猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白刺激小鼠产生抗体的研究

›› 2010, Vol. 37 ›› Issue (7): 49-51.

猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白刺激小鼠产生抗体的研究

王星星，张中文，王晶，郭玮，赵剑利，吴国娟

（北京农学院动物科学技术系，北京 102206）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2010-07-20 发布日期:2010-07-20
通讯作者: 吴国娟

The Study of the Antibody Produced by N Protein of Porcine Reproductiveand Respiratory Syndrome Virus in Mic

WANG Xing-xing, ZHANG Zhong-wen, WANG Jing, GUO Wei, ZHAO Jian-li, WU Guo-juan

(Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2010-07-20 Published:2010-07-20
Contact: WU Guo-juan

摘要/Abstract

摘要： 为比较传统免疫、脾内免疫、胶粒免疫和硝酸纤维素膜皮下包埋等4种方法制备的猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）核衣壳蛋白抗原免疫小鼠后刺激机体产生特异性抗体的水平，比较不同方法对于特定抗原刺激机体产生免疫应答的影响，筛选一种最有效的能够用于PRRSV核衣壳蛋白多克隆抗体和单克隆抗体制备的免疫方法。用PRRSV核衣壳蛋白作免疫原，分别用传统皮下免疫法、脾内免疫法、胶粒免疫和硝酸纤维素皮下包埋法免疫BABL/c小鼠，间接ELISA检测血清效价，用Western blotting检测其特异性。三免后，常规免疫小鼠血清效价为1.28×105，脾内免疫法为1.28×105，胶粒免疫为3.2×104，NC膜皮下包埋法为6.4×104。结果表明，4种免疫方法均获得了高滴度、高特异性的多克隆抗体，与传统免疫法相比，其他3种方法有其明显的优势，即节省抗原，其中脾内免疫法为优先选用的免疫方法，其免疫效果好，可节省大量抗原和时间。

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒; 核衣壳蛋白; 抗体; 脾内免疫; 硝酸纤维素膜; 胶粒免疫

Abstract: The purpose of this study was to compare the levels of antibody titer to PRRSV and screen the best immunization method for PRRSV. The nucleocapsid protein of PRRSV was used as immunogen to immunize BABL/c mice by traditional immunization, NC filter immunization, intrasplenic immunization and gel particle containing special bands. Then the titer of positive sera was detected by indirect ELISA, and the specificity was analyzed by Western blotting. After the third immunization, the titers of serum in different mice groups immunized by the four groups were 1.28×105, 1.28×105, 3.2×104, and 6.4×104, respectively. The results showed that the four immunity methods had obtained high titers polyclonal antibody, comparing with traditional immunization, the other three methods had more advantage in conserving antigen. Intrasplenic immunization was the best immunization method, which had the best immunity effect，using the least antigen and the shortest time.

Key words: PRRSV; nucleocapsid protein; antibody; intrasplenic immunization; NC filter; gel particles

中图分类号:

S852.65+9.6

王星星;张中文;王晶;郭玮;赵剑利;吴国娟. 猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白刺激小鼠产生抗体的研究[J]. , 2010, 37(7): 49-51.

WANG Xing-xing;ZHANG Zhong-wen;WANG Jing;GUO Wei;ZHAO Jian-li;WU Guo-juan. The Study of the Antibody Produced by N Protein of Porcine Reproductiveand Respiratory Syndrome Virus in Mic[J]. , 2010, 37(7): 49-51.

[1]	任建乐, 林铱婷, 姬康, 谭姗姗, 陈新新, 晋怡, 王颖, 牛胜, 梁立滨, 李俊平, 赵宇军, 田文霞. A型塞内卡病毒VP2蛋白多克隆抗体的制备及间接ELISA检测方法的建立[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(2): 678-688.
[2]	王永飞, 邓博文, 刘晓艳, 哈尔勒哈·阿曼太, 郭嘉栋, 周正国, 蔡江, 李有文. 绵羊肺炎支原体EF-Tu蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2024, 51(2): 689-699.
[3]	刘海翔, 张佩佩, 邓思, 秦英惠, 姚伦广. 大口黑鲈弹状病毒G蛋白胞外区原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(9): 3762-3770.
[4]	雷逸辰, 王紫腾, 江钧益, 王淑辉, 孙秀柱. 草食动物免疫球蛋白表达谱及其多样性机制研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(8): 3313-3324.
[5]	王慧, 冯保亮, 向光明, 黄雷, 刘志国, 李奎, 牟玉莲. CD163单等位基因表达的iPAMs细胞系的构建及其介导PRRSV感染的特征分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2617-2628.
[6]	马天天, 张亚楠, 冯亚文, 岳怀宁, 王亚文, 苏恺, 袁晨, 逯纪成, 孙泰然, 薛文阁, 宋勤叶. 非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2832-2842.
[7]	任胜杰, 申宏利, 项勋, 代飞燕, 朱茂银, 邬佳莉, 胡志辉, 段纲, 常华. 红嘴鸥TLR7蛋白多克隆抗体制备及在DF-1细胞中的表达特征分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2865-2875.
[8]	索南吉, 李沛轩, 刘转霞, 王亭玮, 刘柯江, 谢东旭, 曾巍巍, 王雯慧. 双峰驼Cyp-A的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2896-2905.
[9]	罗世美, 赵瑶, 马鲜平, 张金阳, 易华山. 蓝舌病病毒NS4蛋白原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2923-2930.
[10]	焦琳琳, 成玉婷, 吴庆国, 吴双, 吴植, 朱善元, 钱莺娟. 鸭坦布苏病毒Capsid蛋白原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2395-2402.
[11]	欧云文, 潘琴, 汪洋, 代军飞, 任绍科, 张洋, 张杰. 猪细小病毒6型ORF2基因的截短表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2487-2495.
[12]	康溥, 任照文, 蔡汝健, 吕宗吉, 黄育浩, 王晓虎. 广东及周边省份猪繁殖与呼吸综合征病毒2型谱系8毒株变异规律和传播研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2001-2011.
[13]	马继福, 阿德力·克坦, 解津刚, 巴合提·博代, 李振伟, 吾热力哈孜·哈孜汗. 基于噬菌体展示技术筛选抑制素α亚基特异性纳米抗体[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2032-2043.
[14]	王雪平, 张孝俊, 李晓月, 王国栋, 张福良, 宋玉伟, 张明亮, 马磊. 高致病性禽腺病毒血清4型Hexon蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2053-2060.
[15]	陈天宝, 王娅妮, 刘宝玲, 王刚, 王晓虎, 柳旭辉, 蔡汝健, 贺东生. 中药抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用机制研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2114-2129.