通过开展牛奶中主要风险因子分析研究,提出风险因子的分类、预警和消除措施,是国际上提高乳品质量安全水平通用的做法,值得学习和借鉴。农业部奶产品风险评估实验室(北京)对牛奶质量安全的主要风险因子,包括霉菌毒素污染、兽药残留、农药残留和激素类药物残留等,进行了分析和比较研究,形成的系列结果将陆续刊出,以期对我国牛奶质量安全风险因子的分析、预警和消除研究有所帮助。

为获得有活性的硫化物醌还原酶(sulfide-quinone reductase,SQR)并研究其功能,试验利用常规PCR方法从荚膜红细菌(Rhodobacter capsulatus)中克隆了SQR基因全长CDS区1284 bp;成功构建了SQR基因的原核表达载体pRSETA-SQR,并转入大肠杆菌中进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,SQR融合蛋白成功表达,在37 ℃条件下,0.4 mmoL/L IPTG诱导表达6 h,50 ku的SQR融合蛋白表达量最高。可溶性分析结果表明,SQR重组蛋白以包涵体形式存在,经过纯化、复性后得到较高纯度的SQR活性蛋白。蛋白活性分析结果表明,该酶具有明显的消化底物decyl-UQ的能力,测定其酶活Km值约为4。

通过RT-PCR和重组PCR技术扩增出猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)疫苗株sM、M、S基因,构建重组腺病毒穿梭质粒。穿梭质粒与BJ5183细菌同源重组构建同源重组腺病毒质粒,同源重组腺病毒质粒经Pac Ⅰ酶切后转染AD-293细胞,获得3个含有目的基因的重组腺病毒。将3个具有感染能力的复制缺陷性重组腺病毒共同感染Vero细胞,细胞上清液进行小鼠免疫特性研究。结果表明,共同感染Vero细胞所得蛋白能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。

本研究采用Real-time PCR的方法检测了分析了民猪的IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR和IGFBP-3基因在骨骼肌中冷诱导前后的表达变化。结果表明,IGF-Ⅰ基因表达水平极显著上调(P＜0.01),IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR基因表达水平极显著下调(P＜0.01),而IGFBP-3冷诱导前后表达变化差异不显著(P＞0.05)。

本试验旨在克隆并表达中国荷斯坦奶牛髓样分化蛋白-2(myeloid differentiation protein -2,MD-2)基因,并用Western blotting进行鉴定。采用RT-PCR技术从中国荷斯坦奶牛外周血白细胞中扩增MD-2 cDNA,并将扩增产物与pMD20-T载体连接,重组质粒经测序鉴定后,构建pET28a-MD-2重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blotting分析。结果表明,目的基因含有1个483 bp的开放阅读框,编码161个氨基酸;与黄牛、黑猩猩和小鼠MD-2的cDNA序列同源性分别为99.38%、77.02%、68.12%,氨基酸同源性分别为98.75%、65.00%和58.13%。融合蛋白以包涵体的形式存在,分子质量约为25 ku。说明本研究成功克隆并表达了中国荷斯坦奶牛MD-2 cDNA,为其进一步的功能研究提供了理论依据。

为调查养猪场环境中家蝇携带猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)情况,2010年采集贵州某猪场家蝇样本,采用RT-PCR方法筛选阳性样本,接种Marc-145细胞分离培养病毒,对分离获得的家蝇样本的PRRSV Nsp2基因进行克隆和序列分析。针对PRRSV N基因家蝇样本扩增出377 bp的特异性片段,阳性家蝇样本接种的Marc-145细胞出现明显CPE现象,针对PRRSV Nsp2基因细胞培养物扩增出1064 bp的特异性片段,测序结果显示,家蝇样本的细胞培养物的PRRSV Nsp2基因片段与贵州猪场猪源PRRSV流行株相比具有较高的核苷酸同源性,高达97.1%~98.5%。从而初步推断家蝇也可能成为PRRSV携带者。

为寻求一种快速、有效的马泰勒虫 (Theileria equi,T.equi) PCR检测方法。基于马泰勒虫18S rRNA基因序列,在其V4高变区设计特异性引物Te-18F、Te-18R,通过PCR技术获得了531 bp的核酸片段。用该引物对马泰勒虫、马泰勒虫和驽巴贝斯虫混合样本、驽巴贝斯虫、尤氏泰勒虫、中华泰勒虫、环形泰勒虫、绵羊泰勒虫、吕氏泰勒虫和瑟氏泰勒虫基因组模板进行特异性试验。同时对马泰勒虫基因组模板进行不同浓度稀释后扩增,以便于确定试验的敏感性。用本试验建立的方法与常规显微镜镜检方法对45份马属动物血样进行检测。特异性试验显示,在被检测的9个样本中,只有马泰勒虫及马泰勒虫和驽巴贝斯虫混合模板中扩增出了符合大小的特异核酸片段。驽巴贝斯虫、尤氏泰勒虫、中华泰勒虫、环形泰勒虫、绵羊泰勒虫、吕氏泰勒虫和瑟氏泰勒虫的扩增结果均为阴性。灵敏度试验结果表明,PCR对马泰勒虫的扩增效率可达到10^-13。对本试验建立的PCR检测马泰勒虫方法评估结果显示,PCR对马泰勒虫的检出率为17.78%(8/45),显微镜镜检结果只有8.89%(4/45)两者的符合率为100%。本试验建立的马泰勒虫PCR检测方法不失,为一种好的检测方法。

