本研究旨在制备猪腺病毒3型(PADV-3)Hexon蛋白多克隆抗体.试验构建重组原核表达载体pET28a-Hexon,IPTG诱导重组蛋白的表达并进行Western blotting鉴定,目的蛋白与佐剂混合、乳化制备免疫原,免疫家兔制备Hexon蛋白多克隆抗体.采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测抗体的免疫活性与抗体滴度.结果显示,Hexon蛋白原核表达以包涵体形式存在,分子质量约为105 ku;真核细胞表达的Hexon蛋白均定位于HEK293细胞质内,细胞核内无分布;IPMA测定所制备的多克隆抗体滴度为1:1 600,该抗体与体外培养的PADV-3及稳定表达Hexon蛋白的细胞均呈特异性反应.结果表明本试验制备的PADV-3型Hexon蛋白多克隆抗体免疫活性和特异性良好.

为研究布鲁氏菌LPS对巨噬细胞中NLRP3炎症小体的影响,本试验提取布鲁氏菌2308、RB51和△WbkA的LPS,以不同浓度与小鼠巨噬细胞相互作用,荧光定量PCR检测其对NLRP3、ASC、Caspase1、IL1-β、IL18转录水平的影响.结果显示RB51 LPS和△WbkA LPS上调NLRP3炎症小体相关基因的转录水平,且呈浓度依赖性,而浓度对2308 LPS调节NLRP3炎症小体相关基因转录的作用不大;且同一浓度下,RB51 LPS和2308 LPS比△WbkA LPS更好的调节Caspase1、IL1-β、IL18的转录水平.

本试验旨在对北京1株犬源狂犬病病毒株(BJ2012ZW株)在全基因组水平上进行分子进化研究,比较与全国流行株及疫苗株之间的差异.试验采集犬脑组织以直接免疫荧光技术和内基氏小体检查方法进行检测,以RT-PCR扩增病毒核酸覆盖全基因组,对产物测序后进行遗传学分析.结果显示,BJ2012ZW株狂犬病病毒属于基因1型,与目前中国的主要流行株全序列同源性为83.9%~99.7%.与同样分离自北京的毒株BJ2011E和CNM1101C的核苷酸全序列同源性最高(99.7%),进化关系近.G蛋白主要抗原位点分析结果表明,BJ2012ZW株与国内疫苗株相比有部分抗原位点发生了替换.BJ2012ZW株属于中国目前的流行株,与目前国内所使用的疫苗株存在一定的差异.

为建立猪细胞因子SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank中3种重要的猪细胞因子即猪白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、α-干扰素(interferon α,IFN-α)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的基因序列,设计特异引物扩增目的基因.将3种基因克隆至pMD18-T载体上,得到各自阳性克隆质粒,以3种阳性质粒为标准品建立标准曲线并进行熔解曲线分析以及灵敏性、特异性和重复性试验.结果表明,当标准品稀释度为1×10¹~1×10⁶ 拷贝/μL时,3种基因的Ct值与浓度间具有良好的线性关系,相关系数均≥0.992.熔解曲线分析表明,产物为特异性单峰且重复性较好.应用建立的方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJM-F92株免疫的30日龄猪外周血单核细胞(PBMC)中IL-12、IFN-α和TNF-α表达量进行检测,结果发现,免疫了PRRSV TJM-F92株的猪PBMC细胞内3种细胞因子表达量均极显著升高(P< 0.01).研究结果为IL-12、IFN-α和TNF-α的定量分析提供了技术平台.

为了解国内猪源多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H基因的变异情况及与荚膜型之间的相关性,本试验采用PCR方法对44株猪源多杀性巴氏杆菌进行荚膜分型和ompH基因的扩增测序.结果显示,44株菌株中22株为荚膜A型,17株为荚膜B型,5株为荚膜D型;44株菌株的ompH基因开放阅读框在1 002~1 056 bp之间;SignaIP 4.1预测结果显示,信号肽为N端20个氨基酸残基;ProtParam分析结果显示,成熟蛋白氨基酸残基数量在313~331 aa之间,推测的分子质量在33.83~36.46 ku之间.序列分析结果显示,44株菌株核苷酸同源性为86.2%~100.0%,氨基酸同源性为86.0%~100.0%;ompH基因核苷酸序列遗传进化树结果显示,荚膜A型、B型和D型菌株分别在不同的分支.试验结果表明,猪源多杀性巴氏杆菌ompH基因在不同血清型之间具有较高的同源性,与荚膜型之间存在相关性.

