为探讨水牛SOX2基因的转录调控机制,本试验克隆获得其长2555 bp 的5'调控序列片段,结合生物信息分析设计了-2263、-1816、-1275、-660和-407 bp 5个缺失体,并分别构建其EGFP表达报告载体,通过生产转基因早期胚胎和转染水牛胎儿成纤维细胞分析各缺失体片段的转录活性。结果发现,除-407 bp以外的各缺失体在猪4.5 d早期胚胎细胞中均能成功启动下游EGFP的表达,且随着片段缩短,其转录活性呈极显著递减趋势(P<0.01);而转染水牛成纤维细胞48 h后,除p-407-EGFP以外的各缺失体报告载体转染组均观察到少数细胞发光,转录活性两两之间差异均极显著(P<0.01),转录活性从高到底排布分别为-2263、-660、-1275和-1816 bp。p-407-EGFP载体在胚胎水平和细胞水平均未观察到荧光。以上结果表明,-660~-407 bp是构成水牛SOX2基因表达不可缺失的部分,-2263~-1816 bp中有非多能细胞特异性的增强子元件存在,而-1816~-1275 bp和-1275~-660 bp均含有多能性细胞特异性的增强子元件。

为进一步分析黑色素皮质激素受体-1(melanocortin-1 receptor,MC1R)基因的分子特性,利用生物信息学方法对GenBank中已报道的赤狐MC1R基因完整编码区序列的碱基组成特点及其编码蛋白的结构特征进行了预测及分析,构建了12个物种MC1R蛋白的系统进化树。结果表明,赤狐MC1R基因编码区序列长度为954 bp,共编码317个氨基酸,为单一外显子,G+C含量高于A+T,编码的蛋白质是一种分子质量为34.8694 ku,等电点为9.13的亲水性稳定碱性蛋白;存在7个强跨膜区、7个广泛磷酸化位点和1个潜在的蛋白激酶C磷酸化位点(第157位的苏氨酸),α-螺旋为其主要二级结构元件;属于G蛋白偶联受体家族一员,包括多个潜在重要功能基序;同源性分析与分子进化树结果均表明,赤狐与北极狐、狗和貉的亲缘关系最近。

猪黑素皮质激素受体-4(melanocortin-4 receptor,MC4R)基因是影响猪生长肥育的主效基因之一,为了进一步研究MC4R基因的生物学功能,制备高成活率转基因猪,通过采用条件性诱导表达载体系统,PCR方法扩增了猪MC4R基因完整编码区,四环素诱导表达系统(Tet-on)的启动子调控区与转录调节元件。采用双酶切和连接等方法将上述元件连接到pcDNA3.1(+)上,构建了重组质粒pcDNA3.1(+)-rtTA-P_Tight-MC4R。经双酶切和测序鉴定,结果显示片段正向连接且片段全长测序正确。试验成功构建了四环素诱导的pcDNA3.1(+)-rtTA-P_Tight-MC4R真核表达载体, 并能在时间特异性方面调控MC4R基因的表达。

本试验采用酶消化法分离得到大鼠颅骨成骨细胞,取第3代成骨细胞,通过加入不同浓度的肉苁蓉水提液(5×10^-5~5×10^-1 mg/mL)来提取细胞总RNA,再采用实时荧光定量PCR方法,来观察不同浓度的肉苁蓉水提液对大鼠成骨细胞骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)基因表达的变化。从试验结果可以得出,肉苁蓉水提液对大鼠成骨细胞BMP2基因表达具有促进作用。

试验利用Trizol法从鸡肠道组织提取总RNA,采用特异性引物通过RT-PCR扩增出α-2,3-唾液酸转移酶Ⅰ(α-2,3-sialyltransferaseⅠ,ST3GALⅠ)基因的cDNA片段,并将其克隆至pGEM-T easy载体,获得阳性重组质粒,再以阳性重组质粒为模板亚克隆ST3GALⅠ基因的完整ORF区,定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,进行PCR、限制性酶切和DNA序列分析鉴定。结果表明,ST3GALⅠ基因全长1029 bp,测序结果同GenBank数据库收录的序列一致,无任何密码子缺失与突变,插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)上的目的基因大小方向均正确。本研究成功构建了pcDNA3.1(+)-ST3GALⅠ真核表达载体,为下一步的真核表达及对ST3GALⅠ基因的功能研究奠定了基础。

猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)是统称为猪圆环病毒相关疾病(porcine circovirus-associated disease,PCVAD)的几个综合征的主要致病因子。目前,对PCV2配体表位和细胞受体在病毒入侵过程中的致病机理还不清楚,受体识别是病毒黏附到宿主细胞表面的第一步,在病毒入侵和致病机理方面起到重要的作用。作者对近几年来PCV2侵染的靶细胞及其靶细胞受体的研究进展作一综述。

