试验旨在探讨日粮中β-羟基β-甲基丁酸钙(HMB-Ca)对肉仔鸡生长性能、屠宰性能和血液激素变化的影响。选用刚出雏的雄性肉雏鸡600只,随机分配到5个处理组(每组6个重复,每重复20只鸡),分别饲喂HMB-Ca添加量为0 (对照组)、0.05%、0.1%、0.15%和0.2% 的日粮,试验期42 d。测定1~21、22~42 、1~42 d的平均日增重、平均采食量和料重比,42 d的屠宰性能及21 、42 d血清激素含量。结果表明,各组间肉鸡的平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异(P＞0.05),但后期和全期均以0.1% HMB-Ca组为最佳;42 d时,0.1% HMB-Ca显著提高肉鸡胸肌率(P＜0.05),同时该处理也有提高腿肌率的趋势(P＞0.05);42 d时,0.05%以上 HMB-Ca组胰岛素含量均显著高于对照组(P＜0.05),以0.1%添加水平为最高;低剂量HMB-Ca(0.05%)组生长激素水平显著高于高剂量HMB-Ca组(0.15%和0.2%)(P＜0.05)。综上可知,HMB-Ca可促进肉仔鸡胸肌的生长发育,提高血清中胰岛素含量;肉仔鸡日粮中适宜的HMB-Ca添加水平为0.1%。

作者综述了早期断奶仔猪肠黏膜免疫系统、谷氨酰胺的营养生理功能、早期断奶对仔猪肠黏膜免疫的影响,以及谷氨酰胺对早期断奶仔猪肠黏膜免疫系统的结构和功能、肠道屏障功能、肠道抗氧化能力及生产性能的影响。

本试验旨在研究复方中草药添加剂对林下生态鸡生长性能和免疫功能的影响。将200只28日龄的林下生态鸡随机分为4组,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别按日粮的0.5%、1%、2%添加复方中草药制剂,空白组不添加任何药物,测定各组的生长性能、新城疫HI抗体水平、免疫器官指数及淋巴细胞转化率。结果表明,按1%、2%添加复方中草药能显著提高林下生态鸡的生长性能和成活率,显著提高HI抗体水平,延长持续时间,促进免疫器官的生长发育,显著提高淋巴细胞转化率。

试验选择270羽1日龄艾维茵肉鸡,随机分为6组,每组3个重复,每个重复15羽。基础日粮为玉米-豆粕型,对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加杆菌肽锌0.5%、1.0%、1.5%、2.0%的中草药复方添加剂,进行为期6周的饲养试验,观察其对肉仔鸡肌肉营养成分的影响。结果表明,该中草药方剂能不同程度地提高肉仔鸡的肌肉营养成分及肌苷酸的含量,降低肉中胆固醇含量,以1.5%添加效果最佳。

试验选用相同胎次母猪的21日龄断奶杜洛克×长白×大约克健康仔猪120头,以栏为单位,依据仔猪栏平均体重(5.27 kg±0.63 kg)随机分为3组,每组5个重复,每个重复(栏)8头仔猪(公、母各半),分别饲喂对照日粮(基础日粮+2.05%丙氨酸)、精氨酸日粮(基础日粮+0.6%精氨酸)和精氨酸生素日粮(基础日粮+0.09% AAA),试验期为7 d,研究了日粮中添加精氨酸和精氨酸生素对断奶仔猪生长性能、器官相对重量和血液生化参数的影响。结果表明,日粮添加0.6%的精氨酸和0.09%的AAA,仔猪的平均日采食量、日增重有显著提高(P＜0.05);肝脏、肾脏、脾脏和心脏的重量高于对照组,但差异均不显著(P＞0.05);与对照组相比,精氨酸组和精氨酸生素组的血清尿素氮和碱性磷酸酶活性显著降低 (P＜0.05),其它血液生化参数差异都不显著(P＞0.05)。试验结果显示,日粮中添加精氨酸和精氨酸生素有利于缓解早期仔猪断奶应激,提高其生长性能,0.09%的AAA可以有效替代0.6%的精氨酸。

试验旨在研究不同发育时期小鼠睾丸肾上腺素能受体(β1AR、β2AR、β3AR、α1A、α1B和α1D)和胆碱能受体(M1、M2、M3、M4和M5)mRNA的表达,以及神经递质去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)和乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)对发育期小鼠睾丸间质细胞增殖的影响。RT-PCR结果表明,β1AR和β2AR mRNA在睾丸发育的3个时期都表达,β3AR、α1A和α1B mRNA在小鼠发育早期的睾丸表达,在成年期睾丸不表达,α1D mRNA在睾丸发育的早期不表达,成年期表达;胆碱能受体M1R、M2R、M3R和M5R mRNA在睾丸发育的3个时期都表达,而M4R mRNA主要在成年期表达。另外通过NE和Ach处理体外培养的发育期睾丸间质细胞,发现Ach处理组BrdU阳性细胞的数量明显增加(P＜0.01)。结果表明,肾上腺素能受体和胆碱能受体在小鼠睾丸的整个发育时期都表达,Ach可促进发育期小鼠睾丸间质细胞的增殖。

