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当期目录

2017年 第44卷 第4期 刊出日期:2017-04-20
生物技术
脂肪酸结合蛋白5对奶牛乳腺上皮细胞乳脂合成的影响
于萌萌, 李萌, 李姗姗, 李冬, 高学军
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  941-949.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.009
摘要 ( 303 )   PDF (1882KB) ( 381 )  
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脂肪酸结合蛋白5(fatty acid binding protein 5,FABP5)是一种胞内脂质运载体。本试验应用甘油三酯测定法及BODIPY染色法检测奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cell,BMEC)中甘油三酯及脂滴分泌情况,采用实时荧光定量PCR、Western blotting技术检测BMECs中FABP5对固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)的表达影响。结果显示,试验成功获得高纯度的BMECs,构建了pGCMV-IRES-EGFP-FABP5真核表达载体,且与空白对照组和空载体组相比,FABP5过表达组的甘油三酯和脂滴分泌量极显著增加(P<0.01),同时SREBP-1c及靶基因FASACC的表达量均极显著增加(P<0.01);试验成功筛选了FABP5 siRNA1为最佳干扰片段,当FABP5抑制时,抑制组的甘油三酯、脂滴分泌量极显著减少(P<0.01),SREBP-1c、FAS、ACC的表达量均极显著降低(P<0.01)。表明FABP5可通过上调SREBP-1c的表达从而促进BMEC中乳脂的合成。

江苏省羊口疮病毒的分离鉴定及B2L基因的遗传进化分析
王秋霞, 朱相儒, 易成功, 秦涛, 陈素娟, 彭大新, 夏同海
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  950-958.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.002
摘要 ( 217 )   PDF (3157KB) ( 257 )  
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为了解江苏省近年来羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)的流行情况,更好地控制江苏地区的羊口疮病,2013~2015年采集江苏部分地区羊口疮疑似病料121份,进行病毒分离鉴定及其B2L基因的遗传进化分析。结果显示,样品中ORFV PCR检测阳性4份,用胎羊鼻甲骨细胞(OFTu)和MDBK细胞进行病毒分离,分离到4株病毒。这4株病毒分别命名为ORFV/Ovis/XZ/Jiangsu/2015/China、ORFV1/Ovis/DT/Jiangsu/2015/China、ORFV2/Ovis/DT/Jiangsu/2015/China和ORFV/Ovis/SL/Jiangsu/2015/China。扩增ORFV的B2L基因全长并绘制遗传进化树。B2L基因序列分析显示,4株分离株之间的核酸同源性为98.5%~100.0%。遗传进化树显示,ORFV/Ovis/XZ/Jiangsu/2015/China株、ORFV1/Ovis/DT/Jiangsu/2015/China株和ORFV2/Ovis/DT/Jiangsu/2015/China株与SC-JY、GX-YB、JS-FX株聚成一簇,核苷酸同源性为97.8%~100.0%。ORFV/Ovis/SL/Jiangsu/2015/China与LiaoNing、HuB、Gansu株亲缘关系接近,核苷酸同源性为98.8%~98.9%。4株分离株与中国疫苗株的核苷酸同源性为96.8%~98.1%。结果表明,江苏地区的ORFV来源可能不同,有必要开展更为深入的流行病学调查,为防控江苏地区的羊口疮奠定基础。

MUC4和MUC13基因在ETEC F18抗性型和易感型梅山断奶仔猪间的差异表达分析
钦伟云, 甘丽娜, 魏宗友, 叶兰, 包文斌, 吴圣龙
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  959-964.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.003
摘要 ( 251 )   PDF (1745KB) ( 324 )  
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MUC4和MUC13基因作为产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coil,ETEC) F4的重要抗性候选基因,可能在断奶仔猪抗ETEC F18菌株的感染过程中发挥重要作用,因此本试验运用实时荧光定量PCR法分析了MUC4和MUC13基因在梅山猪ETEC F18抗性型和易感型个体11个组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、肌肉、胸腺、淋巴结、十二指肠和空肠)中的表达水平及差异。结果显示,MUC4和MUC13基因在检测的11个组织中均有不同程度的表达。其中,在胸腺和淋巴组织中,MUC4基因在抗性型个体中的表达水平显著高于易感型个体(P<0.05);在肺脏组织中,MUC13基因在抗性型个体中的表达水平显著高于易感型个体(P<0.05),且MUC13基因在抗性群体肠道中的表达水平较高。由此推测,MUC4基因在免疫组织、MUC13基因在肠道组织的高表达可在一定程度上提高了机体的免疫能力,保护和润滑肠道,从而抵抗ETEC F18菌株对机体的感染。

马身猪MEF2A基因4种可变剪接体的克隆和生物信息学分析
张旗, 郭晓红, 高鹏飞, 靳玉舒, 李萌, 成志敏, 张宁芳, 乐宝玉, 曹果清, 李步高
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  965-972.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.004
摘要 ( 211 )   PDF (4018KB) ( 302 )  
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本研究旨在克隆马身猪肌细胞增强因子2A(myocyte enhancer factor 2A,MEF2A)基因的不同剪接体类型。依据转录组测序对可变剪接的预测结果,试验扩增MEF2A基因第5~8外显子之间的编码区,用生物信息学软件分析了马身猪MEF2A基因不同剪接体的序列特性,预测保守结构域,构建系统进化树,比对不同物种MEF2A的氨基酸同源性。结果显示,获得了4个MEF2A基因的剪接体,MEF2A1的第5~8外显子正常剪接;MEF2A2缺失了第5外显子,第6外显子的5'端多出138 bp,第7外显子的3'端多出102 bp;MEF2A3缺失了第5外显子,第6外显子的5'端多出138 bp;MEF2A4第7外显子的3'端多出102 bp。插入的138 bp序列编码的蛋白质中存在1个保守结构域HJURP_C,这可能与MEF2A参与肝细胞纤维化作用有关。MEF2A1和MEF2A4与猪MEF2A1(GenBank登录号:NP_001090890.1)同属于一个亚群,同源性高达98.9%,MEF2A2和MEF2A3与猪MEF2A2(GenBank登录号:NP_001093168.1)同属于一个亚群,同源性分别为98.2%和98.9%。本试验成功克隆了4个MEF2A基因的剪接体,为进一步研究其蛋白功能奠定基础。

lncLER在卢氏绿壳蛋鸡肝脏中表达调控的研究
顾真真, 李红, 刘乙, 谭文波, 任俊晓, 李艳敏, 李转见, 田亚东, 刘小军
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  973-979.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.005
摘要 ( 241 )   PDF (2438KB) ( 290 )  
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长链非编码RNA(lncRNA)在许多生物学过程中发挥着重要的调节作用。河南农业大学家禽种质资源创新工程研究中心通过对产蛋前期(20周龄)和产蛋高峰期(30周龄)卢氏绿壳蛋母鸡肝脏组织的转录组分析,筛选出了一个在产蛋高峰期母鸡肝脏中表达水平显著上调的lncRNA(lncLER)。本研究利用半定量PCR(RT-PCR)、实时荧光定量PCR分析了lncLER在卢氏绿壳蛋母鸡不同发育时期和不同组织中的表达规律,并从个体和细胞水平研究了体内、体外雌激素处理对lncLER表达的影响。结果表明,lncLER在卢氏绿壳蛋母鸡各组织中均有不同程度的表达,且在产蛋高峰期肝脏中的表达量较高;雌激素在个体和细胞水平可显著上调lncLER的表达。本试验初步阐明了lncLER基因在卢氏绿壳蛋母鸡中的表达调控规律,为进一步研究lncLER在鸡产蛋过程中的生物学功能奠定了基础。

