试验旨在建立从绵羊羊水、胎儿肾脏组织中分离培养表达Oct-4细胞的新方法，同时，通过实时荧光定量PCR（Real-time PCR）初步探索二者在分子生物学特性方面的联系及差异。采用0.01%胰酶培养液，从同一只受孕中期绵羊的羊水和胎儿肾脏组织中各分离1株细胞。Real-time PCR分析结果表明，从绵羊羊水、胎儿肾脏组织中分离的细胞均表达胚胎干细胞相关标志基因Oct-4、胚胎生殖细胞标志基因SSEA-1、主要组织相容性抗原MHC-Ⅱ、细胞凋亡基因Bax及抑制细胞凋亡基因Bcl-2，不表达MHC-Ⅰ、Nanog及TERT，因此，将羊水中表达Oct-4的细胞暂命名为羊水来源多潜能干细胞(amniotic fluid stem cells，AFSC),胎儿肾脏组织中表达Oct-4的细胞暂命名为肾脏组织干细胞(renal tissue stem cells，RTSC)。相对定量分析结果显示，二者的Oct-4、Bax及Bcl-2基因的相对表达量存在明显差异。绵羊羊水中表达Oct-4的细胞（AFSC）和胎儿肾脏组织中表达Oct-4的细胞（RTSC）体外悬浮培养7 d均能形成类胚体。试验成功建立了从绵羊羊水、胎儿肾脏组织中分离培养表达Oct-4细胞的新方法，实时荧光定量PCR分析初步显示绵羊羊水中表达Oct-4的细胞和胎儿肾脏组织中表达Oct-4的细胞具有相同的起源，并在体内处于一种动态的变化之中。

试验从鸡场周围环境中采集土样，在伊红美蓝培养基平板上分离纯化大肠杆菌，然后以其为宿主，分离相应的噬菌体，并研究其生物学特性。结果表明，共分离到大肠杆菌4株，经16S rDNA鉴定为埃希氏大肠杆菌。其中，以大肠杆菌LY4为宿主分离纯化到1株烈性噬菌体，负染经电镜观察该噬菌体由多面体头部及尾部组成，噬菌斑直径为2.5～3.8 mm，效价2.0×10¹⁰ PFU/mL，最佳感染复数为0.0001；在温度－20～37 ℃、pH 5.0～10.0范围内该噬菌体表现出良好的稳定性，但在人工胃液（pH 1.2）条件下，即可导致死亡；测定其一步生长曲线，该噬菌体潜伏期为20 min，裂解能力强，以上特性表明该噬菌体在鸡舍环境治理中具有潜在的应用价值。

为建立检测马疱疹病毒4型（EHV4）抗体的间接ELISA方法，本研究以原核表达的具有型特异性抗原表位的gG蛋白为检测抗原，经条件优化，成功建立检测EHV4抗体的间接ELISA方法，对该方法进行特异性及重复性试验。结果表明，重组4型gG蛋白仅与EHV4阳性血清发生反应，不与马疱疹病毒1型（EHV1）阳性血清发生反应；组内及组间变异系数均小于10%。采用建立的方法与进口试剂盒对不同省份送检的马血清进行检测比较，两者阳性和阴性符合率均在90%以上。本研究建立的间接ELISA方法为检测EHV4抗体及流行病学调查奠定基础。

为了研究伪狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）立即早期180基因（immediate early 180，IE180）及其功能，试验采用设计的特异性引物通过PCR法对IE180基因进行扩增，并成功构建了IE180克隆载体，经序列测定后，用DNAStar软件对该序列和已发表的7个PRV参考株的IE180基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行比对分析。结果表明，HB-98株IE180基因编码区大小为4425 bp，编码1474个氨基酸，与GenBank中登录的参考株的IE180基因核苷酸同源性为98.4%～99.1%,氨基酸同源性为97.8%～98.4%。系统进化树分析结果表明，该毒株与毒株TNL(登录号：AF352564.2）的亲缘关系较近。

试验旨在优化Smad泛素化调节因子2（Smurf2） siRNA最佳转染条件，筛选最佳siRNA干扰片段，进而实现对Smurf2基因的瞬时沉默，为研究Smurf2基因在马兜铃酸肾病（aristolochic acid nephrohathy，AAN）中的作用奠定基础。本研究通过培养小鼠原代肾小管上皮细胞（renal tubular epithelial cells，RTECs），并以脂质体Lipofectamine^TM 2000为转染介质，将Smurf2 siRNA转染入RTECs；通过观察绿色荧光的表达量及Real-time PCR反应优化转染条件，转染后Real-time PCR检测mRNA表达抑制率。CCK-8法检测Smurf2 siRNA复合物对RTECs活性的影响；同时，用Real-time PCR和Western blotting检测不同位点Smurf2 siRNA对Smurf2 表达的影响。结果显示,当Lipofectamine ^TM 2000与siRNA比例为1.5 μL∶30 pmol时，转染效率最高，为70%～80%；Smurf2-619 siRNA干扰效果最明显；与正常组相比，转染siRNA组的Smurf2蛋白表达水平显著下降（P<0.05）。最终确定了Smurf2 siRNA最佳转染条件，其中Smurf2-619 siRNA对Smurf2 表达的抑制率最高。

基于GenBank中已公布的家犬(Canis familiaris)、赤狐(Vulpes vulpes)、北极狐(Alopex lagopus)和貉(Nyctereutes procyonoides)黑素皮质激素受体1(MC1R)基因序列，利用BioEdit 7.0等生物信息软件，对4种犬科动物MC1R基因进行序列比对和遗传进化分析。结果表明,家犬、赤狐、北极狐及貉MC1R基因为单一外显子，编码区序列长度均为954 bp，碱基组成表现为C＞G＞T＞A,且G+C百分含量高于A+T；编码区碱基序列中共检测到20个突变位点，包括16个单一突变和4个简约突变，转换类型多于颠换，核苷酸和氨基酸序列同源性较高；赤狐与北极狐间的遗传距离最短，邻近法(NJ)、最小进化法(ME)和非对组算数平均法(UPGMA)3种方法构建的进化树基本一致，赤狐与北极狐首先聚为一簇，貉比家犬、赤狐和北极狐分化时间更早。

