cp BVDV)感染MDBK细胞过程中诱导细胞凋亡的分子机制。试验利用TargetScan和Microcosm Targets等生物信息学在线软件预测凋亡相关的miR-193a靶基因Bax,并利用双荧光素酶报告基因系统验证miR-193a的靶基因;用过表达miR-193a的慢病毒pre-miR-193a-lv和抑制miR-193a表达的慢病毒pre-miR-193a-inhibitor-lv分别侵染MDBK细胞,48 h后收集细胞,然后用实时荧光定量PCR、Western blotting和流式细胞仪检测凋亡通路中Bax的表达水平及MDBK细胞凋亡率。结果预测并验证了miR-193a的靶基因为Bax;双荧光素酶报告基因分析结果显示miR-193a能直接结合到Bax 3'UTR区域中的miRNA反应位点,并极显著下调Bax的表达水平(P<0.01);流式细胞仪检测凋亡率结果显示,感染pre-miR-193a-lv慢病毒的MDBK细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。结果表明miR-193a能直接靶向凋亡通路中Bax基因,从而促进凋亡的发生。

为探讨牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)对热应激条件下AA肉鸡、海兰褐仔鸡及昆明种小白鼠的抗热应激作用,试验检测了TCDCA对热应激条件下AA肉鸡死亡率、海兰褐仔鸡体增重及对热应激小鼠采食量、饮水量、增重、血清中皮质醇和甲状腺素(T3)含量、肝脏组织中热休克蛋白70(HSP70) mRNA表达的影响。结果表明,0.1和0.2 g/kg TCDCA可显著降低热应激AA肉鸡死亡率(P<0.05);0.05、0.1和0.2 g/kg TCDCA可极显著增加热应激海兰褐仔鸡的体增重(P<0.01);0.1 g/kg TCDCA能显著提高热应激小鼠的采食量和饮水量(P<0.05),而对其体增重无显著影响(P>0.05);0.05、0.1和0.2 g/kg TCDCA可使热应激小鼠血清T3含量显著降低(P<0.05);0.1和0.2 g/kg TCDCA可使热应激小鼠血清皮质醇含量显著升高(P<0.05);0.05、0.1和0.2 g/kg TCDCA可显著抑制热应激小鼠肝脏中HSP70 mRNA的表达(P<0.05)。综上所述,TCDCA具有抗热应激作用。

环肽pLR(LVRGCWTKSYPPKPCFVR)是以2个半胱氨酸的二硫键成环,不仅具有类胰蛋白酶抑制剂的典型分子结构特点,且具有促肥大细胞释放组胺,抑制类胰蛋白酶活性和粒细胞—巨噬细胞集落形成,对电负性POPG膜有透化作用,但无溶血作用,并对过敏性哮喘小鼠模型的表现型症状和肺脏组织损伤具有治疗作用。作者针对环肽pLR的结构与功能、生物学活性及在哮喘动物模型中的免疫调节作用进行了综述,以期为环肽类药物的开发和应用提供参考。

试验旨在建立绒山羊毛囊干细胞体外分离培养方法,并对其生物学特性和多向分化潜能进行鉴定。利用两步酶消化法和差速贴壁法分离纯化毛囊干细胞,对其进行传代培养,测定生长曲线和克隆形成率,采用油红O和茜素红染色法对第5代毛囊干细胞向成脂和成骨分化情况进行鉴定。结果显示,分离得到的毛囊干细胞形态均一,体积小,呈典型的铺路石状生长,生长曲线呈S型,克隆形成能力强。成脂诱导后,细胞体积增大,细胞质增多,胞内出现小脂滴,诱导12 d后,脂滴逐渐增多,油红O染色呈阳性;成骨诱导后,细胞边缘模糊,出现颗粒状结节,经茜素红染色呈阳性。表明获得的绒山羊毛囊干细胞具有多向分化的潜能。

本试验旨在探讨0~10周龄扬州鹅肠道的发育规律。选取189只1日龄扬州鹅仔鹅,随机分为7个重复,每个重复27只,通过饲养试验和屠宰试验研究扬州鹅肠道长度和肠道重量的发育规律。结果表明,扬州鹅肠道发育与体重发育趋势基本一致,扬州鹅1~4周生长迅速,4周龄左右达到增重高峰,4~7周日增重稳定在73 g/d左右,而肠道在6周龄时基本发育完善;随周龄的增加,肠道各段长度与肠道总长度的比值均无明显变化。该研究结果为扬州鹅的生产和资源开发提供理论依据。

