试验旨在寻找影响京海黄鸡禽流感抗病性状的分子标记.本研究以京海黄鸡核心群母鸡为基础,测定了血清中的禽流感(H5亚型)抗体滴度,利用简化基因组测序技术进行全基因组关联分析(genome-wide association studies,GWAS),检测与禽流感抗体滴度相关的SNP位点.结果发现2个在染色体水平上与禽流感抗病性状显著相关的SNPs位点,分别位于4号和10号染色体上,其中10号染色体上的SNP位于RNA甲基转移酶家族基因Nsun7内部.该基因与细胞增殖和分化、蛋白质的生物合成密切相关,具有重要的生物学功能,推断其可作为影响京海黄鸡禽流感抗病性状的新的候选基因.

试验旨在对沼泽型水牛ALK3基因进行克隆、生物信息学分析,并对其在水牛组织中的表达规律进行系统研究.根据GenBank中已公布的牛ALK3基因序列设计特异性引物,应用RT-PCR方法扩增、克隆获得目的基因片段;应用生物信息学方法分析和预测了水牛ALK3的遗传进化及蛋白质的理化性质、二级和三级结构;并应用QRT-PCR技术对ALK3基因在水牛组织中的表达进行了差异分析.结果表明,水牛ALK3基因编码区全长1 599 bp,共编码532个氨基酸.多重序列比较分析显示,水牛ALK3核苷酸序列与牛、绵羊、猪、马、人和小鼠相应序列的同源性分别为98%、96%、95%、93%、94%和91%.系统进化树分析显示,ALK3基因在不同物种以及进化的过程中具有高度保守性.对ALK3蛋白质的分析表明该蛋白呈弱碱性,有信号肽,细胞亚定位于胞膜上,存在丝氨酸/苏氨酸激酶和GS等结构.定量分析结果显示,ALK3在水牛生殖脊、心脏、肝脏、颗粒细胞、肺脏、卵丘细胞、肾脏、下丘脑、垂体、大脑等15种组织或细胞中有不同程度的表达,其中卵巢中表达量最高,垂体、肺脏和睾丸次之,卵丘细胞表达量最低.本研究成功克隆了沼泽型水牛ALK3基因,并研究了其在不同水牛组织细胞中的表达规律,为阐明其在水牛繁殖过程中的功能及转基因载体构建中的应用研究奠定了理论基础.

为保障动物源性食品安全,本研究建立了分别检测猪肉和鸡肉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和T-2毒素残留的间接竞争酶联免疫吸附法.结果显示,该方法在猪肉和鸡肉样本中DON的检测限分别为34.9和43.5 μg/kg,添加回收率为72.7%~97.1%,变异系数小于8.7%;T-2毒素的检测限分别为33.7和28.7 μg/kg,添加回收率为72.1%~95.0%,变异系数小于11.3%.该方法灵敏度高、准确、简便,适用于猪肉和鸡肉中DON和T-2毒素残留的快速检测.

为了探讨核苷酸结合寡聚化结构域1(nucleotide-binding oligomerization domain containing 1,NOD1)在抗沙门氏菌感染过程中的作用,本试验采用实时荧光定量PCR的方法检测了血液中NOD1基因在转录水平的表达量变化.试验分为3组,鸡白痢沙门氏菌组、肠炎沙门氏菌组和对照组,分别在感染后1、3、5、7 d检测NOD1 mRNA的表达水平.结果显示,感染后的1~7 d,鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌感染后的表达量变化趋势不同,其中,鸡白痢沙门氏菌感染后表达量呈先上升再下降然后再上升的波浪形变化,而肠炎沙门氏菌感染后的表达量呈逐渐上升趋势.与对照组相比,血液中NOD1 mRNA的水平,在鸡白痢沙门氏菌感染后的3和7 d的表达量显著高于对照组(P <0.05),在肠炎沙门氏菌感染后的5、7 d的表达量显著高于对照组(P <0.05).提示,鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌感染后均可促进鸡血液中NOD1基因的表达,NOD1基因可能参与了机体抗沙门氏菌感染过程.

本研究旨在建立一种快速鉴定致猪水肿病大肠埃希菌的多重PCR检测方法.分别针对大肠埃希菌16S rDNA、志贺毒素Stx2e A亚基和菌毛F18ab A亚基保守序列设计合成3对特异性引物,优化多重PCR反应条件,并进行特异性和敏感性检测.结果显示,阳性对照菌株扩增产物大小分别为1 062、733和313 bp.特异性和灵敏性检测结果表明,与肠炎沙门菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、支气管败血波氏杆菌和猪链球菌等猪常见致病菌均无交叉反应;菌体直接扩增法最低检出量为1 875 CFU.利用建立的多重PCR检测方法对分离收集的128株大肠埃希菌进行鉴定,得到36株致猪水肿病大肠埃希菌,其中30株既有菌毛F18ab又产志贺毒素Stx2e,另外6株仅产志贺毒素Stx2e.结果表明,本试验所建立的多重PCR检测方法对致猪水肿病大肠埃希菌的快速诊断和流行病学调查具有一定的应用价值.

