为探究肌生长抑制素（myostatin，MSTN）基因对牛肌肉发育的具体调控机制，本研究选取同一牛场健康鲁西黄牛10头，其中通过转基因技术得到的基因编辑牛MSTN^-/-和同种非转基因野生型牛各5头。分别采集两组牛腿臀肌肉样品，利用IIlumina HiSeq高通量测序技术进行转录组测序分析，通过生物信息学方法比较两组样本间的差异表达基因，并进行GO和KEGG富集分析，最后利用实时荧光定量PCR验证转录组测序数据。结果显示，基因编辑型牛和野生型牛之间共检测到18 071个基因。在log₂|FoldChange|≥ 1.48条件下，筛选出406个差异表达基因，其中347个显著上调，59个显著下调。GO功能富集分析显示，MSTN基因编辑后显著影响915个功能类别（P<0.05），差异基因主要参与结合、生物系统调节、免疫系统等相关功能。KEGG通路富集分析结果共涉及211个通路，差异基因主要富集在细胞黏附分子、趋化因子信号通路、细胞因子互作等信号通路上，进一步从中筛选出可能参与细胞生长、肌肉发育的差异基因（CD14、KIT、CSF1R、FBP1、DUSP4、ULBP21、PRKCB、SPN、CHAD、SRC）。实时荧光定量PCR检测结果显示，所选差异基因表达水平与转录组表达水平一致，证明测序结果的可靠性。本研究结果表明，MSTN基因发挥作用后可以介导多个下游基因表达，从而影响相关信号通路及生物学过程；同时，所筛选出的差异表达基因可作为进一步研究骨骼肌调控机制的候选靶标。

试验旨在采用CRISPR/Cas9技术获得猪氨基肽酶N（porcine aminopeptidase N，pAPN）基因敲除的猪回肠上皮（immortal pig intestinal-2I，IPI-2I）细胞系，进而在细胞水平上研究pAPN在冠状病毒入侵过程中的作用及相互作用机制。本研究将已构建好的靶向pAPN基因第2外显子上的2个sgRNA载体（pX330-GFP-g3和pX330-RFP-g5）共转染IPI-2I细胞。转染48 h后，荧光显微镜下观察IPI-2I细胞绿色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP）和红色荧光蛋白（red fluorescent protein，RFP）的发光情况，并用流式细胞仪收集带有GFP和RFP荧光标记的细胞，用来筛选单克隆细胞。然后取少量单克隆细胞提取DNA，用PCR扩增打靶区域附近的序列，测序鉴定其基因型，以获得pAPN基因敲除的IPI-2I细胞株。选择野生型和pAPN基因纯合片段敲除的IPI-2I细胞，提取细胞总蛋白，通过Western blotting检测pAPN基因敲除前后IPI-2I细胞中pAPN蛋白的表达。结果表明，转染48 h后，通过荧光显微镜可以观察到IPI-2I细胞中大部分细胞能够同时表达GFP和RFP，说明pX330-GFP-g3和pX330-RFP-g5质粒载体已经转入IPI-2I细胞。PCR和测序结果表明，共获得48株片段敲除单克隆细胞（片段敲除效率为15.5%），其中16株为单等位基因敲除，32株为双等位基因敲除；在32株双等位基因敲除细胞中，有23株细胞为纯合片段敲除。Western blotting结果表明，pAPN基因纯合片段敲除的细胞中检测不到pAPN蛋白的表达。综上，本研究利用CRISPR/Cas9编辑系统成功构建了pAPN基因纯合敲除的IPI-2I细胞系，为阐明pAPN在冠状病毒入侵过程中的作用机制以及制备猪抗病新品种奠定了基础。

研究旨在获得西农萨能奶山羊长链脂酰CoA合成酶6（long-chain acyl-CoA synthetase 6，ACSL6）基因CDS序列，初步探究其对奶山羊乳腺上皮细胞脂质代谢的影响。以西农萨能奶山羊原代乳腺上皮细胞为试验材料，对ACSL6基因进行扩增和克隆，并利用实时荧光定量PCR方法对ACSL6基因进行组织表达分析，针对ACSL6基因的碱基序列利用在线软件进行生物信息学分析，采用RNA干扰技术改变奶山羊乳腺上皮细胞中ACSL6基因mRNA的表达水平。结果显示，ACSL6基因CDS区全长为2 169 bp，编码722个氨基酸；生物信息学分析表明ACSL6蛋白为碱性不稳定蛋白。组织表达分析显示，ACSL6基因在奶山羊乳腺组织中高度表达，其次为脾脏。将设计合成的siRNA转染乳腺上皮细胞，发现干扰ACSL6基因的表达使脂质代谢相关基因乙酰辅酶A羧化酶（acetyl CoA carboxylase，ACC）、硬脂酰辅酶A去饱和酶1（stearyl-CoA dehydrogenase 1，SCD1）、脂肪酸转运蛋白36（cluster of differentiation 36，CD36）、固醇调节元件结合蛋白1（sterol regulatory element binding proteins 1，SREBP1）的mRNA表达水平极显著下调（P<0.01）。本研究结果为从蛋白及个体水平上研究ACSL6基因对奶山羊乳腺脂质代谢的影响提供理论依据。

本研究旨在对广西巴马小型猪骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic proteins 2，BMP2）基因进行克隆及其结构和功能的预测，并检测其在广西巴马小型猪和长白猪中的表达差异。以广西巴马小型猪基因组DNA为模板，通过测序鉴定BMP2基因外显子区的单核苷酸多态性（SNPs），利用多种生物信息学软件对广西巴马小型猪BMP2基因启动子区、编码区（CDS）、3'UTR区进行了分析，预测分析广西巴马小型猪BMP2基因编码蛋白的基本理化性质、磷酸化位点、O-糖基化位点、跨膜区域、亲疏水性、蛋白质修饰结构、二级结构和三级结构等，并对miRNA结合位点及其相关通路进行分析，绘制了广西巴马小型猪和长白猪的组织表达谱。结果显示，试验成功克隆了广西巴马小型猪BMP2基因CDS区，总共1 188 bp，编码395个氨基酸；与猪参考基因组相比，广西巴马小型猪BMP2基因在G1663A、G1897C发生了同义突变，在C1896T（Pro→Leu）、T1971C（Gly→Ser）、G2000A（Leu→Ser）发生了3处错义突变；在3'UTR区域存在miR-142-5p、miR-129-5p等共13个miRNA结合区域；相似性比对结果显示，广西巴马小型猪与野猪、黄牛、水牛、山羊、绵羊、马、澳洲野犬、家犬、猕猴对应区段的相似性依次为99.92%、91.75%、91.84%、91.92%、91.92%、90.50%、89.43%、90.91%和90.91%；系统进化树结果表明，广西巴马小型猪与野猪的亲缘关系最近，与黄牛的亲缘关系相对较近，与猕猴亲缘关系较远；BMP2蛋白分子质量为44.55 ku，理论等电点为8.37，预测其有12个O-糖基化位点，42个磷酸化位点；预测分析发现该蛋白为亲水性蛋白，且是膜外蛋白。组织表达谱发现，广西巴马小型猪生长板软骨中BMP2基因表达量显著低于长白猪（P<0.05）。该研究为进一步探索广西巴马小型猪中BMP2基因的功能提供了理论基础，也为广西巴马小型猪品种资源的利用提供了重要参考。

为深入研究Ras同源基因家族成员A（Ras homolog gene family，member A，Rhoa）和环氧合酶2（cyclooxygenase 2，Ptgs2）分子在布鲁菌逃逸机体免疫中发挥的作用，试验对RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因进行扩增与克隆，构建真核表达载体并预测生物信息学功能。根据GenBank数据库中公布的RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因CDS区序列（登录号：JN971019.1和NM_011198）设计引物，提取RAW264.7细胞总RNA并反转录为cDNA，经RT-PCR扩增Rhoa和Ptgs2片段并测序，将纯化的Rhoa和Ptgs2片段分别与线性化pcDNA3.1质粒相连接，对重组质粒进行测序分析和双酶切鉴定后，利用Lipofectamine^TM 2000转染293T细胞，经实时荧光定量PCR和Western blotting验证Rhoa和Ptgs2基因的表达情况，并应用生物信息学软件对Rhoa和Ptgs2基因进行预测分析。结果显示，试验成功构建了RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因的真核表达质粒；实时荧光定量PCR检测均在转录水平上表达；Western blotting可见Ptgs2蛋白在70 ku处有一明显条带，而Rhoa蛋白未出现条带。生物信息学预测显示，Rhoa和Ptgs2基因核苷酸序列相似性较高，在不同物种之间较为保守；Rhoa不具有信号肽，为不稳定蛋白，而Ptgs2在第17-18位氨基酸处存在信号肽，为稳定蛋白；Rhoa和Ptgs2蛋白分别有12和53个潜在的磷酸化位点；二级结构、三级结构均以无规则卷曲为主。本研究成功构建了RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因的真核表达载体，均在转录水平上表达，并分析了其生物学功能，为后续开展RAW264.7细胞Rhoa和Ptgs2基因在布鲁菌免疫机制方面的研究提供了工具。

