为了探究猪缝隙连接蛋白43（GJA1）的结构和相关功能，本研究对16个哺乳动物的GJA1蛋白进行多重序列比对及系统发育分析，并通过相关的生物信息学数据库和软件从理化性质、蛋白修饰位点、跨膜区、亚细胞定位、二级结构、三级结构、多态位点、功能区域和互作蛋白等方面对猪GJA1蛋白的结构和功能进行系统分析。系统发育分析结果显示，GJA1蛋白在16种哺乳动物中变异未达到饱和，物种间遗传距离小且同源性高，其中猪与马的GJA1蛋白序列最为接近，同源性达93.3%，在进化树上的分类也证实了这一结果。蛋白结构分析结果显示，猪GJA1蛋白分子质量为43.08 ku，理论等电点为8.88，由20种氨基酸组成，不稳定指数为44.06，平均疏水系数为-0.240，脂溶指数为82.67，不分泌信号肽，有4个跨膜区、6个O-糖基化位点和38个磷酸化位点，最有可能位于细胞质膜和高尔基体内，其二级结构和三级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成。蛋白功能分析结果显示，在猪GJA1蛋白的CDS序列中有2个超级家族结构功能区域和6个错义突变位点，且猪GJA1蛋白还与ZO-1和Cx36等蛋白及多种蛋白激酶存在相互作用。本研究通过生物信息学分析系统地揭示了猪GJA1蛋白的结构和功能，为后续进一步研究GJA1蛋白在猪体内发挥生物学功能的遗传调控机制提供一定的理论支持。

本研究旨在克隆猪葡萄糖调节蛋白78（glucose-regulated protein 78，GRP78）基因，并进行生物信息学分析，探讨其在猪不同组织中的表达情况。根据GenBank上公布的猪GRP78基因序列（登录号：XM_001927795.6）设计引物，PCR扩增及测序获得猪GRP78基因CDS序列，使用在线软件分析GRP78的理化性质、跨膜结构、信号肽、疏水性、保守结构域、二级结构和三级结构，并进行同源性比对及系统进化树构建，利用实时荧光定量PCR方法检测猪GRP78基因在各组织中的表达情况。结果显示，猪GRP78基因CDS区长1 965 bp，可编码654个氨基酸。生物信息学分析表明，GRP78理论分子质量为72.3 ku，等电点（pI）为5.06，半衰期为30 h，其水溶液在280 nm处的消光系数为30 495，肽链N端为蛋氨酸（Met），不稳定系数为32.39，属于稳定蛋白。脂肪系数为85.40，总平均疏水指数为-0.496，无跨膜结构，存在信号肽序列，说明该蛋白属于分泌型蛋白；GRP78蛋白只包含1个超家族保守结构域：HSP70结构域。蛋白二级结构分析显示，GRP78蛋白中α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲分别为40.06%、20.49%、8.10%和31.35%。同源性比对结果显示，猪GRP78基因与人（登录号：NM_005347.4）、小鼠（登录号：NM_001163434.1）、大鼠（登录号：NM_013083.2）、山羊（登录号：XM_005687138.3）、牛（登录号：NM_001075148.1）核苷酸序列的同源性分别为93%、91%、90%、95%、95%，氨基酸序列的同源性分别为99%、98%、98%、99%、99%，各个物种之间GRP78基因保守性较高。实时荧光定量PCR结果显示，GRP78基因在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、胃、卵巢、输卵管、乳腺、小脑、大脑、垂体等组织中均有表达，在心脏、脾脏、肺脏中相对高表达。本研究结果为今后深入研究GRP78基因的生物学功能提供了基础材料。

为分析猫泛白细胞减少症病毒（FPV）北京株（FPV-BJ 05株）NS1基因的分子特征及其编码蛋白的生物学功能，本研究对FPV-BJ 05株NS1基因进行PCR扩增、克隆及序列测定。应用生物信息学软件分析FPV-BJ 05株与GenBank上登录的11株FPV参考株NS1基因的同源性，并预测NS1蛋白理化性质、信号肽、跨膜结构、B细胞抗原表位、磷酸化位点、亚细胞定位及蛋白结构与功能、高级结构等。结果显示，NS1基因全长2 007 bp，编码668个氨基酸，且与其他FPV分离株NS1基因核苷酸序列同源性为98.8%~99.3%，氨基酸序列同源性为97.9%~98.8%。系统进化树分析结果显示，FPV-BJ 05株NS1蛋白与GenBank上登录的3株FPV参考株处于同一大分支，但由于氨基酸的突变导致其属于独立的一小分支。NS1蛋白既无信号肽也无跨膜结构域，属于非分泌型的疏水性蛋白。B细胞抗原表位预测结果显示，NS1蛋白柔韧性较好，抗原性及表面可及性较高，预测该蛋白含有13个优势抗原位点。修饰结构预测表明，NS1蛋白含有62个潜在磷酸化位点，27个O-糖基化位点和2个N-糖基化位点。亚细胞定位结果显示，NS1蛋白在细胞质和细胞核的概率较高，分别为69.6%和17.4%。NS1蛋白二级结构中α-螺旋、延伸链、无规则卷曲和β-转角分别占39.37%、15.42%、39.37%和5.84%。应用在线软件SWISS-Modle对NS1蛋白进行建模，预测其三级结构，结果发现NS1蛋白主要以α-螺旋为主。本试验结果将为北京地区FPV免疫诊断及核酸疫苗研究提供理论依据。

试验旨在对羊源多杀性巴氏杆菌toxA-N基因进行克隆、原核表达及纯化，并对表达蛋白toxA-N进行生物信息学分析，为探索羊源多杀性巴氏杆菌毒素基因的相关特性提供参考依据。以羊源多杀性巴氏杆菌基因组为模板，参考GenBank中公布的多杀性巴氏杆菌HN06中toxA基因序列（登录号：CP003313.1）设计引物，通过PCR技术扩增出目的片段，构建重组质粒pET28a （+）-toxA-N，转化E.coli BL21（DE3）感受态细胞，IPTG诱导表达后，经考马斯亮蓝染色及Western blotting鉴定，纯化蛋白并运用生物信息学软件对表达蛋白进行特性分析。结果显示，试验成功扩增出大小为1 515 bp的toxA-N基因片段，经BamHⅠ和NotⅠ双酶切得到大小约为5 369和1 515 bp两条片段，表明成功构建了pET28a （+）-toxA-N重组质粒，IPTG诱导表达的菌株经考马斯亮蓝染色及Western blotting鉴定后，成功表达出大小约为60 ku的toxA-N蛋白；生物信息学分析表明，toxA-N蛋白为包涵体，其分子式为C₂₆₃₅H₄₀₀₂N₆₆₄O₇₉₇S₁₇，原子总个数为8 115，消光系数为84 480，不稳定指数为43.50，亲水性平均值为-0.381。在toxA-N蛋白二级结构中，α-螺旋、β-折叠、延伸链和无规则卷曲分别占53.47%、2.77%、11.28%和32.48%，与三级结构预测结果一致。本试验通过对toxA-N基因的初步研究，揭示了多杀性巴氏杆菌毒素的相关特性，对家畜的疾病预防、诊断、治疗具有重要意义。

