研究日粮锌水平对4~6周龄肉仔鸡生长性能、胴体性能和肉品质的影响。360只1日龄Arbor Acres(AA)肉公雏,0~3周龄统一饲喂同种日粮(含锌86.25 mg/kg),于22日龄从中选取288只鸡按体重随机分成8个处理,每个处理分6个重复笼饲养,每个重复笼6只鸡。分别饲喂不添加锌的玉米-豆粕型基础日粮(对照组,含锌27.66 mg/kg)和在基础日粮中分别添加20、40、60、80、100、120和140 mg/kg锌(试剂级硫酸锌)日粮。试验期21 d。研究结果表明,日粮锌水平对4~6周龄肉仔鸡生长和胴体性能均无显著影响(P>0.10),但日粮中添加适宜水平的锌可显著降低肉仔鸡胸肌、腿肌的滴水损失和胸肌丙二醛含量,提高胸肌L^*值(P<0.10)。

选5头经产并装有永久性十二指肠瘘管的中国荷斯坦奶牛,采用5×5拉丁方试验设计,分为对照组(烟酸和核黄素,0 g/d)、烟酸组(烟酸,3 g/d)、核黄素组(核黄素,0.3 g/d)、烟酸+核黄素组(烟酸3 g/d+核黄素0.3 g/d)、VB混合物组(烟酸3 g/d+核黄素0.3 g/d+硫胺素0.03 g/d+泛酸0.42 g/d+吡哆醇0.03 g/d+生物素0.04 g/d+叶酸0.04 g/d),以研究十二指肠灌注烟酸、核黄素、烟酸+核黄素、VB混合物对奶牛生产性能、血液参数及牛奶风味的影响。结果表明,奶牛干物质采食量和产奶量在烟酸+核黄素组、VB混合物组中增加(P<0.05),在烟酸组、核黄素组中无显著改变(P>0.05);外周血红细胞数和血红蛋白含量在VB混合物组中增加(P<0.05),在烟酸+核黄素组中降低(P<0.05),在烟酸组中无显著变化(P>0.05),核黄素组外周血红细胞数降低(P<0.05),血红蛋白含量无显著改变(P>0.05),处理组间其余外周血红细胞参数、血小板参数及牛奶风味均无显著差异(P>0.05)。因此,泌乳奶牛十二指肠灌注烟酸+核黄素、VB混合物可以提高奶牛生产性能,且VB混合物对外周血红细胞数量和血红蛋白含量具有提高作用,经十二指肠灌注烟酸、核黄素、烟酸+核黄素、VB混合物对牛奶风味无副作用,且烟酸+核黄素、VB混合物组牛奶风味较对照组更佳。

为研究紫锥菊复方对高温条件下蛋鸡生产性能和血液生化指标的影响,选用60周龄海兰褐蛋鸡250只,随机分为5组,试验第1~4组日粮中分别添加0.5%、1%、1.5%的紫锥菊复方和0.04%维生素C,第5组为空白对照组。试验结果表明,1%紫锥菊复方和1.5%紫锥菊复方能够显著提高高温条件下蛋鸡的采食量、产蛋率(P<0.05),降低料蛋比(P<0.05);维生素C对于高温条件下蛋鸡采食量、产蛋率、料蛋比的影响差异不显著(P>0.05),但可降低蛋鸡软破蛋比率和鸡群死淘数;与对照组相比,不同浓度的紫锥菊复方和维生素C均可明显提高血清GLU、TP、ALB水平和ALP活性,降低血清TG、CHO浓度和ALT、CK活性。

水貂饲料营养是影响水貂养殖经济效益的一个重要因素,科研工作者对此作了大量的研究工作。作者回顾了国内外水貂营养研究进展,结合对水貂消化系统特点的分析分别从能量水平、脂肪与脂肪酸、蛋白质与氨基酸、碳水化合物、维生素和矿物需要量等方面进行了综述,为水貂营养的进一步研究提供了依据,同时提出了水貂营养研究存在的问题及进一步研究方向。

猪的采食量与其生长速度、生产性能息息相关。在保证猪健康生长的同时,尽可能地提高其采食量,是提高养猪生产效益的重要途径。猪的食欲和采食行为受到外界环境、饲养技术、自身物理特性、体内化学和代谢因子、中枢和外周信号因子的综合调控。下丘脑在整合各种信号从而发挥采食调控作用的网络中发挥着关键作用。分子生物学手段的应用使得采食信号因子的研究不断取得突破,NPY、CCK、SS、Orexin、Ghrelin等在下丘脑采食调控网络中的作用和信号途径已日渐明朗,而AMPK、mTOR和Leptin更是成为近年来的研究热点。作者从影响猪采食行为的因素、下丘脑的调控作用及影响采食行为的主效因子等方面展开论述,综述了当前国内外在猪采食调控方面的研究进展,针对存在的问题提出讨论,并对接下来的研究方向做出展望。

从猪粪便中分离得到一株新饲用乳杆菌,对其16S rDNA基因进行了测序,该段基因序列已提交GenBank,登录号为HQ641209。将该菌株16S rDNA基因序列进行在线BLAST比对并与其他乳杆菌属菌株的16S rDNA序列建立系统发育树,结果显示该菌16S rDNA序列与NCBI公布的约氏乳杆菌Lactobacillus johnsonii (AB295648)的同源性为99.7%,因此该菌鉴定为约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii),将其命名为"Lactobacillus johnsonii Sun001"。经测试,该菌株对E.coli K88、K99菌株的生长有抑制作用,在pH为2.5的模拟胃液中处理3 h存活率为68.8%,在0.3%胆盐浓度的模拟肠液中处理3 h存活率为21.4%。

