日本大耳白兔干扰素-γ基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

›› 2011, Vol. 38 ›› Issue (5): 85-88.

日本大耳白兔干扰素-γ基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

任春芝¹, 季燚², 刘丹丹¹, 李建梅¹, 王尚尚¹, 陶建平¹, 王志强¹, 许金俊¹

1. 扬州大学兽医学院, 江苏扬州 225009;2. 姜堰市畜牧兽医站, 江苏姜堰 225500

收稿日期:2010-11-09 修回日期:1900-01-01 出版日期:2011-05-20 发布日期:2011-05-20
通讯作者: 许金俊

Received:2010-11-09 Revised:1900-01-01 Online:2011-05-20 Published:2011-05-20

摘要/Abstract

摘要： 提取经ConA 刺激后的日本大耳白兔外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR技术对其IFN-γ基因进行扩增和测序。将去除信号肽的IFN-γ基因片段插入原核表达载体pET-30a并在大肠杆菌中进行表达。结果显示,克隆的IFN-γ基因长为504个核苷酸,具有一个完整的开放阅读框,编码168个氨基酸,所测序列与GenBank中已登录的安哥拉兔、中国白兔、欧洲兔、新西兰兔IFN-γ同源性为100%,与獭兔同源性高达99.8%。构建的重组菌经过IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳证实,IFN-γ基因片段在大肠杆菌中得到了融合表达,分子质量约为18 ku,表达量为菌体总蛋白的35%左右。以上结果为下一阶段兔IFN-γ重组蛋白生物学特性及其应用的研究奠定了基础。

关键词: 日本大耳白兔; 干扰素-γ; 克隆; 序列分析; 表达

中图分类号:

Q785

任春芝;季燚;刘丹丹;李建梅;王尚尚;陶建平;王志强;许金俊. 日本大耳白兔干扰素-γ基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J]. , 2011, 38(5): 85-88.

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