本试验旨在了解近年来浙江省兔支气管败血波氏杆菌的感染情况及耐药状况,指导合理用药,检测细菌的耐药基因,探究其耐药机理.根据细菌形态、培养特性、生化试验,结合PCR法对分离菌株进行鉴定;K-B纸片扩散法检测细菌对18种常用抗生素的耐药率;设计耐药基因特异性引物,PCR法扩增耐药基因,并进行测序分析.结果显示,分离鉴定出2012—2014年22株兔支气管败血波氏杆菌;药敏结果显示,分离菌对青霉素G、头孢拉定、链霉素、林可霉素、克林霉素、甲氧嘧啶耐药严重,对多黏菌素B、左氟沙星、强力霉素、四环素等药物敏感,耐β-内酰胺类药物的细菌中检测到耐药基因bla_TEM.结果表明,兔支气管败血波氏杆菌是引起兔呼吸道疾病的主要病原菌,分离菌多重耐药,耐药率较高,检测到的耐药基因与耐药表型相符.

本试验应用RT-PCR方法对2011年1月—2014年4月采自广西南宁、玉林等14个地区的331份仔猪腹泻粪便样品进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测.结果显示331份样品中有210份为PEDV阳性,阳性率为63.44%.对其中25份阳性样品的PEDV M基因进行克隆和测序,将测序结果与GenBank中PEDV参考毒株的M 基因序列进行同源性比对分析并构建系统进化树.25个PEDV M基因序列与51个参考毒株M基因的核苷酸和氨基酸同源性分别为96.0%~99.9%、94.3%~99.6%.PEDV M基因遗传变异分析结果表明,广西2013年—2014年的PEDV流行毒株与北京、安徽、武汉、河北、广东等地2010年—2013年的流行毒株亲缘关系较近,而与中国早期分离株CH/S(GenBank登录号:JN547228)、疫苗株CV777(GenBank登录号:AF353511)和Attenuated DR13(GenBank登录号:JQ023162)的遗传距离较远.提示广西现流行的PEDV与早期毒株相比已发生较为明显的变异.

持续性感染和免疫耐受是牛病毒性腹泻病的重要特征,也是该病的防控难点.本试验将2种生物型的牛病毒性腹泻病毒(BVDV):致细胞病变(CP)型(BVDV OregonC24株)和非致细胞病变(NCP)型(BVDV Yak株),灭活、浓缩作为抗原,分别免疫家兔制备高免血清.同时,使用BVDV全病毒蛋白作为包被原,建立了检测BVDV的间接ELISA检测方法.本试验利用该方法对高免血清进行检测,探讨CP型BVDV与NCP型BVDV抗原免疫原性差异.结果显示,CP型BVDV的高免血清效价均比NCP型BVDV高免血清的效价高,平均高35%.结果表明,CP型BVDV的免疫原性优于NCP型BVDV,且CP型BVDV与NCP型BVDV的血清效价具有明显差异.这为在实践中疫苗毒株筛选及生产提供了理论指导.

为探索苦参碱对多重耐药表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,SE)整合子整合酶(intⅠ)和二氢叶酸还原酶(dfrA)的影响,试验通过纸片扩散法筛选多重耐药菌株、以肉汤稀释法测定苦参碱对SE的最低抑菌浓度(MIC)和最佳逆转条件;通过普通PCR法测定苦参碱对SE整合子intⅠ和dfrA基因碱基序列的影响;通过荧光定量PCR法测定苦参碱对SE整合子intⅠ和dfrA mRNA表达量的影响,结果显示苦参碱亚浓度作用表皮葡萄球菌后对intⅠ、dfrA基因序列无影响;苦参碱对intⅠ mRNA表达量具有抑制作用,而对dfrA mRNA表达量影响不大,结果表明在SE体内苦参碱可从mRNA水平上抑制SE intⅠ的表达量.

在流感疫情监测中,血凝试验是最常用的检测方法.针对鸡红细胞不能凝集流感病毒"O"相毒株,新鲜红细胞需现采现配、麻烦、费时,易溶血、不易保存等问题,本试验对豚鼠醛化红细胞制备方法的筛选和制备条件的优化进行研究,并以新鲜豚鼠红细胞为对照,用于流感病毒不同型别血凝试验.结果表明,戊二醛固定法制备的豚鼠醛化红细胞不溶血、结果稳定性好、保存期长、血凝活性与新鲜豚鼠红细胞基本一致,可以替代新鲜豚鼠红细胞用于血凝试验.