采用RT-PCR方法扩增并克隆麦洼牦牛G蛋白信号转导调节因子5(regulator of G protein signaling 5,RGS5)基因序列,利用ClustalX 1.83和Mega 5.0软件构建系统进化树,并选用多种生物信息学软件进行序列分析和蛋白结构预测.结果表明,所得麦洼牦牛RGS5基因长度为863 bp,包含1个546 bp的完整开放阅读框,编码181个氨基酸,GenBank登录号为KJ867514.系统进化树分析发现,麦洼牦牛RGS5氨基酸序列与普通牛亲缘关系最近,其次是山羊和绵羊.RGS5基因编码的蛋白质分子质量为20.94 ku,理论等电点(PI)为6.35,它是一种以α-螺旋为主,不含信号肽的非跨膜、不稳定性蛋白.三级结构预测显示,麦洼牦牛与人RGS5蛋白三级结构相似性高达90.51%.以上结果为深入研究RGS蛋白功能积累科学资料.

试验旨在研究藏绵羊溶菌酶(lysozyme,LZM)1基因在瘤胃、瓣胃、皱胃、气管、肝脏和肾脏各组织中的表达情况、进化关系及抑菌活性.采用RT-PCR技术克隆藏绵羊LZM1基因,定量PCR检测LZM1基因在瘤胃、瓣胃、皱胃、气管、肝脏和肾脏中的表达情况,并将该基因的氨基酸序列与普通牛胃LZM等氨基酸序列进行比对,根据邻位连接法构建系统进化树;将该基因插入pET-32a质粒后构建得到pET-32a-LZM1重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并诱导表达,SDS-PAGE法鉴定表达产物;采用比浊法测定LZM1蛋白的活性;采用琼脂糖平板扩散法研究异源表达蛋白的抑菌活性.结果表明,从藏绵羊瘤胃、瓣胃、皱胃、气管、肝脏和肾脏各组织中成功克隆藏绵羊LZM1基因,其在瘤胃、瓣胃、皱胃、气管、肝脏和肾脏中均有表达,在皱胃中表达量最高;其氨基酸序列与普通牛胃LZM(GenBank登录号:NM_001080339.1)序列的同源性最高(96%);重组蛋白LZM1分子质量约为35 ku;其比活力约为400 U/mL;该重组LZM1对金黄色葡萄球具有良好的抑菌活性.

为分析羊口疮病毒贵州株(ORFV-GZ株)F1L基因的分子特点,预测编码蛋白的生物学功能,本试验对ORFV-GZ株F1L基因进行PCR扩增、克隆及序列测定.应用生物信息学相关软件及方法,对ORFV-GZ株F1L基因进行列分析并对其编码蛋白进行了二级结构、B细胞表位、保守结构域、跨膜结构域和信号肽预测.结果显示,F1L基因PCR扩增产物大小为1 029 bp,编码342个氨基酸;与OV-SA00株、NZ2株、OV-IA82株和D1701株相应序列核苷酸同源性分别为98.4%、97.9%、97.8%和96.8%,氨基酸的同源性分别为98.3%、97.6%、97.3%和95.3%;系统进化树显示,ORFV-GZ株F1L基因与FJ-GT株亲缘关系最近;二级结构以α-螺旋和无规则卷曲所占比例较大,预测此蛋白可能存在7个B细胞优势抗原表位,两个跨膜区域,无信号肽区域.本试验结果将为贵州省ORFV免疫诊断及核酸疫苗研究提供理论依据.

应用PCR技术对3个猪囊尾蚴西昌分离株的线粒体细胞色素C氧化酶第Ⅰ亚基(cox1)基因全序列和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原酶第一亚基(nad1)基因部分序列进行扩增,分析其遗传变异,并用Mega 5.0程序NJ法绘制种系发育树,探讨不同地区来源的猪囊尾蚴种系发育关系.测序结果显示,猪囊尾蚴的cox1基因全序列长度为1 620 bp,nad1基因部分序列长度为796 bp.cox1和nad1基因序列均存在一定的遗传变异,且cox1基因序列的变异高于nad1序列.种系发育分析结果显示,所有猪囊尾蚴分离株构成一个分支,3个西昌分离株均属于猪带绦虫亚洲基因型.结果表明,cox1和nad1基因均可用于猪带绦虫的分子分类,为猪带绦虫病/猪囊尾蚴病的分子诊断奠定了基础.

