为观察泌乳奶牛阴外动脉注射脂多糖(lipopolysaccharides ,LPS)后对临床症状及白细胞(WBC)的影响,选用6头泌乳后期的中国荷斯坦奶牛,用注射LPS处理和空白对照交叉试验设计,每期试验持续一周,期间3头牛进行阴外动脉LPS注射(Escherichia coli 0111:B4,0.01 μg LPS/kg体重),另外3头牛在阴外动脉注射生理盐水。结果表明,与对照组相比,注射LPS极显著影响奶牛的呼吸频率(P＜0.01),在注射后3 h达到最高;注射LPS后对奶牛直肠温度没有影响;注射LPS极显著影响奶牛脉搏(P＜0.01),在注射后6 h达到最高;注射LPS极显著影响奶牛血液中WBC数(P＜0.01),且对其分类计数没有影响。因此,当给奶牛阴外动脉注射LPS后,会影响奶牛的临床症状和WBC数。

为研究玉米-豆粕型日粮中赖氨酸水平对70~90日龄生长肉兔生产性能、血清类胰岛素生长激素浓度及其基因表达的影响。选择100只体重接近、前期饲养相同的70日龄新西兰肉兔为试验动物,随机分成5组,以赖氨酸含量分别为0.55%、0.65%、0.75%、0.85%和0.95%的5种日粮为试验处理,进行为期20 d的饲养试验。结果表明,随日粮赖氨酸水平的增加,90日龄生长肉兔生长性能组间差异不显著(P>0.05);血清胰岛素、生长激素、类胰岛素生长激素浓度显著提高(P＜0.05),分别在0.85%,0.75%和0.95%达到最大值;肝脏和肌肉IGF-Ⅰ相对表达量也明显增加(P＜0.05)。综上所述,70~90日龄生长肉兔血清IGF-Ⅰ浓度和基因表达受日粮赖氨酸水平的影响。

过瘤胃氨基酸已成为调控高产奶牛理想小肠氨基酸的重要手段,对提高奶牛的生产水平有着重要的意义。作者就目前过瘤胃氨基酸的保护方法、作用效果、影响因素及有效性的比较进行了综述。

试验旨在研究葡萄糖氧化酶(GOD)对断奶仔猪生长性能及肠道健康方面的影响,讨论其可能的作用机理。试验选用160头10 kg断奶仔猪,根据体重随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ共4个处理组,每个处理5个重复,每个重复8头猪。试验Ⅰ组不添加GOD,饲喂基础日粮;Ⅱ组在基础日粮中添加100 mg/kg金霉素;Ⅲ和Ⅳ组分别给予0.1%、0.2%的GOD。结果显示,与对照相比,日粮中添加0.2%的GOD日增重显著提高(P<0.05);饲料转化效率趋于提高(0.05<P<0.15);胃和十二指肠pH显著降低(P<0.05);十二指肠绒毛高度及VH/CD显著提高(P<0.05);日粮干物质及粗蛋白质消化率显著提高(P<0.05)。因此,日粮中添加0.1%~0.2%的GOD能够降低断奶仔猪胃肠道pH,改善肠道形态结构,提高营养物质消化率和饲料转化效率,提高断奶仔猪生产性能。

本试验主要研究了不同锌源及锌水平对生长期雌性水貂营养物质消化率及氮代谢的影响。本试验采用单因子试验设计,每组12个重复,每个重复1只,Ⅰ-Ⅵ组水貂基础日粮中蛋氨酸螯合锌添加量(以锌元素计)分别为0(Ⅰ组)、15(Ⅱ组)、30(Ⅲ组)、45(Ⅳ组)、60(Ⅴ组)、75 mg/kg(Ⅵ组)、Ⅶ组水貂基础日粮中硫酸锌添加量(以锌元素计)为60 mg/kg。结果表明,冬毛生长期雌性水貂对添加蛋氨酸螯合锌水平为45 mg/kg的日粮的干物质、蛋白质和脂肪的消化率最高;不同锌源及锌水平日粮对生长期雌性水貂氮代谢的影响无显著差异。

作者综述了粕类蛋白质饲料,包括豆、菜、棉粕作为动物饲料原料的营养特点及经过微生物发酵后可有效改善其营养价值,提高动物消化利用率,促进动物生产,从而节约饲料成本,且有利于缓解中国蛋白质饲料资源紧缺的关键性问题,并提出了微生物发酵粕类蛋白质饲料存在的问题及发展前景。

二甲酸钾是近年来国内外重点研究的一种新型饲料添加剂。通过对二甲酸钾的理化性质、作用机理、在猪生产中的应用及存在的问题等进行介绍,为以后二甲酸钾的深入研究提供一定的理论依据。

采用体外法研究无机磷添加浓度对瘤胃发酵的影响。无机磷在培养液中设0、30、60、90、120、150、200、250、300、350 mg/L 10个水平。体外培养发酵48 h后终止培养,测定培养液的pH、总挥发性脂肪酸(VFA)。结果表明,不同无机磷添加水平对乙酸、丙酸、丁酸和总VFA产量影响显著(P＜0.05),无机磷添加水平为200 mg/L时,乙酸、丙酸、丁酸及总VFA产量最高,随后下降。瘤胃培养液pH随无机磷添加水平的增加而显著降低(P＜0.05),无机磷添加水平为200 mg/L时达到最小值5.65,随后又上升。在本试验条件下,添加无机磷明显促进瘤胃微生物对饲料养分的发酵,适宜添加水平为200 mg/L。