试验旨在探讨日粮中添加硫辛酸对焉耆马赛后运动性能、血浆抗氧化能力及代谢指标的影响.选取运动成绩、体重、体尺、年龄相近的焉耆马11匹, 随机分为3组,分别为:对照组(3匹)、试验Ⅰ组(4匹)、试验Ⅱ组(4匹).对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ组分别在基础日粮中添加12.5、25 g/(d·匹)的硫辛酸.试验开始第20天对各组马匹进行20 km模拟比赛,赛后30 min内测定各组试验马匹的体温、脉搏、呼吸,同时采集各试验组马匹血液.结果表明,无论是赛后0 min还是赛后20 min,试验Ⅰ、Ⅱ组测得的心率均极显著低于对照组(P <0.01);试验Ⅰ组焉耆马血浆中GSH-Px活力比对照组高44.30%(P <0.05);试验Ⅰ、Ⅱ组焉耆马血浆中SOD活力、T-AOC大小分别比对照组高42.33%(P <0.01)、44.72%(P <0.01)和77.41%(P >0.05)、68.62%(P >0.05);试验Ⅰ、Ⅱ组焉耆马血浆中MDA浓度比对照组低41.09%(P <0.05)、23.48%(P >0.05);试验Ⅰ、Ⅱ组焉耆马血浆中NEFA浓度与对照组相比有升高的趋势(P >0.05).在饲料中添加硫辛酸,可提高焉耆马运动性能,有利于焉耆马运动后生理指标的快速恢复,提高运动后焉耆马的抗氧化能力,减缓焉耆马在运动期间的疲劳症状,相比而言,添加12.5 g/(d·匹)硫辛酸组效果较佳.

试验旨在研究自然霉变玉米和玉米蛋白粉(M)对仔猪生长性能、养分表观消化率及血清酶水平的影响.选用28日龄平均体重(9.59±0.79)kg的健康三元杂交(杜×长×大)仔猪15头,随机分为3组,每组5个重复,每个重复1头仔猪.对照组饲喂基础日粮,50% M组和100% M组分别用自然霉变玉米和玉米蛋白粉替代基础日粮中50%和100%优质的玉米及玉米蛋白粉.预试期7 d,正试期15 d.结果表明:①随着自然霉变玉米和玉米蛋白粉替代比例的增加,仔猪平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)呈线性或二次曲线降低(P <0.05),其中,50% M、100% M组仔猪ADG显著降低,100% M组ADFI显著降低(P <0.05).②随着自然霉变玉米和玉米蛋白粉替代比例的增加,仔猪日粮总能(GE)、有机物(OM)、干物质(DM)、粗蛋白质(CP)和粗脂肪(EE)的表观消化率呈线性或二次曲线降低(P <0.05).③随着自然霉变玉米和玉米蛋白粉替代比例的增加,血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)水平呈线性或二次曲线降低(P <0.05),丙氨酸转氨酶(ALT)水平呈线性或二次曲线升高(P <0.05),碱性磷酸酶(ALP)水平呈先降后升的二次曲线变化(P <0.05).综上所述,在本试验条件下,饲喂自然霉变玉米和玉米蛋白粉可降低仔猪生长性能,降低日粮总能、有机物、干物质、粗蛋白质、粗脂肪的表观消化率,影响机体血清酶的正常水平.

本试验旨在研究植物乳杆菌对肉鸡生长性能和血清生化指标的影响,以探讨植物乳杆菌作为生长促进剂及疾病治疗剂的可能性及其适宜的添加剂量.采用2×3复因子试验设计,即大肠杆菌O78攻毒与未攻毒2个处理和植物乳杆菌3个添加水平(0、0.8‰、1.6‰),选用180只AA肉鸡,随机分为6组,每组3个重复,每个重复10只.试验期42 d,分为前期(1~21 d)和后期(22~42 d).结果表明,攻毒后1~42日龄肉鸡平均日增重(ADG)显著降低(P <0.05),料重比(F/G)显著升高(P <0.05),同时21日龄肉鸡血清AST、ALT、ALP和BUN水平显著升高(P <0.05),TP、GLB水平显著降低(P <0.05),42日龄肉鸡血清ALB、AST、ALT和ALP水平显著升高(P <0.05);日粮中添加植物乳杆菌能提高1~42日龄肉鸡ADG,降低ADFI、F/G,同时可显著提高21日龄攻毒肉鸡血清TP、ALB、GLU水平及42日龄攻毒肉鸡血清TP、GLB水平(P <0.05),显著降低21日龄攻毒肉鸡血清ALP、BUN水平及42日龄攻毒肉鸡血清ALT、ALP、BUN水平(P <0.05);攻毒因素与植物乳杆菌水平因素二者的互作效应对后期(22~42 d)肉鸡F/G有显著影响(P <0.05),对21日龄肉鸡血清ALB、GLU、ALP及42日龄肉鸡血清ALT、ALP有极显著影响(P <0.01).综上所述,植物乳杆菌能提高肉鸡的生长性能,改善血液生化指标,且添加1.6‰植物乳杆菌的总体效果均优于0.8‰的添加量,可以考虑将其作为一种新型的替代抗生素的微生态制剂.