本试验旨在为阐明水牛感染大片吸虫的免疫机理提供单核巨噬细胞材料。经过密度梯度离心分离,贴壁法培养水牛外周血单核巨噬细胞,以MTT法检测培养4、24、48、72、96、120、144、168、192 h时贴壁单核巨噬细胞的相对存活数量,结果显示贴壁细胞体外培养72、96、120 h时,细胞数量相对稳定,组间差异不显著(P＜0.05)。贴壁72 h的细胞通过倒置显微镜、瑞氏染色观察,结果显示其具备单核巨噬细胞的典型形态特征;酸性磷酸酶、非特异性酯酶染色阳性率分别为(72.8±0.5)%和(84.6±0.4)%,显示其具备单核巨噬细胞酶化学特性;贴壁细胞表达单核巨噬细胞特异性表面抗原MHC Ⅱ;墨汁的吞噬率为(87.5±0.6)%,表明该细胞具有单核巨噬细胞的吞噬功能。结果表明贴壁法分离,5% BSA的DMEM培养水牛外周血单核巨噬细胞,培养72 h贴壁细胞具备单核巨噬细胞特征,在细胞数量相对稳定期(72、96、120 h)可以进行相应的试验研究。

采用TUNEL法在一个生物年的周期内每隔两月对绒山羊体侧部的皮肤毛囊进行检测,观察毛囊细胞凋亡的周期性变化特点。结果表明,控制毛囊生长变化的凋亡细胞是成簇分布的,毛乳头的成纤维细胞很少有凋亡现象,细胞凋亡与毛囊周期性生长具有相关性,兴盛期毛囊凋亡细胞减少,退行期凋亡细胞显著增多。常年长绒型与季节长绒型品系在一年内的凋亡细胞变化情况基本一致,只是常年长绒型品系在兴盛前期的细胞凋亡明显低于季节长绒型品系。

为了进一步探索抗生素与益生菌的关系,并为畜产品的安全生产服务,本研究采用不同浓度的硫酸粘杆菌素和金霉素作用于乳酸菌,通过测定培养液的pH、吸光度值及活菌数目来判断抗生素抑制作用的强弱。结果表明,在厌氧培养24 h后,0.025%的金霉素和0.05%的硫酸粘杆菌素可抑制乳酸菌的生长(P<0.05),随着培养时间的延长,两种抗生素对乳酸菌的抑制作用均逐渐减弱,说明益生菌的耐药性在逐步增强。

microRNA (miRNA)是一类大小约22 nt的内源性非编码RNA,它们通过剪切靶基因的转录产物或抑制靶基因转录产物的翻译,在转录后起到调控靶基因表达的作用。大量研究结果表明,动物体内的miRNA参与了胚胎的早期发育、脑和神经发育、心脏发育、肌肉及骨骼发育等动物发育的各个方面。已有证据表明,一些miRNA在胎盘中特异表达,在胎盘的正常发育过程中起到了重要作用。作者对参与胎盘发育的miRNAs进行了综述。

建立了奶牛饲料样品中甲草胺、乙草胺、莠去津3种除草剂的气相色谱-质谱(GC-MS)检测方法,样品经分散固相萃取法处理后,取上清液用安捷伦HP-5气相色谱毛细管柱分离,气相色谱-质谱联用仪进行测定。3 种除草剂在 5~500 μg/kg 内线性关系良好。平均添加回收率为94.5%~115.4%,相对标准偏差(RSD) 为4.4%~9.2%,最低检测限为1.5 μg/kg。本方法前处理操作快速简单,可重复性好,满足国内外对饲料中甲草胺、乙草胺和莠去津的快速、准确的检测要求,适合大量样品的准确定量和定性分析。

本研究旨在建立检测鸡球虫四价弱毒疫苗(柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫)抗体应答的酶联免疫吸附试验(ELISA),并初步阐明鸡免疫四价弱毒疫苗及攻虫后的抗体应答。将300羽岭南黄鸡分为A(免疫攻虫组)、B(不免疫不攻虫组)、C(不免疫攻虫组)共3个组。A组雏鸡在4日龄时进行首免,11日龄时鸡开始二免,二免完成后(17日龄时)对A组及C组的鸡进行攻虫(28万个4种球虫的混合卵囊/羽),7 d后检查A、C两组鸡的存活率。在鸡二免和三免完成后,分别对A、B组进行采血,通过优化最佳抗原包被浓度、酶结合物工作浓度及最佳血清稀释度,建立了ELISA方法来检测鸡体对球虫四价弱毒疫苗的抗体应答情况。A组鸡血清抗体的平均D值为0.870和0.904,明显高于B组鸡的平均D值0.261和0.270,证明了鸡体免疫疫苗后可以刺激产生相应抗体。免疫鸡攻虫后的存活率和抗体应答的检测结果,都充分说明了此鸡球虫弱毒四价疫苗具有良好的免疫原性,所建立的ELISA方法为今后评价鸡球虫弱毒四价疫苗的免疫效力提供了有效手段。

为了克隆从患肺炎犊牛和健康犊牛上分离的多杀性巴氏杆菌血红素结合受体(heme acquisition system receptor,HasR)基因并进行序列分析,分别以致犊牛肺炎和健康犊牛携带的多杀性巴氏杆菌DNA为模板,通过PCR反应扩增出血红素结合受体基因的全部序列,PCR产物纯化后克隆到pMD19-T载体上,经菌液PCR和酶切鉴定后进行序列测定。各菌株HasR基因序列比对结果发现,Pm-BS-a、Pm142-x-4、Pm142-x-3、Pm149-x、Pm-BS-d的序列之间亲源关系较近,而Pm149-xby与参考菌株Pm70的同源性较高。健康牛源的多杀性巴氏杆菌与致犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌之间HasR基因的同源性非常高,说明致犊牛肺炎多杀性巴氏杆菌是一种条件性致病菌,其引起的犊牛肺炎可能属内源性感染。

