HCLV在PK-15细胞中的滴度和12-nt的变化

›› 2007, Vol. 34 ›› Issue (12): 59-61.

HCLV在PK-15细胞中的滴度和12-nt的变化

亢文华1，郝俊峰2，潘春刚1，宁宜宝3

1中牧股份实业有限公司,北京 100070; 2中国科学院生物物理研究所，北京 100101；3中国兽医药品监察所，北京 100081

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-12-20 发布日期:2007-12-20

Change of a 12-nt and Titer of HCLV in PK-15 Cells

KANG Wenhua1，HAO Junfeng2，PAN Chungang1，NIN
G Yibao3

1.China Animal Husbandry Industry Company,Beijing 100070,China；2.Institute of Biophysics Chinese Academy of Sciences,Beijing 100101,China；3.China Institute of Veterinary Drug Control,Beijing 100081,China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2007-12-20 Published:2007-12-20

摘要/Abstract

摘要： 在PK-15细胞上连续传代获得的HCLV，从第1～25代病毒的测序结果一致，同源性为100％。从第26代开始在12-nt(ttttttctttttt)插入处出现变化，第26、27代在69位碱基
C的左右各多插入了一个T；第28、29代在碱基C的右侧多插入了2个T；第30、31代在C的左侧多插入了6个T，碱基C也变成了T；第32、33代在C的右侧缺失了2个T，碱基C也缺失；第34代在C的左侧缺失了5个T，在C的右侧缺失了5个T，碱基C也缺失，并且在第86位由原来的A变成G，第92位由原来的T变成C。将HCLV 1～34代病毒接种24孔板中长满单层的PK-15细胞，于接种后72 h进行荧光抗体检查，比较不同代次HCLV在PK-15细胞上增殖的差异。结果发现，从28代开始病毒滴度有所下降。

关键词: 猪瘟兔化弱毒株; 3’端非编码区; RT-PCR; 序列测定

Abstract: HCLV strain was grown in Primary bovine testicular cells, from 1 to 34serial passages were made continuously. The result of Sequence analysis showed
The homologies of 3’-UTR nucleotide sequence was 100％ from 1 to 25 serial passages. 12-nt(ttttttctttttt) insertion began to change from 26 serial passages, two T more than 1 serial passages in 69 place from 26 to 27 serial passages, Two T more than 1 serial passages in 69 place from 28 to 29 serial passages, six T more than 1 serial passages in 69 place from 30 to 31 serial passages, two T lack than 1 serial passages in 69 place from 32 to 33 serial passages, ten T more than 1 serial passages in 69 place 34 serial passages, A to G in 86 place, T to C in 92 place. HCLV strain from 1 to 34 serial passages cultured in PK-15 cells, immuno fluorescence assay in 72 h, Detection the difference of HCLV from 1 to 34 serial passages. detection indicated the titer of HCLV began to decrease from 28 serial passages.

Key words: hog cholcra lapinized vaccine; 3’-UTR; RT-PCR; sequencing

中图分类号:

S852.65+1

亢文华;郝俊峰;潘春刚;宁宜宝 . HCLV在PK-15细胞中的滴度和12-nt的变化[J]. , 2007, 34(12): 59-61.

KANG Wenhua;HAO Junfeng;PAN Chungang;NING Yibao. Change of a 12-nt and Titer of HCLV in PK-15 Cells[J]. , 2007, 34(12): 59-61.

[1]	李名洋, 方庆励, 黄伟坚. 广西地区水牛群牛星状病毒分子流行病学调查[J]. 中国畜牧兽医, 2020, 47(9): 2926-2934.
[2]	杨帆, 石顺利, 徐娜, 雷宇, 常塔娜, 李平安, 关平原. 牛副流感病毒3型3种基因型多重RT-PCR检测方法的建立[J]. 《中国畜牧兽医》, 2018, 45(1): 32-38.
[3]	张晓芬, 冶贵生. 藏羊白细胞介素-7基因的PCR扩增及生物信息学分析[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(9): 2558-2565.
[4]	唐连飞, 禹思宇, 周宇. 数字RT-PCR技术检测H3N2亚型猪流感病毒方法的建立[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(6): 1847-1853.
[5]	施开创, 许心婷, 胡杰, 粟艳琼, 陆文俊, 陈汉忠. PRRSV美洲型经典株、变异株和疫苗株多重RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(3): 879-887.
[6]	姚怀兵, 赵毅, 刘宏, 张毅, 任方, 黄炯. 口蹄疫O型病毒二温式RT-PCR检测方法的建立及初步应用[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(2): 311-318.
[7]	王博, 王慧煜, 赵宝华, 罗静, 王承民, 何宏轩, 韩雪清. H1、H3亚型猪流感病毒双重实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 《中国畜牧兽医》, 2017, 44(10): 3035-3041.
[8]	马萍, 李达, 汤德元, 张元鑫, 张华, 曾智勇, 刘霞, 韦冠东. 鉴别猪瘟野毒与疫苗毒的单一与二重RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 《中国畜牧兽医》, 2016, 43(9): 2230-2239.
[9]	胡鸿惠, 南文金, 黄健强, 吴静波, 彭国良. 猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒一步法双重RT-PCR检测方法的建立与应用[J]. 《中国畜牧兽医》, 2016, 43(9): 2279-2284.
[10]	刘梅芬, 王淑娟, 闫若潜, 王东方, 曹伟伟, 赵雪丽, 李勤楠, 李宁. 猪瘟病毒巢式RT-PCR检测方法的建立与应用[J]. 《中国畜牧兽医》, 2016, 43(9): 2285-2290.
[11]	许心婷, 施开创, 李常挺, 龙飞翔, 莫胜兰, 陈汉忠. PRRSV野毒感染猪群免疫接种弱毒活疫苗的效果分析[J]. 《中国畜牧兽医》, 2016, 43(9): 2447-2454.
[12]	孙彦琴, 马震原, 闫若潜, 王东方, 曹伟伟, 郭育培. 猪流行性腹泻病毒与猪伪狂犬病病毒二重RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 《中国畜牧兽医》, 2016, 43(9): 2455-2460.
[13]	罗思思, 谢芝勋, 谢志勤, 邓显文, 刘加波, 谢丽基, 黄莉, 黄娇玲, 曾婷婷, 张艳芳, 王盛. H6N1亚型禽流感病毒二重荧光RT-PCR检测方法的建立[J]. , 2016, 43(2): 326-332.
[14]	王建华, 董志珍, 王玉玲, 肖妍, 赵祥平. 一种鉴别尼帕病毒和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒二重荧光RT-PCR检测方法的建立[J]. , 2016, 43(2): 348-355.
[15]	李丹, 谢芝勋, 宋德贵, 李孟, 谢志勤, 罗思思, 谢丽基, 黄莉, 范晴, 黄娇玲. H9和H6亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立[J]. 《中国畜牧兽医》, 2016, 43(12): 3101-3106.