试验旨在克隆山羊过氧化物酶体增殖物激活受体α（peroxisome proliferators-activated receptors-alpha，PPARα）基因的CDS区序列，分析其编码蛋白的结构与功能，并探讨其在山羊不同组织中的表达模式。采用RT-PCR方法扩增并克隆PPARα基因CDS编码区；通过在线软件对其一级结构、二级结构和三级结构进行生物信息学分析；利用基因序列和编码蛋白构建系统发育树，进行系统发育进化分析；采用实时荧光定量PCR方法检测PPARα基因在简州大耳羊心脏、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏和网膜6个组织中的相对表达情况。结果表明，山羊PPARα基因CDS区全长1 413 bp，结构稳定，共编码470个氨基酸。生物信息学分析发现，PPARα蛋白是一种结构较为稳定的带负电的亲水性蛋白，以α-螺旋和无规则卷曲为主，无信号肽和跨膜蛋白，属于膜内蛋白。蛋白序列中总共有49个磷酸化位点，9个糖基化位点。保守结构域中含有明显的DBD区域和LBD区域，蛋白结构高度保守。三级结构预测发现其蛋白结构主要为通过长链卷曲连接的2个明显不同的结构区域，结构均以helix螺旋为主。序列比对结果表明，山羊PPARα氨基酸序列与绵羊和牛的同源性最高。实时荧光定量检测结果表明，PPARα基因在肾脏和肝脏中表达量较高，显著高于其他组织（P < 0.05）；在网膜组织和心脏中中度表达，显著高于肺脏和脾脏（P < 0.05）；在肺脏和脾脏中相对低表达；说明山羊PPARα基因可能与体内脂肪氧化、脂质代谢和抗氧化应激等调控功能有关。试验结果为深入研究PPARα基因在山羊中的生理功能和调控机制奠定了理论基础。

为进一步获得猪肉质性状候选基因Rho相关激酶1（Rho-associated，coiled-coil containing protein kinase 1，ROCK1）的序列特征、生物学功能及时空表达规律等信息，本研究通过PCR、SMARTer RACE PCR的方法克隆了猪ROCK1基因，应用生物信息学方法分析该基因的蛋白质序列在不同物种中的进化关系，并采用RT-PCR和实时荧光定量PCR的方法检测其在不同组织和不同猪种背最长肌不同发育阶段的表达。结果显示，ROCK1基因有2个转录本，包含4 065 bp的开放阅读框（ORF），编码1 354个氨基酸；猪ROCK1基因ORF序列与人、小鼠和大鼠的ORF序列的同源性分别为95%、91%和91%，相应的氨基酸序列同源性分别为98%、96%和94%，该蛋白在不同物种间高度保守；ROCK1基因的组织分布较广泛，不同发育阶段在同一组织中的表达会发生变化；胚胎期ROCK1基因在梅山猪背最长肌中的表达极显著高于大白猪（P < 0.01），出生后ROCK1基因在2个猪种背最长肌中的表达无显著差异（P > 0.05）。本试验结果为研究ROCK1基因在猪骨骼肌发育中的生物学功能及其分子机制奠定基础。

试验旨在探究内皮素3（endothelin 3，EDN3）在不同毛囊时期小鼠皮肤中是否存在差异表达及其对黑色素细胞黑色素沉着相关基因表达的影响。通过RT-PCR技术对EDN3、EDNRB在不同毛囊时期小鼠皮肤的表达情况进行定量分析发现，EDN3和EDNRB在小鼠不同毛囊时期皮肤样品中均有表达，在毛囊生长初期和中期小鼠皮肤中EDN3 mRNA表达量是末期的2.18倍（P < 0.05）和1.15倍（P > 0.05），毛囊生长初期和中期EDNRB mRNA表达量是末期的16.8倍（P < 0.01）和9.9倍（P < 0.01）。为了进一步揭示EDN3在黑色素细胞色素沉着中的重要作用，通过细胞转染技术使小鼠黑色素细胞过表达EDN3并测定其黑色素含量及色素沉着相关基因的表达水平发现，与空载组相比，体外转染EDN3的黑色素细胞黑色素含量明显增加。此外，MITF mRNA显著降低（P < 0.05）；TYR、TYRP2、EDNRB、c-Kit和EDN1 mRNA显著升高2.04倍（P < 0.05）、1.44倍（P < 0.05）、1.41倍（P < 0.05）、5.21倍（P < 0.01）和3.27倍（P < 0.01）。MITF蛋白水平显著降低（P < 0.05），TYR、TYRP2、EDNRB和c-Kit蛋白水平显著升高1.48倍（P < 0.01）、4.61倍（P < 0.01）、1.27倍（P < 0.05）和2.64倍（P < 0.01）。综上所述，EDN3在不同毛囊时期小鼠皮肤中均可有效表达，且表达量存在显著差异。黑色素细胞中过量表达EDN3，使色素沉着相关基因的表达量及黑色素含量增加。

为了分析三穗麻鸭细胞因子信号传导抑制蛋白（suppressors of cytokine signaling，SOCS）基因分子特征，预测其编码蛋白的生物学功能，本试验对三穗麻鸭SOCS1基因进行PCR扩增、克隆及序列测定，应用生物信息学方法对三穗麻鸭SOCS1基因进行序列分析，并对其编码蛋白的二级结构、保守结构域、跨膜结构域、信号肽和三级结构进行预测。结果显示，三穗麻鸭SOCS1基因全长为624 bp，可编码207个氨基酸；与大雁、原鸡、非洲爪蟾、猪、牛、人、大鼠和草鱼相应序列核苷酸序列同源性分别为97.6%、92.6%、68.3%、65.0%、64.8%、64.5%、63.5%和58.2%，氨基酸序列同源性分别为99.5%、96.6%、69.2%、64.0%、64.0%、67.9%、65.4%和50.8%；系统进化树显示，三穗麻鸭与大雁亲缘关系最近；编码蛋白的二级结构由无规则卷曲、α-螺旋、β-转角和延伸链组成，具有一个中央SH2区和SOCS盒，且无跨膜区和信号肽区域；三级结构呈弯曲螺旋结构。本试验结果为三穗麻鸭SOCS1基因编码蛋白的生物学功能研究奠定了理论基础。