选取大约克猪、白香猪、可乐猪3个猪种的公猪构建品种DNA池。对DAZ基因的部分CDS区和3'UTR进行PCR扩增,并对PCR产物进行测序。结果表明,3个猪种中,DAZ基因的该序列未发现任何突变。同源性分析结果表明,猪与人、猩猩、猴、鼠、牛的DAZ基因该序列核苷酸同源性分别为97.0%、95.2%、96.1%、92.9%、97.0%。说明在哺乳动物中,其DAZ基因CDS部分序列和3'UTR是高度保守的。系统进化分析结果表明,猪和牛在一个进化支上。蛋白疏水性分析表明,在17－20位有个强疏水区。

根据GenBank中发表的犬瘟热病毒Onderstepoort株N蛋白基因序列设计两对特异性引物,采用RT-PCR扩增犬瘟热病毒贵州分离株(CDV-GZ1)的N基因,并进行克隆与序列分析。结果显示,CDV-GZ1株N基因的ORF全长1572 bp,其编码氨基酸序列与国外Shuskiy株和01-2689株的同源性分别为98.9%和97.1%,与部分国内分离株同源性在95%以上,说明N蛋白是保守性较强的结构蛋白。

3β羟基类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,3βHSDs)和17β羟基类固醇脱氢酶(17β-hydroxysteroid dehydrogenase,17βHSDs)是所有固醇类激素生成及激素活性和非活性之间互相转化的关键酶,对于维持哺乳动物体内激素之间的平衡、调节激素生成和代谢发挥着重要的作用。作者综述了3βHSDs和17βHSDs基因的结构及功能、表达及组织分布、基因的转录调控,以及两种酶与养猪生产间的关系。

通过RT-PCR方法扩增到犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)分离株GS0812-4的N、H、F蛋白基因,然后克隆入pGEM-T Easy载体并进行序列分析和抗原表位预测分析。结果表明,GS0812-4分离株的N、H、F蛋白基因与其他分离株相应序列的核苷酸同源性分别为93.2%~97.8%、90.3%~97.3%、93.2%~97.8%,其推定的氨基酸同源性分别为96.6%~98.7%、91.3%~97.9%和96.6%~98.7%;GS0812-4分离株N、H、F蛋白基因与疫苗株相应序列的核苷酸同源性分别为93.1%~93.8%、89.4%~90.5%、93.1%~93.8%,其推定的氨基酸同源性分别为96.4%~97.3%、89.3%~91.3%、96.4%~97.3%。由基因系统发育树可知,GS0812-4与疫苗株处于不同的分支,其中与MKY-KM08的亲缘关系最近,但GS0812-4在N、H、F 3个基因系统发育树上与其他同一毒株的亲缘关系远近不同。H、F蛋白的抗原表位预测结果表明,GS0812-4与MKY-KM08和疫苗株的抗原表位均有差异。说明GS0812-4是野毒株,与MKY-KM08属于同一基因型,来源于同一毒株,但两毒株间的H蛋白和F蛋白的抗原表位仍有差异。

从鸡毒支原体、鸡滑液囊支原体和火鸡支原体 3种致病性支原体液体培养物中提取DNA,用特定引物分别和组合进行PCR,均得到了特异性扩增产物,片段大小分别为732、207和850 bp。直接用液体培养物进行PCR亦得到了一致的电泳条带。试验结果表明,建立的PCR方法可用于上述3种支原体临床感染的鉴别诊断。ELISA血清学检测和气管拭子PCR检测的比较结果表明,该PCR方法可用于临床MG检测。

鸡白细胞介素-2(IL-2)是由激活的T细胞分泌产生的糖蛋白,具有显著的免疫增强作用,不仅在T细胞、B细胞的生长与分化和NK细胞的激活等方面发挥重要作用,而且与其他细胞因子一起发挥免疫功能,是一种能影响机体免疫反应各个方面的调节因子。文章综述了鸡白细胞介素-2分子生物学和疾病防治应用研究进展。

本研究旨在从分子水平上掌握中国新城疫病毒的变异情况和新城疫的流行规律,对2008-2009年从中国部分省市养殖场分离的9株新城疫病毒毒株,采用RT-PCR方法扩增其F和HN基因,经克隆和测序,对所得序列进行同源性和遗传进化分析。结果显示,9株分离株有8株为基因Ⅶ型,1株为基因Ⅱ型,F基因开放性阅读框架(ORF)为1662 bp,强毒株同La Sota的核苷酸同源性为83.5%~84.2%。HN基因开放性阅读框架(ORF)为1716或1734 bp,强毒株在538位缺失1个糖基化位点。结果表明,近年流行的ND疫情主要是由基因Ⅶ型NDV引起,F和HN基因的变异可能与频繁的疫苗免疫选择压力有关。

本研究对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)分离株sc05的HN基因进行了克隆、序列测定,在此基础上将其C端功能结构域76－571 aa片段亚克隆到pET32a(＋)表达载体上,构建重组表达质粒pET32a-HN,鉴定正确后转化进BL21 plysS(DE3)细胞,筛选出阳性克隆,用1 mmol/L IPTG 诱导表达,并对表达产物进行鉴定。SDS-PAGE电泳结果显示,HN基因功能结构域片段在 BL21 plysS(DE3)细胞中实现融合表达,表达产物大小约为76 ku,Western blotting试验证实其能与NDV阳性血清反应。本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础。

