牛奶在食物营养链中处于较高级所以其含有的农药的残留量相对较高,长期服用农药污染的牛奶能致畸、致癌、致突变,对人体健康危害较大,各国家及国际组织均制定了相关的标准和法规来限制本国牛奶中的农药残留。作者对国内外牛奶中农药残留限量情况进行了比较和分析,并且对相关检测方法和风险监测模式进行了综述。

牛奶中激素类药物残留对人体健康危害较大,各国家及国际组织制定了相关的标准和法规。作者对主要国家和国际组织牛奶中激素类药物残留的限量及禁用标准作了比较和分析,并对其所制定的检测方法和风险监测模式作了综述。

Myostatin(MSTN)基因是胚胎期肌肉形成和出生后骨骼肌生长的主要调控因子之一,通过抑制肌细胞的扩增和分化而调控肌肉的生长和发育。为了进一步揭示MSTN在绵羊成纤维细胞中的生物学功能,采用RT-PCR从绵羊肌肉组织中扩增MSTN基因,将其cDNA终止密码子TGA删除,采用定向克隆技术连接到带有水母绿色荧光蛋白(AcGFP)报告基因的真核表达载体pAcGFP-N1中,构建融合蛋白重组质粒,经XhoⅠ/SacⅡ双酶切、测序鉴定后,用脂质体介导质粒转染绵羊原代成纤维细胞,观测荧光表达及用RT-PCR和Western blotting方法检测基因转录、蛋白质表达情况。结果表明,成功克隆绵羊MSTN基因,通过PCR方法在MSTN阅读框两端引入了XhoⅠ和SacⅡ克隆位点,成功构建pAcGFP-MSTN融合蛋白真核表达载体,重组质粒转染绵羊成纤维细胞24 h后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,通过RT-PCR扩增出1138 bp的转录产物,并用Western blotting检测到78 ku目的蛋白的表达。本试验为研究MSTN基因在成纤维细胞和脂肪分化调控中的具体机制奠定基础。

为进一步研究山羊胰岛素样生长因子结合蛋白1(insulin-like growth factor-binding proteins 1,IGFBP-1)基因的蛋白表达及生理功能,根据已测定出的山羊肝脏组织的IGFBP-1基因全编码区序列,并结合从NCBI获取的19个物种相应序列,利用ExPasy、NetPhos、NetOGlyc、SignalP等生物软件分析IGFBP-1基因CDS区及其氨基酸的理化性质、结构特点。结果显示,山羊IGFBP-1基因的CDS全长编码的多肽含有263个氨基酸残基,理论pI=6.33,分子质量为28.5758 ku,非稳定系数为53.15,非球形且定位于细胞外。IGFBF-1起始25个氨基酸残基构成信号肽,成熟肽具有2个疏水区、4个亲水区,无跨膜区;二级结构以无规卷曲为主,α-螺旋和延伸片段很少。预测存在磷酸化(17个)和O-糖基化(8个)两种翻译后修饰,但后者分值较低。山羊IGFBP-1核苷酸、氨基酸序列相似性与绵羊和牛的分别为99%和98%,与其他哺乳动物间的相似性也较高。进一步分析发现,IGFBP-1 N-端(26-110)和C-端(204-263)的保守性均在50%以上;信号肽(1-25)和中间连接区(111-203)则变异很大,山羊和绵羊的中间区序列完全一致,但与人的相似性只有9%。除RGD和YF在斑马鱼和鸡中不一致外,其他基序包括新片段(FYLPNC)在物种中高度保守。山羊IGFBP-1是一种稳定性较差、弱亲水性且具有信号肽的分泌蛋白,在物种间高度保守,磷酸化是调控其功能的主要因素。

参照GenBank公布的禽流感病毒基质蛋白M1基因序列,设计合成了1对特异性引物,采用RT-PCR法成功扩增并克隆了禽流感病毒M1基因。序列测定结果为M1基因cDNA全长759 bp,编码252个氨基酸。将其序列与数株甲型流感病毒M1基因序列进行比较,M1基因核苷酸同源性为99.1%~99.6%,推导氨基酸同源性为98.8%~99.6%,生物信息学分析表明,M1基因编码的蛋白质具有亲水性,有很强的抗原性,M1蛋白共有6个潜在的N-糖基化位点,可能存在3个蛋白激酶C磷酸化位点,存在2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。

从河北某宠物医院病犬的脾脏中分离到1株犬瘟热病毒,H基因测序结果表明,该分离株与疫苗株的同源性为99.5%,有3个氨基酸突变,但不影响其糖基化位点。将该株病毒P1基因克隆到pET32a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)及Rosetta感受态细胞,在IPTG诱导下获得大小为50 ku,可溶性表达的P1重组蛋白。Western blotting、间接ELISA试验结果显示表达产物能被犬瘟热高免血清所识别,表明其具有良好的反应原性,有望用于犬瘟热的检测。

本试验采用Vero细胞从临床疑似患犬瘟热的犬组织病料中分离出一株病毒,通过观察细胞病变,提取细胞培养物RNA并扩增克隆分析N蛋白基因部分序列进行了鉴定。结果表明,该毒株接种于Vero细胞后,出现了典型的细胞病变;对接种病料后的Vero细胞培养物提取总RNA进行RT-PCR扩增,得到了287 bp的目的片段;序列分析表明该分离株与犬瘟热病毒弱毒(Onderstepoort和Snyder Hill)的同源性为95.5%~96.9%,与标准强毒株(A75/17和2544/Han95)及野毒株(XJ-4、ZJ7、98-2646等)的同源性较高,为97.2%~99.0%,证明该毒株为犬瘟热病毒野毒株,命名为QD10。