为了解广西南宁地区犬细小病毒（CPV）的流行现状与病毒变异情况，本试验对初步确诊为犬细小病毒病的12份阳性病料提取基因组DNA，以提取的基因组DNA为模板，通过PCR扩增VP2基因序列并测序，将12个阳性毒株样本VP2基因测序结果与GenBank中登录的17株国内外CPV分离株VP2基因进行同源性比对，采用Mega 7.0软件绘制遗传进化树，分析其病毒亚型和遗传进化情况。结果显示，成功扩增得到12个毒株样本的VP2基因片段，大小约1 755 bp，12株阳性样本毒株的VP2基因同源性在99.2%~100.0%之间，其中NN01与NN07、NN02与NN06同源性最高，为100.0%；阳性样本毒株与国内其他分离株VP2基因的同源性为97.6%~100.0%，其中NN08、NN10及NN04与CPV-ZJ1579同源性最高，均为100.0%，属于CPV-2a亚型；阳性样本毒株与国外代表性毒株同源性在98.1%~99.8%之间。遗传进化树分析表明，12个样本毒株中有3株属于CPV-2a亚型，3株属于CPV-2b亚型，6株属于CPV-2c亚型。这是继2018年初广西分离到CPV-2c型CPV后，首次发现南宁地区大规模流行CPV-2c亚型病毒，预示着CPV-2c亚型CPV在国内的流行正在增加。综上所述，广西南宁地区CPV-2a、CPV-2b与CPV-2c亚型并存，但CPV-2c亚型的比重比其他地区大，这也给该地区提供了新的防治信息，在实际CPV防控工作中除了对CPV-2a、CPV-2b等传统流行亚型的关注之外，更应该重视CPV-2c亚型CPV的防控。

为分析单增李斯特菌溶血素S （listeriolysin S，LLS）llsB基因缺失对单增李斯特菌（Listeria monocytogenes，LM）生物学特性的影响，本研究利用同源重组构建了llsB基因缺失株LM90-ΔllsB，并以8周龄、体重40 g±5 g的健康昆明系雄性小鼠为试验动物对其生长特性、半数致死量（LD₅₀）、脏器载菌量等生物学特性进行了初步研究。结果显示，本研究成功构建了llsB基因缺失株；缺失株在体外连续培养20代过程中能稳定遗传。通过生长曲线测定发现，llsB基因缺失株生长活性略高于亲本株；小鼠感染试验结果显示，亲本株和缺失株的LD₅₀分别为10^6.17和10^6.50 CFU；与亲本株相比，缺失株在小鼠肝脏和脾脏中的载菌量均极显著减少（P<0.01），说明缺失株对小鼠的感染能力明显减弱。在小鼠脑中未检出单增李斯特菌。综上所述，llsB基因对LM90的部分生物学特性可能有直接或间接的调控作用，本试验结果为进一步研究LLS的致病机理及防控李斯特菌病提供一定的理论依据。

试验旨在筛选并制备鸡PD-1单克隆抗体，对该单克隆抗体的免疫学特性、结合活性及其对鸡PD-1/PD-L1信号通路激活的阻断作用进行初步研究。运用杂交瘤细胞融合技术筛选杂交瘤细胞株，采用ELISA方法、Ig抗体亚型鉴定试剂盒、Western blotting鉴定抗体的免疫学特性，利用间接免疫荧光技术及流式细胞术检测筛选单抗与鸡PBMCs的结合情况，应用该单抗与IBDV感染7 d后的鸡PBMC细胞作用，利用实时荧光定量PCR技术检测IL-2、IL-6和IFN-γ等细胞因子的表达情况。结果显示，试验获得1株特异、稳定分泌鸡PD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为PD-1-D05。该单克隆抗体的亚型属于IgG1，杂交瘤细胞培养上清和腹水的效价分别为1：2¹¹和1：2.048×10⁵。ELISA和Western blotting检测结果表明，PD-1-D05单抗能与免疫原发生特异性反应，与pET-28a （+）、Rosetta菌株蛋白提取液上清及无关蛋白无交叉反应。间接免疫荧光及流式细胞术检测结果显示，PD-1-D05单克隆抗体能与鸡PBMC特异性结合，且IBDV感染7 d后的PBMC经单抗处理后，IL-2表达量显著升高（P<0.05），IFN-γ转录水平显著下降（P<0.05），IL-6表达水平较IBDV攻毒组细胞虽有所下降，但并无统计学差异（P>0.05）。结果表明，试验成功筛选并制备了能够稳定分泌鸡PD-1单克隆抗体的细胞株，所获得的PD-1单克隆抗体具有良好的免疫学特性，该单抗能够特异性识别鸡PD-1分子并与鸡PBMC细胞特异结合，并在一定程度上恢复由于IBDV感染导致的PD-1/PD-L1信号通路激活引发的免疫调节相关细胞因子IL-2、IFN-γ的异常表达。

为探究山羊白介素10（interleukin 10，IL-10）基因的序列特征及在组织中的相对表达情况，试验采用PCR法扩增并克隆金堂黑山羊IL-10基因，用DNAMAN、DNAStar、ExPASy等生物信息学软件进行序列分析，运用实时荧光定量PCR法检测IL-10基因在金堂黑山羊不同组织中的表达情况。结果显示，金堂黑山羊IL-10基因序列长为379 bp，开放阅读框为276 bp，编码91个氨基酸残基。IL-10蛋白二级结构中含有α-螺旋、β-转角和无规则卷曲，分别为76.92%、2.20%和20.88%。IL-10蛋白三级结构模型与人IL-10（1ilk.1.A）基因同源性最高（86.81%）。系统进化分析结果发现，金堂黑山羊IL-10基因与挪威山羊IL-10基因亲缘关系最近。实时荧光定量PCR检测发现，在金堂黑山羊肺脏中IL-10基因表达水平显著高于脾脏、心脏、肌肉和肾脏（P<0.05），在肾脏中IL-10基因表达水平显著高于脾脏、心脏和肌肉（P<0.05），在脾脏、心脏和肌肉中IL-10基因表达水平较低，但差异不显著（P>0.05）。本试验结果揭示了IL-10基因具有高度的保守性，可能参与调控山羊的免疫应答反应。

本研究旨在对肠炎沙门氏菌（Salmonella Enteritidis）鞭毛蛋白FliC基因进行克隆，并对所获序列进行生物信息学分析。提取该菌基因组DNA作为模板，参考GenBank中肠炎沙门氏菌FliC基因序列设计1对引物，利用PCR克隆获得FliC基因，将其插入到克隆载体中进行测序，应用生物信息学软件分析该基因的核苷酸和氨基酸序列，利用BLAST进行同源性比对，并构建系统进化树，同时对该基因编码蛋白的理化性质、亲水性、信号肽、跨膜结构域、糖基化位点和B细胞抗原表位、二级结构、三级结构等进行分析。结果显示，试验成功克隆了1 518 bp的目的基因，编码505个氨基酸。同源性比对发现，FliC基因相对保守，与大肠杆菌属有较高的同源性。该蛋白的化学分子式为C₂₂₅₄H₃₇₀₁N₆₅₇O₈₀₃S₄，理论分子质量为52.981 ku，理论等电点为4.91；不稳定指数为16.86，是稳定存在的亲水蛋白质。结构分析结果显示，该蛋白没有信号肽或跨膜结构域，但具有8个N-糖基化位点、13个O-糖基化位点和60个磷酸化位点，同时还含有26个B细胞线性结合位点和5个T细胞结合位点。二级结构分析显示，α-螺旋、β-转角、延伸链和无规卷曲分别占43.76%、3.76%、20.99%和31.49%。本试验成功克隆了肠炎沙门氏菌鞭毛基因FliC，并对其序列结构进行了分析，为进一步研究鞭毛在肠炎沙门致病过程中的作用及基因工程疫苗的研制提供理论依据。