为研究中国美利奴羊(新疆军垦型)品系间的毛品质特点,以超细毛品系、A品系、B品系、毛用多胎品系和肉用多胎品系为试验对象,测定毛纤维的主要理化性能,分析各品系羊的毛纤维特点,并作相关分析。结果表明,A品系羊毛自然长度最长;超细毛品系羊毛纤维直径显著低于其它品系(P＜0.05),其羊毛卷曲度显著高于其它品系(P＜0.05);B品系污毛量最高,肉用多胎品系污毛量显著低于其它品系(P＜0.05)。毛用多胎品系净毛率最高,但各品系间净毛率差异不显著(P＞0.05)。相关分析结果表明,羊毛细度与卷曲度呈极显著负相关(P＜0.01),细度与污毛量呈显著正相关(P＜0.05);卷曲度与污毛量呈显著负相关(P＜0.05),卷曲度与自然长度呈极显著负相关(P<0.01);污毛量与自然长度呈极显著正相关(P＜0.01);自然长度与净毛率呈显著正相关(P＜0.05)。说明各品系羊的毛品质特点与培育目标一致,其中,超细毛品系羊毛综合品质优良。

为探讨玉米赤霉烯酮对离体培养的小鼠胸腺上皮细胞的作用,本研究以1月龄昆明小鼠为研究对象,采用MTT法、线粒体染色、流式细胞仪分析等方法,离体研究玉米赤霉烯酮对胸腺上皮细胞线粒体的影响。结果表明,高剂量(10~25 μg/mL)玉米赤霉烯酮能显著增强小鼠胸腺上皮细胞线粒体代谢MTT能力,增强线粒体活性,使线粒体膜电位升高。

为确定中药王不留行对奶牛乳腺细胞泌乳功能的影响,以王不留行为原料,通过水浸提得到王不留行提取液,测出王不留行提取液中增乳活性物质邻苯二甲酸二丁酯含量,设置不同浓度中药提取液进行细胞试验,观察其对细胞泌乳的影响,筛选出增乳效力最显著的药物浓度。结果2 mg/mL(生药浓度)药物组增乳效果最显著,提示中药王不留行可直接作用于奶牛乳腺上皮细胞促进泌乳。

胞嘧啶-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸(cytosine phosphate guanidine oligodeoxynucleotide,CpG ODN)是指含有非甲基化的胞嘧啶和鸟嘌呤二核苷酸为核心序列的核苷酸序列,近年来,CpG ODN作为一种新型免疫佐剂的研究越来越多,可诱发机体产生多种免疫学效应,提高系统免疫和黏膜免疫水平,具有安全性高,耐受性强等特点。

通过对鲤鱼鳍条细胞进行原代培养,摸索出最佳的培养条件。采用组织块培养法,取一小块鳍条组织在不同培养基、温度、pH、CO₂等培养条件下进行培养,对其生长状况进行观察。培养48 h可见组织块周围有细胞迁出,并形成生长晕,培养1周可形成单层细胞,主要由上皮样细胞和少量成纤维样细胞组成。本研究初步确立了鲤鱼的鳍条细胞培养条件为:培养基为M199,培养温度为25~27 ℃,pH为7.2~7.6,CO₂浓度为5%,原代培养血清浓度为15%~20%,连续培养12 d后可得到纯化的鳍条细胞。

试验采用高碘酸钠法合成了磺胺二甲嘧啶的人工SMZ-BSA和SMZ-OVA,紫外扫描和SDS-PAGE电泳鉴定证明抗原耦联成功。在此基础上,建立间接竞争ELISA法,将磺胺二甲嘧啶添加到鸡蛋和鸡肉样品中,分别用ELISA和高效液相色谱(HPLC)分析方法检测。结果表明,在0.1~50 ng/mL浓度范围内,方法的检测灵敏度IC₁₀=0.18 ng/mL。鸡蛋实际样品的检出限可达到2.0 ng/g,鸡肉实际样品检出限可达到5.0 ng/g。研究建立的ELISA方法与HPLC方法具有较高的相符性,可用于鸡蛋与鸡肉样品中磺胺二甲嘧啶残留含量分析的大量样品的筛查。

为了研究狂犬病病毒(rabies virus,RV)糖蛋白(rgp)膜外区在以糖蛋白为免疫原的免疫应答中的作用,提取RV的RNA,通过RT-PCR扩增RV糖蛋白膜外区1375 bp的序列,将其克隆入pMD18-T载体中,经测序比对正确后,通过酶切将其亚克隆入pVAX1表达载体的多克隆酶切位点处,将酶切鉴定正确的阳性重组子命名为pVAX-rgp,构建表达狂犬病病毒糖蛋白膜外区的真核表达载体,在质脂体介导下转染DK细胞观察其表达情况。研究结果表明,经免疫荧光和Western blotting鉴定,有特异性荧光和60 ku条带产生,证明pVAX-rgp载体中的rgp可在DK细胞中表达。本研究通过成功构建狂犬病病毒8202株糖蛋白膜外区的真核表达载体,为下一步有关功能基因组的研究和基因疫苗的研制奠定了基础。

