奶牛关节炎病原菌的分离与鉴定

doi:10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.02.037

›› 2016, Vol. 43 ›› Issue (2): 542-547.doi: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.02.037

奶牛关节炎病原菌的分离与鉴定

简宗辉, 段锐锐, 陈培富

云南农业大学动物科学技术学院, 昆明 650201

收稿日期:2015-08-25 出版日期:2016-02-20 发布日期:2016-03-02
通讯作者: 陈培富 E-mail:cltwins2003@sina.com
作者简介:简宗辉(1990-),男,云南曲靖人,硕士,研究方向:微生物与免疫学,E-mail:379872582@qq.com
基金资助:
云南省高校兽医公共卫生重点实验室(A3007954)

Isolation and Identification of the Arthritis Pathogen from Dairy Cow

JIAN Zong-hui, DUAN Rui-rui, CHEN Pei-fu

College of Animal Science and Technology, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201, China

Received:2015-08-25 Online:2016-02-20 Published:2016-03-02

摘要/Abstract

摘要： 为避免奶牛关节炎对牛场造成巨大经济损失,采集患病奶牛关节积液,应用胰蛋白胨肉汤琼脂分离培养病原菌,随后通过形态学方法、生化试验和PCR扩增16S rRNA基因片段及TA克隆测序对其进行鉴定.结果显示,该菌在血琼脂上产生明显的β溶血;光镜下可见该菌个体为单个或短链状排列的革兰氏阳性球菌;该菌七叶苷、麦芽糖、蔗糖、葡萄糖、过氧化氢酶试验均为阳性,对头孢唑啉、恩诺沙星、环丙沙星、氨苄西林、链霉素、氯霉素、新霉素、头孢吡肟8种抗生素敏感,对四环素、红霉素、强力霉素、阿米卡星4种抗生素耐药;该菌与金黄色葡萄球菌核苷酸同源性为91%,但与肉葡萄球菌核苷酸同源性为92%.依据该菌株16S rRNA基因片段测序结果,并结合生物学特性分析,初步将分离菌株鉴定为葡萄球菌属的细菌.本试验结果可为该牛场确诊和防治关节炎提供必要的试验依据.

关键词: 奶牛关节炎; 生物学特性; 16S rRNA; 葡萄球菌属

Abstract: This study was aimed to avoid the dairy cow arthritis,which could caus huge economic losses to cattle farms.Joint effusion was collected from diseased dairy cows,and the pathogens was isolated and cultured using tryptone broth agar followed by morphological,biochemical tests and PCR amplifying 16S rRNA gene fragments and TA cloning and sequencing to identify it.It was found that the bacteria could form beta hemolytic ring on blood AGAR;And it appeared a single individual or short catenation gram-positive by optical microscopy;The results of biochemical identification showed that esculin sesquihydrate,maltose,sucrose,glucose,and hydrogen peroxide enzyme tests all presented positive;It was sensitive to cefazolin,enrofloxacin,ciprofloxacin,ampicillin,streptomycin,chloramphenicol,neomycin and cefepime,while was resistant to tetracycline,erythromycin,doxycycline and amikacin.The nucleic acid homology of this strain with Staphylococcus aureus was 91%,and with the Staphylococcus carnosus was 92%.According to the 16S rRNA gene fragment sequencing results,and the biological characteristics analysis,the initial isolates were identified as similar to Staphylococcus spp bacteria.The results of this study could provide necessary experimental basis for future diagnosis,prevention as well as treatment of arthritis in cattle farm.

Key words: dairy cow arthritis; biological characteristics; 16S rRNA; Staphylococcus spp

中图分类号:

S852.61

简宗辉, 段锐锐, 陈培富. 奶牛关节炎病原菌的分离与鉴定[J]. , 2016, 43(2): 542-547.

JIAN Zong-hui, DUAN Rui-rui, CHEN Pei-fu. Isolation and Identification of the Arthritis Pathogen from Dairy Cow[J]. , 2016, 43(2): 542-547.

参考文献

[1] 齐丽霞,刘代臣,蔡金秋.奶牛关节炎的鉴别诊断及防治措施[J].农村实用科技信息,2006,8:31-32.
[2] 聂贤龙,石慧敏,陶桂林.奶牛乳房炎发病情况调查及防治措施[J].疫情报告,2014,298(2):64-65.
[3] 高延玲,董鹏,李金磊,等.奶牛场金黄色葡萄球菌的分离及耐药性研究[J].畜牧与饲料科学,2014,35(9):1-3.
[4] 王凤,宋立,汤德元,等.奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定、血清型及耐药性研究[J].动物医学进展,2013,34(6):62-67.
[5] Bes M,Guenin-Faublee V,Meugnier H,et al.Impruvement of the identification of Staphylococci isolated from bovine mammary infections using molecular methods[J].Vet Microbiology,2000,71(3-4):287-294.
[6] 谢志勤,谢芝勋,唐小飞,等.多重PCR快速检测奶牛乳房炎3种主要病原菌[J].畜牧与兽医,2006,38(7):4-6.
[7] 郭京蓉,袁玉兰,周继唯,等.6株金黄色葡萄球菌菌株的鉴定[J].中国生物制品学杂志,2014,27(12 ):1534-1538.
[8] Weisburg W G,Barns S M,Pelletier D A,et al.16S ribosomal DNA amplification for phylogenetic study[J].J Bacteriol,1991,173(2):697-703.
[9] Amann R I,Ludwig W,Schleifer K H.Phylogenetic identification and in situ detection of individual microbial cells without cultivation[J].Microbiol Rev,1995,59(1):143-169.
[10] 高强,许保银,程逸冰,等.运用绿色荧光蛋白探讨肉葡萄球菌双精氨酸分泌途径[J].天津科技大学学报,2014,29(5):1-5.
[11] Guo Y,Wang H,Zhao C J,et al.A surveillance study of antimicrobial resistance of gram-positive cocci strains isolated from 16 teaching hospitals in China in 2012[J].Chin J Microbiol Immunol,2013,33(6):401-409.
[12] 朱立力,孙玉林,于馨,等.胸腺嘧啶依赖型金黄色葡萄球菌小菌落突变株的分离鉴定[J].中国畜牧兽医,2014,41(10):241-245.
[13] 熊元,王波,李皓宇,等.金黄色葡萄球菌小菌落突变株的分离与鉴定[J].中国畜牧兽医,2015,25(5):968-971.
[14] 王奇惠,朱立力,时永强,等.金黄色葡萄球菌小菌落突变株体外感染乳腺上皮细胞的研究[J].中国畜牧兽医,2015,42(8):2169-2175.

