3种抗凋亡试剂在猪精液低温保存中的应用

中国畜牧兽医

3种抗凋亡试剂在猪精液低温保存中的应用

许春荣¹，陆媚²，刘德玉¹，唐胤晟¹，彭夏云¹，韦永强¹，王英群¹，胡传活²

（1.广西畜禽品种改良站，广西南宁 530001；2.广西大学动物科技学院，广西南宁 530005）

收稿日期:2013-08-26 出版日期:2014-02-20 发布日期:2014-03-27
通讯作者: 胡传活（1964—），男，博士，副教授。E-mail:hch64815@gxu.edu.cn
作者简介:许春荣（1975—），男，广西人，学士，兽医师，研究方向：猪生产学。
基金资助:
广西水产畜牧兽医局科技计划项目(桂渔牧科1204934)；广西教育厅科研项目（201012MS001）。

Application of Three Anti-apoptotic Reagents to the Low Temperature Preservation of Boar Semen

XU Chun-rong¹, LU Mei², LIU De-yu¹, TANG Yin-sheng¹, PENG Xia-yun¹, WEI Yong-qiang¹,WANG Ying-qun¹, HU Chuan-huo²

(1.Guangxi Work Station of Livestock ＆Poultry Breed Improvement, Nanning 530001, China；2.College of Animal Science and Technology, Guangxi University, Nanning 530005, China)

Received:2013-08-26 Online:2014-02-20 Published:2014-03-27

摘要/Abstract

摘要： 为了改善猪精液低温保存方法，研究在低温条件下葛根素、酒石酸美托洛尔和二氯乙酸钠3种抗凋亡试剂对保持猪精液品质的作用,采用手握法采集健康公猪精子活力大于0.7的精液，用添加不同浓度葛根素（0、0.02、0.10、0.50、2.50 mmol/L）、酒石酸美托洛尔（0、0.02、0.10、0.50、2.50 mmol/L）及二氯乙酸钠（0、0.04、0.20、1.00、5.00 mmol/L）的稀释液稀释，于5 ℃下保存，每天检查，以精子稀释后活力、有效存活时间、总存活时间、存活指数及保存72 h后精子畸形率和顶体完整率为衡量指标，试验重复6次。结果表明，一定浓度的3种药物能有效地延长低温保存时猪精子的存活时间,其中0.50、0.50及1.00 mmol/L分别是葛根素、酒石酸美托洛尔和二氯乙酸钠的最佳添加浓度。

关键词: 猪; 精液; 低温保存; 抗凋亡试剂

Abstract: The objective of the present study was to improve the low temperature preservation of boar semen and evaluate the effect of three anti-apoptotic drugs (puerarin, metoprolol tartaric and dichloroacetate) on keeping the quality of boar semen. Semen was collected from adult boars of proven fertility with the gloved-hand technique, and only the semen showing a minimum of 70% motile was used. Semen was diluted in extenders containing anti-apoptotic drugs (0,0.02,0.10,0.50 and 2.50 mmol/L puerarin, 0,0.02,0.10,0.50 and 2.50 mmol/L metoprolol tartaric acid, 0,0.04,0.20,1.00 and 5.00 mmol/L dichloroacetate). All sperm suspensions were stored at 5 ℃ and sperm motility was detected once a day. Six parameters (motility of extended soermatozoa,spermatozoal-survival effective time,spermatozoal-survival overall time, spermatozoal-survival index, the 72 h deformity rate and acrosomal integrity) were measured, six replicates were performed. The results showed that under the conditions of this study, a certain concentration of three drugs can extend the life-span of spermatozoa under the low temperature, and the optimal concentration of puerarin, metoprolol tartaric acid and dichloroacetate was 0.50, 0.50 and 1.00 mmol/L, respectively.

Key words: boar; semen; low temperature preservation; anti-apoptotic drugs

许春荣，陆媚，刘德玉，唐胤晟，彭夏云，韦永强，王英群，胡传活. 3种抗凋亡试剂在猪精液低温保存中的应用[J]. 中国畜牧兽医.

XU Chun-rong, LU Mei, LIU De-yu, TANG Yin-sheng, PENG Xia-yun, WEI Yong-qiang,WANG Ying-qun, HU Chuan-huo. Application of Three Anti-apoptotic Reagents to the Low Temperature Preservation of Boar Semen[J]. .