为探究卵黄蛋白原-32（ovocalyxin-32，OCX-32）基因过表达与鸡子宫上皮细胞Ca²⁺含量和脂质指标之间的关联性，本研究采用Ⅳ型胶原酶法分离培养长顺绿壳蛋鸡子宫上皮细胞，构建pcDNA3.1（+）+OCX-32+Flag表达载体并转染子宫上皮细胞，测定OCX-32基因过表达量、Ca²⁺浓度和脂质指标并进行相关性分析。结果显示，试验组的总胆固醇（TCHO）浓度显著高于对照组（P<0.05），对照组的Ca²⁺浓度显著高于试验组（P<0.05）。OCX-32基因过表达量与Ca²⁺浓度呈显著负相关关系（P<0.05），与甘油三酯（TG）浓度呈显著正相关关系（P<0.05），与TCHO浓度呈极显著负相关关系（P<0.01），TCHO浓度与TG浓度呈极显著负相关关系（P<0.01），研究结果揭示了OCX-32基因过表达能够调控鸡子宫上皮细胞的Ca²⁺含量和脂质的合成转运，为深入阐释鸡子宫上皮细胞中脂质和钙分泌的调控机制提供试验基础和数据支持。

为探究miR-150在绵羊卵巢中的调控机制，本研究利用生物信息学方法对miR-150进行靶基因预测与分析。通过miRBase数据库获取miR-150成熟序列，进行序列比对和保守性分析；利用Ensemble数据库搜索miR-150前体序列，并利用PROMO在线软件对其上游2 000 bp的启动子区进行转录因子结合位点预测；通过TargetScan和miRwalk在线软件预测并取靶基因的交集，采用DAVID和KOBAS在线软件对预测靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析；利用Networkanalyst在线软件对靶基因进行功能性蛋白的互作分析，绘制miR-150靶基因参与的调控网络；利用YM500V2在线软件分析miR-150靶基因在不同组织和疾病中的差异表达水平。结果显示，miR-150成熟序列在不同物种间具有高度保守性；miR-150启动子区存在p53、ID1、FOXO4等转录因子结合位点。GO功能分析结果显示，主要富集在RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控等生物过程，锌离子结合、DNA结合、转录DNA模板等分子功能，以及核、核质、胞质、胞质核周区域等细胞组分。KEGG通路富集结果显示，主要富集在癌症通路、癌症中蛋白聚糖、人乳头瘤病毒感染、乳腺癌、调节干细胞多能性等信号通路。miR-150靶基因互作分析发现，靶基因PIK3R1、PIK3CB、CTNNB1与其他蛋白存在较多靶向关系，参与了雌激素信号通路、细胞衰老、磷脂酰肌醇信号系统、TGF-β等通路。根据YM500V2在线软件分析miR-150在不同组织和疾病中的表达发现，在血液中表达水平最高，在卵巢、胰腺、淋巴和皮肤中表达水平相对较高，在脑和肾上腺皮质中表达水平很低或不表达。通过对绵羊miR-150靶基因的生物信息学分析，为其功能和调控机制研究提供参考依据，为绵羊miR-150在卵巢发育中的调控机制奠定基础。

研究旨在对努比亚山羊脂肪和肥胖相关蛋白（fat mass and obesityassociated protein，FTO）基因进行克隆和分析，并构建其真核表达载体。取努比亚山羊背最长肌组织作为试验材料，采用RT-PCR扩增出FTO基因的编码区，测序鉴定后对得到的序列用相应的分析软件进行生物信息学分析，然后将FTO基因片段与pMD19-T载体连接后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，构建pMD19-T-FTO载体，测序正确的重组质粒双酶切后，连接pEGFP-N1载体构建pEGFP-N1-FTO真核表达载体，然后转染3T3-L1细胞，培养48 h后，在荧光显微镜下观察细胞表达荧光的情况。结果表明，试验成功克隆了努比亚山羊FTO基因的编码区，序列长度为1 518 bp，编码505个氨基酸，分子质量为57 142.24 u。努比亚山羊FTO基因编码区序列与NCBI上公布的山羊、牛、绵羊、猪、原鸡、小鼠的相似性分别为98.7%、96.4%、98.3%、87.2%、64.3%、81.7%，该基因系统进化树分析显示，努比亚山羊与山羊遗传距离最近，与原鸡遗传距离最远，在不同物种中具有高度保守性。努比亚山羊FTO蛋白二级和三级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。构建的真核表达载体pEGFP-N1-FTO转染3T3-L1细胞48 h后，在显微镜下观察到绿色荧光的表达，说明FTO基因真核表达载体构建成功。本试验构建努比亚山羊FTO基因真核表达载体，其在3T3-L1细胞中成功表达，为以后研究FTO基因与山羊脂肪代谢的相关性奠定基础。

1，25（OH）₂D₃是维生素D的主要活性形式，影响人和动物脂肪形成，为探究其在猪脂肪细胞增殖分化中的作用，试验从3~5日龄仔猪皮下脂肪组织分离培养前体脂肪细胞，并以浓度为0、0.1、1、10、100和1 000 nmol/L的1，25（OH）₂D₃分别处理，在培养的0、1、2、4、6、8和10 d采用MTT比色法检测细胞增殖活性；在诱导分化后0、1、2、4、6、8和10 d，以油红O染色提取法和实时荧光定量PCR检测细胞成脂分化及分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）和脂肪酸合成酶（FAS）表达。结果显示，0.1和1 nmol/L 1，25（OH）₂D₃显著促进猪前体脂肪细胞增殖（P<0.05），而浓度为10~100 nmol/L时则抑制细胞增殖（P<0.05）；0.1和1 nmol/L 1，25（OH）₂D₃显著抑制猪前体脂肪细胞分化（P<0.05），降低PPARγ和FAS mRNA表达水平（P<0.05），但在浓度为10和100 nmol/L时，显著促进猪前体脂肪细胞分化（P<0.05），上调PPARγ和FAS mRNA表达（P<0.05）；浓度达1 000 nmol/L时，可能对细胞有毒性作用。综合以上结果，低浓度1，25（OH）₂D₃促进猪前体脂肪细胞增殖，而通过下调PPARγ表达抑制分化；高浓度1，25（OH）₂D₃抑制猪前体脂肪细胞增殖，通过上调PPARγ表达促进分化。1，25（OH）₂D₃对猪前体脂肪细胞增殖和分化具有双向作用。

试验旨在探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferators-activated receptors，PPARγ）激动因子（环格列酮）和胰岛素对延边黄牛前脂肪细胞脂质代谢的影响及可能的调控机制。试验分为对照组（CON，5% FBS）、胰岛素处理组（I组，5% FBS+10 mg/L胰岛素）、环格列酮处理组（C组，5% FBS+10 mg/L环格列酮）、胰岛素+环格列酮处理组（IC组，5% FBS+10 mg/L胰岛素+10 mg/L环格列酮）。各组处理144 h，通过RNA-Seq技术对其进行转录本测序，差异表达基因进行GO功能注释和KEGG富集分析。差异表达基因分析结果显示，与对照组相比，IC组差异表达基因数量为1 764个，比I和C组分别多276和569个，3个试验组间共有371个差异基因；IC组上调基因数量为974个，分别比I和C组多140和249个，IC组下调基因为790个，I和C组下调基因分别为654和470个。差异基因的GO分析表明，各处理组的差异基因参与了细胞过程、代谢过程以及生物过程的调节；在分子功能上，主要是分子功能调节剂、转运活性、转录调节活性等；在细胞成分上，大多数差异基因被富集到细胞器、细胞膜及胞外区等。KEGG通路分析发现，差异表达基因主要富集在FoxO、PPAR、TGF-β、p53等信号通路。综上所述，胰岛素和环格列酮单独处理与二者共同处理对延边黄牛前脂肪细胞分化的调控机制有所差别，其中二者共同处理对分化的促进作用更加明显。本研究结果为研究环格列酮与胰岛素在调节脂肪生成中的功能和分子机制提供了依据。

试验通过研究不同生长速度阿勒泰羊主要血液生化指标含量和尾脂中瘦素（Leptin）基因的表达水平，探讨阿勒泰羊生长速度与脂肪沉积之间的关系。选取300只出生时间相近的阿勒泰羊公羔，正常饲喂至6月龄，记录日增重，取平均日增重排前10%和后10%的公羔各30只，分为生长快速组（HBW）和生长慢速组（LBW），从生长快速组随机选12只分为抑制生长组（饲喂低能量饲粮以抑制其生长，HBW-75%，n=6）和生长快速对照组（饲喂标准饲粮，HBW-100%，n=6），生长慢速组随机选12只分为促进生长组（饲喂高能量饲粮以促进生长，LBW-125%，n=6）和生长慢速对照组（饲喂标准饲粮，LBW-100%，n=6）；预饲期7 d，正饲期30 d，试验结束后称重并采集血液，屠宰后采集尾部脂肪。检测血液TG、CK、TSH、T3、T4、S.S、GH、INS、PG、Leptin含量或活性及尾部脂肪Leptin mRNA和蛋白表达量，并观察尾部脂肪细胞形态学变化。结果显示，HBW-100%和LBW-100%组初体重与末体重均差异显著（P<0.05），HBW-75%和HBW-100%组初体重与末体重均无显著差异（P>0.05）；LBW-100%和LBW-125%组初体重差异显著（P<0.05），末体重无显著差异（P>0.05）。LBW-100%组的T4、S.S、Leptin、TSH、T3含量显著低于HBW-100%组（P<0.05）；LBW-125%组T3含量显著高于LBW-100%组（P<0.05）；HBW-75%组GH、PG和Leptin含量显著低于HBW-100%组（P<0.05）。LBW-125%组尾部脂肪细胞面积大于LBW-100%组，HBW-75%组小于HBW-100%组（P<0.05）。Leptin mRNA和蛋白表达量检测结果表明，HBW-100%组的Leptin mRNA表达量与LBW-100%组无显著差异（P>0.05），Leptin蛋白表达量极显著高于LBW-100%组（P<0.01）。LBW-125%组Leptin mRNA和蛋白的表达量均显著高于LBW-100%组（P<0.05）。HBW-75%组Leptin mRNA的表达量极显著低于HBW-100%组（P<0.01），Leptin蛋白表达量显著低于HBW-100%组（P<0.05）。综上所述，生长快速组与生长慢速组中，Leptin的表达量与体重和体脂有一定关联；在生长慢速组促进生长后体重和体脂显著增加，Leptin的表达量呈上升趋势；在生长快速组抑制生长后体重和体脂减少，Leptin的表达呈下降趋势。改变生长速度对Leptin的表达量会产生影响，从而改变机体的脂肪沉积状况。