传染性法氏囊病病毒（infectious bursal disease virus，IBDV）毒株Gx（超强毒株）、F9（中等毒力毒株）、Gt（弱毒株）遗传背景高度相似，但生物学性状差异显著。为研究不同毒力毒株与宿主细胞相互作用的分子细节，本研究将IBDV Gx、F9、Gt毒株的衣壳蛋白VP2基因克隆入pGBKT7载体，分别构建了诱饵载体pGBGxVP2、pGBF9VP2和pGBGtVP2。经Matchmaker Gold Yeast Two-hybrid System验证，结果显示所构建的3个诱饵载体均无自激活作用，对酵母细胞无毒性作用。本研究为利用酵母双杂交系统深入研究IBDV与宿主相互作用奠定了基础。

为建立一种快速、敏感的猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）检测方法，试验据GenBank中PEDV基因组序列，设计并合成针对M基因的内、外2对特异性引物，通过优化反应条件，建立了检测PEDV的巢式RT-PCR方法。结果显示，单一使用外引物或内引物进行常规RT-PCR时检测限量均为50 pg PEDV RNA模板，而使用巢式RT-PCR可检测到50 fg PEDV RNA模板。使用该方法对猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪瘟病毒的扩增结果均为阴性。结果表明，建立的巢式RT-PCR方法特异性、敏感性好，可快速准确地检测出样本中微量PEDV核酸。

菌壳技术是一种新型的灭活疫苗制备方法，通过非变性的灭活方式保存细菌表面多个抗原表位，所制备的菌壳可作为预防细菌病的理想疫苗。本试验从噬菌体PhiX174 DNA钓取裂解E基因，连接至温控原核表达载体pBV220，通过PCR在所构建的pBV220+E上扩增出蛋白裂解部件（protein lysis component,PLC），该部件包含阻遏蛋白cI857、溶菌E基因及终止序列rrnbT1T2，然后将其克隆至广宿主表达载体pBBR1MCS-2中，最终将构建的广宿主裂解质粒pBBR+PLC电转入犬布鲁氏菌RM6/66中。试验结果表明，经42 ℃诱导后，广宿主裂解质粒对犬布鲁氏菌RM6/66的裂解率达100%，成功制备了犬布鲁氏菌RM6/66菌壳疫苗。本试验通过菌壳技术制备的犬布鲁氏菌疫苗对预防宠物犬布鲁氏菌病起到重要作用，同时也对人兽布鲁氏菌疫苗的研制提供新策略。

本试验旨在构建猪生长激素促分泌素受体（pGHS-R）真核表达系统，并瞬时转染人源胚胎肾细胞（HEK293T）观察其表达情况。以猪基因组为模板，通过剪接重叠延伸聚合酶链式反应（SOE-PCR）克隆出pGHS-R的编码区序列，插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中，构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/pGHS-R，酶切鉴定并测序，加myc标签，瞬时转染HEK293T细胞，用Western blotting鉴定该重组质粒是否能在真核细胞中表达相应的目的蛋白。结果显示，本试验成功扩增出pGHS-R编码序列，酶切和测序结果表明pcDNA3.1(+)-myc/pGHS-R构建正确，Western blotting方法证实转染的该质粒能在HEK293T细胞中正确表达目的蛋白。结果表明，本试验成功构建了pGHS-R真核表达载体，并正确表达蛋白，为进一步研究GHS-R的功能奠定了基础。

为寻求一种快速灵敏的环形泰勒虫病PCR检测方法，基于环形泰勒虫裂殖体表面蛋白（Theirelia annulata surface protein,TaSP）基因序列保守区设计特异性引物，通过PCR技术扩增出该基因长为393 bp的高免疫原性区片段。用该引物对环形泰勒虫、中华泰勒虫、瑟式泰勒虫、尤氏泰勒虫、吕氏泰勒虫、绵羊泰勒虫、马泰勒虫、驽巴贝斯虫、牛巴贝斯虫基因组模板进行特异性试验，对环形泰勒虫基因组模板进行梯度稀释后扩增，以确定试验的敏感性，同时用本试验建立的方法与常规显微镜镜检方法对150份血清样品进行检测。特异性试验结果显示，在被检测的9个样本中，只有环形泰勒虫基因组模板中扩增出了符合大小的特异核苷酸片段；敏感性试验结果表明，PCR对环形泰勒虫的扩增效率可达到10^-10；通过对150份血清样品的检测，并与血涂片方法进行比较，结果显示PCR方法具有特异性强、敏感度高等特点，适用于牛环形泰勒虫病的检测。

据GenBank数据库中沙门氏菌种特异性基因（fimY）的保守序列，试验设计1套特异性环介导等温扩增（LAMP）引物，建立了实验猴粪便中沙门氏菌的LAMP检测方法。该方法对沙门氏菌纯培养的敏感性可达1.35×10¹ CFU/mL，对临床样品的敏感性可达1.35×10³ CFU/mL，检测敏感性与常规PCR方法相当；LAMP方法全部反应可在1 ｈ内完成；可通过肉眼观察颜色直接判定结果；对其他常见病原体的检测结果均为阴性。结果表明建立的LAMP方法简便、快速、灵敏、特异，可用于粪便样品中沙门氏菌的快速检测。

为探讨可溶性干细胞因子（stem cell factor, SCF）基因表达水平与山羊毛色间的相关性，本试验利用实时荧光定量PCR（QRT-PCR）技术研究了SCF基因mRNA在黑色和白色山羊皮肤中的表达量，并对结果进行统计分析。经内参基因校正后，黑色山羊皮肤中可溶型SCF的相对表达量是白色山羊相对表达量的0.27倍（P>0.05）。可溶型SCF mRNA表达量可能与山羊毛色表型不存在相关性。

