猪呼吸道疾病综合征中性粒细胞cAMP-PDE和血浆cAMP、IL-6、TNF-α的变化及中药疗效研究

中国畜牧兽医 ›› 2014, Vol. 41 ›› Issue (9): 132-135.

猪呼吸道疾病综合征中性粒细胞cAMP-PDE和血浆cAMP、IL-6、TNF-α的变化及中药疗效研究

张美华¹, 李佳¹, 孟乐², 周双海³, 姜代勋¹, 陈武¹

1. 北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室, 北京 102206;
2. 天津市宁河原种猪场, 天津 301504;
3. 北京农学院动物科学技术学院, 北京 102206

收稿日期:2014-03-03 出版日期:2014-09-20 发布日期:2014-09-24
通讯作者: 姜代勋, 陈武 E-mail:dx_tcvm@126.com;tcvmchenwu@hotmail.com
作者简介:张美华（1987- ），女，河南人，硕士，研究方向：中西结合临床兽医学。
基金资助:
北京市属高等学校人才强教计划资助项目（PHR201107134）；北京市自然科学基金（6112007）。

Study on Cyclic AMP Phosphodiesterase in Polymorphonuclear Neutrophils and cAMP,IL-6,TNF-α in Plasma of Porcine Respiratory Disease Complex and the Therapeutic Effect of Chinese Herbal Medicine

ZHANG Mei-hua¹, LI Jia¹, MENG Le², ZHOU Shuang-hai³, JIANG Dai-xun¹, CHEN Wu¹

1. Beijing Key Laboratory of Traditional Chinese Veterinary Medicine, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China;
2. Tianjin Ninghe Breeding Pig Farm, Tianjing 301504, China;
3. Animal Science and Technology College, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China

Received:2014-03-03 Online:2014-09-20 Published:2014-09-24

摘要/Abstract

摘要： 本试验通过观察呼吸道疾病综合征（PRDC）病猪中性粒细胞（PMN）环磷酸腺苷磷酸二酯酶（cAMP-PDE）活性和血浆cAMP、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量的变化及自拟中药汤剂对其的影响与疗效，以期为呼吸道炎症的病理机制与中药防制积累资料。将PRDC病猪随机分组，治疗组灌服由芦根、黄芪、白芍、甘草组成的1 g生药/mL中药，1.5 mL/kg，每天2次，连续给药10 d。停药后取全血检测各组外周血白细胞数量；并分离PMN，HPLC法检测cAMP-PDE活性；ELISA试剂盒测定血浆中cAMP、IL-6、TNF-α的含量。与健康对照组相比，患病组白细胞数量显著升高（P<0.05），cAMP-PDE活性和血浆TNF-α、IL-6含量均极显著升高（P<0.01）；治疗组TNF-α含量显著升高（P<0.05）。与患病组相比，治疗组的白细胞数量、cAMP-PDE活性和血浆TNF-α含量均显著降低（P<0.05），IL-6极显著降低（P<0.01）。结果表明PRDC病猪存在外周血白细胞数量、PMN cAMP-PDE活性和血浆IL-6、TNF-α含量升高的异常变化，自拟中药汤剂能改善呼吸道病猪的临床症状，其作用机制与降低白细胞数量，抑制PMN cAMP-PDE活性和降低血浆IL-6、TNF-α含量相关。

关键词: 猪呼吸道疾病综合征; 中性粒细胞; cAMP-PDE; IL-6; TNF-α 中药

Abstract: The study observed the variety of cyclic AMP phosphodiesterase (cAMP-PDE) activity in polymorphonuclear neutrophils (PMN) and contents of cAMP,IL-6,TNF-α in plasma of porcine respiratory disease complex (PRDC),the therapeutic effect and influence of self-made Chinese herbal decoction,for accumulating information of respiratory inflammation pathological mechanism and its prevention.Divided pigs with PRDC into disease group and treatment group, and normal ones as control group. Drenched treatment group with 1 g crude drug/mL Chinese herbal decoction, which was composed of reed rhizome,mongolian milkvetch root,white peony root and liquorice root,twice a day and 1.5 mL/kg body weight for ten days. Observed changes of the number of white blood cell in peripheral blood,neutrophils were isolated from whole blood,HPLC was used to test its cAMP-PDE activity and ELISA kit was used to test the contents of IL-6,TNF-α in plasma.Compared with control group,the number of white blood cell in disease group increased significantly (P<0.05),cAMP-PDE activity and contents of TNF-α,IL-6 increased extremely significantly (P<0.01);but TNF-α in treatment group increased significantly (P<0.05). Compared with the disease group,the number of white blood cell,cAMP-PDE activity and content of TNF-α in treatment group decreased significantly (P<0.05), content of IL-6 decreased extremely significantly (P<0.01).The results showed that abnormal inflammatory reaction existed in PRDC,cAMP-PDE activity,the contents of IL-6 and TNF-α,the number of white blood cell increased significantly.Self-made Chinese herbal decoction could improve the clinical symptoms of the disease,of which the function mechanism was related to the reduction of the white blood cell number,inhibition of cAMP-PDE activity,and reduction of contents of IL-6 and TNF-α in plasma.