生物芯片技术是21世纪的前沿生物技术,该技术是继基因克隆、基因测序和PCR技术后的又一次革命性的技术突破,现已成为生物技术领域的研究热点之一,它的最突出特点是高通量、高集成、微型化、平行化、多样化和自动化。正是这些优点,使得生物芯片技术日益广泛应用于生命科学研究的众多领域。文章主要对生物芯片的特点和现状、技术环节及其在兽医科学研究中的应用作一综述。

根据GenBank上A型流感病毒M基因的保守序列,设计1对引物,建立了检测猪群中A型流感病毒的RT-PCR方法。试验结果表明,该RT-PCR方法敏感、特异,适于临床样品检测,为猪群中A型流感病毒的临床诊断和流行病学调查奠定了基础。

从湛江地区疑似大肠杆菌病的病死鹅组织中分离鉴定2株致病性大肠杆菌O₈₆K₆₁和O₄₄K₇₄,以此制备油佐剂灭活疫苗。用上述疫苗接种20日龄雏鹅,35日龄加强免疫一次,分别于27、35、42、50日龄检测免疫鹅血清抗体水平,并进行攻毒保护试验。结果表明,制备的大肠杆菌油佐剂灭活疫苗安全可靠,免疫后15、30 d后,免疫鹅血清抗体水平分别达到1∶32和1∶128;且免疫鹅能抵抗10¹⁰/mL的致病性大肠杆菌攻击,对照组鹅全部发病,有明显临床症状,从发病鹅组织中分离到致病性大肠杆菌。

繁殖性状是牛的重要性状之一,繁殖性能高低直接关系到生产成本和生产效率,因此,提高牛的繁殖效率是目前国内外养牛业研究的热点课题。作者综述了牛繁殖性状相关功能基因的研究进展,并对其应用前景进行了展望。

试验旨在检测绵羊瘦素受体(leptin receptor,LEPR)基因序列突变位点,为进一步分析LEPR基因多态性与绵羊生长性状的关系奠定基础。选用美利奴羊与阿华西羊杂交群体作为试验材料,利用RT-PCR、测序等方法测定了4只绵羊的LEPR基因cDNA部分序列及内含子7序列,同时利用PCR-RFLP分析两个位点在群体(229只)中的多态性。测定出LEPR基因cDNA序列长2608 bp(包含外显子2-16完整序列及外显子1和17的部分序列)和LEPR第7内含子序列全长160 bp,共发现5个核苷酸变异位点,第2外显子中2个(T240C和A279G),第10、14外显子中各1个(A1683G,T2373C),内含子7中1个(1285+A73G),外显子中的4个变异位点均未引起编码氨基酸的改变。在研究群体中,A279G与A1683G中A的频率分别为0.415、0.467,后者处于非平衡状态,GG和AA是主要的单倍型。不同物种间序列一致性分值均比较高,但LEPR mRNA区序列一致性比内含子高,基于LEPR mRNA序列构建的系统发育树更符合实际情况,且可靠性值更高。结果表明,绵羊LEPR基因的保守性较强,突变形式主要是转换,A279G和A1683G可能是突变热点。

声音是母猪与仔猪沟通的桥梁,也是其生存小环境的一部分。笔者概述了猪听觉的形成原理、声音的特征、母猪与仔猪间声音的联系及声音对断奶仔猪生产性能和行为的影响,为进一步缓解断奶应激、提高猪的生产性能寻找新的路径。

本研究采用直接测序法对贵州小香鸡生长激素(growth hormone gene,GH)基因的2~3外显子区域进行多态性分析。结果显示,在第2内含子处出现4个SNPs位点:G47A、T170C 、T334C和G393A。卡方检测结果表明,T33C处显著偏离了Hardy-Weinberg平衡(P＜0.05),其它3个SNPs位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P＞0.05)。

本研究利用5个微卫星标记BL1038、BM757、BM4621、OarFCB304、OarFCB48对小尾寒羊的遗传多样性进行了分析。结果表明,小尾寒羊群体在5个微卫星标记中共发现有57个等位基因,小尾寒羊群体的有效等位基因数(Ne)在5.7315~12.3025之间,5个微卫星标记的有效等位基因数平均达到7.4888个,其中OarFCB48的有效等位基因数最高为12.3025个。5个微卫星标记中平均杂合度为0.8559 ,其中OarFCB48的杂合度最高为0.9187。微卫星标记OarFCB48的多态信息含量(PIC)最高为0.9130,BM757的PIC最低为0.8091,平均PIC为0.8439。说明小尾寒羊群体属于多态信息含量较高的遗传群体。

对不同亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV) 5'LTR序列及其启动子活性进行了比较分析,以探讨LTR对ALV复制和致病力的影响。通过PCR分别扩增克隆了中国分离株GD08(ALV-A)、CD08(ALV-B)、HN06(血管瘤病变型ALV-J)和NX0101(骨髓瘤病变型ALV-J)毒株基因组5'LTR片段。与国内外不同亚群ALV分离株5'LTR核苷酸序列比较发现,NX0101株和HN06株与ALV-J国内外分离株的同源性最高,达90.8％~97.5％;GD08株与ALV-A国内分离株SDAU09C1的同源性最高,为94.6％;CD08株与GD08株和ALV-J各株的同源性高达90％以上。LTR中的R区具有较高的保守性,但CD08株U3区缺失11 bp,GD08株U5区与其它毒株的U5区差异较大。将LTR片段插入到pCAT-Basic载体的CAT报告基因前,通过转染DF-1细胞和测定CAT表达量来评价LTR的启动子活性。HN06株和NX0101株之间,以及GD08株和CD08株之间LTR启动子活性有差异,但差异不显著;而ALV-J毒株与GD08株和CD08株之间的LTR启动子活性差异显著。