本试验旨在构建用于核酸适配子筛选的随机寡核苷酸文库并对筛选过程中的PCR条件进行优化。利用Primer Premier 5.0构建了随机寡核苷酸文库并据文库两端固定序列设计引物，对对称PCR和间接不对称PCR中的上、下游引物的比例、模板量、退火温度、循环数等条件进行优化并验证其重复性，得到了对称PCR和间接不对称PCR的最佳反应条件，获得较理想的dsDNA和ssDNA并具有良好的重复性。本试验成功构建了寡核苷酸文库，优化了PCR条件，为适配子筛选和后续试验奠定了一定的基础。

据猪传染性胃肠炎病毒（transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV）S基因序列设计1对特异性引物,通过对实时荧光定量RT-PCR反应条件的优化，建立了SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测TGEV的方法，同时对12份病料进行检测，并与常规RT-PCR进行比较。结果显示，该方法的敏感性达到43.07拷贝/μL，具有良好的特异性和重复性，而常规RT-PCR最低只检测到4.307×10³ 拷贝/μL，敏感性较低。本试验建立的检测TGEV S基因的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法为传染性胃肠炎的鉴别诊断及TGEV的分离鉴定奠定了技术基础。

猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）是世界各地重要猪病毒性病原之一，每年给养猪业造成重大损失。本试验建立了应用TaqMan-LNA的荧光定量RT-PCR和逆转录—环介导等温扩增(RT-LAMP)2种PRRSV检测方法。结果表明荧光定量RT-PCR和RT-LAMP检测下限分别为10²和10¹ 拷贝数/μL，都具有良好的特异性。临床样本检测结果同样表明2种方法都具有良好的特异性和灵敏度。本试验所建立的TaqMan-LNA荧光定量RT-PCR和RT-LAMP可有效的应用于PRRSV的检测。

microRNA（miRNA）是近年来研究较为广泛的一种短小RNA，主要功能是调节与个体生长、发育、疾病发生过程有关基因的表达，参与生命过程中一系列重要进程，包括早期发育、细胞增殖、细胞凋亡、脂肪代谢、细胞分化等。作者主要概述了家禽miRNA对胚胎发育、性腺发育、肌肉生长、脂肪代谢的调控作用，并对家禽miRNA的研究前景进行了简单探讨，以期为下一步开展相关研究提供参考。

为比较家兔与BALB/c小鼠对猪瘟病毒E2蛋白靶向化树突状细胞疫苗的敏感性，本研究首先根据小鼠与家兔体重比，分别免疫糖基化E2蛋白与E2蛋白（家兔2 mg/只，小鼠20 μg/只），在不同时间采血制备血清，通过ELISA方法测定血清中IgG水平。结果显示，接种后BALB/c小鼠出现了轻度的免疫应答，而家兔产生了强而持久的免疫保护。本研究对BALB/c小鼠的接种量进行了进一步摸索，结果表明，50与100 μg/只免疫效果明显优于20 μg/只；其中50 μg/只E2蛋白与糖基化E2蛋白免疫后，血清IgG水平较高且稳定；而100 μg/只糖基化E2蛋白免疫后，免疫初期，糖基化E2蛋白组产生了免疫抑制，至21 d抗体水平逐渐升高且达极高水平；但100 μg/只E2蛋白免疫后，整个免疫期内抗体水平均较低，只有轻微波动。以上结果表明，家兔对糖基化E2蛋白与E2蛋白的敏感性均显著高于BALB/c小鼠，且糖基化E2蛋白免疫效果明显好于E2蛋白，BALB/c小鼠的糖基化E2蛋白最佳免疫剂量为50 μg/只。

本研究以番鸭肝脏为试验材料，通过RT-PCR扩增出番鸭脂肪酸合成酶（fatty acid synthase，FAS）部分CDS序列，利用相关分子生物学软件对其进行分析，同时采用实时荧光定量PCR技术检测FAS基因在成年番鸭各组织中的表达特性及填饲对番鸭肝脏和腹脂中该基因表达的影响。结果表明，克隆出的番鸭FAS基因CDS片段大小为1122 bp，编码374个氨基酸，与近缘物种禽类核苷酸同源性为92%～99%；实时荧光定量PCR结果表明，番鸭FAS基因在肝脏和腹脂中高表达，说明FAS具有组织表达特异性；填饲导致肝脏中FAS基因表达显著升高（P＜0.05）。本试验结果可为进一步研究FAS基因在番鸭肝脏脂质代谢中的作用奠定基础。

试验旨在研究日粮中添加女贞子提取物对蛋鸡产蛋高峰后期生产性能和免疫功能的影响，选用47周龄海兰褐壳蛋鸡180只，采用单因素完全随机分组试验设计，分为4组，每组3个重复，每个重复15只鸡，对照组饲喂基础日粮，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础日粮中添加0.05%、0.10%和0.15%女贞子提取物。结果显示,与对照组相比，3个试验组的日均产蛋量和产蛋率均极显著升高（P＜0.01），试验Ⅲ组的料蛋比降低了10.9%（P＜0.01），4组间蛋均重和破软蛋率均无显著差异（P＞0.05）；试验Ⅱ、Ⅲ组的睾酮含量与对照组相比极显著降低（P＜0.01），3个试验组孕酮、雌二醇和IgM、IgA及白细胞介素-2的含量均极显著高于对照组（P＜0.01）。结果表明，在日粮中添加女贞子提取物可显著提高蛋鸡产蛋高峰后期的生产性能和免疫功能。

选择5周龄健康、体重(367.9±4.53)g的三黄鸡（♂）224只，随机分成4个处理（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ），每个处理4个重复，每个重复14只鸡。Ⅰ为对照组，饲喂基础日粮；Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ为试验组，分别饲喂添加3.75‰、5.00‰和6.25‰代谢有机酸产品（以短链的酮酸和有机酸为主）的日粮。结果表明，与对照组相比，Ⅲ组平均日增重显著增加（P＜0.05），Ⅳ组料重比显著降低（P＜0.05）；各处理组对8周龄三黄鸡胸肌率、腿肌率和腹脂率均无显著影响（P＞0.05），但可提高血清总蛋白、白蛋白水平，降低谷丙转氨酶含量。提示，代谢有机酸产品可有效地提高三黄鸡平均日增重，降低料重比，并通过调节血清蛋白和酶的水平促进三黄鸡生长，其适宜添加浓度为5.00‰。

