脂质体法转染水牛肾脏成纤维细胞条件的优化

›› 2013, Vol. ›› Issue (5): 119-122.

脂质体法转染水牛肾脏成纤维细胞条件的优化

邓廷贤, 庞春英, 张滢寅, 杨炳壮, 张秀芳, 梁贤威

中国农业科学院广西水牛研究所, 农业部(广西)水牛遗传繁育重点实验室, 广西南宁 530001

收稿日期:2012-10-22 出版日期:2013-05-20 发布日期:2013-05-27
通讯作者: 张秀芳,女,广西人,研究员,主要从事水牛胚胎生物技术研究。E-mail:zhangxfbri@sina.com;梁贤威,男,广西人,研究员,主要从事水牛繁殖生物技术和营养研究。E-mail:liangbri@126.com E-mail:zhangxfbri@sina.com;liangbri@126.com
作者简介:邓廷贤(1983-),男,湖南人,硕士,实习研究员,研究方向:分子遗传学。
基金资助:
桂科青(0991067);桂科攻(1123005-1);桂科自(2010GXNSFA013096);"广西‘特聘专家’专项经费资助"。

Optimization of the Transfection Efficiency of Buffalo Fetal Fibroblasts Cells Using Liposome

DENG Ting-xian, PANG Chun-ying, ZHANG Ying-yin, YANG Bing-zhuang, ZHANG Xiu-fang, LIANG Xian-wei

Key Laboratory of Buffalo Genetics, Breeding and Reproduction Technology, Ministry of Agriculture (Guangxi), Guangxi Buffalo Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Nanning 530001, China

Received:2012-10-22 Online:2013-05-20 Published:2013-05-27

摘要/Abstract

摘要： 试验旨在研究脂质体介导基因转染水牛肾脏成纤维细胞时如何获得较高的转染效率。本研究将以绿色荧光蛋白基因为标记基因,利用Lipofectamine LTX介导外源DNA转染水牛肾脏成纤维细胞,探讨脂质体用量、质粒用量、质粒大小、转染时间、细胞初始接种密度对转染效率的影响。结果表明,4 μg pmaxGFP质粒DNA与4 μL脂质体转染6 h,其细胞活性达98%,可获得较满意的转染效率。

关键词: 脂质体; 成纤维细胞; 转染; 水牛

Abstract: The aim of the present study was to obtain the highest transfection efficiency by liposome induced exogenous DNA to buffalo fetal fibroblasts. In the study, the exogenous DNA was transfected into buffalo fetal fibroblasts using Lipofectamine LTX. The impacts of liposome amount, plasmid amount and size, transfection time course, initial plated density and different promoter used on transfection efficiency were discussed according to the GFP marker gene. It was indicated that 4 μg pmaxGFP plasmid DNA with 4 μL liposome resulted in the highest transfection efficiency and its cell activity was up to 98% after 6 h transfection.

Key words: liposome; fibroblasts; transfection; buffalo

中图分类号:

Q813.1

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