樱桃谷鸭源鹅出血性多瘤病毒VP3基因的克隆与序列分析
万春和, 刘荣昌, 程龙飞, 傅光华, 傅秋玲, 施少华, 陈红梅, 黄瑜
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  980-985.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.006
摘要 ( 292 )   PDF (1704KB) ( 604 )  
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为明确福建地区是否存在鹅出血性多瘤病毒(goose hemorrhagic polyomavirus,GHPV)感染,本研究对2016年福建省临床送检测19份鸭组织样品进行GHPV检测,结果从1例樱桃谷鸭中检测到GHPV感染阳性(记为GHPV-FJ201601株)。随后根据GenBank中GHPV参考株序列特征,设计针对GHPV的VP3基因特异性引物,利用PCR技术扩增获得GHPV的VP3基因片段。结果显示,GHPV-FJ201601株的VP3基因全长为654 bp,编码217个氨基酸。对编码的VP3蛋白分析发现其理论等电点为9.37,带负电荷氨基酸为23个(Asp+Glu),带正电荷氨基酸为28个(Arg+Lys);不稳定指数为38.43,是一个稳定蛋白;脂肪系数64.33,总平均疏水性指数为-0.744;该蛋白无典型的信号肽切割位点;其亚细胞定位类型为核定位;对其进行磷酸化分析发现,该蛋白存在14个氨基酸磷酸化位点。核苷酸同源性分析显示,不同来源GHPV代表株VP3基因相互之间核苷酸同源性均较高,均不低于99.7%。VP3基因遗传进化结果显示,GHPV-FJ201601株和鹅源GHPV分离株(匈牙利14234株与法国Toulouse Goose 2000株)处于同一遗传进化分支,与鸭源分离株(法国Toulouse Muscovy Duck 2008株、法国Toulouse Mule Duck 2008和中国106株)却处于不同的遗传进化分支,但所有GHPV分离株VP3基因遗传进化均较近。本研究首次证实福建地区樱桃谷鸭群中存在GHPV感染,为丰富不同地区与宿主的GHPV分子流行病学数据提供参考。

生理生化
一周岁内滩羊皮肤差异表达蛋白研究
杨佐青, 陶金忠, 陈信, 马瑞华, 张鑫荣
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  986-993.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.007
摘要 ( 231 )   PDF (2855KB) ( 287 )  
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为研究一周岁内滩羊皮肤中的差异表达蛋白,本试验利用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离了滩羊不同生长阶段皮肤蛋白,经考马斯亮蓝染色,用PDQuest 8.0软件检测并分析差异蛋白点,并经MALDITOF/TOF-MS/MS鉴定。对4个生长时期的蛋白图谱进行两两比对,共发现了19个差异蛋白点,质谱成功鉴定出15个蛋白点共13种蛋白,可能与滩羊皮肤生长调控有关的蛋白有14-3-3蛋白σ亚型(14-3-3 protein sigma)、膜联蛋白A2(annexin A2)、角蛋白25(keratin 25)、微管蛋白α链(tubulin alpha chain)。对差异表达蛋白进行分析,发现这些差异表达蛋白可能与滩羊皮肤不同生长阶段的毛囊周期性变化有关。一周岁内滩羊皮肤差异蛋白的发现为滩羊皮肤的年变化规律研究奠定理论基础。

光周期对于绒山羊毛囊干细胞激活的影响
刘斌, 郭俊, 勿都巴拉, 马跃军, 辛雷勇, 赵存发, 李玉荣, 尹俊
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  994-1000.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.008
摘要 ( 237 )   PDF (3748KB) ( 215 )  
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为了延长绒山羊毛囊兴盛期,提高羊绒产量,本试验通过人工缩短内蒙古阿尔巴斯型绒山羊的日照时间,利用组织切片技术对比人工短光照和自然光照周期下绒山羊皮肤组织形态变化,利用免疫组织化学方法研究毛囊细胞增殖及相关信号通路重要蛋白的表达。结果显示,人工短光照周期下绒山羊毛囊细胞增殖强烈,干细胞标记角蛋白15(cytokeratin 15,K15)阳性信号大量分布于外根鞘,β-catenin信号活跃表达于毛母质及根鞘,毛囊提前进入兴盛期;而自然光照周期下绒山羊毛囊仍停留在休止期,相应蛋白信号表达较弱。综上表明,短日照对毛囊生长具有明显的促进作用,人工短光照周期可以提前激活毛囊干细胞,使其提前进入兴盛期,引起多种毛囊生长相关蛋白的表达。

动物营养与饲料科学
应用CNCPS法和体外产气法评价苹果渣作为反刍动物非粮饲料的潜力
李岩, 杨军香, 孟庆翔, 刘畅, 陈万宝, 周振明
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1001-1008.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.009
摘要 ( 162 )   PDF (1292KB) ( 341 )  
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试验旨在应用康奈尔净碳水化合物—蛋白质体系(CNCPS)和体外产气法评定不同地方苹果渣的营养价值,以采集自辽宁锦州、北京、河北唐山、安徽砀山的4种苹果渣为研究对象,采用CNCPS中碳水化合物和含氮化合物的分类方法,测定苹果渣的营养成分,评定其营养价值,同时采用体外产气法评定苹果渣的发酵情况,并计算其能量价值。结果显示,不同地域来源的苹果渣的营养成分存在显著差异,且CNCPS碳水化合物、蛋白质组分的优劣不同。在含氮化合物组分中,苹果渣的非蛋白氮(PA)含量较高,均高于60%;而快速降解蛋白(PB1)含量较低,均低于3%。在碳水化合物组分中,苹果渣的不可利用的细胞壁(CC)含量较高,为51%~63%。北京苹果渣的最大产气量(B)最高,极显著高于其他3种苹果渣(P<0.01),而唐山苹果渣的产气速度(C)极显著高于北京苹果渣和砀山苹果渣(P<0.01)。砀山苹果渣氨态氮(NH3-N)含量最高,极显著高于其他苹果渣(P<0.01)。不同地方苹果渣瘤胃液挥发性脂肪酸比例差异极显著(P<0.01)。不同地方的苹果渣的总可消化养分(TDN)及其他能值差异较大,以砀山苹果渣的能值最高,极显著高于其他苹果渣(P<0.01)。综上可知,不同地域来源的苹果渣在化学成分、体外瘤胃发酵参数和能量价值方面存在显著差异。本试验在补充中国肉牛常用饲料数据库的同时,也为非粮饲料的开发利用奠定了数据基础,以达到科学合理利用的目的。

长×大×通、大×长×通杂交猪及其亲本的生长性能、胴体性状和肉品质比较研究
梁国明, 彭中镇, 刘榜, 余梅, 徐三平, 李奎, 唐中林
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1009-1015.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.010
摘要 ( 220 )   PDF (1099KB) ( 374 )  
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试验以通城猪为母本,长白猪(瑞典)、大白猪(英国)为父本进行三元杂交,对两个三元杂交猪(长×(大×通)、大×(长×通),简称为长×大×通、大×长×通)及亲本分别从生长性能、胴体性状及肉品质方面进行了比较。结果显示,长×大×通和大×长×通三元杂交猪的生长性能、胴体性状及肉品质均表现出较好的杂种优势。长×大×通三元杂交猪的测定期平均日增重、料重比、活体背膘厚、剪切力、大理石纹和肌内脂肪含量的杂种优势率分别为12.54%、-13.89%、10.39%、-8.71%、-8.33%和8.57%,大×长×通的杂种优势率分别为10.81%、-11.05%、10.55%、-6.50%、6.67%和2.44%。长×大×通和大×长×通两者比较,长×大×通三元杂交猪的试验期平均日增重、眼肌面积及腿臀肉骨率分别为843.4 g/d、34.51 cm2和73.54%,大×长×通三元杂交猪分别为808.6 g/d、31.45 cm2和70.67%,二者差异均显著(P<0.05)。综上所述,以通城猪为母本进行的两个三元杂交猪的生长和胴体性状显著优于亲本通城猪,肉质显著优于亲本长白猪和大白猪,且长×大×通组合优于大×长×通组合。