细胞凋亡是细胞生命活动中的基本现象,是当今生命科学研究的热点。文章通过检索国内外主要数据库,对细胞死亡受体途径、线粒体途径及交织旁路途径进行简要综述。文章可为后续该领域研究提供借鉴,更好的解决实际问题。

试验旨在分析亚洲黑熊主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC) DQA和DRB基因外显子2多态性。采用PCR扩增和克隆测序等方法对来自云南地区的40只亚洲黑熊DNA样本进行研究。结果发现,在40只亚洲黑熊样本中检测出了9个DQA外显子2等位基因和13个DRB外显子2等位基因,和大熊猫相比,亚洲黑熊在DQA和DRB基因外显子2位点上有较高的多态性。通过对推导出的氨基酸序列抗原结合位点的同义替换和非同义替换的比较,证明了DQA和DRB位点的平衡选择作用。

试验根据直径将猪卵泡分为2组:G1组(4~7 mm)和G2组(2~4 mm),对2组卵泡内获取的卵母细胞体外成熟率和发育潜能进行了比较,利用相对定量PCR检测了卵丘细胞中卵丘扩展相关基因Has2、Ptgs2、Ptx31及Pgr的表达水平,应用绝对定量PCR检测了成熟培养前后卵母细胞线粒体拷贝数,并利用5,5'-二巯基-2-硝基苯酸(DTNB)酶循环法检测了体外成熟培养过程中卵母细胞谷胱甘肽(GSH)的含量。结果显示,G1组和G2组卵母细胞体外成熟率分别为95.06%和68.19%,G1和G2组排出第一极体的成熟卵母细胞孤雌激活后的囊胚率分别为51.47%和29.44%,2组卵母细胞在体外成熟率和孤雌发育率上均差异显著(P<0.05)。G1组卵丘细胞在体外成熟培养过程中的扩展程度明显高于G2组,G1组卵母细胞对应的卵丘细胞扩展相关基因Has2、Ptgs2、Ptx31、Pgr的表达水平高于G2组(Has2基因在卵母细胞成熟培养0、24 h除外);G1组卵母细胞线粒体数、谷胱甘肽含量均高于G2组。以上结果表明,大卵泡来源的卵母细胞体外成熟能力和发育潜力优于小卵泡来源的卵母细胞,这可能与卵母细胞成熟过程中卵丘扩展程度、卵丘扩展相关基因表达激活情况、卵胞质内谷胱甘肽含量和线粒体拷贝数有关。

美丽臀(callipyge,CLPG)及肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是全世界公认的与肌肉生长发育相关的基因,突变后分别产生“美丽臀”和“双肌”的优良性状。为研究国外进口品种澳洲白绵羊是否携带2种基因的突变位点,本试验以澳洲白绵羊为试验动物,采用PCR-RFLP技术对CLPG、MSTN基因的多态性进行分型。结果发现:CLPG基因上有1个C→T的SNP位点,澳洲白绵羊群体中有CC和CT 2种基因型;MSTN基因在3'-UTR区发现1个G→A的SNP位点,澳洲白绵羊群体中有GG和GA 2种基因型。用R语言程序对所测数据进行性别间不同基因型与生长发育状况的单因素方差分析得知,CLPG和MSTN基因不同基因型对澳洲白公羊体重、体高、体斜长、尻宽、背膘厚和眼肌面积均无显著性影响(P>0.05);CLPG基因CT基因型在母羊体重上显著高于CC基因型(P<0.05),在体斜长上极显著高于CC基因型(P<0.01),MSTN基因GA基因型母羊眼肌面积极显著高于GG基因型(P<0.01)。澳大利亚进口澳洲白绵羊中筛选到含有CLPG和MSTN基因的突变位点,且该突变位点对绵羊体尺性状有显著性作用,因此澳洲白绵羊引进后可以作为改良本地羊品种、基因聚合及三元配套系的终端父本。

为了探究过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPARα)基因在不同脂肪型猪肝脏组织中的发育表达规律,本研究采用实时荧光定量PCR方法,检测了马身猪和大白猪0、1、2、3、4、5和6月龄个体肝脏内PPARα基因mRNA的表达量。结果显示,马身猪和大白猪肝脏组织PPARα基因mRNA发育性变化趋势存在差异,大白猪PPARα 基因表达量呈现出前、后期高中期低的变化趋势,0月龄时表达量最高,3月龄时表达量最低,两者差异极显著(P<0.01),而马身猪表达量呈现前期高后期低的变化趋势,0月龄和1月龄的表达量极显著高于其他月龄(P<0.01)。上述结果揭示猪PPARα可能是肝脏脂质代谢的调控因子,为猪脂肪沉积的调控机制提供理论数据。

