猪流行性腹泻病毒重组腺病毒疫苗的构建及小鼠免疫试验

›› 2012, Vol. 39 ›› Issue (2): 11-15.

猪流行性腹泻病毒重组腺病毒疫苗的构建及小鼠免疫试验

焦茂兴¹, 吴锋², 刘德辉², 黄毓茂²

1. 宜春学院生命科学与资源环境学院,江西宜春 336000;2. 华南农业大学兽医学院,广东广州 510642

收稿日期:2011-07-06 修回日期:1900-01-01 出版日期:2012-02-20 发布日期:2012-02-20
通讯作者: 黄毓茂

Construction of the PEDV Adenovirus Vaccine and Mice Immune Experiment

JIAO Mao-xing¹, WU Feng², LIU De-hui², HUANG Yu-mao²

1. Life Science and Resources Environment School of Yichun College, Yichun 336000, China;2. College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China

Received:2011-07-06 Revised:1900-01-01 Online:2012-02-20 Published:2012-02-20

摘要/Abstract

摘要： 通过RT-PCR和重组PCR技术扩增出猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)疫苗株sM、M、S基因,构建重组腺病毒穿梭质粒。穿梭质粒与BJ5183细菌同源重组构建同源重组腺病毒质粒,同源重组腺病毒质粒经Pac Ⅰ酶切后转染AD-293细胞,获得3个含有目的基因的重组腺病毒。将3个具有感染能力的复制缺陷性重组腺病毒共同感染Vero细胞,细胞上清液进行小鼠免疫特性研究。结果表明,共同感染Vero细胞所得蛋白能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答。

关键词: 猪流行性腹泻病毒; 重组腺病毒; 疫苗; 免疫

Abstract: sM, M, S gene of PEDV vaccine stain were implified by amplified by RT-PCR and reorganization PCR, then inserted into the pShuttle-CMV vector. These recombinant shuttle plasmids were linearized by PmeⅠand then transformed to BJ5183 cells containing the pAdEasy-1 bone plasmid. The homologous recombinantplasmidwas transformed to XL-10 Gold ultracompetent cells in order to obtain this plasmid in a large scale. These recombinant adenoviruses were co-infected Vero cells, mice immune experiment indicated that antibodies were induced by Western blotting.

Key words: PEDV; recombinant adenovirus; vaccine; immunity

中图分类号:

S858.65

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