试验旨在探究妊娠后期饲粮中添加β-胡萝卜素对母猪初乳、常乳成分及肠道菌群的影响，并揭示肠道菌群与乳成分之间的相关性。选取胎次相近的妊娠后期二元杂交母猪48头，随机分为3组，每组16个重复，分别饲喂添加0、30和90 mg/kg β-胡萝卜素的饲粮，试验从妊娠第90天开始到分娩后第14天结束。分娩当天采集母猪初乳和粪便样品，哺乳第14天采集母猪常乳样品。对初乳中免疫球蛋白（Ig）水平以及常乳中乳成分进行测定，粪便样品通过16S rRNA测序技术进行分析。结果显示：与对照组相比，饲粮添加β-胡萝卜素有提高母猪初乳中IgM的趋势（P=0.173），降低IgG的趋势（P=0.155）；添加30 mg/kg β-胡萝卜素显著提高了常乳中乳蛋白和尿素氮含量（P<0.05），同时降低了乳糖含量（P<0.05），而添加90 mg/kg β-胡萝卜素降低了常乳中总固体含量（P<0.05）。对粪便菌群进行分析发现，β-胡萝卜素上调了Eubacterium brachy group、Ruminococcaceae UCG009、Ruminococcaceae UCG014等菌群的丰度，下调了Candidatus Soleaferrea、Coprococcus 3、Lachnospiraceae NK4B4 group等菌群的丰度。相关性分析表明，Coprococcus 3与初乳中IgM水平呈显著负相关（P<0.05），Fibrobacter与初乳中IgG、IgM水平呈显著正相关（P<0.05）；Lachnospiraceae NK4B4与常乳中乳蛋白和总固体含量呈显著正相关（P<0.05）；Ruminococcaceae UCG009与初乳中IgG水平呈显著负相关（P<0.05）。以上结果表明，β-胡萝卜素可通过调节肠道菌群影响母猪初乳及常乳的成分组成。

试验旨在研究饲粮中两种全株玉米青贮比例及额外补充碳酸氢钠对疆岳驴生长性能、营养物质表观消化率、血清生化指标及经济效益的影响。选取体况良好的6~8月龄疆岳驴断奶公驴40头（106.02 kg±11.81 kg），随机分为5组：全株玉米青贮占粗饲料的比例分别为0（Ⅰ组）、30%（Ⅱ组）、60%（Ⅲ组）及额外补充碳酸氢钠的Ⅳ组（全株玉米青贮占粗饲料30%+碳酸氢钠）和Ⅴ组（全株玉米青贮占粗饲料60%+碳酸氢钠），碳酸氢钠正常添加量按照精料干物质的0.5%计算，额外添加量按照精料干物质的0.5%+全株玉米青贮干物质的1%计算，每组8头驴，按照等能等氮原则设计饲粮。预饲期12 d，正试期120 d。结果显示，随着全株玉米青贮添加量的增加，试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组料重比逐渐下降，其中试验Ⅲ组显著低于试验Ⅰ、Ⅱ组（P<0.05）；试验Ⅲ组粗脂肪、中性洗涤纤维、粗灰分的表观消化率最高，显著高于试验Ⅱ组（P<0.05），总蛋白、肌酐含量和碱性磷酸酶活性均显著高于试验Ⅰ组（P<0.05），试验Ⅲ组葡萄糖含量极显著低于试验Ⅰ组（P<0.01），试验Ⅲ组总胆固醇含量显著低于试验Ⅰ、Ⅱ组（P<0.05）。与同等比例添加全珠玉米青贮的组相比，试验Ⅱ组平均日增重显著高于试验Ⅳ组（P<0.05），试验Ⅲ组平均日增重高于试验Ⅴ组（P>0.05）；试验Ⅲ组料重比显著低于试验Ⅴ组（P<0.05），试验Ⅱ组料重比低于试验Ⅳ组（P>0.05）；试验Ⅱ、Ⅳ组间粗蛋白质、粗脂肪、能量和粗灰分的表观消化率差异均不显著（P>0.05）；试验Ⅲ、Ⅴ组营养物质的表观消化率差异均不显著（P>0.05）；试验Ⅳ组总胆固醇含量及谷丙转氨酶活力均显著高于试验Ⅱ组（P<0.05）。试验Ⅰ~Ⅴ组疆岳驴每千克增重成本分别为16.40、15.10、14.79、17.34和16.10元，整个试验期每头驴毛利润分别为711.27、837.53、871.98、629.46和738.16元。综上，在本试验条件下，以生长性能、营养物质表观消化率及血清生化指标为评价依据，综合经济效益比较，以在基础饲粮（以DM为基础）中添加0.28%碳酸氢钠时、全贮玉米青贮占粗饲料60%（在基础饲粮DM中添加26.67%）饲喂疆岳驴公驴效果最优，无需额外补充碳酸氢钠。

暗斑蛋是近年来鸡蛋生产中关注的热点。为探究鸡蛋暗斑变化规律及其对蛋品质的影响，本研究选取日龄和饲养环境相同的济宁百日鸡和汶上芦花鸡各500只，收集两个品种的鸡蛋各60枚，记录鸡蛋在产后0、1、2、3、4、12、24 h及3、5、7 d时暗斑的变化情况，计算暗斑率；收集两个品种的新产鸡蛋各200枚，放置3 d后，选取每个品种正常蛋和四级暗斑蛋各30枚，进行蛋品质检测。结果显示，汶上芦花鸡的暗斑率低于济宁百日鸡。鸡蛋产出2 h开始出现暗斑，4~12 h为暗斑高发期，12 h~3 d为暗斑加重期，3~7 d正常蛋不再向暗斑蛋转变，但低等级暗斑蛋会向高等级暗斑蛋转变。两个品种的暗斑蛋和正常蛋的蛋壳厚度、蛋壳比例、蛋黄颜色、哈式单位差异均不显著（P>0.05）。济宁百日鸡正常蛋的蛋白高度显著高于暗斑蛋（P<0.05），汶上芦花鸡暗斑蛋和正常蛋的蛋白高度差异不显著（P>0.05）。综上所述，时间是影响暗斑蛋产生的重要因素，不同品种鸡蛋的暗斑产生率不同，且暗斑对蛋品质有一定影响。

为了研究虫草粉（古尼虫草地顶孢霉培养物）联合酵母硒对蛋鸡产蛋性能、蛋品质、抗氧化功能和免疫功能的影响，试验选用450羽24周龄海兰褐壳蛋鸡，随机分为5组，每组6个重复，每个重复15羽。对照组饲喂基础饲粮，试验Ⅰ~Ⅳ组饲喂添加0.1 mg/kg酵母硒联合不同剂量虫草粉（0、0.2%、0.3%和0.4%）的基础饲粮，试验期27周；选取产蛋高峰中期（第40周龄）蛋鸡进行产蛋性能、鸡蛋品质、免疫功能和抗氧化功能分析。结果显示，与对照组相比，产蛋高峰中期试验Ⅲ组蛋鸡的产蛋率、平均蛋重均显著提高，料蛋比显著降低（P<0.05）；鸡蛋哈夫单位、蛋壳颜色、蛋壳强度、蛋黄颜色、蛋清粗蛋白质含量、蛋黄粗蛋白质和粗脂肪含量均显著升高（P<0.05），蛋清中必需氨基酸Leu、Lys、Met、Trp、Phe、Thr、Val和His及非必需氨基酸Ala、Asp、Glu、Pro和Tyr水平也显著增加（P<0.05）；试验Ⅳ组蛋鸡的蛋壳颜色、蛋壳强度、哈夫单位和蛋清粗蛋白质含量均显著提高（P<0.05），蛋清中必需氨基酸Ile、Gly、Arg和非必需氨基酸Cys、Ser水平均显著增加（P<0.05）；试验Ⅰ~Ⅳ组蛋鸡蛋黄、蛋清中硒含量均显著增加（P<0.05）。同时，与对照组相比，产蛋高峰中期试验Ⅲ组蛋鸡血清MDA含量显著下降（P<0.05），WBC数量、血清IFN-γ和IL-2水平及T-AOC和T-SOD活性均显著升高（P<0.05）。结果表明，饲粮中联合添加酵母硒和适量的虫草粉能明显提高产蛋高峰中期蛋鸡的产蛋性能和鸡蛋品质，增强机体免疫力和抗氧化能力，以0.1 mg/kg酵母硒联合添加0.3%虫草粉的效果最佳。