本试验旨在测定和比较5个绿壳蛋鸡群体中EAV-HP在溶质载体有机阴离子转运蛋白家族成员1B3(solute carrier organic anion transporter family member 1B3,SLCO1B3)基因的5'-非编码区插入整合的频率和类型。所选5个绿壳蛋鸡群体包括3个北京地区的商业群体(北京-LK、北京-LF和北京-YM)、贵州长顺绿壳蛋鸡群体和四川省地方品种旧院黑鸡;采用双重PCR对EAV-HP的插入整合进行检测,并利用DNA测序的方法判断EAV-HP的主要突变位点。结果表明,5个绿壳蛋鸡群体均拥有一定数量的EAV-HP插入整合的个体,表现为杂合(LC/N)和纯合(LC/LC)基因型,均可产绿壳蛋,其中旧院黑鸡的绿壳蛋频率最低,仅为28.90%,其次是北京-LF群体,为46.94%,其他3个群体的绿壳蛋频率为83.33%~84.62%;经卡方检验,北京-LF和旧院黑鸡群体符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),而其他3个群体则极显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.01)。DNA测序结果显示这5个绿壳蛋鸡群体中EAV-HP插入整合的序列与之前报道的东乡绿壳蛋鸡的KC632577.1完全一致。地方品种旧院黑鸡的绿壳蛋频率较低,建议利用双重PCR检测的分子标记辅助选择方法加以提高。

为探讨影响新疆地区西门塔尔母牛情期受胎率的因素,本试验采用SAS 8.1对影响情期受胎率的配种季节、与配公牛和母牛年龄3个因素进行最小二乘方差分析,各水平间进行Duncan多重比较并分析不同水平对情期受胎率的影响。结果表明,不同配种季节对西门塔尔母牛情期受胎率影响极显著(P<0.01),春季西门塔尔母牛情期受胎率极显著低于夏季、秋季、冬季(P<0.01),冬季情期受胎率最高(64.7%),而春季情期受胎率最低(40.0%);与配公牛对西门塔尔母牛情期受胎率无显著影响(P>0.05);母牛年龄对西门塔尔母牛情期受胎率的影响极显著(P<0.01),随着母牛年龄的逐渐增加情期受胎率有降低的趋势。依据本研究结果,可针对各影响因素合理有效的调控,从而提高母牛的情期受胎率,最终提高牛场经济效益。

本研究以中国优良地方品种梅山猪为材料,采用胰酶消化法获得猪胎儿成纤维细胞,通过使用Y染色体SRY基因引物SRY-1、SRY-2进行PCR扩增,结果发现,雄性胎儿样本能扩增出250 bp的Y染色体特异性基因片段,而雌性胎儿样本未扩增出此条带;G1、G2、G3、G4和G5代的融合效率差异不显著(P>0.05),但G5代作为供体细胞核移植的重组胚胎卵裂率显著高于G1、G2、G3和G4代(P<0.05);使用G5代的胎儿成纤维细胞作为供核细胞,通过手术移植的方法,将重构胚胎移植到二元后备母猪体内,结果成功地获得了体细胞克隆梅山仔猪,并且仔猪全部为雄性胎儿,说明该性别鉴定方法不但操作简单,而且准确度高;经微卫星DNA 多态性鉴定,确定克隆猪来自供核细胞,与代孕母猪无亲缘关系。本研究将为中国优质猪品种改良、保种、性别控制及建立人类疾病模型等研究提供有效可行的方法,为批量生产克隆优秀种猪提供了坚实的理论基础。