Key words: porcine respiratory disease amplexc (PRDC); polymorphonuclear neutrophils (PMN); cyclic AMP phosphodiesterasec (cAMP-PDE); IL-6; TNF-α; Chinese herbal medicine

中图分类号:

Q592.1

张美华, 李佳, 孟乐, 周双海, 姜代勋, 陈武. 猪呼吸道疾病综合征中性粒细胞cAMP-PDE和血浆cAMP、IL-6、TNF-α的变化及中药疗效研究[J]. 中国畜牧兽医, 2014, 41(9): 132-135.

ZHANG Mei-hua, LI Jia, MENG Le, ZHOU Shuang-hai, JIANG Dai-xun, CHEN Wu. Study on Cyclic AMP Phosphodiesterase in Polymorphonuclear Neutrophils and cAMP,IL-6,TNF-α in Plasma of Porcine Respiratory Disease Complex and the Therapeutic Effect of Chinese Herbal Medicine[J]. , 2014, 41(9): 132-135.

参考文献

1 马丽梅,邓春兰,马加庆.急性肺损伤与细胞因子相关性的研究进展[J].医学综述,2009,15(19):2909～2912.

2 王海为,李剑勇,杨亚军,等.非甾体抗炎药物研究进展[J].动物医学进展,2011,32(1):77～80.

3 贝泠,胡夭惠,沈恂.一种改进的分离嗜中性白细胞的方法[J].生物化学与生物物理进展,1998,25(4):359～362.

4 刘毅,李金宝,邓小明.炎症反应中性粒细胞凋亡延迟机制研究进展[J].国外医学麻醉学与复苏分册,2003,24(3):190～192.

5 孙军锋,高文杰,王伟.支气管肺炎患儿TNF-α、IL-6及IL-10的变化及其临床意义[J].海南医学院学报,2013,19(1):50～57.

6 朱莉娜,陈武,侯显涛,等.犬瘟热犬中性粒细胞cAMP-PDE活性的变化及中药作用研究[J].中国畜牧兽医,2008,35(11):51～55.

7 张法仁,曾忠良.中药抗炎机理研究进展[J].中国兽药杂志,2009,43(11):49～52.

8 杨秀平.动物生理学[M].北京:高等教育出版社,2002.

9 杨晓刚,郭德和,边虹,等.体外循环期间细胞因子TNF-α、IL-6与中性粒细胞的变化及其相互影响[J].南京医科大学学报,2009,29(11):1585～1602.

10 汪雪峰,陈思煜,陈锋.急性肺损伤发病机制的研究进展[J].海峡药学,2013,25(1):102～104.

11 陈桂华.猪呼吸系统感染性疾病的治疗措施[J].中国畜禽种业,2012(10):118.

12 罗富荣, 陈惠孙.中性粒细胞呼吸爆发、脱颗粒的信号转导途径[J].国外医学生理、病理科学与临床分册,2000,20(3):219～222.

13 姜代勋,陈武,许剑琴,等.SARS防治中药抗炎机理的研究——对猪cAMP-磷酸二酯酶活性的影响[A].第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集[C].2005.

14 姜代勋,陈武,于同泉,等.中草药对磷酸二酯酶4活性影响的初步研究[J]. 北京农学院学报,2006,21(1):7～9.

15 姜代勋,陈武,谷金妮,等.猪中性粒细胞磷酸二酯酶基因表达及活性研究[J].中国农业科学,2007,40(6):1265～1270.

16 韩学宏,吕淑萍,余勤,等.规模化猪场猪呼吸系统疾病的病原分析与综合防治措施[J].宁夏农林科技,2009,3:15～17.

17 Chen J W,Chen Y H,Lin S J. Long-term exposure to oxidized low density lipoprotein enhances tumor necrosis factor-alpha stimulated endothelial adhesiveness of monocytes by activating superoxide generation and redox-sensitive pathways[J]. Free Radic Biol Med,2006,40:817～826.

18 Hoyle G W. Mitigation of chlorine lung injury by increasing cyclic AMP levels[J]. Proc Am Thorac Soc,2010,7(4):284～289.