本研究对比分析了饲粮中添加纳米铜、灵芝孢子粉与大豆异黄酮对育雏阶段清远麻鸡生长性能、免疫功能及抗氧化性能的影响，旨在为肉鸡生产中添加剂的开发及应用提供参考。采用单因素随机分组设计，选用1 200只1日龄清远麻鸡母鸡分成4组，对照组（CON）饲喂基础饲粮，3个处理组（NC、GLS及SI）分别在基础饲粮中添加2 500 mg/kg纳米铜、600 mg/kg灵芝孢子粉和300 mg/kg大豆异黄酮预混剂。每个处理10个重复，每个重复30只鸡，试验期30天。试验结束后，采集试验鸡血浆、空肠黏膜样品，测定血液抗氧化相关生化指标及肠道免疫因子。结果表明：与对照组相比，①饲粮添加纳米铜、灵芝孢子粉与大豆异黄酮对清远麻鸡肉仔鸡的生长性能均无显著影响（P>0.05）。②灵芝孢子粉显著提高了30日龄清远麻鸡的胸腺比例（P<0.05）。③纳米铜显著提高了清远麻鸡的空肠绒毛隐窝比（P<0.05）。④纳米铜、灵芝孢子粉与大豆异黄酮均显著增加了清远麻鸡血浆和空肠中总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性（P<0.05）；纳米铜显著增加了血浆谷胱甘肽过氧化氢酶（GSH-Px）活性（P<0.05）、降低了空肠黏膜丙二醛（MDA）含量（P<0.05）；大豆异黄酮显著降低血浆与空肠MDA含量（P<0.05）。⑤纳米铜组清远麻鸡空肠中免疫球蛋白A（IgA）含量显著增加（P<0.05），灵芝孢子粉组清远麻鸡血浆中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、空肠中干扰素-γ（IFN-γ）含量显著降低（P<0.05）。在本试验条件下，纳米铜、灵芝孢子粉与大豆异黄酮对清远麻鸡肉仔鸡生长性能没有显著影响，但均可改善抗氧化性能指标；纳米铜可提高空肠绒毛隐窝比，纳米铜与灵芝孢子粉可调节免疫因子分泌。其中纳米铜对抗氧化性能的调节作用最优，灵芝孢子粉对免疫功能调节作用最优。

蛋白质是动物饲粮的第二大成分，然而中国饲料蛋白质原料资源日益短缺，严重制约了畜牧业的健康可持续发展。黄粉虫（Tenebrio molitor L.）食性广、繁殖快、产出高，属于可再生的生物资源，其干物质中粗蛋白质、甲壳素、不饱和脂肪酸、维生素等含量较丰富，能够提取具有抗菌、抑炎、免疫调节等功能的生物活性物质，如抗菌肽、凝集素，且具有生长快、易规模饲养、占用土地少等优点，有望成为一种新型蛋白质饲料资源，进而缓解当前饲料蛋白质原料不足的现状。有研究表明，黄粉虫可以部分替代饲粮中的常规蛋白质饲料原料，提高畜禽生长或生产性能，改善产品品质，以及提高畜禽机体健康水平。作者阐述了黄粉虫的营养成分、畜禽对黄粉虫营养物质的消化率，在参考国内外最新研究成果的基础上综述了黄粉虫部分替代常规蛋白质饲料原料，改善畜禽生长或生产性能，提高肉禽屠宰性能，改善家禽产品品质，调节畜禽机体物质代谢，增强机体免疫和抗氧化功能以及改善肠道健康的作用，并对其在畜禽生产中的应用前景进行展望，以期为推广黄粉虫在畜牧业中的应用提供参考。

本试验研究了高产蛋白酶酵母菌在不同条件下对发酵豆粕品质的影响。以蛋白酶活性为指标，对豆粕发酵的时间、含水量、菌液接种量和葡萄糖添加量进行优化，根据单因素试验结果设计正交试验，探究高产蛋白酶酵母菌发酵对豆粕中蛋白酶、纤维素酶、植酸酶、果胶酶活性和粗蛋白质、小分子多肽、胰蛋白酶抑制剂含量的影响。结果表明，单因素试验条件下，分别在含水量50%、菌液添加量4%、葡萄糖添加量1.5%时发酵豆粕具有最高的蛋白酶活性。以单因素试验结果设计正交试验，与对照组相比，9个试验组蛋白酶活性增长100.56%~380.13%、纤维素酶活性增长2.67%~81.77%、植酸酶活性增长53.89%~252.81%、果胶酶活性增长13.84%~70.83%、小分子多肽增长574.67%~1 981.08%、粗蛋白质含量增长9.24%~16.49%、胰蛋白抑制剂含量降低7.36%~67.39%。高产蛋白酶酵母菌发酵豆粕可以显著提升其营养价值，降低抗营养因子含量。使用高产蛋白酶酵母菌对豆粕进行发酵，若需要发酵豆粕中水解酶活性最高，发酵条件为葡萄糖1%、混合菌液2%，含水量45%，在室温下发酵5 d；需要粗蛋白质、多肽含量以及胰蛋白酶抑制剂降低率最高时，发酵条件为葡萄糖2%、混合菌液4%，含水量55%，在室温下发酵5 d。

乳酸（lactic acid）是奶牛瘤胃内重要的中间代谢产物，合理的调节乳酸代谢特征、充分利用及发挥乳酸的有益功能对奶牛健康生产具有重要意义。文章介绍了乳酸的合成途径及主要产酸菌、乳酸的代谢途径及主要利用菌、乳酸在奶牛瘤胃内的代谢方式及影响其代谢的因素，详细阐述了乳酸产生菌与利用菌对乳酸代谢调节的影响，同时介绍了植物提取物对乳酸代谢调节作用及乳酸代谢调节对奶牛胃肠道菌群、泌乳性能和乳房炎的影响。为进一步了解乳酸对奶牛健康的作用机制及相关植物活性物质在生产实践中的应用提供理论依据，为解决高精料饲粮引起的奶牛酸中毒的预防与治疗提供新思路。

试验旨在探究丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路中MAPK10、MEF2C基因结构变异的遗传多样性及其与香猪生长性状的关联性，以期为贵州香猪的育种改良提供理论依据。采用PCR技术对233头香猪2个结构变异（structure variation，SV）位点（MAPK10-I₈-sv273和MEF2C-I₁-sv71）进行群体基因变异研究，利用Origin软件绘制香猪的生长曲线，利用在线软件计算出多态信息含量（PIC）、杂合度（He）、纯合度（Ho）及有效等位基因数（Ne），并利用SPSS 26.0软件分析基因分型结果与香猪生长性状的关联性。结果显示，2个结构变异位点在香猪群体中存在多态性，均有3种基因型：DD、ID和II，2种等位基因：D和I。其中，MAPK10-I₈-sv273的D等位基因频率明显高于I等位基因，DD基因型频率最高（0.65），且DD基因型个体的平均日增重、体高和生长速度均大于II基因型个体，表明该位点D等位基因具有提高香猪生长性能的遗传效应；MEF2C-I₁-sv71的I等位基因频率高于D等位基因，II基因型频率最高（0.51），II基因型个体的平均日增重、胸围、总体生长速度均大于DD基因型个体，表明该位点的I等位基因可提高香猪的生长性能。综上，结构变异MAPK10-I₈-sv273和MEF2C-I₁-sv71与香猪的生长发育相关，可作为生长性状选育的候选分子标记。

试验旨在从分子水平上研究中国马鹿的父系起源结构和遗传多样性水平，判断各种群间的系统发育关系和亲缘关系远近。通过DNA提取、PCR扩增和直接测序的方法，对天山马鹿、阿尔泰马鹿、塔河马鹿、东北马鹿等11个群体共159头马鹿的SRY基因序列进行了检测和分析，计算碱基组成、核苷酸多样性（Pi）、单倍型多样性（Hd）以评估遗传多样性，构建单倍型网络图；以白唇鹿为外群，用邻接法（NJ）和最大似然法（ML）构建系统进化树，探讨马鹿的聚类及遗传多样性。结果显示，所获序列长度为1 615 bp，在基因中共鉴定出18个SNPs多态性位点，占核苷酸总数的1.11%，根据多态性位点鉴定出14个单倍型，优势单倍型为Hap-1，所占频率35.84%，为天山马鹿、阿尔泰马鹿、阿拉善马鹿、塔河马鹿、东北马鹿、甘肃马鹿、北美马鹿和高产鹿王种群的共有单倍型。其中，阿拉善马鹿、塔河马鹿、甘肃马鹿、川藏马鹿、北美马鹿和高产鹿王均具有独有单倍型。单倍型多样性介于0~0.857，核苷酸多样性介于0~0.00272，各亚种间遗传距离最大的是塔河马鹿与西藏马鹿（0.002406），最小的是阿拉善马鹿与青海马鹿（0.000124）。基于邻接法和最大似然法构建的系统进化树一致，显示11个野生马鹿种群间共存在3个分支，支系S1包含全部马鹿种群，塔河马鹿、甘肃马鹿、北美马鹿和高产鹿王构成支系S2，北美马鹿构成支系S3，单倍型最小网络图与系统进化树一致。表明各马鹿种群之间的遗传多样性存在差异，塔河马鹿、高产鹿王和甘肃马鹿分别存在2个父系类型，北美马鹿存在3个父系类型，其他马鹿种群只存在1个父系类型，Hap-1在单倍型组S1中处于核心位置，其他单倍型分散分布于其周围，推测Hap-1为马鹿种群中较为原始的单倍型。