为探究脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)基因在猪不同组织中的发育性表达规律,本研究采用实时荧光定量PCR技术检测马身猪和大白猪7个阶段(初生、30、60、90、120、150和180日龄)肝脏、背最长肌和背部皮下脂肪3种组织中FAS基因mRNA的相对表达量。结果表明,品种间比较,FAS基因mRNA在马身猪和大白猪肝脏、背最长肌和背部皮下脂肪组织各生长发育阶段中的表达差异均达到显著或极显著(除肝脏组织初生阶段和背部皮下脂肪组织120日龄阶段)(P<0.05;P<0.01)。FAS基因mRNA在大白猪组织间的表达差异与生长发育相关,150和180日龄阶段,背部皮下脂肪组织中表达量极显著高于肝脏和背最长肌组织(P<0.01),初生、30日龄和90日龄阶段,背最长肌中的表达量极显著高于肝脏和背部皮下脂肪组织(初生阶段无脂肪组织样)(P<0.01);而马身猪整个发育过程中,背最长肌组织表现为优势组织,极显著高于其他2种组织(除120日龄阶段外)(P<0.01),脂肪组织表达量次之,肝脏组织中表达量较少。品种、日龄、组织及品种与日龄、组织与日龄的互作效应对FAS基因mRNA的相对表达量均有极显著影响(P<0.01)。FAS基因直接参与脂肪酸的合成,对猪肉质性状的遗传改良具有重要意义。

本试验旨在探讨不同外源激素组合的添加、胰岛素—转铁蛋白—亚硒酸钠(ITS)的添加、不同培养皿、石蜡油的添加对卵母细胞体外成熟培养(IVM)的影响。结果显示:①孕马血清促性腺激素+人绒毛膜促性腺激素+促卵泡素(PMSG+HCG+FSH)组高于促卵泡素+促黄体素(FSH+LH)组和尿促性腺激素(hMG)组,相互之间差异显著(80.1%、68.3%、53.3%,P<0.05);②添加1% ITS到猪卵母细胞培养液中对卵母细胞成熟率无显著提高(P>0.05),但显著提高了孤雌激活后孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率(63.3%、55.1%,18.7%、12.1%,P<0.05);③凹槽皿组猪卵母细胞成熟率显著高于四孔板和30 mm塑料皿组(73.3%、68.0%、68.3%,P<0.05);④石蜡油的添加对卵丘细胞扩展和卵母细胞体外成熟率均有显著提高(84.8%、69.9%,P<0.05)。结果表明培养液中添加PMSG+HCG+FSH和ITS及选用凹槽皿、成熟培养液上覆石蜡油可提高猪卵母细胞IVM效果。

试验对伊犁马速步赛的体尺性状与比赛成绩之间的相关性进行了研究。测定速步赛中不同比赛项目伊犁马的体高(X₁)、体长(X₂)、胸围(X₃)和管围(X₄),计算体长率(X₅)、胸围率(X₆)和管围率(X₇),并用SPSS 18.0软件分析其与比赛成绩之间的相关性。结果表明,在不同的比赛项目中,体尺性状与比赛用时有显著或极显著的相关性(P<0.05;P<0.01)。1000 m速步赛中比赛用时随体高、体长、胸围的增大而减少,随管围、胸围率和管围率的减小而减小;3000 m速步赛中比赛用时随体高、体长的增大而减小,随胸围率和管围率的减小而减小;5000 m速步赛中比赛用时随体高、胸围、体长的增大而减小,随管围率的减小而减小。

本研究旨在检测并对比分析中国北方地区3个荷斯坦牛场乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,简称金葡菌)的流行情况及乳汁中总菌群的抗生素耐药性。试验采集北方地区3个荷斯坦牛场的生产群奶样、大罐奶样和临床型乳房炎牛奶样共181份,首先采用Baird-Parker选择性培养基对金葡菌进行分离纯化;再采用特异性PCR方法鉴定含金葡菌特异基因nuc的金葡菌菌株;最后采用琼脂稀释法检测奶样中总菌群及金葡菌对14种抗生素的耐药性。结果发现,181份奶样带菌率为100%;金黄色葡萄球菌检出率为16.03%,分离纯化了48株金葡菌。奶样总菌群耐药性检测结果表明,中国北方地区3个荷斯坦牛场对于β-内酰胺类抗生素(苯唑西林、氨苄西林、头孢西丁、头孢哌酮)耐药性均较高,达89%以上;对红霉素、利福平、四环素、万古霉素、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、阿莫西林/克拉维酸的耐药性达80%以上;对氯霉素的耐药率过半;仅对阿米卡星耐药率较低(18%~58%)。对金葡菌耐药性检测结果显示,3个牛场金葡菌对环丙沙星、头孢西丁和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑有较高耐药性,但均对阿米卡星、氯霉素、加替沙星和万古霉素敏感。3个牛场绝大多数菌株都产生了多重耐药谱。研究结果为奶牛场乳源总菌群、金葡菌耐药性情况及科学用药提供试验数据。