试验旨在使用“大型动物开放回流式呼吸测热装置”并结合生长代谢试验，研究纤维素酶和活性干酵母对草原红牛日粮表观消化率及能量代谢的影响。选用8月龄健康、体重（170±10）kg的草原红牛公牛4头，采用4×4拉丁方试验设计，以混合精料和羊草为基础日粮。试验分4期，每期37 d。Ⅰ组为空白对照组，在日粮中不添加纤维素酶和活性干酵母；Ⅱ组在日粮中添加190 mg/kg纤维素酶；Ⅲ组在日粮中添加200 mg/kg活性干酵母；Ⅳ组在日粮中添加190 mg/kg纤维素酶+200 mg/kg活性干酵母。结果表明：①Ⅲ、Ⅳ组干物质消化率与Ⅰ组相比均差异显著（P<0.05）,Ⅲ组与Ⅰ组相比干物质消化率提高了9.01%；②Ⅲ组对日粮中有机物质、粗蛋白质、无氮浸出物、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维、纤维素和半纤维素的表观消化率影响与Ⅰ组相比均差异显著（P＜0.05），Ⅲ组纤维素和半纤维素的表观消化率与Ⅰ组相比分别提高了14.65%和18.81%；③Ⅲ组对能量代谢中的消化能和代谢能影响与Ⅰ、Ⅱ组相比均差异显著（P＜0.05），与Ⅳ组相比差异不显著（P＞0.05），Ⅳ组比Ⅰ组相比代谢能提高了16.63%；④纤维素酶和活性干酵母混合添加未见组合效应。提示，活性干酵母能提高草原红牛日粮利用率及减少能量损失，混合添加未见叠加效应。

甜菜碱及其盐酸盐作为一种高活性的甲基供体，在甲基代谢中起着重要的营养调控作用，同时具有调节体内渗透压、促进脂肪与氨基酸代谢、增强蛋白质合成和改善肉品质等重要作用，故甜菜碱作为一种新型、安全的营养性添加剂在饲料工业和动物生产中得到了越来越广泛的应用。作者综合近年来国内外有关甜菜碱的文献报道，就其生理学功能及其在畜牧生产中的应用进行综述。

霉菌毒素的广泛存在对动物及人的健康产生严重的威胁，霉菌毒素降解剂可降解霉菌毒素，减少其对动物和人的危害，目前国内外对霉菌毒素降解进行了深入研究。作者主要对霉菌毒素的危害、霉菌毒素降解剂的分类及其在饲料中的应用进行综述，以期为霉菌毒素研究者提供较新的参考资料。

试验旨在研究微生态制剂对育肥羔羊生长性能、养分表观消化率和血液生化指标的影响。选用180只体重(20.45±0.77)kg的育肥羔羊，随机分为3组，每组3个重复，每个重复20只。对照组饲喂基础日粮，试验Ⅰ、Ⅱ组在基础日粮中分别添加0.1%、0.2%微生态制剂，试验期30 d。结果显示，试验Ⅰ、Ⅱ组的平均日增重分别比对照组提高了12.88%（P<0.05）和7.36%（P>0.05）；平均日采食量虽有所升高但差异均不显著（P＞0.05）；料重比分别比对照组降低了6.50%和6.00%（P＜0.05）。日粮中添加微生态制剂可显著提高有机质、粗蛋白质和酸性洗涤纤维的表观消化率（P＜0.05）；试验Ⅰ、Ⅱ组血清中尿素氮含量显著低于对照组（P＜0.05），血糖含量显著高于对照组（P＜0.05），但血清总蛋白、白蛋白、总胆固醇和甘油三酯的含量试验组与对照组相比差异均不显著（P＞0.05）。结果表明，日粮中添加微生态制剂可提高羔羊生长性能和营养物质表观消化率，降低血清尿素氮含量，提高血糖含量，0.1%添加组优于0.2%添加组。

为探索并建立巴马小型猪骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)的体外培养及鉴定方法，本研究在健康猪髂后上棘取骨髓，采用密度梯度分离法分离单个核细胞，按2×10⁷个/孔的密度加入预先包被人纤维连结素（HFN）的6孔细胞培养板中，用含内皮细胞生长因子的选择性培养基诱导培养，逐日在倒置相差显微镜下观察，MTT法检测EPCs增殖情况；流式细胞术（FACs）检测EPCs中AC133和vWF的表达纯度；免疫荧光法双染检测EPCs表面相关抗原ac-LDL和UEA-1。结果发现，从巴马小型猪骨髓分离的EPCs具有增殖能力；MTT结果显示细胞于48 h换液二次贴壁后3～5 d增殖明显，7～10 d增殖加速并出现条索状结构；FACs检测结果显示，二次贴壁细胞vWF阳性细胞百分率74.91%，AC133阳性细胞百分率79.54%，而未经诱导的二次贴壁细胞vWF和AC133阳性率分别是33.65%和39.87%；细胞经免疫荧光双染后Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1表达呈阳性，vWF和AC133免疫荧光染色阳性。由此可见，分离培养的细胞具有自我增殖和分化潜能，是内皮祖细胞。

细胞凋亡是由多基因控制的细胞自主有序的死亡，以维持内环境稳定。其在多细胞生物的组织分化、器官发育、机体稳态的维持中有重要意义。细胞凋亡可促进因感染、损伤所致的细胞死亡并被机体清除，临床上细胞凋亡与许多疾病有直接关系。B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）家族蛋白是参与细胞凋亡的重要调节分子，既可抑制也可促进细胞凋亡。作者概述了Bcl-2蛋白家族成员、结构特点、Bcl-2蛋白家族与细胞凋亡的关系及生物学意义。