本研究旨在阐明鸡蛔虫分离株线粒体细胞色素c氧化酶第Ⅰ亚基(cox1)基因部分序列(pcox1)的遗传变异情况,并用pcox1序列构建其与其他蛔虫的进化关系。应用聚合酶链反应(PCR)扩增鸡蛔虫虫株的pcox1,将测定获得序列应用Clustal X 1.81程序进行比对,然后用Phylip 3.67程序MP法和Mega 4.0程序NJ法绘制种系发育树,并用Puzzle 5.2程序构建最大似然树。所获得的pcox1序列长度一致,均为250 bp,种内变异在0~2.5%之间。种系发育分析表明,8个鸡蛔虫分离株位于同一分枝。由于鸡蛔虫pcox1序列种内相对保守,种间差异较大(6.9%~15.3%),故可作为种间遗传变异研究的标记,研究结果为进一步研究鸡蛔虫的群体遗传结构奠定了基础。

本研究旨在通过正交优化得出灰色家鸽的ISSR-PCR反应的最佳体系。以灰色家鸽为试验材料,使用引物ISSR807,采用正交优化方法对影响PCR反应的Mg²⁺、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、模板进行了体系优化,同时对引物的最佳退火温度进行了选择,建立了适合灰色家鸽的ISSR-PCR分析的最佳体系。结果表明,灰色家鸽ISSR-PCR反应的最优体系为:25 μL总体积中包括10×PCR Buffer 2.5 μL, Mg²⁺ 2.6 mmol/L, dNTPs 0.2 mmol/L, 引物0.4 μmol/L,Taq DNA聚合酶0.5 U,DNA 模板1.2 ng/μL,最佳退火温度为56.2 ℃。通过对ISSR-PCR反应体系的优化,能为利用该技术进行灰色家鸽遗传多样性评价、不同种源鉴定及亲缘关系分析奠定基础。

本试验对临床分离的多重耐药鸡源致病性大肠杆菌强毒株的耐药基因进行初步定位,为临床选择合适的治疗策略提供理论依据。从送检病死鸡的肝脏、心脏中分离鉴定致病菌,质粒提取试剂盒提取分离菌的耐药质粒,转化入基因工程菌JM109,通过质粒纯化、电泳和药敏试验对耐药基因进行了初步定位。并用艾叶水煮液对该菌株进行体外耐药质粒消除试验。结果分离鉴定到1株强毒力鸡源大肠杆菌,该菌呈多重耐药性,且仅对氟奇霉素和链霉素敏感;由质粒转化和药敏试验结果可初步将耐环丙沙星、青霉素、氧氟沙星、氟哌酸、林可霉素和复方新诺明的基因定位于耐药质粒上,并可随质粒的转移而使转化菌获得耐药性;用艾叶水煮液可使该菌的耐药质粒消除率达60%;质粒消除菌的药敏试验结果表明,消除耐药质粒的细菌恢复了对环丙沙星、青霉素、氧氟沙星、氟哌酸、林可霉素和复方新诺明的敏感性。本研究结果表明,分离菌的耐药基因分别位于质粒和染色体上,艾叶对耐药质粒有较强的消除作用,可作为临床治疗用药。

以从中国甘肃玛曲牦牛胆管中采集的3条中华双腔吸虫作为研究对象,用引物JB3及JB4.5扩增中华双腔吸虫的线粒体细胞色素c氧化酶第Ⅰ亚基(cox1)基因部分序列(pcox1),并用pcox1序列构建其与其它吸虫的进化关系。将测定获得序列应用Clustal X 1.81程序进行比对,然后用Phylip 3.67程序MP法,并用Puzzle 5.2程序构建最大似然树。所获得的3个中华双腔吸虫样品pcox1序列长度一致,均为355 bp。种系发育分析表明,3个中华双腔吸虫样品位于同一分枝。本研究系首次报道中华双腔吸虫的线粒体cox1序列,从而为进一步研究中华双腔吸虫进一步的分类、鉴定和遗传变异研究奠定了基础。

本试验旨在扩增延边黄牛白细胞介素18(IL-18)全长cDNA,并对其序列进行进化分析。根据GenBank中已公布的牛IL-18 cDNA序列设计1对引物,利用RT-PCR从刀豆蛋白(ConA)和植物分裂素(PHA)双重刺激36 h活化的延边黄牛脾淋巴细胞中扩增出牛IL-18全长cDNA,进行PCR、酶切和测序鉴定,并做进化分析及二级结构预测。扩增出延边黄牛IL-18全长cDNA,大小为760 bp,其中有两个氨基酸突变。进化分析结果显示,延边黄牛IL-18与牛、山羊、绵羊、马和猪的同源性较高,均大于90%,与同种群牛的同源性最高,而与原鸡的同源性最低,为51.1%。本研究确定了IL-18的种群差异,并预测了二级结构特性,为进一步研究延边黄牛IL-18的基因表达、生物活性及其作为佐剂的应用奠定了基础。

噬菌体展示技术是在20世纪80年代中期兴起的一项技术,该技术可以实现外源蛋白质或多肽基因的表达产物与噬菌体衣壳蛋白融合,进而展示到噬菌体表面。近年来,噬菌体展示技术在动物病毒性疾病中的应用范围越来越广,在筛选动物病毒抗原表位及抗病毒多肽、疫苗研制等领域显示出了明显的优势。文章就噬菌体展示技术的基本原理及噬菌体展示技术在动物病毒性疾病方面的应用作一综述,以期对后续噬菌体展示技术在病毒性疾病的诊断、防制等方面的应用作指导。