试验旨在研究散栏与栓系两种饲养方式对西门塔尔牛生长过程中不同时期血清部分激素和神经递质水平变化的影响.选用50头体重相近(330 kg左右)、月龄相同(12月龄)、未去势、健康无病的西门塔尔公牛,随机分为散栏组和栓系组,每组25头,分别于2012年10、11、12月及2013年1、2月进行体重及血清部分激素和神经递质水平的测定.结果表明,散栏组日增重在2012年11月显著高于栓系组(P <0.05),在2012年12月及2013年2月极显著高于栓系组(P <0.01).散栏组血清部分激素水平中生长激素(GH)含量在2013年2月显著高于栓系组(P <0.05);甲状腺素(T4)、睾酮(T)含量在2012年12月和2013年2月分别显著和极显著高于栓系组(P <0.05;P <0.01);生长抑素(SS)含量在2013年2月极显著低于栓系组(P <0.01);雌二醇(E2)、促黄体素(LH)含量在2012年12月和2013年2月显著高于栓系组(P <0.05).散栏组牛血清部分神经递质中组胺(His)和5-羟色胺(5-HT)含量在2012年12月分别显著和极显著高于栓系组(P <0.05;P <0.01).综上所述,随着年龄的增加,散栏饲养组牛血清中部分激素水平变化与日增重变化具有一定的相关性.与栓系饲养方式相比,散栏饲养方式较适合于提高西门塔尔牛的日增重.

啤酒糟、木薯渣、饼粕等糟渣类副产品应用于畜牧养殖业过程中面临着诸多问题,如供应具有季节性、水分含量过高难以贮存以及一些糟渣类饲料适口性差和消化率低等,现如今主要是通过干制、青贮等方法来解决此类问题.作者通过对国内外干制、微生物发酵、青贮和营养物质提取技术等方法的研究进行分析总结,以期找出合理贮存方法,从而合理利用糟渣类饲料资源.

为探究荨麻对子宫运动的影响及其可能机制,本试验用生物信号处理系统测定了浓度递增(0.5%、1.0%、2.0%、4.0%、8.0%和16.0%)的麻叶荨麻(Urtica cannabina,UC)醇提液对未孕大鼠离体子宫收缩频率、收缩张力和收缩幅度的影响,并用特异性M-受体阻断剂硫酸阿托品(atropine,A,2.5 μg/mL)和2.0% UC联合用药,分为3个处理: UC单独处理、UC+A和A+UC,观察UC对子宫收缩的影响是否与M-受体有关.结果显示,在UC浓度递增到4.0%时收缩频率较用药前显著增加(P <0.05);浓度递增到4.0%、8.0%时,收缩幅度较用药前极显著降低(P <0.01);但浓度递增UC对子宫收缩张力影响不显著(P >0.05).一次性加入2.0% UC后子宫收缩张力迅速增加并接近僵直,之后逐渐降低.无论UC+A或A+UC处理都使子宫收缩频率较用药前明显加快,收缩张力极显著增加(P <0.01),但2个联合用药处理组之间差异不显著(P >0.05);UC+A和A+UC处理组收缩张力较UC单独用药组均极显著降低(P <0.01).结果表明,UC可兴奋未孕大鼠离体子宫,A可缓解UC引起的子宫僵直或张力增加,但不能阻断UC引起的子宫收缩频率增加.提示UC对未孕大鼠离体子宫的兴奋作用和激动与M-受体有一定关系,但可能还存在其他机制.

本试验旨在了解小瓜虫(Ichthyophthirius multifiliis)感染草鱼后对草鱼肝脏、肾脏和肌肉等组织器官线粒体的影响.人工方法用小瓜虫感染健康草鱼,确定草鱼成功感染小瓜虫后,透射电镜观察肝脏、肾脏和肌肉组织中线粒体结构的变化,检测这些组织器官的过氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量.透射电镜观察结果显示,与正常组相比,感染组肾脏、肝脏和肌肉组织线粒体数量减少,线粒体肿胀、嵴断裂或消失.感染组肝脏、肾脏和肌肉组织中SOD含量平均值均高于正常组,其中肝脏、肾脏表现为差异显著(P <0.05),肌肉组织差异不显著(P >0.05);感染组肝脏、肾脏和肌肉组织中MDA平均含量均低于正常组,其中肝脏、肾脏表现为差异显著(P <0.05),肌肉组织差异不显著(P >0.05).结果表明,小瓜虫感染草鱼后,对草鱼的肝脏、肾脏和肌肉组织的线粒体结构及SOD和MDA活性均有影响.

采用ELISA方法检测了不同体重梯度的川藏黑猪配套系和DLY猪血清中脂联素和胰岛素的含量变化,并分析了其与肌内脂肪含量的关系.结果表明,川藏黑猪在90、110和130 kg体重时血清中的脂联素含量分别为82.49、79.15和82.49 μg/L,胰岛素含量分别为37.44、39.77和37.53 mIU/L;DLY猪血清中的脂联素含量则分别为62.59、62.86和61.81 μg/L,胰岛素分别为48.48、46.45和48.29 mIU/L,相同猪种不同体重间差异均不显著(P >0.05),而相同体重不同猪种间达极显著差异(P <0.01).相关性分析结果显示,脂联素含量与肌内脂肪含量呈极显著正相关(P <0.01),胰岛素含量与肌内脂肪含量呈极显著负相关(P <0.01),提示脂联素和胰岛素可能是通过血液来实现对猪肌内脂肪的整体调控.