蛋白质样品的双向电泳分离效果受各种试验条件的影响较大,针对不同来源的蛋白样品进行试验条件的优化可获得具有较高分辨率的双向电泳图谱。试验拟建立优化的奶牛乳腺上皮细胞核蛋白质双向电泳分离体系,按标准条件对蛋白质进行双向电泳分离,并对关键因素进行优化,采集电泳图谱并分析双向电泳图谱中蛋白斑点的数量、图像分辨率及背景条纹的变化。通过对试验条件的筛选和优化,成功建立了具有较高分辨率的奶牛乳腺上皮细胞核蛋白质组双向电泳分离体系。

miRNA是一类在转录后水平调节基因表达的非编码RNA。病毒编码的miRNA在调控病毒基因自身表达及病毒与宿主相互作用方面起着重要作用,这一类miRNA有助于提高病毒的致病性。因此,通过使用与病毒miRNA互补的单链核苷酸即抗miRNA寡核苷酸(anti-miRNA oligonucleotides,AMOs)来抑制病毒miRNA的表达,从而沉默其功能达到抑制病毒复制的效果,这可能成为一种治疗病毒性感染的新方法。文章描述了研究较深入的病毒miRNA与其功能及AMOs的修饰方式,并讨论了AMOs应用的可能性。

根据虎线粒体细胞色素b核苷酸保守序列设计引物和探针,建立了一种快速鉴定虎制品的TaqMan实时荧光定量PCR方法。以梯度稀释的含有目的扩增片段的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应。结果显示,5.0×10⁵~ 5.0×10¹拷贝/μL范围内定量PCR均有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为50拷贝/μL。对豹、狮子、猫等7种非虎哺乳动物DNA样本的检测结果均为阴性。本研究建立的实时荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性和重复性好、方便经济的特性,在虎制品的检测与鉴定中具有良好的应用前景。

朊蛋白(prion protein,PRNP)基因编码朊蛋白,是引起疯牛病的主效基因。本研究利用PCR方法首次从杂交牛(大额牛×云南黄牛)基因组中扩增了PRNP基因,GenBank登录号为HQ875337。PCR产物直接双向测序表明,该序列包含杂交牛PRNP基因795 bp的开放阅读框(ORF),编码264个氨基酸前体蛋白。生物信息学分析结果发现,该蛋白包含1个信号肽、3个α螺旋、2个β折叠、6个八肽重复序列、1个疏水区域、1个二硫键和1个糖基磷脂酰肌醇锚定位点。与已报道的其他牛PRNP基因进行序列比对分析,核苷酸和氨基酸的同源性均在97%以上。

通过腹腔途径用体内含有荧光蛋白的蜥蜴利什曼原虫感染BALB/c小鼠,感染后采其脏器做冰冻切片,荧光染料染色后用荧光显微镜观察,并经PCR鉴定,结果显示蜥蜴利什曼原虫感染小鼠后,主要分布于心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏。另外,成功建立了利什曼原虫荧光定量PCR检测方法,并采用该方法检测感染蜥蜴利什曼原虫后BALB/c小鼠体内利什曼原虫的增殖情况,结果显示,感染13 d内,BALB/c小鼠体内蜥蜴利什曼原虫呈波浪状增殖。这一结果为研究蜥蜴利什曼原虫感染人和动物的致病机理和免疫方法及疫苗研制等方面提供了基础理论依据。

环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是近年来发展出来的一种新型核酸扩增技术。自建立以来,该技术不断改进和发展,并广泛应用于病原微生物的检测,文章将就此展开综述。

近些年围绕16S~23S rRNA基因间隔区发展起来的分子生物学技术为细菌多样性的研究开辟了新的途径,使得人们在细菌多样性的研究中得以摆脱传统分离培养的束缚,进而使分析方法得以长足拓展,并为指导实践提供可靠的理论依据,作者就16S~23S rRNA基因间隔区序列的特点、应用及发展前景作一简述。

为检测外源基因整合在转基因克隆牛染色体上的定位情况,通过优化染色体荧光原位杂交技术,成功对4头人转铁蛋白转基因克隆牛的整合位点进行定位。每头牛分析中期分裂相40个以上,杂交率在53.1%~86.8%之间,且杂交信号分别位于转基因克隆牛的11号、15号和19号染色体的相应位置;另外采用定量PCR方法对杂交信号强弱不同的转基因克隆牛个体进行整合位点拷贝数的检测,结果显示拷贝数的多少与杂交信号强弱直接有关。

