转人溶菌酶基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立

›› 2010, Vol. 37 ›› Issue (6): 40-42.

转人溶菌酶基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立

朱振营1，林祥梅1，刘建1，吴绍强1，仇松寅1，王建武2，薛振华3

(1.中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所，北京 100029；2.中国农业大学农业生物技术国家重点实验室，北京 100193； 3.北京市畜牧兽医总站，北京 100107)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:2010-04-30 出版日期:2010-06-20 发布日期:2010-06-20
通讯作者: 刘建

Development of Multiplex PCR Detection of Human Lysozyme Gene in Transgenic Cow

ZHU Zhen-ying1, LIN Xiang-mei1, LIU Jian1, WU Shao-qiang1, QIU Song-yin1,WANG Jian-wu2, XUE Zhen-hua3

(1. Institute of Animal and Plant Quarantine, Chinese Academy of Inspection and Quarantine, Beijing 100029, China;2. State Key Laboratory for Agrobiotechnology, China Agricultural University, Beijing 100193, China; 3. Beijing Municipal Animal Husbandry and Veterinary General Station, Beijing 100107, China)

Received:1900-01-01 Revised:2010-04-30 Online:2010-06-20 Published:2010-06-20
Contact: LIU Jian

摘要/Abstract

摘要： 建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法，为转基因动物及产品进出境检测技术平台的建立提供技术支持，并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据牛物种特异性基因线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）设计奶牛内源性基因引物，根据外源基因人溶菌酶基因（human lysozyme，hLY）及标记基因新霉素磷酸转移酶基因（NPTⅡ）设计特异性引物，优化反应条件，建立转基因奶牛多重PCR检测方法。结果表明，建立的方法灵敏、快速、特异，一个反应可以检测多个基因片段，可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。

关键词: 转基因; 多重 PCR; hLY

Abstract: For developing the typical testing standard of transgenic mammals and its derived food and the technical support for entry﹠exit animal quarantine, detection of the transgenic component in transgenic cow by multiplex PCR was developed in this study.The endogenous mitochondrial DNA(mtDNA) gene specific for cow identification, exotic human lysozyme(hLY)，marker NPTⅡ were amplified according to the differential primers. The process of the multiplex PCR reaction was optimized. The system described herein represent simple, accurate and sensitive detection methods in which only one reaction was necessary to detect multiple target sequences that could be reliably used for the identification of specific lines of transgenic cows.

Key words: transgene; multiplex PCR; human lysozyme

中图分类号:

朱振营;林祥梅;刘建;吴绍强;仇松寅;王建武;薛振华. 转人溶菌酶基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立[J]. , 2010, 37(6): 40-42.

ZHU Zhen-ying;LIN Xiang-mei;LIU Jian;WU Shao-qiang;QIU Song-yin;WANG Jian-wu;XUE Zhen-hua. Development of Multiplex PCR Detection of Human Lysozyme Gene in Transgenic Cow[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2010, 37(6): 40-42.

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