分子生物学技术具有操作简便、特异性强等优点,弥补了传统形态学分类方法的不足,因此分子水平的分类为棘球属绦虫种、株的鉴定提供了一种强有力的手段。文章介绍了线粒体基因(cox1、nad1、cob等)、核糖体基因应用于棘球绦虫分子分类的研究进展。

非结构蛋白NS3是致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒的分子标记蛋白,它具有多种生物学功能。研究结果表明,NS3在病毒非结构蛋白的加工、成熟、基因组复制与转录过程中以及宿主细胞致细胞病变效应的产生中起重要作用。文章总结了NS3的生物学特性及其相关功能,为阐明NS3的致细胞病变作用机理奠定基础。

为了查明流行于新疆北部部分地区部分规模化养猪场副猪嗜血杆菌的存在情况及其部分生物学特性,本试验以新疆北部地区几个规模化猪场为研究对象,从可疑副猪嗜血杆菌病病料中分离目标菌,采用微生物学与免疫学的试验手段,调查其主要流行株的生物学特性,包括生理生化特性、培养特性及分子特性,并对分离株进行了药敏试验及对小白鼠的致病性试验。试验结果表明,该地区规模化猪场中已普遍存在副猪嗜血杆菌病的感染,5株分离株对小白鼠均有较强的致病性,而且对硫酸庆大霉素和盐酸土霉素已经产生了耐药性。

本试验采用RT-PCR方法扩增了兔出血症病毒(rabbit haemorrhagic disease virus,RHDV)衣壳蛋白VP60基因。PCR产物纯化后连接T载体,提取质粒后,进行序列测定,将测序正确的纯化产物双酶切,克隆入原核表达载体pET28b(+)中,构建原核表达载体。将鉴定正确的重组质粒转化表达宿主菌E.coli Rosetta^TM,用IPTG诱导培养重组表达菌。经SDS-PAGE分析,在分子质量62.0 ku处可见明显的表达带,经Western blotting检测,约在62.0 ku处出现特异性的反应带。结果表明,表达蛋白具有良好的抗原性。

试验根据GenBank上发表的猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳(N)蛋白基因序列,设计合成了一对寡聚核苷酸引物,扩增大小为245 bp的目的片段,建立起PEDV N基因的RT-PCR检测方法。试验结果表明,该方法具有很强特异性和很高的敏感性,可作为猪流行性腹泻临床快速诊断的一种方法。

试验旨在研究日粮中添加酵母或酵母代谢物产品对奶牛生产性能的影响。选择70 头中国荷斯坦泌乳奶牛,按产奶量、泌乳天数和胎次等情况配对分成7组,每组10 头,其中试验1组为对照组,其余6组为试验组。对照组饲喂基础日粮,该日粮主要包含20 kg青贮、3 kg干草、2 kg苜蓿干草和9 kg泌乳期奶牛精料补充料。试验组在饲喂基础日粮的基础上再分别添加60 g益生素酵母1、50 g益生素酵母2、10 g益生素酵母3、10 g益生素酵母4、15 g益生素酵母5和15 g益生素酵母6。试验期为50 d,其中预试期10 d,正试期40 d。结果表明,不同的酵母或酵母代谢物产品对奶牛产奶量和奶成分有不同程度的影响,添加益生素酵母2试验组奶牛的产奶量与对照组相比增加显著( P<0.05)。不同的酵母及酵母代谢物产品对牛乳成分也有不同程度的影响,益生素酵母1、益生素酵母2和益生素酵母3显著提高了牛奶中乳脂含量(P<0.05);益生素酵母4显著提高了牛奶中蛋白含量(P<0.05);不同酵母或酵母代谢物产品对牛奶中干物质含量无显著影响;在体细胞数方面,添加益生素酵母2、益生素酵母3和益生素酵母4的试验组牛奶中体细胞数有一定的降低,但差异不显著(P>0.05)。因此,本试验证明饲料中添加酵母及酵母代谢物能提高奶牛的生产性能。

研究日粮中添加复合微生态制剂对蛋种鸡小肠肠道长度、pH及盲肠微生物的影响,试验选用1日龄海兰褐蛋种鸡320只,随机分为4个组,进行16周的试验。试验组日粮是在对照组日粮基础上分别添加50、100、200 g/t的复合微生态制剂组成。试验结果表明:① 与对照组相比, 21日龄时,添加复合微生态制剂组显著降低了蛋种鸡十二指肠、空肠、回肠的相对长度(P<0.05);42日龄时,试验2组的回肠相对长度显著低于对照组(P<0.05); 112日龄时, 试验1组空肠和回肠的相对长度显著低于对照组 (P<0.05),试验3组十二指肠的相对长度显著低于对照组(P<0.05)。②试验1、2组蛋种鸡21日龄空肠和回肠的pH显著低于对照组(P<0.05),试验3组蛋种鸡21、42、112日龄十二指肠、42日龄空肠的pH也显著降低 (P<0.05) 。③添加复合微生态制剂可显著提高蛋种鸡21日龄盲肠乳酸菌的数量(P<0.05),其中试验2组乳酸菌的数量最多,与对照组相比,提高了11.76%,其次是试验3组和试验1组;添加复合微生态制剂对于42和112日龄蛋种鸡的盲肠微生物无显著影响。结果提示,日粮中添加复合微生态制剂能缩短蛋种鸡小肠肠道相对长度,同时降低肠道pH并能改善肠道菌群,对雏鸡的健康生长有促进作用。本试验中添加100 g/t的复合微生态制剂为适宜添加量。

