【目的】 贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)CM7-4是从海水中分离的具有良好抗菌活性的芽孢杆菌。本试验旨在探究贝莱斯芽孢杆菌CM7-4的抗菌机理，并对其全基因组序列进行分析，以期挖掘其抗菌等功能特性基因。【方法】 通过酸沉淀法得到贝莱斯芽孢杆菌CM7-4的细菌素粗提物，通过固体琼脂打孔法测定蛋白酶K对其抑菌效果的影响；基于MGI DNBSEQ-T7平台对贝莱斯芽孢杆菌CM7-4进行全基因组测序分析，通过序列组装、基因预测和功能注释分析其产细菌素的潜质。【结果】 贝莱斯芽孢杆菌CM7-4的细菌素粗提物对大肠杆菌、沙门菌、粪肠球菌、单增李斯特菌等8种不同的革兰阴性和阳性菌具有良好的抑菌效果；与对照组相比，经蛋白酶K处理后细菌素粗提物对8种指示菌的抑菌效果均极显著下降(P＜0.01)；全基因组测序显示，贝莱斯芽孢杆菌CM7-4的基因组大小为3 953 124 bp，GC含量为47.04%；共预测到3 870个蛋白编码基因、9个rRNA、81个tRNA、1个ncRNA；基因组中含有11个与细菌素合成相关的基因、10个与抗氧化活性相关基因，以及4个与调控免疫和炎症信号通路相关的基因。【结论】 贝莱斯芽孢杆菌CM7-4是一株潜在的产细菌素菌株，为进一步研究其抗菌特性提供了理论基础。

【目的】 构建牛种布鲁氏菌(B.abortus)A19株效应蛋白BspE基因缺失株，探究其生长特性及在宿主细胞中的生存、黏附及入侵能力，并观察BspE蛋白的亚细胞定位情况。【方法】 以牛种布鲁氏菌A19为研究对象，运用同源重组及SacB反向筛选技术构建布鲁氏菌效应蛋白BspE基因缺失株A19ΔBspE，并通过质粒回补方法构建其回补株A19CΔBspE，比较3种菌株在体外的生长特性；通过平板计数方法分析BspE基因缺失对布鲁氏菌在细胞内的生存及黏附和入侵细胞能力的影响；通过间接免疫荧光试验检测BspE蛋白在RAW264.7细胞中的定位情况。【结果】 菌液PCR结果显示，获得大小为2 060 bp的特异性条带，成功构建BspE基因缺失株A19ΔBspE；Western blotting结果显示，获得大小约为14.59 ku的BspE-flag条带，成功构建回补株A19CΔBspE。生长曲线结果显示，在相同的培养条件下，A19ΔBspE与牛种布鲁氏菌A19、A19CΔBspE的生长趋势没有显著差异(P＞0.05)，均在8 h达对数生长期，32 h进入平台期。胞内增殖试验结果显示，在感染48 h内，A19ΔBspE在RAW264.7细胞中的生存能力与牛种布鲁氏菌A19、A19CΔBspE无显著差异(P＞0.05)。细菌黏附和入侵试验结果显示，A19ΔBspE黏附和入侵RAW264.7细胞的能力与牛种布鲁氏菌A19、A19CΔBspE没有显著差异(P＞0.05)。间接免疫荧光试验结果显示，BspE蛋白主要分布于核周区域。【结论】 本研究证实了BspE基因的缺失不影响布鲁氏菌在体外的生长及在RAW264.7细胞中的生存、黏附及入侵能力，且 BspE 蛋白主要定位在核周区域，为后续研究布鲁氏菌效应蛋白BspE的生物学功能和致病机制奠定基础。

【目的】 蛋壳颜色作为绿壳蛋的重要经济性状，不仅影响着消费者的购买偏好，还直接关系到绿壳蛋的市场定价，且绿壳蛋颜色的深浅受多个基因的协同调控。试验旨在挖掘调控绿壳蛋蛋壳颜色深浅的候选蛋白及其关键信号通路，为优化绿壳蛋鸡的选种选育和提升绿壳蛋的经济价值提供材料。【方法】 以纯系高产期的赤水乌骨鸡为研究对象，采用串联质谱标签(TMT)定量蛋白质组学技术分析产浅绿蛋(QL)和产深绿蛋(SL)的赤水乌骨鸡蛋壳腺组织中的差异表达蛋白，对其进行GO功能和KEGG通路富集分析，筛选调控绿壳蛋颜色深浅的候选蛋白并进行Western blotting验证。【结果】 共鉴定到5 958个可定量蛋白，包含差异表达蛋白102个，其中46个上调，56个下调。GO功能分析发现，差异表达蛋白在生物过程中主要富集于联受体信号通路、维生素A应答、对雌激素的反应等条目；分子功能主要富集于丝氨酸水解酶活性、碳水化合物跨膜转运蛋白活性、视黄醇结合等条目；细胞组分主要富集于蛋黄、胶原三聚体、血液微粒等条目。KEGG通路分析中显著富集到6条通路，其中类固醇激素生物合成通路可能通过影响蛋壳钙化过程来改变蛋壳颜色的形成。Western blotting结果显示，SL组赤水乌骨鸡蛋壳腺中HSD17B7和TXNRD2蛋白表达水平极显著高于QL组(P＜0.01)，表达趋势与蛋白组学研究结果一致。【结论】 差异表达蛋白中SLC22A15b、SLC35A、SLC2A1、SLC4A4、HSD17B7、TXNRD2的显著上调和KNG1的显著下调可能与蛋壳颜色的形成有关，研究结果可为阐明绿壳蛋色素沉着的分子机制提供参考。

【目的】 了解上海地区鸽Ⅰ型副黏病毒(PPMV-1)流行毒株F基因遗传变异情况，分析F蛋白生物信息学特征，为PPMV-1的防控提供技术支持。【方法】 应用RT-PCR方法扩增分离株F基因，测序并进行遗传进化分析，并通过生物信息学在线软件对F蛋白结构功能进行预测分析。【结果】 分离株F基因编码区全长为1 662 bp，编码553个氨基酸，F蛋白裂解位点序列为112R-R-Q-K-R-F117，符合强毒株序列结构特征。系统进化树分析结果显示，分离株属于新城疫病毒(NDV)Class Ⅱ群Ⅵ.2.1.1.2.2亚型，与疫苗株La Sota和Mukteswar处于不同进化分支，与国内分离株Pi/SH/CH/0617/2013和pigeon/Ningxia/2068/2016同属Ⅵ.2.1.1.2.2分支。生物信息学分析结果表明，F蛋白为亲水性蛋白，分子质量约为59.03 ku，理论等电点(PI)为7.87，半衰期为30 h，不稳定系数为35.06，脂肪系数为109.73。F蛋白主要分布在细胞质膜和内质网中，具有跨膜结构和信号肽，包含6个潜在的N-糖基化位点、13个半胱氨酸残基、103个O-糖基化位点，以及67个磷酸化位点。二级结构中α-螺旋、无规则卷曲、延伸链、β-转角分别占46.11%、31.46%、18.08%及4.34%，三级结构预测结果与二级结构相一致。B细胞抗原位点预测结果显示，F蛋白含有11个抗原表位(氨基酸数目≥7)。【结论】 本研究分离获得的PPMV-1分离株属于NDV Class Ⅱ群Ⅵ.2.1.1.2.2亚型，其F蛋白具有较好的抗原表位，可作为PPMV-1疫苗研制和抗病毒治疗的靶蛋白。研究结果为有效防控PPMV-1感染提供了一定的参考依据，同时也为进一步研发新型疫苗奠定了基础。

【目的】 了解大庆地区奶牛群体犊牛肠道病毒的种群组成及遗传变异情况，为犊牛腹泻病毒性病原的检测与防控技术研究提供理论依据。【方法】 于大庆周边奶牛场，采集155份犊牛粪便样品，随机分为6个腹泻样品池和3个临床无腹泻症状样品池。提取总核酸，基于Illumina测序平台进行高通量测序，利用SPAdes和SOAPdenovo进行序列拼接和组装，根据获得的序列分析病毒种群组成和遗传变异情况。【结果】 成功注释到21个病毒科的6 517 147条病毒相关序列，除噬菌体外，冠状病毒科丰度最高，小RNA病毒科次之。将腹泻样本的注释结果与临床无腹泻样本进行比较发现，无腹泻样本中的病毒种群多样性明显高于腹泻样本，细小病毒科、小RNA病毒科及呼肠孤病毒科在腹泻样本中的相对丰度高于无腹泻样本。本研究还注释到牛环曲病毒(BToV)、牛嵴病毒(BKV)和牛诺如病毒(BNoV)等多种新发犊牛腹泻病毒序列，且首次在黑龙江地区犊牛粪便中注释到牛纽布病毒(BNeV)。对组装到的牛轮状病毒(BRV)、牛冠状病毒(BCoV)和牛星状病毒(BoAstV)基因组进行遗传进化分析，结果表明，BRV流行基因型为G6、G10、P[5]和P[11]；组装到的1条BCoV全长基因组与中国流行毒株Coronavirus/Bo/BCoV6/2021/CHN亲缘关系最近；组装到的5条BoAstV均聚集在肠道组织嗜性毒株分支。【结论】 大庆地区犊牛肠道病毒种群中冠状病毒科丰度最高，腹泻组样本病毒种群多样性低于无腹泻组。粪便样本中注释到BToV、BKV和BNoV等多种致犊牛腹泻的病毒，首次在黑龙江犊牛粪便中注释到BNeV，分析了当地流行BRV、BCoV和BoAstV遗传进化特点，为当地犊牛腹泻病毒性病原检测提供理论依据。

【目的】 探究雄激素对和田羊皮肤结构的影响，了解神经酰胺合成酶4(ceramide synthases 4，CERS4)基因及蛋白在雄激素影响和田羊皮肤结构中发挥的作用。【方法】 选择15只2岁和田母羊随机分为5组，每隔3 d分别对对照组和试验1、2、3、4组和田羊肌肉注射0、1、2、3、4 mg/kg睾酮，共处理42 d，在第42天采集背部皮肤组织。采用对照组和田羊皮肤样品进行CERS4基因CDS区克隆和测序，构建和田羊CERS4蛋白氨基酸序列系统进化树，并分析和田羊CERS4蛋白的理化性质及蛋白质结构等。通过制作皮肤组织切片并进行马松染色，探究不同剂量睾酮处理和田羊后的皮肤结构变化；通过实时荧光定量PCR检测不同剂量睾酮处理后和田羊皮肤中CERS4基因表达水平，采用免疫组化技术观察CERS4蛋白在和田羊皮肤中的分布。【结果】 成功克隆和田羊CERS4基因CDS区，长度为1 182 bp，编码393个氨基酸。相似性分析表明，和田羊与绵羊的CERS4基因相似度最高。系统进化树分析结果显示，和田羊与绵羊在进化上属于同一分支，与人和小鼠的亲缘关系最远。生物信息学分析显示，和田羊CERS4蛋白为亲水性蛋白，无信号肽且可能有5个跨膜结构域。和田羊CERS4蛋白大部分位于内质网和细胞质膜中，而在高尔基体、细胞核和线粒体中含量最少。该蛋白与W5Q2R1_SHEEP、ACER3、SGMS1等蛋白相关性高达95%以上。经睾酮处理后和田羊皮脂腺数量和面积显著增加(P＜0.05)，并且睾酮处理组和田羊皮肤样品CERS4基因表达水平相比对照组均显著提高(P＜0.05)，CERS4蛋白主要在皮肤皮脂腺部位表达。【结论】 试验成功克隆了和田羊CERS4基因，雄激素处理促使和田羊皮脂腺面积增大、数量变多，并且显著提高皮肤CERS4基因的表达水平。本研究为深入了解雄激素影响绵羊皮脂腺增殖分化的作用及机制提供理论依据，同时对解决由雄激素引起的皮肤健康问题具有理论意义。