为研究甘肃棘豆黄酮的抗氧化及免疫活性，试验通过1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定其抗氧化活性，通过测定不同浓度甘肃棘豆黄酮对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、白细胞介素2（IL-2）和免疫球蛋白G （IgG）抗体形成的影响研究其免疫活性。结果显示，甘肃棘豆黄酮对DPPH自由基清除率最高为32.23%，略高于维生素E （28.55%），低于维生素C （97.05%）；对超氧阴离子自由基清除率最高为80.03%，高于维生素E （69.70%），低于维生素C （98.69%）；对羟基自由基清除率最高为30.39%，低于维生素C （98.98%）、略低于维生素E （32.57%）。在小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验中，随着甘肃棘豆黄酮溶液浓度的提高，脾脏淋巴细胞相对增殖率也提高，当其浓度为200 μg/mL时，小鼠脾脏淋巴细胞的增殖率为23.40%；200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组IL-2水平极显著高于对照组（P<0.01），50和100 μg/mL甘肃棘豆黄酮组与对照组无显著差异（P>0.05）；各甘肃棘豆黄酮组IgG抗体水平均极显著高于对照组（P<0.01），其中，50 μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于100和200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组（P<0.01），100 μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组（P<0.01）。综上所述，甘肃棘豆黄酮具有较好的抗氧化活性及免疫活性。

为探究亚油酸对反刍动物瘤胃中溶纤维丁酸弧菌脂肪酸合成的影响，试验用不同水平亚油酸培养基进行溶纤维丁酸弧菌体外厌氧培养试验，分光光度计测定菌液D_{600 nm}值达到1.0时，在培养基中添加亚油酸，使试验1组（对照）、2、3及4组培养基亚油的浓度分别为0、2.5、5.0及7.5 mg/100 mL，培养24 h后收集菌液检测35种脂肪酸含量。结果显示，细菌代谢相关的C8：0、C11：0、C14：0、C15：0、C17：0、C17：1、C18：1（n-9） C、C18：2（n-6） C、C18：3（n-6）、C20：0、C20：2、C20：3（n-3）、C20：3（n-6）、C20：5（n-3）、C21：0、C22：0、C22：2、C22：1（n-9）及C22：6（n-3）脂肪酸随着培养基中亚油酸浓度的提高无显著变化（P>0.05）；培养基中添加亚油酸使C10：0、C12：0、C16：0、C18：0、C20：4（n-6）、C23：0、C24：1合成量显著减少（P<0.05）；而C15：1及C18：3（n-3）合成量在2.5 mg/100 mL亚油酸组显著增加（P<0.05）；C14：1在对照组中合成量最高，在添加亚油酸的试验组中，随着亚油酸含量增加而增加；C24：0在7.5 mg/100 mL亚油酸组合成量最高。综上所述，亚油酸对于溶纤维丁酸弧菌合成脂肪酸有一定影响作用，可抑制C10：0、C12：0、C16：0、C18：0、C23：0、C14：1、C20：4（n-6）等脂肪酸的合成，C15：1、C16：1、C18：3（n-3）含量增加，但超过一定量时合成量会减少。

硫化氢（H₂S）是一种无色具有臭味的气体，不仅是畜禽舍内的一种有毒有害物质，而且近年来发现H₂S是继NO、CO之后第3种气体信号分子。H₂S在胃肠中可以通过沙门氏菌、幽门螺旋杆菌等对含硫有机物及硫酸盐分解和还原产生，也可以通过胱硫醚-β-合成酶（CBS）、胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）、半胱氨酸转移酶（CAT）与3-巯基丙酮酸硫转移酶（3-MST）等催化L-半胱氨酸等含硫氨基酸产生。H₂S具有多种生理病理学作用，可通过阻断细胞色素C氧化酶而抑制线粒体呼吸（高浓度情况下），造成细胞凋亡，同时也能下调BCL-2及NF-κB等抗凋亡基因表达，促进细胞凋亡；可通过调节Caspase3而抑制细胞凋亡（低浓度情况下），还可以与NF-κB的P65发生巯基化反应促进下游抗凋亡基因表达而发挥抗凋亡作用。高浓度的H₂S可以上调NF-κB、P38、ERKE1/2等基因表达，加重炎症反应；低浓度H₂S可以通过抑制NF-κB信号通路发挥抗炎作用。作者通过综述H₂S气体的生成及其在细胞凋亡和炎性反应中的双重作用，为深入了解H₂S在疾病发展过程中的生理、病理机制提供参考。

本试验以表达猪乳铁蛋白肽的重组屎肠球菌（pNZ8112-PLFcin/Ef）饲喂断奶仔猪，研究其对仔猪生长性能的影响和抗产肠毒素大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC）感染的效果。选取28日龄体重相近的健康断奶仔猪36头，随机分为3组（重组屎肠球菌组、空载体组和培养基组），每组3个重复，每个重复4头仔猪。重组屎肠球菌组和空载体组分别饲喂添加pNZ8112-PLFcin/Ef （6×10¹² CFU/kg）和pNZ8112/Ef （6×10¹² CFU/kg）的基础日粮，而培养基组饲喂含有相同体积的GM17液体培养基的基础日粮。试验期26 d。结果显示，与培养基组相比，重组屎肠球菌组断奶仔猪的平均日增重极显著提高（P<0.01）；料重比显著降低（P<0.05）；腹泻率明显降低，肠道菌群的均匀度和多样性指数均下降。为进一步探究表达猪乳铁蛋白肽的重组屎肠球菌对断奶仔猪抵抗ETEC感染的保护作用，在连续饲喂21 d后，每个重复中随机挑选1头体况相近的断奶仔猪灌服ETEC。结果发现，与培养基组相比，攻菌后重组屎肠球菌组断奶仔猪血清白细胞介素-2（IL-2）、免疫球蛋白G （IgG）含量、肠黏液中分泌型免疫球蛋白A （sIgA）水平均显著升高（P<0.05）；脾脏指数显著提高（P<0.05），但胸腺指数、肠段长度及重量则均无显著差异（P>0.05）。综上所述，表达猪乳铁蛋白肽的重组屎肠球菌能够起到促进断奶仔猪生长及抗ETEC感染的保护作用。

植物提取物（PE）是通过物理化学等方式从植物中得到的单一或混合物质，含有多酚、生物碱、多糖、精油等活性物质。其生物学功能多样：调控抗氧化酶活，降低过氧化物含量，抑制或清除自由基等；通过调控NF-κB、ERK、JNK活化及相关转录因子的表达，实现机体免疫应答；降低炎性因子及其相关基因表达，缓解炎症；具有抗菌作用，不容易产生耐药性；通过改变癌细胞细胞周期，实现细胞凋亡，达到抗癌目的；对疟原虫、丝虫、克氏锥虫等寄生虫有显著抑制作用。植物提取物在仔猪生产上应用广泛，具有良好的效果：能提高仔猪平均日增重（ADG）、饲料转化率等生长性能，如菠萝茎、八角提取物；促进仔猪消化吸收，提高营养物质代谢；降低血液转氨酶、碱性磷酸酶（AKP）活性，缓解应激；提高仔猪血液抗氧化酶活性，降低过氧化物水平；提高仔猪血液细胞因子、免疫球蛋白的含量，增强机体免疫功能；调控肠道菌群，改善肠道黏膜形态，减少仔猪腹泻。植物提取物是绿色健康的添加剂，其广泛普及可大幅度减少抗生素的使用。随着生物技术的发展，植物提取物在健康养殖中将发挥越来越大的作用。