本研究旨在探讨肌细胞生成素(myogenin,MyoG)基因多态性与泸宁鸡生长性状的关联性.采用PCR-SSCP和DNA测序技术,对泸宁鸡MyoG基因5'调控区的多态性进行检测.结果表明,泸宁鸡MyoG基因5'调控区存在4个多态位点(A153G、A267G、A446G和C612T).在153 bp处存在A/G突变,形成3种基因型(AA、AG和GG),其中AA基因型肝脏重显著高于AG、GG基因型(P <0.05).在446 bp处存在的A/G突变,形成3种基因型(AA、AG和GG),该位点GG基因型屠宰率显著高于AA、AG基因型(P <0.05),AG、GG基因型胸肌率显著高于AA基因型(P <0.05).以上结果显示,MyoG基因5'调控区的多态性与泸宁鸡肝脏重、屠宰率、胸肌率有一定的关联性,可作为泸宁鸡相应生长性状的候选基因.

为探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)的添加浓度及脱卵丘细胞时间对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育的影响.试验通过在体外成熟液中添加不同浓度(0、10、15、20、30、40 ng/mL)的EGF来研究其对培养44 h的卵母细胞成熟率以及孤雌胚胎发育的影响;在培养开始后的不同时间(18、24、38、44 h)进行脱卵丘细胞处理来研究不同时间脱卵丘处理对培养44 h的卵母细胞成熟率以及孤雌胚胎发育的影响.结果表明,成熟培养基中添加10 ng/mL EGF能显著提高卵母细胞的卵裂率和囊胚率(P <0.05).共培组和独培组卵母细胞培养18 h后脱卵丘细胞成熟率均低于44 h,但差异不显著(P >0.05);共培组卵母细胞培养18 h后脱卵丘细胞的卵裂率和囊胚率显著高于培养44 h(P <0.05);独培组卵母细胞培养18 h后脱卵丘细胞的卵裂率与44 h无显著差异(P >0.05),但囊胚率显著高于培养44 h后脱卵丘细胞(P <0.05).添加10 ng/mL EGF对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎体外发育较好;卵母细胞培养18 h后脱卵丘细胞可提高孤雌胚胎早期发育能力.

为研究不同饲养条件对地方猪种宗地花猪心脏型脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid binding protein,H-FABP)基因表达及肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量的影响,试验利用实时荧光定量PCR技术,分别测定放养型和圈养型宗地花猪背最长肌中H-FABP基因的表达水平,并测定背最长肌的IMF、大理石纹、嫩度.结果发现,圈养型宗地花猪的IMF、大理石纹、嫩度均高于放养型宗地花猪(P >0.05),pH、肉色极显著高于放养型宗地花猪(P <0.01);放养型宗地花猪背最长肌中H-FABP mRNA 水平显著高于圈养型宗地花猪(P <0.05);放养型、圈养型宗地花猪H-FABP基因表达与IMF均无显著相关性(P >0.05).以上结果表明,不同饲养条件影响H-FABP基因表达并在一定程度上影响IMF,但影响不显著.

五指山猪是中国特有的小型猪种,是作为人类实验模型的首选动物之一.为给五指山猪的品种保护和合理开发利用提供基础资料,试验采用解剖学和统计学方法,对不同日龄雌性五指山猪卵巢、输卵管和子宫进行了解剖测量,并对其数据进行了分析处理,探讨了其生长发育特点.结果表明,五指山猪卵巢长径、短径及厚度增长与日龄呈线性相关,其重量增长与日龄呈指数相关,而其指数随日龄增加呈先减后增的趋势;五指山猪输卵管长度和管径的增长与日龄呈线性相关,重量增长与日龄呈指数生长;五指山猪子宫体长度的生长与日龄呈线性生长模式,子宫体生长发育强度在70~110 d之间,其长度在1.093~11.557 cm之间.

供体细胞周期同步化是影响体细胞核移植成功率的重要因素之一.试验分别对绵羊卵丘细胞采用血清饥饿和接触抑制的方法进行细胞周期同步化处理,使用流式细胞仪检测各组细胞周期的分布.结果发现,与对照组相比,卵丘细胞经血清饥饿24~72 h后,显著地增加了G₀/G₁期细胞的百分比(P <0.05);接触抑制24~72 h,G₀/G₁期细胞所占比例与血清饥饿组无显著差异(P >0.05),但显著高于对照组(P <0.05);用经血清饥饿与接触抑制的供体细胞进行核移植后,重构胚卵裂率、桑椹胚率和囊胚率差异不显著(P >0.05),但二者囊胚率显著高于对照组(P <0.05).上述结果证实,血清饥饿和接触抑制均能使绵羊卵丘细胞周期同步化至G₀/G₁,均可用作绵羊体细胞核移植的供体细胞细胞周期同步化处理.

microRNA(miRNA)是一类在转录后调节基因表达的非编码RNA,已有大量研究表明,miRNA参与多种生命活动的调节,包括细胞增殖与分化、激素分泌、新陈代谢、肌肉和脂肪的形成发育、免疫应答反应、疾病的发生和肿瘤的形成等.近年来miRNA已成为生命科学研究中的亮点.随着miRNA的发现及其功能研究的深入,有关乳腺生长发育和泌乳调控的研究也进入了miRNA调控的新层面.文章总结了乳腺发育和泌乳过程中miRNA表达的阶段特异性及健康乳腺和乳腺病变时miRNA的差异表达,综述了miRNA对乳腺发育和泌乳的调节作用,旨在为从miRNA层面研究乳腺发育及泌乳提供新思路.