不饱和脂肪酸(unsaturated fatty acid,UFA)不仅能提高奶牛饲料能量浓度,改善能量负平衡,还能够调控乳脂组成,使牛奶中含有更多有益人体健康的功能性成分(如共轭亚油酸和n-3多不饱和脂肪酸)。笔者主要从UFA的营养特性、奶牛日粮中UFA的来源及UFA在奶牛上的研究3个方面进行综述,为进一步调控奶牛乳脂肪酸提供理论基础。

试验旨在研究枯草芽孢杆菌对黄羽肉鸡生长性能及营养物质代谢率的影响,为枯草芽孢杆菌制剂在黄羽肉鸡生产中的应用提供理论依据。选择60羽7周龄体重相近、健康的黄羽肉鸡,随机分成5组,每组设4个重复,每重复3羽,设一个对照组,饲喂基础日粮;试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加0.05、0.1、0.15、0.2 g/kg的枯草芽孢杆菌制剂(活菌数为10⁸ CFU/g)。试验期30 d。结果表明,与对照组相比,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组日增重分别提高了49.03%(P<0.05)、46.39%(P<0.05)和37.04%(P<0.05),各试验组饲料报酬均有所提高但无显著差异;各试验组可极显著提高粗蛋白质的代谢率(P<0.01),粗脂肪、钙、磷及表观代谢能的代谢率均有提高,试验Ⅲ组极显著提高黄羽肉鸡对钙、磷的吸收利用率(P<0.01),并且,试验Ⅲ组粗蛋白质、粗脂肪的代谢率最高。因此,在黄羽肉鸡日粮中枯草芽孢杆菌制剂适宜的添加量为0.15 g/kg。

电解水是一种瞬时、广谱、高效、廉价、安全无污染无残留的新型消毒剂。根据电解方式和电解程度不同,可分为5种不同类型,且不同类型的电解水在畜禽生产中的用途各不相同。电解水在食品加工中应用已经较为广泛,近年来研究人员开始将其应用于畜禽生产中的杀菌消毒,取得了良好的效果。将碱性电解水作为畜禽饮用水,可促进畜禽机体健康。作者综述了电解水的生成机理、理化性质和作用机制等,并对其在畜禽生产中的主要应用范围进行了介绍。

本试验利用枯草芽孢类微生态制剂饲喂樱桃谷肉鸭,通过检测鸭增重和料重比,探索枯草芽孢类微生态制剂对肉鸭生产性能的影响,为合理开发利用枯草芽孢类微生态制剂提供了理论依据和技术支持。

固态发酵法是一种切实可行的提高豆粕营养价值的方法。豆粕是畜禽最重要的植物性蛋白源,但其含有的抗营养因子限制了幼龄动物对蛋白质的有效利用。研究结果表明,发酵豆粕对动物的生长性能、消化和免疫功能具有积极的影响。作者就固态发酵豆粕的营养价值研究及其在动物饲养中的应用进行了综述。

试验旨在明确T淋巴细胞在中国恒河猴各组织中的表型与分布,为疾病模型研究提供基础数据。取外周血、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结及肠道组织,从中分离出淋巴细胞。使用流式细胞术检测分析各种表型的淋巴细胞在组织间的分布。结果表明,淋巴结中CD4⁺ /CD8⁺ T细胞比值高于外周血,肠道固有层中最低,三者差异显著。记忆性T细胞在外周血和肠道固有层T细胞中比重较大,而淋巴结中主要为幼稚T细胞。CD4⁺ T细胞中中心记忆T细胞Tcm为主要亚群,而CD8⁺ T细胞主要为效应记忆细胞Tem。外周血与肠道固有层中增殖T细胞比例相当,而淋巴结中T细胞增殖水平相对较低。各组织中CXCR4受体表达量普遍高于CCR5受体,其中肠道固有层CCR5受体表达水平最高。值得注意的是,有一小群表型CD3⁺ CD4⁺ CD8low的细胞仅在肠道固有层中存在,经分析其功能活性应高于肠道CD4单阳性T细胞。因此,测定了健康中国恒河猴各表型T淋巴细胞在多种淋巴组织中的基础数值,为相关模型研究奠定基础。

从发病白缘(鱼央)病变组织分离纯化1株G^-细菌,经过染色镜检、生理生化试验、16S rDNA序列分析和动物试验鉴定为气单胞菌属维氏气单胞菌,并编号为LA201001。采用Kirby-Bauer法检测了维氏气单胞菌分离菌株对30种常用抗菌药敏感性。结果显示,维氏气单胞菌分离株LA201001对小鼠和白缘(鱼央)具有致病性,且耐药性较强,对强力霉素、四环素、复方阿莫西林、氨苄青霉素、头孢氨苄、头孢噻吩、卡那霉素等21种受试药物耐受,仅对庆大霉素、丁胺卡那、诺氟沙星、环丙沙星和氧氟沙星5种受试药物敏感。