日粮中添加番茄渣对围产期奶牛抗氧化性能的影响
古丽努尔·阿曼别克, 玛里兰·毕克塔依尔, 艾比布拉·伊马木
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1016-1021.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.011
摘要 ( 214 )   PDF (1028KB) ( 346 )  
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试验旨在研究日粮中添加番茄渣发酵饲料对围产期奶牛抗氧化性能的影响。选择体质均匀,预产期、体重、胎次和泌乳量相近的围产期奶牛16头,随机分为2组,每组8头,对照组饲喂常规全混合日粮(TMR),试验组在日粮中添加番茄渣发酵饲料(围产前期13%,围产后期11%)。预试期14 d,正试期 60 d(产前30 d至产后30 d)。结果显示,与对照组相比,围产后期试验组奶牛产奶量显著提高(P<0.05);整个试验阶段,试验组奶牛血清GSH-Px、T-SOD和T-AOC活力均高于对照组,其中,围产前期试验组GSH-Px、T-SOD和T-AOC活力显著提高(P<0.05),与围产前期相比,围产后期GSH-Px、T-SOD和T-AOC活力等抗氧化指标均呈下降趋势,围产后期试验组奶牛MDA含量较对照组显著降低(P<0.05),但围产前期和围产后期间无显著差异(P>0.05);与对照组相比,围产后期试验组红细胞、血红蛋白浓度、尿素氮、低密度胆固醇、铁含量均显著提高(P<0.05);其他指标两组间差异均不显著(P>0.05)。综上所述,日粮中添加番茄渣发酵饲料对围产期奶牛机体的抗氧化性能和产奶量有一定提高作用。

蜂花粉醇提物对衰老小鼠学习、记忆及脑组织抗氧化能力的影响
陈艳珍
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1022-1026.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.012
摘要 ( 149 )   PDF (1012KB) ( 321 )  
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试验旨在探讨蜂花粉醇提物(ethanol extracts from bee pollen,EEBP)对D-半乳糖诱导的衰老雄性小鼠学习、记忆和脑组织抗氧化能力的影响。以昆明种雄性小鼠为研究对象,按体重随机分为正常对照组、模型对照组和低、中、高剂量(400、800、1 600 mg/kg体重)EEBP组。除正常对照组外,其余各组小鼠每天颈背部皮下注射500 mg/kg体重 D-半乳糖0.2 mL,正常对照组注射等体积的生理盐水。EEBP组小鼠每天灌胃0.3 mL EEBP悬浮液,对照组小鼠灌胃等体积的蒸馏水,试验期56 d。采用Y型迷宫和跳台仪测试小鼠学习记忆能力,同时测定各组小鼠脑组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)的活力及丙二醛(ma1ondialdehvde,MDA)的含量。结果表明,EEBP能显著降低D-半乳糖诱导的衰老小鼠Y型迷宫的学习次数,提高正确次数,延长跳台潜伏期,降低错误次数;提高衰老模型小鼠脑组织SOD、GSH-Px和CAT活性,降低MDA含量。以上结果说明EEBP可以改善D-半乳糖致衰老模型小鼠学习、记忆能力,提高脑组织的抗氧化能力,具有一定延缓脑衰老的作用。

藤茶提取物对小鼠生长性能、腹泻率及抗氧化性能的影响
陈丽, 孙云子
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1027-1031.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.013
摘要 ( 201 )   PDF (1207KB) ( 293 )  
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试验旨在研究藤茶提取物对小鼠生长性能、腹泻率和抗氧化性能的影响。将90只小鼠随机分为空白组、对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,空白组小鼠饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础日粮中添加0.02、0.04、0.06 mg/g体重的藤茶提取物,对照组在基础日粮中添加0.02 mg/g体重的硫酸抗敌素。在试验第26天给小鼠灌服番泻叶,观察各日粮处理组小鼠腹泻情况。结果显示,各试验组和对照组小鼠试验末体重均高于空白组,且对照组显著高于空白组(P<0.05);添加藤茶提取物有提高小鼠生长性能和肝脏重的趋势,但与空白组相比差异不显著(P>0.05);试验Ⅱ、Ⅲ组和对照组小鼠腹泻率显著低于空白组和试验Ⅰ组(P<0.05);与空白组相比,对照组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著提高(P<0.05),试验组也有提高趋势,但均未达显著水平(P>0.05);对照组的过氧化氢酶(CAT)活性显著高于试验Ⅱ组(P<0.05),各试验组之间超氧化物歧化酶(SOD)活性无显著差异(P>0.05)。以上结果表明,日粮中添加藤茶提取物能够能提高小鼠的生长性能及抗氧化性能,降低小鼠的腹泻率,可作为抗生素的替代品进一步研发。

南阳黑猪和大白猪脂肪酸分析及其综合评价
鲁云风, 张晓娜, 张征田
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1032-1036.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.014
摘要 ( 191 )   PDF (1017KB) ( 559 )  
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试验旨在研究南阳黑猪脂肪酸组成及含量,以期为中国地方猪种遗传资源的保护及开发利用提供理论依据。以南阳黑猪和大白猪为研究对象,每品种猪各12头,测量背最长肌脂肪酸含量及种类,以脂肪酸种类及数量、单不饱和脂肪酸(monounsaturated fatty acid,MUFA)、多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)、饱和脂肪酸(saturated fatty acid,SFA)、12-16碳饱和脂肪酸(饱和脂肪酸1,SFA1)、其他饱和脂肪酸(饱和脂肪酸2,SFA2)、不饱和脂肪酸(unsaturated fatty acids,UFA)、SFA2/SFA1、PUFA/MUFA、必需脂肪酸(essential fatty acid,EFA)、共轭亚油酸(conjugated linoleic acids,CLA)、PUFA/SFA、ω-6 PUFA/ω-3 PUFA等为指标,从营养、健康、风味及储存方面综合评价两个猪种猪肉脂肪酸品质。结果显示,两个猪种背最长肌中共检出30种脂肪酸,其中23种脂肪酸在两个猪种间有显著或极显著差异(P<0.05;P<0.01);除SFA2/SFA1和ω-6 PUFA /ω-3 PUFA外,南阳黑猪其他指标均高于大白猪;SFA1、MUFA、PUFA、SFA、UFA、UFA/SFA、SFA2/SFA1、PUFA/MUFA、EFA、CLA、PUFA/SFA、ω-6 PUFA/ω-3 PUFA 11个指标在两个猪种间存在显著或极显著差异(P<0.05;P<0.01),SFA2和PUFA/MUFA在两个猪种间无显著差异(P>0.05)。综合以上结果,南阳黑猪肌肉脂肪酸品质总体优于大白猪。

遗传繁育
绵羊Lpin2基因多态性及其与尾型和屠宰性状的关联分析
焦小丽, 景炅婕, 乔利英, 洪中山, 李留安, 田川尧, 康翠翠, 陈明明, 刘文忠
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1037-1045.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.015
摘要 ( 207 )   PDF (1716KB) ( 333 )  
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试验旨在研究Lpin2基因遗传变异对绵羊尾型和屠宰性状的影响。以两品种脂尾型绵羊广灵大尾羊和小尾寒羊为研究对象,采用DNA直接测序法检测Lpin2基因5'非编码区部分序列的单核苷酸多态性(SNPs),并分析其与尾型及屠宰性状的关联性。结果发现,Lpin2基因5'非编码区起始密码子上游约1 200 bp的DNA序列中存在3个SNPs,即NC_019480.2:g.-663 dup ATT(SNP1)、g.-388 T > C(SNP2)和g.-330 T > G(SNP3),其中SNP1为三核苷酸ATT重复扩展短串联重复序列(STR)的拷贝数变异(CNV),在广灵大尾羊中的突变频率显著高于小尾寒羊(P<0.05),显著降低了广灵大尾羊的胴体重与屠宰率(P<0.05),对小尾寒羊的屠宰性状无显著影响(P>0.05)。SNP2和SNP3构成单倍型块,形成的单倍型对各性状无显著影响(P>0.05)。试验结果可为绵羊肉质性状的标记辅助选择提供参考依据。