【目的】 试验旨在探究CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding protein alpha，CEBPA)基因在如皋黄鸡中的生物学特征、组织表达水平，并构建其表达载体。【方法】 对如皋黄鸡CEBPA基因CDS区进行克隆并测序，与其他物种进行相似性比对及系统进化树构建，通过生物信息学软件对如皋黄鸡CEBPA蛋白的理化性质、磷酸化位点、糖基化位点、功能结构域、互作蛋白及二级结构、三级结构进行预测。利用实时荧光定量PCR技术检测CEBPA基因在如皋黄鸡心脏、肝脏、肺脏、肾脏、十二指肠、空肠、腺胃、肌肉、睾丸中的表达情况。构建CEBPA基因过表达(OE-CEBPA)和干扰载体(CEBPA-sh12，CEBPA-sh167，CEBPA-sh727)，并检测各载体活性。【结果】 如皋黄鸡CEBPA基因CDS区序列全长975 bp，共编码324个氨基酸。相似性比对结果显示，如皋黄鸡与日本鹌鹑、鸿雁、野鸽、野鸭的CEBPA氨基酸序列相似性均＞94%，其中与日本鹌鹑的相似性最高，达99.4%；系统进化树结果表明，如皋黄鸡与日本鹌鹑的亲缘关系较近，与哺乳动物的亲缘关系较远。如皋黄鸡CEBPA蛋白为亲水不稳定蛋白，存在25个磷酸化位点，含9个N-糖基化位点和109个O-糖基化位点；CEBPA蛋白具有1个转录激活区和1个与DNA结合的亮氨酸拉链结构bZIP；如皋黄鸡CEBPA蛋白二级结构主要由193个无规则卷曲、93个α-螺旋、25个延伸链和13个β-转角组成，三级结构预测结果与二级结构基本一致；CEBPA蛋白主要与TRIB1、PPARG、RXRA、MAPK9、MAPK10、JUN、ESR1等蛋白互作。CEBPA基因在如皋黄鸡各组织中均有表达，其中以肝脏中表达量最高。成功构建CEBPA过表达载体和3个干扰载体，将它们分别转染至鸡成纤维细胞，与对照组相比，过表达组(OE-CEBPA)CEBPA基因表达量显著升高(P＜0.05)，干扰组(CEBPA-sh167)CEBPA基因表达量显著下降(P＜0.05)。【结论】 试验获得如皋黄鸡CEBPA基因完整CDS区并成功构建与筛选出具有过表达/干扰活性最佳的鸡CEBPA表达载体，该基因在如皋黄鸡各组织中广泛表达，其中以肝脏中相对表达量较高。结果为进一步研究鸡CEBPA的功能提供了参考依据。

【目的】 揭示双氢睾酮(dihydrotestosterone,DHT)和褪黑素(melatonin,MLT)在牦牛毛囊细胞中的互作效应，为阐明这两种激素在毛囊周期发育中的调控机制及其作为重要的信号分子在牦牛毛发性状选育中的应用提供依据。【方法】 以牦牛真皮毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)和表皮毛母质细胞(hair matrix cells,HMCs)为研究对象，利用噻唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度DHT(0、0.01、0.1、1、10、20、40、80 μmol/L)和MLT(0、250、500、600、750、1 000、1 500 pg/mL)对牦牛DPCs和HMCs增殖的影响；选择最佳浓度DHT和MLT联合处理HMCs，采用MTT法检测两种激素在牦牛HMCs中的互作效应，利用EdU进一步验证试验结果。利用实时荧光定量PCR检测DHT和MLT联合处理后细胞增殖及毛囊发育相关基因的表达情况，分析DHT和MLT可能的作用机制。【结果】 与对照组(0 μmol/L)相比，10～40 μmol/L DHT可显著或极显著促进DPCs增殖(P＜0.05；P＜0.01)，40～80 μmol/L DHT可极显著促进HMCs增殖(P＜0.01)，其中40 μmol/L DHT为促进DPCs和HMCs增殖的最佳浓度，此外，低浓度DHT(1 μmol/L)可极显著抑制HMCs增殖(P＜0.01)。与对照组(0 pg/mL)相比，500 pg/mL MLT对DPCs的促增殖作用最为明显(P＜0.01)，而不同浓度MLT对HMCs增殖均无明显作用(P＞0.05)。使用40 μmol/L DHT和500 pg/mL MLT联合处理HMCs 72 h，与DHT组相比，DHT+MLT联合处理对HMCs的促增殖作用极显著降低(P＜0.01)。实时荧光定量PCR结果显示，与对照组相比，DHT处理HMCs后极显著或显著改变了与毛囊发育相关基因LEF1、SFRP1、TGFB2和BCL2的表达量(P＜0.01；P＜0.05)，提示DHT可能通过影响这些基因的表达参与调控毛囊的发育过程。【结论】 牦牛DPCs和HMCs对DHT和MLT作用的敏感性不同，一定浓度的DHT均可显著促进DPCs和HMCs的增殖，低浓度DHT具有抑制HMCs增殖的趋势。500 pg/mL MLT是促进DPCs增殖的最佳浓度，不同浓度MLT对HMCs增殖均无明显作用。在HMCs中，MLT具有抗DHT作用的功能。

肠上皮细胞紧密连接作为肠道屏障的重要组成部分，不仅决定肠道的细胞旁通透性，还在维护肠道内环境稳定、防止有害物质侵入等方面发挥重要作用。当紧密连接的结构或功能受损时，肠道屏障的完整性遭到破坏，导致细胞旁通透性显著增加，细菌、内毒素、病毒及大分子物质便可通过细胞旁路途径进入组织和器官，从而引起肠道疾病发生。但是不同分子通过肠道紧密连接的途径也不同，目前证明主要有两种细胞旁路途径，即孔隙途径和渗漏途径。这两种途径在分子大小、通透性及调控机制方面有所不同，孔隙途径主要涉及小分子物质通过，通过调节紧密连接蛋白Claudin-2的表达影响孔隙途径通透性，进而影响肠道屏障功能；而渗漏途径主要涉及大分子物质通过，Occludin、Tricellulin、ZO-1等紧密连接蛋白在这一途径中发挥关键作用，以维护肠道屏障的完整性。笔者以影响孔隙途径和渗漏途径通透性的相关蛋白为出发点，阐明这些蛋白影响孔隙途径和渗漏途径通透性的调控机制，从而防止有毒有害物质进入体内，以期为肠上皮紧密连接屏障破坏引起肠道疾病的防治提供理论依据。

奶牛乳腺炎、酮病和脂肪肝都是奶牛的常见疾病，不仅严重危害了奶牛健康，还给奶牛业带来了巨大的经济损失。自噬是发生在真核生命中高度保守性的生命过程，能清除细胞内有害物质，保证内环境稳态，对生物体健康的维系具有重要意义。自噬激活的途径多种多样，既包括腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase，AMPK)和雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)等信号通路介导的溶酶体自噬，还包括由PTEN诱导的激酶1(PTEN-induced kinase 1，PINK1)/Parkin RBR E3泛素蛋白连接酶(Parkin RBR E3 ubiquitin protein ligase，PARK2)途径介导的线粒体自噬，此外，自噬的激活还与多种营养物质的调控有关，如植物提取物、氨基酸和维生素等。笔者阐述了自噬在奶牛乳腺炎、酮病和脂肪肝等常见疾病中通过线粒体或溶酶体途径发生反应并缓解上述疾病所造成负面影响的发生机制及研究进展，以期为奶牛生产中常见疾病的临床干预提供科学依据。

【目的】 本试验通过对比4种光源下北京油鸡的生长性能、屠宰性能、性发育相关指标，探究北京油鸡养殖过程中的最优光源。【方法】 试验选取体重相近的1日龄商品代北京油鸡公雏720只，随机分配到白炽灯、荧光灯、暖白LED灯和冷白LED灯4个光照处理组中，每个处理组5个重复，每个重复36只鸡。分别在第4、8和13周龄末时，以重复为单位测定生产性能；从每个重复中随机挑选1只鸡进行性激素相关指标测定。13周龄末，从每个重复中选取接近各重复平均体重的3只鸡测定屠宰性能和性器官指数。【结果】 在整个生长阶段，白炽灯组和冷白LED灯组北京油鸡采食量显著高于荧光灯组和暖白LED灯组(P＜0.05)，暖白LED灯组料重比显著低于冷白LED灯组和荧光灯组(P＜0.05)，白炽灯组料重比最高且显著高于其他3组(P＜0.05)。4种光源对北京油鸡屠宰性能没有显著影响(P＞0.05)。在性发育方面，白炽灯组和冷白LED灯组北京油鸡睾酮的分泌显著高于荧光灯组(P＜0.05)，暖白LED灯组处于中等水平；白炽灯组、冷白LED灯组和暖白LED灯组北京油鸡褪黑素的分泌显著高于荧光灯组(P＜0.05)。4种光源间公鸡的睾丸指数和鸡冠厚度无显著差异(P＞0.05)；暖白LED灯组和荧光灯组鸡冠长度显著大于白炽灯组(P＜0.05)，冷白LED灯组处于中等水平；与之类似，鸡冠高度以暖白LED灯组最高且显著大于白炽灯组(P＜0.05)，荧光灯组和冷白LED灯组处于中等水平。【结论】 在北京油鸡的养殖过程中，采用LED灯作为光照系统可以显著提高北京油鸡的生长性能，而且LED灯还可以促进性发育相关激素的分泌，间接促进性发育。