作者综述了钙调磷酸酶在促进肌纤维类型转化中的作用,为进一步研究肉品质提供参考资料。

为了研究氨和乳酸对悬浮培养的BHK-21细胞生长和细胞内酶活性的影响,用添加了不同浓度氨和乳酸的培养基悬浮培养BHK-21细胞,间隔12 h取样,比较细胞的生长状况,检测细胞代谢过程中营养物质的消耗和细胞内琥珀酸脱氢酶的活性。结果显示,当氨和乳酸的添加浓度分别为2.5和10 mmol/L时,对细胞的生长产生弱抑制作用;随着氨和乳酸添加浓度的增加,细胞生长缓慢,营养物质消耗量降低,琥珀酸脱氢酶活性降低;在氨和乳酸添加浓度分别达到5和20 mmol/L时,细胞生长代谢受到严重的抑制,琥珀酸脱氢酶活性在整个培养过程中显著低于对照组。因此,培养液中氨和乳酸积累到一定浓度会抑制BHK-21细胞生长,影响细胞内琥珀酸脱氢酶的活性。

通过RT-PCR方法扩增出日本乙型脑炎病毒SA14-14-2株的NS1基因,利用Hind Ⅲ和Hpa Ⅰ双酶切克隆到带有Flag标签的pcDNA3.1载体上,重组质粒命名为pcDNA3.1-NS1-Flag。脂质体法转染293T细胞后,经间接免疫荧光(IFA)和化学荧光Western blotting检测,证明带有Flag标签的NS1基因在293T细胞中得到高效表达。

为探讨脑心肌炎病毒(EMCV)感染后IL-6、iNOS基因的表达水平,从分子水平深入研究EMCV的致病机制,分别针对小鼠IL-6、iNOS及管家基因β-actin 的基因序列设计特异性引物和探针,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测IL-6、iNOS和β-actin的TaqMan real-time PCR检测方法。该方法线性关系好,IL-6、iNOS和β-actin标准曲线的相关系数均达到0.998;敏感性高,初始模板的检出下限均达到1×10¹拷贝/μL;特异性强,只有以总RNA反转录成的cDNA为模板,并加入特异性引物和探针的反应才检测到荧光信号;重复性好,组内与组间的变异系数均小于2%。应用所建立的检测方法,对猪源EMCV GXLC株感染小鼠的脑、心脏中IL-6、iNOS mRNA的表达水平进行了检测。结果表明,本研究建立的TaqMan real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于小鼠IL-6、iNOS基因的检测及定量分析。

试验旨在研究奶牛VEGF-A、VEGF-C及PLGF基因在乳腺发育各个时期的mRNA表达情况,进而为下一步研究奶牛乳腺发育功能基因奠定基础。采用Real-time PCR SYBR GreenⅠ染料法,所得结果与Affymetrix公司的基因芯片差异筛选结果作比较分析。结果表明,3个基因在乳腺发育11个时期均有表达。VEGF-A基因在妊娠后期及泌乳期表达量较高且与其它时期差异显著(P<0.05);VEGF-C基因在泌乳期表达量较高;PLGF基因的表达量从青春期开始到妊娠期呈递增趋势,到妊娠期4个月达到最高表达量,其后表达量逐渐递减。从以上结果可以得出,VEGF-A及VEGF-C基因可能在奶牛泌乳中发挥作用,而PLGF基因对奶牛乳腺发育起到重要作用,因此通过PCR扩增出PLGF基因的全部CDS序列,为下一步研究PLGF基因功能奠定基础。

试验通过候选基因法,选定卵泡抑素(follistatin,FS)作为影响水牛繁殖性能的主要候选基因,通过基因工程的方法,用XhoⅠ、SacⅡ双酶切广西大学动物遗传育种与繁殖实验室克隆的添加有ACC的Kozaka 序列的pMD-bFS质粒和pEGFP-N₁,构建pEGFP-bFS真核表达质粒,将其与阳离子脂质体混匀后,分别转染体外培养的水牛胎儿成纤维(BFF)细胞和仓鼠肾(BHK)细胞系,经过48 h培养后,在相差荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达水平,用RT-PCR和Western blotting方法对转入质粒表达进行定性鉴定。结果显示,本研究成功构建了添加有ACC的Kozaka 序列的pEGFP-bFS真核表达质粒,该重组质粒在BFF和HBK两种细胞均表达,但在HBK细胞系的表达量稍高。本研究结果将为下一步制备具有生物活性的bFS工程疫苗,研究bFS对水牛繁殖性能的影响提供参考。

根据猪乳铁蛋白N叶(PLF-N)的蛋白序列和毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子的偏嗜性,通过全基因合成法合成改造后的PLF-N基因片段,将其克隆到pGAPZα-A质粒中构建分泌型重组酵母表达载体 pGAPZα-A- PLF。pGAPZα-A- PLF 通过限制性内切酶Avr Ⅱ酶切线性化后,经电穿孔法转入毕赤酵母细胞SMD1168内。PCR检测结果发现,PLF-N基因与毕赤酵母染色体稳定结合,Zeocin抗性筛选,得到高拷贝转化子。在GAP启动子调控下,PLF-N重组蛋白获得分泌表达,其分子质量约为38 ku,上清表达量约为364 μg/mL。琼脂糖孔穴扩散法检测结果显示,该表达产物对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均具有较好的抑菌活性,且对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度(MIC)分别为12.5、25.0 μg/mL。

本研究旨在利用基因工程的方法,制备犬瘟热(canine distemper,CD)疾病诊断用抗原。提取犬瘟热病毒基因组,RT-PCR扩增犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)F1基因序列,克隆并测序。将F1基因定向克隆到原核表达载体pET28a多克隆位点,阳性重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达产物,并用Ni柱亲和层析纯化目的蛋白。结果显示表达的F1重组蛋白能与犬瘟热标准阳性血清发生反应,具有良好的反应原性,可以作为犬瘟热疾病的诊断用抗原。