不同遗传背景猪群体黏病毒耐药蛋白1基因多态性分析
张立春, 李兆华, 李梦姝, 孙福亮, 曹阳, 朴庆林, 金海国, 张树敏
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1046-1053.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.016
摘要 ( 225 )   PDF (4226KB) ( 261 )  
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为探讨不同遗传背景猪黏病毒耐药蛋白1(myxovirus resistance,Mx1)基因的遗传多态性,本试验采用RT-PCR方法扩增克隆出猪Mx1基因并进行生物信息学分析,采用高分辨率熔解曲线法(HRM)对民猪、长白山野猪与民猪杂交猪(简称野杂猪)和大白猪3个群体Mx1基因外显子2区多态性进行分析。结果显示,从民猪及野杂猪中成功克隆出4条Mx1基因mRNA序列。该序列含有1个1 992 bp的完整开放阅读框(ORF),编码663个氨基酸。比较发现4条Mx1基因序列中共含有30个SNPs位点,其中17个SNPs位点引起了氨基酸序列的变异。功能结构域分析发现,大部分氨基酸突变位点位于Mx1基因功能结构域两侧。HRM多态性分析显示,Mx1基因外显子2区DD基因型作为优势基因型在3个群体中具有最高的基因型频率,其中大白猪中DD基因型频率为100%,野杂猪为62.5%,民猪为56.2%。基因多态性分析还发现该区域存在更多的核苷酸及氨基酸突变位点,表明民猪和野杂猪Mx1基因存在更丰富的基因多态性。

拜城油鸡肌肉生长抑制素基因多态性与生产性能的相关性研究
王彦钦, 邵勇钢
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1054-1060.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.017
摘要 ( 206 )   PDF (1245KB) ( 342 )  
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试验旨在研究肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因在拜城油鸡中的多态性及其与生产性能的关系,探寻可用于拜城油鸡选育的分子遗传标记。选取96只6周龄的拜城油鸡公鸡,随机分为3组,每组32只,分别在12、18和24周龄时对其生产性能指标进行测定,同时采用PCR-RFLP方法检测MSTN基因的多态性,分析MSTN基因多态性与拜城油鸡生产性能的关系。结果显示,在拜城油鸡公鸡中MSTN基因存在多态性,检测到3种基因型:AA、GA、GG,GA为优势基因型,等位基因A为优势等位基因,不符合哈代-温伯格平衡定律(P<0.05)。在12周龄时,AA基因型个体的体重、屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重和腿肌重均显著高于GA基因型个体(P<0.05);在18周龄时,GA基因型个体的体重、胸肌重和腿肌重均显著高于GG基因型个体(P<0.05);在24周龄时,AA基因型个体的体重、屠体重和半净膛重均极显著高于GG基因型个体(P<0.01),全净膛重和腿肌重显著高于GG基因型个体(P<0.05),GA基因型个体的体重、屠体重、半净膛重和腿肌重均显著高于GG基因型个体(P<0.05),其余指标在不同周龄不同基因型个体间差异不显著(P>0.05)。MSTN基因多态性与拜城油鸡部分生产性能指标密切相关,推测该基因可以作为拜城油鸡选育的分子遗传标记之一。

贵阳地区犬细小病毒VP2基因的克隆及遗传进化分析
陈强, 嵇辛勤, 段志强, 阮涌, 雷云, 龙丹丹, 胡焱, 万彪
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1061-1068.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.018
摘要 ( 221 )   PDF (4142KB) ( 166 )  
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为研究贵阳地区犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)的流行基因型及其遗传进化情况,本试验对从贵阳市分离的10株CPV的VP2基因进行PCR扩增和克隆并进行序列分析。结果显示,分离的病毒能使F81猫肾细胞产生明显的细胞病变(CPE),分离的10株病毒中,7株为CPV-2a亚型,3株为CPV-2c亚型,命名为GY-1~GY-10。10株CPV分离株与疫苗株VP2基因的同源性98.4%~99.4%,与其他国内外参考株的同源性为97.7%~99.9%。本试验首次报道贵阳市CPV的流行基因型为CPV-2a亚型并伴随CPV-2c亚型存在,对监测CPV遗传变异趋势及疫苗的研制具有重要意义。

水牛瘦素受体基因密码子使用偏好性分析
范新阳, 欧阳依娜, 王鹏武, 张永云, 滕晓红, 苗永旺
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1069-1078.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.019
摘要 ( 203 )   PDF (1683KB) ( 349 )  
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试验选取27头河流型水牛和41头沼泽型水牛,以从NCBI数据库中下载的家牛、野牦牛、野牛、绵羊、山羊、小鼠和人的序列作对照,对编码瘦素受体(leptin receptor,LEPR)基因的密码子偏好性及水牛与其他物种间密码子使用的差异和进化关系进行了深入分析。结果发现,所有的密码子在河流型水牛和沼泽型水牛LEPR基因中均有使用,两种类型水牛偏好使用的密码子有28个,其中使用偏好性较强的密码子为AGA(RSCU≥2),表明河流型水牛和沼泽型水牛LEPR基因密码子使用特征相似。水牛及参考物种LEPR基因均偏好使用以A/U结尾的密码子,但水牛与其他参考物种间偏好使用密码子的种类和数目有差异。密码子使用偏好聚类分析表明,河流型水牛与沼泽型水牛亲缘关系最近,先聚为一类,然后与家牛、野牦牛和野牛聚为一类,再与绵羊、山羊、小鼠和人等物种聚为一类。在密码子使用频率上,河流型水牛LEPR基因与酵母密码子偏好性差异小于与大肠杆菌和小鼠密码子偏好性差异,从而揭示酵母更适合作为水牛LEPR基因的外源表达系统。

6个猪品种CD53基因中结构变异SV184分布频率的研究
徐倩, 岑永秀, 喻昌燕, 刘畅, 冉雪琴, 王嘉福
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1079-1086.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.020
摘要 ( 188 )   PDF (1328KB) ( 233 )  
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基于香猪全基因组重测序数据,在白细胞表面抗原CD53基因中筛选到一个结构变异(structure variant,SV)184,为了探索不同猪品种间此结构变异是否存在多态性变化,本试验选择香猪、大白猪、糯谷猪、柯乐猪、江口萝卜猪和荣昌猪作为试验动物,采用PCR方法对猪群中SV184的分布频率进行比较研究,应用RT-PCR技术,分析CD53基因的原初转录本序列结构,研究SV184对CD53基因的转录是否有直接影响。结果显示,6个猪品种中SV184的分布频率存在明显差异,香猪以VN基因型为主,其他5个猪品种是NN基因型占优势;计算两种等位基因的频率,香猪以缺失的V等位基因为主,其他5个猪品种以正常的N等位基因为主。选择3种基因型个体的血液样本,逆转录后分析CD53基因的原初转录本的序列,从中检测到缺失型和不缺失的两种转录本形式,提示SV184对CD53基因的转录无直接影响。SV184可作为分子标记用于区分香猪和其他猪品种。