本试验从发病猪肝脏中分离到1株细菌,经革兰氏染色镜检、生化试验、药敏分析、16S rDNA测序,确认该菌为1株多重耐药奇异变形杆菌。该菌与GenBank中其他9株不同来源的奇异变形杆菌进行16S rDNA比对分析,从遗传进化规律方面证明不同来源的的奇异变形杆菌亲缘性极其相近。周期性群集运动分析结果表明在含0.5%和1.0%琼脂平板上,该菌不以圆环样周期运动;在含1.5%和2.0%琼脂平板上,该菌以圆环样周期运动。

为对送检的发病藏香猪病死因进行确诊,本试验采用常规PCR、RT-PCR及荧光定量PCR方法,并结合流行病学调查、临床诊断及病理剖检等实验室检测对送检病料进行诊断,结果显示病死猪心脏、肺脏充血出血,肺脏肉变,气管内充满白色泡沫,全身淋巴结出血;荧光定量PCR方法检测猪圆环病毒呈阳性,PCR方法检出猪伪狂犬病病毒特异性条带,未见猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、猪肺炎支原体条带,RT-PCR方法未扩增出猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒特异性条带;血液涂片染色镜检可见猪附红细胞体。结果表明病死猪为猪伪狂犬病、猪圆环病毒病与猪附红细胞体病混合感染,采用经实验室诊断给出的综合防治方案治疗后,疫情得到控制。本次病例的诊治为养猪业可能发生的猪伪狂犬病、猪圆环病毒病、猪附红细胞体病的混合感染提供了有效的防治方法和借鉴经验。

本研究旨在探讨不同血清型沙门氏菌在环丙沙星抗生素压力下突变频率及在耐药发展过程中靶位基因突变、外排泵及调控基因表达的差异。选取临床分离的印第安纳型、肠炎型和鼠伤寒型沙门氏菌的敏感菌株,在环丙沙星压力下诱导耐药突变,分别获得一系列不同程度的耐药突变株。分别检测不同血清型沙门氏菌突变株的突变频率、靶位基因喹诺酮耐药决定区(QRDRs)和外排泵调控基因ramR-ramA突变及外排泵相关基因的表达水平;同时检测了母株在羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)存在情况下环丙沙星药物的蓄积浓度,以确定母株是否存在外排泵的作用。结果表明,在环丙沙星压力下,印第安纳型沙门氏菌较肠炎型和鼠伤寒型有更高的突变频率,易获得耐药株;印第安纳血清型菌株耐药性的获得主要是由于靶位基因gyrA发生单突变,协同外排泵外排作用增强而获得高水平耐药;肠炎型沙门氏菌耐药性获得主要是由于靶位基因gyrA发生83和87位双位点突变,并随着gyrB和parC基因的多位点同时突变而获得高水平耐药,耐药性的发展过程中没有外排泵作用参与;而鼠伤寒沙门氏菌在抗生素压力下不易发展成耐药菌,耐药性发生主要是由于靶位基因gyrB发生突变,而伴随parC基因突变及微弱的外排泵作用导致耐药水平增加。

作者从病原学、流行病学、诊断及预防措施等方面,对2011年秋欧洲大部分地区暴发的新型传染病——施马伦贝格病进行全面综述,重点总结了此病的诊断方法,为对此病的发病机理、感染机制和其他新型检测技术的深入研究奠定基础。

本试验对由患慢性奶牛乳房炎奶样中分离出的1株疑似金黄色葡萄球菌小菌落突变株(SCVs)进行形态观察、金黄色葡萄球菌相关保守基因片段(nuc、nucA、16S rDNA) 多重PCR扩增鉴定、药敏试验、生理生化特性研究及补偿试验。结果显示分离出1株金黄色葡萄球菌SCVs,该菌含有金黄色葡萄球菌菌种特异性基因nuc和nucA;与金黄色葡萄球菌质控菌株ATCC 25923的抑菌圈大小明显不同;菌落形态主要表现为菌落细小、生长缓慢、溶血能力下降;凝固酶活性下降;耐盐能力降低;革兰氏染色为革兰氏阳性球菌,呈葡萄状排列;补偿试验鉴定该金黄色葡萄球菌SCVs为胸腺嘧啶依赖型。结果表明成功分离鉴定出1株胸腺嘧啶依赖型金黄色葡萄球菌SCVs,为由金黄色葡萄球菌SCVs引起的奶牛慢性乳房炎的预防和控制及其致病机制的研究奠定前期基础。