本试验应用一步法RT-PCR和荧光RT-PCR方法分离到一株新城疫病毒,并对此毒株F基因进行了克隆、测序和分析,发现F蛋白裂解位点氨基酸序列为112Arg-Arg-Gln-Lys-Arg-Phe117,与新城疫病毒强毒株特征相符,从分子水平上证明了本试验所分离毒株为新城疫强毒株。结合GenBank中其他新城疫参考株F基因序列进行比较发现,本试验所分离毒株与目前流行的强毒株Taiwan/95、SKY/03、SGM/01的F基因裂解位点氨基酸序列完全一致,而与传统疫苗毒La Sota株的裂解位点则不同。

采用PCR和直接测序方法测定鸳鸯线粒体DNA(mtDNA)控制区全序列,与GenBank上已知序列相比较分析mtDNA D-loop 3个区的序列变异。结果发现,鸳鸯mtDNA控制区序列长1035 bp;与欧洲鸳鸯相比,鸳鸯(样品采集来自贵州省石阡县)mtDNA控制区共存在25处转换、12处颠换、2处插入和12处缺失;两种鸳鸯之间mtDNA控制区Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ区的序列变异率分别为14.5%、0.64%和0.8%,Ⅰ区的变异速率最快;mtDNA控制区的A、C、T、G碱基含量分别是26.6%、16.0%、26.6%和30.8%,A+T含量稍高于C+G含量,G含量最高,符合序列组成的碱基偏倚性。与其他鸭科物种进行了mtDNA控制区序列一致性的比较,结果均高于80%。

采用气相色谱/质谱法测定牛奶中涉及美国国家环保署(EPA)优先控制污染的6种邻苯二甲酸酯类环境激素,分别为邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸正二丁酯(DnBP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)和邻苯二甲酸二正辛酯(DnOP)。室温振荡提取方式优于超声波提取,用正己烷作提取溶剂,室温振荡提取1.5 h,就可将牛奶中的邻苯二甲酸酯类化合物提取完全。精密度检验和添加回收试验结果表明,PAEs各化合物的回收率在85.00%~102.14%之间,标准偏差(RSD)在1.88%~5.50%之间,说明本方法准确可靠。应用本方法检测市售牛奶中PAEs,DEP和DnBP 检出频率较多,BBP检出量最大,塑料包装的袋奶主要检出BBP、DEHP和DnOP,且比其它包装的牛奶含量都高,说明包装材料中的PAEs对牛奶有污染作用,需要引起足够重视。

为探索猪圆环病毒Ⅱ型(PCVⅡ) ORF2基因的高效表达,将ORF2基因整合到酵母表达载体pPICZαC中,构建重组质粒pPICZαC-ORF2,通过SacⅠ酶切线性化,经电穿孔法转到毕赤酵母菌SMD1168。经Zeocin^TM抗性筛选得到转化子,通过SDS-PAGE分析和Western blotting鉴定,结果表明衣壳蛋白在酵母菌中成功分泌表达。

为了快速确诊锦鲤疱疹病毒(koi herpesvirus,KHV),本试验建立了KHV双重PCR检测方法。根据锦鲤疱疹病毒的SphⅠ-5基因和胸腺嘧啶脱氧核苷激酶(thymidine kinase,TK)基因设计特异性引物,优化反应条件,建立了KHV双重PCR检测方法。结果表明,建立的方法简单、灵敏、准确,一个反应体系可同时扩增292 bp和410 bp两个基因片段,可有效用于KHV的检测。

本研究旨在阐明脑多头蚴湖南分离株线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位1基因(nad1)部分序列(pnad1)的遗传变异情况,并用pnad1序列重构脑多头蚴与其他带科绦虫的种群遗传关系。利用聚合酶链反应(PCR)扩增脑多头蚴的pnad1,应用ClustalX 1.81程序对序列进行比对,再用Phylip3.67程序MP法和Mage4.0程序NJ法绘制种系发育树,并用Puzzle5.2程序构建最大似然树,同时利用DNAStar 5.0中的Megalign程序进行同源性分析。结果显示,所获得的pnad1序列长度分别均为430 bp,湖南分离株与已知多头带绦虫位于同一分枝。由于脑多头蚴pnad1序列种内相对保守,种间差异较大,故均可作为种间遗传变异研究的标记,从而为脑多头蚴的分子流行病学和其相关疾病的诊断奠定基础。

FoxO蛋白家族是2000年才公布统一命名的蛋白质家族,其中FoxO1是FoxO亚家族中的主要成员之一。作者在综述FoxO1的结构及其分布的基础上,重点探讨了其与生物代谢、氧化应激、动物肌细胞分化和肌纤维类型转化、动物繁殖等方面的生物学功能。

为制备新城疫病毒HN蛋白的单克隆抗体,本研究采用新城疫病毒CK/AH/100/2010作为免疫原,免疫6~8周龄BALB/c小鼠,3次免疫后取脾细胞与SP2/0融合,用血凝抑制(HI)方法检测筛选,具有HI活性的单抗有6株:PX1-PX6。6株单抗与AIV、EDS等其它具有血凝活性的病毒的交叉血凝抑制试验结果表明,6株单抗具有良好的特异性。间接免疫荧光试验结果表明,PX1、PX3可与新城疫病毒CK/GD/263/2010 HN抗原发生特异性反应,而其它单抗不反应。

利用昆虫杆状病毒表达系统表达水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV) VP2 基因,表达的蛋白能够形成病毒样粒子,具有反应原性,为研究MEV新型疫苗奠定基础。采用PCR方法扩增MEV VP2 基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体,目的基因定向克隆到pFast-BacⅠ载体中,构建重组转座载体后转化DH10 Bac感受态细胞,获得重组Bacmid 质粒后转染Sf9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行 Western blotting鉴定。结果成功克隆MEV VP2基因。Western blotting结果证实,表达蛋白能够被MEV单克隆抗体识别。在 Bac-To-Bac 杆状病毒表达系统中成功的表达了MEV VP2蛋白,目的蛋白具有较好的反应原性。