为研究日粮不同蛋白质水平对乌金猪脂肪代谢相关酶活性的影响。选取体重约15 kg的乌金猪54头,随机分为3组,每组3个重复,每个重复6头,在15~30 kg体重阶段饲喂18%(高蛋白质组)、16%(中蛋白质组)和14%(低蛋白质组)蛋白质水平的日粮,30~60 kg体重阶段饲喂16%(高蛋白质组)、14%(中蛋白质组)和12%(低蛋白质组)蛋白质水平的日粮, 60~100 kg体重阶段饲喂14%(高蛋白质组)、12%(中蛋白质组)和10%(低蛋白质组)蛋白质水平日粮,在体重30、60和100 kg体重时分批屠宰,取肝脏及背部皮下脂肪组织测定脂肪酶(LPS)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)活性。结果表明,在30 kg体重时,日粮蛋白质水平对乌金猪肝脏和脂肪组织中脂肪代谢相关酶活性差异不显着(P>0.05),在60和100 kg体重时,高蛋白质日粮组乌金猪肝脏和脂肪组织LPS的活性明显高于低蛋白质日粮组(P<0.05),G-6-PDH和MDH活性则明显低于低蛋白质日粮组(P<0.05)。因此,高蛋白质日粮增加了生长中后期乌金猪的内源性能量释放,可能影响了体脂沉积比例。

多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFA)是细胞膜磷脂的重要组成成分,当机体受到外界抗原刺激时,淋巴因子、抗体的分泌及新的免疫细胞的产生都依赖于脂肪的参与,作者主要从抗体水平、淋巴细胞转化率、溶菌酶活性、前列腺素生成、细胞因子产生等几个方面综述了多不饱和脂肪酸对家禽免疫机能的影响及机理。

试验旨在通过日粮中添加中药复方研究其对慢性热应激状态下蛋鸡的血液生化指标的影响,并对其调控机制作初步的探讨。本试验选用60周龄海兰褐蛋鸡250只,随机分为5组,每组50只,试验1~4组日粮中分别添加1%中药复方1、1%中药复方2、1%中药复方3、0.04%维生素C,第5组为空白对照组。分别在试验期的第14、28、42、56天检测蛋鸡血清中钙、磷、钠、钾离子浓度。试验结果显示,3种中药复方都可以使血清中钙、磷、钠、钾4种离子的浓度升高,有此可见中药复方可维持机体的血液生化指标稳定,提高血清中钙、磷、钠、钾含量,提高机体的热耐力,而且中药复方的效果优于维生素C。

本研究旨在探讨不同泌乳相关激素和生长因子对奶牛乳腺上皮细胞增殖的影响及其与细胞外基质主要成分层黏连蛋白的关系。将正常的荷斯坦泌乳期奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,在未包被或包被层黏连蛋白的条件下,以MTT法检测催乳素(PRL)、牛生长激素(GH)、类胰岛素生长因子-1(IGF-Ⅰ)、类胰岛素生长因子-2(IGF-Ⅱ)对细胞增殖作用的影响。在层黏连蛋白包被条件下,进行血清恢复的同时添加不同泌乳相关激素和生长因子,GH、IGF-Ⅰ有促进细胞增殖的作用(P<0.05),PRL、IGF-Ⅱ有维持细胞存活的作用(P<0.05);无血清时,几种激素和生长因子单独添加均无明显促增殖效应(P>0.05)。无基质条件下,与血清联合使用时,PRL、GH、IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ均对细胞生长有不同程度促进作用(P<0.05);无血清时,仅IGF-Ⅰ使细胞增殖速率显著加快(P<0.05)。层黏连蛋白作为培养基质对于体外培养的泌乳乳腺上皮细胞生长速度没有显著促进作用,但有利于PRL和IGF-Ⅱ发挥促存活作用。PRL、GH、IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ对细胞增殖和存活有促进作用,但需要与血清中其他成分协同才能充分发挥作用,其中IGF-Ⅰ促增殖能力最强。

为给黄酮类非甾体抗炎药的研发提供试验依据,本试验以脂多糖诱导巨噬细胞(RAW264.7)释放一氧化氮(NO)为试验体系,研究了5种取代基对黄酮类化合物体外抗炎活性的影响。具体评价了黄酮、5,7-二羟基黄酮、5,7,4'-三羟基黄酮、芹菜素-7-葡萄糖苷及蒙花苷的体外抗炎活性。结果表明5,7,4'-三羟基黄酮能明显抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞NO的释放,5,7,4'-三羟基黄酮的4'羟基是其活性的必需基团。

本试验采用枯草芽孢杆菌对豆粕进行固体发酵,通过正交试验探讨不同碳源组合、发酵时间、培养温度、水分比例、接种菌量等因素对发酵豆粕粗蛋白质增加率和蛋白质水解度的影响。结果表明,影响枯草芽孢杆菌固体发酵豆粕粗蛋白质增加率的条件因素的主次顺序为玉米粉比例>培养时间>温度>麸皮比例>水分比例>次粉比例>接种菌量,表观分析固体发酵条件最佳组合为A₃B₁C₃D₃E₂F₂G₁,粗蛋白质增加率达到28.05%;影响发酵豆粕蛋白质水解率的条件因素的主次顺序为温度>培养时间>玉米粉比例>接种菌量>麸皮比例>次粉比例>水分比例,表观分析固体发酵条件最佳组合为A₂B₃C₁D₃E₃F₃G₁,蛋白质水解度达到46.46%。枯草芽孢杆菌固体发酵豆粕的粗蛋白质增加率与蛋白质水解率存在明显的正相关(R²=0.556)。