本试验旨在构建绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9(keratin type Ⅱ intermediate filament 9,KIF Ⅱ-9)基因cDNA的毛囊特异性表达载体,转染辽宁绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达外源基因并可用于核移植的转基因细胞克隆。通过PCR扩增得到的KAP6-1基因启动子,然后与RT-PCR扩增得到的KIFⅡ-9 cDNA 序列连接构成皮肤特异性表达载体pcDNA3.1-KK,将重组表达载体以脂质体介导转染胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得转基因细胞克隆,结果显示,外源KAP6-1启动子序列和KIF Ⅱ-9 cDNA整合到细胞基因组中,为下一步通过核移植方法获得转基因绒山羊提供了条件。

试验以构建的海南黄牛外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR的方法筛选出海南黄牛细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)全长cDNA,构建pET28a-Cdc42重组质粒,经IPTG诱导表达后,进行可溶性分析和蛋白纯化,并应用Western blotting对其进行鉴定。结果显示,海南黄牛Cdc42 cDNA的编码框由576个碱基组成,编码191个氨基酸,融合蛋白分子质量约为30 ku,该蛋白主要以包涵体形式存在;纯化后的蛋白经Western blotting检测,发现对应大小的特异性条带,表明本试验成功克隆Cdc42并表达。

试验通过对内蒙古绒山羊采用持续埋植两年褪黑激素和提取皮肤总RNA后,进行Real-time PCR扩增,并研究了褪黑激素(melatonin,MT)对绒相关基因SOX21在皮肤中表达的影响。以GAPDH基因为看家基因对荧光定量获得的相对定量的数据进行校正,数据经2-△△Ct法分析,结果发现:①SOX21基因在不同个体中的表达趋势是相对稳定的,不受个体差异的影响。②褪黑激素对一年中SOX21基因在内蒙古白绒山羊皮肤中表达的影响除3、4、5月份外其他月份均有显著的影响。③持续埋植两年稳定了褪黑激素对SOX21基因在绒山羊皮肤中表达的影响,降低了绒山羊对褪黑激素的应激反应。④SOX21基因在毛囊休止期表达明显下调,可能与脱绒相关。

试验从雌性绵羊妊娠期不同阶段的输卵管、子宫内膜、卵泡组织中提取总RNA,根据已发表的绵羊Flt-1基因的cDNA序列设计引物,以β-Actin基因为内参,采用RT-PCR扩增绵羊Flt-1基因,将扩增产物克隆于载体后进行序列分析,并应用Kodak Science 1 D、Bandscan图像分析软件,推断出不同组织中Flt-1基因的表达量。结果表明,从雌性绵羊妊娠期不同阶段生殖道各组织上皮均获得82 bp的Flt-1基因的扩增片段,且Flt-1基因在雌性绵羊生殖道各组织内的表达量不同。说明Flt-1基因对绵羊的妊娠维持起着重要的作用。

环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种新型恒温扩增技术。LAMP技术不需要特殊的精密仪器设备,结果观察和判定直观,且具有成本低廉、操作简单、反应时间短、特异性强、灵敏度高等优点。因此特别适合现场快速检测及基层普及应用,具有很高的实用推广价值。作者就LAMP技术的原理、反应过程、操作过程及其在禽流感、口蹄疫、高致病性蓝耳病和猪瘟等重大动物疫病诊断中的应用等作一综述。

通过PCR获得流产型布鲁氏菌Omp22基因的编码区,将其克隆到pSOS载体中,构建酵母双杂交系统的诱饵载体pSOS-Omp22。测序正确后,将重组质粒导入cdc25H检测其表达产物对酵母细胞有无毒性和自激活作用,且在酵母细胞中定位是否正确。结果表明,获得了正确的流产型布鲁氏菌Omp22基因编码区,并成功克隆到pSOS诱饵载体中,且转化有诱饵载体的cdc25H在SD/Glucose(-L)营养缺陷平板上生长良好,说明表达产物对酵母细胞无毒性,对报告基因也无自激活作用且其定位正确。表明pSOS-Omp22可应用在酵母双杂交系统中,用于寻找巨噬细胞cDNA文库中与Omp22相互作用的蛋白质。

IBRS-2细胞出现分化变异影响使用,为不影响正常的科学研究,本研究采用单细胞克隆的方法重新提纯,用96孔板经过3周的独立培养后,将具有代表性的4株进行扩增,然后用已知毒价的口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)弱毒分别对其进行接毒试验和TCID₅₀测定。结果表明,B1株克隆细胞的病变最为理想,其TCID₅₀为7.60,比提纯前的4.52更接近实际毒价7.85,且和实际毒价无显著差异。

为了研究兔抗鹅IgG酶标抗体的制备,试验采用水稀释-辛酸-硫酸铵法粗提,透析除盐,DEAEA-50纤维素层析相结合的方法提取鹅卵黄IgG,经核酸蛋白检测仪和SDS-PAGE测定IgG浓度;制备兔抗鹅IgG酶标抗体;利用酶标抗体检测小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因疫苗的免疫效果。结果表明,粗提的IgG浓度为10 mg/mL,抗体纯度可达到94.5%;免疫扩散得出兔抗鹅 IgG抗血清效价约 1∶32,抗体酶标后效价为1∶3000;酶标抗体可以作为检测疫苗效果一种很好的工具。