[1]	王乐平, 潘艳, 谭奕舟, 李磊, 韩凯欧, 曹雅洁, 李军, 周雨晴, 廖玉英, 马东鑫, 龚俞, 彭昊, 王晓晔. 1株大肠杆菌噬菌体vB_EcoP_GN07的分离鉴定及全基因组分析[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1522-1531.
[2]	曹颖颖, 梁亮, 曾怡蓉, 钟清华, 袁小芳, 唐海波, 冷静. 滇西树鼩源沙门氏菌的分离鉴定及生物学特性研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(4): 1718-1728.
[3]	程龙飞, 廖维连, 陈红梅, 江南松, 傅秋玲, 万春和, 刘荣昌, 施少华, 黄瑜, 傅光华. 宽谱鸭疫里默氏菌噬菌体筛选及生物学特性研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(3): 1169-1176.
[4]	刘彬, 黎梦, 习欠云, 孙加节, 罗君谊, 张永亮, 陈婷. 黑水虻的生物学特性及在家禽生产中的应用研究进展[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(2): 586-597.
[5]	尹杨燕, 潘艳, 李小宁, 李军, 廖玉英, 李常挺, 韦天超, 彭昊. 1株植物乳杆菌的生物学特性及体外抑菌活性研究[J]. 中国畜牧兽医, 2023, 50(2): 666-673.
[6]	高也凡, 宋哈楠, 王育南, 吴月, 牛锐利, 宗宪春, 关伟军. 北京油鸡角膜缘干细胞分离培养及分化潜能研究[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(9): 3372-3381.
[7]	周雨晴, 马东鑫, 吴洁, 王晓晔. 宽谱大肠杆菌O157∶H7 CVCC4050噬菌体vB_EcoM_GXBP08的分离鉴定及特性分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(7): 2735-2745.
[8]	姜长津, 陈云, 潘鹏丞, 陈宝剑, 关志惠, 卢慧林, 谢炳坤, 覃兆鲜. 育肥猪粪便菌群结构及其与生长速度的相关性分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(3): 924-931.
[9]	乔宏兴, 丁勇, 张立恒, 宋予震, 董青, 边传周, 赵俊强. 鸭源绿色气球菌的分离鉴定及16S rRNA基因序列测定与遗传进化分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(2): 435-442.
[10]	李金敏, 高绪娜, 桑瑞新, 宫本芝, 徐海燕, 谷巍, 郝木强, 兰江华, 王红. 1株禽大肠杆菌噬菌体的分离及杀菌效果评估[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(2): 783-190.
[11]	李林林, 董嘉文, 张俊勤, 黄允真, 孙敏华. 鸭疫里默氏杆菌RIA_0940基因缺失株的构建及主要生物学特性测定[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(12): 4564-4572.
[12]	李大鹏, 曹春华, 付鹏程, 张景艳, 张康, 王磊, 张凯, 刘琴, 包永占, 李建喜. 1株牦牛瘤胃源无色杆菌的鉴定及生物学特性评价[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(12): 4909-4919.
[13]	郑会珍, 普浩, 缪荣浩, 甘露, 葛晓敏, 巴音查汗, 李永畅, 郭庆勇. 牛环形泰勒虫enolase基因的原核表达及生物信息学分析[J]. 中国畜牧兽医, 2022, 49(10): 3972-3981.
[14]	张玉莹, 刘书杰, 冯宇哲, 张晓卫, 崔占鸿. 基于16S rRNA测序分析正常与腹泻牦牛犊牛粪便细菌区系组成[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(9): 3293-3302.
[15]	唐宁, 殷茵, 任慧英, 张灿, 刘文华. 沙门氏菌高效价宽谱噬菌体的分离纯化及生物学特性测定[J]. 中国畜牧兽医, 2021, 48(7): 2577-2583.

奶牛关节炎病原菌的分离与鉴定

Isolation and Identification of the Arthritis Pathogen from Dairy Cow

PDF

可视化

摘要/Abstract

引用本文

使用本文

参考文献

相关文章 15

编辑推荐

Metrics

本文评价