不同佐剂对猪圆环病毒衣壳蛋白免疫原性的影响

doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.11.034

《中国畜牧兽医》 ›› 2016, Vol. 43 ›› Issue (11): 3037-3046.doi: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.11.034

不同佐剂对猪圆环病毒衣壳蛋白免疫原性的影响

王立波¹, 吴润生², 闫超¹, 吕暾¹

1. 福州大学生物科学与工程学院, 福州 350116;
2. 福州大北农生物科技有限公司, 福州 350014

修回日期:2016-04-19 出版日期:2016-11-20 发布日期:2016-11-18
通讯作者: 吕暾 E-mail:lvtun@yahoo.com
作者简介:王立波(1989-),男,河南新乡人,硕士,研究方向:生物化学与分子生物学,E-mail:874362450@qq.com
基金资助:
2013年福建省产学研重大专项“猪圆环病毒二代疫苗的开发”（2013N5006）；2012年福州市产学研重大专项猪圆环病毒二代疫苗的开发（2012G106）

Effects of Different Adjuvants on the Immunogenicity of PCV2-Cap Protein

WANG Li-bo¹, WU Run-sheng², YAN Chao¹, LV Tun¹

1. College of Biological Science and Engineering, Fuzhou University, Fuzhou 350116, China;
2. FuZhou Da Bei Nong Biotech Co., Ltd., Fuzhou 350014, China

Revised:2016-04-19 Online:2016-11-20 Published:2016-11-18

摘要/Abstract

摘要：

试验旨在研究猪圆环病毒不同佐剂疫苗的制备及其对免疫原性的影响。将去除信号肽的PCV2（porcine circovirus type 2，PCV2）Cap蛋白基因连接在pET-28a载体上，进行诱导表达，用脱氧胆酸钠（DOC）和低浓度尿素对表达产物进行溶解，制备氢氧化铝胶体佐剂、脂质体佐剂、弗氏佐剂、白油佐剂、蜂胶佐剂，并与纯化的PCV2-Cap蛋白混合制成亚单位疫苗，以商品化的灭活疫苗作为阳性对照，免疫小鼠，并使用ELISA方法检测动物血清中抗体及细胞因子含量的变化，评估其免疫保护效果。结果显示，表达产物以包涵体的形式存在，使用DOC溶解包涵体可省略蛋白复性步骤，且纯化方法简单，获得纯度较高的衣壳蛋白；ELISA检测结果表明PCV2-Cap蛋白能诱导产生特异性较高的抗体；水系佐剂制备的亚单位疫苗具有较高的免疫活性，为亚单位疫苗的商品化提供重要的数据支持。

关键词: 猪圆环病毒; 包涵体; 佐剂; 亚单位疫苗

Abstract:

The study was aimed to prepare vaccines with different adjuvants,and research its effects on immunogenicity.The PCV2 Cap gene with its signal peptide removed was connected to pET-28a vector,and then was induced to express,using sodium deoxycholate（DOC）and low concentration of urea to dissolve the inclusion body.Different adjuvants,such as alum-based adjuvants,liposome adjuvants,propolis adjuvants,white oil adjuvants and Freund adjuvant were prepared,together with protein purified to make up subunit vaccines,and commercial inactivated vaccine as positive control,immuning mice,and ELISA method were used to detect changes in concentrations of animal serum antibody and cytokines,evaluated the immune protective effect.Results showed that the expression product in the form of inclusion body,using the DOC could omit dissolving inclusion body protein renaturation steps,and the purification method was simple,the capsid protein obtained had high purity.ELISA assays showed that PCV2-Cap had good immunogenicity.And we found that the water system adjuvants had high immune activity,this could provide important previous experimental data for the commercialization of the subunit vaccine.

Key words: porcine circovirus; inclusion body; adjuvant; subunit vaccine

中图分类号:

王立波, 吴润生, 闫超, 吕暾. 不同佐剂对猪圆环病毒衣壳蛋白免疫原性的影响[J]. 《中国畜牧兽医》, 2016, 43(11): 3037-3046.

WANG Li-bo, WU Run-sheng, YAN Chao, LV Tun. Effects of Different Adjuvants on the Immunogenicity of PCV2-Cap Protein[J]. , 2016, 43(11): 3037-3046.

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不同佐剂对猪圆环病毒衣壳蛋白免疫原性的影响

Effects of Different Adjuvants on the Immunogenicity of PCV2-Cap Protein

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