试验旨在对羊白介素1受体颉颃因子（interleukin-1 receptor antagonist，IL-1Ra）基因进行全长cDNA克隆及生物学分析。根据布鲁氏菌感染羊白细胞层SSH cDNA文库中的IL-1Ra基因序列信息及已知核苷酸序列（GenBank登录号：KC425613.1）设计引物，利用RT-PCR结合RACE方法扩增并克隆IL-1Ra基因，对其进行序列及相关分子特性分析。结果表明，羊IL-1Ra基因全长为1 228 bp，可编码174个氨基酸，含有1个完整的IL-1保守结构域和1个IL-1Ra结构域（PHA02651结构域）。IL-1Ra分子质量为19 765.8 u，等电点（pI）为5.72，其分子式为C₈₈₅H₁₃₈₅N₂₃₅O₂₅₆S₁₁，且含有信号肽。二级结构分析显示，IL-1Ra分子存在较多的β折叠及受体结合位点，与三级结构预测结果一致，且与人/鼠IL-1Ra分子的空间结构相似度极高，达到90%以上。羊IL-1Ra有IL-1特有的三叶草结构，其酶结合结构域位于TYR⁴⁷至GLU⁶⁶之间。将羊IL-1Ra与牛、虎鲸、宽吻海豚、猪、家犬、人、鼠等14个物种进行蛋白质同源性比对，发现在各物种间存在5个高度同源的半胱氨酸位点。系统进化树分析发现，羊IL-1Ra基因全长cDNA所编码的氨基酸序列同山羊、牛单独形成一个分支。本研究结果为今后深入研究IL-1Ra基因的生物学功能奠定了基础。

为筛选番鸭下丘脑组织中的基因组信息，本研究以NCBI数据库中已标注的绿头鸭基因组（登录号：BGI_duck_1.0）为参照，利用RNA-Seq技术对番鸭下丘脑组织基因表达水平，以及可变剪切事件、SNPs及InDel进行筛选。结果显示，共鉴定出14 619个基因表达（FPKM ≥ 1），占筛选出总基因数的72.7%。共有5 034个基因发生了7 528次可变剪切，其中外显子跳跃占92.76%，第一个外显子可变剪切和内含子滞留所占比例最小，共占总数的0.027%。通过RNA-Seq技术，本研究还筛选到646 423个SNP位点和77 712个InDel位点。对SNPs和InDel所在的基因进行功能注释发现，这些基因主要参与分子功能、生物过程和细胞组成过程。通过KEGG通路分析发现，出现SNPs和InDel所在基因主要富集在内分泌调节和神经行为调节的相关通路上，表明下丘脑既可参与内分泌调节，又参与动物的神经行为调节。本研究筛选出的数据不仅丰富了番鸭的遗传信息，而且也建立了番鸭相关基因的SNPs和InDel的数据库，这为番鸭的遗传育种工作及相关功能基因的具体定位提供了可靠依据，同时也为以后番鸭行为的研究提供了一定的参考价值。

为探究FoxO1对瘦素信号传导的调节机制，本研究构建了重组质粒pEF1α-myc-FoxO1ΔDBD，并将其转染于293Rb细胞，应用Western blotting检测突变体FoxO1ΔDBD的表达；然后采用DNA原核显微注射的方法制备含有突变体FoxO1ΔDBD的转基因小鼠模型，以鼠尾基因组DNA为模板，PCR扩增鉴定基因型；采用实时荧光定量PCR和免疫共沉淀方法检测FoxO1ΔDBD在转录水平和翻译水平的表达，并对FoxO1ΔDBD转基因鼠进行表型分析。结果显示，试验成功构建了重组质粒pEF1α-myc-FoxO1ΔDBD，并在293Rb细胞中检测到了突变体FoxO1ΔDBD的表达，继而获得了10只首建鼠，建立了10个繁育系。试验建立了高G-C含量PCR扩增产物的基因型鉴定方法，并成功地应用于转基因小鼠中。实时荧光定量PCR和免疫共沉淀结果显示，在转录水平和翻译水平上成功地检测出FoxO1ΔDBD的表达，表型分析结果显示，转基因小鼠体重显著低于野生型小鼠（P < 0.05），提示瘦素的作用增强。综上所述，本试验成功构建了FoxO1ΔDBD转基因小鼠，为探究FoxO1对瘦素信号传导的调节机制提供研究模型。

本试验旨在进行关岭牛肌球蛋白重链1（myosin heavy chain 1，MYH1）5'侧翼启动子的克隆和生物信息学分析。采集关岭牛血液及组织样品（背最长肌、后腿肌、心脏、肝脏、小肠、脂肪组织），利用PCR方法扩增关岭牛MYH1基因5'侧翼区，构建关岭牛pUCm-T-MYH1克隆载体，并对MYH1基因5'侧翼区进行生物信息学分析，最后利用实时荧光定量PCR法测定了MYH1基因在关岭牛不同组织中的表达。结果显示，本试验成功获得1 373 bp（-1 360~+12 bp）的MYH1基因5'侧翼启动子序列；利用生物信息软件对获得的克隆序列进行分析发现，MYH1基因5'侧翼启动子序列存在5处可能的转录起始点和多个潜在转录因子结合位点；关岭牛与金丝猴、野猪、家鼠、藏羚羊、野驴的MYH1基因5'侧翼区保守性较强的区域为转录起始点上游-400~+100 bp，推测转录起始点上游-400~+75 bp可能是其核心启动子区域。实时荧光定量PCR分析发现，MYH1基因在关岭牛背最长肌和后腿肌中高表达，在心脏、肝脏、小肠、脂肪组织中表达量很低，说明MYH1基因表达具有组织特异性。