根据GenBank上已发表的猪瘟病毒(CSFV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的全基因序列,进行对比分析,分别设计合成两对能特异性扩增CSFV、BVDV的引物。经过条件优化后,建立了检测CSFV和BVDV的双重RT-PCR方法,扩增两种病毒的片段,大小分别为938、650 bp。应用该方法对11批牛睾丸细胞、7批胎牛血清、60个批次的猪瘟细胞苗、10份全血样及10份组织样进行检测。通过试验证明,所建立的方法具有良好的特异性和敏感性,为防止猪瘟细胞苗的污染及进行CSFV和BVDV鉴别诊断提供了有效方法。

哺乳动物体细胞克隆技术是一项高新的生物技术,这一技术不仅为许多学科发展带来了机遇,它的应用将给畜牧业生产、转基因动物和医学带来了革命性的变化。作者就这几个方面的应用做一简要综述。

以西南马为对照,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对31匹贵州矮马的转铁蛋白(TF)、白蛋白(Alb)、α^1-B糖蛋白(AlB)3种血清蛋白进行了多态性研究。结果表明,AlB位点呈现单态,TF、Alb蛋白位点均表现出不同程度的多态性。Alb位点共发现6种蛋白型,对应3个等位基因,贵州矮马Alb位点的基因频率分别为A(0.2097)、B(0.5645)、C(0.2258);TF位点共发现8种蛋白型对应5个等位基因,贵州矮马TF位点的基因频率分别为A(0.0484)、B(0.5806)、C(0.1129)、D(0.1452)、E(0.1129)。Alb、TF位点的多态信息含量(PIC)和遗传杂合度均较大,说明贵州矮马的遗传多样性较高,具有较大的选育空间。但是贵州矮马在白蛋白及转铁蛋白位点的杂合度均低于西南马,说明在相对闭锁的环境中生存的贵州矮马,保持了较为纯净的原始基因库。贵州矮马的Alb和TF的个体识别率及累积非父排除率均较高,提示这两个蛋白的多态性可应用于贵州矮马的谱系鉴定和个体鉴别。

通过人工添加中华蜜蜂王浆技术来培育江山2号与法国意蜂的杂交蜂王,并测定江山2号、法国意蜂、中华蜜蜂、营养杂交子1代和子4代工蜂的微卫星遗传多态性。结果表明,经过营养杂交,亲本蜜蜂与营养杂交子代的遗传距离发生明显的变化,中华蜜蜂和意大利蜜蜂的特有DNA条带发生了转移。说明通过蜂种之间的营养杂交可以改变其微卫星多态性。

本研究旨在观察鸵鸟一年中激素分泌规律与发情行为的相关性,为采精和输精掌握最准确的时间,采用放射免疫分析法(RIA)测定样品中促卵泡刺激素(FSH)、雌激素(E2)和睾酮(T)的浓度水平。结果表明:①雌鸵鸟血浆内FSH水平在一年之中呈现波动式变化,从11月开始上升,12、2、7月中出现3个明显的分泌波峰,峰值分别为114.354、130.168和144.375 mIU/mL,6月中旬达到全年中最低22.312 mIU/mL;②E2水平在1~5月都呈缓慢上升趋势,在7月突然下降到最低(18.874 pg/mL),9月达全年最高峰(367.285 pg/mL);③雄鸵鸟血浆睾酮(T)浓度从1~6月一直呈上升趋势,6月达到较高水平(121.473 ng/dL),8月达到全年中最低(77.166 pg/dL),到10月中旬达到全年最高(138.562 ng/dL);鸵鸟血浆内FSH、E2及T的浓度水平在一年之中呈现波动式变化与发情表现趋于一致。

近几年来,在公猪精液冷冻稀释液中添加抗氧化剂以提高冷冻精液质量的研究受到广泛的关注。添加谷胱甘肽、超氧化物歧化酶和过氧化物酶、维生素E、L-半胱氨酸和L-谷氨酰胺、中草药成分等抗氧化剂可以有效地防止氧化损伤,提高解冻后精子活率、精子成活力、质膜与顶体完整性等,进而提高冷冻保存精液的受精能力。作者综述了抗氧化剂的抗精子冷冻损伤的作用机制及不同抗氧化剂的应用效果,并对其在公猪精液冷冻保存中的应用前景进行了展望。

在脂肪酸的合成过程中,脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)是一种多功能的复合酶,是合成脂肪酸的关键酶,因此,动物体内脂肪酸合成酶蛋白的多寡、活性的高低对动物脂肪酸的合成及体脂的沉积具有重要的意义。近年来,国内外大量的研究报道了脂肪酸合成酶对脂肪合成、代谢的调控。作者将从脂肪酸合成酶基因结构特征,其与能量代谢及体脂沉积的关系,以及日粮养分与激素对脂肪酸合成酶基因的表达调控研究进行综述。

本研究旨在了解生活在高海拔地区的藏黄牛乳的生化组成特点。试验测定了43头九龙藏黄牛乳蛋白含量、乳蛋白组成和酪蛋白多态性。藏黄牛乳蛋白含量低,仅约为29 g/L;电泳分析结果显示,脱脂乳蛋白组成与普通牛乳接近,主要包括酪蛋白、α-乳清蛋白和β-乳球蛋白等组分,β-Lg与α-La含量的比值低于牦牛;酪蛋白的相对含量约为70%,主要包含α_s-CN和β-CN,二者分别检测到3和2种基因型。研究结果表明,九龙藏黄牛乳的组成与生活在类似生态环境中的九龙牦牛存在差异。