试验旨在探讨乳酸菌―芽孢菌发酵黄芪对小鼠免疫功能的影响。将84只小鼠分成6组，每组14只，分别为生理盐水组（阴性对照组）、未发酵黄芪组（阳性对照组，黄芪生药浓度为150 mg/mL）、试验Ⅰ组（黄芪生药浓度为60 mg/mL）、试验Ⅱ组（黄芪生药浓度为90 mg/mL）、试验Ⅲ组（黄芪生药浓度为120 mg/mL）、试验Ⅳ组（黄芪生药浓度为150 mg/mL）。小鼠采用灌胃方式给药30 d，最后处死小鼠测定其体重、免疫器官（胸腺和脾脏）系数、免疫因子（IgG、IL-6、sIgA）。结果显示，给药30 d后，试验组小鼠体重明显升高；试验Ⅰ组免疫器官系数极显著高于对照组（P＜0.01）；试验Ⅲ、Ⅳ组免疫因子IgG和sIgA均极显著高于对照组（P＜0.01）。由此可知，乳酸菌―芽孢菌发酵黄芪对小鼠的免疫功能有很好的促进作用。

为探讨鸡转移因子脂质体（chicken transfer factor liposome，CTFL）对小鼠腹腔巨噬细胞及消化吸收的影响，本试验选取了大小相近的18～22 g SPF级雌性小鼠30只，随机分成3组，每组10只，分别腹腔注射鸡转移因子（chicken transfer factor，CTF）、CTFL和生理盐水2 mL/只，隔日注射1次，连续注射5次，第11和21天检测小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率，同时分别取十二指肠、空肠和回肠固定到10%福尔马林液中、石蜡切片、苏木素—伊红染色，显微镜下观察，测量各段小肠的绒毛长度。结果显示，CTF和CTFL组对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率的影响与对照组相比均差异极显著（P＜0.01），CTF和CTFL组相比差异不显著（P＞0.05）。小鼠饲养11和21 d时，CTF和CTFL组的十二指肠绒毛平均长度均显著长于对照组（P＜0.05），且CTFL组的十二指肠绒毛平均长度比CTF组长，而空肠和回肠平均绒毛长度均无显著差异（P＞0.05）。结果表明，CTFL和CTF均能显著提高机体免疫功能，CTFL对小鼠消化吸收的促进作用比CTF强。

试验旨在研究羧甲基葡聚糖（CMG）注射剂药效，从而为临床动物疾病防制提供试验依据。试验选取小鼠作为试验动物，进行急性毒性试验及体内抗金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及大肠杆菌感染试验。另外，采用MTT方法测定了CMG对奶牛淋巴细胞转化率影响，并对CMG注射剂进行了奶牛临床初步应用试验。结果表明，小白鼠对CMG最大耐受量在240 mg/只以上，且在4 mg/只浓度下对金黄色葡萄球菌、无乳链球菌及大肠杆菌感染的保护率分别为60%、62.5%、87.5%；CMG能明显提高奶牛淋巴细胞转化率，临床应用试验组比空白对照组隐性乳腺炎发病率下降26.8%。本试验结果表明，CMG注射液可作为潜在新型兽用免疫增强剂在动物临床应用。

瘤胃上皮不仅是瘤胃微生物附着、生长并进行消化和代谢的主要部位，也是营养物质吸收、转运、代谢的主要场所，同时也是瘤胃内环境与血液循环系统之间的一道重要生理屏障。因此，维持瘤胃上皮结构和功能的完整性对保持反刍动物健康和生产性能具有重要意义。作者对循环式尤斯灌流系统的基本构造、注意事项及反刍动物瘤胃上皮机械屏障的评定方法进行了综述，旨在为维持瘤胃上皮屏障功能提供参考。

为建立止咳平喘颗粒的质量标准，本试验采用薄层色谱法（TLC）对组方中紫菀、桑白皮、百部、枇杷叶及鱼腥草进行定性鉴别，采用高效液相色谱法测定本方中紫菀酮的含量。结果显示，TLC鉴别专属性强，斑点清晰；采用C₁₈反相柱，以乙腈—水为流动相，检测波长为200 nm，其线性范围为10.2～510.0 μg/mL，回归方程为A＝11481C＋36617（R²＝1，n=6）。平均回收率为99.89%，RSD=1.57%。本试验所建立的方法简便、准确、专属性强、重复性好，可有效地控制颗粒的质量。

研究旨在观察连续灌胃复方姬松茸多糖口服液对大鼠产生的病理和毒理变化。将80只Wistar大鼠随机分为高、中、低剂量组和溶剂对照组，分别以5.6、2.8、1.4 g/kg复方姬松茸多糖口服液和等体积蒸馏水(NS)对照品对大鼠连续灌胃9周，观察和检测大鼠临床症状、血液学和脏器的病理变化情况。结果显示，在临床症状、病理学检查中各试验组大鼠与对照组均未见明显差异。各组大鼠的体重均未见显著差异(P＞0.05)。3个剂量组中，高剂量组的心脏指数、肝脏指数、肾脏指数和中剂量组的心脏指数、肝脏指数与对照组相比均差异显著(P＜0.05)；高剂量组的WBC、LYM、MID、GRA、PLT和中剂量组的WBC、GRA、PLT与对照组相比均差异显著(P＜0.05)；高剂量组的Cre、TG及中、低剂量的TG与对照组相比均差异显著(P＜0.05)。结果表明，中、低剂量复方姬松茸多糖口服液对大鼠无明显毒副作用。

多不饱和脂肪酸是一种具有特殊生物学功能的物质，在机体免疫调节、细胞增长、基因调控、脂质代谢及抗癌等方面都具有重要的作用，作者简述了多不饱和脂肪酸的生物学功能及其在鸡生产中的应用研究进展，包括对鸡生产性能、蛋肉品质和免疫机制等方面的调节作用。