4个主效基因与英系长白猪繁殖性能的相关性分析
胡慧艳, 贾青, 侯胜奎, 刘津, 赵思思, 李晓敏, 张伟峰, 李书杨, 王贵江
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1087-1094.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.021
摘要 ( 203 )   PDF (1468KB) ( 350 )  
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为寻找有效的分子标记用于英系长白猪辅助育种进而提高其繁殖性能,在英系长白猪群(169头)中采用PCR-RFLP技术,进行雌激素受体(estrogen receptor,ESR)、视黄醛结合蛋白(retinol binding protein 4,RBP4)、瘦素(leptin,LEP)和促卵泡素亚基β(follicle-stimulating hormone β,FSHβ) 4种与繁殖性状相关基因的基因型频率检测,利用SPSS 19.0统计软件,采用最小二乘法将各基因不同基因型与总产仔数、产活仔数、断奶窝重、断奶头数进行了相关分析。结果显示,ESRRBP4、LEP基因均以A为优势等位基因,FSHβ基因以B为优势等位基因,其中LEPFSHβ基因多态位点符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05),而ESRRBP4基因多态位点处于Hardy-Weinberg不平衡状态(P<0.01);LEP基因在长白猪母猪中表现为BB基因型为有利基因型,其总产仔数、产活仔数、断奶头数分别比AB基因型高1.3219、1.6855、1.1710头(P<0.05);FSHβ基因中AA基因型为不利基因型,BB基因型断奶窝重比AA基因型高5.1129 kg(P<0.05);ESRRBP4基因对长白母猪繁殖性能均无显著影响(P>0.05),而LEPFSHβ基因可能作为有价值的候选基因应用于英系长白猪的分子标记辅助选择。

浦东白猪遗传多样性及繁殖性能的变化分析
肖倩, 张哲, 孙浩, 张向喆, 沈大德, 储野根, 王起山, 潘玉春
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1095-1101.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.022
摘要 ( 183 )   PDF (1706KB) ( 352 )  
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试验旨在研究浦东白猪现存群体的遗传多样性及其繁殖性能变化的原因。利用全基因组范围内的遗传标记(SNPs),对比6个太湖流域地方品种及3个西方引进品种,对浦东白猪的遗传多样性进行了分析。同时利用落入繁殖候选基因内的SNPs,分析了群体的多样性及结构。结果显示,相较于本研究中所选择的太湖流域地方品种及西方引进品种,浦东白猪的遗传多样性较太湖流域地方品种低;除枫泾猪外,浦东白猪繁殖相关SNPs的多态性标记的比例、期望杂合度最低,等位基因丰度仅高于杜洛克猪;主成分分析(PCA)结果揭示浦东白猪繁殖相关SNPs位点仍具有其群体独特性。研究结果揭示了浦东白猪现存群体遗传多样性较低,繁殖性能的退化可能是由于一些有利等位基因的灭绝、繁殖相关基因多态性及个体杂合性的降低所致。但是浦东白猪仍然携带一定数量的有利等位基因且依旧具有其群体独特性,暗示浦东白猪仍具有较高的保种价值。本研究为浦东白猪后期的选育、保种和开发利用提供了一定的参考。

高坡猪肌肉生长抑制素基因多态性及其与肉质性状的相关性分析
易恒洁, 李辉, 赵忠海, 杨华婷, 彭邦星, 王玉
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1102-1107.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.023
摘要 ( 179 )   PDF (1218KB) ( 290 )  
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为了探讨肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因的多态性对高坡猪肉质性状(水分、粗脂肪、粗蛋白质、粗灰分、眼肌面积、大理石纹、pH、肉色、嫩度、滴水损失、失水率)的影响,试验以MSTN基因作为肉质性状候选基因,以10月龄的50头高坡猪为研究对象,采用PCR扩增产物直接测序的方法对高坡猪MSTN基因3个外显子的单核苷酸多态性(SNP)进行研究,运用SPSS 20.0软件分析MSTN基因SNP与肉质性状的关联性。结果表明,仅在高坡猪MSTN基因第3外显子63 bp处检测到1个C/T突变位点,该突变为同义突变,未引起编码氨基酸的改变。基因型分析发现,仅有3个个体在该位点发生突变,CC基因型为优势基因型,C为优势等位基因,无TT纯合基因型。经χ2适合性检验分析,该SNP在研究群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。群体遗传参数分析发现,C63T标记位点的杂合度(He)相对较低,表明其在高坡猪群体中的变异较小;就多态信息含量(PIC)而言,该位点属于低度多态(PIC<0.25),说明该遗传标记能够提供少量的遗传信息。将该位点的不同基因型与肉质性状指标进行关联分析表明,所有肉质性状指标在不同基因型间差异均不显著(P>0.05)。综上所述,MSTN基因外显子在高坡猪中存在多态性,但变异较少,相对保守,能否作为高坡猪肉质性状的遗传标记有待于扩大样本数量进一步研究。

延边黄牛ACTA1基因的SNPs检测及其与肉质性状的关联分析
田万年, 杨翰林, 夏广军, 严昌国
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1108-1114.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.024
摘要 ( 206 )   PDF (1636KB) ( 286 )  
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试验旨在研究延边黄牛ACTA1基因的遗传变异,分析其多态性对肉质性状的影响。采用PCR-RFLP和PCR-SSCP方法探讨ACTA1基因多态性及其与肉质性状的关联性。结果发现,延边黄牛ACTA1基因存在2个突变位点:A193G突变,导致氨基酸Arg → Gly的错义突变;A298G突变,导致氨基酸Lys →Arg的错义突变。χ2检验显示,A193G和A298G位点于检测群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。关联分析显示,延边黄牛ACTA1基因2个突变位点的不同基因型与肌肉中肉豆蔻酸、油酸含量、眼肌面积、大理石花纹等级呈显著相关(P<0.05)。初步认为ACTA1基因对延边黄牛肉质性状有显著影响,可作为延边黄牛新品种早期选择的候选基因。

赤水乌骨鸡肌肉生长抑制素基因多态性及其与肉质性状的关联分析
李维, 祖盘玉, 李洪林, 林家栋, 张福平
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1115-1121.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.025
摘要 ( 160 )   PDF (1413KB) ( 362 )  
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本研究旨在探讨肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因多态性及其与赤水乌骨鸡肉质的关联性。采用DNA池、PCR产物直接测序方法对赤水乌骨鸡MSTN基因的外显子进行多态性检测,结果发现,在赤水乌骨鸡MSTN基因的外显子1中检测到1个SNP位点C324T,表现为3种基因型,分别命名为CC、CT和TT,而在MSTN基因外显子2、3上没有发现多态位点。对基因型与肉质性状关联分析显示,CT基因型胸肌、腿肌pH均显著高于CC和TT基因型(P<0.05),CT基因型剪切力显著高于TT基因型(P<0.05),其他肉质性状在不同基因型间差异均不显著(P>0.05)。此结果提示,MSTN基因对赤水乌骨鸡pH和剪切力具有较大的遗传效应,初步推断 MSTN是控制这一性状的众多基因之一,且可能是影响赤水乌骨鸡pH和剪切力的一个主效基因或与主效基因相连锁,可作为选育赤水乌骨鸡pH和剪切力的分子标记,用于标记辅助选择意义重大。

Leptin基因多态性及其与产仔性状的相关性分析
朱爱文, 周春宝, 倪黎纲, 韩大勇
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1122-1127.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.026
摘要 ( 192 )   PDF (1418KB) ( 372 )  
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试验旨在探究Leptin基因对猪产仔性状的影响,为其新品种持续选育提供遗传学依据。参考GenBank发布的猪Leptin基因DNA序列(登录号:U66254、AF026976)设计3对引物,采用PCR-SSCP技术分析Leptin基因在苏姜猪和姜曲海猪中的单核苷酸多态性(SNP),并用统计学方法分析基因座多态性与产仔性状的相关性。结果发现,Leptin基因在苏姜猪、姜曲海猪群体中均具有多态性,检测到3种基因型:AA、AB和BB;测序结果发现,编码区第3 469位碱基处发生单碱基突变(T3469C),为同义突变。χ2适合性检验显示,2个猪种Leptin基因型分布处于Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。多态信息含量(PIC)分析显示,苏姜猪为中度多态,姜曲海猪为低度多态。Leptin基因型与产仔性状关联分析显示,不同基因型间产仔性状差异不显著(P>0.05),但T3469C位点AB基因型平均产仔数较AA和BB基因型高,初步推断Leptin基因T3469C位点可能是影响猪产仔性状潜在的遗传标记,建议做进一步的研究。

