单精注射法生产转GFP基因猪胚胎的研究

›› 2007, Vol. 34 ›› Issue (6): 44-46.

单精注射法生产转GFP基因猪胚胎的研究

苗向阳1，方昌阁1，2，邵建军1，朱瑞良3，任慧英1

1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100094；2.中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京 100094； 3.山东农业大学动物科技学院，泰安 271018

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-06-20 发布日期:2007-06-20

Production of Porcine Transgenic Embryos Expressing GFP by Intracytoplasmic Sperm Injection(ICSI)

MIAO Xiangyang1,FANG Changge1,2,SHAO Jianjun1,ZHU Ruiliang3,REN Huiying1

1.Institute of Animal Science,Chinese Academy of Agricultural Science,Beijing 100094,China; 2.The State Key Laboratory for AgroBiotechnology, China Agricultural University, Beijing 100094,China; 3.College of Animal Science and Technology, Shandong Agricultural University, Taian 271018, China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2007-06-20 Published:2007-06-20

摘要/Abstract

摘要： 卵胞质内单精子注射(ICSI)的出现为治疗人类男性不育提供了新的途径。作为一种家畜胚胎工程新技术，ICSI可以解决猪的多精子受精问题。本研究用冷冻/解冻的猪精子与GFP基因孵育后对猪IVM卵母细胞进行ICSI，通过对猪ICSI卵母细胞发育能力和基因表达效率的分析，初步研究以精子为载体的转基因与卵细胞质内单精注射相结合的技术(SMGT-ICSI)生产转基因猪胚胎的技术路线的可行性。用GFP基因转染的精子注射后化学激活的ICSI卵母细胞基因表达率显著高于电激活处理的ICSI卵母细胞的基因表达率。用精子头部注射的猪卵母细胞和用完整精子注射的猪卵母细胞总基因表达效率无显著差异(P>0.05)。结果表明，用冷冻/解冻后的猪精子或精子头部与外源DNA孵育后通过ICSI方法生产转基因胚胎是可行的。

关键词: 卵母细胞; 单精注射; 胚胎

Abstract: Intracytoplasmic sperm injection(ICSI), which is a new technique of embryo engineering of domestic animals, can solve the problem of porcine polyspermy. Porcine ICSI was conducted using repeatedly frozen/thawed intact sperm or sperm head which were incubated with GFP gene for 30 minutes.The expression rate of GFP gene in ICSI oocytes activated by CaCl2 was higher than that of ICSI oocytes activated by electrical pulse. The result showed that SMGT-ICSI procedure for the production of transgenic porcine embryos was feasible.

Key words: oocytes; ICSI; embryo

中图分类号:

S814.8

苗向阳;方昌阁;邵建军;朱瑞良;任慧英 . 单精注射法生产转GFP基因猪胚胎的研究[J]. , 2007, 34(6): 44-46.

MIAO Xiangyang;FANG Changge;SHAO Jianjun;ZHU Ruiliang;REN Huiying . Production of Porcine Transgenic Embryos Expressing GFP by Intracytoplasmic Sperm Injection(ICSI)[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2007, 34(6): 44-46.

[1]	高子浩, 李嘉, 张琳惠, 张慈, 刘炳男, 李俊杰, 夏威. 线粒体在家畜卵母细胞成熟过程中的调控机制研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(5): 2232-2242.
[2]	李志毅, 李洁, 陈楚雯, 农意, 王佳燕, 王孜, 吴锦波, 李志雄. 藏鸡胚胎不同发育阶段腿肌组织中miRNA的分析及鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(4): 1681-1693.
[3]	徐光勇, 刘振田, 陈祥飞, 张美洁, 杜涛, 张俊波, 刘智辉, 邢雪松, 杜福良. 和牛OPU卵母细胞体外受精后胚胎发育潜能研究[J]. 中国畜牧兽医, 2025, 52(2): 730-739.
[4]	孙慧敏, 范冰峰, 张旭林, 邵静, 刘理想, 许保增. 梅花鹿早期妊娠不同时期血液转录组分析[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(9): 3892-3908.
[5]	郑湘民, 王玉琪, 徐冰洁, 孙朝阳, 高青山, 方南洙, 金庆国. 千金藤素对牛体外卵母细胞和早期胚胎抗凋亡能力的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(7): 2943-2952.
[6]	符彬彬, 王东升, 何凡, 李清春, 祁梦凡, 张化鹏, 黄涛. 猪miR-192靶向调控Wnt7a基因表达的研究[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(6): 2300-2307.
[7]	莫显红, 李俊杰, 郭成, 温诏禹, 邹宇柱, 赵文博, 徐振军. 家畜卵母细胞玻璃化冷冻损伤研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(6): 2524-2532.
[8]	罗安凤, 华再东, 杨彩侠, 陈矾. 核膜孔亚复合物Nup98/Rae1对小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(5): 1998-2006.
[9]	李有为, 程亚倬, 商继勇, 张廷龙, 孙铭菊. 哺乳动物小卵泡卵母细胞体外成熟的研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(3): 1171-1182.
[10]	莫显红, 陶庆华, 房义, 梁婧, 张佳音, 梁小航, 徐振军. 白血病抑制因子对牛卵母细胞体外发育能力的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(2): 462-469.
[11]	杜倩笙, 刘可可, 唐非台, 唐小川, 何家康, 王晓丽. 绞股蓝多糖对H₂O₂损伤小鼠卵母细胞及线粒体的保护作用[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(12): 5371-5379.
[12]	罗安凤, 张玉清, 王昕昕, 杨彩侠, 解迪. Ola1对小鼠早期胚胎体外发育的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(11): 4871-4879.
[13]	英提扎尔·阿不力孜, 郭延华, 艾日夏提·地里夏提, 艾克拜尔·艾合麦提, 妮格尔阿依·安尼瓦尔, 王旭光, 阿布力孜·吾斯曼. 单宁酸缓解氟化钠诱导小鼠卵母细胞氧化应激的研究[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(10): 4246-4254.
[14]	刘可可, 薛梦琦, 唐非台, 杜倩笙, 王欣雨, 董胤余, 王晓丽. 抗冷冻蛋白Ⅲ对玻璃化冷冻小鼠卵母细胞线粒体的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(8): 3180-3188.
[15]	张笑梦, 焦安惠, 王玉琪, 方南洙, 金庆国. 添加罗格列酮对小鼠卵母细胞氧化还原稳态的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 1818-1827.