本试验取新生24 h内的Wistar大鼠心肌组织,无菌剪碎后采用胰酶消化法分离细胞,用含20%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养,逐日在倒置相差显微镜下观察。结果于培养后48 h即可观察到部分细胞搏动;72 h后,细胞逐渐展开,搏动频率在60~70次/min,从而初步确立培养的细胞为心肌细胞;进一步采用心肌细胞特异性蛋白(cTnT)抗体和α肌动蛋白(α-actin)单克隆抗体分别对培养的心肌细胞进行免疫荧光及免疫组织化学鉴定,结果均呈阳性。

本试验对吉林白鹅羽毛(绒)生长发育规律进行了研究。分别在34、44、54、64日龄随机抽取15只试验鹅,以颈部放血法屠宰后,采集翅部、背部、腹部、尾部羽毛(绒),主要测量羽毛的羽轴、羽枝、羽根及羽绒的长度。结果表明,羽毛的生长是一个渐变的过程,不同部位的羽毛成长速度不同,换羽时间也不一致;同一部位的羽绒、羽枝、羽轴随着日龄的增长,变化趋势基本一致,而羽根的变化趋势与羽绒、羽枝、羽轴的相反。

在试验中采用组织块法分离培养大鼠表皮干细胞,观察所培养的细胞形态,免疫组织化学方法检测CK15、P63、α6-integrin表达情况并用α6-integrin标记表皮干细胞经流式细胞仪检测其标记率,同时对1~6代表皮干细胞在不同培养时间计数。结果表明,采用组织块法能分离得到大鼠表皮干细胞,且获得的细胞生长良好;干细胞标记物CK15、α6-integrin、P63呈阳性。经流式细胞仪检测得知,黏附细胞被α6-integrin标记的几率为80%,而未黏附细胞被α6-integrin标记的几率仅为2%,二者相差较大。

为研究IGF-Ⅰ表达和奶牛乳腺发育与泌乳之间的关系,采用qRT-PCR检测奶牛乳腺组织中IGF-Ⅰ的表达情况,应用细胞培养、qRT-PCR、MTT法检测IGF-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞的影响。结果显示,在青春期奶牛乳腺组织中IGF-Ⅰ的表达量最高;添加IGF-Ⅰ后,乳腺上皮细胞IGF-ⅠR表达增加,细胞增殖能力提高,β-酪蛋白表达增加。研究结果表明,IGF-Ⅰ可通过促进IGF-ⅠR的表达,从而促进乳腺上皮细胞增殖和提高乳中β-酪蛋白含量。

本研究以400头中国荷斯坦奶公犊为试验动物,研究不同胴体等级间产肉性能及肉质差异。对不同胴体等级间产肉性能研究结果发现,除分割肉产率外,其它指标随着等级增加而增大;不同胴体等级间奶公犊的胴体重、分割肉重、优质部位肉重等指标存在显著差异(P<0.05);对不同胴体等级间肉质研究结果发现,不同体形等级间奶公犊肉质差异不显著(P>0.05);随脂肪等级的增加,犊牛肉的蛋白质含量、脂肪含量、感官品质升高,含水量、蒸煮损失、剪切力、色度值L*降低。不同脂肪等级的犊牛肉,除脂肪含量、多汁性存在显著差异外(P<0.05),其它肉质指标均无差异(P>0.05)。试验结果表明,胴体等级能够在一定程度上反映荷斯坦奶公犊的产肉性能,但是对犊牛肉肉质的预测性较低。

超数排卵(简称超排)可诱导大量卵泡成熟排卵,增加可移植胚胎的数量,在家畜胚胎移植中起着至关重要的作用,同时也是进行转基因动物生产和动物克隆等研究的基础手段之一。作者介绍了几种常用超数排卵方法和特点及影响超排效果的影响因素,就超数排卵技术在反刍动物(牛羊和鹿科动物)中的最新应用进行了概括论述并提出了存在的问题和发展前景。

根据GenBank发表的鸡胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)基因序列针对外显子2和3设计2对引物,采用DNA池测序和PCR-SSCP技术,对鸡IGF1R基因的G26336A、C111014A位点进行多态性检测,并与鸡的生产性状进行相关性分析。结果表明,G26336A位点AA基因型个体56日龄体重显著低于BB基因型个体(P<0.05),AA和AB基因型个体在84日龄体重显著低于BB基因型个体(P<0.05)。C111014A位点CC、CD基因型个体初生重显著低于DD基因型(P<0.05),CC基因型个体在300日龄体重显著低于DD基因型(P<0.05)。研究结果初步表明,IGF1R基因可能是影响鸡生长性状的一个主效基因或是与之存在紧密遗传连锁的一个标记。

以影响布鲁拉美利奴羊繁殖力的骨形态发生蛋白受体-IB (bone morpho-genetic protein receptor-IB, BMPR-IB) 基因为候选基因,采用PCR-RFLP方法对策勒黑羊中BMPR-IB基因的多态性进行了研究。结果表明,在随机选取的100只策勒黑羊中检测到BB、B+和++ 3种基因型,其中BB、B+、++基因型频率分别为0.10、0.43和0.47,B基因频率为0.315,+基因频率为0.685,处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。推测BMPR-IB基因可能是影响策勒黑羊多羔性状的候选基因之一。