采用PCR和直接测序的方法测定百宜黑鸡和兴义矮脚鸡线粒体DNA控制区全序列,比较分析两种贵州地方鸡种的遗传变异。结果表明,百宜黑鸡、兴义矮脚鸡mtDNA控制区全序列长均为1231 bp;共发现26个变异位点(不包含种内变异位点),占分析位点总数的2.11%,其中12个转换,14个颠换;百宜黑鸡mtDNA控制区的A、T、G、C碱基含量分别为27.096%、33.628%、13.117%、26.159%,矮脚鸡的A、T、G、C碱基含量分别是A26.916%、T33.409%、G13.387%、C26.288%,t检验结果显示,两种鸡mtDNA控制区的A和T含量差异显著。百宜黑鸡和兴义矮脚鸡的遗传距离是0.0379,根据分子钟计算,二者约在190万年前分歧进化。

作者以精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)目前的研究现状为基础,从试验动物年龄选择入手,综述了胎儿时期前精原细胞和新生动物精原干细胞形态和功能差异,试图为SSCs研究中分离、纯化、富集高纯度的SSCs提供新的研究思路。

随着牛集约化养殖的发展,高精饲料的使用越来越广泛,这在不断提高牛生产性能的同时也引起了一些营养代谢病,特别是瘤胃酸中毒的发生,给养殖业造成了巨大的经济损失。作者就牛瘤胃酸中毒的发病机制与防治进行了较为系统地论述,以期为临床生产中更有效地预防和控制该病的发生和流行提供一定的理论参考。

应用反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),利用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N蛋白)ORF7基因保守序列的6个区域设计2对特异引物,经反应体系、反应条件优化及敏感性和特异性试验,建立了PRRSV RT-LAMP检测方法。研究结果表明,该检测方法不需要复杂仪器,仅用一台普通恒温水浴锅,在等温条件(63 ℃)保温1 h,即可完成核酸扩增反应,加入核酸染料SYBR GreenⅠ后,用肉眼即可对试验结果进行准确判定,为田间和基层部门检测猪繁殖与呼吸综合征病毒提供了一种廉价、简便、快速、敏感、特异的新方法。

基于细菌rRNA区域序列的PCR技术,通过设计特异性引物从奶样中快速、准确地鉴定奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌。采用金黄色葡萄球菌与挤奶前从奶牛乳房上洗刷下来的污水经过3次富集的方法,通过双层琼脂平板法,分离纯化得到了强裂解性的奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌的噬菌体。本试验分离的是可收缩尾的噬菌体,其头部为二十面体,约50 nm×62.5 nm,尾部长约187.5 nm,尾宽约37.5 nm,有尾鞘、基板等结构。纯化后在双层琼脂平板上形成的噬菌斑大而整齐,边缘光滑,透明,直径约2 mm,具有明显的强裂解性噬菌体特性,通过测定,该噬菌体的最佳感染复数为0.01,效价大于10⁹ PFU/mL。对噬菌体的不同保存方法进行比较,结果表明,将噬菌体置于-80 ℃加入7% DMSO冷藏是较好的保存方法。

本试验旨在研究和探讨抗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)药物花艽-6的抗炎作用及其抗炎机理。采用二甲苯致小鼠耳肿胀法、醋酸致小鼠毛细血管通透性增高法、甲醛和蛋清致小鼠足跖肿胀法,以及棉球致小鼠肉芽组织增生法分别研究了该药物的抗急性、亚急性和慢性炎症的作用。通过复制佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠模型研究花艽-6对其血清中IL-1β、IL-6和TNF-α含量的影响。花艽-6对小鼠二甲苯所致的耳肿胀、醋酸所致的腹腔毛细血管通透性增高、甲醛和蛋清所致的足跖肿胀和棉花所致的肉芽组织增生均具有显著或极显著的抑制作用。花艽-6具有抗炎作用,可显著降低AA大鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达,对RA具有治疗作用。

本试验旨在检查中药颗粒剂对传染性法氏囊病(IBD)鸡免疫器官损伤的修复作用。采用病理组织学方法检查传染性法氏囊病自然耐过鸡和用中药颗粒剂治疗而康复鸡的免疫器官,采用光学显微镜对其主要免疫器官进行病理组织学观察。即随机抽取中药颗粒剂治疗组和自然耐过对照组25日龄鸡各10只,其中中药治疗康复后35日龄鸡10只,自然耐过35日龄鸡7只,死亡3只。扑杀被检鸡,采集各鸡法氏囊、脾脏和肝脏病料,眼观病变以后,用10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,切片,苏木素-伊红染色,组织切片,显微镜检查病理组织学变化,并进行显微组织拍照直观比较自然耐过鸡和自制中药颗粒治疗康复鸡的免疫器官病理组织学变化。被检的IBD自然耐过鸡的免疫器官仍呈轻度病理性变化,而采用自制中药颗粒治疗痊愈鸡的病理变化基本一致,表现为免疫增强。中药颗粒剂能够显著修复IBD鸡免疫器官的损伤。