为了克隆巴什拜羊SPLUNC1基因并表达该蛋白，本试验从巴什拜羊肺脏组织中提取总RNA，利用RT-PCR方法扩增出SPLUNC1基因开放阅读框序列，将该基因片段插入到真核表达质粒pPIC9K中构建pPIC9K-SPLUNC1重组质粒，然后将pPIC9K-SPLUNC1重组质粒线性化并电击转化入毕赤酵母GS115中，经甲醇诱导蛋白表达后用SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定目的蛋白。结果表明，经RT-PCR扩增成功获得大小为748 bp的SPLUNC1基因；构建的pPIC9K-SPLUNC1重组质粒经PCR、酶切及测序鉴定与预期结果一致；SDS-PAGE及Western blotting检测鉴定结果表明获得大小为25.53 ku的SPLUNC1蛋白。本试验结果为进一步研究巴什拜羊SPLUNC1蛋白的生物学活性奠定基础。

蜡样芽孢杆菌是一种可引起食物中毒的常见食源性细菌，属于革兰氏阳性的条件致病菌，广泛存在于土壤、空气、水及植物源、动物源加工的食品中。近年发现也能感染包括人在内的多种动物，是一种人兽共患性细菌，特别是能够引起人畜肠道疾病，导致腹泻型或呕吐型食物中毒。快速准确检测蜡样芽孢杆菌是控制其污染和感染后治疗的关键环节。作者对蜡样芽孢杆菌的检测方法进行了全面详细的总结，主要包括传统检测方法、普通PCR、多重PCR（mPCR）、实时荧光定量PCR（Real-time PCR）、叠氮溴化丙锭-定量PCR（PMA-qPCR）、微滴数字PCR技术（ddPCR）、环介导等温扩增（LAMP）及酶联免疫吸附测定（ELISA）。从传统方法到新兴技术，涉及传统检测技术、分子生物学检测和免疫学检测技术，作者主要总结了各方法的原理、检测范围，并对各方法的优缺点进行了比较。这些检测方法的灵敏度、精确度、样本要求等有所不同，可根据检测需要和条件限制进行选择。将分子生物学方法和免疫学等方法有效地结合起来，多角度多层次地对样品进行检测，可全面而准确地呈现检测结果。蜡样芽孢杆菌能产生多种毒素，这些毒素决定了其致病性，所以除了检测菌体外，还可以对毒素进行检测，有助于确定病原及其致病力。总的来说，蜡样芽孢杆菌对人畜的健康安全均构成了威胁，快速准确地检测能有效辅助治疗和提前预防，作者将主要检测方法进行了总结，希望能有助于全面准确地评估蜡样芽孢杆菌的风险，为主动监测和预警提供科学依据。

为了研究犬细小病毒（canine parovirus，CPV）VP2蛋白的结构和功能，本试验对CPV VP2蛋白进行表达和纯化。采用大肠杆菌表达外源蛋白的方法，将CPV VP2基因插入原核表达载体pET-32a（+）中构建重组原核表达载体pET-VP2，转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中，在不同IPTG浓度、诱导温度和诱导时间条件下进行原核表达，确定最佳诱导条件。最佳条件下的诱导产物经超声破碎离心后，利用镍柱对重组蛋白进行纯化并用SDS-PAGE和Western blotting进行双重鉴定。结果显示，重组质粒pET-VP2经双酶切鉴定分别获得大小为5 900 bp左右的载体条带和1 755 bp左右的目的基因条带，成功构建了pET-VP2重组质粒；重组VP2蛋白的分子质量约为64 ku，与预期大小一致，且在37℃、1.0 mmol/L IPTG、诱导5 h条件下表达量最高，条带最亮；蛋白超声破碎后经SDS-PAGE发现，只在沉淀中出现了目的条带，而上清中并未出现相应条带，说明重组蛋白均以包涵体的形式存在；纯化后获得的重组蛋白，经SDS-PAGE和Western blotting双重鉴定，均在64 ku处出现条带，说明纯化后的蛋白为重组蛋白pET-VP2。本试验通过对CPV VP2蛋白的原核表达及纯化成功获得了大量纯度较高的CPV VP2蛋白，为今后制备CPV VP2蛋白多克隆抗体及进一步研究该蛋白在对治疗犬细小病毒病中的临床应用价值提供了基础理论依据。

试验旨在建立广灵驴成纤维细胞库，以期在细胞水平上对广灵驴进行保护。本研究以1月龄广灵驴耳缘皮肤组织为试验材料，采用组织块贴壁法进行成纤维细胞培养，建立了广灵驴耳缘皮肤组织成纤维细胞系，并对其相关生物学特性进行了鉴定。结果发现，试验所建立的广灵驴成纤维细胞系大多数细胞呈长梭形，部分细胞呈三角状或星型。在培养过程中，广灵驴原代成纤维细胞在贴壁4 d时开始有细胞从组织边缘游离出来，贴壁14 d后，细胞汇合率达到80%，可以进行第一次传代培养；细胞生长态势良好，生长曲线呈典型的S型曲线；细胞冻存复苏后活率有所下降，但生长状态良好。细胞分裂中期染色体数2n=62，说明成功建立了广灵驴成纤维细胞系。通过本方法建立的广灵驴成纤维细胞系为后续广灵驴的相关研究奠定了基础。

自噬是真核细胞所特有的细胞内物质成分被溶酶体降解过程的统称。生命体借此清除细胞内的废物，重建结构从而维持蛋白质代谢平衡及细胞内环境稳定。氧化应激是指体内氧化与抗氧化作用失衡，倾向于氧化，导致中性粒细胞炎性浸润，蛋白酶分泌增加，产生大量活性氧中介物（ROS），而ROS直接参与细胞存活和死亡调节。大量研究表明，氧化应激中产生的ROS在多种条件下都是自噬的重要调节因子，它能诱导自噬发生，而自噬能通过不同的信号通路来缓解氧化应激造成的损伤，从而保护细胞存活。ROS在多种条件下都是自噬的重要调节因子。作者主要对自噬的形成过程、氧化应激诱导自噬产生机制（包括调控mTOR信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路机制）及自噬缓解氧化应激的途径（mTOR信号通路、PI3K介导的信号通路和调控p53等）进行综述，以期为畜牧生产中通过调控自噬缓解动物氧化应激的措施提供理论依据。