原核表达MadCam-1基因、纯化MadCam-1黏附蛋白,并制备其多克隆抗体,为进一步功能研究奠定基础。根据MadCam-1的已知基因序列设计并合成1对引物,应用PCR技术扩增MadCam-1基因片段插入到原核表达载体 pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒 pGEX-4T-1-MadCam-1,转化入E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导,对其产物进行SDS-PAGE分析和Western blotting鉴定,以纯化后的融合蛋白为抗原,免疫家兔,获得抗血清。结果表明,重组表达质粒pGEX-4T-1-MadCam-1经PCR及双酶切鉴定证明构建正确,测序结果与GenBank中登录的基因序列同源性为100%。表达产物经Western blotting鉴定,结果证实成功表达了分子质量约为50 ku 的蛋白质。纯化的蛋白质免疫家兔后,经ELISA检测多克隆抗体效价为1∶32000。因此,成功获得了奶牛 MadCam-1多克隆抗体,为进一步研究奶牛黏附分子 MadCam-1的功能奠定了基础。

试验探讨了产箱环境对母貂母性行为和仔貂存活、生长、发育的影响。4种新型产箱类型有A、AB、AC、AD,B型为传统产箱。通过母貂的做窝行为和对5日龄仔貂的取回试验判断产箱环境对母貂母性行为的影响,通过出生重、出生个数、仔貂死亡率、平均体重、体表温度来判断产箱环境对仔貂存活、生长的影响。结果表明,仔貂的出生重和出生个数不受产箱环境的影响;AC型产箱能够增强母貂的母性,提高1~14日龄仔貂的存活率和平均体重。新型产箱在保温性能和产仔保活方面都优于传统产箱。

为探索H-FABP和LPIN1基因在不同猪种中的多态性分布情况,应用PCR-RFLP技术检测了61头军牧1号白猪、51头杜洛克猪和51头藏猪H-FABP和LPIN1基因的多态性分布。结果发现,军牧1号白猪、杜洛克猪和藏猪在H-FABP基因的Hinf Ⅰ多态性位点上均表现为单一的HH型,而Hea Ⅲ多态性位点上均表现出多态性,等位基因D的基因频率分别为0.1475、0.2255和0.7647,Msp Ⅰ多态位点上,军牧1号白猪表现为单一的aa型,杜洛克猪和藏猪则表现为多态性,等位基因A的基因频率分别为0.6078和0.4609。在LPIN1基因的Eco88 Ⅰ多态性位点上,杜洛克猪表现为单一的AA型,军牧1号白猪和藏猪表现为多态性,等位基因A的基因频率分别为0.4262和0.2059;在Bsh1236 Ⅰ多态性位点上,杜洛克猪表现为单一的TT型,军牧1号白猪和藏猪则表现为多态性,等位基因T的基因频率分别为0.7459和0.2059。

采用5% 二甲乙酰胺(DMA)(V/V)完全替代甘油,比较乳糖、海藻糖对精液冷冻保存效果的影响。结果表明,海藻糖显著提高了冷冻——解冻后精子成活力(49.32%±1.52%)与顶体完整性 (47.33%±1.16%)(P<0.05)。然后利用海藻糖替代乳糖,评价不同浓度的DMA对公猪精液冷冻保存的影响。结果表明,当DMA添加量为4%时,解冻后精子活率、成活力、顶体完整率分别为(45.17±0.56)%、(50.33±0.67)%、(48.30±1.44)%,均显著高于3% DMA、6% DMA添加组(P<0.05),精子活率显著高于5% DMA添加组(P<0.05),但精子成活力、顶体完整性与其差异不显著(P>0.05)。因此,当利用海藻糖作为冷冻保存基础稀释液,DMA最适添加量为4%。

保护动物品种的多样性,不仅对维护家畜的环境适应能力来说是非常关键的,还关系到未来动物生产模式的建立和完善。调查结果表明,现在世界山羊育种形势呈现一个矛盾的现象:一方面,发达国家通过完善的选育组织对山羊的乳用、肉用及毛用性能进行改进;另一方面,在一些落后的地方,山羊的产品还都用于农牧民的自身消耗。当前山羊育种情况如下,少数山羊经过了充分的选育过程并具有某些特点和特性;而大多数山羊尚未经过系统、完善的选育。通过分析山羊选育的现状,作者提出了一些建议,可以更有效的开发这一物种的遗传潜质。

试验旨在寻找肌内脂肪含量差异极显著的两组个体延边黄牛背最长肌组织差异表达基因,并分析其遗传多态性对生长性状的影响。应用引物退火技术获得了在肌内脂肪含量差异极显著的两组个体背最长肌组织差异表达α-肌动蛋白1(actin alpha 1,ACTA1)基因及其全长cDNA序列,该基因主要在心脏和背最长肌中表达。序列比对结果发现,在5'端非编码区193 bp处存在1个突变。采用PCR-RFLP方法对100头延边黄牛群体进行检测,发现AA、AG、GG 3种基因型,基因型频率分别为0.24、0.50、0.26;A、G等位基因频率分别为0.37、0.63。对该突变位点的多态性与生长性状的关联性进行分析,结果发现,在体长、体重和平均日增重上,GG基因型个体显著高于AA和AG基因型个体(P＜0.05);在胸围上,GG基因型个体显著高于AG基因型个体,但与AA基因型个体差异不显著(P＞0.05);在体高上,不同基因型之间差异不显著(P＞0.05)。初步认为GG基因型是提高延边黄牛体质量和体尺指标性状的有利基因型,提示ACTA1基因有可能作为延边黄牛生长性状的候选基因。