本研究旨在表达山羊痘病毒p32蛋白、制备p32蛋白单克隆抗体。通过PCR克隆p32基因,连接到pMD18-T并测序;酶切、连接后将p32基因克隆到pET28a(+)中,将重组质粒转化大肠杆菌Rosseta,在IPTG诱导下成功表达p32蛋白;利用亲和层析法纯化p32蛋白,用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠后制备p32蛋白单克隆抗体,获得22株识别重组蛋白的单抗,通过间接免疫荧光鉴定,其中3株能识别病毒的p32蛋白。山羊痘病毒p32蛋白的表达和单克隆抗体的制备为山羊痘病毒抗原、抗体检测提供了生物材料。

根据GenBank中犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)VP2基因序列设计合成两对特异性引物1F/1R和2F/2R,从疑似CPV感染病犬的粪便病料中提取DNA作为模板,分段扩增涵盖VP2基因的两个片段,大小分别为1325和758 bp,并进行克隆、测序,通过拼接得到11条长度为1755 bp的VP2基因完整序列。核苷酸同源性分析表明,扩增得到的11个完整VP2基因序列与GenBank中发布的21株国内外参考毒株比较,核苷酸同源性为96.2%~99.8%。采用DNAStar软件分析,预测VP2蛋白可能成为B细胞表位的区段位于Met1-Val38、Met73-Val82、Met96-Ala103、Lys151-Thr170、Gly235-Phe243、Leu294-Phe303、Ala359-Thr399、Ile469-His483、Ala503-Arg520、Lys570-Tyr584。将扩增获得的VP2基因编码的氨基酸序列与CPV参考毒株进行比较,第426位和第555位氨基酸残基分别为Asp和Val,鉴定出本试验得到的CPV基因型均为2a型,初步证实成都地区仍以CPV-2a为主要流行毒株。

试验对山羊肌生成抑制素(myostatin,MSTN)基因序列进行了克隆及生物信息学分析,旨在为该基因的深入研究提供理论依据。结果表明,山羊MSTN基因序列长1128 bp,编码375个氨基酸,GenBank登录号为GU183368。山羊MSTN蛋白序列与绵羊、猪、兔、马、人、牛、鼠同源性依次为93%、89%、88%、88%、88%、87%、85%,同源性较高,说明该基因高度保守;疏水性分析结果表明,该蛋白大多数氨基酸为疏水性氨基酸;蛋白跨膜结构及方向显示,从内向外和从外向内分别含有1个强跨膜螺旋区;信号肽预测显示,信号肽序列长度为70;亚细胞定位预测发现,该蛋白是一个Ⅱ型膜蛋白,大部分定位于高尔基体、质膜和内质网膜,内质网腔内也有少量分布;结构功能域预测发现N-肉豆蔻酰化位点3个,N端糖基化位点2个,蛋白激酶C磷酸化位点5个,酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点5个,络氨酸激酶磷酸化位点1个,EF-hand 钙结合结构域1个,亮氨酸拉链1个,TGF 家族标记1个;二级结构预测显示,α螺旋占25.33%,β折叠占3.20%,随机卷曲占50.13%,延伸链占21.33%。

为建立快速、敏感、准确的马动脉炎病毒检测方法,笔者选取病毒基因组中高度保守的ORF7序列设计引物和TaqMan探针,分别使用马动脉炎病毒的总RNA和含有选定检测序列的克隆标准品进行一步法实时定量RT-PCR,绘制扩增曲线,两曲线斜率之差小于0.1,证明两者的扩增效率相同,可用选定检测序列的克隆标准品对马动脉炎病毒进行定量检测。

本试验采用RT-PCR和测序相结合的方法克隆了牛锌指蛋白312(ZnF312)基因,得到了1812 bp的cDNA序列,包括63 bp的5'非翻译区(1-63)、1377 bp的CDS区(64-1440)和372 bp的3'非翻译区(1441-1812)。采用生物信息学方法分析了该基因及其所编码的蛋白质的结构和功能,结果表明,ZnF312基因位于22号染色体上,编码458个氨基酸,分子质量为48.82 ku,等电点为9.419,含有6个锌指结构域(ZnF_C2H2),与人、黑猩猩、小鼠、大鼠和狗的ZnF312蛋白序列的相似性分别为97%、97%、94%、94%和95%,ZnF312蛋白亚细胞定位于细胞核的概率为95.7%,定位于线粒体的概率为4.3%。结合ZnF_C2H2在真核生物中的重要作用,推测牛ZnF312蛋白可能识别相应的靶基因,在生长发育或疾病控制中起着重要的作用。

以51头西门塔尔和鲁西黄牛的杂交后代作为试验动物,扩增组织蛋白酶D(cathepsin D,CTSD)基因部分外显子,通过DNA测序方法检测到该基因第5、6、8外显子共4个SNPs(T581C、T599C、A861T、A1128G)的遗传变异。SAS软件采用最小二乘法拟合线性模型,将几个位点的不同基因型与牛肉质、胴体性状进行关联分析。结果表明,位于CTSD基因外显子5的T581C突变与大理石纹性状呈显著相关(P<0.05),BB基因型显著优于AA和AB基因型,这为T581C作为肉牛大理石纹的分子标记提供了一定的理论依据。

本试验选择高表达密码子重新设计合成猪β干扰素成熟肽核苷酸,通过设计特异的引物,在毕赤酵母表达系统中表达PoIFN-β,获得分泌表达的高活性重组PoIFN-β,并采用非洲绿猴肾细胞(Vero)-水泡性口炎病毒(VSV)系统以细胞病变抑制法测定重组猪β干扰素的效价,为指导重组PoIFN-β的临床使用和研究其生物学功能提供基础。