研究采用响应面法并以滤纸酶活力（filter paper activity，FPA）作为响应值对转透明颤菌血红蛋白基因的里氏木霉（Trichoderma reesei）Tu6-VHb菌株液体发酵产纤维素酶的发酵条件进行优化。根据单因素试验结果设计P-B试验，筛选出影响Tu6-VHb菌株发酵产酶的3个显著因素：吐温-80含量、发酵液体积（250 mL三角瓶发酵）、氮源浓度。用最陡爬坡路径法逼近最大响应值区域，运用响应面B-B试验设计确定3个显著因素之间的交互作用和最佳发酵条件。结果显示，Tu6-VHb产纤维素酶的最佳发酵条件是：吐温-80含量0.39%，发酵液体积61.32 mL（250 mL三角瓶发酵），氮源浓度0.87%。经优化后，Tu6-VHb菌株发酵产纤维素酶酶活力达51.72 U/mL，与模型预测值51.94 U/mL相近，较优化前该菌株酶活力（39.984 U/mL）提高了29.35%，是未转入透明颤菌血红蛋白基因的里氏木霉（Trichoderma reesei）Tu6菌株酶活力（35.904 U/mL）的1.44倍。

本试验旨在研究不同温度条件下，发酵时间对完全混合发酵日粮（total mixed fermentation ration，TMF）发酵品质的影响。将0.5% CT-10（同型发酵乳酸杆菌）、5%糖蜜和TMR装入发酵袋内并于5、15和25℃条件下密封发酵，在发酵5、10、15、20和30 d时开袋取样测定其发酵品质。结果显示：5℃时，随着发酵时间的延长，各组间中性洗涤纤维（NDF）和粗灰分（Ash）无显著差异（P > 0.05），而干物质（DM）、粗蛋白质（CP）、粗脂肪（EE）和酸性洗涤纤维（ADF）含量均随时间的增加而显著降低（P < 0.05）；15℃时，各组间NDF含量无显著差异（P > 0.05），而其他指标含量均呈现下降趋势；25℃时，各组间EE、Ash、NDF和ADF无显著差异（P > 0.05），而CP随着发酵时间的增加显著降低（P < 0.05）。不同的发酵时间对TMF有机酸含量影响显著（P < 0.05），在5和15℃时，发酵30 d天时pH分别降至4.23和4.36，达到发酵过程中的最低点；各个发酵温度条件下，氨态氮（NH₃-N）含量变化趋势一致，前15 d持续增加，之后又呈现先缓慢降低再增加的趋势；25℃时，发酵20 d，pH降至4.57，乳酸含量和TVFAs含量分别达到最高。综合以上结果和V-Score评分最终得出：5℃时，发酵20 d效果较好，15℃时，发酵15、20 d效果较好；25℃时，发酵5 d效果较好，饲料等级均为优。

试验旨在研究不同处理对麻疯树籽仁粕（Jatropha curcas kernel meal，JCKM）蛋白质营养价值的影响。选择脱油后的JCKM为研究对象，对其分别进行干热、湿热、热化学和微生物发酵处理，通过测定其营养成分、蛋白质溶解度（PS）、粗蛋白质体外消化率（IVCPD）等指标，以未处理的JCKM为对照，评价不同处理对JCKM蛋白质营养价值的影响。结果显示：微生物发酵处理组粗蛋白质（CP）含量显著高于其他组（P < 0.05）；微生物发酵处理组粗纤维（CF）含量显著低于热化学处理组（P < 0.05），其他各组间差异不显著（P > 0.05）；各处理组间钙（Ca）含量差异不显著（P > 0.05）；微生物发酵处理组总磷（TP）含量最高，显著高于其他组（P < 0.05）。微生物发酵处理组Gly、Arg、Cys、Val、Ile含量高于其他组。干热处理、微生物发酵处理及对照组PS显著高于湿热处理和热化学处理组（P < 0.05）；微生物发酵处理组IVCPD显著高于其他组（P < 0.05）。综上所述，微生物处理JCKM后CP含量升高，氨基酸组成较为均衡，是一种有效的处理方法。

试验旨在研究日粮中添加抗菌肽及益生菌复合添加剂对青脚麻鸡生长性能和屠宰性能及血清生化指标的影响。选择7日龄初始体重相近的青脚麻鸡460羽，随机分为5组，每组4个重复，每个重复23羽，分别饲喂5种不同的日粮：Ⅰ组饲喂基础日粮+150 mg/kg金霉素（对照组），Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别在基础日粮中添加200、400、600和800 mg/kg添加剂。试验期56 d。结果显示：①前期Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组平均日采食量均有提高，其中Ⅳ、Ⅴ组与Ⅰ组相比均达到显著水平（P < 0.05）；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组平均日增重均有提高，其中Ⅳ组与Ⅰ组相比达到显著水平（P < 0.05）；Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组平均料重比均有降低，其中Ⅱ、Ⅳ组与Ⅰ组相比均达到显著水平（P < 0.05）。后期和全期平均日采食量、平均日增重和平均料重比各组差异均不显著（P > 0.05）。②各组与对照组相比，全净膛率、胸肌率和腿肌率均有一定程度的提高，但各组差异均不显著（P > 0.05）。③与对照组相比，Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组血清总蛋白含量分别提高了1.18%、12.11%和29.28%；Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组血清白蛋白含量分别显著提高了23.87%、22.28%和23.05%（P < 0.05）；Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组碱性磷酸酶活性分别提高了12.07%、13.17%和29.67%；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组谷草转氨酶活性分别提高了0.95%、16.22%、92.95%和137.94%，其中Ⅳ和Ⅴ组均达到显著水平（P < 0.05）。结果表明，在青脚麻鸡日粮中添加抗菌肽和益生菌复合添加剂，可提高青脚麻鸡血清中总蛋白、白蛋白含量及碱性磷酸酶、谷草转氨酶活性，促进青脚麻鸡营养物质代谢，从而提高青脚麻鸡的生长性能和屠宰性能。