为了解贵州省三穗县8个养鸭场环境土壤中细菌群落结构多样性概况,本试验采用试剂盒提取土壤样品细菌总DNA,PCR扩增细菌16S rDNA V3可变区,并通过变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对扩增产物进行凝胶分离,回收测序共得到43条特异性条带,其中7、8号养鸭场条带数相对较少.DGGE图谱经Quantity One软件分析,结果显示,同一鸭场样品相似性存在差异,绝大部分鸭场样品间相似性均高于50%,所测序列与GenBank中相应原核生物16S rDNA序列经同源性比对可见相似性在90%~100%之间,共包括5个大纲的细菌种类:变形菌门(Proteobacteria)的α,β类群、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)、酸杆菌门(Acidobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes).

本试验旨在研究移植脐带间充质干细胞对荷斯坦公犊日增重及血清生长因子水平的影响.选取1月龄体重相近的荷斯坦公犊28头,随机分为对照组和试验组,采集健康的荷斯坦新生胎牛的脐带组织,通过胰酶消化筛选法体外分离、纯化及培养牛脐带间充质干细胞(UC-MSCs),试验组按公犊体重(3×10⁵个/kg干细胞)稀释至8 mL颈静脉注射至体内,对照组注射等量生理盐水.试验期154 d.结果表明,注射UC-MSCs后,试验组公犊平均体重在4、5、6月龄时显著高于对照组(P< 0.05);试验组公犊平均日增重在3、4月龄时显著高于对照组(P< 0.05),而在6月龄时极显著高于对照组(P< 0.01).试验组血清中类胰岛素样生长因子(IGF-1)水平在4月龄时显著高于对照组(P< 0.05);试验组血清中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF-α)水平在3月龄时显著高于对照组(P< 0.05);试验组血清中VEGF、成纤维细胞生长因子(bFGF)、TGF-α水平在6月龄时显著或极显著高于对照组(P< 0.05;P< 0.01);2、3、4、6月龄时,试验组血清中骨形态发生蛋白(BMP-7)水平显著低于对照组(P< 0.05).综上所述,移植UC-MSCs能显著提高公犊的平均日增重及血清中IGF-1、VEGF、TGF-α、bFGF水平,血清中这些生长因子与公犊的生长发育密切相关,进而影响其生长性能.

甜菜碱及其盐酸盐,是一种营养性饲料添加剂,作为甲基供体参与体内蛋氨酸循环.近期研究发现,甜菜碱主要通过降低同型半胱氨酸浓度、增加繁殖相关激素含量等途径提高畜禽的繁殖性能,也具有调控能量代谢、抗应激的作用.作者就甜菜碱对畜禽繁殖性能的影响及其作用机理进行简要综述.

研究旨在通过测定豁眼鹅、皖西白鹅、浙东白鹅肌肉纤维直径、横切面积和肌纤维的密度,探讨不同鹅品种的肌纤维特性差异.结果表明,豁眼鹅胸肌肌纤维直径、横切面积显著大于浙东白鹅、皖西白鹅(P< 0.05),而肌纤维密度表现为相反的趋势.豁眼鹅的腿肌肌纤维直径和横切面积显著大于皖西白鹅(P< 0.05),而豁眼鹅的腿肌肌纤维密度显著小于皖西白鹅(P< 0.05).品种内不同性别之间部分指标也存在显著差异,主要表现在皖西白鹅和浙东白鹅的肌纤维横切面积和直径上.相关性分析表明,肌纤维的直径与肌纤维横切面积呈极显著正相关(P< 0.01),肌纤维直径和横切面积与肌纤维密度呈极显著负相关(P< 0.01).由此可知,不同品种间肌纤维特性存在差异,同品种间不同性别间的肌纤维特性也存在差异.