为研究不同品种、采精月份、采精月龄和采精间隔等因素对加系公猪精液品质的影响，以及品种、初次采精周龄对精液质量稳定性的影响，本研究以江西某种公猪站79头加系大白猪、长白猪、杜洛克猪种公猪为试验群体，收集2018年12月至2020年12月3 921条精液采集与精液质量数据，通过混合线性模型与方差分析探究各因素对精液量、精液密度、精子活力、总精子数及其稳定性的影响。结果显示，从不同品种对精液质量的影响来看，长白猪精液量和总精子数均高于大白猪、杜洛克猪，但杜洛克猪精液密度高于长白猪、大白猪，杜洛克猪精子活力最低；从不同月份来看，1~3月采精精液密度最高，4~6月采精精子活力最高，10~12月采精精液量和总精子数最高，精液量呈现秋冬多、春夏少的季节变化规律。公猪不同月龄采精，精液质量指标也存在差异，月龄越小精液量越低，但精液密度偏高，精子活力相对较好，在19~24月龄黄金期总精子数最高。不同采精间隔对精液质量有较大影响，采精间隔越长，精液量、精液密度、精子活力和总精子数相对较好，采精间隔为5 d时综合性能最佳，但过长的采精间隔导致精子活力降低。品种影响总精子数稳定性，长白猪、大白猪总精子数稳定性显著优于杜洛克猪（P<0.05）。本研究结果表明，品种、采精月份、采精月龄和采精间隔均会影响公猪精液质量，关注这些因素有助于公猪站制定更完善的生产计划，提高公猪利用率。

研究旨在筛选最适合猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻的冷冻液，并探究玻璃化冷冻对猪MⅡ期卵母细胞DNA的影响。选取目前应用最多的7种冷冻液（分别为1、2、3、4、5、6、7组），将MⅡ期卵母细胞随机分为8组，其中对照组直接进行孤雌激活，其余7组分别进行7种冷冻液处理后不经液氮冷冻直接于解冻液中解冻，解冻后进行孤雌激活，通过卵裂率、囊胚率和囊胚细胞数的统计结果筛选出最适冷冻液；应用筛选的3种冷冻液，进行猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻，解冻后恢复2 h，统计卵母细胞形态正常率，孤雌激活44~48 h统计卵裂率；应用透射电子显微镜观察正常MⅡ期卵母细胞与玻璃化冷冻-复苏后的MⅡ期卵母细胞超微结构的变化；将猪MⅡ期卵母细胞随机分成对照组、冷冻液处理组和冷冻组，应用彗星电泳技术检测玻璃化冷冻对卵母细胞DNA的损伤。结果发现，与对照组相比，除5组卵裂率、1组囊胚率显著降低（P<0.05）外，其余各组卵裂率、囊胚率均差异不显著（P>0.05）；各组间囊胚细胞数均低于对照组，但差异均不显著（P>0.05），3、6、7组卵裂率和囊胚率较高；玻璃化冷冻-解冻后，7组卵母细胞的形态正常率、卵裂率均显著低于3、6组（P<0.05），6组卵裂率高于3组；MⅡ期卵母细胞移入预处理液中后可见明显的皱缩，移入冷冻液中迅速脱水，解冻后可见卵母细胞透明带断裂，胞质皱缩、分布不均；透射电子显微镜下，冷冻后猪MⅡ期卵母细胞透明带及细胞膜损伤，微绒毛严重损伤甚至消失，皮质颗粒排列在质膜下且数量减少，脂滴形态破坏、形成空泡，内质网与脂滴的联系损坏，线粒体肿胀、嵴不明显；彗星电泳发现，与对照组相比，冷冻液处理组头部DNA、尾部DNA和Olive尾矩值均差异不显著（P>0.05），有彗星拖尾现象；冷冻组头部DNA损伤、尾部DNA损伤与Olive尾矩值均显著高于冷冻液处理组和对照组（P<0.05），有明显彗星拖尾现象。结果表明，以二甲基亚砜（DMSO）和乙二醇（EG）为主要成分的冷冻液适于猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻；玻璃化冷冻对猪MⅡ期卵母细胞超微结构及其DNA存在一定损伤作用，其损伤机制有待进一步研究。

本试验旨在筛选绵羊高度多态性四碱基微卫星遗传标记，建立适用于绵羊亲子关系鉴定的实验体系。试验以小尾寒羊为主要研究对象，从已有的绵羊参考基因组序列出发，基于全基因组序列筛选法共筛选出53个（ATAG）_n四碱基重复微卫星位点，然后通过基因分型数据共筛选出30个扩增效果好、多态信息含量（PIC）丰富的四碱基重复微卫星位点；30个位点的基因分型结果表明，共扩增出253个等位基因，平均等位基因数为8.433，等位基因数均>5，多态信息含量在0.566~0.898，观测杂合度（Ho）范围在0.548~0.903，期望杂合度（He）范围在0.631~0.921，平均期望杂合度为0.776；哈代-温伯格平衡检验30个位点均处于遗传平衡状态。随后根据PCR的扩增效率从获得的30个多态性位点中筛选出22个微卫星位点用于亲权排除概率的计算，根据多态信息含量的大小由高到低依次增加位点数进行组合。结果表明，在两个亲本的基因型均未知的情况下，标记位点数为15个时，累积排除概率可达到99.99%，其中单个位点的第一非亲排除率（non-exclusion probability of the first parent，NE-1P）介于0.321~0.663之间。利用建立的亲子鉴定体系对16只具有系谱记录的小尾寒羊样本进行检测，结果共鉴定出4个具有高置信度的绵羊家系，鉴定结果与系谱记录完全一致。本试验为绵羊分子系谱的构建、亲子鉴定以及保障绵羊育种工作的正常开展奠定重要基础。

试验旨在研究精氨酸（Arg）对干扰素-tau（interferon-tau，IFNT）处理的牛子宫内膜上皮细胞的调控作用及其可能的机制。将牛子宫内膜上皮细胞接种至6孔细胞培养板中，当达到70%~80%融合度时，向细胞培养基中加入不同浓度的IFNT（0、100 ng/mL），12 h后收集细胞检测未折叠蛋白反应（unfolded protein response，UPR）通路相关基因的表达情况；用不同浓度（0、0.05、0.1、0.2、0.5、1、2 mmol/L）Arg处理牛子宫内膜上皮细胞，24 h后用CCK8法检测其对增殖率的影响，筛选出Arg的最佳作用浓度；将子宫内膜上皮细胞随机分为Arg饥饿组、Arg饥饿+IFNT处理组、Arg添加+IFNT处理组，在Arg饥饿或添加处理6 h后加入100 ng/mL IFNT，IFNT处理12 h后检测UPR通路（BiP、PERK、CHOP、ATF6）、凋亡（BAX、Caspase9）和容受性（HOXA10）相关基因表达情况。结果显示，IFNT刺激可诱导牛子宫内膜上皮细胞UPR通路相关基因BiP、PERK、CHOP、ATF6的表达显著上调；0.5 mmol/L Arg可显著提高牛子宫内膜上皮细胞的增殖率（P<0.05）；Arg缺失可显著上调IFNT诱导下牛子宫内膜上皮细胞中BiP、PERK、CHOP、ATF6和BAX基因mRNA的表达（P<0.05），并显著下调HOXA10基因mRNA的表达（P<0.05），但对Caspase9基因mRNA表达无显著影响（P>0.05）。结果表明，Arg缺失可导致牛子宫内膜上皮细胞发生内质网应激，并影响子宫内膜宫受性的建立，可为进一步揭示Arg对牛子宫内膜的调控机制及制定减少妊娠早期胚胎丢失的营养调控策略提供参考。

为寻找伊犁马肉质性能的分子标记，试验以38匹伊犁马为材料，测定肉质性状（失水率、熟肉率、剪切力）和肌纤维性状（肌纤维横截面积、肌纤维直径、肌纤维密度），利用PCR直接测序法检测肌细胞生成素（meyogenin，MyoG）基因外显子1在伊犁马群体中的多态性，并对MyoG基因SNPs不同基因型与肉质、肌纤维性状进行关联分析。结果表明，MyoG基因外显子1检测出5个突变位点，分别为SNP1（g.31187343 A>C）、SNP2（g.31187333 G>A）、SNP3（g.31187132 C>T）、SNP4（g.31187105 C>G）和SNP5（g.31187099 C>T），其中SNP1为错义突变，碱基A突变为C使得氨基酸由苏氨酸突变为脯氨酸，其他位点均为无义突变。SNP3和SNP4为中度多态位点，SNP1和SNP2为低度多态位点，这4个位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态。MyoG基因外显子1中SNP1和SNP4不同基因型个体失水率、熟肉率、肌纤维横截面积、肌纤维直径、肌纤维密度差异显著（P<0.05）；SNP3不同基因型个体熟肉率、肌纤维横截面积、肌纤维密度差异显著（P<0.05）；SNP2不同基因型个体各指标差异均不显著（P>0.05）。综上，伊犁马MyoG基因外显子1检测到5个多态位点，其中SNP1（g.31187343 A>C）、SNP3（g.31187132 C>T）和SNP4（g.31187105 C>G）位点不同基因型对肉质及肌纤维性状有显著影响，这些位点可作为伊犁马肉质性能潜在分子标记。

拷贝数变异（copy number variation，CNV）具有多种形式的变异结构，在品种多样性、生物进化和疾病相关性等研究中起着重要作用，并具有片段长度大、覆盖范围广等特点。随着分子生物学的发展及DNA测序技术的日渐成熟，人们对遗传变异的研究不断向DNA分子水平深入，多态性标记在畜禽育种中已逐渐成为动物育种研究的趋势和主流。由于CNV对基因的调控和表达所造成的影响更为显著，因此，CNV在重要畜禽中的研究越来越多。目前，已检测出大量有关畜禽重要经济性状的基因序列变异，并有许多研究均表明CNV与动物的重要经济特征及疾病的发生有关。笔者主要通过参考国内外相关的研究报道，简述了CNV的相关研究背景、概念、突变机制，归纳总结了CNV对牛、羊、猪、鸡的经济性状、繁殖性状和疾病调控的影响，以期通过对这些重要畜禽的基因组学研究揭示其适应性遗传机理和表型性状差异的遗传基础，开发相应的分子遗传标记，为畜禽的标记辅助选育提供理论基础。