本试验旨在研究不同物候期天然牧草中所含的营养成分对放牧绵羊瘤胃内环境的影响。分别在牧草生长的不同时期（绿草期、盛草期和枯草期）选择不同的样方测定其混合牧草的营养成分，同时段选择6只放牧绵羊测定其瘤胃pH，氨态氮（NH₃-N）及挥发性脂肪酸（VFA）含量。结果显示：①牧草中粗蛋白质（CP）含量在绿草期含量最高（13.95%），显著高于其他阶段（P < 0.05），而枯草期最低，为5.14%；中性洗涤纤维（NDF）随着牧草的生长不断增加，酸性洗涤纤维（ADF）在绿草期含量最少。②瘤胃内环境参数随着不同物候期牧草中营养成分的变化而变化，瘤胃pH在盛草期显著低于其他阶段（P < 0.05），NH₃-N含量在枯草期显著低于其他两个阶段（P < 0.05），VFA含量在枯草期最低，盛草期显著高于绿草期（P < 0.05）。综上所述，放牧绵羊在枯草期由于摄入的CP含量减少，NDF增加，导致消化率降低，不能满足放牧绵羊的营养需要，故在枯草期到绿草期这一阶段应对其进行合理补饲，调控瘤胃发酵，以改善瘤胃内环境，提高其对营养物质的吸收。

试验旨在研究黄芪发酵前后对肉鸡生长性能、抗氧化功能的影响。将210只1日龄AA肉鸡随机分为7组，每组3个重复，每个重复10只。A组为对照组，饲喂基础日粮；B、C、D、E、F、G组分别在基础日粮中添加0.2%黄芪、0.5%黄芪、0.8%黄芪、0.2%发酵黄芪、0.5%发酵黄芪、0.8%发酵黄芪，添加量以质量百分比计。试验期为42 d。分别于第21、42天测定肉鸡生长指标、抗氧化指标。结果表明，在第21天，发酵黄芪组平均日采食量均显著高于黄芪组（P < 0.05），黄芪组料重比显著低于对照组和发酵黄芪组（P < 0.05）；E组血清过氧化氢酶（CAT）含量显著高于A、B组（P < 0.05），血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性显著高于与A组（P < 0.05）。在第42天，发酵黄芪组平均日增重均较高，料重比显著低于A、B组（P < 0.05）；试验组GSH-Px活性均显著高于A组（P < 0.05），发酵黄芪组与黄芪组相比差异不显著（P > 0.05），发酵黄芪组血清中超氧化物歧化酶（T-SOD）活性均高于黄芪组，且与B和C组差异显著（P < 0.05）。综上所述，在肉鸡日粮中添加一定量发酵黄芪能显著提高平均日增重，降低料肉比，且可通过提高血清中GSH-Px和T-SOD活性来提高其抗氧化能力；发酵黄芪的作用效果优于黄芪，最适宜添加量为0.5%。

为揭示食欲素前体（prepro-orexin）基因对长白猪采食和生长性状的影响，试验采用PCR产物直接测序法对132头长白猪prepro-orexin基因的C62T和G426A位点多态性进行检测，并对各位点与30~100 kg阶段的采食及生长性状进行关联分析。结果表明，长白猪prepro-orexin基因C62T和G426A位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态，等位基因频率表现为野生型（C、G）高于突变型（T、A）；两个位点的4种单倍型和7种单倍型组合中，CG、TA为主要单倍型，CG/CG、TA/CG和TA/TA为主要单倍型组合。C62T位点的CC基因型、G426A位点的GG基因型及CG/CG单倍型组合均可显著减少日采食次数、延长每次采食时间和提高每次采食量（P < 0.05）；其中CG/CG组合的日采食次数、每次采食时间、每次采食量分别较TA/CG组合显著减少1.22次、延长0.79 min和提高32.18 g（P < 0.05），而与TA/TA组合的差异未达到显著水平（P > 0.05）。C62T位点的TT基因型、G426A位点的AA基因型及TA/TA单倍型组合可显著或极显著缩短达100 kg体重日龄、提高30~100 kg平均日增重（P < 0.05；P < 0.01）；TA/TA组合达100 kg体重日龄分别较CG/CG、TA/CG组合分别显著缩短6.23和6.69 d（P < 0.05），平均日增重分别极显著提高47.91和50.04 g/d（P < 0.01）。结果表明，prepro-orexin基因C62T和G426A位点对长白猪采食和生长性状的影响具有明显的协同效应。

试验旨在研究白细胞表面抗原DRB1基因外显子3多态性与哈萨克羊布鲁氏菌病易感性的相关性。运用混合DNA池结合PCR产物直接测序方法，对哈萨克羊DRB1基因外显子3进行多态性分析，经卡方检验分析每个SNP位点的等位基因频率、基因型频率及其多态性与布鲁氏菌病易感性的相关性，利用生物信息学分析软件对PCR扩增所获序列进行RNA二级结构及蛋白质的二级结构和抗原表位分析。结果表明，在282 bp的外显子3序列中共检测到7个SNPs，分别为：T10C、C119T（Trp→Arg）、G215C（Gln→Glu）、A238G、T245G（Ser→Ala）、G256A、C259T，这些位点在病例组和对照组之间的等位基因频率及各基因型间不存在显著性差异（P > 0.05）；进一步分析发现，各突变位点均引起RNA二级结构和最小自由能的改变，各错义突变位点均未引起蛋白质二级结构和抗原表位的改变。由此得出，DRB1基因外显子3的7个SNPs位点（T10C、C119T、G215C、A238G、T245G、G256A和C259T）与哈萨克羊布鲁氏菌病易感性无相关性。