2013年高温季节在广东广州2个养殖场患病宝石鲈(Scortum barcoo)病灶处共分离到2株细菌Py1和Py2。宝石鲈攻毒试验结果显示2株分离菌均具有较强毒力(半致死量分别为7.42×10⁶和1.72×10⁶ CFU/mL),且都对罗非鱼具有高度感染性(半致死量分别为3.39×10⁶和8.66×10⁵ CFU/mL)。经ATB生化鉴定及cfb基因序列分析,确定分离株为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae),并对其进行了相关药敏试验检测,以期为该病的预防提供参考。

本试验旨在研究2种粒径组方中草药对西伯利亚鲟致病性维氏气单胞菌病的预防效果。分为3个试验:安全性试验:设粗粉中草药(CP)组和超微粉中草药(SP)组,每组6个重复,每个重复10尾鱼,采取人工灌服给药,观察7 d;预防性试验:设对照(C)组、CP组和SP组,每组3个重复,每个重复15尾鱼,阶段性投喂2个疗程中草药后,用致病性维氏气单胞菌攻毒试验鱼,观察10 d;中试试验:分组同预防性试验,在鲟鱼养殖基地进行生产性试验,连喂2个疗程后抽血测定鱼体的非特异性免疫指标。安全性试验结果表明,2种粒径的中草药对西伯利亚鲟鱼LD₅₀均大于5000 mg/kg体重。预防性试验结果表明,CP、SP组试验鱼的成活率均显著高于C组(P<0.05)。中试试验结果表明,CP组的超氧化物歧化酶(SOD)水平显著高于C组(P<0.05);SP组的丙二醛(MDA)、补体蛋白3(C3)水平均显著高于C、CP组(P<0.05);SP组的碱性磷酸酶(AKP)水平显著高于C组(P<0.05)。综上所述,2种粒径的组方中草药对西伯利亚鲟维氏气单胞菌病具有较好的治疗作用,其中投喂超微粉制剂组方中草药能提高西伯利亚鲟鱼的非特异性免疫能力。

鸡传染性腺胃炎是一种由多种原因引起的鸡腺胃综合征,主要以鸡的生长缓慢或阻滞、腺胃肿大充血、腺胃乳头出血、溃疡甚至糜烂为特征的传染性疾病。鸡传染性腺胃炎的病原较复杂,可能主要有禽网状内皮组织增殖病病毒、冠状病毒、鸡痘病毒及霉菌毒素等构成。一般认为该病的发生由病毒、霉菌及细菌等多种因素协同作用。由于病因尚无定论,加之该病防制困难,给养禽业造成了重大的经济损失。文章就鸡传染性腺胃炎几个主要的发病原因进行分析和叙述。

为验证慢呼宁口服液对鸡慢性呼吸道病的治疗效果,将21日龄三黄肉鸡按常规方法随机分为6组,每组30只,分别为:慢呼宁口服液高、中(相当于推荐剂量)、低剂量组及镇喘散对照组、感染对照(感染不给药)组、健康对照组,除健康对照组外其余各组鸡均进行鸡毒支原体的人工感染。各药物治疗组连续给药7 d,停药后继续观察14 d,分别对其临床疗效、平均增重与病理变化等进行观察与评价。结果显示慢呼宁口服液高、中剂量组对感染鸡有明显的疗效,能明显降低血清抗体反应阳性率,气囊损伤减少率达90%以上,试验鸡的鸡毒支原体抗体阳性检出率为10%、20%,平均增重分别为596.1和661.3 g。而镇喘散对照组在气囊损伤减少率(82.5%)和平均增重方面较慢呼宁口服液中、高剂量组小,而鸡毒支原体抗体阳性检出率(30%)则较高。结果表明,慢呼宁口服液对鸡慢性呼吸道病有较好的防制效果,其作用优于镇喘散。