为了建立一个合理有效的复州牛超数排卵方案,获得更多更优的胚胎,长期保存复州牛的基因,试验从不同批次、哺乳情况、不同来源促卵泡素(FSH)、不同FSH剂量等方面分析了47头复州牛超数排卵效果.结果表明,经超数排卵处理的复州牛头均回收卵数7.98枚,其中头均有效胚数4.62枚;供体牛体况好、超数排卵方案细化的第3批次效果最好,头均有效胚数8.25枚,显著高于第1批次(2.00枚)和第2批次(2.79枚)(P <0.05);未哺乳牛头均黄体数、头均回收卵数和头均有效胚数分别为15.38个、7.63枚、5.75枚,极显著高于哺乳牛的10.64个、2.18枚、0.64枚(P <0.01);日本产FSH头均回收卵数、头均有效胚数分别为12.70和7.50枚,动物所产FSH分别为10.62和7.38枚,二者间差异不显著(P >0.05);动物所产FSH的适宜剂量为每头8.8 mg,头均有效胚数7.38枚,有效胚率为69%.通过优化复州牛的超数排卵方案,取得了理想的超数排卵效果.

为了研究KIT基因的拷贝数与贵州地方猪毛色之间的关系,本试验以黔北黑猪、柯乐猪、糯谷猪、香猪4个地方品种为试验材料,采用实时荧光定量PCR方法检测基因组中KIT基因的拷贝数变异,并与荣昌猪和大白猪2个白毛色猪品种相比较.结果显示,4个贵州地方猪种中,全黑/全棕毛色个体的KIT基因拷贝数以缺失为主,黑色带白斑个体的KIT基因拷贝数全部缺失,而棕色带白个体的KIT基因拷贝数增加、正常各半.大白猪的KIT基因拷贝数显著增加,荣昌猪KIT基因拷贝数以正常类型为主.表明大白猪的白毛色由KIT基因拷贝数增加决定,但荣昌猪的白毛色可能与KIT基因的拷贝数变异之间没有直接的联系;4个贵州地方品猪的全黑/全棕色毛色与KIT基因拷贝数的缺失有关,但柯乐猪和香猪中带白斑个体的KIT基因拷贝数并未增加,提示贵州地方猪品种的白斑毛色的形成机制有一定的特殊性.

为研究京海黄鸡杂交组合亲本BB鸡与FF鸡鸡球虫病抗性的差异,试验选取BB和FF公鸡各30只,饲养至9日龄时,每个群体随机分为免疫组(n=15)和非免疫对照组(n=15),分组当天免疫组京海黄鸡杂交组合亲本按正典鸡球虫病四价活疫苗说明书要求接种鸡球虫疫苗,疫苗免疫后第8天采用生物素双抗体酶联免疫吸附法(ELISA)测定免疫组和非免疫对照组8个血浆球虫抗性指标,并进行差异显著性检验.结果显示,BB鸡免疫组过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和白介素17(IL-17)的含量显著高于FF鸡免疫组(P <0.05);BB杂交组合亲本免疫组CAT含量极显著高于对照组(P <0.01),SOD含量显著高于对照组(P <0.05);FF杂交组合亲本免疫组CAT和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量均显著高于对照组(P <0.05).综合分析结果表明,BB鸡免疫效果优于FF鸡群体,BB鸡球虫病抗性优于FF鸡群体.

为建立H5N1亚型禽流感病毒感染海兰白鸡模型,本研究选取1株鹅源H5N1高致病性禽流感病毒A/goose/guangdong/1/96(H5N1)(简称GD1/96),测定其对4周龄海兰白鸡的半数致死量.感染模型试验中,将30只4周龄海兰白鸡随机分成3组,每组10只,5只直接感染,5只同居,试验组设置一个重复,将病毒液稀释至10^4.5EID₅₀,滴鼻、点眼各0.1 mL,对照组接种PBS,感染后24 h放入同居鸡;感染后连续观察14 d,记录死亡时间,每天采集咽喉拭子和泄殖腔拭子;感染组和同居组第3、5 天各剖解3只鸡,采集气管、肺脏、脑、脾脏、肾脏和十二指肠,进行病毒分离;qRT-PCR法分析感染组和同居组第3、5 天鸡肺组织中IFN-α和TNF-α的相对表达量.结果显示,GD1/96株的鸡胚半数感染量(EID₅₀)为10^-8.167/0.1 mL,对4周龄海兰白鸡的半数致死量为10^4.5 EID₅₀.感染模型试验结果显示,以10^4.5EID₅₀的攻毒剂量感染海兰白鸡,感染组鸡在感染后8 d全部死亡;在感染和同居3 d后,各组鸡的咽喉拭子和泄殖腔拭子均可检测到病毒;感染和同居后第3、5 天,各组鸡的6种组织中均可分离到高滴度的病毒;IFN-α和TNF-α在感染组和同居组的鸡肺脏组织中的表达量均显著增加(P <0.05).本试验建立了海兰白鸡的H5N1亚型禽流感病毒感染模型,为H5N1亚型禽流感病毒的致病机理及表达抗流感基因转基因鸡的研究奠定了基础.