【目的】 研究在低磷饲粮中添加不同剂量植酸酶对28～70日龄鹅生长性能、血浆生化指标、屠宰性能和粪中氮、磷含量的影响。【方法】 选取28日龄四川白鹅母鹅200只，随机分为5组，每组5个重复，每个重复8只鹅。正对照组(PC组)饲喂总磷含量为0.7%(有效磷为0.35%)的常规饲粮；负对照组(NC组)饲喂总磷含量为0.5%(有效磷为0.15%)的低磷饲粮；试验组饲喂在NC组的基础上分别添加1 000(NC1000)、2 000(NC2000)和4 000 IU/kg(NC4000)植酸酶的饲粮，试验期42 d。以重复为单位记录各组试验鹅采食量、初始体重和终末体重，计算平均日增重、平均日采食量和料重比；70日龄时，从每重复选取2只鹅翅静脉采血，测定血浆生化指标；从每重复选取与该重复平均体重接近的1只鹅屠宰，测定屠宰性能；从每重复选取2只接近平均体重的鹅收集新鲜粪样，测定粪中总氮、总磷含量。【结果】 ①PC、NC1000、NC2000、NC4000组鹅终末体重、平均日增重和平均日采食量均显著高于NC组(P＜0.05)，各组间料重比无显著差异(P＞0.05)。②PC、NC1000、NC2000、NC4000组鹅血浆磷含量均显著高于NC组(P＜0.05)，NC2000和NC4000组鹅血浆碱性磷酸酶活性均显著低于NC和NC1000组(P＜0.05)，低磷饲粮中添加植酸酶对鹅血浆总蛋白、白蛋白、球蛋白、葡萄糖、甘油三酯、总胆固醇、钙含量和乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性均无显著影响(P＞0.05)。③PC、NC1000、NC2000、NC4000组鹅屠宰率和半净膛率均显著高于NC组(P＜0.05)，植酸酶对鹅全净膛率、胸肌率、腿肌率、瘦肉率、皮脂率、腹脂率、肠道重量和长度均无显著影响(P＞0.05)。④植酸酶对鹅粪中总氮含量无显著影响(P＞0.05)，NC、NC1000、NC2000、NC4000组鹅粪总磷含量显著低于PC组(P＜0.05)。【结论】 低磷饲粮中添加植酸酶可改善28～70日龄鹅生长性能和屠宰性能，降低磷排放。在本试验条件下，在总磷含量为0.5%的低磷饲粮中添加1 000 IU/kg植酸酶较为适宜。

【目的】 研究用5%发酵豆粕等量替代基础饲粮中豆粕对产蛋后期蛋鸡生产性能、抗氧化能力、肠道组织形态及肠道菌群多样性的影响。【方法】 选用330日龄农大三号蛋鸡，对照组9 000只，试验组6 800只。对照组蛋鸡饲喂基础饲粮，试验组蛋鸡饲喂用5%发酵豆粕等量替代基础饲粮中豆粕的试验饲粮，试验期42 d。试验期间记录产蛋数、异常蛋数、死淘鸡数及采食量；于试验第21、42天，每组随机测定100枚鸡蛋的蛋品质，检测12只鸡的血清生化、免疫及抗氧化指标；于试验第42天，每组随机屠宰12只蛋鸡，取十二指肠和空肠肠段分析肠道组织形态变化，分离盲肠内容物测定肠道菌群多样性。【结果】 与对照组相比，第21天时，试验组蛋鸡料蛋比显著增加(P＜0.05)，蛋黄颜色显著变浅(P＜0.05)，血清AST活性显著提高(P＜0.05)，其他指标差异不显著(P＞0.05)；第42天时，试验组蛋鸡料蛋比、蛋黄颜色和血清AST活性均无显著变化(P＞0.05)，而异常蛋率和产蛋率均显著降低(P＜0.05)，蛋壳强度、蛋重和蛋白高度均显著提高(P＜0.05)，血清总抗氧化能力(T-AOC)显著提升(P＜0.05),蛋鸡肠道菌群中Cryptobacteroides属的相对丰度显著降低(P＜0.05)。【结论】 用5%发酵豆粕等量替代基础饲粮中的豆粕能够显著提高产蛋后期蛋鸡的生产性能和蛋品质，增强其抗氧化能力，对蛋鸡肠道菌群结构有一定影响。

赭曲霉毒素A(OTA)是霉菌毒素的一种，污染范围极广，广泛存在于玉米、小麦等饲料原料中。OTA被动物从肠胃吸收后，通过动物体内循环系统对畜禽造成肾脏毒性、肝脏毒性、肠道毒性、免疫毒性和致癌致畸性等，进而对畜禽的健康和养殖生产造成严重的危害。因此，研究如何缓解OTA的毒性作用及缓解策略显得尤为重要。生物缓解策略主要包括酵母菌和芽孢杆菌等微生物缓解措施及酶降解措施。除生物缓解之外，营养缓解措施包括植物提取物、维生素、微量元素、氨基酸等，对OTA毒性也具有良好的缓解作用。作者就OTA对畜禽的毒性作用进行了总结，并重点综述了缓解OTA毒性作用的生物和营养缓解策略的研究进展，以期为缓解霉菌毒素对畜禽健康养殖的危害进而促进畜禽高质量发展提供参考。

【目的】 研究白酒糟饲粮中添加复合酶制剂对肉鸭生长性能、肉品质、肠道发育、血液指标及营养物质表观利用率的影响。【方法】 选取1日龄健康、体重接近的雄性北京鸭144只，随机分成3组，每组6个重复，每个重复8只。对照组鸭饲喂玉米-豆粕型基础饲粮，白酒糟组鸭饲喂添加18％白酒糟的饲粮，复合酶制剂组鸭饲喂在白酒糟组基础上添加复合酶制剂500 mg/kg的饲粮。试验期分为1~14和15~35 d两个饲喂阶段。试验结束后，以重复为单位，采集血液、胸肌、排泄物和各段小肠，测定胸肌肉品质、血液指标以及营养物质表观利用率。【结果】 ①与对照组相比，白酒糟组和复合酶制剂组肉鸭14 d体重、1～14 d ADG显著降低，1～14 d F/G显著升高(P＜0.05)，且复合酶制剂组肉鸭1～14 d F/G显著低于白酒糟组(P＜0.05)。与对照组相比，白酒糟组和复合酶制剂组肉鸭15～35 d和1～35 d ADFI、F/G均显著增加(P＜0.05)，且复合酶制剂组肉鸭1～35 d ADFI、F/G显著低于白酒糟组(P＜0.05)。②与对照组相比，复合酶制剂组肉鸭胸肌率显著降低(P＜0.05)，白酒糟组及复合酶制剂组肉鸭腹脂率显著升高(P＜0.05)，白酒糟组和复合酶制剂肉鸭胰腺指数以及复合酶制剂组肉鸭肌胃指数均显著升高(P＜0.05)。③与对照组相比，白酒糟组及复合酶制剂组肉鸭十二指肠和空肠相对重量显著升高(P＜0.05)。④与对照组相比，白酒糟组和复合酶制剂组肉鸭能量利用率均显著降低(P＜0.05)；与白酒糟组相比，复合酶制剂组肉鸭粗蛋白质利用率和能量利用率均显著升高(P＜0.05)。⑤与对照组相比，白酒糟组肉鸭胸肌pH_{24 h}、滴水损失以及复合酶制剂组肉鸭胸肌pH_{24 h}均显著升高(P＜0.05)，且复合酶制剂组肉鸭胸肌pH_{24 h}显著高于白酒糟组，滴水损失显著低于白酒糟组(P＜0.05)；与对照组相比，2个试验组pH_{45 min}均显著降低(P＜0.05)。⑥各组间肉鸭血常规指标均无显著性差异(P＞0.05)。与对照组相比，白酒糟组肉鸭血浆AST和LDH活性、AST/ALT、ALB、UA含量均显著降低(P＜0.05)，复合酶制剂组肉鸭AST/ALT显著降低(P＜0.05)；与白酒糟组相比，复合酶制剂组肉鸭血浆GLU、TP、GLB和UA含量均显著升高(P＜0.05)。【结论】 在本试验条件下，使用18%白酒糟替代玉米豆粕饲喂肉鸭时，添加复合酶制剂可以降低料重比，提高养分利用率。

随着现代信息技术的快速发展，近红外光谱技术(near-infrared reflectance spectroscopy，NIRS)凭借检测时能够保持样本完整性和多组分快速分析的特点被广泛应用于农业领域。当波长范围在800～2 500 nm时，NIRS依靠含氢官能团振动的倍频与合频吸收特定频率的光，从而产生表明分子组成的泛音与组合振动，形成光谱数据，然后对光谱数据进行处理，得到样本的定性与定量特征。在动物生产中，饲料的营养价值评定和动物性产品品质分析至关重要。NIRS与动物生产相结合，有利于饲料常规养分快速检测，确保动物体营养均衡，同时对动物产品品质进行把控，满足市场需求。作者介绍了NIRS的发展历程和应用原理，重点综述了NIRS在动物生产中的应用和效果评价，以期为NIRS在动物生产中的应用提供参考。

【目的】 本试验旨在探究饲粮中添加不同水平葡萄籽原花青素(grape seed procyanidins,GSPs)对肉牛生长性能、表观消化率、血清生化指标和瘤胃内环境的影响。【方法】 选取20头健康状况良好、体重在400 kg左右的12月龄西门塔尔公牛，随机分为4组，每组5个重复，每个重复1头牛。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮中添加20(20 GSPs组)、40(40 GSPs组)和80 mg/kg(80 GSPs组)GSPs，预饲期15 d，试验期55 d。测定每头牛的初始体重、终末体重，记算平均日采食量和料重比；试验结束前3 d,采用全收粪法测定养分消化率；试验结束后，每头牛采集15 mL血液和50 mL瘤胃液,用于测定血清生化指标、瘤胃发酵参数及瘤胃16S rRNA基因序列。【结果】 与对照组相比，①20 GSPs和40 GSPs组西门塔尔牛的终末体重显著提高(P＜0.05)；40 GSPs组西门塔尔牛的干物质表观消化率、中性洗涤纤维表观消化率显著增加(P＜0.05)；20 GSPs和40 GSPs组的粗蛋白质表观消化率显著增加(P＜0.05)。②40 GSPs组西门塔尔牛血清天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶活性显著降低(P＜0.05)；添加GSPs各组西门塔尔牛血清尿素氮含量均显著降低(P＜0.05)。③40 GSPs组西门塔尔牛血清总抗氧化能力显著提高(P＜0.05)；40 GSPs和80 GSPs组血清谷胱甘肽过氧化物酶活性显著升高(P＜0.05)。④80 GSPs组西门塔尔牛血清免疫球蛋白G和补体3水平显著增加(P＜0.05)；40 GSPs组血清补体3和补体4水平显著升高(P＜0.05)，而白细胞介素-6含量显著降低(P＜0.05)，80 GSPs组血清肿瘤坏死因子含量显著降低(P＜0.05)。⑤40 GSPs、80 GSPs组西门塔尔牛瘤胃液中丙酸含量显著升高(P＜0.05)；20 GSPs组瘤胃细菌Chao1指数显著提高(P＜0.05)；20 GSPs组瘤胃螺旋菌门(Spirochaetes)和梭菌属(Clostridium)的相对丰度显著增加(P＜0.05)；80 GSPs组瘤胃纤维杆菌门(Fibrobacteres)、放线菌门(Actinobacteria)和螺旋菌门(Spirochaetes)相对丰度显著增加(P＜0.05)；40 GSPs和80 GSPs组瘤胃琥珀酸菌属(Succiniclasticum)相对丰度显著下降(P＜0.05)。【结论】 饲料中添加40 mg/kg GSPs提高了西门塔尔牛的终末体重、血清免疫和抗氧化水平及瘤胃细菌多样性，改善了瘤胃菌群组成。