本试验通过饲养试验研究了京红1号商品代蛋鸡产蛋后期钙的适宜需要量，旨在为京红1号商品代蛋鸡营养标准的制定提供一定的基础数据。采用单因子试验设计，选用52周龄的京红1号蛋鸡360只，随机分为4个处理，每个处理6个重复，每个重复15只鸡，饲喂玉米-豆粕-植酸酶型基础日粮，4个处理的钙水平分别为2.91%、3.94%、4.38%和4.98%，试验期6周。试验期间每天记录蛋鸡产蛋数、蛋重和不合格蛋数，每周以重复为单位统计采食量。试验结束时，每个重复取3枚鸡蛋测定蛋品质。结果表明：①不同钙水平对蛋鸡平均日产蛋率、平均蛋重、平均日产蛋量、平均日采食量和料蛋比的影响均不显著（P>0.05），但3.94%处理组料蛋比和平均日采食量相对于其他处理组都有所降低；3.94%处理组的破损蛋率显著低于4.38%和4.98%处理组（P<0.05）；②不同钙水平日粮对蛋壳厚度影响显著（P<0.05），4.38%处理组蛋壳厚度显著高于2.91%和4.98%处理组（P<0.05），3.94%处理组显著高于4.98%处理组（P<0.05）；3.94%处理组的蛋壳强度最大，蛋壳比例最适宜，但二者在各个处理间差异不显著（P>0.05）；③通过建立蛋壳厚度与日粮钙水平间的回归关系估测日粮最佳钙水平为3.84%。综合本试验结果，在饲喂玉米-豆粕-植酸酶型基础日粮条件下，3.84%~3.94%钙水平日粮能改善京红1号蛋鸡产蛋后期蛋壳厚度、提高蛋重、降低破损蛋率，有利于其生产性能的发挥。

哺乳动物的肠道内栖息着庞大复杂的微生物群体，其微生物群体与宿主的消化吸收、物质的营养代谢和免疫功能密切相关，是影响机体健康的重要因素之一。随着分子生物学技术在肠道微生物领域的应用，特别是新一代测序技术的快速发展，使得人们对复杂的肠道微生物的研究更加深入。基于宏基因组学技术不仅能够研究肠道微生物组的多样性、揭示消化道微生物对宿主生理代谢的影响，还能进一步深入挖掘新的功能基因，并揭示宿主基因与微生物组间的互作关系和共同进化。作者综述了宏基因组学技术在哺乳动物肠道微生物中的主要应用和存在的不足，并展望了其在肠道微生物研究中的广阔应用前景，从而加深人们对肠道微生物影响宿主肠道健康作用的认识。

本试验旨在研究日粮中添加黄芪多糖和丁酸梭菌及其复合剂对蛋雏鸭生长性能和血清生化指标的影响。选取1日龄健康绍兴公鸭600只，随机分为5组，每组6个重复，每个重复20只。Ⅰ组饲喂基础日粮（对照组），Ⅱ~Ⅴ组分别在基础日粮中添加40 mg/kg的杆菌肽锌（抗生素组）、800 mg/kg的黄芪多糖、250 mg/kg丁酸梭菌、800 mg/kg黄芪多糖+250 mg/kg丁酸梭菌复合剂，试验期为28 d。结果显示：①1~14日龄时，各组平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）差异均不显著（P>0.05）。15~21日龄时，与Ⅰ、Ⅱ组相比，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组ADG显著提高（P<0.05）、F/G显著降低（P<0.05）；22~28日龄时，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组ADG显著高于Ⅰ组（P<0.05）；Ⅴ组ADFI显著高于其他组（P<0.05），Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组F/G显著低于Ⅰ、Ⅱ组（P<0.05）。1~28日龄时，与Ⅰ、Ⅱ组相比，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组ADG显著提高（P<0.05）、F/G显著降低（P<0.05）。②试验第28天时，与Ⅰ组相比，Ⅴ组三碘甲状腺原氨酸（T3）含量显著提高（P<0.05）；Ⅲ、Ⅴ组甲状腺素（T4）、生长激素（GH）含量显著提高（P<0.05）；各组间血清皮质醇（CORT）含量无显著差异（P>0.05）；Ⅳ、Ⅴ组白细胞介素-2（IL-2）显著高于Ⅰ、Ⅱ组（P<0.05）。Ⅲ、Ⅴ组干扰素-γ（IFN-γ）显著高于其他组（P<0.05）。综上所述，日粮中添加黄芪多糖和丁酸梭菌可一定程度上提高蛋雏公鸭生长性能，改善血清生化指标，黄芪多糖和丁酸梭菌复合添加效果优于单独添加。

试验旨在研究反季节给繁殖母羊补喂褪黑素（melatonin，MLT）及在MLT基础上补喂来曲唑（letrozole，LE）和N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartate，NMDA）对母羊血浆繁殖相关激素水平的影响，为调控母羊发情药物的开发及应用提供新思路。试验选取40只（3.0±0.5）岁经产萨福克母羊（平均体重为76.23 kg±12.25 kg）随机分为4组，每组10只，分别为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组，分别饲喂基础日粮、基础日粮+MLT 10 mg/（只·d）、基础日粮+MLT 10 mg/（只·d）+LE 7 mg/（只·d）、基础日粮+MLT 10 mg/（只·d）+LE 7 mg/（只·d）+NMDA 300 mg/（只·d）。结果显示，与对照组相比，试验Ⅰ组母羊血浆中促卵泡素（FSH）、雌二醇（E₂）、雌三醇（E₃）及双氢睾酮（DHT）水平均极显著升高（P<0.01），睾酮（T）水平显著降低（P<0.05）；试验Ⅱ组，母羊血浆MLT和LH水平均极显著升高（P<0.01），FSH水平显著升高（P<0.05）；试验Ⅲ组，母羊血浆中MLT和促性腺激素释放激素（GnRH）水平均显著升高（P<0.05）。与试验Ⅰ组相比，试验Ⅱ组母羊血浆中MLT显著升高（P<0.05），LH和T水平均极显著升高（P<0.01）。试验Ⅲ组与试验Ⅰ、Ⅱ组相比，FSH水平极显著降低（P<0.01）。综上所述，MLT和LE对母羊繁殖相关激素的释放有促进作用，且两者结合使用可达到调控母羊繁殖相关激素水平的效果；MLT、LE和NMDA组合应用对母羊繁殖激素调控效果不佳。

本试验旨在研究苎麻青贮饲料品质及以苎麻青贮饲料为唯一粗饲料使用时，不同粗蛋白质（CP）水平精料补充料对西门塔尔牛生长性能和血清生化指标的影响。试验将苎麻与玉米秸秆按照质量比为1：1的比例混合均匀后打捆制成苎麻青贮饲料。选择年龄相近，体重为（324.83±30.27） kg的健康西门塔尔肉牛18头，随机分为3组，每组6头，1头牛为1个重复，分别饲喂CP含量为18.0%（高CP水平，试验Ⅰ组）、16.0%（中CP水平，试验Ⅱ组）和14.0%（低CP水平，试验Ⅲ组）的精料补充料。预试期10 d，正试期60 d。结果表明，苎麻与玉米秸秆混合青贮后，感官等级评定为1级优良，pH为4.24，氨态氮（NH₃-N）含量显著增加（P<0.05），干物质（DM）、有机物（OM）、CP、中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）、钙（Ca）和总磷（TP）含量均无显著差异（P>0.05）。饲养试验结果表明，试验Ⅰ组肉牛平均日增重（ADG）最高，达到1.49 kg/d，试验Ⅱ、Ⅲ组ADG与试验Ⅰ组相比分别降低了14.09%和11.41%（P>0.05）。3个试验组的干物质采食量（DMI）和料重比（F/G）均无显著差异（P>0.05）。不同CP水平精料补充料对西门塔尔牛血清中碱性磷酸酶（ALP）、天门冬氨酸转移酶（AST）、ALT/AST、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、白球比（A/G）、总胆固醇（TCHO）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）均无显著影响（P>0.05），但是试验Ⅰ组血清丙氨酸转移酶（ALT）活性显著高于试验Ⅲ组（P<0.05），但与试验Ⅱ组无显著差异（P>0.05）。综上，苎麻的营养水平较高，和玉米秸秆混合后青贮可得到品质较好的苎麻青贮饲料；将苎麻青贮饲料作为肉牛唯一粗饲料来源，高CP含量（18%）的精料补充料可提高肉牛的生长性能。