为了探讨静原鸡极长链脂肪酸延伸酶蛋白2（elongation of very-long-chain fatty acids 2，ELOVL2）基因的遗传特性，确定核苷酸的变异位点，本研究采用PCR-SSCP及DNA测序技术对静原鸡ELOVL2基因进行多态性检测。结果显示，静原鸡ELOVL2基因外显子6无多态性，内含子2和6呈中度多态。在ELOVL2基因内含子2扩增片段上共检测到5种基因型：A₂A₂、B₂B₂、C₂C₂、D₂D₂和A₂C₂，4种等位基因：A₂、B₂、C₂和D₂，其中A₂为优势等位基因（0.62），A₂A₂基因型为优势基因型（0.54）；3个SNPs位点：g.63372228+4918G > A的转换、g.63372228+5024T > C的转换和g.63372228+4928C > A的颠换。在E2e6I6扩增片段上共检测到3种基因型：A₁A₁、B₁B₁和A₁B₁，2种等位基因：A₁和B₁，其中A₁为优势等位基因（0.67），A₁A₁基因型为优势基因型（0.54），等位基因B₁存在g.63388000+748G > C的颠换。群体遗传学分析发现，静原鸡ELOVL2基因内含子2、6遗传纯合度均较高，且偏离了Hardy-Weinberg平衡（P < 0.05）。本研究结果表明，静原鸡ELOVL2基因内含子2和6序列突变较高，且呈中度多态，表现出纯合子优势，外显子6上无突变。

本研究旨在探索转化生长因子β3（transforming growth factor beta 3，TGFβ3）基因在大白猪×民猪构建的F2代资源群体内的多态性，并分析其多态性与猪脊椎数性状的关系。试验采用PCR技术，以F0代个体的DNA为模板，筛选TGFβ3基因外显子区的SNP，并将筛选到的SNP在F2代群体中进行验证，进而分析SNP与猪脊椎数性状的关联性。结果发现，TGFβ3基因在F0代个体中仅筛选到1个SNP位点，即SSC7：105179474 G > A，表现为两种基因型GG和GA。TGFβ3基因不同基因型与F2代个体脊椎数性状的关联分析表明，SSC7：105179474 G > A与猪肋骨数、胸腰椎数之和呈极显著相关（P < 0.01），与猪腰椎数无显著相关（P > 0.05）。χ²适合性检验发现，该位点处于Hardy-Weinberg平衡状态（P > 0.05）。综上所述，TGFβ3基因可能是影响猪脊椎数性状的主效基因或与主效基因连锁，SSC7：105179474 G > A位点有望作为提高猪脊椎数性状的分子遗传标记。

目前中国母猪年生产力（PSY）水平与同期发达国家相比偏低，主要表现为仔猪断奶前死亡率高，对养猪业造成较大损失。为了解中国仔猪在繁育环节的经济损失情况，基于1980~2016年中国PSY数据，总结中国近37年PSY的波动趋势及原因，对仔猪繁育环节死亡仔猪带来的乳汁及教槽料损失进行估算。估算结果为：中国仔猪繁育环节乳汁的损失系数为3.47%~3.50%，2015年损失乳汁56.17万~77.71万t；教槽料损失系数为1.63%，2015年损失教槽料4.80万t。中国仔猪繁育环节的损失系数远高于发达国家，其中乳汁与教槽料损失系数均是PSY最高的丹麦的1.59倍，均是损失系数最低的爱尔兰的2倍多。仔猪繁育环节的损失系数与仔猪断奶前死亡率有关，教槽料的损失系数由于不同生猪养殖场饲养方式不同存在较大差异，所以，要提高养殖场管理水平，尤其要加强断奶前仔猪的保育，减少死亡率。

试验旨在探讨不同剂量中药复方多糖在不同MHC B-Lβ Ⅱ基因型鸡淋巴细胞中对TLR4及下游MyD88依赖性信号转导通路主要元件的影响。采用PCR-SSCP方法将500羽京红1号蛋鸡按MHC B-Lβ Ⅱ基因型分组，采集不同MHC B-Lβ Ⅱ基因型鸡外周血淋巴细胞，分别加入终浓度为100、75、50、0 μg/mL（高、中、低剂量组和对照组）中药复方多糖共培养16、24、32、48 h收集细胞，应用实时荧光定量PCR方法检测不同MHC B-Lβ Ⅱ基因型鸡TLR4、MyD88、TNAF-6基因的表达。结果显示，与对照组相比，中药复方多糖能显著增强不同MHC B-Lβ Ⅱ基因型鸡TLR4、MyD88、TNAF-6 mRNA的表达量（P < 0.05）；中、低剂量组AA基因型鸡TLR4、MyD88、TNAF-6基因的表达量高于高剂量组（培养16 h时TLR4基因除外），高剂量组BB基因型TLR4、MyD88、TNAF-6基因的表达量高于其他剂量组（培养32和48 h时TLR4基因除外）），低剂量组BC基因型TLR4、MyD88、TNAF-6基因的表达量高于其他剂量组（培养16 h时TLR4基因除外）。结果表明，中药复方多糖发挥机体免疫调节作用的机制是通过与淋巴细胞表面TLR4结合，激活下游MyD88依赖性信号转导通路，调控细胞免疫，且不同MH-C B-Lβ Ⅱ基因型鸡淋巴细胞最适中药复方多糖免疫调节剂量不同。

牛支原体（Mycoplasma bovis，M.bovis）是一种造成全世界范围内育肥牛和奶牛多种疾病综合征的重要病原体。临床症状主要包括长期性肺炎及多发性关节炎（CPPS）、呼吸道疾病综合征（BRD）、乳腺炎及生殖器官疾病。牛支原体能感染多种组织和器官，也能从健康的牛体内分离，是威胁畜牧业生产的主要病原体。由于临床上抗生素治疗效果不佳，预防或控制牛支原体感染最好的选择是研发有效的商业可用的疫苗。牛支原体疫苗的研究已历经多年，虽然存在很多问题，但也取得了一定进展。文章对牛支原体弱毒疫苗、灭活疫苗及亚单位疫苗的研究进展进行了总结，并讨论了疫苗设计的优化方案，为合理设计和研发有效的牛支原体防控技术提供参考。