为了解中国地方猪种的血液生化指标,试验用Monarch660全自动生化分析仪检测了通城猪、陆川猪和宁乡猪3个地方猪种24项血液生化指标,统计结果表明,3个品种间有6项指标差异极显著(P＜0.01),通城猪和宁乡猪间有4项指标差异不显著(P＞0.05),陆川猪和宁乡猪间有3项指标差异不显著(P＞0.05)。通过3个地方猪品种间同一指标的比较,以及与人参考值、中国小型猪品种、其他地方猪品种和国外引进猪品种比较,为中国地方猪品种资源的合理保护和利用提供科学依据。

细胞凋亡在机体生理功能中起着重要作用,是机体清除体内损伤、衰老及具有潜在威胁性细胞的一种基本方式。沉默信息调节因子2相关酶1(silent information regulator 2 homolog 1,SIRT1)作为哺乳动物Sirtuin家族的一员,自发现以来作为重要的调控因子被广泛研究;最近研究报道SIRT1调控一系列转录因子如p53、FOXO家族和NF-κB,在细胞凋亡中起关键的作用。作者主要阐述了SIRT1的分子生物学特性、表达调控及SIRT1与细胞凋亡的关系。

β-羟丁酸(β-hydroxybutyric acid,BHBA)是血液中酮体的重要组成成分,在禁食和能量供应不足的情况下,可作为大脑和其他组织的重要能量来源。推测BHBA可能作为中枢神经系统的信号物质在能量和摄食行为调节中发挥重要作用。由于BHBA对神经元具有神经保护性作用,所以有可能成为治疗神经元疾病的有效物质。文章主要概述了BHBA在中枢神经系统中的作用及其可能的信号通路。

利用PCR-SSCP对296头成年大通牦牛MyoD1基因(GenBank登录号:NC_007313)外显子3全序列及3'UTR部分序列进行SNPs筛选,并将筛选到的突变位点与牦牛五项体尺指标进行相关性分析。结果发现,在3'UTR 1976 bp处检测到1个新突变,突变由C→T的转换造成,由此产生3种基因型:CC、CT、TT。利用最小二乘分析研究了该位点不同基因型对大通牦牛体尺性状的影响。结果表明,CC基因型个体的胸围、体重显著高于CT、TT基因型个体(P＜0.05),CC、CT基因型个体的体斜长显著高于TT基因型个体(P＜0.05),3种基因型对体高及管围的影响差异不显著(P＞0.05)。

利用测序和PCR-RFLP技术对85只湖羊个体瘦素(leptin)基因第2内含子进行多态性分析,检测到A99G和C150T两个SNPs,两座位的优势基因型均为野生基因型,基因型频率分别为0.7882和0.8000,突变纯合型均未检测到;卡方检验结果表明,两座位的基因型频率处于哈代—温伯格平衡(P＞0.05);统计分析结果表明,A99G和C150T座位的不同基因型与初生重、3月龄体重、6月龄体重之间的相关关系不显著(P＞0.05)。

试验采用聚合酶链式反应方法,从野生乌苏里貉耳部肉中提取DNA,扩增出18S rDNA的全序列,并对其进行克隆测序,获得长度为1831 bp的序列,并将序列提交到GenBank上,经BLAST分析结果表明,测序得到的乌苏里貉18S rDNA与其他物种同源性均在90%以上,说明18S rDNA基因具有较高的保守性,可以作为分类学当中系统进化分析的重要参考依据。

为了研究生长分化因子11(growth differentiation factor,GDF11)基因与蒙古羊多脊椎性状间的关系,本研究首先克隆了该基因启动子区序列,并采用相关生物信息学软件对该序列进行了分析。结果得到512 bp的蒙古羊GDF11基因启动子区序列,整个序列碱基构成为A占10.55%,G占16.80%,T占31.84%,C占40.82%,整个序列G+C含量百分比为57.62%。通过在线软件对蒙古羊GDF11基因启动子区生物信息学分析结果表明,该区域未找到符合条件的CpG岛,也未发现TATA box或CAAT box结构,但存在一处潜在的转录起始位点和HSF2、HSF2、GATA-1、AML-1a和MZF1 5个潜在转录因子,并且具有5种基序结构:EGF_1、CTCK_1、ANAPHYLATOXIN_1、VWFC_1和DEFENSIN。本研究结果为进一步揭示该基因对蒙古羊脊椎数的调控机理提供了重要的理论依据。