本试验采用RCR-SSCP及测序的方法检测了58头糯谷猪母猪卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH) β基因编码区3个外显子的多态性,并分析了不同基因型与繁殖性能的关联性,结果发现,在外显子1和外显子3中未发现多态位点,外显子2中发现了2个新的多态位点,共检测出3个等位基因,5个基因型,未检测到BB基因型。其中A等位基因在6699位点发生了C→T突变,B等位基因在6708位点发生了T→C突变,C等位基因与公布序列一致,A、B、C等位基因频率分别为0.288、0.119、0.593。2个突变均为同义突变,各基因型间的繁殖性能差异不显著。

试验以260只如皋黄鸡为素材,采用飞行质谱技术对位于促卵泡素受体(follicle stimulate hormone receptor,FSHR)基因第2内含子的3个SNPs位点进行检测,并对其与繁殖性状的相关性进行了分析。结果表明,C+29329A突变对开产日龄、开产蛋重及40周龄蛋重有显著影响(P<0.05);而C+30582G只与40周龄总产蛋数呈显著相关(P<0.05);G+51411A则对开产日龄、开产体重及40周龄总产蛋数有显著影响(P<0.05)。研究结果显示,FSHR基因有望成为选育高产蛋鸡的分子标记,辅助选育、开发中国地方鸡品种资源。

近年来,环境内分泌干扰物(environmental endocrine disrupting chemicals,EDCs)对雄性动物的生殖毒性引起了广泛的关注。大量资料显示EDCs可引起雄性生殖发育障碍,如隐睾、尿道下裂、睾丸癌、精液品质不良等。作者就几种典型的EDCs对睾丸间质细胞分泌睾酮的影响机制作一综述。

为了探讨梅山与杜洛克母猪卵巢差异表达基因对猪排卵与繁殖性状的影响,应用mRNA差异显示技术研究梅山猪与杜洛克猪卵巢中基因表达的差异性,分离9条在纯种梅山猪与纯种杜洛克猪卵巢中差异表达的表达序列标签(ESTs),并用半定量RT-PCR鉴定。通过BLAST比对发现,其中有3条EST与GenBank序列同源性较高。组织表达谱分析揭示了这些ESTs在梅山猪心脏、肝脏、肺脏、肾脏、肌肉、脂肪、小肠、大脑、卵巢、子宫、脾脏、输卵管等各个组织中的表达有不同程度的差异。研究结果表明,梅山猪和杜洛克猪卵巢之间的不同基因差异表达的方向存在差异,这些差异表达的基因可能在某种程度上导致猪繁殖力的差异,进而为研究影响猪排卵数的分子机理调控网络打下基础。

鹿产品是珍贵的中药材,目前市场上存在着严重的以假充真,以次充好的现象,科研工作者对鹿产品的检测做了大量的研究工作。作者回顾了近年来鹿产品检测方面的研究进展,分别从性状检测、显微检测、理化检测及分子检测等几种主要检测方法进行综述,为鹿产品检测的进一步研究提供了参考依据,同时提出了鹿产品检测中存在的问题及进一步研究方向。

为研究和牛杂交牛短期内重复超排效果,自2011年6月至2011年8月对100头和牛杂交牛连续进行了3次重复超排。结果发现,3次超排获得回收胚平均数分别为11.65±8.96、13.28±7.69、13.24±8.39枚;可用胚平均数分别为7.52±7.16、8.51±6.94和8.92±6.59枚。试验结果表明,对和牛杂交牛进行间隔为33 d的连续3次超排,能够获得较好的超排效果,且个体差异是影响超排效果的主要因素;育成牛超排有效率稍高于经产牛(P>0.05),但可用胚平均数显著低于经产牛(P<0.05)。

Mx(myxovirus resistance)蛋白是由干扰素诱导产生的具有GTP酶活性的肌动蛋白,具有广谱的抗病毒功能,可抑制RNA病毒及DNA病毒的复制。作者综述了Mx基因及其编码蛋白的结构和功能,阐述了其抗病毒的作用机制,并展望了Mx基因在抗病毒转基因育种领域的应用前景。

选取新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)GX-08株对26日龄雏鸡和20日龄雏番鸭进行人工感染试验,对体外细胞培养物进行致病性试验,并进行病理组织学观察。结果表明,以10^5.5EID₅₀的攻毒剂量对26日龄雏鸡和20日龄雏番鸭通过肌注接种,雏鸡的发病率和死亡率分别为100%和100%,雏番鸭的发病率和死亡率分别为70%和70%;通过点眼、滴鼻及口服接种,雏鸡的发病率和死亡率分别为80%和30%,雏番鸭的发病率和死亡率分别为20%和20%。感染鸡消化器官和部分呼吸器官病变严重,表现出典型的嗜内脏型NDV感染的病理变化特点;感染鸭则肝脏、脾脏和胰腺等实质器官病变明显,消化器官和部分呼吸器官病变较轻微。以200 TCID₅₀的剂量对单层鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸭胚成纤维细胞(DEF)接种,结果CEF和DEF均于24 h左右开始出现病变,并分别于96和84 h左右细胞单层完全被破坏。与CEF相比,DEF接种病毒后,细胞坏死、裂解过程迅速,合胞体形成现象显著,合胞体的数量及合胞体平均含有的胞核数较多,病毒接种后培养物上清的HA效价峰值也较高,表明GX-08株均可致CEF和DEF病变,且对DEF有更强的细胞融合能力。