本试验旨在探索不同配比的地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌制剂对青脚麻鸡氮利用效率及血液生化指标的影响.将600只青脚麻鸡随机分成6组(对照组及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组),每组4个重复,每个重复25只.对照组饲喂基础日粮,Ⅰ~Ⅴ组分别在基础日粮中添加不同配比的地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌制剂,其中地衣芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌比例依次为0.5%:0.5%、0.33%:0.66%、0.25%:0.75%、0.66%:0.33%、0.75%:0.25%,试验期56 d.结果表明,Ⅳ组与其他各组相比,青脚麻鸡的血氨浓度和黄嘌呤氧化酶活性显著降低(P< 0.05);与对照组相比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组青脚麻鸡血浆中尿酸含量显著降低(P< 0.05),Ⅰ~Ⅴ组青脚麻鸡血浆和肠道内容物中尿素氮含量显著降低(P< 0.05),Ⅳ组青脚麻鸡血浆中白蛋白含量和白蛋白/球蛋白比值显著降低、球蛋白含量显著升高(P< 0.05);各组血浆中总蛋白含量及丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性均无显著变化(P >0.05).综上所述,日粮中添加地衣芽孢杆菌:枯草芽孢杆菌为0.66%:0.33%的复合芽孢杆菌制剂可显著提高青脚麻鸡的氮利用效率和血液生化参数.

本试验通过制备棉籽饼粉脱毒饲料产品,采用感官鉴定法观察其物理性状,采用国标法测定其棉酚含量,采用凯氏定氮法测定其粗蛋白质含量,并通过肉鸭饲喂试验探讨其在肉鸭饲养过程中的应用效果.结果表明,脱毒后的棉籽饼粉中棉酚残存量不足10 mg/kg,与原始饼粕相比,粗蛋白质含量提高了4.35%,其颜色明显变浅,饼粕质地松软,硬度小,无硬块,无异臭,符合安全标准.经肉鸭饲喂试验发现,与对照组肉鸭相比,用制备的棉籽饼粉脱毒饲料代替常规饲料饲喂肉鸭其生长发育、器官发育、血液指标、饲料中营养成分利用情况均未发现异常,未发现棉酚中毒现象,说明脱毒后的棉籽饼粉饲料中棉酚含量符合饲用安全标准,达到脱毒目的.

为研究补饲对放养牦牛产肉能力及肉品质的影响,试验选取12头在海北州天然放养的牦牛,随机分为2组,即无补饲处理组(对照组)和补饲处理组(补饲组),屠宰后测定2组牦牛8个分割部位的肉重量以及辣椒条、眼肉、外脊3个部位的肉品质指标.结果发现,补饲处理显著增加了牦牛优质部位里脊和眼肉的产肉量(P< 0.05),增产幅度分别达到了80%和100%.辣椒条、眼肉和外脊的加工性能会受到补饲处理的影响,持水能力有所下降,而嫩度却显著改善(P< 0.05).肉色不会受到补饲处理的显著影响(P >0.05).补饲处理不会显著影响辣椒条、眼肉、外脊的蛋白质含量(P >0.05),但却可显著提高辣椒条的脂肪含量(P< 0.05),并显著降低其水分含量(P< 0.05).结果表明,补饲可增加牦牛优质部位肉产量,并改善牦牛肉嫩度.

本试验旨在研究刚开产的汶上芦花鸡和济宁百日鸡母鸡肌肉的营养成分和挥发性风味物质.选择1日龄汶上芦花鸡和济宁百日鸡母鸡各200只,随机分为4个重复,每个重复50只鸡,在统一的营养水平和饲养管理方式下进行饲养,每个重复随机选取4只于150日龄屠宰,分析其肌肉品质、肌肉中挥发性风味物质的含量.结果表明:汶上芦花鸡和济宁百日鸡的胸肌中肌苷酸含量均显著高于腿肌(P<0.05);汶上芦花鸡和济宁百日鸡的腿肌、胸肌的氨基酸组成中EAA/TAA在40%左右,EAA/NEAA均在65%以上,必需氨基酸评分中,汶上芦花鸡和济宁百日鸡的腿肌、胸肌中的苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸和汶上芦花鸡的蛋氨酸等必需氨基酸评分均高于理想评分,说明这2个品种均具有优秀的蛋白质水平和较高的营养价值;汶上芦花鸡和济宁百日鸡的腿肌均含有20种脂肪酸,胸肌均含有17种脂肪酸,其中,济宁百日鸡的多不饱和脂肪酸总量(PUFA)显著高于汶上芦花鸡(P<0.05),而单不饱和脂肪酸总量(MUFA)显著低于汶上芦花鸡(P<0.05),表明济宁百日鸡的营养价值要高于汶上芦花鸡,但肉品质上易酸败变质;汶上芦花鸡和济宁百日鸡的腿肌、胸肌中挥发性风味物质组成差别较大,且均以烷烃类、醇类、醛类和酮类化合物为主.由此可见,汶上芦花鸡和济宁百日鸡母鸡均具有较高的营养价值和可口的风味.