为了解曲靖地区仔猪出现腹泻的细菌性病因,对5个养殖场148份出现仔猪腹泻症状的样品进行细菌分离培养及耐药性分析,结果显示,检出致病性大肠杆菌(E.coli)114份,阳性率为77.03%;沙门氏菌(Salmonella)26份,阳性率为17.57%,混合感染率为17.57%.致病性大肠杆菌和沙门氏菌对多种抗生素产生了耐药性,其中114株致病性大肠杆菌中97株呈多重耐药性,占总菌数的85.09%,26株沙门氏菌中20株呈多重耐药性,占总菌数的76.92%.结果表明,致病性大肠杆菌是导致当地哺乳仔猪腹泻的主要细菌性病原,部分仔猪继发感染沙门氏菌,两种细菌对多种抗生素产生了耐药性,多重耐药现象较严重.

为了解引起石河子地区规模化奶牛场隐性乳房炎奶牛源大肠杆菌的流行情况及其耐药性,本试验采用兰州乳房炎检测板(Lanzhou mastitis test,LMT)对石河子地区11个规模化奶牛场进行了检测,同时对无菌采集的检测为阳性的乳样进行了大肠杆菌分离鉴定及耐药性分析.结果显示,石河子地区11个规模化奶牛场的隐性乳房炎感染阳性率为44.56%(313/1950);对313份无菌采集的乳样进行细菌分离鉴定,结果共分离出病原菌108株,其中大肠杆分离率为14.81%(16/108);药敏试验结果显示16株大肠杆菌对氧氟沙星、头孢唑啉、克林霉素高度敏感,对庆大霉素、氨苄西林、链霉素中度敏感,对阿莫西林、四环素有耐药性.本试验为该地区大肠杆菌源性隐性乳房炎的防制提供科学依据.

本试验旨在探讨中草药体外抑菌作用,为纯中草药消毒剂的临床使用和扩大临床使用范围提供科学依据.本试验以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌为模式菌株,以抑菌圈直径、抑菌浓度、细菌生长曲线和抑菌温度曲线为检测指标,研究纯中草药消毒剂"香连"溶液干膏剂的抑菌活性.试验结果显示,对3种模式菌株的抑杀效果由强到弱依次为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌,MIC分别为7.81、31.25、250 mg/mL,所需时间分别为2、2、6 h,对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌抑杀环境温度为25、37℃.结果表明,"香连"溶液消毒剂不仅可作为环境消毒剂,也可作为饮水消毒剂和细菌性疾病的治疗药物.

为研究加味四君子汤的药效学,试验通过灌服大黄水煎液制备小鼠脾虚症模型,观察不同剂量加味四君子汤对脾虚小鼠一般体征、免疫机能、抗应激能力、胃肠运动和吸收功能的影响.结果表明,加味四君子汤中,高剂量组可改善脾虚小鼠的体征,显著增加小鼠体重和腹腔巨噬细胞吞噬率(P <0.05),在一定程度上提高小鼠体温;中剂量组可显著提高血清中IgM含量、脾脏指数和胸腺指数(P <0.05);不同剂量加味四君子汤均能显著提高腹腔巨噬细胞吞噬指数和延长小鼠游泳持续时间(P <0.05),改善常压耐缺氧能力,降低胃排空率,减缓小肠的推进,提高脾虚小鼠尿液D-木糖排泄量和血清淀粉酶活性.综上所述,不同剂量的加味四君子汤能改善小鼠脾虚症状,提高小鼠的免疫机能、抗应激和消化吸收能力.

对广西南宁市某眼镜蛇养殖场送检的患病眼镜蛇进行病理剖检及病原菌分离鉴定,根据临床发病症状、病理变化、病理组织学检查、病原分离鉴定及致病力试验结果,确诊为缓慢葡萄球菌感染.该分离菌对小鼠有一定的致病性;药敏试验结果显示,分离菌对阿莫西林钠舒巴坦钠、头孢哌酮钠舒巴坦钠、氨苄西林钠、阿莫西林钠、苯唑西林钠、哌拉西林钠、阿米卡星敏感,对头孢曲松钠、氧氟沙星、利福平中介,对链霉素、林可霉素、磺胺间甲氧嘧啶、氟苯尼考、土霉素、诺氟沙星耐药.选择敏感抗生素阿莫西林钠舒巴坦钠添加在水和料中预防发病,患病眼镜蛇肌肉注射头孢哌酮钠舒巴坦钠,46条病蛇经一个疗程治疗,仅5条死亡,效果显著,蛇群无新病例发生,1周后逐渐恢复采食.