古典猪瘟是严重危害养猪业发展的重要疫病之一,对古典猪瘟病毒的分子生物学研究能揭示病毒复制和致病机理,寻找免疫保护关键位点,为新型疫苗开发奠定基础。文章综述了近年对古典猪瘟病毒基因组和相关蛋白的研究成果,对以后的研究方向作了展望。

以低于治疗水平的氯四环素(CT)及低于治疗水平的氯四环素和治疗水平的氧四环素组合(CT-OX)两种方式分别对肉牛进行抗生素处理,研究其对肠道大肠杆菌耐药基因型的影响。从粪便样品分离大肠杆菌,并通过抗菌药物纸片法和稀释法敏感性试验测试分离出的大肠杆菌对四环素、氧四环素和氯四环素的敏感性。利用针对耐药基因tet(A)、tet(B)和tet(C)的引物对176个四环素耐药或中介的细菌样品进行多重PCR试验,结果发现所有样品均携带一种或两种耐药基因,tet(A)在两组样品中的流行基本相同,但CT组中tet(B)的流行比例显著小于CT-OX组(P<0.05),而tet(C)的流行比例则显著CT-OX组(P<0.05)。同时,在对四环素表现为中介的52个样品检测结果中,发现其中92.3%携带tet(C)基因。另外,最小抑菌浓度值(MICs)结果表明,药物敏感性同时取决于四环素类别和耐药基因型两方面。利用real-time PCR在转录水平上对tet(C)基因进行分析,发现耐药型与中介型并非上游调控造成。对tet(C)基因的测序分析结果发现,耐药型的第1063位碱基由T突变为G。由上述数据可知,对肉牛的四环素饲喂种类可以影响到大肠杆菌的耐药基因流行。

根据GenBank上公布的副结核分枝杆菌C-2染色体的ISMav2基因序列设计特异性引物,对牛副结核分枝杆菌进行PCR扩增并将产物克隆到pMD18-T载体后测序。结果表明,扩增的目的片段大小为246 bp,与预期扩增序列同源性为99.6%。该PCR检测体系的特异性强,不能在非副结核分枝杆菌 DNA中扩增出条带;敏感性高,最低检测的DNA含量为1 pg。该检测体系的成功构建为牛副结核病的检测、鉴定和流行病学调查提供了有力的技术支持。

猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)是引起猪病毒性腹泻的一种重要病原微生物。近年来,其检测技术取得了迅速发展。文章就该病诊断技术的研究进展作一综述,并对其检测新策略进行了展望。

大肠杆菌病血清型众多、易继发、地域性强、耐药性突出、暴发率高。鸡大肠杆菌病已严重影响中国养禽业,在实践中主要以预防为主。文章综述了大肠杆菌及其致病因素外膜蛋白的基本概况和外膜蛋白A的研究现状。

黄芪多糖具有多种生物活性,作为免疫增强剂和抗病毒药物在动物生产中已开始应用,在临床上也已经用于治疗肝炎、肿瘤等疾病。作者对黄芪多糖免疫药理作用及应用进行了概述,为更好地开发利用黄芪多糖提供参考。

为了解大理地区猪细小病毒(PPV)感染的情况,从大理地区58个散养户采集了243份猪血清,采用间接ELISA方法对血清样本进行细小病毒抗体检测。结果显示,243份猪血清中抗PPV抗体阳性率为85.60%,表明大理地区散养户猪群细小病毒病已经普遍流行,结果值得关注。

本试验旨在了解绵羊肺炎霉形体在山西省雁北地区的流行状况,为该病的预防和控制提供科学依据,对雁北地区的大同市、朔州市和忻州市的12个县,随机抽取96份血清样本,用间接血凝试验进行血清学检测。共检出37份阳性血清,绵羊肺炎霉形体的总体平均阳性为38.54%,其中忻州市阳性率最高,为44%,朔州市最低,为25%;县(区)阳性率以大同市浑源县最高,达66.7%;饲养方式、环境卫生、动物年龄等对本病的感染均有影响,其中舍饲羊阳性率达50%,高于总体平均阳性率和半舍饲阳性率。结果提示,山西省雁北地区绵羊肺炎霉形体阳性率较高,通风不良和环境卫生较差为主要诱发因素。

戊型肝炎病毒是一种RNA病毒,主要引起急性传染性肝炎,该病毒不仅可以感染人,而且有多种动物可以作为其自然宿主。文章从病原学、流行病学、检测方法及其疫苗的研制几个方面对其进行了综述。

本试验旨在研究喹烯酮及其主要代谢物在猪体内的药物代谢动力学过程。将喹烯酮按40 mg/kg的剂量对7头猪进行灌胃给药,采用HPLC-MS/MS法测定血浆中喹烯酮及其主要代谢物的浓度,药代动力学软件WinNonlin 5.2处理血浆中药物浓度－时间数据。灌胃给药后猪血浆中能检测到原药和N1-脱氧喹烯酮、脱二氧喹烯酮及3-甲基喹噁啉-2-羧酸(MQCA)3种代谢物。喹烯酮的浓度－时间数据符合一级吸收一室开放模型,其主要药代动力学参数为:T_1/2Ka＝(0.97±0.08)h,T_1/2λz＝(2.79±0.16)h,CL＝(26.03±0.65)L/h·kg,Cmax＝(0.26±0.01)μg/mL,Tmax＝(2.23±0.06)h,AUC＝(1.54±0.04)h·μg/mL;采用统计矩法处理N1-脱氧喹烯酮和脱二氧喹烯酮的浓度－时间数据,N1-脱氧喹烯酮主要药代动力学参数为:Tmax＝(6.33±1.37)h,Cmax＝(8.81±2.08) ng/mL,T_1/2λz＝(3.03±1.27)h,AUC＝(0.07±0.01)h·ng/mL,MRT＝(6.58±0.40)h;脱二氧喹烯酮的主要药动学参数:Tmax＝(10.29±0.29)h,Cmax＝(6.20±1.11)ng/mL,T_1/2λz＝(5.84±2.78)h,AUC＝(0.15±0.01)h·ng/mL,MRT＝(3.64±0.72)h。同时,在少数时间点检测到代谢物MQCA。猪口服喹烯酮后,吸收较快,消除较慢。血浆中检测到N1-脱氧喹烯酮、脱二氧喹烯酮及3-甲基喹噁啉-2-羧酸3种代谢物,且浓度较低、消除缓慢。