【目的】 研究饲粮中添加益生菌和酸制剂对断奶仔猪生长性能和肠道菌群的影响。【方法】 选取同批次、健康状况良好、体重相近的健康断奶仔猪120头，随机分为3组，每组5个重复，每个重复8头。A组为对照组，正常饲喂基础饲粮；B组在基础饲粮基础上添加酸制剂1 g/kg；C组在基础饲粮基础上添加益生菌2 g/kg，试验周期30 d。【结果】 ①与A组相比，B、C组仔猪末重、平均日采食量(ADFI)和平均日增重(ADG)均极显著提高(P＜0.01)，C组仔猪料重比(F/G)显著降低(P＜0.05)。②基于16S rDNA测序分析肠道菌群多样性分析显示，Alpha多样性在3组间差异不显著，但Beta多样性中，A组仔猪肠道微生物群落结构与B、C组间存在显著差异。在粪便微生物组成上，3组仔猪肠道优势菌门主要是厚壁菌门和拟杆菌门，各组不同菌门之间的相对丰度有不同的变化趋势，其中与A组相比，B组仔猪肠道拟杆菌门的相对丰度极显著升高(P<0.01)，而B和C组螺旋体菌门相对丰度显著降低(P＜0.05)。与A组相比，B、C组仔猪肠道普雷沃菌属的相对丰度显著或极显著升高(P＜0.05;P＜0.01)，而密螺旋体属和SMB53菌属的相对丰度显著或极显著降低(P＜0.05；P＜0.01)。C组仔猪肠道栖粪杆菌属和罗斯拜瑞氏菌属的相对丰度相较于A组显著或极显著升高(P＜0.05；P＜0.01)，而B组仔猪肠道颤螺菌属的相对丰度相较于A组显著降低(P＜0.05)。③组间菌群KEGG代谢通路功能分析显示，与A组相比，B、C组中视黄醇代谢(ko00830)、泛醌和其他萜类-醌生物合成(ko00130)通路显著上调(P＜0.05)，C组中甲苯降解(ko00623)和鞘脂代谢(ko00600)也出现极显著上调(P＜0.01)。与B组相比，C组氯代烷烃与氯代烯烃降解(ko00625)出现显著上调(P＜0.05)。【结论】 饲粮中添加2 g/kg益生菌或1 g/kg酸制剂均能提高断奶仔猪生长性能，可能与添加益生菌和酸化剂调节肠道菌群密切相关，其中添加益生菌的效果优于添加酸制剂。

【目的】 研究补饲中草药、活性干酵母制剂对哺乳犊牛腹泻率及肠道菌群多样性的影响，为探究中草药和活性干酵母制剂在哺乳犊牛肠道健康的作用机理提供理论依据。【方法】 选取体重、月龄相近且体况良好的延边黄牛哺乳犊牛24头，采用完全随机设计方法随机分成3组，每组8头犊牛(公5头、母3头)，对照组(Ⅰ组)饲喂基础饲粮，中草药组(Ⅱ组)在基础饲粮中添加0.5%的中草药制剂，酵母组(Ⅲ组)在基础饲粮中添加1 g/d的拉曼活性干酵母。饲养试验为期31 d，其中预试期10 d，正式试验期为21 d。在饲养试验结束当天晨饲前，采用棉拭子无菌采集该牧场犊牛直肠中新鲜粪便样品，于―80 ℃保存待测，采集的犊牛直肠中的粪便进行测序，比较Ⅱ、Ⅲ组与Ⅰ组在菌群多样性方面存在的差异。【结果】 ①与Ⅰ组相比，Ⅱ和Ⅲ组犊牛的平均日增重(ADG)显著提高(P＜0.05)，料重比(F/G)、腹泻率和粪便评分显著降低(P＜0.05)；②在瘤胃菌群多样性方面，与Ⅰ组相比，2个处理组的Alpha多样性指数(ACE、Chao1、Coverage、Shannon和Simpson)均无显著差异(P＞0.05)；③瘤胃菌群分布方面，在门水平上，两个处理组中优势菌门均为厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)；在属水平上，两个处理组中优势菌属为瘤胃球菌科UCG-005(Ruminococcaceae_UCG-005)、理研菌科RC9肠群(Rikenellaceae_RC9_gut_group)、产粪甾醇真细菌群([Eubacterium]_coprostanoligenes_group)。其中，与Ⅰ组相比，Ⅱ和Ⅲ组理研菌科RC9肠群的相对丰度显著升高(P＜0.05)，其他菌群在门水平和属水平上的相对丰度差异不显著(P＞0.05)。【结论】 补饲0.5%中草药饲料添加剂或1 g/d活性干酵母制剂均可在不同程度上减少哺乳犊牛腹泻症状，而且改善肠道菌群多样性，促进其肠道健康发育。

脂肪组织是动物机体的能量储存站，也是重要的内分泌器官。脂肪过度沉积造成的肥胖会带来一系列的代谢性疾病，如脂肪肝、心血管疾病、胰岛素抵抗等。同样地，猪脂肪的生成影响着猪的抗病力、繁殖性能、肉品质、生产效率等性状，这些性状影响着生猪生产的经济效益。成熟的脂肪细胞是由间充质干细胞经前脂肪细胞分化得到的，这个过程中有许多信号通路和转录因子参与，而自噬通常是分解代谢机体中冗余成分最主要的手段，参与维持着机体内稳态。自噬和脂肪生成之间有密切的联系，通常脂肪生成活跃时伴随着自噬水平的升高；而自噬过程受损也伴随着脂肪生成的抑制。在自噬活动中，有许多相关的转录因子和信号通路也参与调控猪脂肪的生成；而在猪脂肪生成的过程中，许多转录调控因子也与自噬关系密切。作者通过总结最新报道的与自噬调控脂肪生成相关的转录因子和信号通路，阐述自噬参与猪脂肪生成调控的研究进展，为猪营养调控和肉质育种提供了全新的思路和靶点。

【目的】 探究二元杂交绵羊萨湖羊、南湖羊与湖羊的肉质特性，为“中环肉羊”新品种的培育和优质羊肉产品开发提供基础数据与理论支撑。【方法】 选取以湖羊为母本，采用白萨福克羊(Suffolk)、南丘羊(Southdown)冷冻精液通过腹腔镜人工授精配种所得萨湖羊、南湖羊各5只，以5只纯种湖羊为对照组，经屠宰采集背最长肌、股二头肌、臂三头肌肉样比较分析萨湖羊、南湖羊和湖羊F1代的屠宰性能和肉品质。【结果】 南湖羊、萨湖羊宰前活重和胴体重较湖羊分别提高了19.92%、12.90%和24.20%、15.55%，且南湖羊和湖羊间存在显著差异(P＜0.05)。南湖羊脂肪和能量水平显著低于湖羊(P＜0.05)，灰分和水分含量显著高于萨湖羊和湖羊(P＜0.05)；萨湖羊碳水化合物含量极显著高于南湖羊和湖羊(P＜0.01)；钾、磷、镁、锌含量均在南湖羊中最高，钠含量在萨湖羊中最高，烟酸含量在湖羊中最高。脂肪酸和氨基酸的组成种类相同，且总脂肪酸含量在南湖羊中最高，极显著高于萨湖羊和湖羊(P＜0.01)。南湖羊饱和脂肪酸(SFA)含量显著高于湖羊(P＜0.05)，单不饱和脂肪酸(MUFA)含量极显著高于湖羊和萨湖羊(P＜0.01)，多不饱和脂肪酸(PUFA)含量极显著高于萨湖羊(P＜0.01)。必需氨基酸(EAA)含量由大到小依次为南湖羊＞萨湖羊＞湖羊，且湖羊中EAA含量极显著低于南湖羊和萨湖羊(P＜0.01)。这3组羊肉中检测到EAA/总氨基酸(TAA)为38.95%～39.65%，EAA/非必需氨基酸(NEAA)为63.79%～65.70%。除缬氨酸和蛋氨酸+胱氨酸外，其他氨基酸评分均高于FAO/WHO的推荐值。【结论】 南湖羊、萨湖羊F1代生长速度快，屠宰性能好，肌肉中的氨基酸、脂肪酸和主要几种矿物质含量丰富，较符合高蛋白低脂肪的特性，更符合人们对肉质品的需求，可以在当地大规模推广。

随着智慧畜牧研究的深入和高通量组学平台的发展，动物育种逐渐进入大数据时代的“育种3.0”，而机器学习是大数据研究不可或缺的有效手段。机器学习亦称计算机自动获取知识，是一门多领域交叉学科，涉及概率论、统计学等多门学科，作为人工智能和数据挖掘中的热门算法之一，具有学习能力强、准确率高和泛化能力强等优势，已经成为生物信息分析领域处理大型数据和进行预测的重要工具。目前广泛用于基因组、转录组、蛋白组、代谢组等多组学数据的整合与分析，尤其在家畜基因组估计育种值(genomic estimated breeding value,GEBV)的计算、基因型数据的填充和蛋白质结构及功能的预测等方面取得重要突破。作者介绍了几种常见的机器学习算法的概念和原理,对机器学习算法在重要家畜(猪、牛、羊)遗传育种方面取得的重要研究成果进行综述,进一步讨论了各种机器学习算法的优缺点、以及应用在动物遗传育种中存在的一些问题。最后,对机器学习的未来发展进行了归纳及展望,旨在提高预测准确性及效率，加快种群遗传进展，快速实现精准育种。