试验旨在探明皮下注射褪黑素（MT）对荷斯坦奶牛配种妊娠率及血清生殖激素的影响。用计步器法确定自然发情的首次配种荷斯坦奶牛150头，对其中70头进行颈部皮下肌内注射褪黑素30 mg，12 h后进行人工输精；选择170头产后首次配种的荷斯坦奶牛进行同期排卵-定时输精处理，其中90头荷斯坦奶牛最后一次注射促性腺激素释放激素（gonadotropin-releasing hormone，GnRH）的同时进行颈部皮下肌内注射褪黑素30 mg，16 h后进行人工输精。在进行二次配种的荷斯坦奶牛中选择153只进行皮下注射褪黑素。荷斯坦奶牛输精后20~35 d进行妊娠检查，详细记录首次配种妊娠母牛头数、二次配种妊娠母牛头数、产犊数。选取同期排卵-定时输精的荷斯坦奶牛25头，皮下注射褪黑素8 h后用放射免疫法检测其血清中褪黑素、促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）、雌二醇（E₂）的含量及35 d妊检时妊娠母牛血清中孕酮（P₄）含量。结果显示，与自然发情和同期排卵对照组相比，其对应的皮下注射褪黑素组荷斯坦奶牛的妊娠率及产犊率均显著提高（P<0.05）；皮下注射褪黑素组的双犊率显著提高（P<0.05），首次配种妊娠率和产犊率均显著提高（P<0.05），二次配种妊娠率和产犊率均差异不显著（P>0.05）。血清激素检测结果表明，与对照组相比，皮下注射褪黑素组血清中褪黑素、LH、E₂含量均显著增加（P<0.05）；35 d妊检时，皮下注射褪黑素的妊娠母牛P₄含量显著增加（P<0.05）。本试验结果表明，皮下注射褪黑素能够提高荷斯坦奶牛的妊娠率、产犊率及血清中LH、E₂和P₄含量，说明皮下注射褪黑素能够促进卵母细胞成熟和排卵，并提高配种妊娠率。

为探究延边黄牛脂蛋白脂肪酶（lipoprteinlipase，LPL）基因遗传多态性及其对肉质性状的影响，本试验以80头健康的30月龄延边黄牛背最长肌作为试验材料，运用PCR直接测序法和高分辨率熔解曲线技术（HRM）对LPL基因的SNP位点进行检测，分析了试验群体的遗传效应，并与延边黄牛的肉质性状数据进行关联分析。PCR直接测序结果表明，延边黄牛LPL基因存在2个多态性位点（g.6215 A>G和g.18341 C>T），其中g.6215 A>G位点表现为2种基因型：AA与AG，优势等位基因为A；g.18341 C>T位点表现为2种基因型：CC和CT，C为优势等位基因；对文献中2个位点的检测结果表明，g.355427 T>A位点表现为2种基因型：AA与AT，A为优势等位基因；c.322 G>A位点的HRM分型结果显示并未分型。这些多态性位点全部呈中度多态（0.25<PIC<0.5），并处于Hardy-Weinberg平衡状态。HRM分型结果显示，这3个SNPs位点与延边黄牛肉质性状存在显著相关：g.6215 A>G位点与延边黄牛胴体重及脂肪、蛋白、水分含量有显著关联，表现为AG基因型个体胴体重、脂肪含量显著高于AA基因型个体（P<0.05），AA基因型个体蛋白及水分含量显著高于AG基因型个体（P<0.05）；g.18341 C>T位点与延边黄牛宰前活重、胴体重及背膘厚有显著关联，表现为CT基因型个体这些性状均显著高于CC基因型个体（P<0.05）；g.355427 T>A位点AT基因型个体宰前活重、背膘厚和脂肪含量均高于AA基因型个体（P<0.05）。综上，LPL基因g.6215 A>G、g.18341 C>T和g.355427 T>A位点对延边黄牛的肉质有显著影响，LPL基因可以作为延边黄牛品种选育改良工作的优势候选基因和有效分子标记。

外泌体是一种广泛存在于多种细胞间质中的囊泡，多种细胞在正常情况下或在细胞外刺激等应激条件下都能产生外泌体，来自不同细胞类型的外泌体作用机制及功能有很大区别。外泌体可通过膜蛋白与靶细胞膜蛋白结合、膜蛋白碎片与细胞膜上受体结合、膜与靶细胞膜直接融合等方式传递生物活性分子，从而参与机体免疫、细胞分化等过程。由于外泌体具有来源天然、穿越屏障能力好、生物相容性强等特点，在许多研究领域均受到广泛的关注。作者介绍了外泌体的形态特点、形成过程、作用机制、分离纯化、生物学特性、功能及应用；总结了近年来外泌体在畜禽研究中的应用。外泌体不仅可应用于动物遗传育种中，还可作为工具或载体来研究动物体内各种生化途径。该综述可为外泌体的相关研究及应用提供参考。

试验旨在探索致脑膜炎粪肠球菌对体外血脑屏障功能的影响，寻求稳定的构建体外血脑屏障损伤模型的方法。选用1周龄ICR小鼠进行原代脑微血管内皮细胞（BMEC）分离并通过BMEC特有的凝血因子Ⅷ（coagulation factor Ⅷ，Factor Ⅷ）进行荧光标记，鉴定分离的细胞并判定分离率。选用1~3日龄ICR小鼠分离星形胶质细胞并通过其特有的胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）对进行荧光标记，鉴定分离的细胞并判定分离率。将原代细胞传至3代，用Transwell二维小孔分别构建单层BMEC和BMEC与星形胶质细胞共培养的血脑屏障模型。选用致脑膜炎粪肠球菌、非致脑膜炎粪肠球菌和大肠杆菌DH5α感受态细胞分别与构建的体外血脑屏障模型共培养，评估致脑膜炎粪肠球菌对体外血脑屏障模型的穿透性。通过4 h渗透试验、荧光素钠通透性试验和血脑屏障损伤相关标志基因基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达量的检测，评估致脑膜炎粪肠球菌对体外血脑屏障模型的影响。结果显示，试验成功分离到BMEC和星形胶质细胞，纯度分别达90%和95%以上。细菌穿透试验结果显示，所选的3株细菌只有致脑膜炎粪肠球菌可穿越体外血脑屏障模型。4 h渗透试验和荧光素钠通透性试验结果显示，共培养模型优于单层BMEC模型。与其他组相比，构建的体外血脑屏障与致脑膜炎粪肠球菌共培养组荧光素钠的穿透力更高，MMP-2基因的表达量明显上升。综上，BMEC与星形胶质细胞共培养的模型优于单层BMEC模型，致脑膜炎粪肠球菌可穿越体外血脑屏障模型，并介导体外血脑屏障损伤，本试验结果为揭示致脑膜炎粪肠球菌对体外血脑屏障损伤机制提供了理论依据。

为了解上海地区犬瘟热病毒（Canine distemper virus，CDV）遗传变异情况，本研究采用首尾重叠的11对特异性引物，对CDV上海株SH202003进行RT-PCR扩增，将扩增片段进行反复测序，序列拼接后最终获得了SH202003株全基因组序列，应用Lasergene 7.0和Mega 6.0软件对全基因及H基因进行序列分析，并构建系统进化树。结果显示，SH202003株基因组全长为15 690 bp，编码6种结构蛋白（N、P、M、F、H和L），H和L基因间隔序列为CUA，L和5'端尾随序列为CAA，与Hebei株核苷酸和氨基酸相似性最高，达到98.6%和96.6%，与疫苗株核苷酸相似性在92.2%~94.3%，氨基酸相似性只有82.7%~87.0%；全基因进化树中，SH202003株与流行野毒株在同一分支，与疫苗株在不同的分支；H基因同样与Hebei株亲缘关系最近，核苷酸和氨基酸相似性分别为98.7%和99.5%，与疫苗株Snyder Hill、CDV3、Convac及Onderstepoort亲缘关系较远；SH202003株处于Asia-1型分支，属于Asia-1型强毒株；SH202003株具有9个潜在N-糖基化位点，与强毒株Hebei株一致。研究表明，上海株SH202003属于CDV强毒株，为Asia-1型，其H基因序列相对保守，具有9个潜在N-糖基化位点，但是全基因序列存在较多突变，与疫苗株的匹配度较差，可能是免疫犬依然发生犬瘟热的主要原因。

为确定猪传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus，TGEV）非结构蛋白2（nonstructural protein 2，Nsp2）与宿主细胞蛋白26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基11（PSMD11）之间是否存在相互作用，本研究利用RT-PCR方法扩增猪源PSMD11基因，并构建其真核表达载体pCMV-Myc-PSMD11，经测序和双酶切验证正确后，转染猪小肠上皮细胞（IPEC-J2），通过Western blotting和间接免疫荧光试验（IFA）检测真核表达载体pCMV-Myc-PSMD11是否能在IPEC-J2中表达。利用免疫共沉淀（Co-IP）试验检测TGEV Nsp2和宿主细胞PSMD11蛋白之间的相互作用，并通过激光共聚焦显微镜观察TGEV Nsp2与PSMD11在宿主细胞中的共定位情况。结果显示，本研究成功扩增了猪源PSMD11基因，大小约为1 474 bp，基因序列经测序比对与标准序列完全一致。构建的真核表达载体pCMV-Myc-PSMD11能在IPEC-J2细胞中成功表达PSMD11蛋白；Co-IP结果表明，PSMD11与Nsp2之间存在相互作用；共定位试验结果显示，PSMD11与Nsp2的相互作用发生在细胞质中，且细胞中PSMD11蛋白的表达位置并未因Nsp2的表达而发生改变。本研究结果为进一步研究TGEV Nsp2在病毒感染过程中所发挥的重要作用提供新的线索。