试验以屠宰场犬卵巢为材料,研究了不同生殖周期阶段(卵泡期、黄体期和乏情期)对犬卵母细胞体外发育的影响。结果表明,从卵泡期卵巢采集A类COCs的数量为22.67±11.02个,显著高于黄体期10.67±5.51个和乏情期7.25±4.92个(P＜0.05);体外培养48 h时,卵泡期、黄体期和乏情期卵母细胞达到MⅠ-MⅡ期比率分别为19.2%±15.3%、26.8%±21.1%、9.8%±10.4%,卵泡期与黄体期之间差异不显著(P＞0.05),但两者均显著高于乏情期(P＜0.05);体外培养72 h时,卵泡期、黄体期和乏情期卵母细胞达到MⅠ-MⅡ期比率分别为25.2%±13.5%、6.6%±6.7%、9.2%±5.5%,卵泡期显著高于黄体期和乏情期(P＜0.05)。同时,随体外培养时间延长,不同生殖周期阶段犬卵母细胞达到MⅠ-MⅡ期比率存在不同变化。说明不同生殖周期阶段对犬卵巢卵母细胞体外发育有一定影响,且与培养时间有关。

目前,鹅繁殖性能普遍较低,大多数鹅品种年产蛋量20~40枚,严重阻碍其产业化发展。较强的就巢性是导致其繁殖性能低的重要原因。大量研究结果表明,家禽就巢行为的发生与维持是由遗传、环境和机体内分泌激素共同控制的。但是,家禽就巢主要受几种激素调控。众多研究结果表明,催乳素(prolactin,PRL)是家禽重要的生殖激素,血浆中高水平的PRL诱导和维持家禽就巢,活性血管肠肽(vosactive intestinal peptide,VIP)是PRL分泌因子,不但能促进垂体细胞分泌PRL,且还在5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(dopamine,DA)调节PRL分泌中发挥中枢作用。因此,VIP在家禽就巢内分泌调控中起到重要的作用。

将近90%以上的恶性卵巢癌发生于覆盖在卵巢表面的单层上皮细胞——卵巢表皮上皮(ovarian surface epithelium,OSE),将其称之为卵巢表皮癌。由于先前研究人员未找到合适的动物模型,卵巢表皮上皮细胞的培养方法在近期才得以确立。作者旨在于总结卵巢表皮上皮的生物学特性及其细胞培养方法和不同物种间卵巢表皮上皮特性的变化。

奶牛白细胞黏附缺陷症是近年新发现的一种常染色体单基因隐性遗传病,由常染色体上CD18基因单碱基突变(A→G)引起的隐性遗传疾病,隐性基因纯合时导致白细胞表面的β2整合素表达明显减少或缺乏而引起临床发病,患病牛的主要特征是机体免疫力降低、易患病从而影响生产性能,严重影响了奶牛场的经济效益。文章综述了该病检测方法的研究进展。

为了解禽白血病病毒J-亚群(ALV-J)感染对安徽省优良地方品种鸡—五华鸡生产性能和免疫性能的影响,在对五华鸡开展ALV-J血清学感染检测调研的基础上,对进入产蛋高峰期的五华鸡ALV-J血清阳性鸡群和阴性鸡群开展了为期18周的试验对比观察研究。结果表明,ALV-J血清阳性(感染或曾经感染)对五华鸡没有造成明显的发病和死亡增高现象;对鸡群新城疫(ND)、禽流感H5和H9疫苗的免疫效果没有呈现明显抑制;但对鸡群的产蛋率和平均蛋重会造成一定程度的下降(对照组平均产蛋率和蛋重分别为56%和0.055 kg,而试验组为53.37%和0.051 kg),料蛋比有一定程度的上升(对照组的料蛋比为3.49∶1,试验组为3.92∶1)。目前ALV-J感染虽然不会造成五华鸡明显的发病、死亡及免疫抑制,但可造成明显的生产性能下降和饲养成本的提高,必须引起高度重视,应及早开展原种鸡的ALV-J净化工作。

本试验旨在研究取代基对黄酮类化合物流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)抑制活性的影响,为黄酮类流感病毒神经氨酸酶抑制剂的研发提供理论依据。应用流感病毒神经氨酸酶活性抑制试验评价了4种黄酮类化合物对NA的抑制活性。芹菜素-7-葡萄糖苷、芹菜素具有H9N2亚型流感病毒NA抑制活性,蒙花苷、汉黄芩苷无H9N2亚型流感病毒NA抑制活性。4'位的取代羟基对于黄酮类化合物的NA抑制活性不可或缺,7位的糖苷键能增强该类化合物的NA抑制活性。

为了筛选防制胚泡着床障碍中药,本试验利用皮下注射米非司酮所致的小鼠胚泡着床障碍模型,以妊娠率、着床胚泡数、雌激素和孕激素及其比值为指标,将丹参、黄芪、川芎、黄芩、白术、菟丝子、桑寄生、续断、党参、当归等中药组成复方进行筛选和药效评价。筛选试验结果表明,方3组妊娠率显著高于方1组、菟丝子组和续断组(P＜0.05),也高于方2组和对照组,说明方3有利于小鼠胚泡的着床。方3的药效试验表明,保胎组妊娠率极显著高于对照组和高剂量组(P＜0.01),显著高于低剂量组(P＜0.05)。保胎组孕酮水平、孕酮和雌二醇比值极显著高于高、低剂量组、对照组和正常组(P＜0.01),孕酮和雌二醇比值显著高于中剂量组(P＜0.05),而保胎组、低剂量组和正常组雌二醇水平显著低于高剂量组和对照组(P＜0.05),中剂量组孕酮水平显著高于对照组(P＜0.05)。这表明方3能提高小鼠的孕酮水平及孕酮和雌二醇比值,有利于小鼠胚泡着床。

