H5N1亚型禽流感病毒和新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞IFN-β基因的动态表达

›› 2010, Vol. 37 ›› Issue (3): 78-83.

H5N1亚型禽流感病毒和新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞IFN-β基因的动态表达

高艳^1,2，杨松沛³，雷小文^1,2，岳华^1,2，李明义⁴，汤承^1,2

（1.西南民族大学生命科学与技术学院，成都 610041； 2.动物医学四川省高校重点实验室，成都 610041；3.四川省兽药监察所，成都 610041； 4.中国动物卫生与流行病学中心，青岛 266032）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2010-03-20 发布日期:2010-03-20
通讯作者: 汤承

The Dynamics of IFN-β mRNA Expression in Chick Embryo Fibroblast Infected with H5N1 Avian Influenza Virusand Virulent Newcastle Disease Virus

GAO Yan^1,2, YANG Song-pei³， LEI Xiao-wen^1,2, YUE Hua^1,2, LI Ming-yi⁴, TANG Cheng^1,2

(1.College of Life Science and Technology, Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041, China; 2.Sichuan Province Key Laboratory of Veterinary Medicine, Chengdu 610041, China; 3.Sichuan Province Institute of Veterinary Drugs Control,Chengdu 610041, China； 4.China Animal and Epidemiology Center, Qingdao 266032, China )

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2010-03-20 Published:2010-03-20
Contact: TANG Cheng

摘要/Abstract

摘要： 根据鸡β-干扰素（ChIFN-β）基因保守序列设计引物建立了检测鸡IFN-β mRNA表达水平的荧光定量RT-PCR (RRT-PCR)方法，并对H5N1亚型禽流感病毒（AIV）和新城疫病毒强毒株（vNDV）感染后3、6、12、24、30 h的鸡胚成纤维细胞（CEF）中IFN-β mRNA表达水平进行了检测。结果显示，建立的RRT-PCR特异性好，对鸡IFN-β mRNA的扩增效率为94.18%，线性范围为10^-8～10^-3，相关系数为0.992，最低能检出48拷贝/反应。AIV在感染CEF后6、12 h显著抑制IFN-β mRNA的表达，24 h开始诱导IFN-β mRNA表达，30 h时IFN-β mRNA水平显著升高；vNDV在感染CEF后的24 h内显著抑制IFN-β mRNA的表达，30 h时则显著诱导 IFN-β mRNA表达。本试验结果为进一步研究H5N1和NDV与机体的相互作用提供了有价值的信息。 

关键词: β-干扰素; 荧光定量RT-PCR; 禽流感病毒; 新城疫病毒; 鸡胚成纤维细胞

Abstract: According to the chicken’s IFN-β （ChIFN-β） gene sequences, a pair of primers was designed for developing a SYBR Green Ｉ quantitative real-time reverse-transcription PCR (RRT-PCR) to detect the IFN-β gene of chicken, and the expression levels of IFN-β mRNA in chick embryo fibroblast (CEF) at 3, 6, 12, 24 and 30 h after infected with H5N1 avian influenza virus (AIV) and virulent Newcastle disease virus (vNDV) were detected. The results showed that the assay was specific for ChIFN-β gene with amplification efficiency of 94.18%, and the linear range was 10^-8 to 10^-3 with good correlation coefficient of 0.992, as well as the detection limit reached to 48 copies per reaction. The expression of IFN-β mRNA in CEF infected with AIV H5N1 and vNDV showed, the expression of IFN-β mRNA in CEF was suppressed significantly at 6 and 12 h, then induced at 24 h and significantly induced at the 30 h after infected with AIV H5N1; the IFN-β mRNA expression of CEF was suppressed significantly at 24 h and induced significantly at 30 h after infected with vNDV. The results provided valuable information for further researching the interaction of H5N1/NDV and organism.

Key words: interferon-β; real-time RT-PCR; avian influenza virus; Newcastle disease virus; chick embryo fibroblast

中图分类号:

高艳;杨松沛;雷小文;岳华;李明义;汤承;. H5N1亚型禽流感病毒和新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞IFN-β基因的动态表达[J]. , 2010, 37(3): 78-83.

GAO Yan;YANG Song-pei;LEI Xiao-wen;YUE Hua;LI Ming-yi;TANG Cheng;. The Dynamics of IFN-β mRNA Expression in Chick Embryo Fibroblast Infected with H5N1 Avian Influenza Virusand Virulent Newcastle Disease Virus[J]. China Animal Husbandry & Veterinary Medicine, 2010, 37(3): 78-83.

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