利用最大似然法(ML)估计了内蒙古三河牛泌乳曲线基于不完全伽马函数(Wood)的不同统计模型,对各模型的差异用似然比(LR)进行检验。结果表明,模型Ⅲ显著优于模型Ⅱ和模型Ⅰ(P<0.01)。采用限制性最大似然法(REML)对模型Ⅲ估计得出,泌乳初期奶量在不同胎次(pari)、产犊年度(year)、产犊季节(seas)、场(herd)下具有显著差异(P<0.05);测定日产奶量的变化率随测定日(t)、测定日自然对数(t')的推移,以及胎次与测定日(t)及其自然对数(t')交互作用的不同差异极显著(P<0.01),泌乳初期奶量与t'和t的斜率系数之间存在显著的正或负相关(P<0.01)。

为了研究季节对石家庄地区荷斯坦奶牛超数排卵的影响,对达到12月龄的荷斯坦育成牛逐月进行3次超数排卵。结果表明,头均胚胎总数和头均退化胚胎数各月差异不显著(P>0.05);头均可用胚胎数量3月最高(7.04±4.92),8月最低(3.20±3.33),两者间差异显著(P<0.05),与其它各月间无显著差异。总体而言,超排效果随着气温升高而呈下降的趋势,在气候较为适宜奶牛生理生存状态的季节,超排效果更为理想。说明超数排卵效果春季最好,秋冬季效果好于夏季,超排应避开夏季炎热的月份。

通过常规病毒检测和分离方法,从东北某猪场送检的猪肺部组织样品中检测分离猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),经过电镜观察和间接免疫荧光检测,并根据PRRSV美洲标准株VR-2332的ORF5基因设计特异引物,利用RT-PCR扩增并克隆ORF5基因,分析其与国内外PRRSV毒株间的同源性。结果表明,所分离株是PRRSV,命名为Jsp-1。

畜禽的肉质特性已经成为动物生产的一个重要研究方向。对影响肉质特性的蛋白质和脂肪构成,蛋白质组学和基因表达谱等高通量研究方法在肉质研究上的最新成果,以及通过研究影响肌肉生长发育和脂肪沉积的结构基因和microRNA以阐明肉质特性的分子机理进行了综述,并对生物信息学将在肉质形成机理研究中发挥的重要作用进行了展望。

动物抗病育种已成为育种学家研究的热点,其中抗病力的选择是研究的前提。作者就利用免疫应答、分子遗传标记及基因工程对动物抗病力选择的研究进行简要的阐述,分析各种方法的优劣,最后对抗病力的选择提出了一些建议。

通过三氟氯氰菊酯对小鼠的骨髓细胞微核及精子畸形和蓄积毒性影响的研究,进一步阐明三氟氯氰菊酯的毒理作用。选取健康成年小鼠50只,随机分为给药高、中、低剂量组,阳性对照组和空白对照组,每组各10只。给药组分别以三氟氯氰菊酯水溶液9.18、4.59、2.29 mg/kg体重灌胃,空白对照组给予等量的生理盐水灌胃,每天1次,连续4 d;阳性对照组以环磷酰胺80 mg/kg体重腹腔注射1次;评价三氟氯氰菊酯对小鼠骨髓细胞微核的影响;另取健康成年雄性小鼠50只,随机分为给药高、中、低剂量组,阳性对照和空白对照组,每组10只;给药组分别以三氟氯氰菊酯水溶液9.18、4.59、2.29 mg/kg体重灌胃;阳性对照组以环磷酰胺80 mg/kg灌胃,空白对照组给予等量的0.9%生理盐水灌胃,每天1次,连续5 d,计算精子畸形率。选择健康小鼠40只,随机分20只为蓄积毒性试验组,20只为空白对照组。试验组采用剂量递增连续染毒法来评价三氟氯氰菊酯的蓄积毒性,计算累积系数,按累积系数的评价标准评价蓄积毒性。结果表明,三氟氯氰菊酯为明显蓄积物质,对小鼠生长造成严重损害;三氟氯氰菊酯高剂量组精子畸形率与空白对照组相比差异极显著;三氟氯氰菊酯高剂量组微核率与空白对照组相比差异极显著。因此,三氟氯氰菊酯为明显蓄积物质,且具有极强的致畸、致突变作用。

黑龙江省近几年频繁发生以多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎以及急性死亡为特征的传染病,为猪场造成严重经济损失,为了确诊是否有副猪嗜血杆菌感染,采集病死猪肝脏、脾脏和肺脏等病料,进行副猪嗜血杆菌的分离;对其理化特性进行鉴定,应用PCR方法对其16S rRNA基因扩增后进行克隆测序,将测序结果在GenBank上进行BLAST分析,把相近的基因序列应用DNAStar软件进行同源性和进化关系分析;用分离菌株进行药物敏感性试验,筛选敏感药物。结果分离出一种具有多形性的NAD依赖性菌株,经鉴定为副猪嗜血杆菌;16S rRNA基因进化分析结果表明,分离菌株与以往报道的副猪嗜血杆菌中国、日本和美国分离株属于同一亚群,而西班牙分离株属于单独的亚群;分离菌株对壮观霉素和头孢拉定高度敏感。

砷制剂由于在提高增重和改进饲料利用率方面的作用而被广泛应用于畜禽生产,长期使用或剂量不当,会导致动物砷的慢性中毒,通过食物链的富集作用,导致人类相应疾病的发生。慢性砷中毒可以导致皮肤损伤、心血管疾病、泌尿系统及神经系统损伤、糖尿病等,砷还是一种确定的致癌物。文章对动物慢性砷中毒的毒理病理学进行了综述,并对慢性砷中毒可能的研究方向进行了展望。