本研究采用PCR-SSCP法与DNA直接测序技术相结合对兴义鸭和樱桃谷鸭多巴胺受体D1 (dopamine receptor D1,DRD1)基因编码序列(coding sequence，CDS)区130－587 bp区域的多态性进行检测，并分析其多态性对樱桃谷鸭生长性状的影响。结果表明，在樱桃谷鸭和兴义鸭DRD1基因编码区130－587 bp区域内均检测到3种基因型：AA、BB和AB，2个等位基因：A和B；AA基因型均为优势基因型，频率分别为0.7416和0.5643，等位基因A均为优势等位基因，频率分别是0.8539和0.7204；多态信息含量分别为0.2184和0.3217，分别处于低度多态和中度多态位点，樱桃谷鸭群体中该座位基因型分布处于Hardy-Weinberg平衡（P>0.05），兴义鸭群体则偏离了Hardy-Weinberg平衡（P<0.05）；序列比对发现2个SNPs位点，其中c.189 T＞C为同义突变，c.507 T＞A为错义突变，导致丝氨酸（S）变成精氨酸（R）。关联分析结果显示，BB基因型樱桃谷鸭个体的8周龄重和12周龄体斜长显著高于AB基因型（P<0.05），10周龄重、12周龄重和12周龄胸深显著高于AA和AB基因型（P<0.05）。研究结果揭示该多态座位可能是影响鸭生长性状的一个标记辅助选择位点。

为研究藏系绵羊的贾洛、红原、欧拉3个类群与新疆细毛羊、阿勒泰羊的遗传多样性及系统进化关系,试验对该5个类群89个绵羊个体的mtDNA D-loop区全序列进行测序分析。结果显示，该5个绵羊类群89个个体总共发现有168个多态性位点，单一多态位点（singleton variable sites） 82个，简约信息位点（parsimony informative sites）86个，碱基A+T的平均含量达到了62.5%，明显高于C+G（37.5%），共检测到70种单倍型，核苷酸多样性（Pi）在0.01040～0.02892之间，单倍型多样性在0.640～1.000之间，平均核苷酸差异数（K）为18.340，Tajima’s D中性检验发现这5个类群均不显著。通过构建NJ进化树结果表明，在藏系绵羊中红原类群与欧拉类群的亲缘关系最近，其次藏系绵羊中贾洛类群才与红原、欧拉类群聚为一类，再依次聚类的为新疆细毛羊、欧洲摩弗伦羊、东方盘羊；盘羊与羱羊单独聚为一类。该5个类群存在明显的3个母系起源。

为了探究猪Lbx1和Lbx2基因的甲基化模式，本研究采用亚硫酸盐测序技术，在猪背最长肌中分析Lbx1和Lbx2基因启动子和外显子1的甲基化状态。结果发现，Lbx1基因的甲基化差异区在外显子1处的CpG岛内；Lbx2基因的甲基化差异区在CpG岛外的启动子区。Lbx1基因CpG岛内的高密度甲基化可能参与下调该基因在背最长肌中的表达量。

亲吻素-1（Kiss-1）基因参与哺乳动物性腺轴的调节，同时也参与其他生殖功能的调控，作者综述了Kiss-1基因在雄性哺乳动物生殖系统的研究进展，并对该领域今后的研究方向进行了分析。

试验采用直接骨髓法制备林芝藏鸡染色体，通过显微自动成像系统观察藏鸡细胞有丝分裂全过程，包括间期、早前期、前期、中期、后期和末期，并分析了藏鸡有丝分裂过程染色体的形态变化规律。通过比较有丝分裂各期的形态，结果发现藏鸡有丝分裂的前期染色体伸展最长，碱基暴露最多，适合于做基因定位工作。同时进行了藏鸡染色体的核型分析，数据统计结果发现林芝地区藏鸡染色体数目2n=78,其中前5对染色体和性染色体中有3对中央着丝粒（m）染色体、1对近中着丝粒（sm）染色体、2对端着丝粒（t）染色体。与前人试验结果进行了比较，结果显示存在一定差异，原因仍需进一步试验验证。

试验旨在鉴定吉林省某雏鸡孵育基地病死雏鸡组织中分离出的1株致病性菌CCGGD201101株并测定其致病性。对疑似致病菌进行生理生化试验、16S rDNA测序鉴定，并人工接种昆明鼠，测定其半数致死量，验证细菌毒力。经鉴定该菌为鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）。以鲍曼不动杆菌CCGGD201101分离株为研究对象，并以鲍曼不动杆菌标准株（ATCC 19606）为对照，测得半数致死量，进一步证明鲍曼不动杆菌病死鸡分离株CCGGD201101具有较强致病性。

为分析广东地区猪源大肠杆菌耐药性及其系统进化背景，试验于2011年从患病猪分离出264株大肠杆菌，包括粪便源131株和肝源133株，采用琼脂稀释法测定18种抗菌药物的敏感性，多重PCR法确定系统进化关系，并对不同来源菌株的耐药性和系统进化背景进行分析比较。结果发现,大肠杆菌多重耐药现象严重，共存在128种耐药谱型。分离菌株对氨苄西林、复方新诺明、萘啶酸和四环素高度耐药，对黏菌素、头孢他啶和阿米卡星较敏感。种群进化分析结果表明，分离菌株主要分布在共生型的A组和B1组（91.66%），且不同来源菌株的种群进化分布差异不显著(P＞0.05)。结合药敏试验结果发现，不同进化组别的分离菌株对特定抗菌药物的耐药性存在显著差异（P＜0.05）。通过对大肠杆菌耐药性及其系统发育群进行综合分析，为兽医临床用药提供依据。

产志贺毒素大肠杆菌（Shiga toxin-producing Escherichia coli，STEC）是一类危害严重的食源性病原菌，能引起人类的严重疾病，如出血性结肠炎、溶血性尿毒症等，牛、羊等反刍动物是引起人类发病的主要宿主来源。作者总结了产志贺毒素大肠杆菌病的流行病学现状，就产志贺毒素大肠杆菌染色体和毒性质粒上的主要毒力因子的研究进展作一综述。

