水貂阿留申病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

中国畜牧兽医 ›› 2014, Vol. 41 ›› Issue (9): 1-5.

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水貂阿留申病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

张秀丽^1,2, 于慧娟³, 徐超², 张桉潮^1,4, 宋兴超², 郝俊伟¹, 赵家平², 杜锐¹

1. 吉林农业大学, 吉林长春 130118;
2. 中国农业科学院特产研究所, 吉林长春 130122;
3. 文登市泽库畜牧兽医工作站, 山东文登 264413;
4. 吉林正大实业有限公司, 吉林长春 130033

收稿日期:2014-03-17 出版日期:2014-09-20 发布日期:2014-09-24
通讯作者: 赵家平, 杜锐 E-mail:tcszjp@126.com;durui71@126.com
作者简介:张秀丽（1983- ），女，吉林人，硕士生，研究方向：经济动物疾病学。
基金资助:
国家自然科学基金（31272565）。

Establishment and Application of Fluorescence Quantitative PCR Assay for Detection of Aleutian Mink Disease Virus

ZHANG Xiu-li^1,2, YU Hui-juan³, XU Chao², ZHANG An-chao^1,4, SONG Xing-chao², HAO Jun-wei¹, ZHAO Jia-ping², DU Rui¹

1. Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China;
2. Institute of Special Animal and Plant Sciences of CAAS, Changchun 130122, China;
3. Wendeng Zeku Animal Husbandry and Veterinary Workstations, Wendeng 264413, China;
4. Jilin China Tai Enterprise Co., Ltd., Changchun 130033, China

Received:2014-03-17 Online:2014-09-20 Published:2014-09-24

摘要/Abstract

摘要： 根据水貂阿留申病毒（Aleutian mink disease virus，AMDV）基因序列（GenBank登录号：NC_001662.1）设计1对特异性引物，通过对荧光定量PCR反应条件的优化，建立了检测AMDV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法，该方法的灵敏度达10拷贝/μL，≥10²拷贝/μL具有良好的特异性和重复性。同时利用该方法对8份疑似AMDV血清进行检测，结果6份阳性，阳性率为75%。本研究为水貂阿留申病的鉴别诊断及净群根除奠定了技术基础。

关键词: 水貂阿留申病毒; SYBR Green Ⅰ; 荧光定量PCR; 标准曲线

Abstract: One pair of specific primers was designed and synthesized according to the sequence of Aleutian mink disease virus (AMDV) subbitted in the GenBank database, and then reaction requirements were optimized to develop a SYBR Green Ⅰ fluorescence quantitative PCR assay. The results showed that the fluorescence quantitative PCR assay could detect 10 copies/μL of plasmid DNA.Its specificity and reproducibility were very good when 10² copies/μL.Meanwhile, 8 field samples were detected with the methods and the positive rate was 75%. This study would lay the foundation for differentiation diagnosis and purification of the mink population.

Key words: Aleutian mink disease virus; SYBR Green Ⅰ; fluorescence quantitative PCR; standard curve

中图分类号:

张秀丽, 于慧娟, 徐超, 张桉潮, 宋兴超, 郝俊伟, 赵家平, 杜锐. 水貂阿留申病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用[J]. 中国畜牧兽医, 2014, 41(9): 1-5.

ZHANG Xiu-li, YU Hui-juan, XU Chao, ZHANG An-chao, SONG Xing-chao, HAO Jun-wei, ZHAO Jia-ping, DU Rui. Establishment and Application of Fluorescence Quantitative PCR Assay for Detection of Aleutian Mink Disease Virus[J]. , 2014, 41(9): 1-5.

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Establishment and Application of Fluorescence Quantitative PCR Assay for Detection of Aleutian Mink Disease Virus

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