为了明确引起大连地区奶牛隐性乳房炎的主要病原菌及其发病情况,对大连市不同地区的256头黑白花泌乳奶牛进行调查研究,对奶牛隐性乳房炎奶样进行病原菌的分离鉴定及药敏试验。结果表明,检出奶牛隐性乳房炎阳性率为65.63%、乳区阳性率为51.95%;病原菌以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、链球菌(Streptococcus)和大肠杆菌(Escherichia coli)为主,占检出细菌总数的83.33%;体外药敏试验筛选出了对主要病原菌高度敏感的药物,能有效地治疗奶牛隐性乳房炎。

本试验自广西南宁某个体黑山羊养殖户的病羊中分离得到疑似肺炎支原体菌株,经光学显微镜和电子显微镜对培养菌株的生长形态进行观察并结合菌株的生化特性、生长抑制试验、动物致病性试验和PCR检测鉴定为绵羊肺炎支原体。

从广东某鸡场送检的疑似禽网状内皮组织增殖病的病鸡中采集病料,处理后经接种DF-1细胞,经聚合酶链式反应(PCR)及特异性间接免疫荧光试验(IFA),分离并鉴定出1株禽网状内皮组织增殖病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV),命名为GD09。依据已发表的REV前病毒全基因组序列设计并合成6对引物,采用分段扩增的方法完成了分离株的全基因组序列测定。结果显示,该分离株基因组序列全长8295 bp,符合典型的复制完全型反转录病毒的基因组结构,基因序列中不含已知致癌基因。将该分离株的亚群特异性gp90基因序列与国内外各参考株相应序列进行相似性比较分析,结果表明,GD09分离株与中国分离株HA9901亲缘关系最近,核苷酸相似性最高。

JL0911株犬细小病毒是由军事兽医研究所流行病与病毒病防控技术实验室分离得到的一株新型犬细小病毒,其主要抗原位点上的氨基酸序列较国内先前分离到的其他株有较大差异,不能被归入目前已有的CPV-2a、CPV-2b、CPV-2c三个类型。本研究旨在利用JL0911株犬细小病毒研制灭活疫苗,并评价其免疫原性。试验采用10^5.5 TCID₅₀/mL的犬细小病毒JL0911,以甲醛灭活后,加入1/4体积的纳米佐剂,制备了犬细小病毒灭活疫苗。取1.5 mL上述疫苗,通过肌肉注射免疫普通家犬,免疫前后不同时间均采集血清,在F81细胞系上测定犬细小病毒的中和抗体。结果显示,免疫后14 d,试验犬血中细小病毒中和抗体效价较免疫前有显著提高,最高可由0提高至2⁹,表明本试验分离的JL0911株犬细小病毒具有生产犬细小病毒灭活疫苗的潜在价值。

本试验旨在研究β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦、外排泵抑制剂利血平及膜通透促进剂乙二胺四乙酸二钠(EDTA)对鸭源大肠杆菌抗菌药物敏感性的影响。采用微量肉汤稀释法测定8株多重耐药鸭源大肠杆菌对头孢噻呋钠、恩诺沙星、阿米卡星、氟苯尼考、多西环素及其与舒巴坦、利血平和EDTA联用的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,舒巴坦能使5株鸭源大肠杆菌对头孢噻呋钠的MIC值下降4倍以上;利血平仅能使3株菌株对头孢噻呋钠的MIC值下降4倍以上;而EDTA能使7、5、3、6、8株菌对以上5种药物的MIC下降4倍以上;舒巴坦+利血平使4株菌株对头孢噻呋钠的MIC下降4倍以上,使5株菌株对氟苯尼考的MIC下降4倍以上;舒巴坦+EDTA使鸭源大肠杆菌对以上5类药物的MIC大幅度下降,分别使8、5、2、8、8株菌MIC下降4倍以上;利血平+EDTA使7株菌株对恩诺沙星MIC下降4倍以上,使所有分离株对其余4种药物的MIC显著下降;舒巴坦+利血平+EDTA和5类药物联用后,所用分离株的MIC下降4倍以上。由此可见,引起鸭源大肠杆菌对以上抗菌药物的耐药原因主要包括细胞膜通透性的下降、药物的主动外排作用和产生β-内酰胺酶的破坏作用,三者相协同提高了鸭源大肠杆菌的耐药水平。

鹦鹉眼炎为鹦鹉饲养过程中最常见疾病,该病常会导致鹦鹉观赏价值下降,同时也成为人们健康的隐患。本试验通过取患鸟的眼部分泌物进行病原分离鉴定及药敏试验的研究,探讨引起鹦鹉眼炎的主要致病菌的类型,抗生素对鹦鹉眼炎主要致病菌的抑制效果。试验结果显示,引起鹦鹉眼炎的病原菌为大肠杆菌,42种抗生素中的氧氟沙星和环丙沙星体外抑菌效果最佳。将上述菌种进行动物接种试验,成功复制出本病,应用含有氧氟沙星成分的眼药水治疗,有明显疗效。据此可提出有效防治措施,为鹦鹉眼炎疾病防治提供参考依据。

从内蒙古包头市某养殖场患有肺炎的病兔分离到一株革兰氏阳性球菌,通过形态学观察和生化试验进行了初步鉴定,并通过16S rRNA序列扩增和测序进行分析,BLAST分析结果显示,该菌与金黄色葡萄球菌的核酸序列同源性达99.6%,确定该分离菌株为兔金黄色葡萄球菌,并将其命名为BTSH1。

