小鼠β-actin mRNA荧光定量PCR方法的建立

›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (7): 127-130.

小鼠β-actin mRNA荧光定量PCR方法的建立

唐佳佳, 岳华, 杨发龙, 汤承

西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都 610041

收稿日期:2010-12-06 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-07-20 发布日期:2011-07-20
通讯作者: 汤承

Establishment of Real-time PCR for Mouse β-actin mRNA

TANG Jia-jia, YUE Hua, YANG Fa-long, TANG Cheng

College of Life Science and Technology,Southwest University for Nationalities,Chengdu 610041,China

Received:2010-12-06 Revised:1900-01-01 Online:2011-07-20 Published:2011-07-20

摘要/Abstract

摘要： 本研究旨在建立定量检测小鼠β-actin mRNA表达水平的实时荧光定量PCR方法,为小鼠相关基因表达水平的分析提供方法。根据GenBank中登录的小鼠β-actin mRNA序列,针对保守区域设计并合成1对引物,建立了基于SYBR Green Ⅰ技术的小鼠β-actin mRNA荧光定量PCR方法。结果表明,该方法扩增效率高(97.7%),定量线性范围广(9.3×10²~9.3×10⁷拷贝/反应),可重复性强,无非特异性扩增和引物二聚体,最小检出量为9.3拷贝/反应。试验结果为β-actin作为内参基因用于小鼠相关基因转录水平分析提供了基础。

关键词: 小鼠; β-actin基因; 实时荧光定量PCR

Abstract: The aim of present study is to establish a real-time PCR for quantitative analysis of mouse β-actin mRNA expression. A set of primer was designed according to the mouse β-actin mRNA sequence in GenBank. And a SYBR Green Ⅰ-based reverse real-time PCR (RRT-PCR) was successfully developed. The results showed that RRT-PCR assay established had a high amplification efficiency(97.7%),wide linear range(9.3×10² to 9.3×10⁷ copies/reaction),good reproducibility and specificity. The detection limit was 9.3 copies/reaction. The results provided a basis for use of β-actin as a reference gene in gene expression analysis in mouse.

Key words: mouse; β-actin gene; real-time RT-PCR

中图分类号:

Q503

唐佳佳;岳华;杨发龙;汤承. 小鼠β-actin mRNA荧光定量PCR方法的建立[J]. , 2011, 38(7): 127-130.

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