本试验旨在观察内脂素(visfatin)对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肝脏组织结构和髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的影响.试验选用24只8周龄Wistar大鼠,随机分成4组:生理盐水组、visfatin组、LPS组、visfatin+LPS组.其中生理盐水组和LPS组每天注射生理盐水,visfatin组和visfatin+LPS组每天注射visfatin,1周后,LPS组和visfatin+LPS组的Wistar大鼠注射一定量的LPS,6 h后剖杀全部Wistar大鼠.采用HE和免疫组化染色观察各组Wistar大鼠肝脏的组织结构和MPO,结果发现,与生理盐水组相比,visfatin组的巨噬细胞增多,MPO表达水平显著降低(P< 0.05);与LPS组相比,visfatin+LPS组的Wistar大鼠肝细胞形态变得模糊不清,炎性细胞的浸润更加明显,MPO的水平表达也显著降低(P< 0.05).结果表明,visfatin可增加肝脏中巨噬细胞的数量且对肝脏中的MPO表达水平也有显著的影响.

本研究以不同纤维直径的细毛羊皮肤组织中的毛囊作为试验材料,利用不同的提取方法、不同pH范围的IPG胶条以及不同的上样量,探索适用于细毛羊皮肤组织的双向电泳体系,建立细毛羊皮肤组织毛囊的2-DE凝胶图谱.凝胶图谱用ImageMaster 2D Platinum软件自动检测蛋白点比较不同纤维直径的细毛羊差异蛋白.结果显示,TCA/丙酮抽提法最适合细毛羊毛囊组织总蛋白质的提取.上样量为100 μL,选择18 cm、pH 4~7的线性IPG胶条,得到质量较好的双向凝胶电泳图谱,有35个蛋白差异点,为后续优质细毛羊的蛋白质组学研究工作奠定基础.

为探讨合成鱼腥草素对鸡新城疫疫苗免疫增强效果的影响,本试验将160只7日龄非免疫健康雏鸡随机分为空白对照组和低、中、高3个剂量组,各组用NDV La Sota株弱毒活疫苗进行初免,2周后加强免疫1次,并在第2次免疫的当天灌胃给药,3个剂量组分别以50、100和150 mg/kg的剂量灌服合成鱼腥草素,连续给药7 d,空白对照组灌服等量的生理盐水.各组分别于初免后的14、21、28和35 d随机抽取8只鸡,测定其免疫器官指数,血清中IFN-γ、IL-2和IL-4的含量及新城疫抗体的效价.结果表明,不同剂量的合成鱼腥草素均能不同程度地提高肉鸡免疫器官指数、细胞因子和抗体滴度的水平,其中以中剂量(100 mg/kg)效果最明显.

为探讨安吉白茶对柱状黄杆菌的抑菌机理,本试验通过测定安吉白茶提取液与细菌作用前后培养液电导率和紫外吸收物的变化,以及菌体磷代谢和可溶糖的变化,初步阐明了安吉白茶对柱状黄杆菌的抑菌机理.研究结果显示,经安吉白茶提取液处理后,细菌培养液的电导率和可溶糖浓度均增大,菌悬液中的紫外吸收物也随作用时间的延长而增加,表明安吉白茶提取液可破坏细胞膜的结构、导致细胞通透性增加,进而使细胞内容物外泄.此外,经安吉白茶处理后的柱状黄杆菌对磷的消耗量降低,以致严重影响了核酸、磷脂等细胞重要成分的合成及能量代谢,导致细菌正常生理功能的丧失.结果表明,安吉白茶可通过破坏菌体细胞膜及干扰磷代谢等途径抑制柱状黄杆菌的生长.

莱克多巴胺(ractopamine,RAC)是一种常用的β-兴奋剂,近年来,人们发展了许多方法检测其在食用动物中的残留情况,以期达到对其使用的有效监控.作者在介绍RAC基本理化性质和作用机理的基础上,论述了国内外检测生物样本中RAC的分析方法,并对这些方法的优缺点进行了分析,进一步说明无论仪器分析方法还是免疫分析方法都有其固有的特性和优缺点,彼此是无法完全替代的,并在此基础上,对未来RAC分析方法的发展方向进行了展望.