为有效鉴别猪瘟病毒强毒株(Shimen)与弱毒疫苗株(HCLV),根据GenBank上已发表的猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2基因高度保守区设计一对特异性引物,在其跨越区内部有Shimen株独有的限制性内切酶Bgl Ⅱ酶切位点,采取酶切RT-PCR产物的方法鉴别Shimen株和疫苗株,同时对该方法的特异性和敏感性进行检测。结果表明,应用该方法从Shimen株和疫苗株中均能扩增出一条大小为750 bp的特异性片段,疫苗株的RT-PCR产物不能被Bgl Ⅱ酶切,Shimen株的RT-PCR产物则被酶切为大小分别为520和230 bp的两条带。此方法可扩增猪瘟病毒的E2基因保守片段,对病毒RNA的最小检出量为3.96×10^-4 μg/mL。采用此方法检查了30例临床疑似猪瘟病料,结果3例感染猪瘟病毒强毒,21例为猪瘟弱毒疫苗株,其他为猪瘟阴性。

本研究旨在对H1N1猪流感病毒血凝素蛋白抗原分子的模拟表位进行分离鉴定并分析其抗原性。用抗H1N1猪流感病毒血凝素蛋白小鼠血清IgG对噬菌体随机12肽库进行筛选,3轮亲和筛选后,特异性噬菌体得到了有效富集;对随机挑选的47个噬菌体克隆用ELISA进行鉴定,其中40个为阳性;对40个阳性克隆测序得到3种不同氨基酸序列;用Western blotting对获得的3个不同序列的噬菌体克隆进行抗原性分析,显示这3种噬菌体插入短肽能和H1N1猪流感病毒感染小鼠血清特异性结合。结果表明,本试验获得了3种H1N1猪流感病毒血凝素蛋白模拟抗原表位,它们都具有明显的抗原性,为H1N1猪流感病毒的疫苗研究和诊断奠定了基础。

猫胫腓骨骨折发生后,由于猫胫腓骨很细,且近心端附着丰富的肌肉,而远心端很少,如果单纯采用外固定或内固定的治疗方法,效果往往不理想。文章就一例猫胫腓骨骨折采用髓内针和金属丝进行内固定后,又在外面用夹板进行外固定,术后恢复良好的病例来进行研究,希望能对猫胫腓骨骨折的治疗提供参考。

通过对产后15~20 d、跗关节炎患牛与正常奶牛血清中蛋白、甲状腺素(T₃、T₄)、维生素、葡萄糖、乳酸、丙酮酸、Ca、P等生化指标的比较,探讨血液生化指标的变化与奶牛骨关节疾病的关系。结果表明,试验组血清白蛋白显著低于对照组(P<0.05),而α-球蛋白显著高于对照组(P<0.05);试验组T₃水平显著高于对照组(P<0.05),T₄显著低于对照组(P<0.05);试验组乳酸和丙酮酸水平显著高于对照组(P<0.05);试验组血糖、VA、VC、VE及Ca、P含量均显著低于对照组(P<0.05),说明产后关节炎过程中T₄、VA、VC的含量降低使关节软骨的胶原及蛋白多糖合成减少,解聚相对增多,引起血清蛋白组成发生变化;而产后血糖水平降低,引起乳酸、丙酮酸含量升高,低血糖又抑制了VC的合成;关节炎过程中可见Ca、P水平降低,可能是通过影响骨质代谢而促进了关节炎的发生。

尿路结石是公犬泌尿系统的常发病之一,膀胱内形成结石无法从尿道排出,导致患犬无法排尿或排尿困难,常通过手术从膀胱及尿道内取出结石。文章就一尿路结石病例的发病情况、临床表现、一般和特殊诊断以及治疗(先行膀胱切开术,无效后,最后行尿道造口,术后恢复良好)过程进行描述,以期为该病的临床诊治提供一定的参考。

藏獒作为犬类的一种,也受到犬类病毒感染的威胁。据调查,侵害藏獒的主要病毒有犬细小病病毒和犬瘟热病毒两大类。作者对青海某藏獒养殖户的病死藏獒进行临床症状观察,病理剖检及实验室诊断,通过病毒的分离培养及鉴定,确诊病死藏獒为犬细小病毒感染。鉴于养殖场中该病的存在及对养犬业的危害,建议加强对犬细小病毒的诊断及监控。

在揭示生猪价格超常波动的内涵、特征的基础上,运用供求理论、组织行为理论和系统分析方法,从疫病、市场、政府调节3个方面深入分析了中国生猪价格超常波动的原因;然后以实现生猪健康养殖目标为视角,从提高生猪产业组织化程度、生产经营主体决策科学性和市场有效性,增强消费者的环保意识,改善政府政策支持方式等方面提出抑制生猪价格超常波动的具体实施策略,推动中国生猪产业快速、持续发展。

为了增加养羊业的经济效益,以及医学、药学进行山羊动物试验的需要,必须提高山羊的繁殖效率,增加山羊怀孕的多胎率。为此作者特设计采用氯前列烯醇(Cloprostenol)对华东地区的山羊(江苏海门山羊)进行同步处理并配种以达到提高山羊的多胎率,提高山羊利用效率的目的。试验分成两组,氯前列烯醇诱导组(T)136头和非诱导组(UT)136头。结果显示,采用氯前列烯醇诱导的山羊(T)多胎率达到78.7%(107/136),怀孕羔羊数平均达到了2.01只/胎(273/136),而未采用氯前列烯醇诱导的对照组山羊(UT)的多胎率只有39.0%(53/136),怀孕胎数平均为1.31只/胎(179/136),两组之间差异极显著(P<0.01),氯前列烯醇处理组羔羊出生后生长、发育正常。本试验结果表明,通过氯前列烯醇诱导可以明显提高山羊的怀孕多胎率,对山羊优良品种的繁育、种群的快速扩繁及试验用山羊的研制等具有重要的经济价值和应用价值。

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是一种对养猪业造成巨大经济损失的传染性疾病,临床上表现为妊娠母猪流产,产死胎、木乃伊胎,断奶仔猪的呼吸道症状等。文章介绍了该病的流行病学特点、临床症状等,重点介绍在生产过程中防控本病的综合措施。