本研究旨在寻找防治鲟鱼病害的有效中草药药物。用水煎煮法提取天然物中草药有效成分,采用试管法测定各提取物对维氏气单胞菌的最低抑菌浓度,最后通过正交试验确定了4种中草药提取物体外抑菌的最优组方。33种中草药提取物对维氏气单胞菌抑菌效果最好的是五倍子,其MIC为0.97 μg/mL;其次是地榆和黄芩,两者MIC均为1.95 μg/mL;马齿苋和苦参抑菌效果最差,MIC为250 μg/mL。选取五倍子、地榆、地锦草和连翘进行正交试验,其最优组方为1∶2∶4∶8,该组方对维氏气单胞菌有明显的抑制作用,为进一步应用中草药防治水产养殖病害提供依据。

根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立了检测BVDV的RT-PCR方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,结果显示,该方法可从BVDV标准毒株Oregon C24V中扩增出471 bp的特异性片段,而对猪瘟病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒、MDBK正常细胞的扩增结果均为阴性。经对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达10^-1 TCID₅₀/mL。应用该方法对临床腹泻病牛各脏器样品进行检测,结果比病毒分离方法更为敏感,操作简便。表明建立的RT-PCR方法具有特异、灵敏、高效、快速的特点,可用于BVDV的临床检测及流行病学监测。

本试验旨在为PCV2的快速诊断提供技术手段。用纯化的原核表达的重组猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白(pET-Cap)免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得了2株能够稳定分泌抗pET-Cap抗体的杂交瘤细胞株3D5和5C5。经建立的间接ELISA试验检测3D5、5C5细胞上清效价分别为1∶2048、1∶1024;诱生腹水的效价分别为 1∶204800、1∶102400,杂交瘤染色体数目分别为95条、96条。Western blotting结果表明,2株单抗能与病毒发生特异性反应。传代培养20代,3个月内复苏冻存3次,3D5、5C5能够稳定分泌抗体。

小鹅瘟是由鹅细小病毒引起的一种急性、亚急性烈性传染病,是目前危害养鹅业的重要传染病之一。近年来关于鹅细小病毒的研究又有了新的发展和新的观点,作者从鹅细小病毒分子生物学、检测方法、致病机理和抗原位点的定位等方面进行了阐述。

本试验旨在使用中药马蹄香对感染细小病毒的患犬进行治疗,观察马蹄香的治疗效果。使用CPV-BM毒株通过口服方式感染犬,根据犬细小病毒临床诊断标准进行诊断,应用马蹄香结合西药的方法进行相应的治疗。发病初期使用马蹄香全粉200 mg/kg·d治疗,1~3 d可治愈,中度症状患犬需要配合0.9%氯化钠液静脉注射治疗,重度症状患犬需要配合5%葡萄糖液和庆大霉素静注治疗,1~3 d可好转,治愈率优于对照组。结果表明,马蹄香是治疗犬细小病毒性肠炎的有效药物,并且可以明显提高其它药物的治疗效果。

采用饱和食盐水漂浮法收集就诊病死球虫阳性鸡小肠中段内容物中的球虫卵囊,恒温培养至孢子化后,用2%琼脂薄板进行球虫单卵囊分离,分别感染7只5日龄雏鸡,对据形态学鉴定为巨型艾美耳球虫的分离株进行2代单卵囊分离和雏鸡感染,取其后代以每只1.0×10⁴个卵囊感染10只10日龄雏鸡进行卵囊扩增,获得大量纯种巨型艾美耳球虫卵囊。结果表明,刀片切割琼脂薄板单卵囊分离法操作简便,单卵囊感染成功率较高,准确率达100%,适用于纯种卵囊的分离与扩增。

2010年4月,安徽省某草鸡养殖场发生一起以严重呼吸困难、急性死亡为特征的病例。取发病典型的鸡内脏,按常规方法处理后,接种10日龄SPF鸡胚,经有限稀释法纯化,获得一株病毒,通过HA、HI、分子生物学以及动物回归等试验,最终确诊该病为H9亚型禽流感。

近年来,由副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)所引起的猪群多发性浆膜炎和关节炎在中国各地屡有发生,对仔猪和青年猪造成严重危害,给养猪业带来了巨大的经济损失,目前,该病已成为全球范围内影响养猪业的典型细菌性疾病。副猪嗜血杆菌血清型复杂,分离培养困难。为了全面认识该病,对其病原学、病理变化、流行病学、致病因子、诊断方法、免疫防治等进行了综述。

羊痘是危害养羊业健康发展的一种烈性传染病,各国学者对该病的诊断与防治进行了广泛研究。作者从羊痘的病原学特征、流行病学特征、诊断方法、防治等方面进行了综述。

从广西23家中小规模猪场采集病料,分离、鉴定出致病性大肠杆菌56株,并对其进行血清型鉴定和耐药性检测,结果鉴定出43株致病性大肠杆菌,分属于16种血清型,其中以O₁₃₈、O₁₈、O₈₅、O₉和O₂₁为优势血清型,占定型菌株的69.76%;用20种常用抗菌药进行药物敏感性试验,发现高敏的药物有头孢拉啶、头孢唑啉、头孢曲松、头孢西丁、多黏菌素B、新霉素、壮观霉素和阿米卡星;而不敏感的药物有青霉素、阿莫西林、强力霉素、卡那霉素、万古霉素、林可霉素。说明这些猪场大肠杆菌的耐药性十分严重,应加强生物安全措施等进行综合防控。