【目的】 了解大宝鸽和石岐鸽二元杂交鸽的繁殖性能和杂交后代的生产性能，为后续建立高生产性能配套系提供完善的数据支撑。【方法】 试验设立了正交组(大宝鸽公鸽×石岐鸽母鸽，子代为DS鸽)和反交组(石岐鸽公鸽×大宝鸽母鸽，子代为SD鸽)，测量分析种鸽繁殖性能，杂交子代0～28日龄的生长性能，28日龄乳鸽屠宰性能、肉品质及胸肌中的常规营养成分、氨基酸及脂肪酸含量，以及乳鸽血清生化指标。【结果】 DS鸽种鸽的受精率和孵化率显著高于SD鸽种鸽(P＜0.05)。SD鸽14日龄体重显著高于DS鸽(P＜0.05)，屠宰率、半净膛率和全净膛率显著低于DS鸽(P＜0.05)，pH_{45 min}显著高于DS鸽(P＜0.05)，肉色a^*值和滴水损失均显著低于DS鸽(P＜0.05)。SD鸽与DS鸽相比胸肌肌纤维直径较小、胸肌肌纤维总数更多，且胸肌肌纤维密度较大(P＜0.05)。SD鸽血清中总蛋白和甘油三酯水平显著低于DS鸽(P＜0.05)，血糖水平和总抗氧化能力显著高于DS鸽(P＜0.05)。【结论】 DS鸽和SD鸽具备优秀的生产性能和屠宰性状，以及良好的肉质特征。研究结果为肉鸽高产配套系的培育提供了理论依据和数据支撑。

【目的】 探究绞股蓝多糖(Gynostemma penttaphyllum polysaccharides，GPP)对过氧化氢(H₂O₂)损伤小鼠卵母细胞及线粒体的保护作用。【方法】 用H₂O₂构建小鼠卵母细胞体外成熟氧化应激模型，并对GPP添加浓度进行筛选。将收集的小鼠MⅡ期卵母细胞随机分为空白对照组、H₂O₂组(在成熟培养液中添加H₂O₂)和H₂O₂+GPP组(在含H₂O₂的成熟培养液中添加GPP)。体外受精后统计卵母细胞的卵裂率、4-细胞率、8-细胞率、桑椹胚率和囊胚率；利用线粒体红色荧光探针(Mito Tracker Red CMXRos)检测小鼠卵母细胞线粒体分布及含量，采用Jc-1线粒体膜电位检测试剂盒检测线粒体膜电位，利用ATP检测试剂盒检测线粒体ATP含量，通过免疫荧光染色观察小鼠卵母细胞纺锤体形态和染色体分布。【结果】 H₂O₂+GPP组卵母细胞的卵裂率、4-细胞率、8-细胞率、桑椹胚率、囊胚率、线粒体含量、线粒体膜电位和ATP含量均显著高于H₂O₂组(P＜0.05)，纺锤体异常率和染色体异常率均显著低于H₂O₂组(P＜0.05)，与对照组间差异均不显著(P＞0.05)。【结论】 GPP可提高H₂O₂损伤小鼠卵母细胞体外受精的卵裂率和囊胚率，增加卵母细胞内线粒体含量、线粒体正常分布、线粒体膜电位、ATP含量，降低纺锤体形态异常、染色体形态异常和排列紊乱，从而减少线粒体的功能障碍。

【目的】 研究黄淮肉羊胰岛素样生长因子1(insulin like growth factor 1,IGF1)基因序列特征、组织表达规律，并对背最长肌中IGF1基因的表达量与产肉性状进行相关性分析。【方法】 选取3、9、18月龄的黄淮肉羊公羊各3只，屠宰后迅速采集半腱肌、股四头肌、臂三头肌、背最长肌、皮下脂肪、瘤胃、肾脏、脾脏、肝脏、睾丸和小肠组织样品并测定其产肉性能。对黄淮肉羊IGF1基因进行克隆测序，并进行生物信息学分析，利用实时荧光定量PCR技术检测其在黄淮肉羊同一年龄(9月龄)各组织以及不同年龄阶段(3、9、18月龄)背最长肌中的mRNA水平，利用皮尔逊相关系数分析IGF1基因的表达量与产肉性状的相关性。【结果】 克隆获得黄淮肉羊IGF1基因CDS序列465 bp，编码154个氨基酸，与山羊的亲缘关系最近。黄淮肉羊IGF1蛋白为亲水性不稳定蛋白，无跨膜结构，存在信号肽，有29个潜在的磷酸化位点。黄淮肉羊IGF1蛋白二级结构主要含有无规则卷曲(54.55%)和α-螺旋(29.87%)，三级结构预测结果与二级结构一致。IGF1蛋白与IGF1R、IGFBP3、IGF2等存在蛋白互作关系。实时荧光定量PCR结果显示，IGF1基因在黄淮肉羊各组织中均有表达，在肝脏组织中表达量最高，在臂三头肌中表达量最低。IGF1基因在3月龄黄淮肉羊背最长肌中表达量最高，显著高于9和18月龄(P＜0.05)，而9月龄的表达量又显著低于18月龄(P＜0.05)。相关性分析结果表明，IGF1基因表达量与生长发育和肉品质指标无显著相关(P＞0.05)；体高、体长、胸围、管围、体重和胴体重之间呈显著或极显著正相关(P＜0.05；P＜0.01)；屠宰率、肉色、大理石纹、眼肌面积之间呈显著或极显著正相关(P＜0.05；P＜0.01)。【结论】 本研究成功克隆了黄淮肉羊IGF1基因CDS区序列，IGF1蛋白属于亲水不稳定碱性蛋白，主要在肝脏中表达，在背最长肌中的表达趋势表现为随着月龄增长先降后升，与生长发育和肉品质指标无显著相关性。这些结果为进一步探究黄淮肉羊IGF1基因在肌肉发育与肉品质调控中的作用提供参考。

【目的】 筛选影响哈萨克马泌乳量的基因，为选育乳用型哈萨克马提供数据支撑。【方法】 采集12匹泌乳高峰期哈萨克马血样进行转录组测序，对测序数据质控后筛选差异表达基因(differentially expressed gene，DEG)，对其进行GO功能和KEGG通路富集分析，绘制富集通路桑基气泡图，筛选与哈萨克马泌乳量相关的基因，并构建基因互作网络。随机选择6个DEGs进行实时荧光定量PCR检测，验证转录组数据的准确性。【结果】 在哈萨克马高、低泌乳量组中共鉴定出286个DEGs，其中上调基因198个，下调基因98个。GO功能分析共富集到27个条目，包括细胞结构、细胞酶活性及物质运输等；KEGG通路分析共富集到13条通路，包括细胞自噬、增殖、迁移相关细胞过程，以及神经信号传导、激素分泌、蛋白质代谢、环境适应及免疫疾病。通过STRING程序构建了1个由95个DEGs组成的基因互作调控网络，并筛选出了10个与泌乳量相关的Hub DEGs。实时荧光定量PCR结果表明，6个基因在哈萨克马高、低泌乳量组变化趋势与转录组测序结果基本一致。【结论】 本研究筛选出KCNN4、CAMK2B、CACNA1D、CACNA1E、GRIA4等基因与泌乳高峰期哈萨克马泌乳量有关，这些基因可能通过复杂的互作机制参与跨膜运输、离子通道、胰岛素和皮质醇分泌、ErbB等信号通路来调控哈萨克马泌乳。

【目的】 探究浏阳、信阳两地区长角血蜱的单倍型多样性(Hd)、遗传分化及种群扩张状况，为后续长角血蜱的种群遗传结构研究提供数据支撑和理论依据。【方法】 试验以采集于两地区的30只长角血蜱为样品，对其线粒体cox1、nad5基因进行PCR扩增及测序，运用Clustal X、Dnasp 5.0和Network 4.6软件对两地区长角血蜱的单倍型多样性进行分析；运用Dnasp 5.0和Arlequin version 3.0软件探究两地区长角血蜱的遗传分化及种群扩张状况。【结果】 长角血蜱cox1基因序列(776 bp)中共存在4个碱基突变位点，含5个单倍型(A1～A5，Hd=0.3609)，其基因分化系数(Gst)、遗传分化系数(Fst)、基因流(Nm)分别为―0.0154、―0.019和―26.82；长角血蜱nad5基因序列(519 bp)中共存在33个碱基突变位点，含17个单倍型(B1～B17，Hd=0.9402)，Gst、Fst、Nm分别为0.0316、0.0503和9.44；长角血蜱cox1+nad5基因序列(1 295 bp)中共存在37个碱基突变位点，含20个单倍型(C1～C20，Hd=0.9563)，Gst、Fst、Nm分别为0.0184、0.0451和10.59。表明两地区的长角血蜱之间尚未出现遗传分化。cox1、nad5及cox1+nad5基因的种群扩张分析结果显示，来自于浏阳、信阳两地区的长角血蜱均经历了多次种群扩张事件。【结论】 来自于浏阳、信阳两地区的长角血蜱之间虽存在低水平的遗传变异和单倍型多样性，但它们之间却存在较高频率的基因交流，无明显的遗传分化，且浏阳、信阳两地区的长角血蜱经历了多次种群扩张事件。

【目的】 探究龙陵黄山羊不同杂交组合的屠宰性能及肉品质，筛选理想的杂交组合，为开发利用龙陵黄山羊品种资源提供科学依据。【方法】 试验选择6月龄龙陵黄山羊、波尔山羊×龙陵黄山羊F1代和努比山羊×龙陵黄山羊F1代为研究对象，分为龙陵黄山羊、波龙山羊和努龙山羊3个试验组，每组12只，采用全舍饲高床饲养，试验预试期10 d，正试期180 d，试验结束时每组选择6只进行屠宰，分析其屠宰性能，并对背最长肌进行肉品质及营养成分分析。【结果】 波龙山羊、努龙山羊的屠宰性能指标较龙陵黄山羊有所提高，其中杂交羊的背脂厚均极显著高于龙陵黄山羊(P＜0.01)；在肉品质方面，波龙山羊背最长肌的pH、滴水损失和熟肉率均极显著高于龙陵黄山羊(P＜0.01)，努龙山羊与龙陵黄山羊间差异不显著(P＞0.05)，3组试验羊的剪切力均差异不显著(P＞0.05)；主要营养成分检测中，龙陵黄山羊羊肉粗蛋白质含量为23.33 g/100 g，与波龙山羊差异不显著(P＞0.05)；粗脂肪含量为0.88 g/100 g，显著低于波龙山羊(P＜0.05)；胆固醇含量最高，达65.80 mg/100 g，与波龙山羊差异不显著(P＞0.05)，但显著高于努龙山羊(P＜0.05)。3组羊肉中均检测了7种微量元素和10种脂肪酸，其含量差异均不显著(P＞0.05)；3组羊肉均检测到16种氨基酸，其中必需氨基酸7种，非必需氨基酸9种，氨基酸种类丰富，含量上表现出龙陵黄山羊更多，但波龙山羊羊肉氨基酸含量与其差异不显著(P＞0.05)。【结论】 杂交羊的屠宰性能有一定程度的提高，在肉质及营养成分方面能够较好的保持龙陵黄山羊羊肉的风味，研究结果为龙陵黄山羊的进一步改良利用提供了理论依据。