为了制备特异性的抗绵羊肺腺瘤病毒(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV) 内蒙株衣壳蛋白(CA)的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系,以原核表达CA蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,经4次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞经杂交瘤技术进行融合,同时以表达蛋白作为包被抗原进行特异性ELISA检测,共筛选到6株阳性杂交瘤细胞株。经过3次亚克隆后,最终得到了5株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株;再利用CA真核表达蛋白以间接免疫荧光法,对此5株杂交瘤细胞进行进一步的特异性鉴定。结果显示,有3株具有特异性强荧光反应,也能检测到目的基因的表达产物。本试验获得了3株稳定分泌抗JSRV-NM株CA蛋白McAb的杂交瘤细胞系,为建立检测病原的特异性诊断方法、分析JSRV-NM株CA蛋白的功能及鉴定B细胞抗原表位等奠定基础。

本试验以兔、牛、人及感染日本血吸虫后小鼠血清蛋白为对照,分别提取东方田鼠和小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、皮肤、骨髓和脑组织蛋白,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,综合比较和筛选东方田鼠组织及血清中潜在的抗日本血吸虫相关蛋白组分。结果表明,随着感染日龄的增加,小鼠在感染日本血吸虫后12和45 d,其血清中85 ku附近蛋白质条带较东方田鼠表达量明显上调,且有继续升高的趋势;东方田鼠肝脏及血清中150 ku组分蛋白电泳条带与其他动物相同组织中相应蛋白质在表达量存在显著差异,蛋白质表达丰度高,该蛋白质组分可能与东方田鼠抗日本血吸虫作用相关。

副猪嗜血杆菌是引起猪格氏病的病原,多继发感染引起全身性疾病,其高发病率和死亡率给养殖业造成严重损失。作者主要对其潜在毒力因子,包括外膜蛋白ompP5和ompP2、自转运蛋白vtaA、转铁蛋白、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶和毒素等的研究作一综述,并对应用于副猪嗜血杆菌的最新研究方法进行概述,从而形成对其毒力相关研究较全面的认识。

根据GenBank中登录的猪嵴病毒3D基因保守序列,设计合成1对引物,以腹泻哺乳仔猪的小肠为起始材料,建立了猪峭病毒的RT-PCR检测方法,并用该方法对收集的50份哺乳仔猪腹泻样本进行检测。结果显示,该方法对模板的最小检测量是2.3 pg,检测猪其他常见致腹泻病毒均为阴性,同一样品3次试验结果一致;所扩增的序列经测序分析均为猪嵴病毒的3D核苷酸序列;仔猪腹泻样本的猪嵴病毒检出率达58%。结果表明,该方法敏感度高、重复性和特异性良好,可用于猪嵴病毒的分子流行病学调查和临床病例的快速诊断。

本研究以原核表达的重组NS1蛋白作为诊断抗原,建立了检测猪细小病毒(PPV)野毒抗体的NS1-ELISA诊断方法。该方法检测猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、猪流行性腹泻病毒5种常见猪病病毒的阳性血清均为阴性;检测灵敏度为1:12800;批内、批间重复性试验的变异系数分别小于5%和10%;与血凝抑制试验(HI)符合率为100%。本研究建立的PPV NS1-ELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,为PPV的野毒抗体检测及PPV流行病学调查等快速诊断提供了一种技术手段。

为建立一种简单、快速、灵敏、准确的禽流感H9检测方法,本研究根据GenBank中收录的禽流感H9病毒高度保守的基因序列,设计1对H9的特异性引物,建立了一步法快速检测禽流感的PCR,对反应条件进行优化后,组装成快速检测试剂盒,并对临床收集的疑似禽流感病料进行检测。结果显示,试验成功建立了禽流感H9病毒一步法RT-PCR检测方法,在此基础上完成了试剂盒的组装,对30份疑似禽流感病料的检出率高达98%以上,检测灵敏度达10^1.5ELD₅₀,稳定性良好, 冷冻保存期达12个月。经证实该试剂盒具有操作简便、经济、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好、稳定性高等优点,值得推广应用。

参考牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)基因组序列设计1对引物,扩增出650 bp的E0基因片段。将目的片段克隆至pMD18-T载体,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。将E0基因定向亚克隆到pET32a表达载体中,酶切及测序鉴定正确后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导得到了以包涵体形式表达的重组蛋白。重组蛋白经亲和层析法纯化后,免疫印迹检测证明纯化的重组蛋白具有良好的活性。

本研究采用间接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)检测黄曲霉毒素B₁(aflatoxins B₁,AFB₁)残留量。将AFB₁与蛋白质载体牛血清蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备了AFB₁-BSA和AFB₁-OVA偶联物,以AFB₁-BSA作为免疫原制备特异性抗体,并成功建立了AFB₁残留间接竞争ELISA检测方法及检测试剂盒。试剂盒IC₅₀为128.8 ng/L,检测线性范围为50~1800 ng/L,检测限不超过100 ng/kg;食用油、花生和谷物的平均添加回收率大于71.3%,批内、批间变异系数均小于14.2%。因此,本试剂盒具有操作简便、检测快速、灵敏度高等特点,将在植物性食品中AFB₁的残留检测中发挥重要作用。