通过测定小鼠血清谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)的活性,探讨柠檬酸、Ca²⁺及二者联合对小鼠肝脏潜在毒性。将体重(20±2)g的昆明系小鼠100只,随机分为对照组,柠檬酸低、中、高剂量组,Ca²⁺低、中、高剂量组,柠檬酸联合Ca²⁺低、中、高剂量组,每组10只。分别经腹腔注射途径作相应处理,0.2 mL/只,对照组注射等量的生理盐水,注射2次,第2次注射7 d后,眼球取血,分离血清,分别测定血清中GOT和GPT的活性。结果显示,各组GOT活性均无显著差异(P>0.05)。与对照组GPT活性相比,钙高剂量组GPT活性升高51.66%,差异显著(P<0.05);钙中剂量组GPT活性升高42.63%,差异显著(P<0.05);联合高剂量组GPT活性升高35.32%,差异显著(P<0.05)。本研究结果表明,一定剂量的Ca²⁺能引起肝脏细胞损伤,与柠檬酸联合后,降低了其对肝脏的毒性。

试验考察了六茜素的质量要求,试验包括澄明度测定、无菌检查、渗透压测定、溶血性试验、酸度测定、局部刺激性试验、热原检查、过敏反应试验、含量测定。结果表明,六茜素符和注射剂的一般要求(中国兽药典委员会,2005)。

噬菌体是一类细菌依赖性病毒,可有效地治疗细菌性感染,尤其是大量耐药菌株的出现使抗生素对细菌病的治疗越来越棘手,噬菌体疗法将对细菌病的控制起更加积极的作用。作者就噬菌体抗菌机理、治疗优势、噬菌体治疗细菌感染的研究及噬菌体裂解素的研究进展进行综述。

苏云金芽孢杆菌是目前应用广泛而有效的一种微生物杀虫剂。文章主要对苏云金芽孢杆菌的培养、分离筛选、主要杀虫蛋白及杀虫机理、基因型鉴定、构建工程菌等方面做了简要综述。

试验研究了灌服单剂量喹赛多(40 mg/kg体重)后原药及其代谢物在健康猪体内的药代动力学特征。液相色谱-串联质谱法测定血浆中喹赛多及其代谢物的浓度,通过WinNonlin 5.2药代动力学软件分析,用非房室模型统计矩原理计算喹赛多及其代谢产物的药动学参数。主要药动学参数分别为喹赛多:t_1/2 (7.52±1.77) h,C_max(0.02±0.01) μg/mL,AUC_{(0-36 h)} (0.26±0.24) (h·μg)/mL,MRT(11.37±3.21) h;N1(脱一氧喹赛多):t_1/2 (3.05±1.12) h,C_max(0.35±0.18) μg/mL,AUC_{(0-36 h)} (2.13±2.31) (h·μg)/mL,MRT(11.83±3.34) h。N4(脱一氧喹赛多):t_1/2 (2.91±1.15) h,C_max(0.60±0.32) μg/mL,AUC_{(0-36 h)} (3.78±4.28) (h·μg)/mL,MRT(11.00±2.86) h。脱二氧喹赛多:t_1/2 (3.85±1.30) h,C_max(0.46±0.19) μg/mL,AUC_{(0-36 h)} (4.21±2.47) (h·μg)/mL,MRT(13.35±2.65) h。QCA(喹口恶啉-2-羧酸):t_1/2 (5.08±0.57) h,C_max(0.25±0.11) μg/mL,AUC_{(0-36 h)} (3.05±1.46) (h·μg)/mL,MRT(15.15±1.83)h。结果表明,血浆中主要存在形式为代谢物,各代谢物的血药浓度及AUC_(0-∞)均高于喹赛多,喹赛多消除半衰期最长,QCA平均滞留时间最长。

禽肉以其高蛋白、低脂肪、低胆固醇的优良品质成为理想的营养健康食品,但由于热应激而导致的家禽肉品质量低劣是现代养禽业所面临的一个重要问题。作者综述了热应激对禽肉肉色、pH、嫩度、保水性等感官性状和肉的风味的影响,从而为养禽生产提供借鉴意义。

采用小鼠耳廓肿胀法和小鼠肉芽组织增生法研究治疗奶牛隐性乳房炎的复方中药制剂的抗炎效果;采用改进Karber法,以半数致死量(LD₅₀)作为评价急性毒性的指标,研究复方中药制剂的急性毒性作用。结果表明,复方中药制剂的低、中、高剂量组对小鼠耳廓的肿胀度(分别为10.41、9.26、8.82 mg)与对照组(生理盐水)的肿胀度(12.52 mg)相比差异显著(P<0.05);复方中药制剂组小鼠的棉球致肉芽肿增重分别为11.21、10.71、8.83 mg,与对照组增重(12.63 mg)相比差异显著(P<0.05)。在急性毒性试验中无小白鼠死亡,LD₅₀>60000 mg/kg体重。研究表明复方中药制剂能有效对抗急性和慢性炎症,抗炎效果显著,且该药安全可靠,可作为临床用药。

为了解宠物兔肠道寄生虫感染情况,采用卢戈氏碘液染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法对1个宠物市场和2个宠物兔场的305份兔新鲜粪便样品进行检查。结果检出肠道寄生虫5种,总感染率为71.2%,其中球虫感染率最高,为47.2%,隐孢子虫、贾第虫、圆线虫和栓尾线虫感染率分别为2.0%、3.9%、29.5%和1.0%;不同采样点和不同年龄段宠物兔肠道寄生虫的感染率统计学差异均极显著(P<0.01),寄生虫感染随年龄增长呈递减趋势。数据表明宠物兔肠道寄生虫感染率较高,且存在人兽共患机会性原虫,应加强其寄生虫病的防治。