参考文献

1 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典一部[M].广州:广东科技出版社,1995.
2 中华医学会心血管病学分会.β肾上腺素能受体阻滞剂在心血管疾病应用专家共识[J].中华心血管病杂志,2009,37（1）：78～83.
3 朱庆磊,何爱霞,吕欣然.葛根素对氧自由基的清除和抗氧化性损伤作用[J]．解放军药学学报,2001,17(10)：123.
4 陈跃峰,杨跃进,陈曦,等.β受体阻滞剂阿替洛尔和酒石酸美托洛尔对大鼠急性心肌梗死后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的作用[J].中国医学科学院学报，2006，28（4）：538～541.
5 林毅,张若楠.葛根素研究概况[J].黑龙江中医药,2000(4)：56～58.
6 俞坚武,屈百鸣,赵仲生,等.葛根素对儿茶酚胺诱导大鼠心肌损伤时凋亡相关蛋白的影响[J].中国中西医结合急救杂志,2002, 9(1)：30～32.
7 高唱,王景周,王琳,等.葛根素对局灶性脑缺血再灌流大鼠神经细胞凋亡的作用[J].中国急救医学,2003,23(1):14～18.
8 钱淑凤,高桂生,郑翠玲.细胞凋亡与疾病[J].中国畜牧兽医,2007,34(9)：88～91.
9 Bailey J L，Biodean J F，Cormier N. Semen cryopreservatian in domestic animal：A damaging and capacitating phenomenon[J].Journal of Andrology，2000，21(1)：1～7.
10 Hafner R P, Brand G C, Brand M D. Analysis of the control of respiration rate,phosphory-lation rate,proton leak rate and protonmotive force in isolated mitochondria using the ‘top-down’ approach of metabolic control theory[J]. Eur J Biochem,1990,188(2)：313～319.
11 Henkel R，Kierspel E，Stalf T，et al．Effect of reactive oxygen species produced by spermatozoa and leukocytes on sperm functions in nonleukocytospermic Patients[J]．Fertil Steril，2005，83(3)：635～642.
12 Jiang B, Liu J H, Bao Y M, et al. Hydrogen peroxide-induced apoptosis in pc12 cells and the protective effect of puerarinⅢ[J]. Cell Biology International,2003,27(12)：1025～1031.
13 Johnson L A，Weitze K F，Falser P，et al．Storage of boar semen[J]．Journal of Reproduction Science，2000，62：143～172.
14 Lysko P G,Webb C L,Gu J L，et al. A comparison of carvedilol and metoprolol antioxidantactivities in vitro[J].Journal of Cardiovascular Pharmacology,2000,36（3）：277～281.
15 POISE Study Group. Effects of extended release metoprolol succinate in patients under-going noncardiac surgery (POISE trial): Arandomized controlled trial[J]. Lancet, 2008, 371（1）：1839～1847.
16 Yu Z, Li W. Induction of apoptosis by puerarin in colon cancer HT-29 cells[J].Cancer Letters, 2006,238(1）：53～60.

[1]	陈楷文, 赵云娇, 王磊, 张剑搏, 马玉红, 吴国芳. 不同氧浓度下猪睾丸间质细胞转录组分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2185-2195.
[2]	韦明邦, 边巴琼达, 肖青青, 段梦琪, 强巴央宗, 商鹏. 藏猪CDKN1B基因克隆、生物信息学及表达分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2196-2206.
[3]	吕春荣, 梁家充, 邵庆勇, 吴国权, 张玉梅, 权国波. 丙酮酸钠对山羊冷冻精子质量的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2363-2369.
[4]	张方玮, 张琪, 雷亮亮, 孙武胜, 张迪, 张云鹏, 张净搏, 王修权, 张晶, 张树敏. 松辽黑猪HBEGF基因多态性及其与繁殖性状的关联分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2370-2379.
[5]	刘锦钰, 张杨, 马旭梅, 周千, 周扬, 张春香, 石磊, 任有蛇. 谷胱甘肽对绵羊精液低温保存效果的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2388-2394.
[6]	孙守湖, 陈志飞, 郭智轩, 俞婷, 王修武, 李松倍, 魏文康, 贺东生. 3种猪冠状病毒N基因密码子偏好性及宿主适应机制研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2403-2413.
[7]	曹琪, 金清, 袁意, 冯逸雪, 孔丹妮, 陈翔鸿, 吴斌, 宋文博, 汤细彪. 规模化猪场常见呼吸道细菌性病原的流行病学调查[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2439-2449.
[8]	史秋颖, 段宝敏, 李颖, 牛登云, 耿晨阳, 周佳伟, 王蕊, 冯敬敬. 2020—2021年中国部分地区猪流行性腹泻病毒S1基因遗传变异分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2468-2478.
[9]	欧云文, 潘琴, 汪洋, 代军飞, 任绍科, 张洋, 张杰. 猪细小病毒6型ORF2基因的截短表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2487-2495.
[10]	潘鹏丞, 雷宗全, 李显, 胡湘云, 秦谦涛, 覃兆鲜, 关志惠, 陈宝剑, 谢炳坤. 陆川猪MYL2基因生物信息学分析、真核表达载体构建及组织表达研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 1796-1806.
[11]	欧阳坤, 魏立民, 孙瑞萍, 解娅立, 齐琪, 李想, 刘圈炜, 晁哲, 张永亮, 陈婷. 姜黄素对海南屯昌猪生长性能、饲料养分表观消化率和血清生化指标的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 1867-1875.
[12]	吴静璇, 孙征, 马雪莲, 张丽阳, 廖秀冬, 罗绪刚, 李素芬, 吕林. 中国畜禽饲料资源中镁含量的调查研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 1888-1898.
[13]	黎明国, 李清春, 陈鑫, 卢世豪, 何凡, 祁梦凡, 张化鹏, 任玉军, 张庆泽, 符彬彬, 徐梦思, 艾子凯, 闫坤, 冯赟, 华再东, 黄涛, 毕延震. TET去甲基化酶对猪卵母细胞发育的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 1907-1917.
[14]	王泽平, 王飞飞, 张芮铭, 付言峰, 赵为民, 戴超辉, 程金花, 廖超, 李辉. 苏紫猪SLA-1基因多态性及其抗病潜能分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 1918-1927.
[15]	宋承磊, 张哲, 韦怡林, 杨松柏, 豆雅晴, 李晨雷, 刘蓥珂, 李新建, 杨峰, 李秀领, 王克君, 乔瑞敏, 韩雪蕾. 不同品种、季节和月龄对公猪精液品质的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 1938-1946.