本试验旨在利用康奈尔净碳水化合物-蛋白质体系（CNCPS）的原理和方法评定不同程度热处理玉米乙醇糟（DDGS）的营养价值，并探究CNCPS组分及其瘤胃降解特性和小肠消化率与美拉德反应中间产物糠氨酸之间的相关性，为饲料营养价值的评定提供新的研究方法和思路。本试验将湿DDGS进行不同温度（110、120、130℃）、不同时间（0.5、1.0、1.5 h）的烘干处理，采用常规化学分析方法并结合CNCPS和AMTS-Cattle数据库对蛋白质各组分的瘤胃降解特性和小肠消化特性进行估测，同时采用高效液相色谱法测定糠氨酸的含量，进而探求CNCPS各组分瘤胃降解特性和小肠消化率与糠氨酸含量之间的相关性并建立回归方程。结果显示：①不同程度热处理的DDGS之间，糠氨酸含量、蛋白质组分、瘤胃可降解蛋白质组分、瘤胃不可降解蛋白质组分、小肠可消化蛋白质组分均存在显著差异（P<0.05）。②糠氨酸与蛋白质PA2、PB1、PB2和PC组分，瘤胃可降解蛋白RDPB2组分，瘤胃不可降解蛋白RUPB2、RUPC和TRUP组分，小肠消化蛋白IDGPB2组分间均存在显著相关性（P<0.05），并可通过回归建立预测方程。综合试验结果，经过不同程度热处理的DDGS的蛋白质组分和糠氨酸含量存在显著相关性，可以利用糠氨酸含量对不同程度热处理DDGS的蛋白质组分的瘤胃降解特性和小肠消化率进行估测。

家禽的天然免疫应答在抵抗病毒感染的过程中起着关键性作用，视黄酸诱导基因-Ⅰ（retinoic acid inducible gene-Ⅰ，RIG-Ⅰ）作为细胞质内一类识别病毒双链RNA的模式识别受体，与天然免疫应答密切相关。它可通过RNA配体结合病原相关分子模式监测细胞质中的病毒RNA，此过程激活了RIG-Ⅰ及下游线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS），最终导致干扰素调节因子（IRF3/7）和核因子κB （NF-κB）活化，诱导产生Ⅰ型干扰素等免疫细胞因子，进而使细胞做出相应的抗病毒天然免疫反应。但由于鸡体内缺乏RIG-Ⅰ基因，目前大多将鸭源或鹅源RIG-Ⅰ基因转染鸡成纤维母细胞（DF-1）研究RIG-Ⅰ基因在鸡感染禽类病毒时是否具有免疫功能。文章介绍了RIG-Ⅰ在家禽体内的表达及其介导的抗病毒天然免疫信号通路，并简述了RIG-Ⅰ在家禽体内抗病毒作用的研究概况，为抑制家禽病毒的感染和免疫系统研究，以及研制新型抗病毒疫苗或免疫佐剂等提供参考。

为分析福建黄兔、新西兰兔、日本大耳白兔群体内的遗传变异情况和群体间的遗传相关性，本试验选取3个品种兔各25只，分别耳静脉采血并采用试剂盒抽提全血基因组，运用15个微卫星标记，结合荧光PCR技术和毛细管电泳方法获得目的片段，通过计算等位基因数、有效等位基因数、杂合度、多态信息含量和遗传距离，分析3个品种兔的遗传多样性。结果显示，3个品种兔在15个座位共检测到110个等位基因，平均等位基因数为7.3个，其中福建黄兔、新西兰兔和日本大耳白兔分别检测到95、95和88个等位基因，且分别在11、12和11个微卫星座位表现为高度多态，表明3个品种兔在筛选的15个微卫星座位均呈现较丰富的遗传多态信息。Hardy-Weinberg遗传平衡检验结果表明，福建黄兔、新西兰兔和日本大耳白兔分别有8、8和6个座位处于Hardy-Weinberg不平衡状态。Nei氏遗传距离分析显示，福建黄兔与新西兰兔、福建黄兔与日本大耳白兔、新西兰兔与日本大耳白兔的Nei氏遗传距离分别为0.1761、0.2347和0.0432。遗传距离越小时，相似度越高，亲缘关系越近，因此，新西兰兔与日本大耳白兔间的亲缘关系最近，福建黄兔与日本大耳白兔间的亲缘关系最远。

本研究旨在检测猪脂联素（adiponectin，ADIPOQ）基因外显子2的多态性，并分析其对山西白猪体重和体尺性状的影响。采用PCR-SSCP技术检测了长白猪、大白猪、杜洛克猪、山西白猪、山西黑猪和马身猪6个猪种392个个体ADIPOQ基因外显子2的多态性，并采用GLM程序分析了ADIPOQ基因外显子2多态性与山西白猪体重和体尺性状的关联性。结果显示，在ADIPOQ基因外显子2的89 bp处检测到G→A错义突变，引起缬氨酸（Val）向异亮氨酸（Ile）的转变。ADIPOQ基因外显子2存在3种基因型：AA、AB、BB，2个等位基因：A和B。杜洛克猪中只有BB基因型，长白猪、大白猪、山西白猪和山西黑猪中BB基因型为优势基因型，马身猪中AA基因型频率最高。在引入品种长白猪、大白猪和杜洛克猪中B等位基因为优势等位基因，基因频率分别为0.96、0.96和1.00；在地方品种马身猪中A等位基因频率（0.52）略高于B等位基因（0.48）；在培育品种山西白猪和山西黑猪中B等位基因频率分别为0.76和0.78，介于引入猪种和地方品种之间。基因型频率分布在马身猪、山西白猪和山西黑猪之间无显著差异（P>0.05），杜洛克猪与长白猪、大白猪间差异均不显著（P>0.05），而长白猪和大白猪间差异显著（P<0.05），任意一个引入品种与马身猪、山西白猪和山西黑猪之间的差异均达到极显著水平（P<0.01）。ADIPOQ基因外显子2多态性对断奶重有显著影响，其中BB基因型个体28日龄断奶重显著高于AA和AB基因型（P<0.05），AA和AB基因型间无显著差异（P>0.05），但对其他性状无显著影响，说明该位点只在个体发育早期阶段起作用。

