副猪嗜血杆菌环介导等温扩增检测方法的建立

›› 2010, Vol. 37 ›› Issue (2): 204-206.

副猪嗜血杆菌环介导等温扩增检测方法的建立

朱杰仪1，谭实勇1，曾小娜1，刘健1，刘中勇2，朱道中2，罗满林1

（1.华南农业大学兽医学院广东省人畜共患病重点实验室，广州 510642；2.广东出入境检验检疫局，广州 510623）

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2010-02-20 发布日期:2010-02-20

Establishment of Loop-mediated Isothermal Amplification for Detection of Haemophilus parasuis

ZHU Jie-yi1, TAN Shi-yong1, ZENG Xiao-na1, LIU Jian1, LIU Zhong-yong2, ZHU Dao-zhong2, LUO Man-lin1

（1.Guangdong Key Laboratory of Zoonosis, College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China; 2.Guangdong Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau, Guangzhou 510623, China）

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2010-02-20 Published:2010-02-20

摘要/Abstract

摘要： 摘要：本研究旨在建立检测副猪嗜血杆菌(Hps)的新方法。根据GenBank上发表的不同血清型Hps的16S rRNA序列，找出高度保守区域，再针对该区域设计了4条特异性引物，建立了Hps环介导等温扩增法(LAMP)。试验结果表明，LAMP方法在恒温（63 ℃）条件下特异性强，比PCR方法敏感100倍，鉴于目前副猪嗜血杆菌分离培养和鉴定的复杂性，LAMP操作简单、成本低，整个扩增反应在1 h内即可完成，为检测Hps提供了一个快速简便的分子生物学方法。

关键词: 关键词：副猪嗜血杆菌; 16S rRNA; 环介导等温扩增技术

Abstract: Abstract：Based on a series of 16S rRNA sequences of Haemophilus parasuis (Hps) published in GenBank, a conservative region was found. Four specific primers targeting the 6 distinct sequences of the conservative region were designed. A loop-mediated isothermal amplification (LAMP) for the rapid detection of Hps was established by using those specific primers. The results show that LAMP has a high specificity, and is more sensitive than PCR method under 63 ℃. Compared with the complex isolation and identification methods of Hps, LAMP is simple, low cost, and could be completed in 1 h. 

Key words: Key words：Haemophilus parasuis; 16S rRNA; loop-mediated isothermal amplification

朱杰仪;谭实勇;曾小娜;刘健;刘中勇;朱道中;罗满林. 副猪嗜血杆菌环介导等温扩增检测方法的建立[J]. , 2010, 37(2): 204-206.

ZHU Jie-yi; TAN Shi-yong; ZENG Xiao-na; LIU Jian; LIU Zhong-yong; ZHU Dao-zhong; LUO Man-lin. Establishment of Loop-mediated Isothermal Amplification for Detection of Haemophilus parasuis[J]. , 2010, 37(2): 204-206.

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