为建立利用内源诱导因子诱导绵羊体细胞为多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPS)的方法,对绵羊Sox2基因进行克隆,并与pMXs连接构建逆转录病毒载体,将构建的载体转染293GP细胞以获得假病毒上清,利用假病毒上清侵染绵羊胎儿成纤维细胞以检测细胞中的Sox2表达变化。PCR和酶切鉴定结果显示,成功构建了pMXs-Sox2重组质粒,该质粒具有转染293GP细胞的能力,所获得的假病毒上清侵染绵羊胎儿成纤维细胞后,可诱导细胞表达Sox2基因。本研究为开展绵羊iPS的相关研究提供依据。

文章综述了畜禽肌肉呈味物质肌苷酸的研究现状、呈味机理、代谢途径和影响因素,提出了现阶段肌苷酸研究过程中存在的问题并对未来的研究方向进行了展望,以期为目前动物营养工作者在畜禽风味品质方面的研究提供借鉴与参考。

对吉林市2009—2010年犬细小病毒病的发病情况进行了调查和分析。收集9个动物医院2年接诊的5684例疑似犬细小病毒病犬,通过临床检查及实验室诊断,确诊4124例患犬发生不同类型的犬细小病毒病。研究表明,本病发生多以肠炎型为主,占总发病数的49.64%;犬品种影响犬细小病毒病的发生,纯种犬的发病率最高,占62.85%,土种犬发病率最低,占11.99%;1~3月龄的幼犬多发,占发病数的65.11%;一年四季均有发病,多发于气温骤变的11~12月和2~3月;免疫次数也影响了犬细小病毒病的发生,每年2次免疫可以显著降低犬细小病毒病的发生。因此,选择高质量的疫苗,增加免疫次数,选择合理的饲养环境,加强多发季节和多发年龄段对犬的保护是减少本病发生的关键。

生乳的质量安全一直以来是人们关注的焦点,加强生乳质量安全监管,确保生乳质量安全,保障消费者身体健康显得尤为重要。作者对优质安全生乳的内涵、影响因素、管理与控制措施等方面进行了综述,以期为生产和管理提供参考。

:禽流感已被列为世界卫生组织(WHO)的流感大流行警告5级,中国将其列为一类传染病。该病的暴发不仅对养禽业造成毁灭性的危害,而且严重威胁到人类生命安全。为此快速准确的诊断对禽流感的防控具有重大的意义,文章就禽流感诊断方法的研究进展作一综述。

基因工程疫苗的研究发展日新月异,已从理论研究进入到实际生产应用,成为生物制品产业发展的一种趋势。文章就兽用基因工程疫苗的种类和研究进展,及在应用基因工程疫苗过程中可能出现的潜在生物安全问题作一简要概述。

选取120只昆明种小鼠随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 4个组,每组30只(雌雄各半),Ⅰ组为常规饲喂对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组饲料中分别添加比例为0.75%、1.00%和1.50%的复方中药进行试验。结果表明,与对照组相比,试验第3周,Ⅲ、Ⅳ组小鼠胸腺指数和脾脏用指数显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01);在第1、3周时,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组血液总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)升高,Ⅲ和Ⅳ组胆固醇(CHO)和甘油三酯(TG)均显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01);同时,Ⅲ、Ⅳ组小鼠血液中间细胞(MID)和淋巴细胞(LYM)也显著增加(P<0.05)。因此,在饲料中添加复方中药饲喂小鼠能促进免疫器官发育,并在一定程度上提高其机体免疫力。

在借鉴动物组织RNA提取方法的基础上,结合使用RNAlater保存液和Trizol试剂,改进了提取步骤和反应体系。利用改良的总RNA提取方法,从羊皮肤组织中快速、高效地提取了高质量总RNA,提取的总RNA可满足基于RNA分析技术的相关分子生物学试验需要。

为研究组合添加剂对水貂精子活力、配种率、平均窝产仔数、断奶成活率、断奶平均体重等繁殖性能的影响。选择种母貂36只、公貂6只,随机分为对照组和试验组,每组3只公貂,18只母貂,母貂设2个重复。对照组貂饲喂基础日粮,试验组在基础日粮基础中添加组合添加剂3 g/(d·只)。试验期120 d,试验期内,测定精子活力、配种率、平均窝产仔数、断奶成活率、断奶平均体重。结果显示,组合添加剂对貂的繁殖性能具有明显的改善作用。与对照组相比,试验组公貂精子活力、母貂受胎率、平均窝产仔数、仔貂断奶成活率和45日龄断奶平均体重等繁殖性能指标分别提高了2.44%、3.93%、13.04%、2.49%、1.85%。