鲁西黄牛是中国优良的地方品种,为了更有效的制定适宜的育种方案,加快鲁西黄牛肉用品系的选育,本研究在鲁西黄牛青年公牛体系和核心群育种方案的基础上,分别设定开放和闭锁核心群育种方案,采用确定性模型评估了开放和闭锁核心群育种体系的育种效果。结果表明,开放与闭锁核心群育种方案相比,综合遗传进展提高了0.80％;育种产出量提高了9.39％;育种效益提高了10.64％;世代间隔延长了0.90％,开放核心群体系优于闭锁核心群体系。这充分说明,在鲁西牛核心群育种方案中,开放核心群育种体系优于闭锁核心群育种体系。

通过对山西黄土高原区域羊鼻蝇蛆感染情况调查和病理学研究,以明确该地区羊鼻蝇蛆的感染率和该病的病理变化。春秋两个季节对羊鼻蝇蛆感染情况进行调查,对307例绵羊进行羊头剖检,检查羊鼻蝇蛆病的各龄幼虫感染情况,同时观察病理变化,并采取感染羊的鼻黏膜、咽后淋巴结、脑和肺组织进行病理组织学检查。春季检查157例,鼻蝇蛆感染患羊34例,感染率达22%;秋季检查150例,感染患羊70例,感染率达47%;春秋两季平均感染率为34%。病理变化主要表现为:鼻黏膜出现不同损伤和增生性炎,咽后淋巴结炎性细胞浸润,有的病例出现肺气肿,脑组织水肿。免疫组织化学染色结果表明,检出虫体的羊与未检出虫体羊比较,咽后淋巴结IgA分泌细胞和IgG分泌细胞呈增高趋势,尤其是淋巴结髓质中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞明显增多。

肠道黏膜屏障包括机械屏障和免疫屏障等,后者主要由肠黏膜吸收上皮细胞和肠道相关淋巴组织构成。肠道黏膜免疫细胞包括淋巴细胞、杯状细胞、肥大细胞等。其中肥大细胞是天然免疫的效应细胞之一,其不仅在天然免疫中发挥重要作用,且能通过所分泌的细胞因子参与获得性免疫。笔者综述了肥大细胞的生物学特性及其在肠道免疫屏障中的作用。

本研究通过API20CAUX系统对从子宫内膜炎患牛子宫内黏液中分离到的183株念珠菌进行鉴定。结果显示克鲁斯念珠菌最多,为33.9%,其次是皱褶念珠菌为17.5%,乳酒念珠菌为13.1%,白色念珠菌为11.5%及热带念珠菌为8.7%。分离中不常见的有假丝酵母为5.5%,近平滑念珠菌为4.4%,吉利蒙念珠菌为3.3%,著名念珠菌为1.1%和光滑念珠菌为1.1%。此外,还对所分离到的念珠菌进行体外溶血活性检测,结果显示克鲁斯念珠菌、乳酒念珠菌、白色念珠菌、热带念珠菌、涎沫假丝念珠菌和光滑念珠菌在接种后48 h后显示α和β溶血;皱褶念珠菌、吉利蒙念珠菌、著名念珠菌只显示α溶血;在孵育72 h后,近平滑念珠菌不显示任何溶血活性。涎沫假丝酵母、白色念珠菌和乳酒念珠菌的β溶血活性比其他菌株高。本研究为临床牛真菌性子宫内膜炎的防治及发病机理的研究奠定了基础。

为建立犬急性胰腺炎模型,本试验选用4只本地健康杂交犬作为研究对象,采用胰管逆行注射法即在主胰管注入牛磺胆酸钠与胰蛋白酶复合液构建急性胰腺炎模型。建模后,观察其组织形态学变化,并于术后1、2、4、7 d动态地检测其红细胞压积、白细胞总数、淀粉酶含量的变化。结果显示:①在向主胰管内注入牛磺胆酸钠与胰蛋白酶复合液5~10 min可看到胰腺充血、出血严重。②试验动物的红细胞压积、白细胞总数以及淀粉酶含量在术后均有显著变化。结果证明采用主胰管内注入牛磺胆酸钠与胰蛋白酶复合液可以构建稳定的急性胰腺炎病理模型。

蓝舌病病毒通过吸血昆虫(库蠓)在易感反刍动物之间叮咬进行传播。在家畜中,蓝舌病易发于某些品种的羊,具有典型症状,呈地方性流行;牛感染蓝舌病通常不表现出临床症状。作者分析和总结了近年蓝舌病疫情发生和传播可能的潜在路线,病毒分子生物学研究概况,致病机理及宿主对蓝舌病病毒的免疫反应,并对蓝舌病疫苗的研究进展作了介绍,建议要加强对该病的深入研究,防患于未然。