随着分子生物学技术与重组DNA技术的不断发展、基因工程疫苗研究的不断深入,传统疫苗体现出诸多缺陷。因此,利用植物基因工程方法开发新疫苗逐渐成为疫苗研究的重点。目前,在转基因植物中表达的主要有大肠杆菌热敏肠毒素B亚单位、乙型肝炎病毒表面抗原、诺沃克病毒外壳蛋白、口蹄疫病毒、狂犬病病毒糖蛋白、变异链球菌表面蛋白和艾滋病病毒抗原等10多种疫苗。与传统疫苗相比,转基因植物疫苗具有价廉、安全、有效、易于运输与保存等优点,因而成为现代疫苗学研究的一个热点。文章综述了国内外植物基因工程疫苗的现状及最新研究进展,对其存在的问题及对策进行讨论,对其发展前景进行展望。

为建立一种快速检测牛病毒性腹泻病毒病原的方法,本研究根据GenBank上登录的牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)基因组序列,设计1对引物,建立了检测BVDV的一步法RT-PCR方法。该方法对牛传染性鼻气管炎病毒、猪瘟病毒、牛副流感病毒3型的扩增结果均为阴性,检测的敏感性达1 ng RNA。该一步法RT-PCR方法具有良好的特异性、敏感性、重复性,可以准确快速检测出极低含量的BVDV,将为BVDV的病原检测及分子流行病学调查等提供一种快速、灵敏、特异、准确的分子生物学检测方法。

为建立一种快速的鸭坦布苏病毒病原检测方法,本研究根据GenBank上登录的鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)基因组序列,设计1对引物,建立了检测DTMUV的RT-PCR诊断方法。该方法对Ⅰ型鸭肝炎病毒、新城疫病毒、减蛋综合征病毒、鸭肠炎病毒等常见鸭病的扩增结果均为阴性,检测的敏感性达1 ng RNA。该RT-PCR方法具有良好的特异性、敏感性、重复性,可以准确快速检测出极低含量的DTMUV,将为DTMUV的病原检测及分子流行病学调查等提供一种快速、灵敏、特异、准确的分子生物学检测方法。

DNA疫苗是在分子生物学技术基础上发展起来的第3代新型疫苗,已体现出其竞争优势和应用潜能。同传统的疫苗相比,DNA疫苗具有免疫效果好、生产成本低、临床应用方便等优点,但同样存在安全性的担忧。文章回顾了DNA疫苗的发展简史,阐述了DNA疫苗的免疫机理,分析了DNA疫苗研究现状,并对DNA疫苗的安全性提出了自己的观点与看法,旨在为DNA疫苗研究提供参考。

本试验利用PK15细胞从江西省某猪场疑似猪痘的保育猪皮肤痘痂中分离到1株病毒,该分离毒株在PK15单层细胞上能连续盲传培养,不产生明显的细胞病变,通过PCR扩增猪痘病毒P35基因,扩增序列与猪痘病毒参考株(AF410153.1)P35基因的核苷酸同源性为97.9%,表明该分离病毒为猪痘病毒,并命名为SWPV-JX01。将SWPV-JX01株F5代细胞培养液经肌肉和皮下注射感染兔和小鼠,人工感染80 h后,通过PCR检测不同组织的猪痘病毒P35基因,从兔的肾脏、脾脏、皮肤、心肌、淋巴结均能扩增到P35基因,且扩增序列与SWPV-JX01株同源性为100%。试验结果表明,SWPV-JX01株能在兔体内增殖,但不能在昆明鼠体内增殖。

本试验旨在研究青海半细毛羊白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)基因分子进化情况,对IL-8基因进行了克隆及序列分析。根据GenBank公布的羊IL-8基因序列设计1对特异性引物,RT-PCR扩增目的片段,将目的基因与pMD18-T克隆载体连接,转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,对PCR与酶切鉴定为阳性的重组质粒进行序列测定,采用生物信息学软件对IL-8基因序列进行序列分析。结果表明,羊外周血淋巴细胞中扩增出与预期大小(370 bp)相符的条带,同源性分析结果显示,克隆的核苷酸序列与已知IL-8基因序列同源性为96.1%~99.0%,是较为保守的基因。

试验旨在研究转植酸酶基因玉米代替非转植酸酶基因玉米添加到肉仔鸡日粮中对肉仔鸡生长性能、胴体性能及肉品质的影响。采用单因子完全随机设计,将160只1日龄AA肉仔公鸡分成2个处理组,每个处理组10个重复笼,每个重复笼8只鸡。对照组饲喂非转植酸酶基因的亲本玉米日粮,试验组饲喂转植酸酶基因玉米日粮,2个处理组鸡在试验期间饲喂的日粮中可利用磷等所有养分含量均相等或相近。试验期共42 d,分为1~21与22~42日龄2个饲养阶段。结果显示,试验组与对照组肉仔鸡各阶段的日增重、日采食量及料重比与42日龄鸡的胴体性能和多数肉质指标差异均不显著(P>0.05),而胸肌肉色(b*)、腿肌pH_{24 h}差异较显著(P<0.05),胸肌pH_{24 h}、腿肌肉色(b*)、剪切力、滴水损失差异极显著(P<0.01)。因此,试验期内转植酸酶基因玉米日粮对肉仔鸡生长性能、胴体性能和肉品质均未产生不良影响,初步说明转植酸酶基因玉米可完全替代普通玉米而用作肉仔鸡日粮的能量原料,且可降低无机磷的添加,从而减少肉鸡磷排出对环境的污染。