分子标记是以个体间核苷酸序列变异为基础的遗传标记，是DNA水平上的遗传多样性的直接反应。分子标记技术是在DNA水平上进行多态性分析的一种技术手段，具有效率高、准确度高的特点，在绵羊育种中有着广泛的应用。分子标记技术不仅可以对绵羊的基因进行定位，而且可以对绵羊群的遗传结构进行分析，重要的是可以进行绵羊的标记辅助育种，对绵羊的育种起重要作用。作者介绍了以Southern杂交、PCR扩增、重复序列和单核苷酸多态性（SNP）为基础的分子标记技术的基本原理及优缺点，重点介绍了这些分子标记技术在绵羊的体尺、屠宰、繁殖等性状中进行标记辅助选择时的应用，揭示了在实际生产中分子标记技术对于绵羊选种与选配、提高其经济价值的重要意义，并基于目前分子标记技术在绵羊育种中的运用，以及未来分子标记技术的应用作出展望。

促卵泡素受体（FSHR）作为影响动物繁殖力的主效基因，已在不同物种中被广泛和持续地研究。作者归纳和分析了山羊FSHR基因的结构及其蛋白质的结构、作用机制、表达范围和规律，总结了该基因单核苷酸多态性的遗传效应，发现山羊FSHR基因的生物信息和基因效应相关研究比较深入，且近期在信号传导方面的研究证实FSHR基因是卵泡形成和发育过程中的关键因素；与不同种群繁殖性能的关联分析提示，FSHR基因的某些单核苷酸突变位点可作为遗传标记辅助选择的依据，但不同山羊种群中的突变效应仍需进一步证实。

为了解猪伪狂犬病病毒（porcine pesudorabies virus，PRV）gB和gE基因变异及遗传演化情况，本研究针对PRV FS-2015野毒株，应用"蚀斑法"对组织病料中病毒进行三轮纯化，应用全长扩增引物对FS-2015株gB和gE基因进行全基因扩增，并对PCR产物进行测序和序列分析。结果显示，PRV FS-2015株的gB、gE基因与国内外PRV参考毒株的核苷酸同源性分别为97.0%~100.0%和97.5%~99.7%，氨基酸同源性分别为96.4%~100.0%和95.3%~99.7%。氨基酸变异位点分析表明，FS-2015株的gB和gE基因均有位点突变和缺失。遗传进化分析表明，FS-2015株与国内近几年分离的PRV变异株GY、ZJ01、HB1201、HN1201、JS2012、BJ-YT和BP属于同一分支，同源性较高，亲缘关系较近；与PRV经典株Kaplan、Becker、NIA3、Kolchis、Bartha和Yangsan株属于不同分支，同源性较低，亲缘关系较远。从PRV FS-2015毒株与国内外经典毒株和当前国内流行的变异毒株的分析结果可知，PRV FS-2015毒株发生了一定的变异，属于当前国内流行变异毒株。本研究结果为广东省伪狂犬病分子流行病学调查、伪狂犬病的防控和疫苗株挑选工作提供参考数据。

为了解广西地区牛呼吸道疾病综合征（bovine respiratory disease complex，BRDC）的病原情况，本研究通过RT-PCR/PCR方法和细菌分离鉴定方法对2016-2017年送检的117份患有呼吸道疾病的病料进行病原诊断，并对主要分离菌进行药物敏感性试验。结果显示，RT-PCR/PCR方法检测的肺炎克雷伯氏菌、牛支原体、化脓隐秘杆菌、多杀性巴氏杆菌、牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）、溶血性曼氏杆菌的检出率分别为41.0%（48/117）、28.2%（33/117）、20.5%（24/117）、15.4%（18/117）、12.8%（15/117）、5.1%（6/117），而细菌分离鉴定方法检测的肺炎克雷伯氏菌、大肠杆菌、牛支原体、化脓隐秘杆菌、多杀性巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌的检出率分别为41.0%（48/117）、33.3%（39/117）、17.1%（20/117）、7.7%（9/117）、2.6%（3/117）、2.6%（3/117），牛副流感病毒3型、牛呼吸道合胞体病毒和牛病毒性腹泻病毒未检出，且PCR方法更敏感。药敏试验结果显示，20株牛支原体对β-内酰胺类、磺胺类、多肽类药物的耐药率为90.0%~100.0%，对喹诺酮类、庆大霉素、阿米卡星和卡那霉素敏感（耐药率为在10.0%~25.0%）；30株大肠杆菌和30株肺炎克雷伯氏菌除了对头孢噻肟、头孢曲松和头孢他啶敏感外（耐药率分别为13.3%~20.0%、10.0%~30.0%），对其他15种药物均具有耐药性（耐药率分别为50.0%~100.0%、40.0%~100.0%）。综上所述，广西地区牛呼吸道疾病主要以牛支原体、大肠杆菌和肺炎克雷伯氏菌引发的混合感染为主，且分离菌均已出现不同程度的耐药性。

试验旨在分离兔出血症病毒（rabbit hemorrhagic disease virus，RHDV）镇江株，分析其遗传进化变异，并表达具有良好活性的重组VP60蛋白。通过排除细菌感染、血凝（HA）和血凝抑制（HI）检测、动物攻毒试验与病毒传代、LD₅₀测定等方法，自江苏省镇江市某兔场发病死亡动物肝脏组织样品中分离病原并鉴定；RT-PCR方法获得VP60基因，通过分析VP60基因核苷酸及氨基酸序列研究其遗传进化；将VP60基因与pCold-Sumo载体连接，构建低温诱导、融合Sumo标签原核表达载体，15℃、IPTG诱导表达重组VP60蛋白并对表达产物进行反应原性鉴定。结果显示，分离鉴定获得RHDV ZJ2015毒株，该毒株能凝集人"O"型红血球，HA效价为11log2，其血凝性能被RHDV （AV33）抗血清抑制，该毒株的LD₅₀为10^-6.38/mL，具有较强的毒力；RT-PCR扩增得到大小约为1 740 bp的特异性条带，系统进化树分析显示，该毒株属于RHDV1抗原遗传变异株（RHDVa），与RHDV1和RHDV2 VP60基因核苷酸序列同源性分别为89.4%~97.6%和81.1%~81.5%，氨基酸序列同源性分别为93.8%~98.3%和87.4%~87.6%。构建的低温原核融合表达质粒pCold-VP60在大肠杆菌Rosetta （DE3）中成功表达，通过SDS-PAGE及Western blotting分析，在分子质量74 ku处有特异性表达蛋白条带，且与抗血清发生特异性抗原抗体结合反应，说明重组蛋白具有良好的反应原性。本研究为开展兔病毒性出血症流行病学研究、开发新型重组疫苗与诊断试剂提供参考依据。

为建立检测血清中非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）抗体的间接ELISA方法，本试验将ASFV p30基因进行原核表达，采用SDS-PAGE和Western blotting方法对重组蛋白进行表达鉴定和免疫原性分析，随后以纯化的重组蛋白为包被抗原，经条件优化、特异性试验、敏感性试验和重复性试验，建立一种血清中ASFV抗体的检测方法。结果显示，ASFV p30基因成功克隆到原核表达载体pET-32a （+）中，获得pET-32a-p30重组质粒；转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞进行诱导表达，得到P30重组蛋白，重组蛋白大小约为42 ku，主要以包涵体形式存在；Western blotting结果显示，纯化后的蛋白具有良好的免疫原性；以纯化的P30重组蛋白为包被抗原，建立了检测ASFV抗体的间接ELISA方法，通过方阵试验对间接ELISA方法进行优化，最终确定了抗原最佳包被浓度为1.2 μg/mL，待检血清最佳稀释倍数为1：100，最佳封闭液为1% BSA，酶标抗体最佳稀释度为1：4 000，以此建立的ASFV间接ELISA方法临界值为0.322。本方法仅与ASFV阳性血清发生特异性反应，与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型及猪流行性腹泻病毒阳性血清均无交叉反应，具有较强的特异性。该方法检测ASFV阳性血清灵敏度可达到1：1 600；批内重复性和批间重复性变异系数均<10%。本试验建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、灵敏度和重复性，可初步应用于ASFV抗体的检测。