本试验以真菌和反硝化细菌为基础菌种按一定比例制得复合活菌制剂,对虾塘养殖水中的亚硝酸盐进行降解或处理。结果表明,活菌制剂净化亚硝酸盐污染的虾塘养殖水效果好于单个反硝化细菌、某复合活菌制剂和硝氮综合剂,复合活菌制剂各菌种在虾塘养殖水中分解亚硝酸盐的作用上各有特点,可为形成共生长效的虾塘养殖水环境修复微生物种群提供基础。

本试验采用121 ℃高压处理副猪嗜血杆菌4型和5型耐热蛋白,混合作为包被抗原,建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法。通过对试验条件进行筛选优化,确定了最佳反应条件:抗原包被浓度为10 μg/mL,37 ℃包被2 h;封闭液选择含20 g/L脱脂奶粉的PBST,封闭30 min;血清的稀释度为1∶80;抗原抗体反应时间为45 min;酶标二抗稀释度为1∶12000,作用时间为30 min;底物显色时间为15 min。特异性、重复性和敏感性试验及对200份送检血清的检测结果表明,建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比间接血凝试验高,对已知阴阳性血清的临床样本检测结果与国外ELISA试剂盒一致,可用于副猪嗜血杆菌的血清抗体检测和血清流行病学调查。

新城疫是当今全球范围内最严重的禽类传染病之一。其病原新城疫病毒是单股负链RNA病毒,编码NP、P、M、F、HN和L 6种结构蛋白,其中最主要的是位于囊膜上的F和HN两种糖蛋白。F蛋白具有使病毒囊膜与宿主细胞膜融合,致使病毒穿入宿主细胞膜的作用,是决定病毒毒力的关键因子;HN蛋白具有血凝素和神经氨酸酶两种活性,这两种活性对于NDV侵染细胞具有重要的作用。这两种糖蛋白不仅对NDV的毒力及致病性方面起着决定性作用,而且也是诱导产生保护性抗体的蛋白。作者主要对这两种蛋白的结构与功能作一概述。

近年来,布鲁氏菌病疫情在人、畜间呈逐年上升的趋势。不仅严重地威胁着人类健康,还影响着国民经济持续快速发展,成为世界性公共卫生问题。文章概述了目前中国动物布鲁氏菌病主要的实验室诊断方法以及国内外在本病诊断技术方面所取得的新进展,为中国研究更为快速、敏感、易于操作的布鲁氏菌病诊断技术提供参考,为快速、精确地诊断本病提供技术支持,以有效地防控本病。

为了解河南地区猪戊型肝炎感染情况,同时掌握该地区猪感染戊型肝炎病毒的基因型,对来自河南新乡、平顶山、南阳等地区不同商品猪场血清、肝脏、粪样品,采用ELISA技术检测猪血清中抗HEV特异性抗体水平,并使用套式RT-PCR检测肝脏和粪便中猪戊型肝炎病毒核酸。结果显示530份样品中HEV抗体阳性率0.6%,HEV RNA均为阴性,推测目前河南省猪戊型肝炎病毒感染率较低。

试验旨在对近来多省份流行的仔猪腹泻病原菌进行分离及鉴定,并研究其防治方法。通过临床症状观察、病理解剖、病原菌分离、镜检、菌落形态观察、生化鉴定、动物试验等方法对该病进行综合研究。从多个发病养殖场的腹泻仔猪病变部位分离到一株魏氏梭菌,并探索了其防治方法。结果表明,当前发生的严重仔猪腹泻与感染魏氏梭菌密切相关,采用治疗魏氏梭菌病的方法对该病进行治疗及利用灭活自场疫苗对其预防效果均明显。

试验旨在研究水牛初乳和常乳主要组分的动态变化规律。采用乳品分析仪对摩本杂水牛(摩拉水牛×德宏水牛)初乳和常乳中乳脂、乳糖、乳蛋白、总固形物(TS)和非脂固形物(SNF)等含量进行测定,用SDS-PAGE对乳蛋白各组分进行分离,并利用凝胶成像系统进行扫描定量。结果表明,初乳中乳糖含量随泌乳天数的增加逐渐升高;乳蛋白、总固形物(TS)和非脂固形物(SNF)含量呈下降趋势;初乳中乳脂含量变化不规则,出现小幅波动;蛋白质各组分中乳铁蛋白(LF)、血清白蛋白(SA)、免疫球蛋白(Igs)含量第1天最高,以后开始下降;酪蛋白(CN)在乳蛋白百分比含量中占优势,随着泌乳天数的增加逐渐升高;β-乳球蛋白(β-LG)第1天含量低,第5 和7天达到最高值;α-乳白蛋白(α-LA)第1天最低,第2天急剧上升,以后变化平稳。常乳中大部分组分含量比较稳定,有时有波动,但各天数之间差异不显著。研究结果显示,水牛乳中大部分组分的含量在初乳中变化较大,初乳的营养价值高于常乳。

