应用逆转录套式PCR检测猪流行性腹泻病毒

中国畜牧兽医

应用逆转录套式PCR检测猪流行性腹泻病毒

王金良¹, 谢金文¹, 唐娜¹, 祖立闯², 李娇², 汪洋², 沈志强^1,2

1. 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州 256600;
2. 山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600

收稿日期:2012-03-21 出版日期:2012-09-20 发布日期:2012-09-18
通讯作者: 沈志强(1963－),男,研究员,博士,从事兽医生物制品的研究开发。
作者简介:王金良(1978－),男,黑龙江人,助理研究员,博士,从事预防兽医学研究工作。
基金资助:
山东省自然科学基金资助项目(ZR2010CQ012)。

Detection of Porcine Epidemic Diarrhea Virus by RT-nested PCR

WANG Jin-liang¹, XIE Jin-wen¹, TANG Na¹, ZU Li-chuang², LI Jiao², WANG Yang², SHEN Zhi-qiang^1,2

1. Shandong Binzhou Academy of Animal Science and Veterinary Medicine, Binzhou 256600, China;
2. Shandong Lvdu Biological Technology Co., Ltd., Binzhou 256600, China

Received:2012-03-21 Online:2012-09-20 Published:2012-09-18

摘要/Abstract

摘要： 根据已发表的猪流行性腹泻病毒(PEDV)N基因核苷酸序列,设计合成2对引物,其中外引物扩增片段长度为297 bp,内引物扩增片段长度为212 bp,在优化RT-PCR反应条件的基础上,建立了检测PEDV的套式RT-PCR检测方法,该方法较普通RT-PCR更加灵敏、可靠,能有效降低假阳性和污染,可用于PEDV的快速诊断和流行病学调查。

关键词: 猪流行性腹泻病毒; N基因; 套式RT-PCR; 检测

Abstract: Based on the published nucleotide sequence of porcine epidemic diarrhea virus N gene, two pairs of primers were designed and synthesized, which outer primers amplified fragment length was 297 bp,and inner primers amplified fragment length was 212 bp. RT-nested PCR methods had been established through optimization of the RT-PCR reaction conditions, this method was more sensitive and reliable than ordinary RT-PCR, and could effectively reduce the false positive and pollution. It could be used for rapid diagnosis and epidemiological investigation of the PEDV.

Key words: PEDV; N gene; RT-nested PCR; detection

中图分类号:

S852.62⁺9.7

王金良, 谢金文, 唐娜, 祖立闯, 李娇, 汪洋, 沈志强. 应用逆转录套式PCR检测猪流行性腹泻病毒[J]. 中国畜牧兽医.

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