【目的】 设计针对禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli，APEC)O1和O78血清型的多表位疫苗(multi-epitope vaccine，MEV)，为APEC新型疫苗的研制奠定基础。【方法】 本研究结合减法蛋白组学和反向疫苗学进行研究。通过CD-HIT、BLASTP等工具去除APEC O1、O78蛋白序列中的冗余和不相似蛋白。将APEC O1、O78中相似蛋白与鸡参考蛋白质组进行BLASTP比对，去除同源蛋白，保留非同源蛋白。采用DEG、VFDB等数据库筛选具有毒力的必需蛋白。利用在线工具PSORTb和VaxiJen v 2.0筛选候选蛋白。使用在线工具NetCTL 1.2和NetMHCⅡpan 4.0预测T淋巴细胞主要组织相容性复合体Ⅰ和Ⅱ类分子结合表位，用在线工具IEDB预测B淋巴细胞表位。经在线工具VaxiJen v 2.0评估抗原性后，将合格的表位通过柔性linker串联成多表位疫苗。对设计的多表位疫苗进行抗原性、理化性质、N-糖基化位点、二级结构和三级结构预测。通过分子对接和免疫模拟分别评估多表位疫苗与免疫受体的结合能力及免疫效果，优化密码子便于克隆表达。【结果】 经筛选后，选择12个CLT表位、12个HTL表位和12个B淋巴细胞表位构建多表位疫苗MEV-O1O78。多表位疫苗MEV-O1O78分子质量为69.81 ku，为稳定亲水蛋白，具有良好的抗原性，存在7个潜在的N-糖基化位点。二级结构中，α-螺旋、延长链和无规则卷曲分别占7.93%、10.81%和81.27%。三级结构拉氏图显示，优势区域中含有的残基数占95.6%。免疫模拟结果显示，多表位疫苗MEV-O1O78能引起良好的体液免疫，并提高部分细胞因子的表达，经密码子优化确保设计的多表位疫苗MEV-O1O78在大肠杆菌K12表达系统中高效、稳定地表达。【结论】 本研究成功设计了含36个优势表位的APEC O1和O78多表位疫苗MEV-O1O78，可为研发禽致病性大肠杆菌病的多表位疫苗提供理论依据和数据支持。

【目的】 制备猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)gB蛋白单克隆抗体并建立竞争ELISA检测方法，为PRV的抗体检测及试剂盒开发提供参考。【方法】 本研究使用PRV gB蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠，使用PEG1500将小鼠脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合，用间接ELISA方法筛选出阳性杂交瘤细胞，采用有限稀释法经过2轮亚克隆，将阳性杂交瘤细胞通过体内诱生法制备腹水，并通过饱和硫酸铵法对腹水进行纯化制备单克隆抗体，用单克隆抗体建立竞争ELISA检测方法。使用棋盘法对反应条件进行优化，对阴性血清进行检测，计算该方法的临界值，并进行特异性、灵敏性和重复性试验，最后与商品化试剂盒同时对临床血清样品进行检测，比较二者的符合率。【结果】 获得2D6、2D8两株杂交瘤细胞均为IgG1型，轻链为κ链，建立的竞争ELISA方法单克隆抗体最佳稀释度为1∶400，蛋白最佳包被浓度为1 μg/mL，待检血清最佳稀释浓度为1∶4，最佳封闭液为1% BSA，酶标二抗的最佳稀释度为1∶4 000。与其他临床常见的猪病病原不发生交叉反应，具有良好的特异性。阳性血清稀释至1∶256仍为阳性，证明该方法灵敏性好。批内和批间的变异系数均＜10%，证明建立的竞争ELISA方法具有良好的重复性。与商品化试剂盒比较，总体符合率达93.3%。【结论】 本研究成功制备针对PRV gB蛋白的单克隆抗体，并应用单克隆抗体建立了PRV gB抗体竞争ELISA检测方法。

【目的】 对福建某猪场疑似患有猪接触传染性胸膜肺炎的病死猪肺脏进行胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae，APP)的分离鉴定，并确定APP分离株的血清型及其生物学特性，以期为猪场临床合理用药和制定防疫策略提供科学依据。【方法】 对1例疑似APP感染致死的后备母猪的肺脏组织进行病原分离培养、染色镜检和生化鉴定，同时进行16S rRNA和Apx Ⅳ毒素基因PCR扩增及血清型分析，采用药敏试验和动物致病性试验探究其耐药情况及毒力。【结果】 从病死猪肺脏中成功分离到1株细菌，菌体形态为表面光滑、边缘整齐、呈灰白色半透明的圆形菌落，革兰染色镜检可见多形性的革兰阴性短杆菌，具有APP的培养特征。生化鉴定结果显示，分离株能利用木糖、葡萄糖、甘露醇，尿素酶、硝酸盐还原和甲基红试验均为阳性，与APP的生化特性一致。16S rRNA与Apx Ⅳ基因测序比对结果显示，扩增序列与GenBank中APP序列的相似性均＞98%，进一步证实分离株为APP，将其命名为APP FJ2022。血清型鉴定结果显示，分离株为生长依赖NAD的血清1型菌株。药敏试验结果显示，分离株对头孢噻肟、头孢呋辛、头孢美唑、阿莫西林等药物敏感，对四环素、氨苄西林、环丙沙星、氟苯尼考等药物耐药。动物致病性试验结果显示，分离株对小鼠具有致病性，其半数致死量(LD₅₀)为7.71×10⁸ CFU。【结论】 本研究从福建省某规模化猪场疑似患猪传染性胸膜肺炎病死猪中分离获得1株血清1型APP，其对多种常见抗菌药物表现耐药，致病性较强。试验结果有助于了解福建省APP的血清型，并为猪场防控APP感染提供参考依据。

【目的】 通过真核系统表达牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2蛋白，以此为包被蛋白建立一种BVDV间接ELISA抗体检测方法，以解决中国BVDV抗体检测技术不足的问题。【方法】 将BVDV E2基因克隆至真核表达载体pTT5，转染293F细胞，待50%细胞死亡后进行超声破碎，并使用Ni离子亲和层析的方法纯化重组E2(rE2)蛋白；以rE2蛋白作为包被抗原，通过对各反应条件进行优化后建立检测BVDV抗体的间接ELISA方法，进行敏感性、特异性、重复性评价，并与中和试验进行比对。用所建方法对不同省份的牛血清样本进行检测。【结果】 采用293F细胞表达了rE2蛋白，经亲和层析方法纯化，rE2蛋白的纯度为99%，浓度为1.74 mg/mL；通过对各个反应条件优化，成功建立了BVDV间接ELISA抗体检测方法。该方法与商品化试剂盒的灵敏度一致，均可检出抗体效价临界血清(VN＝1)；具有良好的特异性，与传染性牛鼻气管炎病毒(IBRV)、牛副流感病毒-3(BPIV-3)、牛呼吸道合胞病毒(BRSV)和牛疱疹病毒-1(BHV-1)抗体阳性血清均无交叉反应；板内和板间重复性试验的变异系数均在5%以内，证明该方法重复性较好；与血清中和试验的符合率为97.5%。临床样本检测结果显示，共检测出364份阳性血清和64份阴性血清。【结论】 基于真核表达的rE2蛋白所建立的BVDV间接ELISA抗体检测方法具有良好的特异性和敏感性，可用于BVDV抗体检测，本研究结果为中国牛病毒性腹泻防控工作提供一种有效的技术手段。

【目的】 探究鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)非结构蛋白的亚细胞定位及其在β-干扰素(IFN-β)信号通路中的作用。【方法】 通过RT-PCR法扩增DTMUV的7个非结构蛋白(NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B和NS5)基因，将其克隆至真核表达载体pCAGGS-HA，构建重组真核表达质粒，并分别转染至HEK-293T细胞，通过Western blotting检测蛋白表达；利用间接免疫荧光试验检测非结构蛋白的亚细胞定位情况，通过双荧光素酶报告试验研究DTMUV的非结构蛋白对鸭源IFN-β启动子活性的影响。【结果】 试验成功构建DTMUV的7个非结构蛋白带HA标签的真核表达质粒。Western blotting结果显示，真核表达非结构蛋白均正常表达，NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B和NS5蛋白分子质量大小分别为38、25、14.4、68、13.9、28和100 ku。间接免疫荧光试验结果显示，7个非结构蛋白在细胞内的表达形态不一，主要定位在细胞浆中。双荧光素酶报告试验结果表明，与对照组相比，过表达NS2B和NS4B蛋白后，鸭源IFN-β启动子活性极显著降低(P＜0.01)。【结论】 本研究成功构建了DTMUV的7个非结构蛋白的真核表达质粒，非结构蛋白主要表达于细胞浆中，其中NS2B和NS4B蛋白具有颉颃IFN-β活性的功能。试验结果为DTMUV的免疫逃逸研究提供了一定的理论依据，并为深入探究DTMUV在宿主天然免疫信号通路中的作用机制提供了试验材料。

【目的】 筛选可高效率表达重组牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)的不同启动子/细胞组合，据此构建携带增强绿色荧光蛋白(eGFP)基因的重组LSDV，并探究其生长特性,为后续抗病毒药物的开发以及病毒复制和作用机制的研究奠定基础。【方法】 利用融合PCR方法分别将羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)启动子、LSDV启动子与eGFP基因进行连接，用以替换LSDV 005基因，构建同源重组片段，并将其分别转染至感染LSDV的非洲绿猴肾细胞(Vero)、非洲绿猴肾细胞衍生株(Vero-E6)、牛肾细胞(MDBK)、仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)、羊睾丸细胞(LT)和原代羊睾丸细胞(PLT)6种细胞中，通过荧光显微镜观察转染效果，并使用ImageJ软件统计荧光面积百分比,筛选出最优启动子/细胞组合。以筛选出的最优组合进行重组病毒转染，并检测病毒纯化效果，进一步探究重组病毒的生长特性和稳定性。【结果】 在6种细胞中LSDV启动子的转染效果均优于ORFV启动子，且在PLT细胞中，LSDV启动子的荧光面积百分比最高(8.38%)，与其他组细胞相比差异显著(P＜0.05)。使用LSDV启动子/PLT细胞组合构建重组病毒LSDV-Δ005/eGFP，纯化后在倒置荧光显微镜下观察到所有病变部位均带有绿色荧光，荧光面积百分比约为50.8%。病毒的生长特性和稳定性分析结果显示，重组病毒LSDV-Δ005/eGFP在6种细胞中的病变效应以及病毒滴度随时间变化的趋势与野生毒株LSDV/Heilongjiang/2022相似，且在PLT细胞上连续传代10次eGFP基因稳定表达。【结论】 利用LSDV启动子/PLT细胞组合构建重组LSDV时效率最佳，据此构建的重组病毒LSDV-Δ005/eGFP生长特性与LSDV野生毒株一致，经10次传代后遗传稳定性良好。