生长激素(growth hormone,GH)对动物的生长发育具有重要的作用,其直接或间接通过诱导胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1,IGF-1)促进干细胞的活化、细胞增殖和分化,并通过细胞膜受体发挥作用启动一系列信号通路.文章就生长激素对细胞增长的作用和功能进行简要概述.

拷贝数变异(copy number variation,CNV)在人类和动物基因组中普遍存在,是重要的遗传变异资源.本试验利用比较基因组杂交(comparative genomic hybridization,CGH)芯片对2匹蒙古马和1匹纯血马进行全基因组CNV检测,共检测到210个CNVs,长度6 109 bp至571.87 kb,平均值为37.81 kb,中值为14.45 kb.合并重叠的CNVs,共检测到70个CNV区域(CNV region,CNVR),大小从6 151 bp至573.59 kb,平均值和中值分别为38.93和14.45 kb,总长度为6.19 Mb.经CNV基因注释和功能分析发现,大部分基因与嗅觉受体活性、嗅觉感官知觉、化学刺激的感官知觉、识别和嗅觉传导等功能相关.对5个CNVRs进行qPCR检验,83.33%的qPCR结果与CGH芯片结果一致.通过对蒙古马基因组拷贝数变异的研究,证明CNV在马基因组中普遍存在,为揭示马基因组CNV与重要生物性状的关联性及品种改良奠定了基础.

本研究旨在揭示影响绵羊重要经济性状的功能基因的分子遗传特征及其与细毛羊群体的遗传关系,为高效选育绵羊品种经济性状及其种质资源的保护与利用提供分子遗传学依据.试验利用PCR-SSCP、DNA测序和生物信息学对289个细毛羊的KRT26基因进行遗传变异分析及其与细毛羊羊毛细度的关联性分析.结果表明,KRT26基因在该细毛羊群体中存在AA、AB、BB 3种基因型,其基因型频率分别为0.221、0.426和0.353,A、B等位基因频率分别为0.434、0.566,细毛羊群体的多态信息含量为0.371,呈中度多态水平,且处于Hardy-Weinberg非平衡状态(P< 0.05).经过BioEdit软件比对序列和Chromas软件分析测序结果显示,KRT26基因发现5处碱基突变:83 bp (G/C)、86 bp (T/C)、112 bp (C/T)、140 bp (G/A)和247 bp (C/T),并通过氨基酸序列的比对结果表明,2处发生了氨基酸的替代,即Val/Ile和Asn/Lys.KRT26基因在细毛羊群体中AA基因型个体极显著高于AB和BB基因型(P< 0.01).因此,KRT26基因可能作为羊毛细度性状的一个新的分子标记.

试验旨在模拟考力代羊生长过程中的遗传和表型变异,为其选种提供一定的依据.用1 269只考力代羊的3 332个生长发育记录,配合自变量为年龄的勒让德多项式的随机回归模型(RRM),其中个体加性遗传效应配合5阶,母体永久环境效应配合2~5阶,对数约束最大似然值和信息标准用来检测最佳配合阶数.用平均信息约束最大似然(AIREML)法来估计体重的遗传、环境和表型协方差函数,结果表明,母体永久环境效应配合4阶时,协方差图更符合考力代羊的生长变化情况,涉及的参数也较少,且羔羊在6月龄前后表现出较大的遗传和表型变异.这些结果提示随机回归模型在有限的数据下能够充分描述考力代羊体重在连续时间轴上的增长变化情况.

为探索ADAMTS1基因在绵羊繁殖中的作用,本研究以贵州半细毛羊为试验对象构建DNA池,分别设计引物扩增第1、2、5-7和9外显子,研究ADAMTS1基因的遗传多态性.结果显示,ADAMTS1基因第6外显子有1个SNP (A255C),第9外显子有4个SNPs (A127G、G243T、G303T、A401G).生物信息学分析表明,SNPs位点对ADAMTS1基因RNA二级结构和蛋白结构均有一定影响.ADAMTS1基因可能影响贵州半细毛羊的繁殖性状.