试验旨在研究槲皮素对蛋鸡生产性能及脂类代谢的影响。选择240只29周龄的海赛蛋鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10只鸡。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础日粮中添加0.02%、0.04%和0.06%槲皮素,试验期为8周。结果表明,与对照组相比,试验Ⅰ组槲皮素能显著提高蛋鸡产蛋率与血清胰岛素含量(P<0.05),显著降低肝脏粗脂肪含量(P<0.05);试验Ⅱ组槲皮素显著提高了蛋黄粗脂肪、蛋黄总磷脂、血清胰岛素和雌二醇的含量(P<0.05),显著降低料蛋比、肝脏粗脂肪含量(P<0.05),且低密度脂蛋白胆固醇有下降的趋势(P>0.05);试验Ⅲ组槲皮素能提高蛋鸡产蛋率、蛋黄粗脂肪与总磷脂的含量,但差异不显著(P>0.05)。因此,0.04%槲皮素为适宜添加量,能提高蛋鸡生产性能和蛋黄中磷脂含量,降低肝脏粗脂肪含量。

糖脂代谢是人和动物正常生长发育的能源基础,这将直接影响着动物的脂质性状,因此糖脂代谢目前已经成为培育优质畜禽品种的切入点。近年来,发现碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate response element binding protein,ChREBP)在调控动物糖脂代谢中具有重要的作用,特别在糖脂代谢的主要场所——肝脏中对糖脂代谢发挥着关键作用。作者就ChREBP的结构特征、组织分布、葡萄糖应答机制、生物学功能、表达调控等方面作一综述,以期为今后的研究提供理论依据。

试验旨在研究小鼠日粮中添加不同剂量的小花棘豆黄酮在其饲喂过程中的安全性。选用48只6~8周龄、体重为(20±2)g的小鼠,随机分为4组,每组12只,雌、雄各半。对照组饲喂全混合日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在全混合日粮中分别添加10、30、50 mg/kg小花棘豆黄酮,试验期为30 d。结果表明,小鼠采食小花棘豆黄酮后未见异常临床症状;小鼠血液学指标、血清生化指标和脏器系数均在正常范围内。提示,小鼠日粮中添加小花棘豆黄酮未发现亚慢性毒性,可以被安全利用。

试验旨在利用人工瘤胃双外流连续培养系统,初步研究日粮中添加不同浓度(0、0.15、0.30、0.60 g/L)蒺藜皂苷(GSTT)对反刍动物瘤胃发酵参数的影响。结果表明,日粮添加不同水平GSTT对瘤胃pH、总挥发性脂肪酸(TVFA)浓度无显著影响(P>0.05);随着GSTT添加水平的提高,人工瘤胃液内NH₃-N浓度、乙酸摩尔比例和乙酸/丙酸比例显著降低(P<0.05),丙酸摩尔比例显著升高(P<0.05)。提示,GSTT可望作为一种潜在的反刍动物瘤胃发酵调控剂来改变瘤胃发酵模式,改善对饲料能量和蛋白质的利用效率。综合考虑,0.30 g/L GSTT为较适宜添加量。

试验旨在研究日粮中添加不同浓度壳寡糖对蛋用鹌鹑免疫功能的影响。选用1日龄朝鲜鹌鹑240只,随机分为6组,每组2个重复,每个重复20只,即Ⅰ组饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组分别在基础日粮中添加0.01%、0.05%、0.10%、0.15%和0.20%壳寡糖,试验期为35 d。结果表明,壳寡糖可以显著提高鹌鹑法氏囊指数(P<0.05),极显著提高胸腺指数和脾脏指数(P<0.01);显著提高鹌鹑血清免疫球蛋白G(IgG)和M(IgM)的含量(P<0.05);可以维持较高的血清新城疫抗体效价(P<0.05),显著提高补体C3含量(P<0.05)。因此,日粮中添加壳寡糖可以促进鹌鹑免疫器官的生长发育,提高机体免疫力,增强抵抗传染病的能力,其中以添加0.05%壳寡糖效果较好。

应激条件下会影响猪的生产性能、行为及血液生理生化指标,对动物机体造成危害。因此,在畜牧生产实践中应尽一切努力防止应激特别是严重应激的发生,以免影响生产的有序进行,损害动物福利,降低经济效益。作者主要综述了断奶、冷、热、运输、屠宰等常见应激因素对猪的生产性能、行为及血液生理生化指标的影响。