本试验旨在对中国自主研发的LDT3-A株鸡传染性支气管炎冻干苗(简称LDT3-A株传支冻干苗)在蛋种鸡中的应用效果进行观察比较。试验组和对照组初免分别使用LDT3-A株传支冻干苗和Ma5+clone30二联冻干苗免疫,在初免后均按照鸡场原定的免疫程序实施其他传支活毒疫苗(如H120、H52)和灭活疫苗免疫,初免后2组所用疫苗完全一致。试验结果显示,LDT3-A株传支冻干苗在父母代蛋种鸡3日龄时1.2倍量滴鼻免疫,免疫后应激反应较小;2组在随后实施相同的其他传支活毒疫苗和灭活疫苗加强免疫的基础上,试验组鸡群得到了有效保护,而对照组鸡群发生了传染性支气管炎疫情。试验期内试验组鸡群总死亡率较对照组降低10.11%;151~210日龄段的平均产蛋率提高了7.0%,种蛋合格率、受精率、出雏率和健雏率分别提高3.0%、2.3%、0.7%和3.2%,料蛋比降低了0.1。研究结果为蛋种鸡场优化筛选鸡传染性支气管炎免疫用疫苗和免疫程序,以及提高其免疫预防效果提供了临床依据。

本研究采用分批培养及分批补料培养方式进行副猪嗜血杆菌的发酵培养,以提高其菌体生物量。本试验首先分析了副猪嗜血杆菌分批培养的发酵过程,然后采用分批培养、恒速流加分批发酵、pH反馈流加分批发酵3种培养方式进行副猪嗜血杆菌发酵培养。结果显示利用恒速流加分批发酵方式进行副猪嗜血杆菌发酵时活菌数最高,为1.6×10¹⁰ CFU/mL,表明采用分批补料培养方式可明显地提高副猪嗜血杆菌的活菌数,且为分批培养的3~4倍。

小反刍兽疫病毒(PPRV)是副黏病毒科(Paramyxoviridae)麻疹病毒属(Morbolivirus)的成员,主要感染山羊、绵羊等小反刍动物,引起一种高度接触性病毒性传染病。小反刍兽疫为一种重大的外来性疾病,2007年在中国西藏自治区日土县首次发生。自2013年末以来中国新疆、青海、甘肃、宁夏、内蒙、湖南、辽宁等地频繁暴发小反兽疫疫情,给中国的畜牧业带来了巨大的损失,引起极大的重视。为更好的分析小反刍兽疫的病原特性及采取有效的防控措施,文章对小反刍兽疫的病原学及疫苗研究进展进行论述。

为查明甘肃省甘南玛曲县牦牛衣原体感染情况并分析影响其感染的因素,试验采用间接血凝试验(IHA)方法检测了该地区的610份牦牛血清,并应用流行病学、统计学方法对影响牦牛衣原体的因素进行了分析。结果表明,牦牛衣原体抗体阳性率为25.08%,季节、性别和年龄对牦牛衣原体感染的影响具有显著差异(P<0.05),胎次对母牦牛衣原体感染的影响差异显著(P<0.05)。由此可知,甘肃省甘南玛曲地区牦牛衣原体感染率较高,因此应对本地区的衣原体病采取适当的控制措施,以确保人类的安全。

本研究使用盐酸克伦特罗荧光定量检测试剂盒,基于免疫荧光层析原理,实现对猪尿中所含克伦特罗的定量检测,并对试纸条的灵敏度、准确度与精密度、特异性、稳定性等进行了初步的性能评价。结果表明,以四参数法对定量曲线进行拟合,线性系数为R²=0.99972;检测限达到0.1 μg/L;对3个不同浓度的添加回收试验,测得其回收率为80%~120%;批内变异系数分别为12.2%、11.1%、15.2%;与4种β-肾上腺素受体激动剂和8种常用的抗生素交叉反应率均低于0.01%;同时验证了本试剂盒在1年的保存期限有效。整个检测过程只需15 min。

本试验对111只山西省地方绵羊品种晋中绵羊的毛绒样品开展了细度、长度、强力、色度、光泽度、净毛率、油脂率、毛绒纤维类型等参数检测,旨在分析晋中绵羊毛绒品质和利用价值。结果表明,晋中绵羊羊毛平均净毛率为80.30%;通过纤维类型检测结果发现晋中绵羊含有绒纤维,平均绒含量为46.91%;晋中绵羊肩部的绵羊绒细度主体范围在19.01~23.00 μm之间,细度在19.00 μm以下的占18.02%,说明晋中绵羊整体细度较细;长度主体范围在20~60 mm之间,占样本总数的80.19%,长度范围较宽,长度分布较分散,个体差异较大。本试验发现了晋中绵羊能够生产绵羊绒,而且其中一部分纺织加工价值显著高于山羊绒和细羊毛。