芽孢杆菌属细菌在芽孢状态下，对外界环境及理化因素具有高度抵抗力。适宜的温度、湿度及营养条件能促进芽孢萌发，影响其对常规灭菌方法的抵抗力。本试验选取蜡样芽孢杆菌作为研究对象，在适宜培养条件下使其形成芽孢，通过研究萌发后芽孢对温度、H₂O₂及含氯消毒剂等条件的抵抗力，证实了适当的条件（温度37 ℃、湿度40%、pH 7.4、30 min）能有效促进蜡样芽孢杆菌芽孢萌发，致使芽孢对高温（80 ℃、2 h）、H₂O₂（1.5 mol/L、2 h）及含氯消毒剂（有效氯含量约800 mg/L、2 h）等常规灭菌方法抵抗力明显降低，并能被有效杀灭和灭活，相对有效杀灭率分别达98.4%、98.9%及99.1%，有效杀灭率分别为88.3%、88.7%及88.9%，这对进一步研究芽孢杆菌属细菌的杀菌消毒条件具有重要参考意义。

试验旨在观察自行研制的重组猪干扰素α1冻干粉针剂对猪的安全性。将20头健康仔猪随机分为4组（3组试验组和1组对照组），每组5只，3组试验组分别肌肉注射低、中和高剂量重组猪干扰素α1冻干粉针剂，连续注射7 d，对照组同时肌肉注射生理盐水。对动物基本生命体征、血常规、血液生化指标、组织标本病理学指标进行观察。各试验组仔猪的外表及行为特征均正常；体温、体重的变化也在正常范围之内；重要脏器如脑、肺脏、肝脏、心脏和脾脏病理解剖HE染色结果显示无器质性病变发生；血常规、血液生化指标均正常。试验结果表明本项目研制的重组猪干扰素α1冻干粉针剂对仔猪无明显毒副作用，使用安全。

为进一步筛选有效的鸡球虫病抗性评价指标，并为后续鸡球虫抗性评价体系的建立及鸡球虫抗病育种提供依据，试验将京海黄鸡分为感染和非感染对照2个组，感染组每只雏鸡灌饲2.5×10⁴个柔嫩艾美尔球虫卵囊，用酶联免疫检测法测定10个球虫抗性血液指标。结果显示，①感染后第3天感染组和非感染对照组的临床表现和各项指标差异均不明显，表明感染后这一阶段无法用现有指标检测到显著变化；②感染后3～5 d感染组鸡体增重为负，且感染组和非感染对照组相比差异极显著（P＜0.01），表明感染后3～5 d的变化最为剧烈；③感染后8 d IFN-γ浓度显著低于非感染对照组（P＜0.05）；丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽—过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）浓度均有不同程度提高，且感染组与非感染对照组SOD浓度差异显著（P＜0.05），其余3个指标均差异极显著（P＜0.01）；④白细胞介素2(IL-2)、IL-16、IL-17、一氧化氮（NO）、β-胡萝卜素（β-C）浓度感染组和非感染对照组相比差异均不显著（P＞0.05）。结果表明，感染后3～5 d内的体增重，CAT、GSH-Px、MDA、SOD 4种抗氧化酶及IFN-γ细胞因子在血浆中的浓度可作为鸡球虫抗性评价指标。

本试验旨在调查新疆石河子地区奶牛乳房炎源大肠杆菌的某些生物学特性及其耐药状况，以提高药物疗效，减少牛奶中药物的残留。试验从新疆石河子地区患乳房炎奶牛的乳样中分离纯化并鉴定出21株大肠杆菌，并对大肠杆菌分离株进行抗菌药物敏感性分析。结果表明，21株大肠杆菌对21种抗菌药物中的6种药物耐药率超过50%，其中最多的耐药15种，最少的耐药5种，耐药6及6种以上的菌株共占到76.19%。提示，该地区奶牛乳房炎源大肠杆菌对多种药物已产生了不同程度的耐药性，且存在严重的多重耐药情况。

本试验旨在检测2株枯草芽孢杆菌对致病性大肠杆菌和沙门氏菌抑菌作用。以致病性大肠杆菌和沙门氏菌作为指示菌，采用2株枯草芽孢杆菌与大肠杆菌和沙门氏菌同时接种及先后接种的方法，对其与大肠杆菌和沙门氏菌的生物颉颃作用进行了研究。结果表明，先接种枯草芽孢杆菌再接种致病菌抑制作用最明显且在24 h时抑菌作用最强，同时接种枯草芽孢杆菌和致病菌抑制作用次之，先接种致病菌再接种枯草芽孢杆菌的抑制作用最弱。提示，2株枯草芽孢杆菌对致病性大肠杆菌和沙门氏菌都有一定的抑制作用，但抑制作用的强弱有差异，且与枯草芽孢杆菌和致病菌接种的时间长短有关。

本试验旨在建立鸡病毒性关节炎动物感染模型，为疫苗效力检验奠定基础。试验采用禽呼肠孤病毒（avian reovirus，ARV）AV2311强毒株和ARV T98强毒株，分别以10^2.0、10^3.0、10^3.5、10^4.5和10^5.5 ELD₅₀/0.2 mL剂量感染49日龄SPF鸡，感染后观察10 d，每天观察、检查接种鸡足垫、小腿或跗关节的肿胀、跛行及红肿情况，于感染后6 d采血，感染后10 d剖检，应用ELISA检测方法测定血清抗体。结果显示，10^5.5和10^4.5 ELD₅₀/0.2 mL感染剂量鸡发病率均达100%，鸡足垫肿胀严重，呈暗红色或紫色，AV2311株症状稍轻于T98株；10^3.5 ELD₅₀/0.2 mL感染剂量鸡发病率为90%，10^3.0和10^2.0 ELD₅₀/0.2 mL感染剂量鸡发病率为80%。ELISA检测结果显示，2毒株10^4.5和10^5.5 ELD₅₀/0.2 mL感染剂量血清抗体均为阳性。试验结果表明，ARV T98株毒力强，具有好的免疫原性， 最佳感染剂量为10^4.0 ELD₅₀/0.2 mL，为鸡病毒性关节炎疫苗质量标准的研究提供了重要依据。

