犬瘟热病毒水貂分离株F1基因的克隆表达

›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (9): 65-68.

犬瘟热病毒水貂分离株F1基因的克隆表达

张蕾¹, 柴秀丽¹, 张大鹏², 张海玲¹, 赵建军¹, 高晗¹, 白雪¹, 徐磊³, 闫喜军¹

1. 中国农业科学院特产研究所,吉林吉林 132109;2. 长春市动物卫生监督所,吉林长春 130061;3. 中国兽医药品监察所,北京 100081

收稿日期:2011-01-14 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-09-20 发布日期:2011-09-20
通讯作者: 闫喜军

Cloning and Expression of F1 Gene of Mink CDV Isolate Strain

ZHANG Lei¹, CHAI Xiu-li¹, ZHANG Da-peng², ZHANG Hai-ling¹, ZHAO Jian-jun¹, GAO Han¹, BAI Xue¹, XU Lei³, YAN Xi-jun¹

1. Institute of Special Wild Economic Animal and Plant Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Jilin 132109, China;2. Changchun Animal Health Inspection Institute, Changchun 130061, China;3. China Institute of Verterinary Drug Control, Beijing 100081, China

Received:2011-01-14 Revised:1900-01-01 Online:2011-09-20 Published:2011-09-20

摘要/Abstract

摘要： 本研究旨在利用基因工程的方法,制备犬瘟热(canine distemper,CD)疾病诊断用抗原。提取犬瘟热病毒基因组,RT-PCR扩增犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)F1基因序列,克隆并测序。将F1基因定向克隆到原核表达载体pET28a多克隆位点,阳性重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达产物,并用Ni柱亲和层析纯化目的蛋白。结果显示表达的F1重组蛋白能与犬瘟热标准阳性血清发生反应,具有良好的反应原性,可以作为犬瘟热疾病的诊断用抗原。

关键词: 犬瘟热病毒; F1基因; 表达

Abstract: To prepare CDV antigen for diagnosis, gene engeneering method was explored. CDV genome was extracted, F1 gene was amplified by RT-PCR cloned and then sequenced. The F1 gene was cloned into expression plasmid pET28a and expressed by the induction of IPTG inducer. The recombined protein was examined by SDS-PAGE and Western blotting,purified by Ni column. The results indicated the recombined protein could react with CDV positive serum and might be used as CDV diagnostic antigen.

Key words: canine distemper virus; F1 gene; expression

中图分类号:

张蕾;柴秀丽;张大鹏;张海玲;赵建军;高晗;白雪;徐磊;闫喜军. 犬瘟热病毒水貂分离株F1基因的克隆表达[J]. , 2011, 38(9): 65-68.

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