本试验旨在探索猪雄性生殖干细胞(mGSCs)体外分离、培养的适宜条件,建立猪雄性生殖干细胞体外培养体系。采用两步酶消化法对新生小猪睾丸生殖干细胞进行了体外分离和初步的培养鉴定,并利用层黏连蛋白和明胶的不同贴壁特性,比较2种差易贴壁分选方法的富集效果,并对传代后的干细胞培养1周后进行碱性磷酸酶染色鉴定,通过免疫荧光技术检测培养细胞是否表达干细胞标志蛋白OCT-4。试验结果表明,层黏连蛋白更适用于猪生殖干细胞的富集、培养,细胞分选效率及增殖生长明显优于采用明胶分选的方法。培养的mGSCs拥有与小鼠mGSCs相同的形态、增殖及表达特征。鉴定结果显示,生长细胞克隆碱性磷酸酶染色呈阳性,支持细胞碱性磷酸酶染色呈阴性;培养的生殖干细胞克隆表达转录蛋白OCT-4,而饲养层支持细胞OCT-4抗体染色则呈阴性。结果表明培养的干细胞克隆仍保持较好的干细胞活性,保持正常的自我复制和分化潜能,初步建立了生殖干细胞培养体系。

本研究采用30日龄黄羽肉鸡90只,随机分成内毒素处理组(LPS组,5 mg/kg)、氨基胍治疗组(AG+LPS组)和生理盐水对照组。每组分别在处理后1、3、5、7和9 h时间点杀鸡取样,取肝脏组织匀浆,提取线粒体,分别检测肝脏线粒体复活体Ⅰ活性。试验结果显示,LPS在各时间段显著降低了肉鸡肝脏线粒体复合体Ⅰ的活性(P<0.05)。注射AG 1 h时,肉鸡肝脏线粒体复合体Ⅰ的活性未发生变化(P>0.05),3 h时却显著增加(P<0.05);5、7 h时,趋于正常(P>0.05);9 h时,显著降低(P<0.05)。由此推论,LPS诱导了线粒体的损伤,引起了线粒体内的复活体Ⅰ活性的紊乱,能量代谢障碍,组织机能发生改变;AG对LPS具有明显的颉颃作用,对机体起到保护作用。

奶牛泌乳主要受到以生长激素为核心的生长激素轴的调控,其调控原理错综复杂,鉴于此,在前人研究的基础上结合生长激素轴的组成及特点对其调控机制进行简单综述,以期対生长激素的泌乳调控有较深入的了解。

作者综述了乳蛋白合成信号通路JAK-STAT和mTOR的组成、在合成乳蛋白中的作用和机理,以及激素等对乳蛋白合成信号通路的刺激调控,对近年来JAK-STAT和mTOR通路的相关研究进展进行了综述,为乳蛋白合成信号通路的整体性把握和深入研究奠定了基础。

试验选择品种差异较大的贵州荷斯坦奶牛和务川黑牛构建不同DNA池,设计1对引物分别扩增2个牛种α-乳清蛋白(alpha-lactalbumin, LALBA)基因5'调控区及第1外显子部分序列总长1126 bp。结果表明,LALBA基因5'调控区存在5个SNPs位点:T-114C、C-166T、A-225C、C-344T、T-778C,T-114C仅在务川黑牛表现多态性。生物信息学软件预测LALBA基因核心启动子区及转录因子结合位点,SNP位点导致11个转录因子结合位点消失,其中1个位于核心启动子区,产生5个新的转录因子结合位点。突变前后RNA二级结构发生明显改变,目标序列未发现CpG岛。

利用13个微卫星基因座对中国5个矮马品种(德保、贵州、宁强、四川、云南)群体进行了遗传平衡检测。根据微卫星等位基因频率,应用无限等位基因模型(infinite allele model,IAM)、双相突变模型(two-phased model of mutation,TPM)和逐步突变模型(step-wise mutation model,SMM)3种模型,符号和Wilcoxon 符号—秩2种检验方法,对5个矮马群体的突变－漂移平衡进行分析。结果表明,在IAM下,Wilcoxon 符号－秩检验中,德保矮马和云南矮马达到了显著性水平(P<0.05);在SMM下,宁强矮马在符号检验中达到了显著水平(P<0.05);在TPM下,5个群体均未达到显著水平(P>0.05)。因此,德保、云南和宁强矮马近期可能经历了瓶颈效应。本研究结果对中国矮马的保护和利用具有重大意义。

本研究采用PCR-SSCP和DNA测序的方法检测了4个品种鸡(仙居鸡、白耳鸡、清远麻鸡和安卡鸡)Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)基因第2内含子的单核苷酸多态性。结果表明,4个品种鸡TLR4基因的第2内含子上均发现了G1894C的突变,共产生了AA、AB和BB 3种基因型,4个品种鸡该位点的多态信息含量(PIC)分别为0.570、0.597、0.583和0.588,均属于高度多态性,且处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);4个品种鸡G1894C多态位点的基因型在感染鸡白痢沙门氏菌阳性组和阴性组间的分布差异均不显著(P>0.05);G1894C多态位点在仙居鸡与白耳鸡2个品种间基因型分布差异极显著(P<0.01)。

