猪圆环病毒2型广东分离株ORF2基因的克隆和序列分析

›› 2014, Vol. 41 ›› Issue (10): 12-16.

猪圆环病毒2型广东分离株ORF2基因的克隆和序列分析

沈海燕^1,2, 刘志成^1,2, 郭慧霞³, 周恒³, 朱余军³, 张春红^1,2

1. 广东省农业科学院动物卫生研究所, 广东广州 510640;
2. 广东省兽医公共卫生公共实验室, 广东广州 510640;
3. 华南农业大学兽医学院, 广东广州 510642

收稿日期:2014-05-06 出版日期:2014-10-20 发布日期:2014-10-29
通讯作者: 张春红 E-mail:13660450420@139.com
作者简介:沈海燕(1983－),女,河南人,博士,研究方向:兽医微生物学与免疫学。
基金资助:
广东省科技计划项目(2012A020602-094、2011B0507-00007);国家自然科学基金(青年科学基金)(3130-2101)

Cloning and Sequence Analysis of ORF2 Gene of Porcine Circovirus Type 2 Isolated from Guangdong Province

SHEN Hai-yan^1,2, LIU Zhi-cheng^1,2, GUO Hui-xia³, ZHOU Heng³, ZHU Yu-jun³, ZHANG Chun-hong^1,2

1. Institude of Animal Health, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China;
2. Guangdong Common Laboratory of Veterinary Public Health, Guangzhou 510640, China;
3. College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China

Received:2014-05-06 Online:2014-10-20 Published:2014-10-29

摘要/Abstract

摘要： 为了解广东部分地区猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)流行毒株的基因型和遗传变异情况,本研究根据GenBank中PCV2的核苷酸序列设计针对ORF2基因的1对特异性引物,从分离于广东省的8株PCV2分离株BL、HD、Li、GD01、GD02、HD01、HD02和HD03株的细胞培养物中扩增ORF2基因,扩增片段克隆到pMD18-T上,获得重组质粒,并对其进行测序。序列分析结果表明,8株PCV2分离株ORF2基因与其他PCV2 ORF2基因核苷酸序列同源性为89.7%~100%,氨基酸序列同源性为87.2%~99.6%,进化分析结果表明,其中7株分离株处于同一分支,属于PCV2b-1A/1B,HD01株属于PCV2b-1C。

关键词: 猪圆环病毒2型; ORF2基因; 序列分析

Abstract: In order to clarify genotype and genetic variation of porcine circovirus type 2 (PCV2) prevalent in some regions of Guangdong province,one pair of specific primers was designed according to the published ORF2 gene sequence of PCV2,and ORF2 genes of PCV2 strain BL,HD,Li,GD01,GD02,HD01,HD02 and HD03 isolated from Guangdong province were amplified. The PCR products were cloned into pMD18-T vector and the recombinant plasmids were obtained and sequenced. The results indicated that the ORF2 gene of PCV2 Guangdong isolates had homologies ranging from 89.7% to 100% at nucleotides level and 87.2% to 99.6% at amino acids level with other PCV2 isolates in GenBank. Phylogenetic analyses revealed that 7 stains of isolates were clustered into genetic subgroup PCV2b-1A/1B,isolate HD01 was clustered into genetic subgroup PCV2b-1C.

Key words: porcine circovirus type 2; ORF2 gene; sequence analysis

中图分类号:

S852.5

沈海燕, 刘志成, 郭慧霞, 周恒, 朱余军, 张春红. 猪圆环病毒2型广东分离株ORF2基因的克隆和序列分析[J]. , 2014, 41(10): 12-16.

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