咪唑苯脲是一种具有良好治疗和预防作用的动物专用抗原虫药。文章综述了其理化性质、抗原虫机理、药代动力学、毒性、残留和临床应用等方面的研究进展,旨在为其在兽医临床的合理使用提供理论依据。

本研究分离了1株鸭肝炎病毒(duck hepatitis virus,DHV),并对其进行了分型研究。取广东某鸭场疑似DHV致死8日龄雏鸭肝脏,肝脏组织处理后经鸭胚接种分离纯化病毒。分离毒株经动物回归试验、ELD₅₀测定、中和试验等确定为血清Ⅰ型DHV,同时通过RT-PCR检测及序列分析,从基因分型角度也验证分离毒株为DHV-Ⅰ,并将该分离毒命名为GD株。

狂犬病是一种感染中枢神经系统的烈性人兽共患传染病,所有温血动物均可感染,一旦发病目前无有效方法治疗,病死率几乎100%。狂犬病病毒基因组编码的5种结构蛋白在病毒转录和复制中发挥重要作用,其抗原性及基因序列可作为病毒分型的重要依据,文章对其特点作一综述。

研究发现一些选择性乳酸菌株具有抑制肠道疾病炎性因子产生、稳定菌群、改善肠道黏膜免疫系统的功能。文章结合炎症性肠炎介绍乳酸菌通过调节炎性细胞因子IL-1β、INF-γ的表达,改善肠道黏膜炎症,控制疾病的进一步恶化。进而探讨其作用机制,为进一步研究乳酸菌调节宿主肠道慢性炎症提供新的思路。

2011年5月中旬在吉林省白城地区的某养鹅场疑似小鹅瘟病死雏鹅的肾脏、肝脏、脑和脾脏组织中分离到1株病毒,选用未免疫小鹅瘟疫苗的健康母鹅所产的14日龄鹅胚,进行鹅胚接种试验,连续传代、血凝试验、琼脂扩散试验、电镜观察、PCR鉴定和动物回归试验,初步确定该病毒为鹅细小病毒,命名为BC1105株。

猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)有两个基因型,分别为PCV1和PCV2。PCV2有致病性,它可以引发多种相关的疾病(PCVAD),如断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)等。该病毒主要通过攻击猪的淋巴细胞,产生免疫抑制,诱发细胞凋亡,还可以和其他病毒协同感染,大大增加了动物的发病率及死亡率。文章对PCV2分子致病机理及引起的相关疾病和防治作一综述。

为寻找引起养殖锦鲤(Ornamental carp)病害的致病因子,从北京地区自然患病的锦鲤体内分离疑似致病菌,再将此菌人工感染健康锦鲤,确定致病菌。采用生理生化鉴定与16S rRNA基因序列的系统发育学分析相结合的方法确定该致病菌株的系统发育地位,同时采用琼脂扩散法测定该菌对抗菌类药物的敏感性。试验结果表明,从病鱼体内分离得到革兰氏阴性杆菌CL0901,人工感染健康锦鲤后,能够引起鱼生病甚至死亡,症状与自然发病症状一致。菌株CL0901与Aeromonas veronii ATCC 35624T的16S rRNA基因序列相似性达99.9%,构建系统发育树,并结合形态特征与生理生化测定结果,将该致病菌鉴定为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。在21种抗菌类药物对该菌的抑菌试验中,左氧氟沙星、诺氟沙星和洛美沙星等10种药物的抑菌效果较好。本研究为进一步防制锦鲤养殖病害提供依据。

本试验为探讨复方参芩对人工感染心肌炎型细小病毒病犬的疗效,将犬分为空白对照组、模型组、阳性药物对照组、复方参芩组,用犬细小病毒接种建立动物模型,用复方参芩预防犬细小病毒病,应用生物信号采集系统的心电图技术测定试验动物的心率、心电图,取心脏石蜡包埋、切片、镜检。试验结果显示,攻毒后3 d,模型组犬心率和心电图异常率增加,心肌损害严重;复方参芩组犬心率保持正常,心电图异常率显著低于模型组犬,心肌组织与空白对照组相比差异不显著。试验犬感染病毒第5天,空白对照组犬未出现死亡,模型组犬死亡率为100%,复方参芩组保护率为80%,阳性药物对照组保护率为70%。表明复方参芩能有效预防心肌炎型犬细小病毒病。

牛支原体(Mycoplasma bovis,Mb)是引起牛肺炎、关节炎、乳房炎和中耳炎等众多疾病的主要病原之一,牛支原体引起的疾病在欧美地区广泛蔓延并造成巨大的经济损失。中国2008年首次报道在犊牛肺炎中分离到牛支原体,目前国内对牛支原体的认识还很欠缺,现对牛支原体生物学特性及其膜蛋白进行简要综述,以期为牛支原体病的防控与治疗提供一定的参考依据。