19 Lugnier C.Cyclic nucleotide phosphodiesterase (PDE) superfamily: A new target for the development of specific therapeutic agents[J].Pharmacology & Therapeutics,2006,109(3):366～398.

20 Rabe K F. Update on roflumilast,a phosphodiesterase 4 inhibitor for the treatment of chronic obstructive pulmonary disease[J].Br J Pharmacol,2011,163(1):53～67.

21 Sconocchia G,Campagnano L,Adorno D,et al. CD44 ligation on peripheral blood polymorphonuclear cells induces interleukin 26 production[J]. Blood,2001,97(11):3621～3627.

22 Taegtmeyer A B,Leuppi J D,Kullak-ublick G A. Roflumilast——A phosphodiesterase-4 inhibitor licensed for add-on therapy in severe COPD[J].Swiss Med Wkly,2012,25(2):142.

23 Wilson M R,Choudhury S,Takata M. Pulmonary inflammation induced by highest retch ventilation is mediated by tumor necrosis factor signaling in mice[J]. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol,2005,288(4):L599～L607.

[1]	曹琪, 金清, 袁意, 冯逸雪, 孔丹妮, 陈翔鸿, 吴斌, 宋文博, 汤细彪. 规模化猪场常见呼吸道细菌性病原的流行病学调查[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2439-2449.
[2]	薛沾枚, 刘雪松, 张艳, 张备, 孟维珊, 张国华, 王岩, 钟鹏, 邱景会, 汤继龙, 史同瑞. 贝莱斯芽孢杆菌发酵对乳康方剂中药有效成分提取效果的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2540-2549.
[3]	蒋山翊, 周碧君, 文明, 王开功. 中药联合复合益生菌对鸡柔嫩艾美耳球虫的预防作用[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2092-2102.
[4]	陈天宝, 王娅妮, 刘宝玲, 王刚, 王晓虎, 柳旭辉, 蔡汝健, 贺东生. 中药抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用机制研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2114-2129.
[5]	王巍, 李春洙, 王沙沙, 桑锐, 葛冰洁, 李春亭, 赵欣, 刘馨蔓, 于明弘, 张雪梅. 中药联合益生菌对大肠杆菌致小鼠腹泻保护机制研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(2): 779-788.
[6]	刘宏莹, 王婧瑜, 崔珍珍, 马青霞, 汪婷婷, 李健明, 时坤, 宫庆龙, 杜锐, 冷雪. 中药有效成分对动物疫苗的免疫佐剂效果及相关机理研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(1): 390-397.
[7]	李春亭, 王沙沙, 赵欣, 王巍, 葛冰洁, 张雪梅. 中药联合益生菌对大肠杆菌性小鼠腹泻的保护作用[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(8): 3226-3234.
[8]	任建明, 纪鹏, 张晓松, 魏彦明, 朱潇鹏, 朱跃明. 健脾消导中药复方对6月龄西杂牛生长性能、瘤胃发酵参数和血清指标的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(7): 2593-2600.
[9]	石建存, 李继开, 贾琳, 吕建存, 商子涵, 张铁, 王春光. 发酵中药对蛋鸡生长性能、抗体水平及肠道菌群的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(6): 2145-2155.
[10]	李佩岐, 康杰, 王珂瑶, 王慧敏, 韩宇峰, 王婷慧, 崔亮, 张剑, 邓瑞强, 段智变. 复方中药水提物对腹水综合征肉鸡肝脏TGF-β1/Smad通路的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(5): 1860-1869.
[11]	王超普, 马现永, 田志梅, 余苗, 刘志昌, 邓盾, 容庭, 遆俊岭, 宋敏, 张辉华. 复方中药发酵粉对断奶仔猪生长性能、养分表观消化率、抗氧化功能以及免疫功能的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(4): 1322-1331.
[12]	王钺夫, 徐闯, 崔一喆. 基于网络药理学探讨中药复方治疗奶牛子宫内膜炎的作用机制[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(4): 1545-1555.
[13]	王兆丽, 杨思宇, 吴艳梅, 宋晓晓, 穆祥, 张涛. 猪繁殖与呼吸综合征病毒-脂多糖刺激对中性粒细胞黏附猪肺微血管内皮细胞的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(2): 471-479.
[14]	储蓄, 张军霞, 王晶. 4种中药单体与丁酸钠诱导猪宿主防御肽表达的协同效果研究[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(10): 4063-4074.
[15]	朱怡萱, 刘诗芃, 张伟, 李金荣, 彭菲, 林娜, 王语嫣, 刘丹丹. 抗马链球菌马亚种组方加味优选及其体内抑菌作用研究[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(10): 4085-4096.