为了解山东省禽腺病毒（fowl adenovirus，FAdV）毒株的基因遗传演化情况及致病性，本试验对山东省两家疑似暴发鸡包涵体肝炎和心包积液综合征鸡场采集的病料（肝脏、脾脏）进行PCR鉴定，并将鉴定为FAdV的2份阳性病料提取病毒液，接种鸡肝癌细胞（LMH）进行毒株传代培养和细胞病变（CPE）观察、PCR检测、TCID₅₀测定、鸡胚致病性试验、SPF鸡回归试验、病毒hexon部分基因扩增及序列分析。结果显示，试验成功分离到2株FAdV，2株分离株细胞传第1代即可观察到CPE，PCR均可扩增出大小为500 bp的片段，且2株分离株细胞F5代TCID₅₀分别为10^-7.75/0.1 mL和10^-7.60/0.1 mL，均对7日龄SPF鸡胚有强致病性；第1分离株和第2分离株对21日龄SPF鸡攻毒死亡率分别为80%和15%。hexon基因核苷酸同源性分析结果显示，第1分离株与FAdV-4株同源性最高（99.57%），第2分离株与FAdV-8b株同源性最高（99.18%）。这2株FAdV分离株均与Ⅰ群禽腺病毒同源，与火鸡出血性肠炎病毒（HEV）所在的血清Ⅱ群及减蛋综合征病毒（EDSV）所在的血清Ⅲ群禽腺病毒位于不同分支。第1分离株基因型为C型，血清型为4型，命名为FAdV-SDC4株；第2分离株基因型为E型，血清型为8b型，命名为FAdV-SDE8b株。综上所述，FAdV-SDC4和FAdV-SDE8b株属于近几年国内流行毒株。本研究结果可为鸡包涵体肝炎、心包积液综合征的防控工作和疫苗株的选择提供科学依据。

试验旨在对猪乙型脑炎病毒（JEV，SA14-14-2株）在传代细胞上的繁殖培养特性及其制备的灭活疫苗免疫原性进行研究，确定猪JEV在细胞培养瓶中培养的关键技术参数及其灭活疫苗的免疫原性。以Vero细胞培养病毒，通过接种时间、接毒量、吸附时间、吸附温度、维持液pH、维持培养温度及培养时间7个条件的优化，将繁殖的病毒液冻融一次，采用病毒蚀斑数测定方法测定病毒滴度。按照优化好的条件繁殖一批毒液，经β-丙内酯灭活，与双相佐剂混合，制备成猪乙型脑炎灭活疫苗。两次免疫（间隔14 d）接种乙型脑炎抗体阴性仔猪，首次免疫前（0 d）、免疫后第7、14、21、28、35、42天采集血清，检测血清中和抗体。二免后第28天进行乙型脑炎P3强毒的攻击，攻毒前（0 d）、攻毒后第1、2、3、5、7、9天采集血浆，攻毒后第14天剖杀免疫猪，采集脑组织，检测血浆和脑组织中JEV。结果显示，用细胞培养瓶进行培养，将Vero细胞培养至48 h进行病毒接种，接种量为1 000 PFU/mL，病毒吸附温度为37℃，吸附时间为90 min，吸附后用pH 7.6~8.8维持液继续培养，培养温度为35℃，培养96 h后收获毒液，冻融一次，可获得较高滴度的病毒。仔猪免疫制备的灭活疫苗后血清抗体水平迅速升高，血浆和脑组织中均未检测出JEV，免疫组试验猪能抵抗强毒攻击，可获得有效免疫保护。本试验结果为猪乙型脑炎疫苗的生产提供了参考依据。

为研究补气血、补肝肾中草药复合添加剂的急性毒性，试验采用灌胃法，选取SPF级昆明小鼠40只，雌雄各半，随机均分为4组（对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组），以0.86 g/mL的中草药混悬液，每次0.4 mL/10 g灌胃，24 h内，高剂量组灌胃2次，每次0.4 mL；中剂量组灌胃2次，每次0.3 mL；对照组灌胃0.4 mL蒸馏水2次；低剂量组灌胃1次，0.2 mL。连续7 d，每天观察小鼠的精神状况和死亡情况。试验结束后，小鼠眼球采血，检测血液生理及生化指标；剖解小鼠，取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏称重，计算脏器指数，制作病理组织切片，观察各脏器病理变化。结果显示，试验期间各组小鼠未见异常；中、高剂量组小鼠体重极显著高于对照组（P<0.01）；高剂量组肝脏指数、脾脏指数均极显著高于其他组（P<0.01）；试验组小鼠白细胞总数较对照组极显著升高（P<0.01），但仍处在正常范围内；试验组小鼠血液肌酐显著降低（P<0.05），中剂量组尿素氮显著低于对照组（P<0.05）；各组间其他生化指标均差异不显著（P>0.05）；病理组织切片结果显示，各组肝脏、脾脏和肾脏均无任何病理变化。综上所述，中草药复合添加剂对蛋白质代谢有明显的促进作用，可提高机体免疫力和肾脏功能，其最大给药量（34.4 g/kg生药）是临床成人每天用药（0.371 g/kg）的92.7倍，证明该药物无毒性，安全性好。

莫西菌素（moxidectin，MOX）是由链霉菌发酵产生的奈马菌素经衍生化得到，具有良好的驱虫活性且对哺乳动物安全，主要应用于畜牧业。莫西菌素相较于其他阿维菌素类药物具有更好的脂溶性和水溶性，在动物体内脂肪组织中分布最高。莫西菌素通过与γ-氨基丁酸（GABA）结合，使Cl^-大量内流造成神经膜电位超极化，导致虫体麻痹死亡。给药途径和动物生理状况的不同会影响其峰血浆浓度和药物半衰期。莫西菌素在牛、羊、犬等动物体内具有很好的驱虫活性，其应用范围从哺乳动物逐渐扩展到鸟类，防治对象从线虫逐渐扩展到螨虫和部分病原菌，研究方向也从驱虫活性延伸至治疗人类疾病。随着莫西菌素应用范围的扩大和时间的延长，耐药性开始出现，可以采用莫西菌素和其他药剂混合等方式降低耐药性的产生速度。探究其更广泛的作用，需要不同研究领域研究人员的共同努力。

为探讨海藻硫酸多糖（sulfated polysaccharide from algae，SPA）及中药复方提取液（compound extracts of Chinese medicine，CECM）对H9N2亚型禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）的作用，将SPA及CECM以3种不同加药方式作用于接种了H9N2亚型AIV的10日龄SPF鸡胚中，无菌收集鸡胚尿囊液，测定血凝效价，检测2种药液对H9N2亚型AIV的预防、治疗及直接灭活作用。结果显示，SPA及CECM的最大安全浓度分别为50和200 mg/mL；3种不同加药方式下，不同浓度SPA及CECM均能极显著降低鸡胚尿囊液中H9N2亚型AIV的血凝效价（P<0.01），以直接灭活作用组的血凝效价降低幅度最大，预防作用组和治疗作用组次之。预防作用组，CECM高剂量组（200 mg/mL）的抗病毒效果显著优于SPA各剂量组（12.5、25和50 mg/mL）及CECM低、中剂量组（50和100 mg/mL）（P<0.05）；治疗作用组，SPA高剂量组（50 mg/mL）及CECM中、高剂量组（100和200 mg/mL）抗病毒效果显著优于SPA低剂量组（12.5 mg/mL）（P<0.05）；直接灭活作用组，SPA及CECM的抗病毒效果均佳，CECM各剂量组的抗病毒效果与SPA各剂量组差异极显著（P<0.01）。结果表明，SPA和CECM对10日龄鸡胚几乎无毒副作用；SPA及CECM均能显著抑制H9N2亚型AIV在鸡胚尿囊液中的增殖，以直接灭活作用组的抗病毒效果最佳，其抗H9N2亚型AIV作用的强弱与药物浓度、用药和病毒的感染时间顺序密切相关。