新城疫作为禽类重要的传染病之一,从发现至今已有80多年的历程,给养殖业带来不可估量的经济损失,因此对于该病的研究具有重要的意义。文章简要介绍了新城疫的几种免疫分析方法和分子生物学检测方法。

无乳链球菌是导致奶牛乳房炎的常见病原菌之一,为了掌握青海地区无乳链球菌的流行情况及常用药物的敏感性,从而为本地区更好的预防与治疗奶牛乳房炎提供保障。本试验在青海地区16个奶牛场共采集258份乳房炎乳样,经革兰氏染色与绵羊鲜血琼脂培养基培养纯化,获得疑似链球菌137株;随后经玻片法血浆凝固酶试验、CAMP试验、生化试验与动物致病性试验对无乳链球菌进行鉴定,结果显示,137株链球菌中含有无乳链球菌42株,分离率为30.7%;经K-B纸片扩散法对无乳链球菌耐药性检测结果显示,该地区无乳链球菌主要对头孢类高度敏感,对氧氟沙星、磺胺类、氨苄青霉素与阿米卡星中度敏感。

本试验旨在了解2009—2010年云南部分猪场猪主要传染病的流行情况,通过对云南地区病例的临床诊断、流行病史调查、病理剖检和实验室确诊,最后统计猪主要传染病疑似病料阳性率。其中,猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)检出率为22.46%(31/138);猪繁殖与呼吸道综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)检出率为26.23%(32/122);猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)检出率为91.30%(84/92);伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)检出率为46.99%(39/83);病原菌检出率为41.07%(23/56);猪肺炎支原体检出率为33.33%(13/39);弓形虫检出率为50.00%(8/16);猪附红细胞体检出率为14.29%(6/42)。

为了解禽白血病(avian leukemia, AL)在中国进口品种鸡群中的感染状况,2008年12月至2010年6月,在4个省市各选择1个进口品种鸡场进行禽白血病流行病学调查。此次调查共涉及4个场、5个品种、不同代次、不同生长阶段的115个鸡群共计7000余份样品,分别采集泄殖腔拭子进行p27抗原的检测和血清中的J抗体、A/B抗体的检测。结果表明,中国进口品种鸡群中存在不同程度的ALV-J亚群、ALV-A/B亚群感染,J抗体阳性率普遍高于A/B抗体阳性率,且肉鸡品种的J抗体阳性率高于蛋鸡品种;此外,本次调查结果还显示,产蛋初期的鸡群p27抗原阳性率和J抗体阳性率较高。

为了调查广西猪源大肠杆菌O157∶H7分离株的耐药表型和消毒剂抗性情况,本研究测定5株猪源大肠杆菌O157∶H7广西分离株的药物敏感性和消毒剂抗性,并应用PCR对5株细菌的耐氨基糖苷类抗生素基因:氨基糖苷磷酸转移酶基因aph(3)-Iia、乙酰转移酶基因aadA和aadB进行扩增。27种抗菌药物的敏感结果表明,5株菌株只对氟苯尼考、头孢曲松、头孢西丁和头孢噻肟敏感;对罗红霉素、多黏菌素B、利福平、林可霉素、阿莫西林、氨苄西林和头孢噻吩的耐药率为100%;对壮观霉素、链霉素、头孢拉定等药物的耐药率在20%~60%之间。在5株大肠杆菌O157∶H7广西分离株中,分别有1株、1株和3株菌株对23种、11种和9种抗菌药产生耐药性。PCR结果证实,5株细菌携带有耐氨基糖苷类抗生素基因,耐药基因的存在与其耐药表型有一定的相关性。消毒剂抗性结果显示,5株细菌对聚维酮碘溶液、新洁尔灭消毒液、稀戊二醛溶液、双季铵盐—碘消毒液、复方过氧乙酸具有抗性,只对二氯异氰尿酸钠粉敏感。研究结果对预防和控制广西大肠杆菌O157∶H7提供了数据。

鸡啄癖症是鸡在某种诱因的作用下单向或相互啄食对方或异物的一种极为复杂的综合症。文章从品种因素、环境因素、营养因素、饲养管理因素、生理因素、疾病因素6个方面分析了鸡啄症的发生原因,并结合生产实际提出了相应的预防和治疗措施。以利于在生产中减少和杜绝鸡啄癖症的发生,提高养鸡的经济效益。

本试验用系统血凝抑制(HI)交叉试验,对鸡传染性支气管炎病毒M41株和Conn株进行抗体区分。结果表明,M41株和Conn株标准抗原与M41阳性血清HI抗体效价在免疫后21 d分别为8 log2、5 log2,相差3 log2;免疫后28 d分别为8 log2、5 log2,相差3 log2;免疫后35 d分别为8 log2、5 log2,相差3 log2。M41株和Conn株标准抗原与Conn阳性血清HI抗体效价在免疫后21 d分别为4 log2、8 log2,相差4;免疫后28 d分别为4 log2、8 log2,相差4 log2;免疫后35 d分别为4 log2、9 log2,相差5 log2。因此,用血清HI交叉试验能够将抗M41株和Conn株抗体区分开来。