巴马小型猪动物模型在医学领域的研究进展
邹迪莎, 于健
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1128-1134.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.027
摘要 ( 333 )   PDF (1106KB) ( 906 )  
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巴马小型猪是中国原产地闭锁繁殖的优质品种,具有遗传稳定性、理想的毛色分布、体型小、多产性、饲养要求低、抗病力强等优势,且在生理学、解剖结构、药物代谢、生化指标和疾病发生机制等方面与人类相似,已用于心血管、皮肤整形、内分泌及代谢、消化、口腔医学、异种移植、中医、麻醉学、神经系统等广泛医学领域的研究,建立了心肌缺血、冠脉微栓塞、卵圆孔未闭、动脉粥样硬化、皮肤创伤、经皮给药、代谢综合征、糖尿病及其并发症、梗阻性黄疸、慢性胰腺炎、肝硬化、肝脏射频消融、牙周组织炎症、下颌骨缺损、异种器官/细胞移植、中医征候、手术麻醉、脑缺血、支架植入、休克等一系列类似于人类疾病的动物模型,表明巴马小型猪作为理想的试验动物在生物医学研究中具有广阔的应用前景。作者综述了巴马小型猪作为试验动物在各医学领域的应用进展,了解现有巴马小型猪疾病模型的种类、构建方法及病理特征,有助于进一步探索具体的病因、发病机制、并发症和防制手段等,为拓展研究范围、提高医学水平奠定了科学基础。

氟化钠对附睾形态结构及紧密连接相关基因表达的影响
贺鑫晋, 刘辰光, 卢洪江, 林坤群, 牛瑞燕, 孙子龙
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1135-1140.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.028
摘要 ( 206 )   PDF (1893KB) ( 321 )  
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为了研究氟对小鼠附睾结构形态及紧密连接相关基因的影响,将60只健康雄性小鼠随机分成4组,对照组饮用蒸馏水,3个氟处理组分别饮用含氟化钠(NaF) 25、50和100 mg/L的蒸馏水。染氟60 d,取小鼠股骨,采用氟离子选择电极法测其氟含量;取右侧附睾制作石蜡切片,HE染色后进行组织形态结构观察;左侧附睾提取RNA,采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测紧密连接相关基因的表达。结果显示,与对照组相比,氟处理组小鼠股骨氟含量随摄氟剂量的增加呈剂量依赖性,其中50、100 mg/L剂量组差异极显著(P<0.01);氟处理组附睾尾管腔厚度极显著增厚(P<0.01);紧密连接相关基因Claudin-2 mRNA表达量极显著下降(P<0.01),100 mg/L剂量组ZO-1 mRNA表达量显著下降(P<0.05)。摄入过量NaF影响附睾形态及其紧密连接相关基因的表达,从而可能对血-附睾屏障造成损伤。

MC1R基因的研究进展
封竣淇, 徐伟, 黄兰, 罗卫星, 蔡惠芬
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1141-1148.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.029
摘要 ( 207 )   PDF (2554KB) ( 470 )  
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MC1R基因作为控制毛色的重要候选基因之一,不仅在黑色素合成过程中起着重要的调控作用,参与毛色的形成,还对人畜疾病、生长性状、行为有着不同程度的影响,因而引起相关学者的广泛关注。为加深对MC1R基因的认识和了解,作者对MC1R基因结构、功能、作用机理、基因的定位、多态性检测及其在人畜方面的研究进展进行综述,并提出新的设想。

预防兽医
拉合尔钝缘蜱的形态学及分子生物学鉴定
吕继洲, 赵丽, 赵昱林, 韩雪清, 王慧煜, 吴绍强
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1149-1158.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.030
摘要 ( 226 )   PDF (4640KB) ( 328 )  
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试验旨在建立拉合尔钝缘蜱的分子生物学鉴定方法。从新疆地区绵羊体表采集寄生蜱,借助体视显微镜和电子显微镜对其进行形态学特征的准确鉴别,初步筛选出疑似拉合尔钝缘蜱。经PCR扩增、测序获得其18S rDNA、16S rDNA及线粒体色素氧化酶亚基Ⅰ基因(cytochrome oxidase Ⅰ,COⅠ)序列,结合GenBank数据库中参考序列,比对分析同源性并构建系统进化树,进行遗传距离评估。本研究全面、清晰地揭示了拉合尔钝缘蜱卵圆形背板、背部圆形盘窝等显微形态特征的细节。同时,在基于16S rDNA与COⅠ序列的邻位相接系统进化树中,拉合尔钝缘蜱分布于两大进化枝之一的软蜱科,同种聚类良好,且拉合尔钝缘蜱种内K2P遗传距离为0~0.3%,本研究方法可快速、准确鉴定拉合尔钝缘蜱物种。

抗头孢氨苄单克隆抗体的制备与初步应用
张伟, 王兴, 刘金萍, 徐声乐, 秦海艳, 刘若璇, 蔡云虹, 汝晓飞, 侯珂, 王捍东
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1159-1167.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.031
摘要 ( 265 )   PDF (1764KB) ( 392 )  
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为制备抗头孢氨苄(cephalexin,CEX)的单克隆抗体并建立鲜奶中CEX残留检测的ELISA方法,本试验采用戊二醛两步法分别将CEX与牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)偶联,用合成的CEX-BSA作为免疫原免疫BALB/c雌鼠;5次免疫后,应用杂交瘤细胞融合技术建立并筛选出两株(2G4、5B3)分泌抗CEX单克隆抗体(monoclonal antibodies,McAb)的杂交瘤细胞株,将2G4细胞株注入BALB/c小鼠腹腔制备腹水,并对腹水进行纯化及鉴定。结果显示,2G4腹水效价大于1∶1.28×105,其抗体亚型为IgG2b(κ),亲和力常数K=1.51×109 L/mol;交叉试验结果显示,该单克隆抗体除了与头孢拉定有52.55%的交叉反应率外,与头孢噻呋、头孢曲松、头孢噻肟、头孢噻吩、青霉素、链霉素、四环素均无明显交叉反应;建立了测定鲜奶样品中CEX的ELISA方法,线性范围为20~1 000 ng/mL,线性方程y=0.4674x-0.5359(R2=0.9909),检测下限为19.68 ng/mL,平均回收率为91.31%,平均变异系数低于15%,低于中国及欧盟规定的头孢氨苄最高残留限量,具有一定的应用前景。

一株鸭源禽Ⅰ型副黏病毒毒力测定及 诱导免疫应答研究
张济培, 谭华龙, 陈冈, 曾强, 张福英, 陈建红
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1168-1174.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.032
摘要 ( 218 )   PDF (2138KB) ( 146 )  
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试验旨在测定一株从番鸭中分离获得的禽Ⅰ型副黏病毒(GSFY株)的生物学特性和遗传特性,并将其制成油乳剂灭活疫苗,进行番鸭免疫保护试验。结果显示,GSFY株的平均致死时间(mean death time,MDT)为71 h,脑内接种致病指数(intracerebral pathogenicity index,ICPI)为1.75,静脉接种致病指数(intravenous pathogenicity index,IVPI)为2.49;GSFY株F基因核苷酸序列同源性分析显示,其与鸡源Chicken/China/Guangxi 9/2003株同源性最高,为97.1%,且二者均处于基因Ⅶ型分支,综合以上结果确定其为禽Ⅰ型副黏病毒基因Ⅶ型强毒株。免疫保护试验结果显示,疫苗进行3次免疫后对番鸭有良好的免疫保护效果,3次免疫后第7天抗体效价平均值达到6log2,第21天抗体效价平均值达到8log2,用GSFY毒株攻击免疫番鸭,当抗体滴度>5log2时,保护率达100%。本研究结果为生产实践制订鸭预防禽Ⅰ型副黏病毒病的免疫程序提供参考。