为探索控制沙门氏菌感染的新途径，本试验进行了高效价宽裂解谱噬菌体的分离。首先利用点斑试验和成斑率（EOP）测定法对环境样品进行了沙门氏菌噬菌体的分离纯化及裂解效价和裂解谱的测定，然后对其中1株效价较高、裂解谱较广的噬菌体进行了电镜形态特征观察、最佳感染复数测定、一步生长曲线测定及温度、pH和紫外线敏感性的测定。结果显示，该株噬菌体对不同沙门氏菌的裂解率不同，裂解效价在10⁹~10¹² PFU/mL；对检测的32株沙门氏菌菌株的裂解率为59.4%；透射电镜下观察到该噬菌体为头部直径约70 nm、尾部长约140 nm的长尾噬菌体；以鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028为宿主菌测得最佳感染复数为0.01；在宿主菌鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028中的一步生长曲线显示，潜伏期为20 min，暴发期为100 min，暴发量为113 PFU/cell；在40~60 ℃效价稳定在10¹⁰ PFU/mL，pH 5.0~13.0效价在10⁶ PFU/mL以上，紫外线照射50 min效价仍有10⁶ PFU/mL。综上可知，该株噬菌体分离株具有效价高、裂解谱宽且对温度、pH、紫外线稳定性良好等特性，符合噬菌体制剂的相关特征，具备作为噬菌体制剂后备菌株开发的潜力。

鸽沙门氏菌病是由沙门氏菌引起的养鸽业常见且多发的疾病，主要侵害雏鸽，给养鸽业造成严重经济损失。引起该病的沙门氏菌为一种兼性胞内寄生菌，可于宿主细胞内生存繁殖并逃避机体免疫防御机能，增加了该病净化的难度。目前，使用抗生素防治鸽沙门氏菌病是生产中最常用的有效措施，但抗生素的大量使用甚至滥用，导致沙门氏菌这一人兽共患病原菌耐药菌株的不断产生，以及药物残留等危害食品和公共卫生安全问题的出现。寻求抗生素替代品来减少或替代抗生素在畜禽养殖生产中的应用已成为动物疫病防控研究的主流。由于养鸽业起步较晚，有关鸽沙门氏菌病及其防控的研究相对较少，文章主要对鸽沙门氏菌病、沙门氏菌致病机制和近年来针对沙门氏菌病的抗生素替代品防控措施的研究进展进行综述，以期为鸽沙门氏菌病相关研究提供参考。

试验旨在通过网络药理学的挖掘功能对乌锦颗粒治疗羔羊痢疾的有效成分进行筛选，并对其潜在作用靶点和可能的通路进行阐释。依据中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）解析乌锦颗粒各单味药的主要有效化合物，同时查找其所对应的靶点，没有靶点的化合物再次通过Swiss Target Prediction数据库对其靶点进行预测，最后得到有事实靶点的化合物及其对应靶点蛋白，采用Cytoscape 3.7.1软件构建有效成分-靶点蛋白网络图；将筛选出的靶点蛋白上传至String在线数据库，构建乌锦颗粒作用于羔羊（Ovis aries）痢疾的蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）图，最后将PPI网络中的核心靶点上传至DAVID数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析，同时进行基因功能聚类分析。结果显示，共筛选出有事实靶点的化合物22种，包括山奈酚、豆甾醇、花生四烯酸甲酯、槲皮素及鞣花酸等，化合物对应靶点蛋白去重后共计129个；PPI网络图显示节点数为74，边数为287，平均节点度为7.76，核心靶点蛋白共计67个，包括INSR、NR3C1、ESR1、PLG及PGR等；GO功能富集分析得到与生物过程（BP）相关的条目54个（FDR<0.05），与细胞成分（CC）相关的条目11个（FDR<0.05），与分子功能（MF）相关的条目22个（FDR<0.05），GO功能富集基因计数较多的条目有转录（transcription）、质膜（plasma membrane）及锌离子结合（zinc ion binding）等；KEGG通路富集结果涉及50个基因，基因协同参与的调控通路43条，涉及基因较多的有神经活性配体-受体相互作用（neuroactive ligand-receptor interaction）、癌症的途径（pathways in cancer）及补体和凝血级联（complement and coagulation cascades）等；基因功能分类结果显示，64个核心靶基因中有12个基因具有聚类结果，将其分为功能不同的2组，分别为聚类1组（富集分数6.11，涉及7个核心靶基因）和聚类2组（富集分数2.84，涉及5个核心靶基因）。综上，乌锦颗粒可能是通过多种化合物作用于多种不同的靶点，参与多种通路的调节来实现对羔羊痢疾的治疗机制。

本研究旨在明确中国罗非鱼主养区广西各地罗非鱼无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）分离株的血清型分布、毒力基因携带情况和耐药情况，为罗非鱼无乳链球菌病的防控奠定基础。2018-2019年从广西柳州、钦州、南宁、北海等地患无乳链球菌病罗非鱼体内分离了47株无乳链球菌，并对各分离株的血清型、毒力基因分布和耐药情况进行检测和分析。血清型检测结果表明，47株无乳链球菌血清型高度一致，均为Ⅰa血清型。对4种毒力基因检测结果表明，47株无乳链球菌临床分离株cylE、sodA、gapC毒力基因的检出率均为100%，而scpB基因仅在人源参考菌株2603V/R中检出，在所有鱼源分离株中未检出。对11类（31种）常见抗生素的药敏试验结果表明，临床分离株对磺胺异噁唑、新霉素、庆大霉素、卡那霉素的耐药率达到90%以上，对氧氟沙星、左氧氟沙星、氨苄青霉素、阿莫西林、头孢克洛、头孢曲松、头孢哌酮、头孢拉定、土霉素、强力霉素的敏感性均为100%。多重耐药检测结果表明，5重以上耐药菌株占93.62%，其中9重以上耐药菌株为19.15%，且均分离自柳州地区。结果表明，广西地区罗非鱼源无乳链球菌血清型单一，均为Ⅰa血清型，且均携带多种毒力基因，多重耐药现象严重。

本研究旨在从中药小分子库中筛选出金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）转录调控因子MgrA的单体抑制剂，并探讨其对金黄色葡萄球菌主要毒力因子的影响及对小鼠金黄色葡萄球菌肺炎的治疗作用。使用荧光各向异性分析法进行抑制剂的筛选，通过实时荧光定量PCR、溶血试验及纤维蛋白原黏附试验考察药物对MrgA调控的相关毒力基因转录表达及对溶血和黏附的抑制作用，采用热稳定迁移试验对其抑制机制进行初步探讨，最后通过建立小鼠肺炎模型评估鸢尾黄素对金黄色葡萄球菌诱导的小鼠肺炎的治疗作用。结果显示，鸢尾黄素作为MgrA的抑制剂，在不影响细菌生长的低浓度下（IC₅₀=20.35 μg/mL）就能显著抑制MgrA的活性（P<0.05）；实时荧光定量PCR结果显示，鸢尾黄素可显著降低fnba基因的转录水平（P<0.05），极显著降低hla和RNAⅢ基因的转录水平（P<0.01），同时极显著上调ebh、srap和spa基因的转录水平（P<0.01）；溶血试验显示，8 μg/mL鸢尾黄素可极显著抑制USA300菌株的溶血作用（P<0.01）；纤维蛋白原黏附试验证实32 μg/mL鸢尾黄素可极显著抑制USA300菌株的黏附活性（P<0.01）；热稳定迁移试验揭示了鸢尾黄素是通过与MgrA结合从而抑制其活性。小鼠肺炎试验结果显示，鸢尾黄素能极显著提高金黄色葡萄球菌感染小鼠的存活率（P<0.01），极显著减少其肺脏载菌量（P<0.01），并减轻小鼠肺脏组织的病理损伤和炎症反应。以上结果表明，鸢尾黄素能通过抑制转录调控因子MgrA的活性对金黄色葡萄球菌感染引起的小鼠肺炎起到治疗作用，可作为开发治疗金黄色葡萄球菌感染的先导化合物，并为以毒力因子MgrA为靶标的药物研发提供了理论依据。