为研究黄芩苷能否增强喹诺酮类药物环丙沙星对鸵鸟源大肠杆菌的抗菌活性，本试验先用二倍稀释法测定单个药物对鸵鸟源大肠杆菌的抗菌活性，进而筛选出10株耐药菌株（T1～T4、T7、T8、T10、T12、T21、T25），然后采用微量肉汤稀释棋盘法，用环丙沙星和黄芩苷对以上10株耐药菌株进行体外联合药敏试验。结果发现环丙沙星和黄芩苷单用的MIC分别为64和512或1024 μg/mL；联合用药后，对10株耐药菌的分级抑菌浓度进行测定，其中T1、T2、T3、T7、T8、T10、T12、T21的分级抑菌浓度均为0.375，T4、T25的分级抑菌浓度均为0.25，10株菌的分级抑菌浓度均小于0.5。结果表明，环丙沙星和黄芩苷联合对鸵鸟源大肠杆菌起协同作用。

为满足规模化养猪场制定免疫及消毒计划的效率与时效性越来越高的需求，以山黑猪种猪场繁殖数据网络平台为基础，结合山黑猪种猪及商品猪的免疫及消毒计划，提出了猪免疫与消毒计划制定的数据管理规范，并以.Net 2005为开发语言，以SQL Server 2005为网络数据库，研制了山黑猪种猪场的智能化免疫与消毒动态提醒的分析与统计系统。系统运行结果表明，构建的分析系统实现了对不同性质猪、不同免疫种类的动态免疫提醒，以及针对不同猪舍为单位的消毒计划提醒，提高了免疫实施精细化方案制定的效率及综合统计能力，有助于人力的安排、药品的配给。此外，只要改变猪群具体的免疫计划与消毒计划，系统也可移植应用于其他猪场。研究进一步指出，免疫与消毒计划的及时、有针对性的调整，猪个体信息的动态与完整，是保证系统分析与制定免疫及消毒具体行动计划时效性的前提。

为了探明兰州地区奶牛子宫内膜炎病原菌区系分布及抗生素耐药情况，指导临床合理用药。笔者对从兰州地区3个规模化奶牛场采集的47份奶牛子宫内膜炎样品进行了细菌分离鉴定，同时对分离鉴定出的4种主要病原菌采用纸片扩散法（K-B法）进行了抗生素耐药性检测。病原菌区系分布结果表明，引起兰州地区奶牛子宫内膜炎的病原菌主要为化脓隐秘杆菌（37.1%）、大肠杆菌（24.2%）、屎肠球菌（22.6%）和无乳链球菌（16.1%）。抗生素耐药性结果表明，4种主要病原菌对大部分抗生素均产生了不同程度的耐药性，尤其是对青霉素、复方新诺明、奥复星和杆菌肽耐药性最为严重，其耐药率为60%～100%。对4种病原菌均较敏感的药物主要有头孢他啶、先锋霉素V和氟苯尼考，其敏感度达100%。

β-内酰胺类抗生素常用于畜牧业预防及控制动物感染性疾病。由于使用方法不当或不遵守休药期规定等原因，造成动物源食品中该类抗生素残留超标，给人类健康带来严重危害，因此需严格控制其在动物源食品中的残留。作者就目前常用的β-内酰胺类抗生素兽药残留的检测方法，包括微生物检测法、理化检测法及免疫分析法等作一简单介绍，分析各种方法的利弊，以期为动物源食品中药物残留检测技术的进一步开发提供参考。

在拥有300头基础母猪的种猪场，利用直观、快速、准确和无损伤的便携式兽用B超仪抽样检测91头配种16 d以上的母猪在20与50 d的妊娠率。结果表明，18～20 d确诊的非妊娠准确率为100%，40～50 d确诊的妊娠准确率为100%；根据诊断结果对妊娠、疾病、返情、未妊娠不返情的母猪采取护理、治疗、补配和催情等措施，减少了母猪个体与群体的非生产天数。本试验建立了一种简单、快速、准确的母猪B超早期妊娠诊断技术，该技术可提高母猪个体及群体的繁殖力及猪场的经济效益。

牛奶中抗生素残留量超标将会严重危害消费者的身体健康。目前，高效液相色谱—串联质谱联用（HPLC-MS/MS）技术的成熟和发展已成为解决这一问题的强有力工具。该技术集分离、定性和定量于一体，分析速度快、选择性强、灵敏度高和重复性好，可同时对同一样品中多种药物成分进行检测。作者综述了近年来HPLC-MS/MS技术在牛奶抗生素残留检测中的研究进展，并阐述了HPLC-MS/MS技术的前处理方法、色谱质谱条件及其检测结果。

试验旨在探讨硫化氢供体硫氢化钠改善疲劳状态下肌力减退的作用。采用脉冲式电流直接刺激腓肠肌作为疲劳模型，对比硫氢化钠和任氏液分别对蟾蜍腓肠肌疲劳的影响。结果表明，硫氢化钠在浓度为5×10^-4、1×10^-3、2×10^-3 mol/L时，离体腓肠肌达到最大收缩幅度90%、50%和10%的时间极显著长于在任氏液作用下的离体腓肠肌(P<0.01)；5.6 mg/kg硫氢化钠也极显著延长了在体腓肠肌达到最大收缩幅度90%、50%和10%的时间(P <0.01)。表明外源性硫化氢具有延缓肌肉疲劳的作用。

本研究旨在建立以免疫亲和色谱（IAC）柱为净化手段的高效液相色谱荧光检测方法（HPLC-FLD），可同时检测牛肌肉组织中的阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素和埃普里诺菌素残留。样品用甲醇提取，IAC柱净化，以乙酸酐—甲基咪唑的乙腈溶液作衍生化试剂，96 ℃条件下，完全衍生化100 min。在5、10、50和100 ng/g添加水平下，牛肌肉组织中4种药物添加回收率为77.3%～119.5％，变异系数为1.5%～18.9％，方法的检测限为0.8 ng/g。该方法可用于检测牛肌肉组织中的阿维菌素类药物残留。