牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (6): 159-162.

牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

张淑琴¹, 郭利¹, 张亭亭², 吴永旺², 武华¹

1. 中国农业科学院特产研究所,吉林吉林 132109;2. 北京必威安泰生物科技有限公司,北京 100176

收稿日期:2010-12-15 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-06-20 发布日期:2011-06-20
通讯作者: 武华

Establishment and Application of a RT-PCR Assay for Detection of Bovine Viral Diarrhea Virus

ZHANG Shu-qin¹, GUO Li¹, ZHANG Ting-ting², WU Yong-wang², WU Hua¹

1. Institute of Special Economic Animal and Plant Sciences,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Jilin 132109,China;2. Beijing Bigvet Biotech Co. Ltd.,Beijing 100176,China

Received:2010-12-15 Revised:1900-01-01 Online:2011-06-20 Published:2011-06-20

摘要/Abstract

摘要： 根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立了检测BVDV的RT-PCR方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,结果显示,该方法可从BVDV标准毒株Oregon C24V中扩增出471 bp的特异性片段,而对猪瘟病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒、MDBK正常细胞的扩增结果均为阴性。经对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达10^-1 TCID₅₀/mL。应用该方法对临床腹泻病牛各脏器样品进行检测,结果比病毒分离方法更为敏感,操作简便。表明建立的RT-PCR方法具有特异、灵敏、高效、快速的特点,可用于BVDV的临床检测及流行病学监测。

关键词: 牛病毒性腹泻病毒; 反转录聚合酶链反应; 检测

Abstract: A reverse transcription PCR (RT-PCR) assay for detection of bovine viral diarrhea virus (BVDV)was established using a pair of specific primers of BVDV. This method could specifically amplify a 471 bp fragment from BVDV Oregon C24V strain,but not from classical swine fever virus (CSFV),infectious bovine rhinotracheitis virus (IBRV),bovine respiratory syncytial virus (BRSV),parainfluenza virus-3 (PI3) and normal MDBK cells. The organs were detected by RT-PCR and virus isolated that collected from a sick calf with bovine viral diarrhea (BVD) like syndrome.These results indicated that the established RT-PCR assay was specific,sensitive,efficient and rapid for detection,monitoring and epidemiological investigation of BVDV infection.

Key words: bovine viral diarrhea virus; RT-PCR; detection

中图分类号:

张淑琴;郭利;张亭亭;吴永旺;武华. 牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. , 2011, 38(6): 159-162.

ZHANG Shu-qin;GUO Li;ZHANG Ting-ting;WU Yong-wang;WU Hua. Establishment and Application of a RT-PCR Assay for Detection of Bovine Viral Diarrhea Virus[J]. , 2011, 38(6): 159-162.

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