为了筛选有效的球虫消毒剂，本研究将柔嫩艾美耳球虫卵囊分别与16种常用消毒剂和1种高效抗球虫药物溶液（250 mg/L妥曲珠利溶液）混合作用2 h然后在2.5%重铬酸钾溶液中孢子化培养，或混合作用4 h后接种14日龄雏鸡，根据卵囊孢子化率、孢子化抑制率、每克粪便卵囊数量（oocysts per gram of feces，OPG）、病变计分和血便情况评价消毒剂和抗球虫药物抑杀球虫卵囊效果。结果显示，8%氨水对未孢子化卵囊和孢子化卵囊均表现为100%的抑杀效果；250 mg/L妥曲珠利、3%甲醛、4%苯酚、0.5%过氧乙酸、5% NaOH+10% NaCl和5% NaOH对球虫卵囊活性具有一定的抑制作用，孢子化抑制率超过10%，但是对孢子化卵囊抑杀作用不明显；而剩余10种常用消毒剂对球虫卵囊没有明显的抑杀作用。氨水抑杀球虫卵囊条件优化的试验结果显示，1%~8%氨水与未孢子化卵囊作用1 h以上，均可100%抑杀球虫卵囊活性。粪便干扰试验结果显示，粪便不影响2%和4%氨水对球虫卵囊的抑杀效果。本研究结果说明常用消毒剂和抗球虫药物不能有效杀灭球虫卵囊的活性，而氨水是一种高效球虫消毒剂。本研究结果可为开发新型高效球虫消毒剂和球虫病控制提供参考。

外泌体（exosome）是通过细胞内多泡体与细胞膜融合产生的纳米级细胞外膜泡，广泛分布在血清、尿液、唾液和其他生物液体中。外泌体作为细胞间通信和遗传物质的重要转移载体，可通过受体介导的相互作用或通过各种生物活性分子（如细胞膜受体、蛋白质、mRNA和miRNA）的转移直接刺激靶细胞，从而发挥其生物学功能。文章主要综述了外泌体内含蛋白质和miRNA的功能及外泌体在临床中的应用。外泌体内蛋白质和miRNA的功能包括生理状态下诱导机体免疫、递呈抗原、参与细胞间信号传导；病理状态下改变肿瘤微环境、促进癌细胞增殖、侵袭、加快血管生成、促进癌症发展；以及某些病毒可将其组分包装、整合到外泌体中来实现细胞间传播，或劫持外泌体，实现免疫逃避。作者主要介绍了其作为肺癌、乳腺癌、胰腺癌及结直肠癌等多种癌症早期诊断的生物性标志物，以及作为稳定性高、转运效率高、靶向性强的药物载体在临床中的应用。

为筛选对奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌（S.aureus）和大肠杆菌O8（E.coli O₈）具有良好抑菌作用的蒙药，本试验采用牛津杯法测定金银花、黄连、何首乌、地榆、五味子、秦皮、穿心莲、甘草、蒲公英、夏枯草、虎杖、柴胡、黄柏、苦参、石榴皮、板蓝根16味蒙药的抑菌圈直径，微量稀释法和平板法测定蒙药的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC）和最小杀菌浓度（minimal bactericidal concentration，MBC），棋盘法测定敏感蒙药对E.coli O8和S.aureus的协同指数（fractional inhibitory concentration index，FICI）。结果显示，黄柏、金银花、黄连、五味子、蒲公英、秦皮6味蒙药对S.aureus的抑菌圈直径为10.22~22.44 mm，MIC为15.6~250 mg/mL；五味子、金银花、黄连、秦皮4味蒙药对E.coli O8的抑菌圈直径为11.29~26.41 mm，MIC为15.6~500 mg/mL；黄柏与黄连联合用药对S.aureus的FICI为0.36，为协同作用，黄连与地榆联合用药对E.coli O8的FICI为0.48，为协同作用。综上所述，金银花、黄连、五味子、秦皮、蒲公英、黄柏6味蒙药对S.aureus综合抑菌效果达极敏或高敏；金银花、黄连、五味子、秦皮4味蒙药对E.coli O8综合抑菌效果达极敏或高敏，黄柏、黄连、秦皮在抑制S.aureus的组方中可优先考虑，黄连与地榆在抑制E.coli O8的组方中可优先考虑。

为探究无菌大鼠深二度烫伤感染模型机体炎性反应，试验利用无菌大鼠分别建立深二度烫伤损伤模型和烫伤后绿脓杆菌感染模型，比较这两种模型和SPF级大鼠深二度烫伤模型在愈合过程、炎性反应及病理变化等方面的异同。20只6周龄雌性Wistar无菌大鼠，在超净工作台内采用恒温恒压烫伤仪94℃作用8 s造成大鼠深二度烫伤，随机分为2组，一组伤口感染浓度为1×10⁵ CFU/mL绿脓杆菌菌液0.5 mL，一组不做处理，创面保持无菌状态，SPF级Wistar大鼠在同样条件下烫伤，创面不做处理。分别观察3组大鼠的伤口结痂时间、脱痂时间和愈合时间，并在烫伤前（0 h），烫伤后24 h、3 d和7 d时，取血清，检测炎性因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素1α（IL-1α）、粒细胞-巨噬细胞刺激因子（GM-CSF）的变化。结果显示，感染绿脓杆菌大鼠组开始结痂所需时间显著长于SPF级大鼠组和无菌大鼠组（P<0.05）；而脱痂及愈合所需时间显著变短（P<0.05）；感染绿脓杆菌组大鼠烫伤24 h时，皮下组织中可见淋巴细胞，有慢性炎性反应；3 d时，真皮深层有化脓性感染，横纹肌周围可见大量炎细胞，烫伤7 d时，皮下组织中有轻微血管扩张充血，化脓性感染减轻，无菌烫伤大鼠与SPF级烫伤大鼠皮肤在烫伤后一周内有轻度炎性反应。3组大鼠烫伤后，血清GM-CSF、IL-1α及TNF-α水平均较烫伤前显著升高（P<0.05）；烫伤24 h时，感染绿脓杆菌大鼠组和无菌大鼠组血清IL-1α水平显著高于SPF级大鼠组（P<0.05）；无菌大鼠组血清GM-CSF水平显著高于SPF级大鼠组和感染绿脓杆菌大鼠组（P<0.05）；烫伤3 d时，染绿脓杆菌大鼠组和无菌大鼠组血清IL-1α水平显著高于SPF大鼠组（P<0.05），无菌大鼠组血清GM-CSF水平显著高于染绿脓杆菌大鼠组（P<0.05）。综上所述，无菌大鼠对烫伤刺激反应迅速强烈，血清中炎性因子迅速升高，SPF级大鼠深二度烫伤后炎性反应缓慢；无菌大鼠深二度烫伤伤口感染1×10⁵ CFU/mL绿脓杆菌，脱痂时间和愈合时间反而缩短。