为了探讨不同佐剂的奶牛乳房炎多联苗对小鼠免疫机能的影响,笔者将小白鼠分为3个组,每组30只,分别为蜂胶苗组、铝胶苗组和空白对照组。用制备的氢氧化铝胶和蜂胶2种乳房炎佐剂多联苗分别免疫小鼠,分别于免疫后的7、14、21、30和45 d采血,进行2种多联苗免疫后E-玫瑰花环率和淋巴细胞转化率测定。结果表明,蜂胶和铝胶2种佐剂苗与空白对照组相比均能显著提高小鼠的细胞免疫水平,2种苗的细胞免疫水平均在免疫后30 d左右达到最高峰(P<0.01),但在免疫后第30和45天时E-玫瑰花环率和淋巴细胞转化率,蜂胶苗组均极显著高于铝胶苗组(P<0.01),说明蜂胶佐剂比铝胶佐剂能更强地增强多联苗抗原对小鼠T细胞的致敏程度。该研究为进一步明确乳房炎多联苗免疫机制及筛选更好的免疫佐剂提供了科学数据。

为了解中国牦牛产志贺毒素的大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli, STEC)中主要黏附因子的流行情况,采用PCR方法对来自四川甘孜阿坝等地区健康牦牛的70株STEC的eae、saa、iha 3种与黏附相关的毒力基因进行检测,并对部分含有相关黏附因子的阳性分离株的毒力基因进行了克隆及序列分析。结果显示,牦牛STEC中saa、iha的阳性率分别为71.42%(50/70)和78.57%(55/70),无eae基因序列(0/70),saa、iha的测序结果与GenBank上序列的同源性分别为100%和93%~99%。健康牦牛分离的STEC无LEE毒力岛编码eae,其他的一些与黏附相关的主要毒力基因saa、iha的携带率较高。

牛呼吸道疾病的出现多是由牛疱疹病毒1型(BHV-1)、牛呼吸道合包体病毒(BRSV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛副流感病毒3型(BPIV3)、牛冠状病毒(BCV)、牛支原体、出血性败血性巴氏杆菌等病原的单独或混合感染造成的。文章针对这几种病原的病原学及相应的防制研究进行了综述。

从13个动物园的非人灵长类动物中采集了384份粪便样品,经过细菌分离培养后,并经染色镜检和生化试验等分离鉴定出153株沙门氏菌,分离率为39.84%。按照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)的判定标准,对分离得到的153株沙门氏菌进行了22种抗生素药物的药敏试验,结果表明,153株均表现出不同的程度的耐药性,其中,羧苄西林的耐药率最高,为95.42%,而亚胺硫霉素最敏感,敏感率为90.20%;且153株沙门氏菌分离株均为多重耐药菌株(n≥2),其中1株的耐药数可达18种之多,耐2~12种抗菌药物的菌株多达123株,占分离菌株的80.39%。从不同动物园分离的沙门氏菌对22种抗生素耐药情况的方差分析来看,在所调查的13个动物园中,不同动物园沙门氏菌分离株的耐药情况也不同。

非结核性分支杆菌属于放线菌目,分支杆菌科,分支杆菌属,其分布广泛,可传染家畜及人类。近年来随着越来越多的非结核性分支杆菌疾病被发现并报道出来,已经引起人们的广泛关注和学者的研究兴趣。由于非结核性分支杆菌其临床表现与结核性分支杆菌极为相似,诊断起来有一定的困难。根据国内外近几年的报道,对非结核性分支杆菌从易感人群、感染部位及长期慢性生长等角度综述其致病性,举例说明其临床症状,再总结比较了传统分析鉴定法、噬菌体分析法、聚合酶链式反应技术和核酸探针等几种非结核性分支杆菌的鉴定方法,建议在临床表征相似时,不仅仅采用传统方法进行分离鉴定,应该采用多种分离方法相结合来进行细菌的分离鉴定,减少时间,节约成本,同时继续研发新的分类方法。

为研究益生菌剂对仔猪肠道菌群的影响,选择60头7.5 kg左右的"杜洛克猪×长白猪×大白猪"原种猪,随机分成2组,每组3个重复,每个重复10头。将仔猪分为试验组和对照组,对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮+0.1%益生菌剂,检测各组仔猪生产性能及肠道菌群等。试验结果表明,益生菌制剂能显著降低仔猪腹泻率(P<0.05),促进仔猪的生长;大肠杆菌和肠球菌是仔猪肠道非常住菌群(过路菌),乳酸杆菌、双歧杆菌、产气荚膜梭菌为常住菌群;益生菌剂能极显著减少仔猪肠道的好氧菌(P<0.01),极显著增加仔猪肠道的厌氧菌、双歧杆菌和乳酸杆菌(P<0.01),显著降低仔猪肠道的产气荚膜梭菌(P<0.05)。因此,饲料中添加益生菌剂能有效改善仔猪肠道菌群。

