tPA信号肽和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因原核表达载体的构建

›› 2009, Vol. 36 ›› Issue (3): 58-62.

tPA信号肽和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因原核表达载体的构建

邱璜，夏平安，卢高峰，王中明，刘明莉，李伟娟，党占国

（河南农业大学牧医工程学院，郑州 450002）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-03-20 发布日期:2009-03-20
通讯作者: 夏平安

Construction of Prokaryotic Expression Vector of PRRSV ORF5 Gene and tPA Signal Peptide

QIU Huang, XIA Ping-an, LU Gao-feng, WANG Zhong-ming, LIU Ming-li, 
LI Wei-juan, DANG Zhan-guo

(The College of Animal Husbandry and Veterinary, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-03-20 Published:2009-03-20
Contact: XIA Ping-an

摘要/Abstract

摘要： 根据GenBank（序列号E00896）上公布的人组织型纤溶酶原激活因子（tissue plasminogen activator，tPA）的序列，利用在线信号肽分析工具Signal P3.0 Server预测出人tPA的信号肽共有63 bp，设计1对能互为模板直接进行扩增的特异性引物，通过重叠PCR的方法扩增出tPA信号肽。另设计1对连接引物，利用PCR方法将tPA信号肽与已删除自身信号肽的ORF5基因相连，成功构建了用tPA信号肽取代猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因原有信号肽的原核表达质粒，为下一步GP5蛋白分泌表达及猪繁殖与呼吸综合征疫苗开发、诊断试剂盒的研制与应用奠定基础。

关键词: PRRSV; ORF5基因; tPA信号肽; 原核表达载体

Abstract: According to the published gene sequence of tissue plasminogen activator (tPA) from GenBank (accession number E00896), with on-line signal peptide analysis tools to predict the tPA signal peptide including 63 bp, one pair of specific primer of tPA signal peptide was designed and synthesized and the tPA signal peptide was amplified by overlapping PCR. Finally, the tPA signal sequence was introduced to replace the original signal peptide of the ORF5 gene by another pair of primer. The studies lay foundations for further study on the secretion expression and the vaccine or diagnosis kit for PRRSV.

Key words: PRRSV; ORF5 gene; tPA signal peptide; prokaryotic expression vector

中图分类号:

邱璜;夏平安;卢高峰;王中明;刘明莉;李伟娟;党占国. tPA信号肽和猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因原核表达载体的构建[J]. , 2009, 36(3): 58-62.

QIU Huang;XIA Ping-an;LU Gao-feng;WANG Zhong-ming;LIU Ming-li;LI Wei-juan;DANG Zhan-guo . Construction of Prokaryotic Expression Vector of PRRSV ORF5 Gene and tPA Signal Peptide[J]. , 2009, 36(3): 58-62.

[1]	王慧, 冯保亮, 向光明, 黄雷, 刘志国, 李奎, 牟玉莲. CD163单等位基因表达的iPAMs细胞系的构建及其介导PRRSV感染的特征分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(7): 2617-2628.
[2]	宋越, 苏胜杰, 张帆, 白帆, 戴伶俐, 王娜, 王大伟, 杨茜雯, 赵世华, 张月梅. 溶血性曼氏杆菌截短型白细胞毒素的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(6): 2479-2486.
[3]	康溥, 任照文, 蔡汝健, 吕宗吉, 黄育浩, 王晓虎. 广东及周边省份猪繁殖与呼吸综合征病毒2型谱系8毒株变异规律和传播研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2001-2011.
[4]	陈天宝, 王娅妮, 刘宝玲, 王刚, 王晓虎, 柳旭辉, 蔡汝健, 贺东生. 中药抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用机制研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(5): 2114-2129.
[5]	李华玮, 郭科威, 王旭英, 张小雨, 路紫微, 李新锋, 马辉, 侯文静. 猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白7真核表达及亚细胞定位[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1160-1168.
[6]	闫普普, 刘欣, 林冰, 刘佳丽, 夏瑾瑾, 黄永熙, 白若男, 刘国平, 杨小林, 郭利伟. 基于生物信息学探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒感染特征及银花甘草汤防治机制[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(10): 4196-4209.
[7]	刘庆庆, 吴鹏, 李培东, 张江伟, 陈创夫, 肖陈诚. 表达猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的重组腺病毒的构建及其免疫原性分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(3): 1024-1031.
[8]	王兆丽, 杨思宇, 吴艳梅, 宋晓晓, 穆祥, 张涛. 猪繁殖与呼吸综合征病毒-脂多糖刺激对中性粒细胞黏附猪肺微血管内皮细胞的影响[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(2): 471-479.
[9]	孙璐, 张静, 尹苗, 程耀蝶, 代锟, 吴倩, 赵洪, 陈希文. 4种清热解毒复方中草药体外抑菌及抗PRRSV活性研究[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(2): 746-754.
[10]	楚品品, 蒋智勇, 李春玲, 勾红潮, 李艳, 蔡汝健. 纳米银体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用研究[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(11): 4356-4363.
[11]	邓吉平, 陈指龙, 郭松扬念, 张坤, 许道军, 杨青, 袁安文. 猪繁殖与呼吸综合征病毒湖南分离株ORF5基因的遗传进化分析[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(10): 3795-3802.
[12]	刘瀚扬, 张毅, 肖冉, 陈斌, 吴永胜, 苏志鹏, 李峪鹏, 裴超信, 许祯莹, 朱佳文. 2018年四川地区猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的分子流行病学调查研究[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(4): 1172-1182.
[13]	周淑棉, 曹迷霞, 胡庭俊. 辣蓼黄酮正丁醇部分体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(2): 605-611.
[14]	张喜懿, 温贵兰, 管国丹, 陈广, 田浪, 杨佰启. 猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州株GZ-R NSP2基因的克隆与遗传变异分析[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(11): 3659-3666.
[15]	邓同炜, 薛亚南, 卢建洲, 夏艳勋, 陈露露, 郭懿文, 彭丽明, 蒋增海, 乔宏兴, 徐耀辉, 张晓战. 猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型与副猪嗜血杆菌混合感染的诊断及病原分析[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(10): 3401-3409.