本试验将70只45日龄的罗曼鸡随机分成对照组和试验Ⅰ~Ⅵ组,旨在探讨不同剂量替米考星对雏鸡心功能和呼吸的影响。结果显示,随着替米考星剂量的加大和给药时间的延长,Ⅴ组死亡2只,Ⅵ组死亡4只;心率(HR)由增加到逐渐恢复,但5 h后,Ⅵ组HR极显著低于对照组(P＜0.01);左心室收缩压(LVSP)和左室内压最大变化速率(±dp/dtmax)呈逐渐下降趋势,左心室舒张末压(LVEDP)则逐渐升高,给药5 h后,Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组LVSP极显著低于对照组、Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组(P＜0.01),Ⅴ和Ⅵ组极显著低于Ⅳ组(P＜0.01)。Ⅱ组LVEDP显著高于对照组和Ⅰ组(P＜0.05),Ⅲ和Ⅳ组显著高于Ⅱ组(P＜0.05),极显著高于对照组和Ⅰ组(P＜0.01)。Ⅴ、Ⅵ组极显著高于其他各组(P＜0.01);Ⅰ~Ⅴ组呼吸逐渐加深加快。5 h后,Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组呼吸率显著高于对照组、Ⅰ和Ⅱ组(P＜0.05),但Ⅵ组呼吸率极显著低于Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组(P＜0.01)。提示替米考星在治疗雏鸡疾病时饮水安全使用剂量为400~600 mg/L,超过800 mg/L时会对心肺功能产生明显影响。

为开发盐酸多西环素新制剂,根据单因素试验,采用正交设计试验法筛选出盐酸多西环素注射液最优配方,以高效液相色谱法测定制剂含量。所研制注射液的外观色泽、澄明度、pH等指标均符合《中国兽药典》2005版注射液项的要求。高效液相色谱测定多西环素含量显示,在5~100 μg/mL浓度范围内,峰面积与药物浓度的线性关系良好(R²＝0.9992),平均回收率为99.87%,日内变异系数≤0.42%,日间变异系数≤0.96%。注射液含量为98.3%。结果表明含量测定方法稳定、可靠,最终配方合理,含量符合要求。

用⁶⁰Coγ射线对不同状态不同体积的鸡新城疫病毒(NDV)、H9N2亚型禽流感(H9N2 AIV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)进行辐照,研究⁶⁰Coγ射线对灭活疫苗中病毒的灭活效果。结果表明,6.0 kGy ⁶⁰Coγ射线辐照对冷冻和液态下5000和10000 mL的NDV、H9N2亚型AIV和PRRSV均不能灭活,辐照后NDV和H9N2亚型AIV冷冻尿囊液的HA效价降低而液态尿囊液的HA效价升高;液态下,⁶⁰Coγ射线能够灭活250 mL细胞培养液中的PRRSV,不能灭活250、5000和10000 mL尿囊液中的NDV和H9N2 AIV,250 mL与5000、10000 mL的NDV HA效价间差异显著(P＜0.05)。⁶⁰Coγ射线辐照对液态的PRRSV细胞培养液灭活效果良好,有望用于灭活苗的病毒灭活。

本研究旨在探讨EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)膜抗原(membrane antigen,MA)的表达与小鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的关系。采用ELISA方法检测EB病毒BLLF1基因转基因小鼠和对照组KM小鼠外周血中IL-6和TNF-α水平,结果显示EB病毒BLLF1基因转基因小鼠血清中IL-6和TNF-α水平均显著或极显著高于KM小鼠,表明EB病毒膜抗原(MA)的表达可促使IL-6和TNF-α的过表达。

以BOX片段(细菌基因组重复序列)为基础的原核生物DNA指纹图谱技术,具有操作简单快捷,可重复性强,容易获得较为丰富的扩增条带等特点。作者综述了BOX-PCR指纹图谱分析技术的特点和一般步骤,并对该技术在细菌菌株遗传多样性研究领域的应用现状和前景进行了阐述。

从一患睾丸炎公山羊中分离到一株革兰氏阴性短小杆菌,该菌经柯兹洛夫斯基鉴别染色红色,在普通绵羊血琼脂、巧克力平板上生长缓慢,对该菌的16S rDNA进行PCR扩增,测序,BLAST比较,结果显示该菌与羊布氏杆菌的16S rDNA有100%的同源性,菌体与布氏杆菌标准阳性血清起强凝集反应。结果显示,该分离菌为布氏杆菌。

利用TCBS琼脂培养基和科玛嘉弧菌显色培养基对细菌进行分离,采用糖分解试验、氧化酶试验、IMVi试验等生化试验鉴定海产品中副溶血性弧菌,为防治疾病提供依据。

鸽圆环病毒(pigeon circovirus, PiCV)是20世纪90年代初发现的一种新的主要影响青年鸽的传染性病原,可引起免疫抑制,导致鸽子生病或死亡,从而给鸽的饲养带来巨大损失。因此,了解该病毒的特性、基因组结构、致病机理、诊断方法至关重要。文章针对这几个方面对鸽圆环病毒作了概述,以便更好地了解该病毒,减轻其对养鸽业造成的危害。

猪咬尾症是猪受到许多种不良因素刺激而引起的一种非特异性应激反应。凡是能引起猪感觉不舒服的各种环境因素、营养因素等均可造成猪群发生咬尾现象。在养猪生产中,猪咬尾症时有发生。2010年3月,甘肃省武威市某养殖猪场发生了一起猪咬尾症。通过采取综合有效的防制措施,使猪场病情得到及时、有效的控制。

动植物中存在着广泛的免疫活性多糖,近年来在促进和调节机体免疫功能方面的研究,已有较大的进展,作者主要对中药多糖对免疫器官、体液免疫、细胞免疫等方面的调节作用做一综述。

青海省海拔高,污染少,在肉猪生产中大量使用中草药添加剂,可使青海省的猪肉产品成为绿色无公害食品。本试验以黄芪、党参为主要原料的中草药添加剂来替代仔猪饲料中的抗生素,拟通过测定仔猪增重效果及腹泻率,探讨中草药制剂在青海高海拔地区肉猪生产中的应用。