试验旨在研究大肠杆菌（E.coli）对奶牛子宫内膜上皮细胞（bovine endometrial epithelial cells，BEECs）的体外炎性损伤，探究大肠杆菌引发炎性反应的最佳浓度、作用时间及机制。首先，用不同浓度的大肠杆菌（5×10⁴、5×10⁵、1×10⁶、2.5×10⁶、5×10⁶ CFU/mL）诱导刺激细胞3、6和9 h，通过倒置显微镜观察细胞形态、CCK-8法测D_{450 nm}值，检测大肠杆菌对细胞活性的影响；其次，用不同浓度的大肠杆菌（5×10⁴、5×10⁵ CFU/mL）处理细胞3、6和9 h，用ELISA方法检测细胞上清液中白介素-1β（IL-1β）、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的分泌量；最后，用不同浓度的大肠杆菌（5×10⁴、5×10⁵ CFU/mL）处理细胞6和9 h，用Western blotting检测核因子κB抑制蛋白α（IκBα）和p65蛋白的磷酸化水平。结果显示，与对照组相比，大肠杆菌感染细胞9 h后，1×10⁶、2.5×10⁶和5×10⁶ CFU/mL大肠杆菌组细胞活性均极显著降低（P<0.01），5×10⁵ CFU/mL大肠杆菌组显著降低（P<0.05）；大肠杆菌感染细胞9 h后，5×10⁵ CFU/mL大肠杆菌组IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α极显著升高（P<0.01）；大肠杆菌感染细胞6 h后，5×10⁵ CFU/mL大肠杆菌组IκBα、p65蛋白磷酸化水平和IL-6均极显著升高（P<0.01），5×10⁴ CFU/mL大肠杆菌组IκBα和p65蛋白磷酸化水平显著升高（P<0.05）。结果表明，大肠杆菌可以刺激奶牛子宫内膜上皮细胞产生炎性反应，且当细胞与5×10⁵ CFU/mL大肠杆菌作用6 h或与5×10⁴ CFU/mL大肠杆菌作用9 h为最佳。

试验旨在对本实验室研发的用于奶牛乳头消毒的二氧化氯消毒剂进行实验室杀菌效果评价，并对二氧化氯的杀菌机理进行初步研究。采用定量法杀菌试验对二氧化氯奶牛乳头消毒剂进行实验室杀菌效果评价；利用透射电子显微镜观察二氧化氯作用后金黄色葡萄球菌超微结构的改变；利用流式细胞仪测定二氧化氯作用后金黄色葡萄球菌细胞膜通透性的变化。定量法杀菌试验结果显示，当该消毒剂中二氧化氯的含量高于1.2 mg/L时，对无乳链球菌、铜绿假单胞菌的杀灭对数值高于3.00，即杀菌率高于99.9%；二氧化氯含量高于0.6 mg/L时，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌杀灭对数值高于3.00，即杀菌率高于99.9%；二氧化氯的含量为0.3 mg/L时，仍能有效杀灭表皮葡萄球菌、停乳链球菌；而二氧化氯含量高于28 mg/L，对于枯草芽孢杆菌的杀菌率才能达到100%。透射电子显微镜超微结构观察结果显示，100 mg/L二氧化氯作用于金黄色葡萄球菌5 min时，细胞膜出现了轻微的皱缩，细胞壁与胞膜之间出现了轻微的空隙，绝大多数细胞仍保持原有形态；作用15 min后，金黄色葡萄球菌形态发生了较明显的变化，细胞膜发生了明显的皱缩，细胞壁与细胞膜完全脱离，细胞质也出现了凝集。流式细胞仪检测金黄色葡萄球菌细胞膜通透性变化发现，二氧化氯处理后金黄色葡萄球菌细胞膜通透性发生了改变，其中含量为50 mg/L二氧化氯作用15 min后细胞膜通透性改变最明显。结合实验室杀菌效果评价结果发现，二氧化氯对细菌细胞膜通透性的改变仅仅是致死细菌的原因之一，二氧化氯对细菌的杀灭机理较复杂，仍需进一步的探索。

试验旨在探究猫脂肪间充质干细胞（adipose mesenchymal stem cells，AD-MSCs）及其条件培养基（adipose mesenchymal stem cells conditioned medium，AD-MSCs-CM）对庆大霉素致损的猫肾细胞（crandell rees feline kidney，CRFK）增殖和凋亡的影响及机制。试验分为空白组、庆大霉素（gentamicin，GM）组、AD-MSCs组和AD-MSCs-CM组；用Ⅰ型胶原酶消化法分离猫AD-MSCs，并用流式细胞术鉴定分离的细胞；以0、2、4、8 mmol/L GM完全培养基处理CRFK，并于12、24和48 h用CCK-8法检测细胞活性，筛选最适造模浓度；致损的CRFK分别与猫AD-MSCs及AD-MSCs-CM共培养，于24、48和72 h后用CCK-8法检测细胞增殖活性，24 h后通过Annexin V流式细胞术检测细胞凋亡率，最后通过实时荧光定量PCR检测细胞周期蛋白D1（cyclin d1，CCND1）、细胞增殖核抗原（proliferative nuclear antigen，PCNA）、Bax和Bcl-2基因的表达水平。结果显示，分离培养的猫AD-MSCs在体外培养条件下呈典型的梭型，高表达MSCs表面标记物CD44、CD90和CD105，不表达白细胞表面标记物CD45；AD-MSCs和AD-MSCs-CM均能促进GM致损CRFK的增殖并抑制其凋亡，其中AD-MSCs和AD-MSCs-CM可通过上调增殖相关基因CCND1、PCNA和抗凋亡基因Bcl-2的表达并降低促凋亡基因Bax的表达而发挥促增殖、抑凋亡作用。试验成功分离得到猫AD-MSCs，并证实AD-MSCs及其条件培养基在体外能促进GM致损CRFK的增殖和迁移，为猫AD-MSCs治疗猫急性肾损伤提供依据。

试验旨在研究小分子药物索非布韦是否具有抑制牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）复制的作用。通过MTT法测定了不同时间和不同浓度索非布韦对牛肾细胞（MDBK）增殖的影响；采用免疫荧光染色试验筛选出能有效抑制BVDV复制的索非布韦最适浓度，用实时荧光定量PCR、致细胞病变作用（CPE）和病毒半数组织细胞感染量（TCID₅₀）测定的方法检测索非布韦对BVDV复制的影响。结果显示，索非布韦处理MDBK细胞24和48 h能极显著抑制细胞增殖（P<0.01）；与对照组相比，当索非布韦浓度为800 μmol/L时免疫荧光染色检测BVDV感染MDBK细胞的双链RNA（dsRNA）含量极显著降低（P<0.01）；实时荧光定量PCR检测发现，与DMSO处理组相比，BVDV感染索非布韦处理组MDBK细胞，BVDV 5'UTR mRNA含量在病毒感染24和48 h时极显著降低（P<0.01）；BVDV感染索非布韦处理组MDBK细胞病变现象明显减弱；索非布韦处理24 h后能极显著减弱BVDV感染MDBK细胞后子代病毒颗粒的形成组与释放（P<0.01），降低病毒滴度。综合上述结果表明，小分子药物索非布韦能有效抑制BVDV体外复制。

为了解家庭农场供货模式下"养殖-销售"活禽产业链中各环节大肠杆菌耐药性及耐药基因流行情况，本研究共采集132份来自自贡市沿滩区某一农贸市场及其活禽供货的33家家庭农场的样品，通过细菌分离纯化、形态学鉴定、特异性引物PCR检测、系统发育群PCR检测、药敏试验及耐药基因鉴定等方法对细菌特性进行分析。研究结果显示，83株分离株在伊红美蓝培养基上形成带有金属光泽的黑色菌落，镜检显示为革兰阴性短杆菌，且特异性引物检测结果均显示阳性，因此，确定83株分离株均为大肠杆菌。系统发育群鉴定结果发现，83株分离株系统发育群集中于A群（53.02%）及B1群（20.48%）；药敏试验结果显示，83株菌株均为多重耐药菌，其中硫酸黏杆菌素、四环素耐药率最高，均为100%，氨苄西林、头孢呋辛、氨曲南、氟苯尼考耐药率均超过90%；耐药基因结果显示，mcr-1、mcr-3、bla_TEM、bla_SHV、bla_{CTX-M-group 1}、bla_{CTX-M-group 9}、qnrS、aac（6'）-Ⅰb-cr、tetA和tetB等耐药基因均有检出，检出率均低于对应抗菌药的耐药率，符合预期结果。此外，统计结果显示，家庭农场细菌耐药率和耐药基因携带率低于农贸市场。本研究结果表明，农贸市场成为活禽产业链中耐药菌及耐药基因的集散地，可为指导禽大肠杆菌临床检测、诊断及合理用药提供试验依据，同时为评估活禽产业链耐药性传播风险提供可靠数据。

试验旨在应用宏基因组测序技术探究两种堆肥处理方式下猪粪中微生物的结构组成与分布特征。试验采集同一粪池中的新鲜猪粪，随机分成添加有效微生物（EM）菌的F组和未添加EM菌的K组，每组粪堆各1堆，堆成圆锥形粪堆，粪堆高1.2 m，底部直径2 m；采集堆肥第0、7、14和21天的粪便样本并提取粪便总DNA，运用宏基因组高通量测序技术，比较F组和K组的微生物多样性（组成及结构）差异，并对功能基因进行注释。结果表明，猪粪便中的细菌共测序获得1 083 607个有效开放阅读框（ORFs）；共鉴定出147个门、118个纲、258个目、593个科、2 343个属和13 193个种；在门水平上，相对丰度前十的细菌界优势菌门有：变形菌门（Proteobacteria）、拟杆菌门（Bacteroidetes）、放线菌门（Actinobacteria）、厚壁菌门（Firmicutes）、疣微菌门（Verrucomicrobia）、绿弯菌门（Chloroflexi）、柔壁菌门（Tenericutes）、浮霉菌门（Planctomycetes）、螺旋体门（Spirochaetes）和酸杆菌门（Acidobacteria）；在属水平上，两组平均丰度值排名前三十五的属分别属于变形菌门、拟杆菌门、厚壁菌门、放线菌门和疣微菌门；通过KEGG功能预测分析，新陈代谢通路是最丰富的，氨基酸代谢通路和碳水化合物代谢通路是包含功能基因数量最多的二级通路。两组的菌群结构多样性差异表明添加EM菌后会促进堆肥前期的菌群变化。