【目的】 通过分离牛肠道病毒(BEV),了解广西地区BEV的传播途径和病原学特性，为疫情监测和疫苗研发提供数据支持，促进广西地区对该病毒的防控。【方法】 本研究将BEV检测的阳性病料接种于胎牛肾细胞(MDBK)，经连续传代后，通过致细胞病变效应(CPE)、RT-PCR、间接免疫荧光试验(IFA)等鉴定分离毒株。对鉴定成功的毒株进行空斑纯化试验后测定毒价，并进行多步生长曲线试验。设计特异性引物扩增病毒全基因组序列，利用MegAlign软件分析分离毒株与参考毒株的核苷酸和氨基酸序列相似性，绘制病毒全基因组序列及VP1基因序列遗传进化树。【结果】 细胞接种病料后第3代出现明显CPE,RT-PCR结果显示，扩增出大小为239 bp的目标条带。IFA结果显示，接种分离株的MDBK细胞内可观察到特异性绿色荧光。本研究分离出了2株BEV，命名为GXHC2317和GXWZ2317株。半数组织培养感染剂量(TCID₅₀)测定结果显示，毒株GXHC2317和GXWZ2317 TCID₅₀分别为10^7.47和10^5.75/0.1 mL。多步生长曲线试验结果显示，毒株GXHC2317和GXWZ2317在MDBK细胞中复制增殖良好，24 h后病毒复制能力达到峰值。相似性分析结果表明，GXHC2317株与参考毒株核苷酸和氨基酸序列相似性分别为69.5%～80.1%和81.1%～96.5%，与宁夏地区分离株NX-FY40氨基酸序列相似性最高。GXWZ2317株与参考毒株核苷酸和氨基酸序列相似性分别为69.3%～87.3%和80.3%～96.4%，与山东地区分离株SD-S67氨基酸序列相似性最高。病毒全基因组序列与VP1基因序列遗传进化树结果表明，GXHC2317株属于BEV E3亚型，GXWZ2317株属于BEV F1亚型。【结论】 本研究从广西地区分离到BEV E3亚型和F1亚型，丰富了BEV在国内流行趋向调查及病原学研究，为广西地区BEV相关基础与应用研究奠定了病原学基础。

【目的】 本研究拟对从1例死亡雏鸭体内分离获得的鸭疫里默氏杆菌进行生物学特性和疫苗效果分析，旨在为鸭传染性浆膜炎的防治提供指导。【方法】 采集送检雏鸭的脑、心脏和肝脏组织进行细菌分离培养，通过菌落形态观察、革兰染色镜检、16S rDNA PCR扩增测序鉴定菌株并分析其遗传进化关系；采用玻片凝集法鉴定菌株血清型，检测菌株对常见抗菌药物的敏感性及致病性；利用分离株制备灭活疫苗，测定其免疫保护效果。【结果】 分离株在血平板上呈半透明、露滴状圆形小菌落，革兰染色可见多个丝状排列的阴性短杆菌，瑞氏染色可见两级浓染的短小杆菌。16S rDNA测序结果显示，分离株与鸭疫里默氏杆菌参考株CZ-RA03处于同一分支，相似性＞99.9％。血清型鉴定结果显示，分离株为鸭疫里默氏杆菌血清2型。药敏试验结果显示，分离株对氧氟沙星、链霉素、卡那霉素等药物耐药，对氟苯尼考、四环素、多西环素等药物敏感。致病性试验结果显示，分离株对7日龄雏鸭的半数致死量(LD₅₀)为1.51×10⁷ CFU，雏鸭感染后肾脏载菌量最高，为2.15×10⁶ CFU/g。利用分离株制备油乳剂灭活疫苗免疫7日龄雏鸭，其免疫攻毒后存活率为86.67%。【结论】 本研究从发病雏鸭中分离鉴定出1株具有较高致病性的血清2型鸭疫里默氏杆菌，以该菌制备的油乳剂灭活疫苗具有良好的免疫保护效果。研究结果为鸭传染性浆膜炎的防治提供了理论基础。

产肠毒素大肠杆菌(ETEC)造成的仔猪腹泻严重影响仔猪健康，是造成仔猪死亡的重要病因，给生猪养殖行业带来巨大的经济损失。ETEC的主要毒力因子是肠毒素和黏附素，肠毒素主要分为耐热肠毒素和不耐热肠毒素，其通过不同方式作用于小肠上皮细胞表面，引起小肠内水和电解质积蓄及代谢紊乱，导致仔猪腹泻，而黏附素则促进ETEC在仔猪小肠上皮细胞定植。目前的疫苗只包括部分菌毛黏附素、肠毒素，免疫效果不全面、缺乏广谱性。现阶段在临床应用中中药效果良好，能大幅度提升感染仔猪存活率、抑制ETEC生长和毒力基因表达、缓解感染仔猪的炎症反应、减少肠道损伤、提升感染仔猪的免疫力及调控ETEC感染造成的仔猪肠道微生物的平衡、调控仔猪肠道化学屏障，从多方面防控ETEC感染。在饲料端全面禁抗背景下，消费者越来越青睐绿色、无抗的生猪产品，而兽用中药为仔猪腹泻病的临床防控提供了新思路和新策略。因此，笔者对ETEC入侵仔猪肠道的致病机理以及中药在该疾病治疗上的应用和治疗效果进行总结概括。

【目的】 探讨佛耳草总黄酮联合抗生素对肺炎克雷伯菌和脂多糖(LPS)诱发的慢性阻塞性肺疾病(COPD)的治疗效果，并从相关蛋白和基因层面探究其相关抗炎机制，为该疾病的治疗提供一个新的思路。【方法】 将54只Wistar大鼠随机分为6组：对照组、模型组、氨茶碱组、佛耳草总黄酮组、抗生素组、佛耳草总黄酮＋抗生素组，每组9只。除对照组外，其余各组大鼠均采用气管滴注肺炎克雷伯菌和脂多糖的方法建立COPD模型，对照组以等体积的生理盐水代替肺炎克雷伯菌和脂多糖同法处理。COPD造模12周确认成功后，治疗组大鼠每天分别给予氨茶碱(50 mg/kg BW)、佛耳草总黄酮(50 mg/kg BW)灌胃处理，头孢他啶(200 mg/kg BW)肌内注射处理，佛耳草总黄酮＋抗生素组大鼠同时给予佛耳草总黄酮(50 mg/kg BW)和头孢他啶(200 mg/kg BW)处理，对照组和模型组大鼠不做处理。连续治疗7 d后，采用动物肺功能检测仪检测大鼠呼气峰流量(PEF)、吸气峰流量(PIF)、0.3 s用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV0.3/FVC)。分别采用HE染色和TUNEL染色检测大鼠肺脏组织病理学形态和组织细胞凋亡水平；采用Western blotting检测大鼠肺脏组织B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、活化的半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)蛋白表达水平；采用实时荧光定量PCR检测大鼠肺脏组织中MMP-2、MMP-9及TIMP-1基因 mRNA表达水平；采用ELISA方法检测各组大鼠血清及肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；采用流式细胞术检测大鼠肺脏组织Th17、Treg细胞比例。【结果】 与对照组相比，模型组大鼠PEF、PIF、FEV0.3/FVC、Bcl-2、Treg细胞比例均显著降低(P＜0.05)，TUNEL阳性率，Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平，Th17细胞比例、Th17/Treg比值，MMP-2、MMP-9、TIMP-1及IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著增加(P＜0.05)。与模型组相比，氨茶碱组、佛耳草总黄酮组、抗生素组、佛耳草总黄酮＋抗生素组大鼠PEF、PIF、FEV0.3/FVC、Bcl-2、Treg细胞比例均显著增加(P＜0.05)，TUNEL阳性率，Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平，Th17细胞比例、Th17/Treg比值、MMP-2、MMP-9、TIMP-1及IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平均显著降低(P＜0.05)。与佛耳草总黄酮组及抗生素组相比，佛耳草总黄酮＋抗生素组大鼠PEF、PIF、FEV0.3/FVC、Bcl-2、Treg细胞比例均显著增加(P＜0.05)，TUNEL阳性率、Bax、Cleaved Caspase-3、Th17细胞比例、Th17/Treg比值、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、IL-1β、IL-6、TNF-α均显著降低(P＜0.05)。【结论】 佛耳草总黄酮和抗生素联用对减轻COPD大鼠气道炎症损伤具有显著效果，其作用机制与二者抑制细胞凋亡、抑制基质金属蛋白酶(MMPs)和炎症反应、降低Th17/Treg比值有关。

【目的】 探究肉桂醛与麝香草酚联合作用对金黄色葡萄球菌的抑菌活性及作用机制，开发新型植物精油抗菌剂，为预防和治疗奶牛乳腺炎临床药物的应用提供理论依据。【方法】 本研究采用微量棋盘稀释法测定肉桂醛与麝香草酚的联合抑菌指数；利用时间-杀菌曲线进一步验证协同杀菌能力，通过观察金黄色葡萄球菌膜完整性、膜通透性、细胞膜电位及测定生物膜形成量、碱性磷酸酶(AKP)活性探究肉桂醛和麝香草酚对细菌壁膜结构的影响；同时研究肉桂醛和麝香草酚对菌体活性氧(ROS)生成的影响。【结果】 联合药敏试验结果显示，肉桂醛与麝香草酚联用时表现出良好的协同抑菌活性，联合抑菌指数在0.1875～0.375之间。体外时间-杀菌曲线结果进一步表明，联合用药组可明显降低细菌数量。肉桂醛和麝香草酚协同作用可降低细胞膜完整性，显著增加细胞膜通透性(P＜0.05)，细胞膜电位去极化，显著降低生物膜形成量(P＜0.05)，显著增加金黄色葡萄球菌AKP外渗量(P＜0.05)，显著提高ROS水平(P＜0.05)，进而导致细胞损伤和死亡。【结论】 肉桂醛与麝香草酚协同作用通过诱导细胞膜损伤，导致细胞内容物泄漏及破坏细胞内稳态发挥抗菌活性。本研究可为开发治疗奶牛乳腺炎的天然植物精油抗菌剂肉桂醛和麝香草酚的临床应用提供参考。