本研究旨在对内蒙古白绒山羊产羔数进行遗传评估,进一步提高其繁殖性能.试验数据来源于内蒙古白绒山羊种羊场1998-2013年的繁殖性能记录,首先,利用SAS软件的GLM程序确定影响产羔数的固定效应;其次,应用重复力动物模型的约束最大似然法(REML)估计产羔数的遗传力,该模型中考虑的随机效应包括个体加性效应和母体永久环境效应.结果表明,母羊年龄和产羔年份对产羔数影响极显著(P< 0.01),群对产羔数影响显著(P< 0.05),其他因素均不显著(P >0.05).产羔数的遗传力为0.13,属于中等偏低遗传.表明根据表型直接选择,产羔数的遗传进展可能会慢一些.

本试验旨在利用基因组扫描策略和DNA混池测序技术分析小尾寒羊线粒体基因组遗传变异.结果表明,小尾寒羊线粒体基因组编码区共有95个变异位点,多肽编码区除ATPase8基因无突变外,其余12个多肽编码基因均有突变位点,变异位点总数为83个,错义突变为19个,分别为:T3544A、T4209C、C7501A、A8040G、G8265C、A9376G、C9975T、G10119A、G10938A、G11046A、G12571C、G13041A、C13576T、T13588C、C13777T、C13789T、T13837C、T13855C、A13876G.12S rRNA区域有3个变异位点,分别为:T281C、C291T、A538G;16S rRNA区域有5个变异位点,分别为:A1099T、T1112C、T2200C、C2444T、T2635C;tRNA区域有4个突变位点,分别为:tRNA-Tyr (G5295A)、tRNA-Lys (T7720G)、tRNA-His (C11607T)、tRNA-Ser (G11669A).由此可知,小尾寒羊线粒体基因组编码区多态性较丰富,该试验结果为核外遗传效应研究提供了分子生物学基础.

为探究鲤鱼病原菌的生物学特性及耐药状况,从患病鲤鱼中分离到菌株CS126,对其进行形态学观察、生理生化性质测定、16S rDNA序列分析及药敏性测定.结果显示,菌株CS126为革兰氏阴性菌,不产生吲哚、不具有动力性,分解半乳糖、甘露醇,VP试验、赖氨酸脱羧酶、氧化酶阴性,七叶苷阳性.16S rDNA序列长度为1 459 bp,GenBank登录号为KJ942580,与GenBank中杀鲑气单胞菌的相似性高达100%,进化树显示与杀鲑气单胞菌杀鲑亚种聚为一分支.这表明菌株CS126为杀鲑气单胞菌杀鲑亚种.该菌株对菌必治、诺氟沙星、氟苯尼考等8种药物高度敏感,但对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、甲氧卞胺嘧啶和磺胺异恶唑等耐药.本试验结果为鱼类杀鲑气单胞菌的快速鉴定及鱼类疾病诊治提供参考依据.

某地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与中国高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(hp-PRRSV)同源性极高,为了筛选适合该地区病情的疫苗,指导养殖户生产,试验选择hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株)和PRRS弱毒活疫苗(VR-2332株)作为疫苗候选株,选取30日龄、健康状况良好、群体差异性小的断奶仔猪30头,随机分成A、B和C组,每组10头,A组注射hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株),B组注射PRRS弱毒活疫苗(VR-2332株),C组注射相同剂量生理盐水作对照,免疫前和免疫后14、28、42、56、70、84 d采集血清,通过淋巴细胞计数、血清病毒核酸检测、血清抗体检测等分析猪体内hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株)和PRRS弱毒活疫苗(VR-2332株)免疫应答情况.试验结果显示,淋巴细胞数量方面,仔猪免疫后,淋巴细胞数量均上升,42 d时A、B组均达到最大值,A组为19.3×10⁹/L,B组为16.7×10⁹/L,C组则一直处于原始水平;抗体阳性方面,14 d时A组为80%,B组为60%,C组为0,42 d时A组为100%,B组为80%,C组为0;病毒核酸阳性率方面,14 d时A组为90%,B组为100%,C组为0,42 d时,A组为40%,B组为70%,C组为0,70 d时,A组为0,B组为20%,C组为0.由此可知,hp-PRRS弱毒活疫苗(JXA1-R株)能快速诱导猪发生免疫应答、产生免疫抗体,抗体持续时间长、效价高、稳定性良好,且疫苗毒在体内存在时间短、减毒时间快、安全性高,对所研究地区猪群免疫具有优越效果.

