猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻的研究

中国畜牧兽医

猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻的研究

齐贵龙¹，任亮¹，朱蒙¹，付博²，马红²，刘娣¹^，2

（1.东北农业大学动物科学技术学院,黑龙江哈尔滨 150030；2.黑龙江省农业科学院畜牧研究所,黑龙江哈尔滨 150086）

收稿日期:2013-10-11 出版日期:2014-04-20 发布日期:2014-05-27
通讯作者: 刘娣。E-mail：liudi1963@163.com
作者简介:齐贵龙（1988—），男，黑龙江人，硕士生，研究方向：胚胎工程。
基金资助:
现代农业产业技术体系建设专项资金（CARS-36）。

Studies on MⅡ Stage Porcine Oocytes Vitrification

QI Gui-long¹, REN Liang¹, ZHU Meng¹, FU Bo², MA Hong², LIU Di¹^，2

（1.College of Animal Science and Technology，Northeast Agricultural University，Harbin 150030，China；2.Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences，Harbin 150086，China）

Received:2013-10-11 Online:2014-04-20 Published:2014-05-27

摘要/Abstract

摘要： 本研究旨在为猪MⅡ期卵母细胞的玻璃化冷冻选择合适的冷冻保护剂及冷冻载体，提高猪卵母细胞冷冻后的存活力。试验分别采用以40% EG、15% EG+15% DMSO+20% FBS、15% EG+15% DMSO+20% SPS作为渗透性冷冻保护剂的冷冻液，以玻璃微细管（GMP）和冷冻帽（cryotop）作为载体对猪卵母细胞进行玻璃化冷冻。结果发现，采用含有血清蛋白替代物（serum protein substitute，SPS）的冷冻液VS3冷冻后二乙酰荧光素（FDA）染色存活率（59.40%±4.93%）显著高于VS1组（42.12%±4.08%）及VS2组（37.57%±1.21%）（P<0.05）；采用VS3作为冷冻液用cryotop作为载体冷冻后FDA染色存活率（83.33%±3.33%）显著高于GMP（59.40%±4.93%）（P<0.05）。由此可见，采用SPS代替胎牛血清（FBS），用cryotop作为载体可以使猪卵母细胞冻后存活率显著提高。

关键词: 猪; 卵母细胞; SPS; cryotop; 玻璃化冷冻

Abstract: The study was designed to select right cryoprotectants and carrier for porcine matured oocytes to improve oocyte viability after vitrification and lay a good foundation for porcine oocytes continue development. Using 40% EG, 15% EG+15% DMSO+20% FBS, 15% EG+15% DMSO+20% SPS as cryoprotectants and taking GMP and cryotop as carrier to do porcine oocytes vitrification. The results showed that VS3 including SPS made better active of FDA (59.40%±4.93%) than VS1 （42.12%±4.08%） and VS2 (37.57%±1.21%）（P<0.05)；VS3 as cryoprotectants and cryotop as carrier made better active of FDA (83.33%±3.33%) than GMP (59.40%±4.93%)(P<0.05). The data demonstrated that use SPS to instead of FBS and cryotop as carrier could significantly improve active of oocyte after vitrification.

Key words: porcine; oocytes; SPS; cryotop; vitrification

齐贵龙，任亮，朱蒙，付博，马红，刘娣. 猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻的研究[J]. 中国畜牧兽医.

QI Gui-long, REN Liang, ZHU Meng, FU Bo, MA Hong, LIU Di. Studies on MⅡ Stage Porcine Oocytes Vitrification[J]. .

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