本试验通过无菌采集西藏地区牦牛乳汁,进行细菌分离、纯化及PCR鉴定;同时对分离的菌株进行药物敏感性研究,以期在生产实践中对该病原的防治提供参考.结果显示,纯化所得到的细菌为革兰氏阳性链球菌,经生化试验及PCR鉴定为无乳链球菌;药敏试验结果显示分离菌株对青霉素类、氨基糖苷类和氯霉素类等大部分药物敏感.本研究为西藏地区牦牛无乳链球菌引起的乳房炎的有效防治提供参考.

本试验从鲫鱼肠道中分离到1株芽孢杆菌,经生物学特性测定及16S rRNA测序分析,鉴定该分离菌株为高产蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌(命名为JX001).对该分离菌进行嗜水气单胞菌体外抑菌试验,结果发现有明显的抑菌圈和抑菌带,说明该分离菌对嗜水气单胞菌具有较强的抑制作用,在养殖水中加入分离菌JX001可防止嗜水气单胞菌的暴发;同时分离菌JX001在生长代谢过程中产生大量的蛋白酶,可有效地促进蛋白质水解,用于蛋白质饲料的降解.

本试验旨在建立急性应激致禽类肝损伤的试验动物模型.对麒麟鸡(卷羽鸡)进行持续高温应激后,检测血清中的肝损伤酶谷丙转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、胆碱脂酶(CHE)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的改变,观察肝脏病理组织学变化.结果显示,高温应激前期,麒麟鸡血清肝损伤酶AST和ALT活性极显著升高(P <0.01),高温应激后期,AST活性显著低于正常水平(P <0.05),而ALT活性极显著低于正常水平(P <0.01);持续高温应激期间,CHE的活性一直低于正常水平,高温应激后期,CHE活性极显著低于正常水平(P <0.01);在高温应激下LDH活性呈先下降后上升再下降的变化趋势,高温应激后期,LDH活性极显著高于正常水平(P <0.01).高温应激引起麒麟鸡肝细胞出现水泡变性、肝细胞核浓缩现象.结果表明,采用急性热应激可诱导麒麟鸡肝损伤试验模型,试验模型具备肝脏水泡变性和核浓缩病理特征.

牛流行热,又称为三日热,是由虫媒弹状病毒牛流行热病毒(BEFV)引起的牛和水牛的一种传染病.该病会导致牛发热、四肢僵硬、跛行,通常又会完全恢复.其会引起感染动物的死亡,母牛流产,致使奶牛产奶量下降、公牛体重和生殖能力下降.作者结合国内外对牛流行热病毒的研究,从发病历史、流行病学、病原学、临床症状、致病机理、诊断、防控等方面阐述了牛流行热的研究进展,旨在为该病的深入研究提供参考.

本试验从江西省南昌市某规模化猪场送检的2份疑似猪丹毒杆菌引起的急性死亡猪组织中分离出2株可疑菌株,经细菌分离培养、染色镜检、生化试验等实验室诊断,进一步以猪丹毒杆菌16S rRNA的特异性引物进行PCR鉴定,确定2株分离菌为猪丹毒杆菌.然后进行动物致病性试验及药敏试验,并对该厂常用的消毒药进行最小抑菌浓度(MIC)的测定.结果表明,1×10⁸ CFU的剂量可致死小白鼠;分离菌对β-内酰胺类抗菌药高度敏感,对多数抗菌药耐药;该厂常用消毒药的抑菌作用已明显下降.本试验结果对临床防制猪丹毒具有参考意义.

本综述介绍了犬瘟热病毒的6种结构蛋白N、P、L、F、H和M蛋白在病毒入侵宿主和宿主细胞内繁殖的功能;简要描述了犬瘟热病毒入侵动物机体感染传播的机制,其中细胞受体SLAM和PVRL4解释病毒的趋向性;介绍了临床诊断、试验动物法、血清学方法和核酸诊断等鉴别诊断犬瘟热的方法及其优缺点.通过系统了解犬瘟热病毒的感染途径及其诊断方法,有助于发现控制犬瘟热病毒传播的新方法.

妊娠相关糖蛋白(pregnancy-associated glycoprotein,PAG)是由胎盘组织产生并释放到母体外周血液中的大分子蛋白,在妊娠过程中发挥着重要作用.目前,母畜妊娠早期诊断的研究多集中在对奶牛伤害小、准确性高、特异性强的间接检测方法上,如检测血液或乳汁中孕酮等激素,而近年来发展起来的对血液中PAG的检测就是一种主流的方法.作者现就PAG的功能、生化特性、母畜怀孕期间PAG的浓度变化及其在反刍动物早期妊娠诊断中的应用情况进行综述.

噬菌体在其发现之初便被用于细菌感染的治疗.然而,随着抗生素时代的到来,噬菌体的研究便被忽略.近半个世纪以来,耐药菌株不断出现,抗生素治疗面临巨大挑战.噬菌体作为细菌的天然杀手,对细菌性疾病有很好的治疗效果,其研究价值逐渐引起科学家们的重视.作者对噬菌体、噬菌体治疗细菌感染的应用、噬菌体制剂、噬菌体治疗局限性及发展趋势等方面作一简要概述.