以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体的重组NDV-HN口服疫苗的构建与鉴定

›› 2013, Vol. 40 ›› Issue (11): 59-63.

以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体的重组NDV-HN口服疫苗的构建与鉴定

田芳华, 程相朝, 张春杰, 李银聚, 李静, 刘一尘

河南科技大学动物科技学院, 河南洛阳 471003

收稿日期:2012-07-04 出版日期:2013-11-20 发布日期:2013-12-19
通讯作者: 程相朝 E-mail:chengxch@126.com
作者简介:田芳华(1987-),女,河南人,硕士生,研究方向:动物疫病发生的分子与免疫学机制。
基金资助:
河南科技大学研究生创新基金(CXJJ-YJS-Z005);河南省科技公关项目(112102110019)。

Construction and Identification of Recombinant Attenuated Salmonella typhimurium Oral NDV-HN Vaccine

TIAN Fang-hua, CHENG Xiang-chao, ZHANG Chun-jie, LI Yin-ju, LI Jing, LIU Yi-chen

College of Animal Science and Technology, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471003, China

Received:2012-07-04 Online:2013-11-20 Published:2013-12-19

摘要/Abstract

摘要： 试验旨在构建表达鸡新城疫病毒(NDV)HN基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-HN)。以pMD18-T-HN为模板,通过PCR扩增出NDV HN基因片段,定向插入原核表达载体pYA3493中,将重组表达质粒pYA3493-HN转入χ6097,再转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL1344ΔcrpΔasd,通过双酶切和PCR对质粒进行鉴定。结果表明,携带NDV HN基因片段的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-HN)构建成功。本研究结果为开发鸡新城疫的口服基因工程活载体疫苗奠定了基础。

关键词: 新城疫; HN基因; 原核表达载体pYA3493; 减毒鼠伤寒沙门氏菌

Abstract: The study was aimed to construct prokaryotic expression vector of NDV HN gene using attenuated Salmonella typhimurium SL1344ΔcrpΔasd as a carrier. The HN gene was cloned from the plasmid pMD18-T-HN by polymerase chain reaction (PCR) and inserted into the vector pYA3493. Electricity transformation method was used in this recombinant plasmid pYA3493-HN transformating to recepted state Salmonella typhimurium SL1344ΔcrpΔasd. The recombinant plasmid pYA3493-HN was identified by digestion of endonuclease, PCR and sequencing. The results confirmed that recombinant attenuated Salmonella typhimurium vaccine SL1344ΔcrpΔasd(pYA3493-HN) was constructed successfully, which provided a foundation for research and development of NDV HN orally genetic engineering live vaccine.

Key words: Newcastle disease; HN gene; prokaryotic expression vector pYA3493; attenuated Salmonella typhimurium

中图分类号:

S852.612

田芳华, 程相朝, 张春杰, 李银聚, 李静, 刘一尘. 以减毒鼠伤寒沙门氏菌为载体的重组NDV-HN口服疫苗的构建与鉴定[J]. , 2013, 40(11): 59-63.

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