猪伪狂犬病病毒gB蛋白表达及免疫原性分析
贾刚, 樊梅娜, 谷巍
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1175-1181.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.033
摘要 ( 224 )   PDF (1430KB) ( 381 )  
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本试验旨在研究猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV) gB蛋白的表达并分析其免疫原性,以PRV病毒液为模板,设计特异性引物,扩增大小为612 bp的保守片段并测序,将其克隆到表达载体pET-28a中,转化表达菌BL21(DE3),经诱导表达、纯化得到目的蛋白,进行Western blotting分析验证并分析免疫原性。结果表明,表达的gB蛋白大小为30 ku,主要以包涵体形式存在,复性后浓度为106 μg/mL,且具有良好的反应原性。应用市售试剂盒检测到样品中含13份PRV阳性血清和16份阴性血清,利用检出的阳性血清,初步可建立以PRV gB蛋白为包被抗原的PRV抗体ELISA检测方法。

内蒙古中东部地区不同来源大肠杆菌耐药性调查
李海华, 郭蔚冰, 杨海明, 翁伟平, 闫强, 张远达, 陈志强
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1182-1188.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.034
摘要 ( 167 )   PDF (1531KB) ( 234 )  
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本研究旨在调查内蒙古赤峰、通辽地区不同来源的大肠杆菌对抗生素类药物的耐药情况。采用K-B法分析来源于鹅、牛和猪等患病动物分离出的46株大肠杆菌对13种常用的抗生素类药物的耐药性;鹅源和猪源大肠杆菌对盐酸多西环素的耐药率最高,分别达95.2%和93.3%;牛源大肠杆菌对盐酸沙拉沙星、恩诺沙星和盐酸多西环素的耐药率最高,达80.0%。多重耐药性结果表明,患病动物的大肠杆菌以6耐(23.9%)为主;牛源大肠杆菌则以7耐(40%)最多。总体耐药谱型以恩诺沙星/氟苯尼考/盐酸多西环素/阿莫西林/硫酸新霉素为主(24.4%)。不同来源的大肠杆菌对抗生素类药物均产生了严重的耐药性,因此不但要求养殖人员学会合理使用抗生素类药物,同时研究开发逆转耐药性的新药物或对抗生素类药物有增敏效用的新药物十分必要。

免疫磁珠富集法对牛源大肠杆菌O157∶H7分离鉴定的影响
丁浩, 苏战强, 夏利宁, 王雨朦, 王栋, 张瑾瑜, 张桃, 况玲, 姚刚
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1189-1194.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.035
摘要 ( 153 )   PDF (1165KB) ( 350 )  
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为证明免疫磁珠吸附技术对牛源大肠杆菌 O157∶H7分离效率的影响,从新疆五家渠市、伊宁县、昌吉市3个牛场的采集18份粪样、162份肛拭子、10份饲料样、17份水样和36份胴体表面棉拭子样本,经EC肉汤增菌后,分别采用免疫磁珠富集后和直接进行SMAC和MUG试验进行选择性培养,然后对菌体rfbE基因和鞭毛fliC基因进行PCR检测,最后对疑似大肠杆菌 O157∶H7菌用生化试验进行符合性检测。结果2种方法分别从243份样品中分离到8株和4株大肠杆菌 O157∶H7,统计学分析该差异不显著。本试验结果表明,在实践中免疫磁珠吸附技术和普通方法相比虽然在统计学上差异不显著,但确实能够增加大肠杆菌O157∶H7的分离数量,这与以前的相关研究结果基本一致。

基础兽医
一株凝结芽孢杆菌的分离鉴定及益生性研究
汪攀, 易敢峰, 孙自博, 王蕊, 陈丽仙, 夏冬梅
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1195-1202.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.036
摘要 ( 209 )   PDF (1697KB) ( 351 )  
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试验旨在分离鉴定一株来源于池塘底泥的具有益生功能的凝结芽孢杆菌,并研究其益生性能。从自然池塘底泥分离得到一株产酸能力强的杆状细菌,通过生理生化特征分析和16S rDNA序列比对,鉴定分离菌为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)。该分离菌株对大肠杆菌K88、大肠杆菌K99、无乳链球菌和嗜水气单胞菌有抑制作用;在pH 2.5的模拟胃液中处理12 h存活率为71.9%;在胆盐浓度为0.3%的模拟肠液中处理12 h,存活率为84.4%。该分离菌株可有效降解亚硝酸盐,48 h降解率达到96.80%。将270只1日龄AA肉鸡分成3个处理组,日粮分别添加0(Ⅰ组)、1.0×106(Ⅱ组)和1.0×107 CFU/g(Ⅲ组)剂量的凝结芽孢杆菌NJ102,试验期42 d。结果显示,Ⅱ、Ⅲ组肉鸡的平均日增重和终末体重显著高于Ⅰ组(P<0.05),料重比显著低于Ⅰ组(P<0.05),各组间平均日采食量差异均不显著(P>0.05)。结果表明,来源于池塘底泥的凝结芽孢杆菌NJ102有一定的抗逆性和益生能力,能改善肉鸡的生长性能,具备作为微生物饲料添加剂开发的潜力。

牦牛源肠球菌的分离鉴定及耐药性分析
徐凤, 张焕容, 梁华, 诸明欣, 汤承
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1203-1210.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.037
摘要 ( 200 )   PDF (3484KB) ( 195 )  
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试验结合革兰氏染色及16S rRNA分子鉴定,对分离自红原县的17份牦牛粪便样中的肠球菌进行鉴定。结果显示,通过细菌分离纯化及PCR扩增,从牦牛粪便样品中分离出8株疑似肠球菌,分离菌的扩增产物经凝胶电泳后均产生1 500 bp特异性条带。16S rRNA测序结果显示,8株疑似肠球菌中,6株为粪肠球菌,2株为屎肠球菌。同源性比对分析显示,粪肠球菌与参考序列同源性为99.7%~100.0%,屎肠球菌与参考序列同源性为98.2%~99.2%,说明牦牛源肠球菌在遗传进化过程中高度保守。运用K-B纸片法进行药敏试验,结果显示,分离株对氨基糖苷类抗生素耐受性较高,2株屎肠球菌中,11-1-2菌株表现为5重耐药,且该菌株耐万古霉素,粪肠球菌主要表现为3重耐药,药敏结果提示牦牛源肠球菌耐药较严重,应引起高度重视。

奶牛用利福昔明子宫注入剂有关物质反相高效液相色谱检测方法的建立及应用
黄慧丽, 徐飞, 张道康, 华伟毅, 李秀波, 刘义明
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1211-1218.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.038
摘要 ( 243 )   PDF (1669KB) ( 306 )  
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本试验旨在建立利福昔明有关物质的检测方法。采用反相高效液相色谱法,紫外检测器进行检测,采用WondaSil C18-WR 250 mm×4.6 mm 5 μm色谱柱,柱温:40 ℃,流动相及其比例为:V(甲醇) ∶V(乙腈)∶V(3.16 g/L甲酸铵,浓氨水调pH至7.2)=31.5∶31.5∶37,检测波长276 nm。采用面积归一化法计算利福昔明子宫注入剂的检测限、定量限及其浓度;考察了方法精密度、线性相关性及有关物质专属性,并通过极端条件的破坏、有关物质的含量、分离度等对主成分峰面积降解程度进行了比较。利福昔明子宫注入剂主成分峰在浓度为40~150 μg/mL的范围内,峰面积与浓度呈现良好的线性关系(R2=0.9998),其有关物质浓度对峰面积线性回归方程为y=23 510x+7 182,其进样精密度RSD为0.13%,方法精密度RSD为0.46%,制剂一定时间内经过强酸、强碱、氧化、高温条件破坏后均有不同程度降解,以破坏前的样品主成分含量为100.00%,氧化破坏和高温破坏主成分降解达13%,酸、碱破坏主成分降解在18%左右,主成分峰保留时间在以上4种条件破坏前后一致,且主成分峰与杂质峰之间及杂质峰与杂质峰之间分离度良好(主成分峰与杂质峰之间分离度均大于1.5,杂质峰与杂质峰之间分离度均大于1.2)。本试验建立的利福昔明子宫注入剂有关物质检测方法操作简便,专属性和重复性好,可适用于利福昔明子宫注入剂有关物质的测定。