本试验旨在探讨以黄芪多糖(astragalan,AG)为佐剂对仔猪猪瘟疫苗诱导猪瘟抗体的影响。将20日龄仔猪40头随机分成4组(n=10),即生理盐水(normal sodium,NS)组、猪瘟疫苗(swine plague vaccine,SPV)组、黄芪多糖注射液(astragalan injection,AGI)组以及黄芪多糖注射液和猪瘟疫苗(astragalan injection and swine plague vaccine,AGI-SPV)组。各组于前腔静脉采血5 mL(用于检测)后,分别于仔猪出生第20、85天连续3 d颈部肌肉注射NS 3 mL×3 d,SPV 1 mL×1 d+NS 3 mL×2 d,AGI 10 mg/kg×3 d,(AGI 10 mg/kg+SPV 1 mL)×1 d+AGI 10 mg/kg×2 d。分别采血检测20(给药前)、35、100 d血清IgG、IgM、IgA、γ-球蛋白、猪瘟抗体(SP-Ab)等。100 d血清测定结果显示,AGI组和AGI-SPV组的γ-球蛋白、IgG、IgM和IgA水平显著高于NS组和SPV组(P＜0.05),SPV组和AGI -SPV组猪瘟抗体阻断率分别显著高于35 d和20 d,且AGI-SPV组高于SPV组(P＜0.05)。 AG作为免疫佐剂能提高猪瘟疫苗对仔猪的免疫力,其作用机制与增加免疫球蛋白和促进猪瘟抗体形成有关。

流感病毒抗原表位的研究,不仅是对流感病毒致病机理和机体免疫系统反应的探究,还能很好地指导对流感的防治。作者从抗原表位的特点,流感病毒抗原表位的特点、研究进展及流感病毒抗原表位疫苗的应用几个方面进行了综述。

为了探索犬肾结石的手术治疗方法,本试验选3~5个月之间,体重6~10 kg的本地杂交犬2只,采用镰刀状肾实质切开法行左侧肾脏切开,分别于术前、术后第3、7、14、21、28天采集血清进行尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)两项肾功能指标测定,并于术后观察其整体状态、排尿表现及肾脏的形态变化。结果表明,手术导致试验犬肾功能指标在术后1~2周内明显降低,于3~4周恢复正常;术肾与健康右肾相比,呈现不同程度的萎缩。

采血技术成为基层畜牧兽医工作人员一项基础性的技术工作,文章对几种常见动物的采血方法进行了总结,为临床兽医实践提供一定的参考。

抑制素是转化生长因子β超家族成员之一,是由α亚基和β亚基构成的异二聚体,主要由卵泡颗粒细胞和睾丸支持细胞分泌,在生殖系统的功能主要是通过调节FSH合成和分泌发挥的。作者就抑制素的分布与结构、在雌雄动物生殖系统的表达及功能、在动物生产中的应用进展进行综述。

芦荟多糖(aloe polysaccharide,AP)是从百合科多年生肉质草本植物芦荟中分离提取出来的,它具有免疫调节、抗肿瘤、护肝养胃等生物学功能,并可作为饲料添加剂用于动物生产。文章旨在综述芦荟多糖的生物学功能及其使用效果,为其在动物生产上的广泛应用提供综合性的理论依据。

发酵床是基于畜禽粪便排放与环境污染控制的一种健康的养殖方式,它为猪提供翻拱和嬉戏场所,符合动物福利和低碳减排的要求,实现了无污染、"零"排放的目的,改善了猪的福利,提高了生产性能,降低了养殖成本,减少了消化道疾病的发生和抗生素等药物的使用。作者从发酵床的提出、发酵原理、发酵床在养猪中的应用及其存在问题等方面进行了综述。

朊蛋白(PrP蛋白)在传染性海绵状脑病中具有重要作用,但其生物学功能至今没有明确。Shadoo蛋白是一种与朊蛋白在N端结构上极为相似的新蛋白,SPRN是Shadoo蛋白的结构基因。由于Shadoo蛋白与PrP蛋白具有相同的生物学性质,且它们在脑组织中重叠表达,因此也被认为是研究朊蛋白的关键因素。文章主要探讨PrP蛋白与Shadoo蛋白在基因结构、蛋白功能、朊病毒感染方面的关系。

以人工感染弓形虫的猪阳性血清及感染前的阴性血清为样品,比较3个国产(A、B、C)和2个国外(D、E)ELISA试剂盒检测猪弓形虫病的敏感性。用这5种ELISA试剂盒,检测人工感染弓形虫的猪阳性血清42份及感染前的阴性血清45份,并参考PCR扩增结果,比较这5种ELISA试剂盒检测猪弓形虫病的敏感性。5种试剂盒中,1种国产试剂盒的检测结果与PCR结果完全一致,其余4种试剂盒的检测结果都与PCR检测结果差别较大。结果表明,国产试剂盒A的检测效果最佳,国外试剂盒与部分国内试剂盒的检测结果相当,临床选用试剂盒时,可选择检测效果最佳的试剂盒A,不必盲目选择国外试剂盒。

抗菌肽是一种参与固有免疫的小分子多肽,具有广谱抗菌活性,构成宿主防御细菌、真菌等入侵的重要分子屏障。目前,抗菌肽在动物保健品中的应用备受关注,特别是其在动物机体内的作用方式。因此,作者对抗菌肽的生物活性及其致细胞死亡作用的高度选择性进行了论述,以便增强人们对此类产品的了解。

