小反刍兽疫病毒间接ELISA抗体检测方法的建立与初步应用

›› 2009, Vol. 36 ›› Issue (12): 149-152.

小反刍兽疫病毒间接ELISA抗体检测方法的建立与初步应用

贾凤芹，李刚，李伟，史利军，胡小华

（中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-12-20 发布日期:2009-12-20

Establishment of Antibody Indirect ELISA of Peste des Petits Ruminants Virus and its Initial Application

JIA Feng-qin， LI Gang， LI Wei, SHI Li-jun, HU Xiao-hua

(Beijing Institute of Animal Science and Veterinary Medicine， Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing 100193，China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-12-20 Published:2009-12-20

摘要/Abstract

摘要： 本研究利用原核表达的小反刍兽疫病毒核衣壳（N）蛋白作为标准抗原蛋白，建立PPRV抗体检测方法，同时对建立的检测方法的相关条件进行了优化。通过优化确定抗原的最佳包被浓度为10 mg/L，血清最佳稀释度为1∶40，二抗的使用浓度为1∶200，血清及二抗的最佳反应条件为37 ℃孵育60 min，底物的最佳反应时间为37 ℃ 15 min。通过批内及批间重复性的评价，变异系数均小于0.1，表明本检测方法具有较高的可重复性。经过临床样品检测证明，建立的检测方法可用于临床PPRV抗体的检测。

关键词: 小反刍兽疫病毒; N蛋白; 间接酶联免疫吸附试验

Abstract: This study established an indirect antibody enzyme-linked assay system based on the nucleocapsid （N） protein of peste des petits ruminants virus(PPRV).We optimized some factors such as antigen coating concentration (10 mg/L)，the dilution of serum was 1∶40，the work concentration of HRP-labeled anti-goat IgG(1∶200)，reacted conditions of samples and HRP-labeled anti-goat IgG(37 ℃，60 min).The CV is not beyond 0.1.The developed method is suitable for PPRV monitoring and detection，especially for screening large number of samples in farms.

Key words: peste des petits ruminants virus(PPRV); nucleocapsid protein; prokaryotic expression; indirect ELISA

中图分类号:

S852.65⁺9.5

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