试验旨在了解广西部分地区畜禽产品中沙门氏菌血清型分布和耐药状况，以及β-内酰胺酶bla_TEM、bla_CTX-M基因和氟喹诺酮类抗生素耐药基因qnrA、oqxA、oqxB、aac（6'）-Ⅰ b-cr的流行情况。对沙门氏菌进行分离鉴定与血清型分型，采用K-B纸片法对其中随机挑选的80株分离株进行24种抗菌药物敏感性试验，并采用PCR方法进行耐药基因检测。结果显示，从零售生鲜畜禽肉中分离的176株沙门氏菌分属5个血清群，共26种血清型，主要优势血清群为B群60.23%（106/176）、E群18.75%（33/176）和C群15.91%（28/176），主要优势血清型为德尔卑沙门氏菌35.23%（62/176）、鼠伤寒沙门氏菌11.93%（21/176）和伦敦沙门氏菌9.66%（17/176）。80株分离株对24种抗菌药物均产生不同程度的耐药，其中对复方新诺明、林可霉素、利福平的耐药率最高，均高于90.00%，对青霉素、氨苄西林、阿莫西林、强力霉素、头孢拉啶、头孢氨苄、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻肟、阿奇霉素的耐药率介于50.00%~90.00%之间，对环丙沙星、氧氟沙星、氟苯尼考的耐药率小于10.00%；所有分离株均为多重耐药株，其中最少为2重耐药，最多为17重耐药，多重耐药性主要集中在10~16重耐药，共占总数的78.75%（63/80）。PCR结果显示，80株分离株各基因的检出率分别为：bla_TEM 98.75%（79/80）、bla_CTX-M 26.25%（21/80）、oqxA 26.25%（21/80）、oqxB 21.25%（17/80）、qnrA 16.25%（13/80）、aac（6'）-Ⅰb-cr 50.00%（40/80）。结果表明，广西畜禽产品源沙门氏菌血清型呈多样性分布，分离株的耐药情况严重，临床日益严重的耐药现象与耐药基因的普遍存在有很大的关系。

为了解湖北某养殖场猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）流行毒株的遗传变异和临床感染情况，试验采集10份疑似PRRS发病仔猪的肺脏、淋巴结等临床样品，应用RT-PCR方法扩增PRRSV的Nsp2部分基因用于定性检测分析，并对扩增的其中2份PRRSV阳性样品进行ORF5基因核苷酸序列测定，结合不同疫苗毒株开展同源性比对分析。为进一步揭示病因，通过多重PCR方法对10份发病猪的肺脏和12份鼻拭子样品进行了相关致病菌的鉴定，并对其中的2株不同病原菌开展药敏试验。结果显示，10份临床样品中有5份检测到美洲型变异PRRSV，病原阳性率为50%。ORF5全基因序列分析表明，2个流行毒株间的核苷酸同源性为99.7%，与以TJM-F92、JXA1-R、HuN4-F112等为代表的高致病性致弱疫苗毒株核苷酸同源性最高，为96.7%~97.0%；与美洲型标准毒株VR2332的同源性分别为87.6%和87.9%；与国内较早分离的经典毒株（CH-1R和R98株）的核苷酸同源性分别为92.9%和87.4%、87.7%。患病猪临床常见感染模式为PRRSV+PM+SS、PRRSV+PM或PRRSV+HPS，2株主要致病菌药敏试验表明，多杀性巴氏杆菌对头孢曲松、阿莫西林等药物高度敏感，猪链球菌对阿莫西林、氨苄西林、阿奇霉素等药物高度敏感。本研究揭示了该场保育猪的发病病原，并从分子水平明确了临床PRRSV与不同疫苗毒株的亲缘关系，为弱毒疫苗的合理选择使用和综合防控PRRS提供了实践依据。

茶树油（tea tree oil，TTO）也称互叶白千层油，从桃金娘科互叶白千层属的新鲜枝叶中提取得到，属白千层萜品型香料油，具有良好的杀菌抑菌及保健作用，且无毒害。近几年，由于抗生素的滥用，细菌耐药性成为世界性话题，越来越多的研究人员从天然植物中寻找抗生素替代品，茶树油作为迄今为止发现的最有效的天然抗菌剂之一，有望成为一种可缓解全球抗菌药物危机的天然抗菌剂，得到了广大科研工作者的青睐。其对常见微生物的杀灭性及在兽药耐药性及残留方面均比化学药品有显著的优越性，有广泛的开发利用前景。由于茶树在中国的种植面积相对较少，加上茶树油的提取工艺相对落后，使得其本身的生产成本较高，影响了其在基础兽药中的开发利用价值。文章主要从茶树油的相关概述、提取、主要化学组成、药理作用及相关应用中对茶树油的相关性质作一简单阐述，以期为将其开发成为市场前景广阔的天然抗菌剂提供参考，为相关研究提供基础理论依据。