以马身猪、太湖猪(二花脸类群)和长白猪为育种素材,采用标记辅助选择技术结合群体继代选育法,经7年6个世代育成山西白猪高产仔母系。结果发现,该品系6世代个体186.48日龄体重达100 kg,30~100 kg阶段日增重708.35 g,每千克增重耗料3.14 kg;体重100 kg屠宰,屠宰率为77.00%,胴体瘦肉率为57.93%,眼肌面积为32.20 cm²。山西白猪高产仔母系生长发育快,胴体品质好,是一个优良的专门化品系。

从定型的优势血清型菌株中选择了2株,制备了基础种子,并对基础种子第1代、第10代和第13代的传代细菌的培养特性、免疫原性以及毒力进行了测定。结果证明,鸭大肠杆菌GX-5株和GX-21株的基础种子传至13代,其培养特性、免疫原性和毒力均不发生变化,表明这两个分离株是良好的疫苗生产菌株,为建立种子批提供了依据。本试验还进行了鸭大肠杆菌高密度发酵试验,获得了鸭大肠杆菌在马丁肉汤培养基中的最佳发酵条件,即发酵温度37.5 ℃,pH 7.4,初糖浓度10 g/L,补糖量为10 g/L,接种量为4%,通气量为1 L/L·min,搅拌转速为200 r/min,培养12 h后得到的发酵菌液浓度最高,D_{600 nm}值达到30.32。本研究为鸭大肠杆菌抗原的规模化生产奠定了基础,也为新疫苗的研制和开发提供了基础材料。

为比较品系对鸡肉肌内脂肪和肌苷酸沉积的影响,选取9个品系鸡作为试验材料,采用索氏浸提法提取肌内脂肪,高效液相色谱仪分析肌苷酸含量。结果表明,同一性别不同品系间肌肉肌内脂肪含量存在显著差异(P＜0.05),除S07、D99和S06×S07 3个品系外,各品系肌内脂肪母鸡高于公鸡;肌苷酸含量在同一性别内不同品系间差异显著(P＜0.05),在S07、D99、S06×S01和S06×S07品系母鸡肌苷酸含量高于公鸡。本试验为鸡的进一步选育,特别对肌肉风味和鲜味特性的育种工作有重要的指导意义。

该试验采用氨氯化铵浸出法浸取次氧化锌,制备饲料添加剂碱式氯化锌(ZnCl₂·4Zn(OH)₂·H₂O)。研究结果表明,在浸出条件为氨与铵根摩尔比为1∶1、总氮与锌摩尔比为10∶1、温度为313 K、时间为60 min时,Zn的浸出率达90%以上。同时,对合成产品进行了主含量、XRD、SEM分析,结果显示产品各项指标均符合GB/T 22546-2008要求。试验还表明该工艺具有方法新颖、流程简单、成本低、安全、高效、环保等特点,从根本上实现了废物资源化的利用,同时还可以生产出质量合格、稳定的新型饲料添加剂碱式氯化锌。

为了评价常山提取物的安全性,对其进行了小白鼠的急性毒性试验。预试验初步确定用药剂量,正式试验取60只昆明种小白鼠,灌胃给药后,连续观察7 d,记录小白鼠的急性毒性反应,并通过改良寇氏法计算常山提取物对小白鼠的半数致死量(LD₅₀)及LD₅₀的95％可信限。结果表明,给药组部分小白鼠出现中毒反应并死亡,剖检主要脏器未见病理变化,测得LD₅₀为18.16 g/kg体重,LD₅₀的95％可信限为15.35~21.49 g/kg体重。试验结果初步提示,常山提取物的毒性很低,临床用药安全可靠。

在动物界,同一种群动物个体之间经常会发生互相争斗的行为,即攻击行为,此种行为在其生命中具有重要意义。随着人们对攻击行为的探究,发现攻击行为是一个受诸多因素影响、彼此相互作用的复杂过程。这既包括种群密度、食物等外部因素,也包括遗传因素、个体差异等内部因素。作者主要对影响动物攻击行为的诸因素作一综述。

杨树花为杨柳科植物毛白杨(Populus tomentosa Carr.)、加拿大杨(Populus canadensis Moench.)或同树种植物的干燥雄花序。中国杨树种植面积大,杨树花产量较高。杨树花中含有丰富的氨基酸、无机元素、蜜糖可以弥补部分饲料中氨基酸和无机元素的缺乏;通过乙醇回流从杨树花中提取的活性化合物具有良好的抗菌活性,并能够增强机体的抗氧化能力;杨树花可替代部分日粮,降低禽畜发病率,提高经济效益;其制剂对家畜肠道疾病具有良好防治效果。

为了分析评估猪重大疫病发生风险,为防控决策提供基础依据。依据评价指标选取原则,通过调查分析、资料检索和专家论证,筛选确定风险指标;利用层次分析法确定设置风险指标权重;依照各项指标的关联性,根据概率论运算法则和数理统计加权综合法,建立评估模型;依据综合评估原理和运算法则,运用计算机技术建立综合估算系统。通过研究,建立了由评估指标结构框架、指标权重系数、指标量化评价标准、评估数学模型、综合估算系统和风险等级标准组成的,适合柳州当地实际的区域性、内源性猪重大疫病风险评估体系。应用表明,建立的猪重大疫病风险评估体系可从时间、空间、水平三方面评估风险,应用于基层防控有现实指导意义。

植物精油作为抗生素添加剂的替代产品具有很多优势,但是植物精油的化学成分非常复杂,作者就植物精油的主要成分及生物学功能的研究进展进行了综述。