本试验旨在报告四川省野生扭角羚自然生存过程中致病性细菌的检测及生物学特征.试验对发病死亡扭角羚病变组织进行细菌学检查及分离,对分别从肝脏、脾脏和肺脏分离得到的4株优势菌进行形态特征、生化特性和16S rDNA分子鉴定,判定为肺炎克雷伯氏菌.这4株菌对供试小白鼠均有致病性.测其LD₅₀,分别为2.9×10⁷、2.9×10⁷、4.5×10⁷和1.1×10⁸ CFU/只.4株分离菌对供试的先锋霉素等敏感,对阿米卡星等中度敏感,对红霉素等耐药.推测这4株肺炎克雷伯氏菌是导致扭角羚死亡的主要病原菌.

本试验旨在建立苄星氯唑西林乳房注入剂无菌检查法并进行验证.采用离心—薄膜过滤—酶中和相结合的方法,按照《中国兽药典》2010年版一部附录进行试验.结果显示采用离心—薄膜过滤—酶中和相结合的方法,以0.5%聚山梨酯-80 pH 7.0氯化钠—蛋白胨缓冲液冲洗,冲洗量400 mL/膜,在最后的培养基中加入不少于300万单位的青霉素酶可有效消除样品对各试验菌株的抗菌活性;验证试验结果显示各验证菌生长良好,各供试品管均未见菌生长.结果表明本试验成功建立了可靠、准确、可用于苄星氯唑西林乳房注入剂的无菌检查法.

本试验旨在通过细菌分离鉴定,明确家养观赏地图鱼的死因,筛选敏感药物.采用常规方法分离纯化细菌后,进行细菌形态学观察,并通过小白鼠致病性试验、细菌主要生化鉴定、16S rDNA序列测定分析、药敏试验及耐药基因检测等方法对分离的细菌进行鉴定及耐药分析.分离出3株革兰氏阴性短杆菌,根据细菌形态特征及理化特性,结合16S rDNA序列测定与系统发育分析结果,判定其分别为肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)、维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)和黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens),其中肺炎克雷伯氏菌具有较强致病性.3株细菌均对洛美沙星、氧氟沙星、阿米卡星、卡那霉素敏感,对阿莫西林、氟苯尼考、克林霉素、甲硝唑等具有较强耐药性.结果表明,肺炎克雷伯氏菌、维氏气单胞菌、黏质沙雷氏菌的混合感染是家养观赏地图鱼的死亡原因.

为弄清贵州某野生动物园长臂猿死亡的原因,本试验采用流行病学调查、临床症状观察、病理剖检诊断和RT-PCR检测确诊等方法,对该野生动物园发病长臂猿进行了诊断.试验结果显示,流行病学调查、剖检病理初步诊断该野生动物园长臂猿疑似流感病毒、支原体和细菌混合感染,RT-PCR/PCR检测确诊发病长臂猿为流感病毒、支原体混合感染,细菌分离培养、生化特性鉴定和动物致病性试验确诊为多杀性巴氏杆菌感染.结果表明造成该野生动物园长臂猿发病死亡的原因为流感病毒、支原体和多杀性巴氏杆菌混合感染.根据诊断及药敏试验结果,制定出了免疫预防及治疗措施.

黑色素瘤分化相关基因5(melanoma differentiation-associated gene-5,MDA5)是胞浆内核酸受体,与病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)相结合,特异性地识别较长的双链RNA,功能与视黄酸诱导表达基因Ⅰ(retinoic acid-inducude gene Ⅰ,RIG-Ⅰ)相似,通过自身级联激活和招募结构域(CARD)与接头蛋白CARD同源相互作用之后,与接头蛋白线粒体连接蛋白(MAVS)(也叫VISA、Cardif或IPS-1)结合,相互作用后会导致RIG-Ⅰ样受体(RLR)在内膜上重新定位,一边招募来TRAF2/TRAF6活化IKK激酶复合物,从而激活转录因子NF-κB;另一边招募来TRAF3和TBK1,从而促进IRF3的磷酸化激活,活化后的转录因子NF-κB及IRF会进入细胞核,共同协作促进Ⅰ型干扰素基因的表达.

禽致病性大肠杆菌(APEC)是引起家禽多种肠外疾病如气囊炎、心包炎、肝周炎、蜂窝织炎及败血症的主要人畜共患病原菌.在过去的数十年间,试验了多种不同类型的疫苗用于本病的控制.鉴于APEC血清型较多且不同血清型之间缺乏交叉免疫保护,故生产上使用的APEC疫苗研究进展缓慢.作者对不同类型APEC疫苗进行了综述并提出未来的研究方向.