本试验旨在研究嗜酸乳杆菌发酵中药对产肠毒素大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC）K88所致腹泻小鼠的影响。选取6~8周龄巴比西小鼠（BALB/c）100只，分为4组，分别为空白对照组（Ⅰ组）、大肠杆菌感染模型组（Ⅱ组）、中药发酵组（Ⅲ组）及中药水提组（Ⅳ组），其中Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组小鼠均用"抗生素+大肠杆菌"模式造模。Ⅰ、Ⅱ组饲喂不含任何药物的基础日粮，Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加10%中药发酵液、10%中药水提液。统计分析各组小鼠腹泻率、腹泻指数、免疫器官指数、肠道菌群及细胞因子IFN-γ、IL-4的含量。结果显示，ETEC K88感染小鼠36 h后，与Ⅱ组相比，Ⅲ、Ⅳ组小鼠腹泻指数（P < 0.05）与腹泻率降低，且Ⅲ组腹泻指数显著低于Ⅳ组（P < 0.05），Ⅲ、Ⅳ组盲肠内大肠杆菌数量较Ⅱ组降低，双歧杆菌及乳酸菌数量提高，且Ⅲ组效果更优；Ⅲ、Ⅳ组的免疫器官指数均高于Ⅰ和Ⅱ组，且与Ⅱ组相比，Ⅲ组的脾脏指数、胸腺指数及肝脏指数分别提高了48.37%、29.57%、36.88%，且差异均显著（P < 0.05）；Ⅲ、Ⅳ组IFN-γ/IL-4比值较Ⅱ组提高，且Ⅲ组高于Ⅳ组。综上所述，乳酸菌发酵中药液具有降低腹泻小鼠腹泻率及腹泻指数，提高免疫器官指数，维持肠道菌群平衡及快速消除体内炎症反应等作用，可为开发防制ETEC所致的仔猪腹泻产品提供参考。

为了确定黄颡鱼发病的原因，试验从患病黄颡鱼体内分离得到1株病原菌，命名为GDYM20160809，通过形态学观察、生理生化特性鉴定、16S rDNA分析及系统进化树构建等方法对分离菌进行鉴定，采用滤纸片扩散法对分离菌进行药敏试验。结果显示，该分离菌为革兰氏阴性短杆菌，PCR扩增其16S rDNA片段，经测序及BLAST比对，显示其与迟钝爱德华菌（Edwardsiella tarda）的同源性达100%，结合生理生化鉴定结果确定分离菌为迟钝爱德华菌。药敏试验结果显示，分离菌对磺胺类药物、头孢类药物、青霉素、复方新诺明等药物敏感，对磺胺间甲氧嘧啶钠、新生霉素、多黏菌素B、阿米卡星、卡那霉素和万古霉素6种药物耐药；人工感染试验结果证实，菌株对罗非鱼、禾花鲤、草鱼和黄颡鱼都有很强的致病性。本试验结果为有效防控黄颡鱼细菌性疾病提供了理论依据，并可指导养殖户合理用药。

为研究防治鸡大肠杆菌病的新方法，减少抗生素的使用及耐药菌株的产生，试验选取黄连、乌梅、白术等中药制成黄连组方口服液，检测其对大肠杆菌O₇₈的抑制作用与临床疗效。体外试验采用最小抑菌浓度（MIC）与最小杀菌浓度（MBC）检测口服液抑菌效果；应用流式细胞仪观察口服液对细菌死亡率的影响；利用扫描电镜和透射电镜观察口服液对菌体形态与结构的影响；临床试验检测口服液对鸡大肠杆菌病的治疗效果及免疫器官指数的影响。结果显示，口服液对大肠杆菌的MIC为62.5 mg/mL，MBC为250 mg/mL；流式细胞仪检测可见口服液组大肠杆菌的死亡率为74.1%，空白对照组大肠杆菌死亡率为37.2%；扫描电镜下可见口服液处理组的菌体溢缩、断裂，形成许多残体；透射电镜下可见菌体变形，质壁分离现象。临床疗效显示，黄连组方治愈率为86.67%，而西药组治愈率为63.33%；空白对照组和西药组脾脏指数与模型组差异极显著（P < 0.01），空白对照组、西药组、黄连组方高剂量组的法氏囊指数极显著高于模型组（P < 0.01），模型组的胸腺指数显著低于其余各组（P < 0.05）。本试验结果表明，黄连组方可使菌体发生变形、溢缩断裂、质壁分离等变化达到杀菌效果，并可通过提高动物体免疫力来防治雏鸡大肠杆菌病。

为了解天津地区2型猪链球菌的流行及耐药情况，本研究收集该地区部分规模化养猪场疑似猪链球菌病病料317份，通过病原分离培养、染色特性观察、生化试验、PCR扩增等方法进行鉴定，并对分离菌进行致病性及药敏试验。结果从样品中分离鉴定出11株2型猪链球菌。对小鼠的致病力试验结果显示，应用0.5×10⁸ CFU/mL的细菌攻击小鼠，11株2型猪链球菌分离株中有6株具有致死性，其中1株致死率较强，5株致死率较弱。药敏试验结果表明，11株分离菌对9种临床常见药物均表现出很强的耐药性，其中对阿米卡星、四环素和强力霉素耐药性最强，耐药率达到100.00%；且所有分离株均呈多重耐药，其中4个分离株为9重耐药，占36.36%（4/11）。本试验结果表明，天津地区存在2型猪链球菌感染情况，且对多种抗菌药均产生了耐药性，应引起养殖户的高度重视，在防制猪链球菌病时，应有针对性地合理、科学、规范用药和交替用药。

通过对2008~2017年期间Web of Science^TM数据库中"多糖表征（polysaccharide characterization）"研究论文产出进行统计比较，分析全球范围内有关"多糖表征"研究情况。根据Web of Science^TM所有数据库，以"polysaccharide characterization "和" polysaccharide structure"为标题，通过文献计量学方法，从发文量、国家/地区、科研机构、期刊、作者、论文被引次数和研究方向等方面分析了"多糖表征"的研究现状和趋势。结果表明，全球在该领域的发文量呈现上升趋势；中国的发文量最多；机构中俄罗斯科学院发文量最多；中国科学院是国内发文量最多的机构；发文量最多的作者来自俄罗斯科学院；英国的《Carbohydrate Polymers》期刊载文量最多；被引次数最多的文章来自佐治亚大学；研究方向主要集中在生物化学与分子生物学、化学、农学等研究方向，学科交叉性较强；各国在多糖表征分析的方法运用上没有太大差异，相较于中国，美国、俄国、英国在多糖表征的应用上更为前沿。