本试验旨在研究石榴皮提取物对离体培养兔球虫卵囊的杀灭作用。采集已感染球虫的18只家兔(体重2.0~2.5 kg)的新鲜粪便(24 h内,35 g/只),用饱和盐水漂浮法分离、提取球虫卵囊。球虫卵囊分别在蒸馏水、石榴皮水提物、石榴皮黄酮、石榴皮多酚、盐酸氯苯胍中培养24、48、72 h,光镜下观察不同浓度的各种药物对兔球虫卵囊数量的影响。结果显示,与蒸馏水组比较,5、10 mg/mL剂量组培养72 h,4种药物均使兔球虫卵囊数量明显减少。球虫卵囊的减少率石榴皮水提物组大于石榴皮黄酮组,石榴皮黄酮组大于石榴皮多酚组和盐酸氯苯胍组;起效时间约为48~72 h。1 mg/mL剂量组4种药物虽可使兔球虫卵囊数量减少,但无显著差异(P＞0.05)。结果提示,石榴皮提取物对体外培养的兔球虫卵囊有较强的杀灭作用,其中石榴皮水提物对兔球虫卵囊杀灭作用最强,石榴皮黄酮和石榴皮多酚次之,其杀灭作用呈一定的正相关量效关系。

犬皮肤肥大细胞瘤约占皮肤肿瘤的20%,因为占位小且不明显,所以是犬的癌症中非常严重的一种。有的切除后没什么后遗症,有的却能成为威胁生命的疾病。正确的鉴别和处置在控制本病方面显得尤为重要。为确诊一例犬皮肤肿物的类型,将病犬皮肤肿物制成石蜡切片,观察HE染色和TB染色结果,发现增多的肿瘤细胞具有肥大细胞典型的组织学和细胞形态学特征,确诊该肿瘤为犬皮肤的肥大细胞瘤。

文章介绍了环介导等温扩增技术的的基本原理、特点及其在传染性疾病中检测和诊断的应用。环介导等温扩增技术具有特异性强、等温灵敏、操作简单、产物易检测等优点。环介导等温扩增技术已经被用来快速诊断动物的传染病。目前可检测圆环病毒2型、鹅细小病毒、伪狂犬病病毒、高致病性禽流感病毒、新城疫病毒、副猪嗜血杆菌、单核细胞增生性李斯特氏菌、猪肺炎支原体及弓形虫基因等。

探讨不同脱钙液对新西兰大白兔膝关节切片染色效果的影响,为膝关节关节软骨及基质多糖的观察奠定试验基础。取正常新西兰大白兔膝关节,10%中性福尔马林溶液充分固定,流水冲洗后,分别浸入10%硝酸脱钙液、3%硝酸脱钙液、改良AF硝酸脱钙液及改良30%盐酸脱钙液中进行充分脱钙后,流水冲洗,制作石蜡切片,苏木精—伊红(HE)、奥尔辛蓝及沙红O染色,显微镜检观察并评价其效果。结果表明:①HE染色效果,3%硝酸组＞30%盐酸组＞10%硝酸组及改良AF硝酸组;②奥尔辛蓝及沙红O染色效果,3%硝酸组及改良AF硝酸组优于其他各组。

为定位检测日本乙型脑炎病毒(JEV)在试验小鼠脑内分布情况,本研究建立了JEV的小鼠感染模型,取发病死亡小鼠的脑组织制作石蜡切片,利用抗JEV单克隆抗体,采用免疫酶组化方法对抗原进行组织学定位检测。试验结果表明,所建立的间接免疫酶组化方法灵敏度高,特异性好,证明了JEV选择性感染神经元,抗原阳性表达主要集中在脑干、神经节及大脑皮质。

在同一鸭场随机抽取相同营养条件下,分别采用网养、散养、单笼饲养与双笼模式饲养的山麻鸭新鲜蛋,分别测定蛋品质及营养成分。结果表明,网养模式下麻鸭所产蛋重显著轻于其它3种模式(P<0.05),而双笼饲养麻鸭所产蛋的蛋白高度显著高于散养(P<0.05),且双笼饲养与网养麻鸭的鸭蛋哈氏单位(HU)高于散养和单笼饲养麻鸭(P<0.05)。在营养成分方面,4种模式饲养麻鸭所产蛋的粗蛋白质和粗脂肪含量均相近,单笼饲养的麻鸭蛋总氨基酸含量最高,其次是双笼模式,散养模式的最低。由此可见,4种模式饲养麻鸭的蛋品质及营养成分具有较显著的差异,网养、单笼与双笼饲养模式均优于散养。