施马伦贝格病毒病(Schmallenberg virus,SBV)是一种新发现的动物传染病,因于2011年底在德国施马伦贝格镇首次发现而临时得名,随后蔓延于西欧(包括比利时、法国、德国、荷兰、意大利、卢森堡、西班牙、英国和丹麦),并分别在奥地利、波兰、瑞典和芬兰等国的牛、山羊、绵羊中检测到抗体。遗传分析显示该病毒与布尼亚病毒科(Bunyaviridae)正布尼亚病毒属(Orthobunyavirus)西姆布血清群病毒(Simbu serogroup viruses)的亲缘关系最密切,西姆布血清群病毒是已知的反刍动物病原,可通过节肢动物媒介(蚊、蠓)传播。施马伦贝格病毒病有2种不同的临床症状:成年牛出现短暂轻微/温和的病症(产奶量减少、发热、腹泻)和新生哺乳动物(牛、羊)死产和先天缺陷。因为同群类似的病毒不是人畜共患病病原,也无该病毒致人发病的证据,但现阶段尚不能完全排除。尽管目前没有特效的药物和疫苗,但因已有类似病毒(赤羽病)的疫苗,疫苗接种应是控制该病的可能选项。因施马伦贝格病毒是一种新发现的病毒,许多方面尚不清楚,还有待于进一步研究。

DNA甲基化是最早发现的表观修饰方式之一,介导基因的表达沉默,在维持细胞功能、遗传印记、个体生长发育中起着重要作用。近年来,DNA甲基化参与调控乳腺生长发育及泌乳相关基因的表达,随着这方面研究的深入,DNA甲基化在奶牛生产、遗传育种方面将会有越来越多的应用。作者主要从DNA甲基化、乳腺泌乳相关基因DNA甲基化及DNA甲基化在奶牛生产中的应用进行综述。

本试验研究了不同精粗比日粮对奶牛血液pH、尿液pH、采食量及产后瘫痪、胎衣不下、产褥热等健康指标的影响。选择10头预产期相同,体重、体况相近的中国荷斯坦奶牛,随机分为2组,试验1组(CS组)饲喂以玉米秸秆为粗饲料来源的日粮,日粮精粗比接近6:4;试验2组(MF组)饲喂以羊草、苜蓿和玉米青贮为粗饲料来源的日粮,日粮精粗比接近4:6。试验结果显示,CS处理组奶牛产前、产后干物质采食量均极显著高于MF组(P<0.01),且CS处理组奶牛产后干物质采食量增长较快、幅度较大。另外,试验结果还发现,MF处理组尿液pH显著高于CS处理组(P<0.05),两处理组奶牛产前、产后血液pH没有差异(P>0.05)。此外,MF处理组产后疾病的发生率显著高于CS组。试验结果表明,围产期奶牛饲喂精料水平较高的日粮对奶牛产后的健康状况更加有利。

通过体外细胞培养方法研究大豆异黄酮对奶牛乳腺上皮细胞增殖及泌乳性能的影响。取对数生长期的奶牛乳腺上皮细胞,用无血清培养基培养24 h,使细胞同步化后分组试验。试验分空白对照组(0 mg/L大豆异黄酮)和添加不同浓度大豆异黄酮(1、10、100、1000 mg/L)组,培养48 h后,采用CASY 细胞计数仪检测细胞增殖能力与活力,高效液相色谱检测β-酪蛋白和乳糖,甘油三酯检测试剂盒检测甘油三酯的分泌情况。结果表明,与对照组相比,10、100、1000 mg/L大豆异黄酮组奶牛乳腺上皮细胞的增殖能力与活力显著增强(P<0.05);细胞分泌β-酪蛋白、乳糖和甘油三酯的能力也显著提高(P<0.05)。因此,添加10、100、1000 mg/L大豆异黄酮均能促进奶牛乳腺上皮细胞增殖及提高其泌乳性能,且呈一定的浓度依赖性。

本试验旨在研究呼和浩特近郊两个奶牛场荷斯坦奶牛体细胞数(somatic cell count,SCC)变化规律及体细胞分(somatic cell score,SCS)与乳成分的相关性。试验按常规方法采集奶样,并借助Bentley FTS/FCM 400 Combi奶牛生产性能测定仪测定奶样,然后对所得数据用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果显示,奶牛各胎次中SCC在第1胎时最低(P<0.01),在第7胎时最高(P<0.01);随着泌乳天数的增加奶样SCC亦明显增加;奶样SCC<100×10³/mL到SCC>1000×10³/mL的过度中,奶牛日产奶量和奶样乳糖含量明显降低(P<0.01),分别降低了6.07 kg(22.97%)和0.40%(8.06%),而奶样乳脂率和乳蛋白率显著升高(P<0.01),分别增加了0.32%(8.31%)和0.26%(8.05%)。秋、冬季奶样乳脂率要明显高于春、夏季奶样乳脂率(P<0.01),秋季奶样乳蛋白率最高,春季奶样乳蛋白率最低;春季奶样乳糖含量最高,秋、冬季奶样乳糖含量相对较低;冬季奶样SCC最高,而秋季奶样SCC则最低。SCS与日产奶量(-0.172)和乳糖含量(-0.283)之间存在极显著负相关(P<0.01),SCS与乳脂率(0.034)和乳蛋白率(0.111)之间存在极显著正相关(P<0.01)。因此,随着胎次增高,SCC有逐渐升高趋势;随着SCC的升高,日产奶量和乳糖含量有降低趋势,而乳脂率和乳蛋白率有升高趋势;季节对乳成分和SCC均有不同程度的影响;SCC对奶牛日产奶量、乳脂率、乳蛋白率、乳糖含量均有明显影响。