复方中药偶蹄康对奶牛口蹄疫疫苗抗体水平、血清细胞因子及生化指标的影响
刘艳, 彭文静, 辛蕊华, 郑继方, 梁歌, 罗永江
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1219-1225.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.039
摘要 ( 218 )   PDF (1128KB) ( 223 )  
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为研究复方中药偶蹄康对奶牛口蹄疫O型、A型、亚洲Ⅰ型3个血清型疫苗抗体水平、10种血清细胞因子含量及生化指标的影响,本试验将健康成年奶牛分为药物组和空白对照组,每组100头,连续拌料给药7 d后注射口蹄疫三联苗,注射疫苗后0、14、28、56 d分别采血,检测血清疫苗效价、血清细胞因子含量及生化指标。结果显示,注射疫苗后0、28和56 d药物组与空白对照组抗体效价无显著差异(P>0.05);注射疫苗后14 d药物对口蹄疫3种血清型抗体效价的提升作用均极显著(P<0.01)。药物组血清总胆红素(T-Bil)降低,0、28 d差异显著(P<0.05),56 d差异极显著(P<0.01);28、56 d药物组与空白对照组葡萄糖含量差异显著(P<0.05);0 d血磷含量差异极显著(P<0.01),但未超出正常生理值范围,且后续检测无显著差异(P>0.05)。注射疫苗后14 d药物组血清CD4含量显著高于空白对照组(P<0.05);注射疫苗后28 d药物组血清CD4、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、IL-18、IFN-γ含量极显著高于空白对照组(P<0.01);注射疫苗后56 d药物组血清IL-6、IL-12含量极显著高于空白对照组(P<0.01),CD4、IL-2、IL-4、、IL-18含量显著高于空白对照组(P<0.05)。综上可知,偶蹄康对奶牛口蹄疫O型、A型、亚洲Ⅰ型3个血清型疫苗效价有显著提升,对奶牛肝脏和肾脏功能无明显的损伤,且有一定的利胆作用,对奶牛细胞免疫和体液免疫机能有明显的提升作用。

仔猪腹泻大肠杆菌流行株鉴定及毒力与耐药性分析
刘哲, 孙洋, 纪雪, 郭学军, 刘军, 祝令伟, 周伟, 冯书章
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1226-1232.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.040
摘要 ( 175 )   PDF (1381KB) ( 350 )  
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为明确河南地区一规模化猪场暴发新生仔猪腹泻疫情的病原特性及其耐药谱,本研究对肠道致病大肠杆菌进行了分离鉴定。对腹泻仔猪粪便中分离的大肠杆菌进行13种毒力基因检测和21种抗生素的药敏试验。结果显示,34.8%分离株检出EAST1基因;所获分离株均为多重耐药菌株,且至少对5类抗生素耐药,耐9类以上抗生素的菌株达到75.3%,对氨苄西林、哌拉西林、环丙沙星、左氧氟沙星和莫西沙星耐药率达到100.0%。细菌种系进化分群结果显示,21.7%分离株属于有致病性的B2群和D群。本研究获得了腹泻仔猪大肠杆菌分离株的毒力基因、耐药谱的基本数据和种系进化分群的遗传背景,为制定有针对性的治疗和防控技术方案提供依据。

四黄止痢颗粒中几种有效成分的薄层鉴别研究
贾纪萍, 熊玥, 宋慧敏, 李芳, 李正雄, 陈晓兰
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1233-1238.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.041
摘要 ( 195 )   PDF (1288KB) ( 401 )  
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为建立和完善四黄止痢颗粒的质量标准,本试验采用薄层色谱法对四黄止痢颗粒中的黄连、黄柏、大黄、黄芩、板蓝根进行鉴别,对展开剂、展开温度、展开湿度、薄层板来源、薄层板批号、显色条件等因素进行考察。试验以环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水-三乙胺(3∶3.5∶1∶1.5∶0.5∶1)为展开剂,置氨蒸气预饱和的展开缸内展开,置紫外光灯(365 nm)下检视鉴别黄连、黄柏;以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂展开,喷以2%三氯化铁乙醇溶液检测黄芩的存在;以正丁醇-冰醋酸-水(19∶5∶5)为展开剂展开,热风吹干后喷以茚三酮试液,在105 ℃加热检视鉴别板蓝根。试验结果表明,在考察条件下,目标物斑点清晰、无拖尾,阴性对照无干扰,方法专属性强,重现性好。

10%磷酸替米考星可溶性粉在靶动物鸡的安全性试验
陈晓兰, 田玉柱, 张明珠, 卜仕金
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1239-1243.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.042
摘要 ( 164 )   PDF (1011KB) ( 195 )  
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为评价10%磷酸替米考星可溶性粉对靶动物鸡的安全性,本试验选择40只25日龄健康白羽杂交肉鸡,随机分为4组,每组10只,公母各半。各组分别以0(0 mg/L)、1(75 mg/L,以替米考星计)、3(225 mg/L,以替米考星计)和5(375 mg/L,以替米考星计)倍推荐剂量的10%磷酸替米考星可溶性粉混饮给药,连用9 d。试验期间观察鸡的临床表现、体重变化和饲料消耗,试验结束后进行病理学检查,并测定血液生理指标和血清相关生化指标的变化。结果显示,10%磷酸替米考星可溶性粉在本试验条件下以5倍以下剂量饮水给药对鸡的生长性能无显著影响(P>0.05),在血液生理指标及血清生化指标方面,不具有剂量依赖性的显著变化(P>0.05)。该试验结果表明,10%磷酸替米考星可溶性粉按推荐剂量(75 mg/L)饮水给药对靶动物鸡具有较大的安全性。

中国小型猪内源性反转录病毒研究进展与对策
冯书堂, 马玉媛, 夏颖
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1244-1248.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.043
摘要 ( 170 )   PDF (1018KB) ( 348 )  
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作者介绍了国内外猪内源性反转录病毒(PERV)研究进展,简述了中国不同品种小型猪PERV存在情况、PERV前病毒全基因克隆与序列分析、细胞水平鉴定方法、感染HEK293细胞研究平台的创建、猪A3F对PERV的抑制作用研究,以及从分子遗传学上揭示不同品系PERV特异性等创新性研究成果,分析了五指山小型猪近交系具有PERV基因拷贝少且没有PERV-C等特异性,以及展望培育中国PERV阴性猪新品系方法等研究,以期为人类异种器官移植和生物医用材料产品安全性研发,解决小型猪PERV疾病传播危险性提供科学对策和新的方向。

环境安全
北方地区大型钟楼式奶牛舍空气环境的评价
佟满满, 史彬林, 岳远西, 李倜宇, 赵飞, 孙登生, 闫素梅
《中国畜牧兽医》. 2017, 44(4):  1249-1257.  doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2017.04.044
摘要 ( 177 )   PDF (1561KB) ( 226 )  
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试验对北方地区某大型钟楼式奶牛舍一年内不同季节舍内、外的空气环境指标,包括温热环境指标、CO2和NH3含量、空气中的粉尘和微生物含量进行测定,旨在了解其变化规律,评价其是否满足奶牛健康生产的要求,以便为北方地区奶牛舍的设计和日常管理提供理论依据。结果表明,所测指标随季节或时间均呈现出一定的变化规律;所监测奶牛舍夏季舍内风速低于标准,中午(14∶00)舍内温度超过27 ℃,温湿指数(THI)>69,奶牛在夏季产生轻度的热应激;除此以外,在不同时间、不同位点监测的其他各项空气环境指标均符合奶牛的饲养标准。综合测定结果,试验所监测的钟楼式奶牛舍较适合北方地区的奶牛养殖,但建议增加防暑降温措施,以减少奶牛在夏季产生的热应激。