【目的】 了解西藏拉萨、那曲地区牦牛乳源产色葡萄球菌的耐药性，并探究其携带毒力基因和耐药基因情况。【方法】 从牦牛乳汁中分离培养产色葡萄球菌，并分析其生化特性，通过PCR方法进行分子生物学鉴定并对分离株携带的毒力基因和耐药基因进行检测，采用纸片扩散法(K-B法)进行药敏试验。【结果】 从66份牦牛乳汁中分离鉴定出11株产色葡萄球菌，分离率为16.67%。分离株在5%脱纤维绵羊鲜血琼脂培养基上形成边缘整齐、圆润、光滑、不透明的乳白色菌落，无溶血现象；革兰染色镜检可见呈念珠状排布的阳性球菌。生化鉴定结果显示，分离菌可发酵果糖、乳糖、甘露糖与蔗糖，硝酸盐还原反应呈阳性。16S rRNA扩增测序对比结果显示，分离菌与GenBank中的其他产色葡萄球菌相似性＞98%。13种毒力基因中检出icaA、bap 2种生物膜相关调控基因，检出率均为81.82%；14种耐药基因中，耐氨基糖苷类基因aph(3')-Ⅰa、耐大环内酯类基因ermB、耐磺胺类基因sul1的检出率分别为63.64%、27.27%和9.09%。分离株对青霉素、氨苄西林和四环素耐药率分别为100.00%、63.64%和36.36%。【结论】 本研究从采集自拉萨、那曲两地的66份牦牛乳样中共分离获得11株产色葡萄球菌，分离株对青霉素、氨苄西林、四环素等常见抗菌药存在不同程度的耐药性，其携带的毒力基因与耐药基因种类较少。研究结果为牦牛产色葡萄球菌的防治提供了理论依据。

【目的】 2023年4月山西太原某肉鸡场发生雏鸡精神沉郁、食欲不振、发病急、病程短、死亡率高的现象，试验旨在确定病死鸡病原菌感染情况并对其生物学特性进行研究，以期为该地区细菌感染疾病的防治提供参考依据。【方法】 对病死雏鸡进行病理剖检观察，采用平板划线法将病死鸡心脏、肝脏、脾脏组织在无菌环境下接种于BHI琼脂培养基进行细菌分离培养，利用革兰染色观察分离株形态；通过生化特性鉴定、16S rRNA基因扩增测序、细菌特异性引物PCR扩增鉴定细菌种属，应用Mega 11.0软件构建系统进化树；通过药敏试验检测分离株对常见抗菌药物的敏感性，同时对其进行致病性分析。【结果】 病死鸡剖检可见皮下水肿且有渗出液，心脏、肝脏、脾脏、胸肌有出血点。分离纯化获得12株分离株，其中8株在血琼脂培养基上出现明显的溶血现象，在麦康凯琼脂培养基不生长，革兰染色为紫色；3株在麦康凯琼脂培养基呈紫红色菌落且革兰染色为红色；1株呈透明白色菌落，革兰染色为红色。生化鉴定结果显示，分离株生化特性分别与金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌相符。8株分离株血浆凝固酶试验结果阳性，4株为阴性。16S rRNA基因PCR扩增测序结果显示，分离株分别与GenBank中的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌的相似性达98%以上，分别命名为SA-1～SA-8、E1～E3、P1。细菌特异性基因PCR鉴定结果显示，在280、414、509 bp处出现单一明亮条带，与预期相符。药敏试验结果显示，分离株SA-1～SA-8对亚胺培南、米诺环素、头孢他啶均敏感，E1～E3对氟苯尼考、亚胺培南、米诺环素等敏感，P1对亚胺培南、庆大霉素、阿米卡星、氨苄西林等敏感。致病性试验结果显示，雏鸡单独感染以及混合感染3种分离菌，20 h内全部死亡，分离株均有较强的致病性。【结论】 本研究成功分离获得8株鸡金黄色葡萄球菌、3株大肠杆菌、1株奇异变形杆菌，分离株均表现多重耐药，对雏鸡有较强致病性。研究结果为研究金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌的混合感染致病机制以及防控提供重要数据支撑。

【目的】 金黄色葡萄球菌是一种革兰阳性共生细菌，是一种胞内菌，其利用坏死性凋亡在人和动物宿主中引起多种疾病。本研究旨在了解混合系列蛋白激酶样结构域(mixed lineage kinase domain like protein，MLKL)是否参与调控金黄色葡萄球菌感染所致炎性反应，为防控金黄色葡萄球菌感染所致疾病提供新思路与理论依据。【方法】 通过转录组测序分析Pam2CSK4和金黄色葡萄球菌SA113刺激前后小鼠巨噬细胞中基因的变化；通过分子对接技术分析Pam2CSK4与MLKL的对接方式及位点；通过实时荧光定量PCR对差异表达基因进行验证；通过Western blotting检测MLKL、p65、p38和ERK的磷酸化水平；通过ELISA方法检测促炎性细胞因子(肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β))、趋化因子(RANTES)和抗炎因子(IL-10)的分泌水平。【结果】 转录组分析结果表明，Pam2CSK4和金黄色葡萄球菌SA113刺激巨噬细胞后可导致坏死性凋亡相关基因表达，且MLKL基因相关度较高(P＜0.05)。分子对接预测结果显示，Pam2CSK4与MLKL蛋白结合良好，并与ARG-304、ARG-301、GLN-331和LYS-333氨基酸残基形成氢键。实时荧光定量PCR和Western blotting结果显示，与未刺激组相比，Pam2CSK4和金黄色葡萄球菌SA113刺激可诱导小鼠巨噬细胞中MLKL的磷酸化和基因表达水平极显著上调(P＜0.01)。表明MLKL参与金黄色葡萄球菌感染过程。通过Western blotting检测MLKL对NF-κB和MAPK信号通路激活的影响，结果显示，与C57BL/6J小鼠相比，在金黄色葡萄球菌SA113刺激30和60 min后，MLKL^-/-小鼠巨噬细胞中p65磷酸化水平显著或极显著上调(P＜0.05；P＜0.01)；而在Pam2CSK4刺激30和60 min后，MLKL^-/-小鼠巨噬细胞中p65磷酸化水平极显著下调(P＜0.01)；在Pam2CSK4刺激15、30和60 min后，MLKL^-/-小鼠巨噬细胞中ERK磷酸化水平极显著下调(P＜0.01)；Pam2CSK4和金黄色葡萄球菌SA113刺激60 min后，MLKL^-/-小鼠巨噬细胞中p38磷酸化水平显著或极显著下调(P＜0.05；P＜0.01)。与C57BL/6J小鼠相比，Pam2CSK4刺激后，MLKL^-/-小鼠巨噬细胞上清液中TNF-α和RANTES分泌水平均极显著升高(P＜0.01)；SA113刺激后，MLKL^-/-小鼠巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-1β和RANTES分泌水平均极显著升高(P＜0.01)，IL-10分泌水平极显著降低(P＜0.01)。【结论】 MLKL对金黄色葡萄球菌诱导的炎症介质分泌及炎症信号通路激活具有调控作用。

【目的】 探究西藏阿里地区某养殖场内牦牛发病和死亡病因，分析其病原菌生物学特性，为有效防治该病提供参考。【方法】 无菌采集死亡牦牛病变组织，根据临床症状进行实验室诊断并分离培养病原菌。通过形态学观察、生化鉴定、16S rRNA PCR扩增并测序、kmt基因鉴定、荚膜血清分型、脂多糖分型对分离株进行鉴定，并探究分离株的药物敏感性和致病性。【结果】 分离株在7%血清TSA培养基中长出灰白色、透明、露滴样菌落；革兰染色镜检可见两端浓染的革兰阴性短杆菌。生化鉴定结果显示，分离株在葡萄糖、鸟氨酸脱羧酶、氧化酶、山梨醇和甘露醇生化反应管中呈阳性。荚膜血清分型及脂多糖分型结果显示，分离株为多杀性巴氏杆菌荚膜血清A型脂多糖L3型。药敏试验结果显示，分离株对羧苄西林、氨苄西林、头孢唑林、庆大霉素、呋喃妥因、头孢呋辛、丁胺卡那、米诺环素和诺氟沙星均表现敏感。致病性试验结果显示，小鼠腹腔注射0.2 mL 1×10⁸ CFU/mL分离株菌液后，死亡率为100%(5/5)，分离株具有较强致病性。【结论】 本研究成功分离鉴定出1株血清A型脂多糖L3型多杀性巴氏杆菌，其对羧苄西林、氨苄西林、头孢唑林等药物敏感，致病性较强。研究结果为探究牦牛源多杀性巴氏杆菌的生物学信息和病原学特征提供了数据参考。

【目的】 了解犬呼吸道感染病原谱的组成和感染特点。【方法】 本研究选取2022年来自中国18个省份动物诊疗机构的400例具有临床呼吸道症状的犬鼻拭子和口咽拭子样本，采用恒温核酸扩增芯片法对病例样本进行6种犬呼吸道病原体核酸检测，并利用统计学方法分析其在不同性别、不同季节、不同年龄、不同区域、不同品种间的差异。【结果】 400份样本中犬呼吸道病原体核酸总检出率为97.25%，犬副流感病毒(CPIV)检出率最高，为35.00%，其他依次为犬支原体(M.canis，31.00%)、犬呼吸道冠状病毒(CRCoV，28.50%)、犬瘟热病毒(CDV，18.50%)、支气管败血波氏杆菌(B.b，10.50%)和犬流感病毒(CIV，1.50%)。混合感染92例，混合感染率为23.00%，其中，二重感染77例，占混合感染病例的83.70%，以CPIV和犬支原体、CRCoV＋CPIV、CRCoV和犬支原体较为常见，阳性率分别为4.75%、4.25%和3.75%；三重感染12例，占混合感染病例的13.04%；四重感染2例，占混合感染病例的2.17%；五重感染1例，占混合感染病例的1.08%。经皮尔逊卡方检验，除CDV在不同年龄间差异显著(P＜0.05)外，其他5种呼吸道病原在不同性别、不同年龄、不同区域、不同品种间均差异不显著(P＞0.05)。【结论】 犬呼吸道病原谱组成复杂，主要以CPIV、犬支原体、CRCoV、CDV、支气管败血波氏杆菌为主，且易发生混合感染，一年四季均可感染，秋冬季节尤为显著，应持续开展系统性、延续性研究，为精准防控犬呼吸道疾病提供科学依据。

尿失禁(urinary incontinence，UI)是指动物在膀胱充盈阶段发生无意识排尿。在小动物临床疾病中，母犬发生尿失禁较为常见，尤其是绝育后的母犬，发病率为1.74%～20.10%，母犬尿失禁的风险因素包括绝育状态、品种、体重等。尿道括约肌机能不全(urethral sphincter mechanism incompetence，USMI)是母犬发生尿失禁最常见的病因，但发病机制尚不明确，受多种因素的影响，包括性激素、结构、功能的改变。目前在小动物临床实践中，尿道括约肌机能不全的确诊较为困难，通常是在排除其他尿失禁的病因后，使用α-肾上腺素受体激动剂药物或雌激素能缓解尿失禁症状，从而诊断为该病因导致的尿失禁。针对尿道括约肌机能不全首选药物治疗，对于难治性病例可考虑配合手术治疗，此外，中医治疗或许是潜在的有效治疗手段。笔者通过对绝育母犬尿失禁在国内外的研究进展进行综述，以期为该类疾病的诊疗提供理论参考，从而加深兽医师对该病的认识、更高效地对该疾病做出诊断，并为绝育母犬尿失禁的研究提供新的思路。