传染性支气管炎病毒和大肠杆菌是严重危害养鸡业的2种传染病原。2011年春夏之交,福州闽候某养鸡场饲养一批三黄鸡突然发病,经症状观察、病理剖检、病原分离鉴定确诊为传染性支气管炎病毒和O₇₈型大肠杆菌混合感染。对传染性支气管炎病毒分离株FJ/11/05 M基因测序后分析表明,分离株FJ/11/05与M41株(美国呼吸型)、美国分离株Beaudette的亲缘关系较近;而与疫苗株H120、D41遗传进化关系较远。

文章综述了抗菌药药动学/药效学(PK/PD)模型的发展,详细阐述新型药动物学/药效学模型在抑制细菌耐药突变上的作用,为合理用药及新药研发提供指导,并指出了临床应用所存在的问题。

为了探索联合用药对獭兔螨病的治疗效果,将50只确诊为患螨病的獭兔随机分为5组,每组10只,其中A组用伊维菌素治疗;B组用伊维菌素加螨净治疗;C组用伊维菌素加双甲脒治疗;D组用伊维菌素加复方桔皮素乙酰酯治疗;E组用伊维菌素加敌百虫治疗。结果显示,A组治愈率为60%,B组治愈率为80%,C组治愈率为90%,D组治愈率为90%,E组治愈率为70%,结果表明伊维菌素结合双甲脒与伊维菌素结合复方桔皮素乙酰酯治疗兔螨效果最佳。

本试验以吉林左家区标准黑貂为例,根据标准黑貂选种标准,量化种貂的选种性状,将所选母貂的繁殖性能及其所产幼貂断奶时的生长发育性状、成年貂的毛皮性状等指标进行具体量化,综合优选出符合要求的种貂来构建育种基础群,达到提高种群质量的目的,为生产实践提供具体操作规范,为下一步水貂品种选育奠定基础。

为研究不同比例麦麸和玉米秸秆对黄粉幼虫生长性能的影响,试验选择1000只5~6龄黄粉虫,随机分成5组,对照组饲喂小麦麸,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别饲喂20%麦麸和80%玉米秸秆、40%麦麸和60%玉米秸秆、60%麦麸和40%玉米秸秆、全玉米秸秆。结果表明,与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅳ组的体重、体长和粗蛋白质含量显著降低(P<0.05),试验Ⅱ、Ⅲ组黄粉幼虫体重、体长和粗蛋白质含量差异不显著(P>0.05),且试验Ⅱ组的经济效益每千克提高了15.15%。因此,试验Ⅱ组麦麸和玉米秸秆的比例最适合养殖黄粉幼虫。

植物雌激素(phytoestrogen)是一类存在于植物中,类似于动物雌激素并具有与靶细胞受体结合能力的生物活性物质,具有双向调节作用,其生理功能多种多样,如促进动物生长、提高机体免疫力、提高动物的泌乳性能和产蛋性能、预防癌症等,是许多药物的重要组分。由于其具有巨大的药用价值,近几年来受到人们的广泛重视,并将其应用于治疗人类疾病、提高畜牧业生产中。作者就植物雌激素的作用机制及在奶牛、蛋鸡、猪生产中添加植物雌激素对提高奶牛生产性能,改善蛋鸡蛋品质、提高产蛋量,母猪泌乳量及仔猪成活率的影响作一综述。

锰缺乏或过量会引起代谢紊乱等疾病,给蛋鸡养殖业造成困扰和巨大的经济损失,因此在蛋鸡生产中越来越受到重视。作者主要介绍微量元素锰的生物学功能及其在蛋鸡养殖生产中的应用,阐述蛋鸡锰缺乏和中毒病的发病原因、临床特征及防治措施,为广大兽医工作者和养殖户提供参考。

本试验通过用超声法和浆状搅拌法提取不同目径淫羊藿中淫羊藿苷和总黄酮,分别用高效液相色谱法和紫外分光光度法测定其溶出量和溶出速率。结果表明,粒径越细,其溶出速率和溶出总量都在增加,400目时其溶出量达到最大,但粉碎到500目时,其溶出速率和溶出总量反而不及300目,因此淫羊藿超微粉的应用以400目效果最好。